常用微生物培养基

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常用微生物培养基

分离真菌:

注:抗生素所有培养基灭菌放置不烫手背时(温度约为40°C左右),同时加入氯霉素和链霉至终浓度为0.5 mg/mL(提前配置好,用0.22 µm微孔滤膜过滤,-20℃存储),混匀后倒平板,用于抑制细菌生长。

1.GPY培养基:葡萄糖20 g,蛋白胨10 g,酵母提取物10 g,海盐15 g,琼脂20 g,蒸馏水1 L,pH 7.5,115℃,30 min灭菌

2.PDA培养基:Potato Dextrose Agar干粉39 g/L,海盐15 g,蒸馏水1 L,pH 6.5-7.0,121℃,15 min灭菌

3.马丁培养基:葡萄糖10 g,蛋白胨5 g,磷酸二氢钾1 g,七水合硫酸镁0.5 g,孟加拉红0.03 g,海盐15 g,琼脂20 g,蒸馏水1 L,115℃、30 min灭菌

4.MEA培养基:麦芽浸粉17g,蛋白胨3g,海盐15g,蒸馏水1L,121℃,20 min 灭菌

5.YPD培养基:酵母提取物10 g/L,蛋白胨20 g/L,葡萄糖20 g/L,琼脂20 g/L,115℃,30 min灭菌

6.沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA,每升培养基):蛋白胨(peptone)10.0 g,葡萄糖(glucose)40.0 g,琼脂(agar)15.0 g,pH 4.0 - 6.0;

7.酵母汁麦芽提取物琼脂培养基(YM,每升培养基):麦芽浸粉(malt extract)3.0 g,酪蛋白胨(casein peptone)5.0 g,酵母提取物(yeast extract)3.0 g,葡萄糖(glucose)10.0 g,琼脂(agar)15 g,pH 6.0 - 6.5;

8.察氏培养基(CDA,每升培养基):硝酸钠(NaNO3)3. 0 g,氯化钾(KCl)0.5 g,蔗糖(sucrose)30. 0 g,七水合硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5 g,七水合硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)0. 01 g,磷酸氢二钾(K2HPO4)1.0 g,琼脂(agar)15.0 g,pH 6.0 - 6.5;

分离放线菌:

注:抗生素所有培养基灭菌放置不烫手背时(温度约为40℃左右),同时加入制霉菌素(终浓度为100.0 μg/ml)和萘啶酮酸(终浓度为25.0 μg/ml)(提前配置好,用0.22µm 微孔滤膜过滤,于-20℃冻存),混匀后倒平板,分别用于

抑制真菌和细菌生长。

分离小单孢菌科:

1. ISP3(每升培养基):燕麦片(oatmeal)20.0 g;微量元素溶液(trace salts solution)1.0 ml;琼脂(agar)15.0 g,pH 7.0 - 7.5;

分离链霉菌科:

2. SM1(每升培养基):胰蛋白胨(tryptone)

3.0 g,蛋白胨(peptone)5.0 g,氯化钠(NaCl)5.0 g,葡萄糖(glucose)10.0 g,琼脂(agar)15.0 g,pH 7.0- 7.5;

3. ISP2(每升培养基):葡萄糖(glucose)

4.0 g;酵母提取物(yeast extract)4.0 g;麦芽提取物(malt extract)10.0 g;琼脂(agar)1

5.0 g;pH 7.0 - 7.5;

分离稀有放线菌:拟诺卡氏,糖多孢等属:

4. M2培养基(每升培养基): 甘油(glycerol)6.0 ml,L-精氨酸(L-arginine)1.0 g,磷酸氢二钾(K2HPO4)0.5 g,七水合硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5 g,琼脂(agar)20.0 g,pH 7.0- 7.5;

5. 甘油-门冬酰胺培养基(ISP5,每升培养基): 甘油(glycerol)10.0 g,L-天门冬酰胺(L-Asparagine)1.0 g,磷酸氢二钾(K2HPO4)1.0 g,微量元素溶液(trace salts solution)1.0 ml,琼脂20.0 g,pH 7.0 - 7.5;

注:微量元素溶液trace salt solution (g/L 海水seawater):四水合氯化锰(MnCl·4H2O)100.0 mg,氯化钴(CoCl2)20.0 mg,硫酸铜(CuSO4)10.0 mg,钼酸钠(Na2MoO4)10.0 mg,氯化锌(ZnCl2)20.0 mg,氯化锂(LiCl)5.0 mg,二水合氯化亚锡(SnCl2·2H2O)5.0 mg,硼酸(H3BO3)10.0 mg,溴化钾(KBr)20.0 mg,碘化钾(KI)20.0 mg,EDTA(℃)钠盐(三水合物)(EDTA(℃)sodium salt(trihydrate))8.0 g;

其他培养基:

6. Gause’s medium(每升培养基):可溶性淀粉(soluble starch)20.0 g,硝酸钾(KNO3)1.0 g,磷酸氢二钾(K2HPO4)0.5 g,硫酸镁(MgSO4)0.5 g,氯化钠(NaCl)0.5 g,七水合硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)0.01 g,琼脂(agar)30.0 g,pH

7.0 - 7.5;

7. Raffinose-histidine(每升培养基):棉子糖(raffinose)10.0 g,L-组氨酸

(L-histidine)1.0 g;磷酸氢二钾(K2HPO4)1.0 g,七水合硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5 g,七水合硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)0.01 g,琼脂(agar)15.0 g,pH 7.0 - 7.5;

8. 海藻糖-脯氨酸培养基(每升培养基):海藻糖(trehalose)5.0 g, 脯氨酸(proline)1.0 g, 硫酸铵((NH4)2SO4)1.0 g,氯化钠(NaCl)1.0 g,氯化钙(CaCl2)2.0 g, 磷酸氢二钾(K2HPO4)1.0 g,七水合硫酸镁(MgSO4·7H2O)1.0 g,混合维生素3.7 mg (维生素B1、核黄素、烟酸、维生素B6、泛酸钙、肌醇、p -氨基苯甲酸各0.5 mg,生物素0.25 mg),琼脂20g,pH 7.0 - 7.5;

9. M6:Glycerine 6mL,Arginine 1g,K2HPO4 1g,MgSO4.7H2O 0.5g,Agar 20g,Sea-salt 15g,pH 7.0-7.4;

10.GS1:可溶性淀粉(Soluble starch)20g,K2HPO4 0.5g,KNO3 1g,MgSO4.7H2O 0.5g,Agar 20g,Sea-salt 15g,pH 7.0-7.4;

11.SIM:Casein 0.4g,可溶性淀粉(starch)10g,K2HPO40.2g,CaNO30.1g,Agar 20g,Sea-salt 15g,pH 7.2-7.4;

培养细菌:

1.LB液体培养基:胰蛋白胨10 g/L,酵母提取物5 g/L,氯化钠10 g/L,PH 7.2,121℃,20 min灭菌

2.LB固体培养基:胰蛋白胨10 g/L,酵母提取物5 g/L,氯化钠10 g/L,琼脂20 g/L,PH 7.2,121℃,20 min灭菌

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