免疫组化技术-免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用

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• 4.微绒毛型 抗原颗粒主要分布于腺癌细胞的微绒
毛,而胞浆和胞膜可以是阳性或阴性表达。这种 表现形式最常见于各种腺癌,如甲状腺腺癌、乳 腺腺癌、胃肠腺癌、胆道腺癌、卵巢浆液性腺癌 等。其特点是阳性颗粒除靠近腔面阳性外,其余 基底部可呈阴性反应。在肿瘤标记物中多见于上 皮膜抗原、上皮特异性抗原、结肠相关抗原、卵 巢癌抗原等。甲状腺腺癌中甲状腺球蛋白常以该 形式出现。
二、阳性标记细胞学特征
• 免疫组化标记中,阳性标记细胞学特征是反映
抗原在细胞中的定位和分布情况。在诊断中阳 性细胞以拟标记的细胞为前提,阳性表达必须 在细胞特定的抗原部位,若不在抗原所在部位 的阳性表达和非目标细胞即使阳性也不应作为 判断依据。根据抗原在细胞中分布和阳性颗粒 沉淀部位可分为以下5种类型:
• 7.菊团型 阳性肿瘤细胞排列呈菊团样结
构,部分阳性细胞围绕血管排列。此型 多见于分化较好的神经内分泌肿瘤和胶 质细胞瘤等,阳性颗粒定位在细胞浆。
四、阳性标记强度特征
• 细胞免疫组化标记的阳性强度根据显色
程度分为弱阳性、中度阳性和强阳性; 也可依据阳性细胞在细胞中所占比例大 致分为:弱阳性,阳性细胞≤25%;中阳 性,阳性细胞25%~50%;强阳性,阳性 细胞>50%。
• 1.胞膜型 阳性颗粒主要分布于细胞膜表
面,形成一薄层棕黄色颗粒包绕整个细 胞。此类型常见于某些膜抗原,如上皮 膜抗原(EMA)、白细胞共同抗原 (LCA)及B细胞、T细胞、粒细胞相关 抗原(GAA)和Ki-1等。
• 2.胞核型 阳性颗粒定位于细胞核,呈均
匀分布或位于核膜下,有的呈小斑块状 不规则分布。此多见于增殖细胞核抗原、 Ki-67及激素受体中雌激素受体(ER)、 孕激素受体(PR)和基因p53等。
胞间界限较清晰,但相互融合呈片状或团块状结 构。此型可见于上皮源性肿瘤、某些向上皮分化 的间叶源性肿瘤、恶性黑色素瘤、中分化神经内 分泌瘤及核形细胞瘤(如癌肉瘤和神经纤维瘤、 平滑肌肉瘤)。
• 4.网状型 此型主要见于细胞密度较大的
大细胞肿瘤,标记物多为膜抗原。阳性 细胞膜与膜间相互紧靠,而胞核呈阴性 反应,免疫组化标记显示网状结构。
免疫组化标记的形态学特征
• 免疫组化标记具有形态学特点,若能熟
练掌握则有助于对免疫组化标记结果的 正确判断,现择要分述如下:
一、阳性标记色度特征
• 免疫组化标记时细胞阳性着色程度取决于抗原含量、分布密
度和标记方法及其敏感性。一般而言,抗原含量越多,分布 密度越高,标记方法越敏感,阳性结果显色则越强。根据阳 性标记的显色程度分为:淡黄色,提示为弱阳性;棕黄色, 为中等度阳性;棕黑色,示为强阳性。在结果判断中,后两 者较有意义,可作为判断依据。而前者除考虑标本处理和方 法学因素外,可能与细胞只有轻度异常表达,或某些细胞摄 取了周围组织抗原之故。
Fra Baidu bibliotek
• 5.腺管型 主要见于腺癌和具有腺癌样结
构的胚胎性肿瘤。上皮标记物多为胞浆 表达。胃肠低分化腺癌中有时HE很难鉴 别腺样结构,但用癌胚抗原、上皮膜抗 原或结肠癌相关抗原则容易显示出来。
• 6.腔缘型 阳性颗粒主要位于腺癌腔缘的
微绒毛处,沿腺管腔缘表面内衬一薄层 黄色颗粒,基底部多为阴性。结肠癌相 关抗原在胃肠腺癌、胆囊腺癌、乳腺癌 中常表现为这种类型;卵巢癌相关抗原 在卵巢浆液性腺癌亦是如此;肿瘤相关 粘液抗原在许多腺癌中也显示腔缘阳性。
• 5.复合型 在常规免疫组化标记中,同一
种抗原可以同时表达于胞膜和胞浆、胞 核和胞浆、微绒毛和胞浆,但很少发现 胞膜和胞核同时表达。值得注意的是组 织标本固定不及时造成抗原移位或乳腺 ER和PR修复不充分也可以发生胞核和胞 浆同时阳性。
三、阳性标记组织学特征
• 根据免疫组化阳性细胞的组织学特点,
• 2.弥漫型 阳性细胞呈弥漫性分布,细胞间无连
接,也可以单个细胞散在分布。此型中细胞几 乎都高度表达某种抗原,如淋巴瘤(白细胞共 同抗原)、Hodgkin病(粒细胞相关抗原、Ki1)、胃肠未分化癌癌胚抗原(CEA)及上皮膜 抗原、尤文瘤中CD99等。
• 3.片块型 较常见。阳性细胞多为细胞浆表达,细
免疫组化阳性细胞或阳性颗粒可呈以下 类型排列:
• 1.局灶型 阳性细胞呈不规则小灶性分布。阳性细胞
可多可少,排列不规则,无固定排列形式,阳性染 色深浅不一。细胞角蛋白、上皮膜抗原在低分化鳞 状细胞癌、腺癌和癌肉瘤;肌动蛋白和结蛋白在低 分化横纹肌肉瘤;NSE、神经丝蛋白、突触素在恶 性神经内分泌肿瘤及低分化星形胶质细胞瘤中胶质 原纤维酸性蛋白(GFAP)和恶性黑色素瘤中S-100 蛋白等均可表现为局灶性阳性。
免疫组织化学技术
• 免疫组织化学(简称免疫组化)是组织化学的
一种,它是利用已知的特异性抗体或抗原能特 异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合 后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、 同位素等,显示一定的颜色,并借助显微镜观 察其颜色的变化,从而在抗原抗体结合部位确 定组织、细胞结构的化学成份或化学性质。
• 3.胞浆型 阳性颗粒主要分布于细胞浆。大部分抗
原均属于此种类型,如细胞角蛋白、波形蛋白、结 蛋白、神经丝蛋白、肌红蛋白、α1-抗胰糜蛋白酶 及前列腺特异性抗原(PSA)等。依据抗原在胞浆 内分布形式,通常表现为弥漫性分布或局限性分布。 前者阳性颗粒弥漫而均匀地分布于整个细胞浆。局 限性是指阳性颗粒呈小斑点状或斑块状局限于细胞 浆中的某一部位、核周或细胞浆的一侧。
• 近十年来,免疫组化技术发展很快,在现代医学
的基础和临床研究中发挥着重要的作用,对疾病, 尤其是对肿瘤的诊断、鉴别诊断及发病机理的研 究提供了强有力的手段,但随着免疫组化标记物 的增多和利用,原为特异的标记物并非绝对特异, 而且出现交叉反应和异常表达的情况日益增多。 故对免疫组化标记结果的意义不能绝对化,应在 光镜观察组织形态的基础上,合理使用免疫组化 技术,审慎判断其标记的意义。
五、非特异着色特征
• 以下情况可干扰免疫组化标记结果的观察和判断:
(1)抗体交叉反应: 是由于该抗原决定簇同时 存在于多种组织细胞,如GFAP可同时存在于星 形胶质细胞和唾液腺肌上皮。S-100蛋白则更为严 重,可表达于多种组织细胞。因此,应全面了解 和认识该抗体的功能和标记范围。故抗体交叉反 应只要应用得当仍有助于诊断。
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