3-3核酸的理化性质和应用

医学生物化学国家开放大学

3-3核酸的理化性质和应用

一、核酸的酸碱性质

由于DNA和RNA的多核苷酸链上既有酸性的磷酸基团，又有碱基上的碱性基团，因此它也是两性电解质。在一定pH溶液中可带某种电荷，故可用电泳方法将其分离。核酸通常显酸性，易与金属离子生成盐，此时可加入乙醇或异丙醇使其沉淀析出。

二、核酸的高分子性质

核酸还具有高分子化合物的某些性质，如粘度大，沉降速度快。

三、核酸的紫外吸收

核酸分子所含的碱基都有共轭双键，具有吸收紫外线的性质。在260nm处有最大吸收峰，利用核酸的紫外吸收特性，可以对核酸进行定量测定。

四、核酸的变性、复性与杂交

DNA变性是核酸在某些条件下会发生氢键断裂，双螺旋结构松散分开，即为核酸的变性，但无共价键的断裂。核酸热变性时，其紫外光吸收峰值达到最大值一半时的温度称解链温度(Tm)。Tm值大小与核酸分子中的G-C对含量多少及核酸分子的长度有关。核酸热变性后，在适当条件下，温度再缓慢下降，变性分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象。解开的两条链又可重新缔合而形成双螺旋，此即为核酸的复性。

不同来源的变性核酸一起复性，有可能发生杂交，核酸分子杂交在分子生物学研究中是一项应用较多的重要实验技术。核酸分子杂交在DNA复性过程中，如果将不同来源的DNA单链分子放在同一溶液中，或者将DNA和RNA分子放在一起，双链分子的再形成既可以发生在序列完全互补的核酸分子间，也可以发生在那些碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间。

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