阿奇霉素片方法验证

一．概述

1 有关物质

1.1照高效液相色谱法（通则0512）测定

1.2色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为磷酸盐缓冲液（取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%的磷酸溶液调节pH

值至8.2）-乙腈（45∶55），流动相B为甲醇，柱温为30℃（必要时适当调整）；按下表进行线性梯度洗脱；流速为每分钟1.0ml，检测波长为210nm。

取杂质S和杂质A对照品各适量，加上述稀释液溶解并稀释制成每1ml中各约含0.05mg的溶液，作为杂质S和杂质A对照品溶液；另取阿奇霉素系统适用性对照品（含杂质R、杂质Q、杂质J、杂质I、杂质H、阿奇霉素和杂质B）适量，加上述对照品溶液溶解并稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，作为系统适用性溶液；精密量取对照溶液10ml，置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度溶液，取系统适用性溶液和灵敏度溶液各50μl，分别注入液相色谱仪，灵敏度溶液主成分峰峰高的信噪比应大于10，系统适用性溶液色谱图中各峰之间的分离度均应大于1.2，阿奇霉素峰的保留时间

35 95 5

64 95 5

65 75 25

1.3测定法

取本品细粉适量，加稀释液[磷酸二氢铵溶液（称取磷酸二氢铵1.73g,加水溶解并稀释至1000ml，用氨试液调节P H值至10.0±0.05）-甲醇-乙腈（7：7：6）]使阿奇霉素溶解并稀释制成每1ml中含阿奇霉素10mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取1 ml，置200 ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

精密量取供试品溶液和对照溶液各50μl，分别注入液相色谱图仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，杂质B峰面积不得大于对照溶液主峰面积的4倍（2.0%），杂质H与杂质Q按校正后的峰面积计算（分别乘以校正因子0.1、0.4）不得大于对照溶液主峰面

积的2倍（1.0%），其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2倍（1.0%），各杂质峰面积的和按校正后的峰面积计算不得大于对照溶液主峰面积的8倍（4.0%）。

2溶出度

2.1照溶出度与释放度测定法（通则0931第二法）测定。

2.2取本品，以磷酸盐缓冲液（pH6.0）(0.1mol/L磷酸氢二钠溶液6000ml，加盐酸约40ml，调节PH值至6.0±0.05)900ml为溶出介质，转速为每分钟100转，依法操作，经45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用溶出介质定量稀释制成每1ml中约含阿奇霉素0.2mg的溶液，作为供试品溶液；另取阿奇霉素对照品适量，精密称定，加适量乙醇（每2mg约加乙醇1ml）使溶解，用溶出介质定量稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照含量测定项下的方法测定，按外标法以峰面积计算每片的溶出量。限度为标示量的75％，应符合规定。

3含量

3.1照高效液相色谱法（通则0512）测定。

3.2色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%的磷酸溶液调节pH值至8.2）-乙腈（45∶55）为流动相；检测波长为210nm。取阿奇霉素系统适用性试验对照品适量，加乙腈溶解并稀释制成每1ml中含10mg的溶液，取50μl注入液相色谱仪，记录的色谱图应与标准图谱一致。

3.3测定法取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿奇霉素0.1g），加乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含阿奇霉素1mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液，精密量取50μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿奇霉素对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

4.工艺处方组成

5、仪器基本情况：

6.相关术语：

6.1准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。一般用回收率（%）表示。回收率限度应在98%～102%之间。

6.2精密度系指在规定的条件下同一份均匀的供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。

6.3线性系指在设计的测定范围内，测定结果与试样中被测物的浓度直接呈比例关系的程度。

6.4范围系指分析方法能达到一定精密度、准确度和线性要求时的高低限浓度或量的区间。

6.5检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。

6.6耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。

二.验证目的

通过验证以确认所采用的方法适合于阿奇霉素片的测定。根据样品特性制订检验方法和检验条件，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。若符合，按验证的方法和条件进

行阿奇霉素片检查；若不符合，重新建立制订检验方法和检验条件，再进行验证，直至验证结果符合设立的验证标准。

三.验证依据

中国药典2015年版二部

中国药典2015年版四部9101《药品质量标准分析方法验证指导原则》

四.参考文件

1、验证管理规程

2、验证总计划

3、SIL-20A高效液相色谱仪操作维护保养规程

5、变更控制规程

6、偏差控制规程

五.验证职责

六.验证步骤

1. 阿奇霉素片含量分析方法验证

1.1系统适应性试验

1.1.1色谱条件

①固定相：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（C18）；

②检测器：紫外检测器，检测波长210nm；

③流动相：磷酸盐缓冲液（0.05mol/L 磷酸氢二钾溶液，用20%磷酸溶液调节PH值至8.2）-乙腈=（45：55）

④流速：1.0mL/min。

⑤柱温：30℃

⑥进样量：50μL。

照高效液相色谱法（通则0512）测定。

1.1.2系统适用性试验溶液：取阿奇霉素系统适用性对照品约20mg

加乙腈2ml溶解，制成每1ml中含10mg的溶液，作为系统适用性试验溶液。

1.1.3取系统适用性试验溶液50μL注入液相色谱仪。

1.1.4判定标准：记录的色谱图应与标准图谱一致。

1.2阿奇霉素片含量分析方法线性验证

1.2.1溶液配制

1.2.1流动相配制