细菌标本片的制备及染色方法
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（2）卢戈氏碘液 碘1g、碘化钾2g、蒸馏水300ml。将碘化钾放入研钵 中，加入少量蒸馏水，使其溶解，再放入已磨散的碘片，徐徐加 水，同时充分磨匀，待碘片完全溶解后，把余下的蒸馏水倒入， 再装入瓶中。
（3）石炭酸复红稀释液 取碱性复红酒精饱和溶液（碱性复红10g溶于 95%酒精100ml中）1ml和5%石炭酸水溶液9ml混合，即为石炭酸 复红原液。再取原液10ml和90ml蒸馏水混合，即成石炭复红稀释 液。
1．碱性美蓝染色液
甲液：美蓝0.3g、95%酒精30mL； 乙液：0.01%苛性钾溶液100mL 先配甲液，将美蓝放入研钵中，徐徐加入酒精 研磨均匀后，把甲、乙两液混合，过夜后用滤 纸过滤即成。新鲜配制的美蓝液染色不好，陈 旧的染色好。
2．革兰氏染色液
（1）草酸铵结晶紫溶液 甲液：结晶紫2g、95%酒精20ml； 乙液：草酸铵0.8g、蒸馏水80ml 将结晶紫放入研钵中，加酒精研磨均匀制成甲液，然后将完全溶 解的乙液与甲液混合即成。
方法步骤
（一）细菌标本片的制作 （二）常用的细菌染色方法 （三）常用染色液的配制
（一）细菌标本片的制作
1．涂片标本的制作 （1）涂片 （2）干燥涂片 （3）固定涂片
2．血液推片和组织抹片的制作 （1）血液推片的制作 （2）组织抹片的制作
1．涂片标本的制作
（1）涂片 取清洁载玻片一块，用吸管吸取生理盐水1滴置于玻片中 央，再将接种环在火焰上灭菌，待冷后从固体培养基上挑 取少许菌落，置于玻片上的生理盐水中混均匀，并在玻片 上涂成直径约为1cm的涂面，要求薄而均匀。
（2）组织抹片的制作
待检尸体经无菌手术切开胸腹腔后，用经火焰灭菌的 镊子夹起组织，用灭菌剪刀剪下小块组织，将组织切 面在载玻片上等距离轻压几下，使其留有组织切面的 压迹。
（二）常用的细菌染色方法
1．美蓝染色法 2．革兰氏染色法 3．瑞氏染色法
1．美蓝染色法
在已固定好的抹片 上，滴加适量美蓝染色 液覆盖涂面，染色2～ 3 min， 水 洗 ， 吸 水 纸 轻压吸干或晾干和镜检， 结果菌体呈蓝色。
细菌标本片的制备及染色方 法
实训目标
能利用不同的材料进行细菌标本片的制备 掌握常规的染色方法，并认识细菌的不同染色特性
仪器材料
酒精灯、接种环、载玻片、吸水纸、生理盐水、美 蓝染色液、革兰氏染色液、瑞氏染色液、染色缸、 染色架、洗瓶、显微镜、香柏油、乙醇乙醚、擦镜 纸、细菌培养物（大肠杆菌、葡萄球菌等）、细菌 病料、无菌镊子和剪刀、特种铅笔等
3．瑞氏染色液
取瑞氏染料0.1g，纯中性甘油1ml，在研钵中 混合研磨，再加入甲醇60ml，使其溶解，装 入中性瓶中过夜，次日过滤，盛入棕色瓶中， 保存于暗处。保存越久，染色越好。
（2）干燥涂片
在室温下自然干燥，必要时将涂面向上，置火焰上来回微 烤使其干燥。
（3）固定涂片
干燥后，将涂面向上，在火焰上快速来回通过2～3次，其 温度以手背接触玻片底面感觉微烫手为宜。
百度文库．血液推片和组织抹片的制作
（1）血液推片的制作 取一张边缘整齐的载玻片，用其一端蘸取少许血液， 在另一张干净无油脂的载玻片上，以45°角度均匀地 推成一薄血涂片，以红细胞不重叠为宜。
2．革兰氏染色法
（1）在固定好的抹片上，滴加草酸 铵结晶紫染色液，作用1～ 3min，水洗。
（2）加革兰氏碘液，作用1～2min， 水洗。
（3）加95％酒精脱色约30s至1min， 水洗。
（4）加稀释石炭酸复红，复染30s左 右，水洗，吸干后镜检。
结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰 氏阴性菌呈红色。
3．瑞氏染色法
细菌抹片自然干燥后，滴加瑞氏染色液于涂片 上以固定标本，1～3min后，再滴加与染色液 等量的磷酸缓冲液或中性蒸馏水于玻片上，轻 轻摇晃使与染色液混和均匀，5min左右水洗， 干后镜检，结果菌体呈蓝色，组织细胞等物呈 其他颜色。
（三）常用染色液的配制
1．碱性美蓝染色液 2．革兰氏染色液 3．瑞氏染色液
（3）石炭酸复红稀释液 取碱性复红酒精饱和溶液（碱性复红10g溶于 95%酒精100ml中）1ml和5%石炭酸水溶液9ml混合，即为石炭酸 复红原液。再取原液10ml和90ml蒸馏水混合，即成石炭复红稀释 液。
1．碱性美蓝染色液
甲液：美蓝0.3g、95%酒精30mL； 乙液：0.01%苛性钾溶液100mL 先配甲液，将美蓝放入研钵中，徐徐加入酒精 研磨均匀后，把甲、乙两液混合，过夜后用滤 纸过滤即成。新鲜配制的美蓝液染色不好，陈 旧的染色好。
2．革兰氏染色液
（1）草酸铵结晶紫溶液 甲液：结晶紫2g、95%酒精20ml； 乙液：草酸铵0.8g、蒸馏水80ml 将结晶紫放入研钵中，加酒精研磨均匀制成甲液，然后将完全溶 解的乙液与甲液混合即成。
方法步骤
（一）细菌标本片的制作 （二）常用的细菌染色方法 （三）常用染色液的配制
（一）细菌标本片的制作
1．涂片标本的制作 （1）涂片 （2）干燥涂片 （3）固定涂片
2．血液推片和组织抹片的制作 （1）血液推片的制作 （2）组织抹片的制作
1．涂片标本的制作
（1）涂片 取清洁载玻片一块，用吸管吸取生理盐水1滴置于玻片中 央，再将接种环在火焰上灭菌，待冷后从固体培养基上挑 取少许菌落，置于玻片上的生理盐水中混均匀，并在玻片 上涂成直径约为1cm的涂面，要求薄而均匀。
（2）组织抹片的制作
待检尸体经无菌手术切开胸腹腔后，用经火焰灭菌的 镊子夹起组织，用灭菌剪刀剪下小块组织，将组织切 面在载玻片上等距离轻压几下，使其留有组织切面的 压迹。
（二）常用的细菌染色方法
1．美蓝染色法 2．革兰氏染色法 3．瑞氏染色法
1．美蓝染色法
在已固定好的抹片 上，滴加适量美蓝染色 液覆盖涂面，染色2～ 3 min， 水 洗 ， 吸 水 纸 轻压吸干或晾干和镜检， 结果菌体呈蓝色。
细菌标本片的制备及染色方 法
实训目标
能利用不同的材料进行细菌标本片的制备 掌握常规的染色方法，并认识细菌的不同染色特性
仪器材料
酒精灯、接种环、载玻片、吸水纸、生理盐水、美 蓝染色液、革兰氏染色液、瑞氏染色液、染色缸、 染色架、洗瓶、显微镜、香柏油、乙醇乙醚、擦镜 纸、细菌培养物（大肠杆菌、葡萄球菌等）、细菌 病料、无菌镊子和剪刀、特种铅笔等
3．瑞氏染色液
取瑞氏染料0.1g，纯中性甘油1ml，在研钵中 混合研磨，再加入甲醇60ml，使其溶解，装 入中性瓶中过夜，次日过滤，盛入棕色瓶中， 保存于暗处。保存越久，染色越好。
（2）干燥涂片
在室温下自然干燥，必要时将涂面向上，置火焰上来回微 烤使其干燥。
（3）固定涂片
干燥后，将涂面向上，在火焰上快速来回通过2～3次，其 温度以手背接触玻片底面感觉微烫手为宜。
百度文库．血液推片和组织抹片的制作
（1）血液推片的制作 取一张边缘整齐的载玻片，用其一端蘸取少许血液， 在另一张干净无油脂的载玻片上，以45°角度均匀地 推成一薄血涂片，以红细胞不重叠为宜。
2．革兰氏染色法
（1）在固定好的抹片上，滴加草酸 铵结晶紫染色液，作用1～ 3min，水洗。
（2）加革兰氏碘液，作用1～2min， 水洗。
（3）加95％酒精脱色约30s至1min， 水洗。
（4）加稀释石炭酸复红，复染30s左 右，水洗，吸干后镜检。
结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰 氏阴性菌呈红色。
3．瑞氏染色法
细菌抹片自然干燥后，滴加瑞氏染色液于涂片 上以固定标本，1～3min后，再滴加与染色液 等量的磷酸缓冲液或中性蒸馏水于玻片上，轻 轻摇晃使与染色液混和均匀，5min左右水洗， 干后镜检，结果菌体呈蓝色，组织细胞等物呈 其他颜色。
（三）常用染色液的配制
1．碱性美蓝染色液 2．革兰氏染色液 3．瑞氏染色液