盐酸小檗碱检验操作规程
碘量法测定黄连素中盐酸小檗碱的含量
碘量法测定黄连素中盐酸小檗碱的含量一、实验原理市售的黄连素片（糖衣片、胶囊）主要成分是盐酸小檗碱（C20H18CLNO4·2H2O·M1=407.85）,又称盐酸黄连素，是一种常用的杀菌药物。
主要治疗胃肠炎、眼结膜炎、化脓性中耳炎等。
它具有还原性，且能与K2Cr2O7定量反应生成沉淀，反应的计量关系为nK2Cr2O7:nC20H18CLNO4=1:2。
由于K2Cr2O7的还原产物Cr3+呈绿色，终点无法辨别出过量的K2Cr2O7的黄色，而且又没有合适的指示剂。
可先加入一定量且过量的K2Cr2O7标准溶液，使盐酸小檗碱完全反应，剩余的K2Cr2O7标准溶液再用间接碘量法以硫代硫酸钠标准溶液进行滴定，以淀粉为指示剂。
根据硫代硫酸钠溶液的用量可求出过量的重铬酸钾的物质的量，进而可测出黄连素片中盐酸小檗碱的含量。
二、仪器和试剂仪器：酸式滴定管，电子分析天平，250mL、100mL容量瓶各1个，50ml烧杯1个，玻璃棒，10mL、5mL、25mL移液管各1支，碘量瓶4个、玻璃漏斗1个。
试剂：基准物质K2Cr2O7、200g/L KI溶液、5g/L淀粉指示剂，0.1mol/L Na2S2O3滴定液、浓盐酸。
①200g/L KI溶液：称取KI100g，加蒸馏水溶解定容至500ml②2.5 g/L淀粉指示剂：称取淀粉0.5g,加热蒸馏水溶解定容至100ml③0.1mol/LNa2S2O3滴定液：称取 Na2S2O315.8g,加蒸馏水溶解定容至500ml④4.6mol/L HCI溶液：量取浓盐酸250ml，加蒸馏水定容至500ml三、操作步骤0.02000mol/L、K2Cr2O7标准溶液的配制K2Cr2O7预先在120℃烘干2h,准确称取1.4709g，置于烧杯中，加水溶解，然后定量转移至250mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀0.1mol·L-1 Na2S2O3溶液的标定（1）准确移取K2Cr2O7标准溶液10.00mL于碘量瓶中，加入3mL 6mol/L HCI溶液、5mL 200g/L KI溶液，摇匀，放在暗处5min；（2）待反应完全后，加入50mL蒸馏水，用待标定的Na2S2O3溶液滴定至淡黄色，然后加入1mL5g/L 淀粉指示剂，继续滴定至溶液呈现亮绿色为终点。
盐酸小檗碱实验报告
一、实验目的1. 熟悉盐酸小檗碱的提取、分离与鉴定方法；2. 掌握薄层色谱法、紫外光谱法等分析方法；3. 提高实验操作技能，培养实验思维。
二、实验原理盐酸小檗碱是从黄连、黄柏等植物中提取的一种生物碱，具有抗菌、抗炎、抗癌等药理作用。
本实验采用溶剂提取法、柱层析法等方法对盐酸小檗碱进行提取、分离，并通过薄层色谱法、紫外光谱法等对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：黄连、黄柏、盐酸小檗碱标准品；2. 实验仪器：电热恒温水浴锅、旋转蒸发仪、紫外分光光度计、薄层色谱仪、硅胶G薄层板、硅胶柱、微量注射器等。
四、实验方法与步骤1. 提取（1）将黄连、黄柏药材粉碎，过40目筛；（2）称取2g药材，加入20ml甲醇，超声提取30min；（3）过滤，滤液旋蒸浓缩至约1ml；（4）加入1ml盐酸溶液，搅拌，静置，沉淀完全后过滤，滤液即为粗提液。
2. 分离（1）将硅胶G加入适量甲醇，搅拌均匀，倒入玻璃层析柱中；（2）将粗提液加入层析柱中，用甲醇洗脱；（3）收集盐酸小檗碱洗脱液，旋蒸浓缩至约1ml；（4）加入1ml盐酸溶液，搅拌，静置，沉淀完全后过滤，滤液即为盐酸小檗碱精制品。
3. 鉴定（1）薄层色谱法：取盐酸小檗碱标准品和精制品适量，分别点于薄层板上，以氯仿为展开剂，展开后晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加热显色，观察斑点颜色和位置；（2）紫外光谱法：取盐酸小檗碱标准品和精制品适量，分别用无水乙醇溶解，制成溶液，在紫外分光光度计上测定其在256nm处的吸光度。
五、实验结果与分析1. 薄层色谱法：盐酸小檗碱标准品和精制品在薄层板上形成相同颜色的斑点，且位置一致，证明精制品中含盐酸小檗碱。
2. 紫外光谱法：盐酸小檗碱标准品和精制品在256nm处的吸光度基本一致，证明精制品中含盐酸小檗碱。
六、实验结论本实验成功提取、分离了黄连、黄柏中的盐酸小檗碱，并通过薄层色谱法、紫外光谱法对其进行了鉴定，结果表明精制品中含盐酸小檗碱。
盐酸小檗碱片质量标准011
盐酸小檗碱片成品质量标准编码JS.QS.CP011-00颁发部门质量部生效日期年月日起草人及日期年月日部门审核人及日期年月日质量部QA审核人及日期年月日批准人及日期年月日分发部门行政办[ ] 财务部[ ] 供应部[ ] 生产部[ ] 质量部[ ] 营销部[ ] 设备部[ ] 仓库中心[ ] 提取车间[ ] 口服固体制剂车间[ ] 口服液体制剂车间[ ]盐酸小檗碱片成品质量标准编 码 JS.QS.CP011-00目 的:明确盐酸小檗碱片的质量标准。
范 围:适用于盐酸小檗碱片的检验。
责任人:质量部负责人、质检员。
内 容：1 物料的基本信息：产品名称：盐酸小檗碱片 产品代码：CPYS 2 处方：无3 产品规格和包装形式：（见下表） 品 名 规 格 包 装 规 格 批 准 文 号盐酸小檗碱片每片0.1g40片/瓶*1瓶/盒*100盒/箱国药准字H36021622 100片/瓶*1瓶/盒*400盒/箱4 质量标准的依据：《中国药典》（2010）版二部 P6405 取样方法：依据《半成品、成品取样操作规程》SOP.QS.QA004-00操作。
6 检验方法操作规程： 6.1 性状：本品应为黄色片。
6.2 检查6.2.1 重量差异：依据片剂项下《重量差异检查法检验操作规程》SOP.QC.TZ013-00测定，重量差异限度为±7.5%，超出重量差异限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。
6.2.2 微生物限度：依据《微生物限度检查法检验操作规程》SOP.QC.TZ018-00测定，细菌数应不得过800cfu/g ；霉菌和酵母菌数应不得过80cfu/g ；大肠埃希菌不得检出; 6.2.3 含量均匀度（0.025g 规格）取本品1片，如为糖衣片，除去糖衣，置乳钵中，研细，加沸水适量使盐酸小檗碱溶解，并分次转移至100ml 量瓶中，放冷，用水稀释至刻度，摇匀；滤过，弃去初滤液约8ml,精密量取续滤液适量，用水定量稀释制成每1ml 中约含盐酸小檗碱40ug 的溶液，作为供试品溶液。
盐酸小檗碱检验记录
盐酸小檗碱检验记录第一页【依据】中华人民共和国药典（年版二部）【性状】本品为结论：【鉴别】⑴取本品0.1g，加水10ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液4滴，放冷，加丙酮8滴，（规定：即发生浑浊）结论：⑵取本品 g，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量，（规定：即显樱红色）结论：⑶取适量，置白瓷皿中，加硫酸1ml，5%加没食子酸的乙醇溶液5滴，置水浴上加热，（规定：即显翠绿色）结论：⑷本品的红外光谱应与对照的图谱（光谱集320图）一致。
⑸取本品0.1g，加水20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液加硝酸使成酸性，滴加硝酸银试液，；分离，沉淀加氨试液，沉淀，再加硝酸，沉淀。
（规定：滴加硝酸银试液，即生成白色凝胶状沉淀；分离，沉淀加氨试液，沉淀即溶解，再加硝酸，沉淀复生成）结论：【检查】室温：相对湿度：氰化物取本品0.5g，依氰化物检查法第一法检查，取下碱性硫酸亚铁试纸，加三氯化铁试液与盐酸各 1滴，放置15分钟，试纸。
（规定：不得显绿色或蓝色）结论：有机腈取研细的本品 g，置25ml具塞锥形瓶中，加无水乙醚5ml，振摇5分钟，用垂熔漏斗（G5）滤过，用无水乙醚洗涤3~4次（每次2ml），合并滤液与洗液，浓缩至约0.5ml，作为供试品溶液，另取胡椒乙腈对照品 g，加氯仿制成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液10ul和全部供试品溶液，分别点于同一硅胶G(厚度0.5mm)薄层板上，以苯-冰醋酸（25:0.1)为展开剂，展开后,晾干,喷以5%钼酸铵硫酸溶液，在105℃加热10~20分钟，检视，供试品溶液在与对照品溶液所显主斑点的相应位置上，（规定：不得显杂质斑点）结论：干燥失重仪器：105℃干燥至恒重空称量瓶重：①g / g ；②g / g 精密称取样品：①样+瓶：②样+瓶：－瓶：－瓶：置105℃干燥5小时后，放置30分钟使至室温称定重量：①g ；②g检验人：复核人：年月日盐酸小檗碱检验记录单第二页减失重量：平均：%（规定：减失重量不得过12%）结论：炽灼残渣仪器：在500~600℃空坩埚恒重：①g / g ；②g / g精密称取样品：①样+坩埚：②样+坩埚：－坩埚：－坩埚：依炽灼残渣检查法将供试品炭化后，置500~600℃灰化30分钟后，降温至300℃后取出放置干燥器中放置30分钟使至室温，称定重量，再重复灰化直至恒重：①g / g ；②g / g减失重量：平均：%（规定：遗留残渣不得过0.1%）结论：重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液（pH3.5） 2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml，另取配制供试液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液2ml,再用水稀释成25ml，放置2分钟同置白色纸上，自上向下透视，（规定：≤0.00002%）结论：【含量测定】置烧杯中，加沸水150ml，搅拌使盐酸小檗碱溶解，放冷，移入250ml量瓶中，精密加重铬酸钾滴定液（0.01667mol/L）50ml，加水至刻度，振摇5分钟，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液100ml,至250ml具塞锥形瓶中，加碘化钾2g，振摇使溶解，加盐酸溶液（1→2）10ml，密塞，摇匀，在暗处放置10分钟，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml,继续滴定至蓝色消失，溶液显亮绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。
盐酸小檗碱安全操作及保养规程
盐酸小檗碱安全操作及保养规程1. 简介盐酸小檗碱（Berberine Hydrochloride）是一种天然药物，广泛应用于临床用药和日常保健领域。
然而，由于其成分较为活性且易于氧化，操作不当会产生安全隐患。
因此，正确的使用和保养方法至关重要。
本文将就盐酸小檗碱的安全操作及保养规程进行详细阐述。
2. 安全操作2.1 操作前准备在进行盐酸小檗碱的操作之前，需要做好以下相关准备工作：1.读取产品说明书及安全操作规程；2.穿着防护衣物、手套、口罩等个人防护装备，确保场所整洁；3.检查包装的完整性和包装标签的信息，核对药品名称、规格等信息；4.使用前需要进行氧化还原试验，确保质量符合要求。
2.2 操作过程在进行盐酸小檗碱的操作过程中，需要注意以下相关事项：1.避免与其他化学物质混合使用；2.尽量使用橡胶或聚乙烯等耐酸碱溶液材料；3.避免直接接触到盐酸小檗碱，使用操作杆或手套进行操作；4.测量时尽量使用称量法，避免使用分装或转移液体；5.操作过程中，如发现气味刺鼻、咳嗽、头痛等不适症状，应立即停止操作，到通风良好的地方进行呼吸新鲜空气。
2.3 操作后处理操作结束后，需要做好以下相关处理工作：1.清洗操作器具和容器，避免交叉污染；2.储存盐酸小檗碱时，需要放置于干燥、避光的地方，封口保存；3.不要将未使用的药品直接倒入排水管道，应按照相关法规进行妥善处理。
3. 保养规程3.1 储存方式盐酸小檗碱储存期限为一年，储存时需要做好以下相关准备工作：1.包装完整，密封性好，防潮、防晒；2.存放温度不宜高于25℃，避免接触火源和直接阳光；3.避免与有机物、强氧化剂等不相容物质共同储存。
3.2 定期检查定期检查储存的盐酸小檗碱是否存在以下情况：1.包装或密封是否完好；2.盐酸小檗碱是否发生结晶或沉淀现象；3.盐酸小檗碱是否产生异味或色泽变化；4.药品是否过期，如过期需及时处理丢弃。
3.3 储存记录定期记录储存的盐酸小檗碱的相关信息，包括品名、规格、数量、生产日期、过期日期等，并进行储存位置标识，便于快速查找和管理。
8103-2盐酸小檗碱片检验标准操作程序
目的：规范盐酸小檗碱片检验操作，保证检验结果的准确性。
范围：盐酸小檗碱片的中间产品、成品。
责任：质检员规定：1性状取供试品10片铺于洁净白纸上，观察其色泽及片型厚薄的均一性。
2鉴别取本品的细粉适量（约相当于盐酸小檗碱0.1g）,加水10ml，缓缓加热使盐酸小檗碱溶解，滤过，照下述方法试验：2.1取滤液，加氢氧化钠试液四滴，放冷(必要时滤过)，加丙酮八滴，观察现象。
2.2取滤液0.5ml，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量，观察现象。
2.3取滤液0.2ml，置白瓷皿中，加硫酸1ml溶解后，加5％没食子酸的乙醇溶液三滴，置水浴上加热，观察现象。
2.4取滤液5 ml，加硝酸0.5 ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液显氯化物的鉴别(1)反应(附录III)。
3检查3.1重量差异按“重量差异检查操作程序”检验。
3.2 溶出度取本品，照溶出度测定法（附录XC第一法），以水1000ml 为溶出介质，转速每分钟120转，依法操作，经45分钟时，取溶液5ml，滤过，取续滤液，加水稀释成每1ml中约含5ug的溶液，摇匀，照分光光度法（附录ⅣA），在263nm的波长处测定吸收度，按C20H18ClNO4·2H2O的吸收系数（E1%1cm）为盐酸小檗碱片检验标准操作程序第2页724计算出每片的溶出量。
A×10×S计算公式：溶出量=E1%1cm×BA为供试品的吸光度B为供试品规格（mg）S为供试品稀释倍数E1%1cm吸收系数3.3微生物限度按“微生物检验操作程序”检验。
3.4水分用水分测定仪测定(颗粒)。
4含量测定照高效液相色谱法(附录I A)。
4.1色谱条件与系统适用性试验填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶流动相：磷酸盐缓冲液[0.05mol/L磷酸二氢钾和0.05mol/L庚烷磺酸钠(1：1),含0.2%三乙胺,并用磷酸调PH值至3.0]-乙腈(60:40)波长：263nm理论板数：≥3000（按盐酸小檗碱峰计算）4.2对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定,用沸水溶解并定量稀释制成每1ml中约含40µg的溶液,即得。
盐酸小檗碱片中间产品检验操作规程
盐酸小檗碱片中间产品检验操作规程目的：为检验盐酸小檗碱片中间产品规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。
范围：适用于盐酸小檗碱片中间产品的检验。
职责：检验员、检验室主任对本规程实施负责。
规程：1. 性状：本品为黄色片或糖衣片。
2. 鉴别：2.1 试剂与仪器2.1.1 氢氧化钠试液 2.1.2 丙酮2.1.3 漂白粉 2.1.4 硫酸，稀硫酸2.1.5 5%没食子酸的乙醇溶液 2.1.6 硝酸银试液、硝酸2.1.7 氨试液 2.1.8 研钵、刀片2.1.9 漏斗、漏斗架、滤纸 2.1.10烧杯、量筒2.1.11电子天平（万分之一克） 2.1.12 小型三用水箱2.1.13 移液管（2ml，1ml） 2.1.14 白瓷皿2.1.15 红外分光光度计 2.1.16 试管，滴定管2.2 项目与步骤2.2.1 取本品的细粉适量（约相当于盐酸小檗碱0.2g）,加水20ml，缓缓加热使盐酸小檗碱溶解，滤过，取滤液做以下鉴别试验：2.2.2 取本品的溶液10ml，置试管中，加氢氧化钠试液4滴，放冷，加丙酮8滴，即发生浑浊，为符合规定。
2.2.3 取本品的溶液0.5ml，置试管中，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量即显樱红色，为符合规定。
2.2.4 取本品的溶液0.2ml，置白瓷皿中，加硫酸1ml溶解后，加5%没食子酸的乙醇溶液5滴，置水浴上加热，即显翠绿色为符合规定。
2.2.5 取本品的细粉适量（约相当于盐酸小檗碱0.1g）,置烧杯中，加水20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液显以下鉴别反应: 取滤液5ml，置试管中，加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液加硝酸使成酸性后，加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀，分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸，沉淀复生成为符合规定。
3. 检查:3.1 试剂与仪器3.1.1 纯化水3.1.2 量管（1000ml）3.1.3 移液管（5ml，2ml）3.1.4 容量瓶（25ml）3.1.5 过滤器、滤膜、滤纸 3.1.6 注射器3.1.7 紫外分光光度计 3.1.8 ZRS-4智能溶出度试验仪3.1.9 片剂脆碎仪 3.1.10 试管、烧杯3.1.11 电子天平（万分之一克） 3.1.12研钵3.1.13 吹风机3.2项目与步骤3.2.1 溶出度：取本品6片，照溶出度测定法（SOP-QC-331-00）以水1000ml 为溶剂，转速为每分钟120转，依法操作，经45分钟时，取溶液5ml 滤过，取续滤液2ml，置25量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（SOP-QC-301-00）在263nm波长处测定吸收度，按C20H18ClNO4·2H2O的吸收系数（E1%1cm）为724计算出每片的溶出量；限度为大标示量的70%为符合规定。
盐酸小檗碱检验操作规程
盐酸小檗碱检验操作规程目的：建立盐酸小檗碱检验操作规程范围：适用于盐酸小檗碱检验。
职责：QC主任及检验员。
执行标准：《中国药典》2020年版二部规程：1性状：本品为黄色结晶性粉末；无臭。
2鉴别：2.1试剂：氢氧化钠、丙酮、盐酸、漂白粉、硫酸、硝酸、没食子酸。
2.2仪器与用具：试管、量筒（25ml）、白瓷皿、电子天平（1/10000）、红外分光光度计。
2.3操作步骤2.3.1取本品约0.1g，加水10ml缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液4滴，放冷(必要时滤过)，加丙酮8滴，即发生浑浊。
2.3.2取本品约5mg，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量，即显樱红色。
2.3.3本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集320图)一致。
2.3.4取本品约0.1g，加水20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液显氯化物的鉴别(1)反应。
3 检查：3.1有关物质：照高效液相色谱法（通则0512)测定。
供试品溶液取本品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中含1mg的溶液。
对照品溶液(l) 取盐酸药根碱对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml 中含0.1mg 的溶液。
对照品溶液(2) 取盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml 中含0.1mg 的溶液。
对照溶液精密量取供试品溶液2ml 与对照品溶液(l)、对照品溶液(2) 各10ml, 置100ml 量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。
系统适用性溶液取对照品溶液(2) 1ml, 用供试品溶液稀释至10ml, 摇匀。
色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.Olmol/L 磷酸二氢铵溶液（用磷酸调节pH 值至2.8)- 乙腈(75 : 25) 为流动相；检铡波长为345nm; 进样体积10μ1 。
系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中，巴马汀峰与小襞碱峰之间的分离度应符合要求。
测定法精密量取供试品溶液与对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2 倍。
盐酸小檗碱的薄层色谱法鉴定
盐酸小檗碱的薄层色谱法鉴定盐酸小檗碱是一种重要的有机化合物，在药物研究和分析领域有着广泛的应用。
薄层色谱法是一种简便、快速、准确的分析方法，被广泛应用于药物分析、食品检测等领域。
本文将介绍盐酸小檗碱的薄层色谱法鉴定方法。
一、实验原理薄层色谱法是以液相为移动相，以固相为静相，利用固液分配作用进行物质的分离和鉴定的一种分析方法。
在薄层色谱中，将待测物溶解于移动相中，利用毛细珠尖吸附于静相薄层，再通过静相与溶剂相互作用力的差异，使待测物分离出来。
二、实验操作步骤1.薄层色谱试纸的准备：取一块无荧光试纸，用无色玻璃棒或毛笔在试纸上涂上薄层静相。
2.移动相的配置：根据实验需要，选择合适的移动相并配置好。
3.样品的制备：将盐酸小檗碱溶解于适量的移动相中，摇匀得到待测样品溶液。
4.样品的上样：用吸管等工具将待测样品溶液均匀地滴于试纸的起始线上。
5.开始上色：将试纸放入含有适量移动相的色谱槽中，待试纸上的色谱线浸泡在移动相中。
6.色谱的进行：观察移动相前进的速度和色谱线的变化情况，保证样品在移动相中有足够的分离时间。
7.色谱结果的观察：将试纸取出，待试纸干燥后，观察样品在试纸上的色谱效果，记录色谱结果。
三、结果分析根据色谱结果，在试纸上的位置和颜色可以初步判断待测物盐酸小檗碱的含量和纯度。
色谱图中，物质分离越好，色谱带越分散，颜色越明显。
可以通过与标准品对比，判断待测物的品质。
四、实验注意事项1.准备试纸时要保持无色、无荧光，静相薄层均匀涂布。
2.移动相的选择要考虑待测物的特性和分离条件。
3.上样要均匀，待测样品的量要适量，不宜过多。
4.移动相在色谱槽中的深度要适中，不宜过高或过低。
5.色谱进行时，要保持试纸和试管的垂直，避免倾斜或晃动。
6.观察色谱结果时，要在试纸完全干燥后进行，避免颜色扩散和混淆。
通过薄层色谱法的鉴定，可以快速准确地分析盐酸小檗碱的含量和纯度。
这种方法操作简便，结果可靠，被广泛用于药物质量控制和分析研究中。
实验 盐酸小蘖碱的提取分离与鉴定
实验盐酸小蘖碱的提取分离与鉴定一、实验目的与要求1．学习生物碱的初步提取分离方法。
2．掌握利用柱层析分离纯化、薄层层析鉴定药用植物成分的方法。
二、基本原理生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物,大都有明显的生理活性,是许多中草药中的有效成分。
它们是人类对植物研究得最早最多的一类有效成分,现已分离出有六千余种。
这些生物碱在植物体内一般均与有机酸或无机酸结合成盐而存在,只有弱碱性生物碱往往呈游离状态,还有一些是与糖结合成苷而存在。
小檗碱又名黄连素,是最先由毛莨科黄连（Coptis chinensis Fran）和芸香科黄柏(Phellodendron amurense Rup.)等植物中提出的一种黄色生物碱。
黄连属植物的根茎、须根、叶中等都含有小檗碱、黄连碱、药根碱、巴马亭等生物碱[1],我国黄连药材产量占世界第一位。
现已发现，唐松草属（Thalictrum）、小檗科的小檗属(Berberis L.)、十大功劳属(Mahomia Nuff)及防己科的天仙藤属（Fibraurea）等都可作为提取小檗碱的资源植物。
本实验即是用小檗属植物三颗针 (Berberis julianae schneid.)或黄连属黄连作为提取小檗碱的原料;RN+R1R2R4R3化合物R R1R2R3R4小檗碱－O－CH2－O－OCH3OCH3H甲基黄连碱－O－CH2－O－－O－CH2－O－CH3黄连碱－O－CH2－O－－O－CH2－O－H掌叶防己碱OCH3OCH3OCH3OCH3H药根碱OH OCH3OCH3OCH3H古伦胺碱OCH3OH OCH3OCH3H黄连类生物碱结构三颗针及黄连中均含有小檗碱(分别为1%,5.1%)以及巴马亭(掌叶防已碱,Palamtine)、药根碱(Jatrorrhicine)等,它们均有明显的抗炎作用。
小檗碱是一种季铵碱,其游离碱为黄色针晶,Mp.145℃(乙醚),微溶于水,能溶于热水和乙醇中，难溶于苯、丙酮、氯仿，几乎不溶于石油醚。
实验七 薄层扫描法测定香莲片中盐酸小檗碱含量
实验七薄层扫描法测定香莲片中盐酸小檗碱含量一、目的要求1、掌握TLCS测定中药制剂含量的方法2、掌握薄层定量的点样和展开技术3、熟悉薄层扫描仪的使用二、基本原理薄层扫描法是利用某种波长的单色光对薄层上的斑点进行扫描，通过测定该斑点对光的吸收度而确定其含量。
本实验采用荧光扫描，测定香莲片中盐酸小檗碱含量。
三、仪器与试药1、薄层扫描仪、分析天平、索氏提取器、定量毛细管2、薄层涂铺器、薄层展开缸3、薄层层析用硅胶，其他试剂均为分析纯4、盐酸小檗碱对照品（中国生物制品检定所）5、香连片（市售品）四、操作步骤1、供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸小檗碱60mg），置索氏提取器中，加盐酸-甲醇（1：100）混合液适量，加热回流提取至提取液无色，将提取液移至100ml量瓶中，用少量盐酸-甲醇（1：100）的混合液洗涤容器，洗液并入提取液中，加混合液至刻度，摇匀，精密量取2ml，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2、对照品溶液的制备取盐酸小檗碱适量，加甲醇制成每1ml含0.02mg的溶液，作为对照品溶液。
3、测定法精密吸取供试品溶液2μl，对照品溶液2μl与6μl，交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水（12：6：3：3：0.6）为展开剂，在另槽中加入等体积的浓氨试液，预平衡15分钟后，展开，展距约10cm，取出，晾干，进行荧光扫描测定，激发波长=366nm，测定供试品与对照品荧光强度积分值，计算，即得。
《中国药典》2005版规定，本品每片含黄连以盐酸小檗碱计，小片不得小于7.0mg，大片不得少于20mg。
五、思考题1、影响薄层扫描测定含量的因素有哪些？点样误差是不是主要因素？2、薄层扫描法中常用的点样器有哪些？。
盐酸小檗碱片中间产品检验操作规程
目的：为检验盐酸小檗碱片中间产品规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。
范围：适用于盐酸小檗碱片中间产品的检验。
职责：检验员、检验室主任对本规程实施负责。
规程：1. 性状：本品为黄色片或糖衣片。
2. 鉴别：2.1 试剂与仪器2.1.1 氢氧化钠试液 2.1.2 丙酮2.1.3 漂白粉 2.1.4 硫酸，稀硫酸2.1.5 5%没食子酸的乙醇溶液 2.1.6 硝酸银试液、硝酸2.1.7 氨试液 2.1.8 研钵、刀片2.1.9 漏斗、漏斗架、滤纸 2.1.10烧杯、量筒2.1.11电子天平（万分之一克） 2.1.12 小型三用水箱2.1.13 移液管（2ml，1ml） 2.1.14 白瓷皿2.1.15 红外分光光度计 2.1.16 试管，滴定管2.2 项目与步骤2.2.1 取本品的细粉适量（约相当于盐酸小檗碱0.2g）,加水20ml，缓缓加热使盐酸小檗碱溶解，滤过，取滤液做以下鉴别试验：2.2.2 取本品的溶液10ml，置试管中，加氢氧化钠试液4滴，放冷，加丙酮8滴，即发生浑浊，为符合规定。
2.2.3 取本品的溶液0.5ml，置试管中，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量即显樱红色，为符合规定。
2.2.4 取本品的溶液0.2ml，置白瓷皿中，加硫酸1ml溶解后，加5%没食子酸的乙醇溶液5滴，置水浴上加热，即显翠绿色为符合规定。
2.2.5 取本品的细粉适量（约相当于盐酸小檗碱0.1g）,置烧杯中，加水20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液显以下鉴别反应: 取滤液5ml，置试管中，加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液加硝酸使成酸性后，加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀，分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸，沉淀复生成为符合规定。
3. 检查:3.1 试剂与仪器3.1.1 纯化水 3.1.2 量管（1000ml）3.1.3 移液管（5ml，2ml） 3.1.4 容量瓶（25ml）3.1.5 过滤器、滤膜、滤纸 3.1.6 注射器3.1.7 紫外分光光度计 3.1.8 ZRS-4智能溶出度试验仪3.1.9 片剂脆碎仪 3.1.10 试管、烧杯3.1.11 电子天平（万分之一克） 3.1.12研钵3.1.13 吹风机3.2项目与步骤3.2.1 溶出度：取本品6片，照溶出度测定法（SOP-QC-331-00）以水1000ml为溶剂，转速为每分钟120转，依法操作，经45分钟时，取溶液5ml滤过，取续滤液2ml，置25量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（SOP-QC-301-00）在263nm波长处测定吸收度，按C20H18ClNO4·2H2O的吸收系数（E1%1cm）为724计算出每片的溶出量；限度为大标示量的70%为符合规定。
药学实验报告及数据
实验名称：盐酸小檗碱提取及含量测定实验目的：1. 学习盐酸小檗碱的提取方法。
2. 掌握盐酸小檗碱的含量测定方法。
3. 了解盐酸小檗碱的药理作用。
实验时间：2021年10月15日实验地点：药学实验室实验材料：1. 盐酸小檗碱原料药2. 乙醇3. 碳酸氢钠4. 紫外分光光度计5. 721分光光度计6. 实验仪器：天平、研钵、烧杯、漏斗、滤纸、容量瓶、移液管等实验方法：一、盐酸小檗碱的提取1. 称取5g盐酸小檗碱原料药，置于研钵中，加入适量乙醇，研磨成粉末。
2. 将粉末转移至烧杯中，加入适量蒸馏水，加热煮沸，提取1小时。
3. 滤去杂质，收集滤液，待测。
二、盐酸小檗碱含量测定1. 精密移取2.0ml滤液，置于10ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，得待测溶液。
2. 将待测溶液在紫外分光光度计上，以乙醇为空白，于269nm波长处测定吸光度。
3. 计算盐酸小檗碱的含量。
实验结果：一、盐酸小檗碱的提取实验中提取的盐酸小檗碱含量为：0.434g。
二、盐酸小檗碱含量测定1. 待测溶液的吸光度为：0.567。
2. 盐酸小檗碱的含量为：0.021mg/ml。
实验讨论：1. 盐酸小檗碱提取过程中，采用乙醇作为溶剂，提取率较高，且提取过程简单易行。
2. 盐酸小檗碱含量测定中，紫外分光光度法具有快速、准确、灵敏等优点，适用于盐酸小檗碱的含量测定。
3. 盐酸小檗碱具有抗菌、抗病毒、抗炎等药理作用，广泛应用于临床治疗。
实验结论：1. 本实验成功提取了盐酸小檗碱，并对其含量进行了测定。
2. 盐酸小檗碱具有广泛的药理作用，具有较高的药用价值。
实验反思：1. 在提取过程中，注意控制提取时间，以确保提取效果。
2. 在含量测定过程中，注意溶液的浓度，避免误差。
3. 在实验过程中，严格遵守操作规程，确保实验安全。
实验报告撰写人：XXX实验报告审核人：XXX实验报告批准人：XXX。
实验十黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识
实验十黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识(一)目的要求学习提取精制和检识黄连中的小檗碱,通过实验要求：1.掌握小檗碱的结构特点和理化性质。
2.熟悉浸渍法、盐析法、结晶法和薄层色谱法的基本操作过程及注意事项。
3.了解盐酸小檗碱的检识方法。
(二)主要化学成分的结构及性质黄连为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch.、三角叶黄连CoptisdeltoideaC.Y.ChengetHsiao、峨嵋野连Coptisomeiensis(Chen)C.Y.Cheng或云连CoptisteetaWall.的根茎。
黄连的根状茎含多种生物碱,主要为小檗碱(黄连素),约5%~8%,其次为黄连碱、甲基黄连碱、掌叶防己碱、药根碱、木兰碱等。
叶含小檗碱1.49%。
小檗碱(berberine):分子式(C20H18NO4)+,分子量336.37。
系季铵生物碱。
游离小檗碱为黄色针状结晶(乙醚),mp.145℃,能缓缓溶于冷水(1∶20),可溶于冷乙醇(1∶100),易溶于热水或热乙醇,难溶于丙酮、氯仿、苯,几乎不溶于石油醚。
盐酸小檗碱(C20H17NO4·HCl·2H2O),为黄色结晶,微溶于冷水(1∶500),易溶于沸水,几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。
硫酸小檗碱((C20H18NO4)2·SO4·3H2O),溶于水(1∶30),溶于乙醇。
重硫酸小檗碱(C20H18NO4·HSO4)为黄色结晶或粉末,溶于水(1∶150),微溶于乙醚。
NOCH3OCH3OO+N+HOCH3OHOCH3OCH3CH3小檗碱木兰碱(三)实验原理根据小檗碱的盐酸盐在水中溶解度小,而小檗碱的硫酸盐水中溶解度较大。
因此,从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉,然后向提取液中加入10%的食盐,在盐析的同时,也提供了氯离子,使其硫酸盐转变为氯化小檗碱(即盐酸小檗碱)而�1�7�1�7�1�7出。
盐酸小檗碱片微生物限度检查方法学验证
盐酸⼩檗碱⽚微⽣物限度检查⽅法学验证2019-09-14摘要⽬的：建⽴盐酸⼩檗碱⽚微⽣物限度检查的⽅法。
⽅法：按《中国药典》2005版的要求［1］，通过接种代表性的阳性菌株，采⽤常规法、稀释法、薄膜过滤法进⾏⽅法学验证实验。
结果：⽤PH7．0氯化钠-蛋⽩胨缓冲液每筒冲洗400mL（分四次），可以消除样品对五株阳性菌株的抑制作⽤。
结论：[HTSS]本样品可以采⽤薄膜过滤法冲洗量为400 mL/筒进⾏微⽣物限度检查。
关键词盐酸⼩檗碱⽚微⽣物限度检查薄膜过滤法⽅法学验证盐酸⼩檗碱⽚具有抑菌作⽤，临床⽤于痢疾杆菌、⼤肠杆菌引起的肠道感染。
含抑菌成分的中成药进⾏微⽣物限度检查时，必须消除供试液抑菌活性，并通过实验验证该样品抑菌活性的消除，以保证检验结果的有效性。
中国药典收载的各中成药品种检查项下，很少规定具体的微⽣物限度检查⽅法。
本实验通过接种5种代表性的阳性菌株，经过微⽣物限度检查⽅法学的验证，建⽴了盐酸⼩檗碱⽚微⽣物限度检查的⽅法。
1 仪器与材料1．1 仪器 HTY-2000A集菌仪（杭州⾼得医疗器械有限公司）；开放式⼀次性薄膜过滤器(北京⽜⽜基因技术有限公司,批号:20051005) ；SPX-100B-Z型⽣化培养箱（上海博迅实业有限公司医疗设备⼚）。
1．2 样品盐酸⼩檗碱⽚（云南天利药业有限公司，规格0．1g／⽚,批号200603120、20060201、20060301）1．3 培养基和试剂改良马丁液体培养基（批号，0507062 ），改良马丁琼脂培养基（批号，010315），玫瑰红钠琼脂培养基(批号, 030710), 营养⾁汤培养基(批号, 011008)，营养琼脂培养基（批号，050328 ），胆盐乳糖培养基( 批号, 05222),北京三药科技开发公司;1．4 菌种⼤肠埃希菌（Escherichia coli）［CMCC(F) 44102］、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) ［CMCC(B) 63 501］、⾦黄⾊葡萄球菌(Staphylococcus aureus) ［CMCC(B) 26 003］、⽩⾊念珠菌(Candida albicans) ［CMCC(F) 98 001］、⿊曲霉(Aspergillus niger)［CMCC(F) 98 003 ］（中国药品⽣物制品检定所）2 ⽅法按中国药典2005版微⽣物限度检查法（附录Ⅺ J）［2］进⾏验证试验2．1 菌液制备取经34℃培养18-24h，⼤肠埃希菌、⾦黄⾊葡萄球菌与枯草芽孢杆菌⾁汤液体培养物1 mL ,加⼊9 mL 0．9%氯化钠溶液中,10倍稀释⾄10-5~10-7备⽤;取经24 ℃培养18~24h的⽩⾊念珠菌霉菌液体培养物1mL , 加⼊9 mL0．9%氯化钠溶液中,10倍稀释⾄10-6备⽤;取经培养⼀周的⿊曲霉菌斜⾯物,加0．9%氯化钠溶液3mL, 洗下孢⼦,转移⾄另⼀空管,标准⽐浊后,取1 mL加⼊0．9%氯化钠溶液中10倍稀释⾄10-4备⽤。
盐酸小檗碱检验操作规程
检查法：取本品各药品项下规定量的供试品,置A瓶中，加水10ml与10%酒石酸溶液3ml，迅速将照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，摇匀，小火加热，微沸1分钟。取下碱性硫酸亚铁试纸，加三氯化铁试液与盐酸各1滴，15分钟内不得显绿色或蓝色。
有机腈取研细的本品0.25g，置25ml具塞锥形瓶中，加无水乙醚5ml，振摇5分钟，用垂熔漏斗(G5)滤过,用无水乙醚洗涤3～4次(每次2ml),合并滤液与洗液，浓缩至约0.5ml,作为供试品溶液；另取胡椒乙腈对照品适量，加氯仿制成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典二部附录ⅤB)试验,吸取对照品溶液10ul和全部供试品溶液,分别点于同一硅胶G(厚度0.5mm)薄层板上,以苯－冰醋酸（25：0.1）为展开剂，展开后，晾干，喷以5%钼酸铵硫酸溶液，在105℃加热10～20分钟，检视，供试品溶液在与对照品溶液所显主斑点的相应位置上，不得显杂质斑点（合成品）。
【性状】 本品为黄色结晶性末；无臭，味极苦。
本品在热水中溶解，在水或乙醇中微溶，在氯仿中极微溶解，在乙醚中不溶。
【鉴别】（1）取本品 约0.1g，加水10ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液4滴，放冷（必要时滤过），加丙酮8滴，即发生浑浊。
（2）取本品约5mg，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量，即显樱红色。
（3）取本品约2mg，置白瓷皿中，加硫酸1ml溶解后，加5%没食子酸的乙醇溶液5滴，置水浴上加热，即显翠绿色。
（4）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集320图）一致 。
（5）取本品约0.1g，加水20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液显氯化物的鉴别（1）反应（《中国药按（4.2～4.3）操作，直至恒重。
盐酸小檗碱片微生物限度检查法验证方案
1 验证小组人员及责任：1.1 验证小组人员：1.2 责任：验证小组组长负责验证方案起草和编写，组织验证全过程的实施，提出验证报告。
验证小组组员分别负责落实方案实施中各部分验证的具体工作。
2.验证目的及标准来源：2.1 验证目的：盐酸小檗碱片微生物限度试验采用薄膜过滤法进行检查。
验证所使用的微孔滤膜能有效截留各类微生物、检验方法能消除盐酸小檗碱对各类微生物的抑制作用。
2.2. 标准来源：《中国药典》2005版二部《中国药品检验标准操作规程》2005年版3. 设备、仪器3.1 无菌室微生物限度检查应有单独的无菌室，每个无菌室应有独立的净化空气系统。
3.1.1 操作间操作间应安装空气除菌过滤层流装置。
环境洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。
操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正压，不低于4.9Pa。
操作台上备有电子天平，乙醇灯，火柴，乙醇棉球，大、小橡皮乳头等。
3.1.2 缓冲间缓冲间内应有洗手盆，无菌衣、帽、口罩、拖鞋等。
缓冲间内不得放置培养箱和其他杂物。
3.1.3 无菌室操作台消毒擦拭后，先启动层流净化装置30min，将备妥的营养琼脂平板3个（经30～350C预培养48h，证明无菌落生长），以无菌方式移入操作间，置净化台左、中、右各1个，开盖，暴露30min 后将盖盖上。
在30～350C培养箱内倒置培养48h，取出检查。
3个平板生长的平均菌落数不超过1个。
3.1.4 在每次操作前、后，用75%乙醇溶液或其他消毒液擦拭操作台及可能污染的死角。
然后启动层流净化装置，同时用紫外杀菌灯照射30min。
3.2 仪器3.2.1 恒温培养箱（30～350C）、生化培养箱（23～280C）、电冰箱、蒸汽灭菌器。
3.2.2 玻璃器皿烧杯、培养皿、量筒、试管及塞、吸管。
玻璃器皿用前应洗涤干净，吸管、量筒不挂水滴，无残留抗菌物质。
吸管口上端距0.5cm处塞入约2cm适宜疏松的棉花，置牛皮纸袋中。
黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定
实验黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的化学检识。
[实验原理]小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
[实验内容]一、提取分离黄连粗粉20g加0.3%硫酸200ml，浸泡20min煎煮30min，滤过滤液药渣加石灰乳调pH值11-12放置10min，抽滤滤液加HCl调pH2-3加滤液体积4-5%的NaCl，放置30min滤液沉淀加200ml水加热至澄明趁热抽滤滤液静置，抽滤沉淀二、精制盐酸小檗碱粗品水，加热溶解，趁热过滤不溶物pH1-2沉淀（盐酸小檗碱）三、检识精制小檗碱溶液滤过，抽干，用少许蒸馏水洗涤，70℃以下干燥，得小檗碱精品。
称重，计算提取率。
1. 浓硝酸、漂白粉实验取盐酸小檗碱少许，加稀硫酸8ml溶解，分置两支试管中，一支加入2滴浓硝酸，观察颜色变化；另一支加入少许漂白粉，观察颜色变化。
2. 丙酮小檗碱实验取盐酸小檗碱少许，加5ml蒸馏水，水浴加热溶解，溶解后加入氢氧化钠试液2滴，观察颜色变化，放冷，加入丙酮4滴，观察现象。
盐酸小檗碱原始检验记录(2020版药典)
盐酸小檗碱原始检验记录文件编号：第1 页共6页名称盐酸小檗碱规格批号包装生产单位供应单位检验项目检验依据检验仪器【性状】本品为本品在热水中（溶解），在水或乙醇中（微溶），在三氯甲烷中（极微溶解），在乙醚中（不溶）项目结论：【鉴别】（1）取本品约0.1g，加水10ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液4滴，放冷（必要时滤过），加丙酮8滴，（应即发生浑浊）项目结论：（3）本品红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集320图一致）项目结论：（4）（2）取本品约5mg，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量，（应即显樱红色）项目结论：（4）本品约0.1g，加水20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液（应显氯化物的鉴别（1）反应）项目结论：【检查】有关物质：照高效液相色谱法(通则0512)试验供试品溶液的色谱中，如有与药根碱峰和巴马汀峰保留一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，均不得过1.0%；其他杂质峰面积的和不得大于对照品溶注液中的小檗碱峰的面积(2.0%)。
检验者：复核者：产品名称：盐酸小檗碱批号：规格：第2 页共6页检验条件：色谱柱：C18柱（以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂ODS柱）柱号：E15XXXXXX 填料：Hypersil ODS 25µm 批号：柱长：150mm 管径：4.6mm 柱温：进样器：XX型进样器进样量：XXµl定量环流动相：0.01mol/L磷酸二氢铵溶液(用磷酸调pH值至2.8)-乙腈(75：25)，检测波长：345nm流速：压力：对照品溶液的制备方法精密称取盐酸药根碱对照品和盐酸巴马汀对照品适量，加流动相溶解并定量稀释成每1ml中约含0.1mg的溶液，分别作为对照品溶液(1)和(2)。
对照品溶液的制备精密称取盐酸药根碱对照品 g（中检所，批号：）和盐酸巴马汀对照品 g（中检所，批号：）分别置于ml、ml容量瓶中，加流动相溶解，摇匀，定容至刻度，分别作为对照品溶液(1)和(2)。
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目的：为检验盐酸小檗碱规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。
范围：适用于盐酸小檗碱的检验。
职责：检验室主任、检验员。
规程：
1．性状：本品为黄色结晶性粉末；无臭；味极苦。
本品在热水中溶解，在乙醇或水中微溶，在氯仿中极微溶解，在乙醚中不溶。
2．鉴别
2.1 试剂与仪器
2.1.1 氢氧化钠试液 2.1.2 丙酮
2.1.3 硫酸 2.1.4 5% 没食子酸的乙醇溶液
2.1.5 硝酸 2.1.6 电子天平(万分之一克)
2.1.7 移液管(10ml，2ml，1ml) 2.1.8 量杯(20ml)
2.1.9 白瓷皿 2.1.10 试管，滴管
2.1.11 电炉 2.1.12 稀盐酸，漂白粉
2.1.13 硝酸银 2.1.14 氨试液
2.1.15 IR470型红外光谱仪
2.2 项目与步骤
2.2.1 称取本品约0.1g，置烧杯中，加水10ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液4滴，放冷(必要时滤过)，加丙酮8滴，即生成浑浊为符合规定。
2.2.2 称取本品约5mg，试管中，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量，即显樱红色为符合规定。
2.2.3 称取本品约2mg，置白瓷皿中，加硫酸1ml溶解后，加5% 没食子酸的乙醇溶液5滴，置水浴上加热，即显翠绿色为符合规定。
2.2.4 红外光吸收光谱的鉴别：称取本品约 1.5mg，照红外分光光度法(SOP-QC-302-00)
测定，本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱图320图）一致为符合规定。
2.2.5 称取本品约0.1g，置烧杯中，加水20ml缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，取滤液加硝酸使成酸性后，加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸沉淀复生成为符合规定。
3．检查
3.1 试剂与步骤
3.1.1 醋酸乙酯 3.1.2 氯仿
3.1.3 甲醇 3.1.4 二乙胺
3.1.5 硅胶G薄层板 3.1.6 无水乙醚
3.1.7 垂熔漏斗(G5) 3.1.8 胡椒乙腈
3.1.9 苯-冰醋酸(25:0.1) 3.1.10 5%钼酸铵硫酸溶液
3.1.11 微量进样器(10μl) 3.1.12 层色缸
3.1.13 2F-I型三用紫外分析仪 3.1.14 直热式电热恒温干燥箱
3.1.15 坩埚 3.1.16 电子天平(万分之一克)
3.1.17 正丁醇，冰醋酸
3.2 项目与步骤
3.2.1 其他生物碱称取本品加乙醇制成每1ml中含2.0mg的溶液，作为供试品溶液；另取药根碱对照品与巴马汀对照，分别加乙醇制成每1ml中各含0.1mg和0.04mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法的（SOP-QC-10-304-00）试验，吸取供试品溶液及药根碱对照品溶液各3μl，分别点于同一含有0.1%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲醇-二乙胺（8:2:2:1）为展开剂，展开后，立即检视。
供试品溶液如显药根碱的斑点，不得深于对照品溶液所显主斑点的颜色。
另取供试品溶液及巴马汀对照品溶液各3μl，分别点于同一含有0.1%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7:1:2）为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品溶液如显与对照溶液相应的杂质斑点，其荧光强度与对照溶液的主斑点的比较，不得更强为符合规定。
3.2.2 氰化物：称取本品0.5g，按氰化物检查法（SOP-QC-10-320-00）第一法检查，15分钟内不得显绿色或蓝色为符合规定。
3.2.3 有机腈：称取研细的本品0.25g置25ml具塞锥形瓶中，加无水乙醚5ml，振摇5分钟，用垂熔漏斗（G5）滤过，用无水乙醚洗涤3-4次（每次2ml），合并滤液与洗液浓缩至约0.5ml，作为供试品溶液；另取胡椒乙腈对照品适量，加氯仿制成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照溶液，照薄层色谱法（SOP-QC-10-304-00）试验，吸取对照品溶液10μl和全部供试品溶液，分别点于同一硅胶G（厚度0.5mm）薄层板上，以苯-冰醋酸（25:0.1）为展开剂，展开后，晾干，喷以5%钼酸铵硫酸溶液，在105℃加热10～20分钟，检视供试品溶液在与对照品溶液所显主斑点的相应位置上，不得显杂质斑点为符合规定。
3.2.4 干燥失重称取本品约1.0g置称量瓶中，按干燥失重检查法（SOP-QC-10-325-00）检查，在100℃干燥5小时，减失重量不得过12%为符合规定。
3.2.5 炽灼残渣精密称取本品1.0g置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定按炽灼残渣检查法（SOP-QC-10-327-00）检查，遗留残渣不得过0.2%为符合规定。
3.2.6 重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，按重金属检查法（SOP-QC-10-322-00）第二法检查，含重金属不得过百万分之二十为符合规定。
4．含量测定
4.1 试剂与仪器
4.1.1 重铬酸钾滴定液(0.016mol/L) 4.1.2 碘化钾
4.1.3 盐酸溶液(1→2) 4.1.4 硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L) 4.1.5 淀粉指示液 4.1.6 烧杯
4.1.7 量杯，量筒 4.1.8 移液管(50ml)
4.1.9 碘量瓶(250ml) 4.1.10 电子天平(万分之一克)
4.1.11 碱式滴定管 4.1.12 铁架台
4.1.13 滤纸 4.1.14 漏斗
4.1.15 漏斗架
4.2 检验步骤
4.2.1 供试品溶液的制备：精密称取本品约0.3g置烧杯中，加沸水150ml使溶解，放冷移置250ml碘量瓶中，精密加重铬酸钾滴定液(0.01667mol/L)50ml，加水至刻度，振摇5分钟，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液100ml置250ml碘量瓶中，加碘化钾2g，振摇使溶解，
加盐酸溶液(1→2)10ml ，密塞，摇匀，在暗处放置10分钟。
4.2.2 空白的制备：水100ml 置250ml 碘量瓶中，加碘化钾2g ，振摇使溶解，加盐酸溶液(1→2)10ml ，密塞，摇匀，在暗处放置10分钟。
4.3
滴定：空白试验溶液及供试品试验溶液各用0.1mol/L 硫代硫酸钠滴定液滴定
（SOP-QC-353-00）至近终点时各加淀粉指示液2ml 继续滴定至蓝色消失，溶液显亮绿色。
每1ml 重铬酸钾滴定液(0.01667mol/L)相当于12.39mg 的C 20H 18ClNO 4。
按干燥品计算，含C 20H 18ClNO 4提取品不得少于97.0%，合成品不得少于98.0%为符合规定。
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m
F
E V V 供试品含量
v 1：供试品溶液消耗滴定液的读数。
(ml)
v 0 ：空白试验溶液消耗滴定液的读数。
(ml)
E ：为每1ml 滴定液相当于被测物质的重量(mg)
F ：为滴定液浓度的校正因子
m ：为取样重(g)
5． 类别：抗菌药 6． 贮藏：密封保存
7． 制剂：⑴ 盐酸小檗碱片；
⑵ 盐酸小檗碱胶囊。