桦褐孔菌菌丝生长条件的试验研究

中以玉米粉为最好 ,菌丝日均生长速度 7. 8mm ,明显高于其他 4 个处理 。(N H4) 2 SO4 、NaNO3无机氮源显然不适合桦褐孔菌 菌丝的生长 。
表 2 不同氮源对桦褐孔菌菌丝生长的影响 (mm/ d)
氮 源
玉米粉 黄豆粉 麸皮 (N H4) 2SO4 NaNO3
Ⅰ
6Leabharlann Baidu 50 6. 20 4. 00 0. 12 0. 10
表 4 不同光照条件对桦褐孔菌菌丝生长的影响 (mm/ d)
不同光 照处理
黑暗 交替 光照
Ⅰ
3. 12 2. 17 2. 00
菌丝日长速 ⅡⅢⅣ
3. 31 3. 00 2. 87 3. 00 2. 67 2. 42 2. 42 2. 42 3. 25
Ⅴ
3. 18 2. 50 2. 42
平均 日长速
1 材料与方法
1. 1 供试菌株 桦褐孔菌菌种由本室于 2003 年自子实体分 离获得 。培养基配方 : ①马铃薯 200ɡ,葡萄糖 20ɡ,琼脂 20ɡ, KH2 PO4 1ɡ,硫酸镁 0. 5ɡ,蛋白胨 1ɡ。水 1 000mL 为标准 。 ② 麦粒 91. 5 % ,麸皮 5 % ,CaCO3 0. 5 % ,过磷酸钙 1 % ,石膏 1 % , 石灰 1 %。含水量 65 %为标准 。 1. 2 试验方法 1. 2. 1 不同碳源对桦褐孔菌菌丝生长的影响 以配方 ①为 标准 ,分别设置葡萄糖 、果糖 、蔗糖 、麦芽糖 、淀粉 5 个不同碳 源处理 。采用培养皿平板培养法 ,接种后定时观察记录菌丝 生长速度[6 、7 、8 ] ,并进行差异显著性分析 。 1. 2. 2 不同氮源对桦褐孔菌菌丝生长的影响 以配方 ②为 标准 ,分别设置硝酸钠 、硫酸铵 、麸皮 、玉米粉 、黄豆粉 5 个不 同氮源处理 。采用试管培养法 ,其他方法同上 。 1. 2. 3 不同的 p H 值对桦褐孔菌菌丝生长的影响 分别设置
参 考 文 献
[1 ] 黄年来. 俄罗斯神秘的民间药用真菌 ———桦褐孔菌. 中国食用 菌 ,2002 (4) 7～8
[ 2 ] Shin Y , Tamai Y , Terazawa M . Chemical constituents of Inonotus obliquus Ⅱ:a new triterpene ,21 ,24 - cyclopentalanosta - 3beta ,21 ,
Duncan 检验
0. 05 0. 01
aA
b AB
bB
c
C
c
C
2. 3 不同 p H 值对桦褐孔菌菌丝生长的影响 不同 p H 值处 理对桦褐孔菌菌丝生长速度的影响明显不同 ,结果见表 3 。在 p H 3～10 桦褐孔菌菌丝均能生长 ,但以 p H 5 、6 为最好 ,菌丝 日均长速分别 2. 65mm 和 2. 90mm ,菌丝量繁茂 ,因此为桦褐 孔菌菌丝丝生长最适 p H 值范围 。
C - 21 oxygenated lanosterol derivatives and ot her lipids in Inonotus
obliquus ,in - vitro Applied Microbiology and Biotechnology , 1994 , 42 (2 - 3) : 385～390 [ 5 ] 李英秀. 桦褐孔菌提取物对胃癌 ,M GX ———830 细胞株具有抗增 殖作用和诱导调亡作用. 菌物研究 , 2003 (1) 17～23 [ 6 ] 牛长满 ,张福元. 杏鲍菇菌丝营养特性的研究. 食用菌 ,2004 (3) 7 ～8 [ 7 ] 黄红英. 沼生花褶伞菌丝体纯培养条件研究. 中国食用菌 ,2004 (1) 11～12 [ 8 ] 闫培生. 大球盖菇菌丝生长的营养需求及环境条件. 食用菌学 报 ,2001 (1) 5～9 [ 9 ] 魏铁铮. 不同培养基对松口蘑菌丝生长的影响. 食用菌学报 , 2000 (3) 48～51
24 - triene - a new ,minor compound from Inonotus obliquus Planta Medica ,1986 , (6) :495～496 [ 4 ] Kahlos K , Tikka V H. Anti fungal activity of cysteine , its effect on
菌丝日长速
ⅡⅢⅣ
6. 75 5. 20 6. 00 0. 08 0. 07
9. 00 7. 40 6. 30 0. 12 0. 10
7. 50 7. 40 6. 70 0. 13 0. 12
Ⅴ
9. 25 6. 80 7. 00 0. 10 0. 12
平均 日长速
7. 80 6. 60 6. 00 0. 11 0. 10
5 2. 00 2. 30 2. 25 2. 50 2. 00 2. 21 b B
8 1. 84 1. 87 1. 93 2. 00 1. 90 1. 90 bc BC
4 1. 25 1. 67 1. 80 1. 91 2. 00 1. 72 cd CD
9 1. 13 1. 18 1. 56 1. 68 1. 68 1. 44 d D
食用菌 EDIBL E FUNGI 2005( 5)
2. 4 不同光照条件对桦褐孔菌菌丝生长的影响 不同光照 条件对菌丝生长的作用明显不同 ,见表 4 。在连续黑暗条件下 桦褐孔菌菌丝生长速度最快 ,为 3. 09mm ,明显高于光暗交替 和连续光照条件下的菌丝生长速度 。
速度明显低于包报纸的 ,可能是由于透气性太差的缘故 。因
此 ,适当的二氧化碳浓度有利于菌丝生长 。 表 5 不同通气条件对桦褐孔菌菌丝生长的影响 (mm/ d)
空气
Ⅰ
报纸包扎 2. 55 塑料膜 2. 18 对 照 2. 12
菌丝日长速 ⅡⅢⅣ
2. 65 2. 75 2. 85 2. 35 2. 45 2. 63 2. 33 2. 42 2. 55
桦褐孔菌 Inonot us obliquus ( Fr. ) Pilat 为多孔菌科褐卧孔 菌属药用真菌 ,主要分布于俄罗斯北部 、欧洲及北美州 、中国 黑龙江 、吉林长白山 、日本北海道等北纬 40°～50°地区 。其菌 核呈现瘤状 ,直径 25～40cm ,深色表面深裂 ,很硬 ,干时脆[1 ] 。 桦褐孔菌菌核是俄罗斯传统的民间治疗癌病的药用菌 ,主要 含有桦褐孔菌醇 ( Inooidiol) 56. 5mg/ g ,抗癌特效成分 betulinic 酸 ,氧化三萜类化合物 (Oxygenatedtriterpenes) β, —D —多糖中 的 BRM 物质之一的葡聚糖 、SOD (超氧化物歧化酶) 比灵芝和 姬松茸高数 10 倍达 6 200 单位/ g、栓菌酸 (trametenolic acid) 、 单宁 化 合 物 、类 固 醇 、生 物 碱 , 特 别 是 羊 毛 甾 醇 ( Lanos2 terol) [2 、3 、4 ] 。Grzybek 等人 1983 年报道桦褐孔菌是一种补药 , 血液的清洁剂和疼的缓和剂 ,能改善并预防过敏性皮质 。桦 褐孔菌菌核提取物对胃癌 M GC —803 细胞有抗增殖作用和诱 导凋亡作用 ,有效抑制传染性病毒 ,抗衰老 ,清除体内的自由 基的作用[5 ] 。本文就不同营养及环境条件对桦褐孔菌菌丝生 长的影响进行了研究 ,以便为桦褐孔菌的人工培养提供参考 。 现将结果报道如下 。
25 - triol - 8 - ene from sclerotium Journal of Wood Science , 2001 , 47 (4) :313～316 [ 3 ] Kahlos K , Hiltunen R. 3 - beta ,22 - dihydroxylanosta - 7 ,9 (11) ,
Ⅴ
3. 25 3. 17 2. 33 2. 00 0. 72
平均 日长速
2. 98 2. 83 2. 82 2. 07 0. 71
Duncan 检验
0. 05 0. 01
aA
a AB
a AB
bB
c
C
2. 2 不同氮源对桦褐孔菌菌丝生长的影响 结果如表 2 所 示 。不同氮源对桦褐孔菌菌丝生长速度的影响明显不同 ,其
表 3 不同 p H 值对桦褐孔菌菌丝生长的影响 (mm/ d)
pH
菌丝日长速
平均 Duncan 检验
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 日长速 0. 05 0. 01
7 2. 50 2. 75 2. 75 3. 00 3. 50 2. 90 a A
6 2. 25 2. 50 2. 75 2. 75 3. 00 2. 65 a A
2 结果与分析
2. 1 不同碳源对桦褐孔菌菌丝生长的影响 不同碳源对桦
褐孔菌菌丝生长的影响明显不同 ,结果见表 1 ,蔗糖 、淀粉 、麦
芽糖对菌丝生长速度的作用明显优于葡萄糖和乳糖 ;三者之 间差异不显著 ,但以蔗糖为最好 ,葡萄糖 、乳糖明显低于蔗糖 、
淀粉 、麦芽糖 。
表 1 不同碳源对桦褐孔菌菌丝生长的影响 (mm/ d)
3. 09 2. 55 2. 50
Duncan 检验
0. 05 0. 01 aA bA bA
2. 5 不同通气条件对桦褐孔菌菌丝生长的影响 桦褐孔菌
菌丝在不同的通气条件下生长速度明显不同 ,见表 5 。报纸包
扎处理的菌丝生长速度明显高于塑料薄膜包扎处理和不包扎
处理 ,其日均长速为 2. 73 mm ;塑料薄膜包扎处理的菌丝生长
食用菌 EDIBL E FUNGI 2005( 5)
桦褐孔菌菌丝生长条件的试验研究 3
陈艳秋1 ,2 张立秋2
(1 吉林农业大学菌物所 ,130118 ; 2 延边大学农学院 ,133400)
摘 要 试验不同的碳源 、氮源和不同的 p H、光照等处理对桦 褐孔菌菌丝生长的影响 。结果表明 ,桦褐孔菌菌丝生长的最适 碳源为蔗糖 ,最适氮源为玉米粉 ; 最适 p H 值为 5～7 ; 菌丝在黑 暗条件下生长良好 ,光照对菌丝生长不利 ;适宜的 CO2 浓度可刺 激菌丝的生长 。 关键词 桦褐孔菌 菌丝 营养 环境条件 文章编号 1000 - 8357 (2005) 05 - 0008 - 02
碳 源
蔗 糖 淀 粉 麦芽糖 葡萄糖 乳 糖
Ⅰ
3. 08 2. 75 2. 42 1. 92 0. 69
菌丝日长速
ⅡⅢⅣ
2. 25 3. 00 3. 50 2. 25 0. 65
2. 67 2. 25 2. 25 1. 92 0. 69
3. 67 3. 00 3. 58 2. 25 0. 81
Ⅴ
2. 85 2. 65 2. 57
平均 日长速
2. 73 2. 45 2. 39
Duncan 检验
0. 05 0. 01 aA bA bA
注 :菌丝培养温度均为 25 ℃。
3 结 论
3. 1 试验结果表明 ,桦褐孔菌菌丝生长的最适碳源为蔗糖 , 其次是淀粉和麦芽糖 。 3. 2 桦褐孔菌菌丝生长的最适氮源为玉米粉 ,黄豆粉和麸皮 次之 。 3. 3 桦褐孔菌菌丝生长的最适 p H 5～6 ;完全黑暗条件下有 利于菌丝生长 ;适当的二氧化碳浓度可促进桦褐孔菌菌丝的 生长 。
3 1. 00 1. 25 1. 37 1. 45 1. 20 1. 25 e
E
10 1. 06 1. 05 1. 31 1. 30 1. 17 1. 17 e
E
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3 吉林省教育厅资助项目 2004 - 2005
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3 、4 、5 、6 、7 、8 、9 、10 不同 p H 值处理 ,采用培养皿平板培养法 , 每个处理设置 5 个重复 。 1. 2. 4 不同的光照条件对桦褐孔菌菌丝生长的影响 以配 方 ①为标准 ,分别设置连续光照 、12h/ 12h 光暗交替 、连续黑暗 3 个不同光照处理[6 ] ,采用培养皿平板培养法 ,每个处理设置 5 个重复 。 1. 2. 5 不同的通气条件对桦褐孔菌菌丝生长的影响 以配 方 ①为标准 ,分别设置不包扎对照 (正常的二氧化碳浓度) 、单 层报纸包扎 (中等二氧化碳浓度) 、单层塑料薄膜包扎 (高二氧 化碳浓度) 3 个不同处理 ,每个处理设置 5 个重复 。