掌握卵磷脂的组成鉴定
卵磷脂的提取实验报告
一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器,如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂,由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能,如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂,通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤,得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂:无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取(1)称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄,加入30mL温热的95%乙醇,边加边搅拌均匀。
(2)将混合液冷却至室温,用漏斗过滤,收集滤液。
(3)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化(1)将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚,溶解后过滤。
(2)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定(1)三甲胺的检验:取少量卵磷脂,加入2~5mL氢氧化钠溶液,水浴加热15min,观察红色石蕊试纸是否变蓝,并嗅其气味。
(2)不饱和性检验:取少量卵磷脂,加入3%溴的四氯化碳溶液,振摇观察是否褪色。
(3)磷酸的检验:取少量卵磷脂,加入5~10滴95%乙醇溶液和5~10滴钼酸铵试剂,水浴加热5~10min,观察是否产生蓝色沉淀。
(4)甘油的检验:取少量卵磷脂,加入0.2g硫酸氢钾,小火加热,观察是否有水蒸气放出,嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验,成功从蛋黄中提取出卵磷脂,得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀,得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验,验证了提取的卵磷脂纯度较高。
实验三卵磷脂的提取和鉴定
CO2-CH2
- CO2-CH O
+
CH2O-P-O-CH2CH2-N(CH3)3
O
Hale Waihona Puke H-OH磷脂分子中同时具有疏水基和亲水基。正是由于 这种特点,使得磷脂类化合物在细胞中起着重要 的生理作用。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、 胆碱和磷酸盐,可分别进行化学鉴定。胆碱在 碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气 味的三甲胺;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作 用,生成黄色的磷钼酸沉淀。通过对分解产物 的检验可以对提取的卵磷脂粗品进行鉴定。
将上述加热过的溶液过滤。滤液性状:
2.磷酸的检验 取干净试管一支,加入10滴上述滤液,加入10滴 95%乙醇,摇匀,再加入10滴钼酸铵试剂,观察现 象;最后将试管放入热水浴中加热5~10min,观察 有何变化。
实验三 卵磷脂的提取和鉴定
实验目的 了解磷脂类物质的结构和性质 学习卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
实验原理
磷脂是生物体组织细胞的重要成分,在脑、 神经组织、肾上腺和红细胞中含量较高,在 蛋黄中含量特别丰富(10%左右)。卵磷脂能溶 于乙醇而脑磷脂、蛋白质及糖类等不溶,利 用此性质可将卵磷脂和其它成分分离。卵磷 脂溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将 其与醇溶性的中性脂肪分离开,达到纯化卵 磷脂的目的。
卵磷脂的化学结构
R1 常为饱和脂肪 酸如C16,C18
R2 常为不饱和脂 肪酸如花生四烯
酸
1 R1-COO-CH2
2* R2-COO-C—H
3
O
CH2 —O—P—O—R
OH
+
-
R= —CH2CH2-N(CH3)3 OH
卵磷脂
卵磷脂彻底水解的产物是什么?
【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定一、实验目的1.了解卵磷脂的结构与性质;2.熟练掌握蛋黄中卵磷脂的提取和鉴定方法;3.通过提取和鉴定,初步了解卵磷脂的含量。
二、实验原理1.卵磷脂介绍卵磷脂是一类含有疏水性脂肪酸、酯等亲脂性成分和疏水性羟基等亲水性成分的复合脂类,具有良好的亲水性和亲油性能。
卵磷脂是细胞膜的组成成分之一,并参与了许多生命过程的调节和控制。
由于分子结构中含有类似细胞膜的磷酸基和羟基,因此卵磷脂可以与水和油相溶液中间的界面上,形成磷双层结构和微乳液,从而可以作为乳化剂、增稠剂、抗氧化剂等在食品、化妆品、医药等领域应用。
2.实验步骤将去壳的新鲜鸡蛋取出蛋黄,用盐水洗净表面的蛋白质,然后压成泥,称取25g,加入160 ml乙醇和70 ml氯仿,振荡提取24h,滤去蛋黄泥,得到提取液。
用氮气吹干提取液,再用5 ml碘化铵溶液的Ninhydrin试剂涂抹于硅胶薄层板上,加热显色,可以看到卵磷脂的蓝色斑点。
通过比对标准卵磷脂反应斑点和实验过程得到的反应斑点,可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量。
三、实验操作3.1 实验仪器和药品仪器:薄层色谱仪、干燥箱、氮气吹口等。
药品:鸡蛋、碘化铵溶液、Ninhydrin试剂。
三、实验注意事项1.实验过程中要避免阳光直射和空气流通;2.对于采用氮气吹干的提取液,需要注意气压和吹干时间,以免造成温度过高或时间过长的现象;3.在硅胶薄层板上涂斑注意均匀和用量的控制,避免溢出或浓度过高导致显色结果出现异常;4.硅胶薄层板在干燥箱中加热时要控制温度和时间,尽量保证试验中硅胶薄层板上出现的斑点的颜色鲜艳而稳定;5.硅胶薄层板上的斑点大小和颜色的变化需要通过标准试验和实验操作的对比来确定实验结果。
四、实验结果分析通过本实验,我们可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量,并通过对标准试剂和实验结果的对比,也可以得到质量较好的卵磷脂含量。
通过初步检测,我们可以确定卵磷脂含量的多少,并初步判断蛋黄的质量。
卵磷脂实验报告答案
一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法。
2. 学会使用光谱分析法鉴定卵磷脂的纯度。
3. 了解卵磷脂的生物学功能及其在食品和医药领域的应用。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,属于磷脂类,由磷酸、脂肪酸、甘油和胆碱等成分组成。
卵磷脂具有降低血液中胆固醇、改善脑功能、增强免疫力等生物学功能。
本实验采用乙醇提取法从蛋黄中提取卵磷脂,并通过光谱分析法鉴定其纯度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:蛋黄、乙醇、正己烷、蒸馏水、硫酸、碘化钾、淀粉、硅胶、层析板、紫外灯、旋转蒸发仪、分光光度计等。
2. 实验试剂:无水乙醇、正己烷、碘化钾、淀粉、硅胶、硫酸等。
四、实验步骤1. 卵磷脂提取(1)取一定量的蛋黄,加入适量的无水乙醇,充分搅拌,使蛋黄中的卵磷脂溶解。
(2)将溶液转移至分液漏斗中,加入适量的正己烷,振荡,静置分层。
(3)取下层正己烷层,通过旋转蒸发仪去除溶剂,得到卵磷脂粗品。
2. 卵磷脂鉴定(1)取少量卵磷脂粗品,加入适量的硫酸,充分溶解。
(2)使用分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度值。
(3)以硫酸溶液为空白对照,计算卵磷脂的纯度。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂提取实验中,通过乙醇提取法成功从蛋黄中提取了卵磷脂。
提取过程中,蛋黄中的中性脂肪和卵磷脂在乙醇中溶解,通过正己烷的萃取,实现了卵磷脂的分离。
2. 卵磷脂鉴定实验结果显示,卵磷脂在特定波长下的吸光度值与纯度呈正相关。
通过计算,得到卵磷脂的纯度为95.6%,说明实验提取的卵磷脂纯度较高。
六、实验讨论1. 实验中,卵磷脂的提取效果与乙醇的浓度、蛋黄的量、搅拌时间等因素有关。
本实验中,采用适量的乙醇、适量的蛋黄和充分的搅拌,提高了卵磷脂的提取效率。
2. 卵磷脂的鉴定方法采用光谱分析法,具有快速、简便、准确等优点。
通过测定特定波长下的吸光度值,可以较为准确地判断卵磷脂的纯度。
七、实验结论1. 本实验成功从蛋黄中提取了卵磷脂,并采用光谱分析法对其纯度进行了鉴定。
卵磷脂的提取和鉴定实验报告
卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子,广泛存在于动植物细胞膜中,对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。
本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂,了解其提取方法和鉴定技术,为进一步研究和应用提供参考。
1. 提取卵磷脂的方法。
首先,我们需要准备卵黄,将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂,使卵磷脂从卵黄中溶解出来。
然后,通过离心将上清液和沉淀分离,将上清液转移到锥形瓶中,加入等体积的0.9%氯化钠溶液,摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。
最后,将沉淀离心,得到卵磷脂。
2. 卵磷脂的鉴定。
为了鉴定卵磷脂的纯度和结构,我们可以利用薄层色谱和质谱技术。
首先,将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中,然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品,放入薄层色谱仪中进行分离。
通过比色试剂或者紫外灯照射,我们可以观察到卵磷脂的斑点,并计算Rf值来确定其纯度。
另外,质谱技术也是一种常用的鉴定方法,通过质谱仪的分析,我们可以得到卵磷脂分子的质谱图,进而确定其分子结构和质量。
3. 实验结果与讨论。
经过提取和鉴定,我们成功得到了卵磷脂,并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。
通过比色试剂和紫外灯照射,我们观察到了卵磷脂的斑点,并计算出了其Rf值,证明了其纯度。
同时,质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰,进一步确认了其结构和质量。
在实验过程中,我们也发现了一些问题,比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰,导致提取得到的卵磷脂不够纯净。
因此,在今后的实验中,我们需要进一步优化提取方法,提高卵磷脂的纯度。
4. 结论。
通过本次实验,我们成功提取和鉴定了卵磷脂,了解了其提取方法和鉴定技术。
同时,我们也发现了一些问题,为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。
希望通过我们的努力,能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。
实验3卵磷脂的提取和鉴定
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从组织或细胞中提取卵磷脂。
在提取过程中,卵磷脂会从组织 或细胞中释放出来,并溶解在有
机溶剂中。
通过离心和过滤等操作,去除杂 质和其他磷脂成分,得到纯度较
高的卵磷脂。
卵磷脂的鉴定方法
薄层色谱法
将提取的卵磷脂点样在薄层板上,用 适宜的展开剂展开,然后通过显色反 应(如喷洒硫酸氢钠、高锰酸钾等) 进行鉴定。
了解卵磷脂的生理功能和作用
生理功能
卵磷脂是生物膜的主要成分,具有保 护细胞膜、促进脂质代谢、降低血脂 等作用,对维持人体正常生理功能至 关重要。
作用
卵磷脂在人体内具有重要的生理作用 ,如促进大脑发育、提高记忆力和智 力水平、抗疲劳等,同时还有抗氧化 、抗衰老的作用。
探究不同提取条件对卵磷脂提取效果的影响
步骤6
通过显微镜观察卵磷脂的形态和结构,并使用色谱柱进 行进一步分析。
04 实验结果与分析
卵磷脂提取效果的测定
01
02
03
卵磷脂含量
通过测定提取液中卵磷脂 的含量,可以评估卵磷脂 的提取效果。
提取率
提取率是卵磷脂实际提取 量与理论提取量的比值, 反映了提取效率。
纯度
通过色谱分析等方法测定 卵磷脂中的杂质含量,以 评估卵磷脂的纯度。
结果分析与讨论
提取效率分析
实验结果显示,使用离心分离技术能 够有效地去除杂质,提高卵磷脂的纯 度。但提取效率较低,可能是由于有 机溶剂用量较大或提取时间较长所致。
鉴定方法比较
红外光谱和质谱分析均能准确鉴定卵 磷脂的主要成分,但质谱分析具有更 高的灵敏度和特异性,能够更准确地 鉴定卵磷脂中的微量成分。
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
实验过程中,我们遇到了许多困难和挑战,如提取效率不高、鉴定结果不稳定等。通过不断尝试和改 进,我们逐渐找到了解决问题的方法,提高了实验技能和解决问题的能力。
实验不足与改进建议
实验不足
在实验过程中,我们发现提取卵磷脂的 效率不够高,且鉴定结果有时不够准确 。此外,实验过程中也存在一些操作不 规范的问题。
02
常用的提取溶剂有氯仿-甲醇混合 溶剂、石油醚等,通过反复提取 可提高卵磷脂的提取率。
卵磷脂的鉴定原理
通过红外光谱法、核磁共振法、质谱法等现代分析手段对提取的卵磷脂进行结构 分析,确定其化学组成和分子结构。
通过色谱法(如薄层色谱法、高效液相色谱法)对提取的卵磷脂进行纯度鉴定, 确定其中所含杂质和溶剂残留量。
讨论
根据分析结果,与前人研究进行比较, 提出可能的改进措施和未来研究方向。
结论总结
总结
对整个实验过程和结果进行总结,概述实验的主要发现和结论。
展望
提出实验的局限性和不足之处,以及对未来研究的建议和展获与体会
实验收获
通过本次实验,我们成功地从蛋黄中提取了卵磷脂,并对其进行了鉴定。实验过程中,我们掌握了卵 磷脂的提取和鉴定方法,加深了对卵磷脂性质和作用的理解。
展望
未来,卵磷脂的研究将继续深入开展,探索 其在生物体内的生理功能和作用机制。同时, 随着人们对健康饮食的关注度不断提高,卵 磷脂在食品、保健品等领域的应用也将得到 更广泛的发展。我们相信,随着研究的不断 深入和应用领域的拓展,卵磷脂将会为人类 健康事业做出更大的贡献。
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学习卵磷脂的鉴定技术
薄层色谱法
利用薄层色谱法分离和鉴定卵磷脂中 的主要成分,了解其组成和比例。
提取卵磷脂实验报告
一、实验目的1. 理解卵磷脂的提取原理和方法。
2. 掌握实验室提取卵磷脂的实验步骤。
3. 学习鉴定卵磷脂纯度的方法。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜中。
它由甘油、磷酸、脂肪酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有降低胆固醇、增强记忆力、促进神经传导等多种生理功能。
本实验采用乙醇作为溶剂,通过浸提、离心、沉淀等步骤提取卵磷脂,并对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、乙醇、乙醚、硫酸铜、氯化钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器:离心机、冰箱、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。
四、实验步骤1. 取鸡蛋,去壳取蛋黄,用玻璃棒搅拌成糊状。
2. 将糊状蛋黄加入适量乙醇,搅拌均匀。
3. 将混合液倒入烧杯中,用玻璃棒搅拌,使卵磷脂充分溶解。
4. 将烧杯置于冰箱中,低温处理2小时,使卵磷脂沉淀。
5. 取出烧杯,用漏斗和滤纸过滤沉淀物,得到卵磷脂粗提液。
6. 将粗提液倒入离心管中,离心分离,取下层卵磷脂沉淀。
7. 将沉淀物用乙醚洗涤,去除杂质,得到纯净的卵磷脂。
8. 将纯净卵磷脂置于干燥器中,晾干至恒重。
五、实验结果与分析1. 提取结果:通过实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,得到白色蜡状物质。
2. 鉴定结果:a. 硫酸铜试验:取少量卵磷脂,加入硫酸铜溶液,振荡,若出现蓝色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有磷酸基团。
b. 氯化钠试验:取少量卵磷脂,加入氯化钠溶液,振荡,若出现白色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有胆碱。
六、实验讨论1. 本实验采用乙醇作为溶剂,能够有效提取蛋黄中的卵磷脂,提取率较高。
2. 低温处理有助于卵磷脂的沉淀,提高提取纯度。
3. 通过硫酸铜和氯化钠试验,对提取的卵磷脂进行了鉴定,验证了其纯度。
七、实验结论通过本实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,并对其进行了鉴定。
实验结果表明,本实验方法可行,提取的卵磷脂纯度较高,为后续研究卵磷脂的生理功能奠定了基础。
八、实验注意事项1. 实验过程中,注意操作规范,避免交叉污染。
卵磷脂的制备与鉴定ppt课件
证充分的“胆碱”与人体内的“乙酰”合成为“乙酰胆
碱”,“乙酰胆碱”是大脑内的一种信息传导物质,从而 提高脑细胞的活性化程度,提高记忆与智力水平。
• 延缓衰老
•
人随着年龄增长,记忆力会减退,其原因与
乙酰胆碱含量不足有一定关系。脑部的神经传导
物质(乙酰胆碱)减少是引起老年痴呆的主要原
因,乙酰胆碱是神经系统信息传递时必需的化合
• 2、不饱和性检验:取干净试管一支,加入 10滴上述滤液,再加入1~2滴3%溴的四氯 化碳溶液,振摇试管,观察有何现象产生。
• 3、磷酸的检验:取干净试管一支,加入10滴上 述滤液和5~10滴95%乙醇溶液,然后再加入 5~10滴钼酸铵试剂,观察现象;最后将试管放入 热水浴中加热5~10min,观察有何变化。
• (4)在搅拌下慢慢加入15ml丙酮,既有卵 磷脂析出,搅动使其尽量析出。
鉴定方法
• 卵磷脂的鉴定: 1、三甲胺的检验:取干燥 试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~ 5mL氢氧化钠溶液,放入水浴中加热15min, 在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有 无变化,并嗅其气味。将加热过的溶液过 滤,滤液供下面检验。
卵磷脂的制备与鉴定
• 卵磷脂属于一种混合物,是存在于动植物 组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性 物质,其构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪 酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂。 卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的 “第三营养素”。卵磷脂有时还是纯磷脂 酰胆碱的同义词。
理化性质
• 卵磷脂按照其纯度的高低,一般分为 PC50、 PC 60 、PC 70、PC80、PC 90、PC95等产品形 式。最高可以提纯到98%,因为其纯度越高,氧 化性能越强,故提纯到98%的卵磷脂需要做氢化
实验九卵磷脂的提取和鉴定
实验九卵磷脂的提取和鉴定实验目的:熟悉卵磷脂的提取方法和常见的鉴定方法。
实验原理:卵磷脂是存在于组织和细胞膜中的一类复杂的生物分子,其主要成分包括磷酸甘油酯、磷酸肌酸、磷酸胆碱等物质。
卵磷脂在生物体内扮演着极为重要的生理功能,在维持生物体的正常生理代谢过程中发挥着重要作用。
卵磷脂的提取方法:材料:鸡蛋黄、乙醇、正己烷、醋酸乙酯。
1.取足够多的鸡蛋黄,用纯净水洗净后晾干备用。
2.将洗净干燥的鸡蛋黄取出,剥去蛋壳并取出蛋黄,用刀将其压成泥状。
3.将压成泥状的鸡蛋黄放入烧杯中,加入适量的乙醇,不断搅拌,使其混合均匀。
4.待混合好的鸡蛋黄和乙醇彻底混合均匀后,将其倒入滤布中,将滤液与滤涤液分离开来。
5.将滤液中酒精分离鸡蛋黄接着加入等量的正己烷,用250ml分液漏斗进行振荡后,取出下层酒精分离液。
6.将酒精中的卵磷脂析出,将析出卵磷脂加入等量的醋酸乙酯中溶解,即可得到卵磷脂。
卵磷脂的鉴定:1.磷钼酸法:将标本加入一定量的磷钼酸试剂,加热至磷钼酸中磷酸结晶完全溶解,此时磷酸含量的多少即为卵磷脂的质量。
其原理是卵磷脂中的磷酸和磷钼酸反应,生成黄色的磷钼酸沉淀。
2.碱水解法:将标本与氢氧化钠混合,使卵磷脂水解产生酰基胆碱。
然后加入硫酸和琼脂,沉淀下来的物质即为卵磷脂。
3.利用质谱法进行鉴定:该方法是根据卵磷脂分子中所含的质子数、化学成分以及分子量等特征,通过对样品中分子的荷电性和分子量的测定,进行卵磷脂的鉴定。
实验步骤:1.取少量卵磷脂样品溶于水中。
2.将卵磷脂样品反复洗涤至清洁,然后加入磷钼酸试剂。
3.待磷钼酸在样品中完全溶解后,使用分光光度计测定溶液中吸收光谱,从而得出样品中卵磷脂的质量。
实验结论:通过卵磷脂的提取方法和鉴定方法,我们可以成功地得到卵磷脂,并确定了样品中卵磷脂的数量和质量。
这为我们进一步研究卵磷脂的生理功能以及用途奠定了基础。
卵磷脂的提取鉴定
卵磷脂的提取及鉴定作者:未知来源:郑州轻工业学院时间:2006-9-23一、实验目的1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。
2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热,可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
三、仪器和试剂仪器小烧杯、试管。
试剂1. 鸡蛋黄2. 红色石蕊试纸3. 95%乙醇4. 10%氢氧化钠溶液5. 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中,加入5mL 浓氨水,另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中,两者混合静置一天后再用。
6. 丙酮7. 乙醚8. 3%溴的四氯化碳溶液9. 硫酸氢钾四、操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g 蛋黄于小烧杯中,加入温热的95%乙醇30mL,边加边搅拌均匀,冷却后过滤。
如滤液仍然混浊,可重新过滤直至完全透明。
将滤液置于蒸发皿内,水浴锅中蒸干,所得干物即为卵磷脂。
(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管,加入少许卵磷脂,再加入5mL 乙醚,用玻棒搅动使卵磷脂溶解,逐滴加入丙酮3~5mL,观察实验现象。
(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~5mL 氢氧化钠溶液,放入水浴中加热15min,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤,滤液供下面检验。
实训 卵磷脂的提取及其组成鉴定
实训卵磷脂的提取及其组成鉴定一、实验目的1、加深了解磷脂类物质的结构和性质2、学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法2、掌握卵磷脂的组成鉴定的原理和方法二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
卵磷脂分离提取的流程如下:三、仪器和试剂仪器研钵、布氏漏斗、蒸发皿、水浴锅(沸水)、玻璃漏斗、玻棒、小烧杯、试管、纱布、酒精灯。
试剂1、熟鸡蛋黄2、红色石蕊试纸3、95%乙醇4、20%氢氧化钠溶液5、钼酸铵试剂:将6g钼酸铵溶于15mL蒸馏水中,加入5mL浓氨水,另外将24mL浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中,两者混合静置一天后使用。
6、丙酮7、氯仿8、10%溴的四氯化碳溶液9、硝酸10、1%硫酸铜溶液11、10%醋酸铅溶液四、操作步骤(一)卵磷脂的提取1、取熟鸡蛋蛋黄一只,于研钵中研细,先加入10ml 95%乙醇研磨,再加入20ml 95%乙醇充分研磨,减压过滤(应盖满漏斗),滤干后,如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入蒸发皿内。
2、将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干,得到黄色油状物。
3、冷却后,加入5ml氯仿,搅拌使油状物完全溶解。
4、在搅拌下慢慢加入15ml丙酮,即有卵磷脂析出,搅动使其尽量析出,将氯仿丙酮溶液倒掉,取沉淀。
(二)卵磷脂的组成鉴定1、水解及三甲胺的检验取一支干燥大试管,加入提取的卵磷脂,并加入5ml 20%氢氧化钠溶液,放入沸水浴中加热10分钟,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味。
卵磷脂的制备及鉴定
卵磷脂的制备及鉴定卵磷脂的制备及鉴定一、实验目的要求1、熟悉鸡蛋黄制备卵磷脂的原理。
2、掌握卵磷脂的制备与减压蒸馏的基本操作方法。
二、实验重点和难点从蛋黄中制备卵磷脂的操作方法。
三、实验原理将卵黄中加乙醇,卵磷脂溶于乙醇溶液中,分离提取,蛋白质等某些杂质从沉淀物中除去。
但由于乙醇抽提时,其他脂质也一起被抽提,如甘油三酯、甾醇等。
利用卵磷脂不溶于丙酮的性质,用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂,能使卵磷脂与其他脂质和胆固醇分离开来。
无机盐和卵磷脂可生成络合物沉淀,因此,可利用金属盐沉淀剂将卵磷脂从溶液中分离出来,由此除去蛋白质、脂肪等杂质,再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质。
四、实验仪器、试剂与材料1、仪器:离心机、旋转薄膜蒸发仪、布氏漏斗、抽滤瓶、真空干燥箱、层析缸、紫外分光光度计。
溶液:取氯化锌10g,加水溶解并稀释至100ml,摇匀,2、试液:l0%的ZnCl2即得。
3、试剂与材料:氯化锌、95%乙醇、丙酮、氯仿、碘、甲醇、无水乙醇。
五、操作步骤1、粗提:取鸡蛋卵黄适量,用2倍于卵黄体积的95%乙醇混合搅拌、提取,离心分离(300Or/min,5min),将沉淀物重复提取3次,回收上清液。
然后减压蒸馏(45℃)至近干,用少量石油醚洗下粘壁的黄色油状物。
加入丙酮溶解,抽滤,分离出沉淀,真空干燥(40℃,3Omin),得到淡黄色的粗卵磷脂,称重。
2、精制:取一定量的卵磷脂粗品,加无水乙醇溶解,得到约10%的乙醇粗提溶液,室温搅拌0.5h。
分离沉淀物,液。
加入相当于卵磷脂质量的l0%的ZnCl2加适量冰丙酮(4℃)洗涤,搅拌lh,再用丙酮反复研洗,直到丙酮洗液为近无色止,得到白色蜡状的精制卵磷脂;干燥;称重。
3、鉴定:(1)薄层色谱分析:取卵磷脂样品与对照品分别制成2%氯仿溶液,用GF254硅胶板以氯仿:甲醇:水(65:25:4)为展开剂,展开,取出,干燥,碘蒸气显色。
(2)紫外吸收光谱测定:将一定量卵磷脂制成0.l%无水乙醇溶液,照紫外分光光法在190~40Onm处测定,卵磷脂的紫外最大吸波长在215nm。
卵磷脂的提取与鉴定
二、实验原理 卵磷脂是甘油磷脂的一种,由磷酸、脂肪酸、甘油和胆 碱组成。卵磷脂广泛存在于动植物中,在植物种子和动物的 脑、神经组织、肝脏、肾上腺以及红细胞中含量最多;其中 蛋黄中含量最丰富,高达8~10%,因而得名。 卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等溶剂,因而可以利用这些溶 剂进行提取。本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。 通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂,两者浓缩后通过离 心进行分离,下层为卵磷脂。新提取的卵磷脂为白色蜡准状 物,遇空气可氧化成为黄褐色,这是由于其中不饱和脂肪酸 被氧化所致。卵磷脂的胆碱基在碱性条件下可以分解为三甲 胺,三甲胺有特殊的鱼腥味,可以此鉴别之。 卵磷脂在食品工业中广泛应用作乳化剂,抗氧化剂,营 养添加剂。
三、实验材料、试剂和仪器 材料:鸡蛋、花生油。 试剂:乙醚、10%NaOH。 仪器:磁力搅拌器,离心机。
四、实验步骤 1、卵磷脂的提取 取15g生鸡蛋黄于250mL三角锥瓶中,加入40mL乙醚, 室温下磁力搅拌提取15min。然后静置30min,上层液用带 棉花塞的漏斗过滤,往残渣中再加入15mL乙醚,搅拌提 取5min。第二次提取液通过过滤后,与第一次提取液合并, 于60℃热水浴中蒸去乙醚,将残留物质倒入烧杯中,再于 真空干燥器中进行减压干燥30min,以除尽乙醚,约可得 5g粗提取物。粗提取物进行离心10min后,下层为卵磷脂, 约得2.5-2.8g。卵磷脂可以通过冷冻干燥得到无水的产物。 2、卵磷脂的鉴定 取以上提取物约0.1g,于试管内加入10%NaOH溶液 2mL,水浴加热数分钟,嗅之是否有鱼腥味,以确定是否 卵磷脂。
Байду номын сангаас
五.结果记录与分析:
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
氯仿
丙酮
油状物
氯仿溶液
卵磷脂
脂肪
Байду номын сангаас
脂肪 卵磷脂
【实验步骤】
1.卵磷脂的提取
〔1〕取1个熟的鸡蛋黄,置于研钵中研细, 加 入15mL 95%乙醇溶液,研磨,搅拌 均匀。减压过滤,收集滤液。将漏斗的 残渣移入研钵内,加15mL 95%乙醇溶液, 研磨,过滤(滤液应完全透明),将两次 滤液合并于蒸发皿内。
〔2〕脂肪酸的检查
取棉花上沉淀少许,加5mL水,搅 拌,有无泡沫生成?过滤,得滤液,以 浓硝酸酸化后参加数滴10%醋酸铅溶液, 观察有何现象?
〔3〕甘油的检查
取小试管一支,参加1滴5%硫酸铜溶液, 2滴10%氢氧化钠溶液,振摇,有氢氧化铜沉 淀生成。参加水解液,沉淀溶解后,得深蓝色 甘油铜溶液。
〔4〕胆碱的检查
取1mL滤液,滴加浓硫酸中和(以蓝色石蕊 试纸检查),加克劳特试剂1滴,有砖红色沉淀 生成。
〔5〕磷酸的检查
取一支干净试管,参加10滴滤液和5 滴95%乙醇溶液,用硝酸酸化,加1mL 钼酸铵试剂,观察有何现象产生?最后 直接用火加热5min~10min,观察有无 黄色磷钼酸铵沉淀生成?
实验五 蛋黄中卵磷脂的提 取及鉴定
【实验目的】
1.掌握从动物中提取有效成分的一般原 理和方法。
2.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。 3.了解卵磷脂水解后的产物,稳固对卵
磷脂组成构造的认识。
【实验原理】
残渣(蛋白质、脑磷
脂) 乙醇提取
蛋黄 过滤
蛋白质 脂肪 卵磷脂 脑磷脂
蒸去乙醇
乙醇溶液
油状物
脂肪
卵磷脂
本卷须知
乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好
卵磷脂的提取和鉴定实验报告
卵磷脂的提取和鉴定实验报告实验报告卵磷脂的提取和鉴定实验目的:了解卵磷脂的提取方法,并通过实验鉴定卵磷脂的纯度。
实验原理:卵磷脂是一种磷脂类物质,具有重要的生物学功能。
卵磷脂的提取可以采用乙醇-醋酸法。
具体步骤如下:1. 取鸡蛋黄1个,加入乙醇5ml,充分混匀。
2. 加入醋酸10ml,再次充分混匀。
3. 将混合液过滤,得到固体物质。
4. 将固体物质溶解在氯仿中,得到卵磷脂样品。
通过卵磷脂的紫外吸收光谱,可以鉴定卵磷脂的纯度。
卵磷脂的吸收峰位于短波长紫外区,主要吸收波长为206nm和223nm。
卵磷脂的纯度越高,吸收峰越尖锐,吸收强度越大。
实验仪器和试剂:乙醇、醋酸、氯仿、紫外分光光度计。
实验步骤:1. 取鸡蛋黄1个,放置室温下1小时。
2. 用清水清洗后风干。
3. 取鸡蛋黄5g,磨碎成细末。
4. 将鸡蛋黄末加入乙醇5ml,充分混匀。
5. 加入醋酸10ml,再次充分混匀。
6. 将混合液倒入漏斗中,过滤掉固体物质。
7. 将固体物质溶解在氯仿中,摇匀,得到卵磷脂样品。
8. 在紫外分光光度计上测试卵磷脂的吸光度。
实验结果:卵磷脂样品的吸收峰位于短波长紫外区,主要吸收波长为206nm和223nm。
经过检测,本次实验制备的卵磷脂纯度较高,吸收峰尖锐,吸收强度较大。
实验结论:本次实验熟悉了卵磷脂的提取方法,并通过紫外吸收光谱鉴定卵磷脂的纯度。
实验结果表明,利用乙醇-醋酸法可以有效地提取卵磷脂,并制备出具有较高纯度的卵磷脂样品。
实验三卵磷脂的提取和鉴定
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与展望
01 实验目的
掌握卵磷脂的提取和鉴定方法
卵磷脂的提取
利用有机溶剂从动植物组织中提 取卵磷脂,可以采用低温、高压 、超声波等辅助手段提高提取效 率。
卵磷脂的鉴定
通过观察卵磷脂的外观、溶解性 、颜色反应等特征,结合薄层色 谱法、气相色谱法等方法对卵磷 脂进行定性鉴定。
了解卵磷脂的生理功能和用途
生理功能
卵磷脂是细胞膜的重要成分,具有保 护细胞、维持细胞正常功能的作用; 同时,卵磷脂还具有降低血脂、预防 心血管疾病等功效。
用途
卵磷脂在食品、药品、化妆品等领域 广泛应用,可作为添加剂、药物成分 或保湿剂等。
探究不同提取条件对卵磷脂提取率的影响
提取条件
研究不同有机溶剂、温度、时间、料 液比等因素对卵磷脂提取率的影响, 通过单因素和正交试验等方法优化提 取工艺。
结果分析
通过对比不同提取条件下卵磷脂的提 取率,分析提取条件对卵磷脂提取效 果的影响,为实际生产提供理论依据。
02 实验原理
卵磷脂的化学组成和性质
卵磷脂是磷脂类的一种,由甘 油、脂肪酸、磷酸和胆碱组成。
卵磷脂具有亲水性和亲油性, 是细胞膜的重要成分,对维持 细胞结构和功能具有重要作用。
卵磷脂在自然界中广泛存在于 动植物组织中,尤其是脑、肝、 卵黄等组织中含量较高。
实验结果的分析与讨论
总结词
实际应用取方法和鉴定手段具有实 际应用价值,能够为卵磷脂的生产和开发提 供技术支持。同时,本实验结果可为相关领 域的研究提供参考和借鉴。
05 结论与展望
实验结论
卵磷脂提取成功
实验九卵磷脂的提取和鉴定
5、点样:样点距玻璃板一端下缘1cm ,相互间隔 1~1.2 cm ;每位点重复点五次,每次用冷风吹干 后再点,每次点样直径不超过2mm 。 6、展层:在层析缸中加入展层剂0.5cm深,加盖平 衡30分钟,将点样端浸入,密闭展层10-30min。后 取出薄层板,标出展层剂前沿位置,用电吹风热风 将薄层板吹干。 7、显色:用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶 液,热风吹干至色斑显现。
表1 抽提物、温度、时间和料液比4因素3水平
水平
1 2 3
[乙醇]∶ [乙醚] 5∶1 4∶1 3∶1
影响因素
温度 时间(min)
4℃
10
25℃
20
60℃
30
料液比 1∶4 1∶5 1∶6
表3 L9 表
按一般方法,如对4个因素3个水平的各种搭配都要考虑,共 需做3*3*3*3=81次试验,而用正交表只需做9次试验,即选用 L9表(L是正交表的代号,下标数字表示试验次数)。
胆碱 HO
二、实验原理
(一)卵磷脂的提取和纯化
▪ 磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿,部分溶于乙醇,极难溶于丙酮; 卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂,但不溶于丙酮; 丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。
▪ 因此,本实验用乙醇、乙醚为溶剂,丙酮为沉淀剂,干燥后 获得卵磷脂。新提取得到的卵磷脂为白色蜡状物,与空气接 触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈黄褐色。卵磷脂中的胆碱, 在碱性溶液中可分解为三甲胺,而具有特异的鱼腥味,可用 于鉴定。
正交法实验设计
物质提取、纯化受到多种因素的影响,如抽提物 的种类及其配比、抽提条件(温度、时间等)都能影 响提取的结果。这种多因素的试验可以通过正交法, 即用一特制的表格—正交表来安排试验,计算和分析 试验结果。这样就能通过少量试验取得较好的效果。
卵磷脂的提取、鉴定和应用 实验指导书
卵磷脂的提取、鉴定和应用实验指导书一、实验目的通过实验,进一步加深对卵磷脂特性和用途等相关知识的理解,掌握卵磷脂的提取和鉴定方法。
二、实验原理卵磷脂是甘油磷脂中的一种,由磷酸、脂肪酸、甘油及胆碱组成:其中,R1为硬脂酸或软脂酸;R2为油酸、亚油酸、亚麻酸或花生四烯酸等不饱和脂肪酸。
卵磷脂广泛分布于动植物中,在植物种籽和动物的脑、神经组织、肝、肾上腺以及红细胞中含量较多;蛋黄中含量最丰富,高达8~10%,因而得名。
卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等,因而可以利用这些溶剂进行提取。
本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。
通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂,两者浓缩后通过离心进行分离,下层为卵磷脂。
新提取的卵磷脂为白色蜡状物,遇空气即氧化变成黄褐色,这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。
卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺,三甲胺有特异的鱼腥臭味,可以此鉴别之。
卵磷脂在食品工业中广泛用作乳化剂,抗氧化剂和营养添加剂。
三、实验材料、试剂和仪器鸡蛋;花生油;乙醚;10%NaOH;磁力搅拌器;离心机等。
四、实验内容1、卵磷脂的提取取15g生鸡蛋黄(通常含水50%,脂类32%,蛋白质16%,灰分2%),于150mL三角锥瓶中加入40mL乙醚,放入磁力搅拌器,室温下搅拌提取15分钟,然后静置30分钟,上层清液于带棉花塞到50mL烧杯中过滤,往残渣中再加入15mL乙醚,搅拌提取5分钟。
第二次提取液过滤后,与第一次提取液合并,于60o C热水浴蒸去乙醚,将残留物倒入烧杯中,约可得5g粗提取物。
粗提取物进行离心(4000转/分)10分钟,下层为卵磷脂,约得2.5~2.8g。
卵磷脂可以通过冷冻干燥得无水的产物。
2、卵磷脂的鉴定取以上提取物约0.1g,分为两份于试管内加入10% 氢氧化钠溶液2mL,水浴加热数分钟,嗅之是否有鱼腥味,以确定是否为卵磷脂。
3、乳化作用在两支试管中各加入3~5mL水,一支加卵磷脂少许,溶解后滴加5滴花生油;另一支也滴入5滴花生油,加塞极力振摇试管,使花生油分散。
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卵磷脂的提取及其组成鉴定
一、实验目的
1. 掌握卵磷脂的提取方法。 2. 掌握卵磷脂的组成鉴定。 3. 掌握蒸馏、抽滤等基本操作。
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二、实验原理
• 卵磷脂具有乳化分解油脂的作用,可增进血液的循环,清除过氧化物,使血 液中的胆固醇及中性脂肪含量降低,可预防和治疗动脉硬化。同时,卵磷脂 还具有改善记忆,健脑作用,在肝脏保护、心脏健康、婴儿神经发育和糖尿 病治疗等方面也具有积极的作用。 卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋黄中卵磷脂的含量较高,约8%。可 根据它溶于乙醇、二氯甲烷而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离得到。 卵磷脂可在碱性溶液中加热水解,水解后的产物为甘油、高级脂肪酸、磷酸 和胆碱,可从水解液中检出这些组分。 卵磷脂的结构、实验步骤
卵磷脂的提取
取熟鸡蛋蛋黄一个,于研钵中研细。将20mL95%乙醇分两次加 入研钵中研磨。减压过滤,布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后,移 入研钵中。再加10mL 95%乙醇研磨,减压过滤,滤干后,合并两次 滤液。如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入圆底烧瓶中。 搭建蒸馏装置,将上述提取液蒸馏除去乙醇,当圆底烧瓶内出现 泡沫时,移去火焰,稍冷后,残余物加入5mL无水乙醇,振摇后继续 蒸馏,当圆底烧瓶内再次出现泡沫时,停止蒸馏,得到黄色油状物。 冷却后,加入5mL二氯甲烷,搅拌使油状物完全溶解。在搅拌下慢慢 加入15mL丙酮,即有卵磷脂析出,搅拌使其析出完全(溶液倒入回 收瓶内)。
四、实验装置
蒸馏装置
卵磷脂组成鉴定
• (1)水解:在上述圆底烧瓶内加入5mL20%NaOH,摇匀后放入沸水浴中加热 10分钟,并用玻璃棒加以搅拌,促使卵磷脂水解。冷却后,在漏斗中用棉花 过滤,滤液供下面鉴定用。 (2)脂肪酸的鉴定:取棉花上沉淀少许,加1滴20%NaOH与5mL蒸馏水,用 玻璃棒搅拌使其溶解。在漏斗中用棉花过滤,得澄清液。以浓HNO3酸化后, 加入10%乙酸铅2滴,观察溶液的变化. (3)甘油的鉴定:取试管一支,加入1mL 1%CuSO4、2滴20%NaOH,振摇, 有Cu(OH)2沉淀生成。加入1mL水解液振摇,观察现象。 (4)胆碱的鉴定:取水解液1mL,滴加浓H2SO4使其酸化(以石蕊试纸检验) ,再加入1滴碘化铋钾溶液,观察现象。 (5)磷酸的鉴定:取试管一支,加10滴水解液,滴加浓H2SO4使其酸化后, 再加5滴5%钼酸铵试剂,20滴氨基萘酚磺酸溶液,振摇后加热,观察颜色的 变化。