掌握卵磷脂的组成鉴定
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卵磷脂的提取及其组成鉴定
一、实验目的
1. 掌握卵磷脂的提取方法。 2. 掌握卵磷脂的组成鉴定。 3. 掌握蒸馏、抽滤等基本操作。
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二、实验原理
• 卵磷脂具有乳化分解油脂的作用,可增进血液的循环,清除过氧化物,使血 液中的胆固醇及中性脂肪含量降低,可预防和治疗动脉硬化。同时,卵磷脂 还具有改善记忆,健脑作用,在肝脏保护、心脏健康、婴儿神经发育和糖尿 病治疗等方面也具有积极的作用。 卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋黄中卵磷脂的含量较高,约8%。可 根据它溶于乙醇、二氯甲烷而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离得到。 卵磷脂可在碱性溶液中加热水解,水解后的产物为甘油、高级脂肪酸、磷酸 和胆碱,可从水解液中检出这些组分。 卵磷脂的结构、实验步骤
卵磷脂的提取
取熟鸡蛋蛋黄一个,于研钵中研细。将20mL95%乙醇分两次加 入研钵中研磨。减压过滤,布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后,移 入研钵中。再加10mL 95%乙醇研磨,减压过滤,滤干后,合并两次 滤液。如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入圆底烧瓶中。 搭建蒸馏装置,将上述提取液蒸馏除去乙醇,当圆底烧瓶内出现 泡沫时,移去火焰,稍冷后,残余物加入5mL无水乙醇,振摇后继续 蒸馏,当圆底烧瓶内再次出现泡沫时,停止蒸馏,得到黄色油状物。 冷却后,加入5mL二氯甲烷,搅拌使油状物完全溶解。在搅拌下慢慢 加入15mL丙酮,即有卵磷脂析出,搅拌使其析出完全(溶液倒入回 收瓶内)。
四、实验装置
蒸馏装置
卵磷脂组成鉴定
• (1)水解:在上述圆底烧瓶内加入5mL20%NaOH,摇匀后放入沸水浴中加热 10分钟,并用玻璃棒加以搅拌,促使卵磷脂水解。冷却后,在漏斗中用棉花 过滤,滤液供下面鉴定用。 (2)脂肪酸的鉴定:取棉花上沉淀少许,加1滴20%NaOH与5mL蒸馏水,用 玻璃棒搅拌使其溶解。在漏斗中用棉花过滤,得澄清液。以浓HNO3酸化后, 加入10%乙酸铅2滴,观察溶液的变化. (3)甘油的鉴定:取试管一支,加入1mL 1%CuSO4、2滴20%NaOH,振摇, 有Cu(OH)2沉淀生成。加入1mL水解液振摇,观察现象。 (4)胆碱的鉴定:取水解液1mL,滴加浓H2SO4使其酸化(以石蕊试纸检验) ,再加入1滴碘化铋钾溶液,观察现象。 (5)磷酸的鉴定:取试管一支,加10滴水解液,滴加浓H2SO4使其酸化后, 再加5滴5%钼酸铵试剂,20滴氨基萘酚磺酸溶液,振摇后加热,观察颜色的 变化。