5-3-三萜皂苷汇总

常用硫酸或含硫酸混合溶液
特点 灵敏度低、专属性差
久置后褪色
仅用于药味少的制剂分析
18
（1）醋酐-硫酸反应
（Liebermann-Burchard反应）
黄 红 紫 红蓝 三萜皂苷类 醋酐 蓝 褪色 绿 紫
19
硫酸
例 甘草浸膏
【鉴别】（1）取本品细粉约1～2mg，置
白瓷板上，加硫酸溶液（4→5）数滴，即显
测定
43
（三）薄层色谱法 √
方法
薄层色谱-比色法
薄层扫描法（TLCS）
44
例 复方扶芳藤合剂
提取 水饱和的正丁醇
ChP
纯化
对照品
D101型大孔吸附树脂柱
黄芪甲苷（外标两点法）
薄层板
展开剂 显色剂
硅胶G（含0.1%CMC-Na）
[正丁醇-醋酸乙酯-水(4:1:5)上层]
-甲醇（10:1）
10%硫酸乙醇溶液（100℃加热）
35
a
b
36
四、含量测定
提取溶剂
*皂苷极性较大，易溶于亲水性 有机溶剂（甲醇、乙醇、丁醇）
*皂苷元极性弱，易溶于有机溶剂 萃取溶剂 正丁醇（水饱和）
37
（一）重量法
* 待测组分的含量
提取分离 纯化 沉淀 干燥 称重 恒重
• 正丁醇浸出物 • 原料药的质量控制
38
例 甘草浸膏（甘草酸）
的分析方法
30
31
32
流动相
用于皂苷元时极性要小些 氯仿-丙酮（19:1） 用于皂苷时极性要大些
水饱和的正丁醇
33
显色剂（氧化性或强酸性试剂）
硫酸-乙醇（10%、50%）△
碘蒸气
34
例 生脉饮 【鉴别】
ChP
对照品 人参二醇、人参三醇
展开wk.baidu.com 环己烷-丙酮（2:1） 显色剂 硫酸-甲醇（1:1）△
沉淀用冰水洗涤4次，每次5mL，弃去洗液及滤液，
39
使水分自然挥散，再用预先加热至60~70℃的乙 醇10mL使沉淀溶解，滤过，滤器用热乙醇洗涤 至洗液无色，合并乙醇液，置已干燥至恒重的烧 杯中，在水浴上蒸干，并在105℃干燥3小时，精 密称定，计算供试品中甘草酸的含量，即得。
本品含甘草酸（C42H62O16）不得少于20.0%
氯仿层 红 蓝
三萜皂苷类 氯仿
硫酸
硫酸层 荧光
或两液接界处显 红色环
24
例 养心定悸膏（煎膏剂） 【鉴别】（2）取本品10mL，加水5mL，摇 匀，加正丁醇10mL，振摇，分取正丁醇液，置 水浴上蒸干，残渣加氯仿1mL使溶解，移至试 管中，沿管壁滴加硫酸0.5mL，两液接界处显 红色环。（甘草酸）
OH
HO HOH2C O O
人参皂苷Rg1
7
O
OH OH
O O HOH2C O O
黄芪甲苷
8
五环三萜皂苷元
COOH
COOH 糖 HO
酸性皂苷9
COOH
HO
齐墩果酸
10
COOH
HO
熊果酸
11
COOH O HOOC O O HOOC O O
甘草酸
12
分析方法特点
1. 多无共轭体系，无明显UV特征
7. 皂苷类药物的特点
A. 遇碱显红~紫红色
B. 遇硫酸显色并增强UV吸收 C. 溶血作用和泡沫反应
D. 盐酸-镁粉反应
E. 多无共轭体系，无明显UV特征
50
8. 三萜皂苷元结构的共同特点是都有
A. 5个环
B. 30个碳原子 C. 8个甲基
D. 羧基
E. 4个环
51
45
测定波长 λS=530nm λR=700nm
（四）HPLC法
*药物有UV吸收 紫外检测器
COOH O
CH2OH OH
HO
HO CH2OH
甘草次酸
柴胡皂苷元A
46
*药物弱UV特征 检测末端吸收
溶剂（流动相）常有干扰
远UV区
UV区
可见光区
IR区
150nm
200nm
400nm
800nm
47
1~5 A. 三萜皂苷
第三节
三萜皂苷类成分分析
triterpenoid saponins
1
一、概述
作用 人参 桔梗 甘草 酸枣仁 具多方面的生物活性 调节机体代谢、增加免疫功能 祛痰 降胆固醇、抗动脉硬化 镇静、催眠、降压
多数能与胆甾醇结合生成复合物沉 淀而产生溶血作用
2
皂苷
水溶液振摇能产生持久性肥 皂样泡沫（甾体、三萜）
2. 在硫酸作用下，可发生脱水、脱 羧、氧化等变化，产生颜色，可
用于鉴别和含量测定 3. 以TLC、HPLC检测为主
13
（二）理化性质
1. 物理性质 （1）皂苷元多为结晶
（2）皂苷多为无定形粉末， 有吸湿性，可降低水溶 液表面张力
14
2. 溶解性
三萜皂苷元 + 糖
难溶于水 易溶于有机溶剂
三萜皂苷
40
（二）比色法 主要是通过显色剂与总皂
苷或总皂苷元反应显色，在可
见光区测定，灵敏度高，但专 属性差
41
显色剂
多为氧化性或强酸试剂 香草醛-硫酸
高氯酸
硫酸（或硫酸-乙醇溶液） 亚甲蓝
42
例 薯蓣皂苷元与硫酸-甲醇（4:1）反应后可 在405nm波长处测定
例 甘草酸与亚甲蓝反应后可在640nm波长处
ChP
【含量测定】 取本品约6g，精密称定，加水
50mL溶解后，移至100mL量瓶中，用乙醇稀释至
刻度，混匀，静置12小时，精密吸取上清
液25mL置烧杯中，加氨试液3滴，置水浴上蒸
发至稠膏状，加水30mL使溶解，缓缓加入盐酸溶
液（3→10）5mL，在冰水中静置约30分钟，滤过， 沉淀置滤纸上放置约2~3小时，
（Rosen-Heimer反应）
三萜皂苷类 红
100℃
三氯醋酸
紫
甾体皂苷类 红
60℃
三氯醋酸
紫
22
（4）冰醋酸-乙酰氯反应 （Tschugaeff反应）
乙酰氯 氧化锌 三萜皂苷类 淡红 冰醋酸、△ 或
紫红
23
（5）氯仿－硫酸反应（Salkowski反应）
27
区分三萜皂苷和甾体皂苷
0.1mol/LHCl5mL + 药液 0.1mol/LNaOH5mL+药液
(pH1)
(pH13)
两管泡沫高度相同
碱管泡沫比酸管多
三萜皂苷
甾体皂苷
28
2. 显色反应
硫酸反应（醋酐、氯仿） 五氯化锑反应 三氯醋酸反应
29
3. 薄层色谱法
皂苷类成分结构复杂，又无 明显UV特征，故TLC法是常用
含30个碳原子的萜类化合物
三萜
多以皂苷形式存在
3
二、结构特征和理化性质
（一）结构特征 三萜皂苷元 + 糖
多为四环三萜 以及五环三萜
三萜皂苷
葡萄糖 半乳糖 鼠李糖 阿拉伯糖 木糖
4
四环三萜皂苷元
糖 HO 糖
中性皂苷 5
OH O O
OH
HO HOH2C O O
OO CH3
人参皂苷Re
6
OH O O
可溶于水 易溶于含水正丁醇 难溶于极性小的溶剂
15
3. 与金属盐类的反应 与Ba2+、Cu2+、Pb2+、Al3+ →↓
16
4. 显色反应
原理
含不饱和双键或羟（酮）基
的三萜化合物可与强酸等作用，使
苷元发生脱水、脱羧、氧化、缩合、
分子重排等反应，因生成具有多烯
结构的缩合物而改变颜色
17
显色剂
多为氧化剂或强酸试剂
黄色，渐变为橙黄色至橙红色。（甘草酸）
20
（2）五氯化锑反应（Kahlenberg反应）
紫蓝色 三萜皂苷类 60~70℃
例 复方丹参片（丹参、三七、冰片）
五氯化锑
紫蓝色 样品醇提液 △ CHCl
3
21
蒸干
五氯化锑
（三七皂苷）
（3）三氯醋酸反应
25
三、定性鉴别 1. 泡沫反应 常用于药材鉴别 原理 皂苷具有降低水溶液表 面张力的作用
样品 滤液 泡沫 △
强力
H 2O
振摇
≥15′
26
例 暑症片 【鉴别】（2）取本品2片，研细，加水10 mL，置水浴上加热5分钟，滤过，滤液置具 塞试管中，密塞，强力振摇1分钟，即产生持 久性蜂窝状泡沫，在15分钟内不得明显减少。 （桔梗皂苷、甘草酸）桔梗、甘草
C. A和B均可 1. 泡沫反应 C
B. 甾体皂苷
D. A和B均不可
2. 与硫酸作用产生颜色 C
3. 遇三氯醋酸100℃时斑点由红变紫 A
4. 酸、碱管泡沫强度相同 A
5. 三氯化铁反应中显紫堇色 D
48
6. 下列中药水溶液能产生泡沫反应是
A. 金银花
B. 黄芩 C. 甘草
D. 乌头
E. 麻黄
49