草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展
草莓病毒病的症状以及防治办法
草莓病毒病的症状以及防治办法随着草莓种植面积的不断扩大，草莓病毒病的发生日益严重，导致植株生长不良、产量下降和品质下降。
因此，这种疾病逐渐引起了广大果农的关注，草莓被单体病毒感染，可见有时症状并不是非常明显，在草莓病毒症在复合侵染后，草莓主要表现为生长弱、退化、新叶膨胀不足、叶片小、无光泽、无绿色、发黄、收缩变形，会直接导致草莓果实少，果实小，产量低。
下面我们就来看下草莓病毒病症状主要有什么？还有就是怎么治草莓病毒病？1、草莓斑驳病毒这种病毒非常普遍，在很多草莓种植的过程中都会出现这种病毒。
如果只是单独的感染这种病毒的时候，症状并不是非常明显。
当它被其他病毒感染时，草莓植株会严重矮化，草莓植株的叶子也会变小，有褪绿斑点，叶子枯萎扭曲。
2、草莓轻型黄边病毒当病毒单独感染时，草莓植株会直接导致发黄，老叶变红，植株矮化，叶片边缘不规则，叶脉向下弯曲或当病毒稍微矮化和复合时整叶扭曲。
3、草莓镶脉病毒单独感染时没有明显症状。
合并感染后，静脉萎缩，叶子扭曲。
同时沿静脉形成黄白色或紫色的病斑。
另外草莓的植株出现的紫色的病斑，还有的植株极矮，匍匐茎发生减少，会直接草莓的产量以及品质直接下降。
4、草莓皱缩病毒这种病毒分布在世界各地，也是对草莓种植影响非常大的病虫害，用强毒株侵染草莓后，草莓植株会变矮，叶片产生不规则的黄色斑点，扭曲变形，匍匐茎数量减少，草莓的繁殖率会直线下降，果实变小。
如果草莓种植的时候，植株会严重矮化，然后与淡黄色边缘病毒混合，会直接影响草莓的产量，甚至完全丧失草莓产量。
怎么治草莓病毒病首先，无毒种苗的培育目前，草莓脱毒亲本品系的培育和繁殖是防治草莓病毒病的经济有效措施。
脱毒方法有热处理、茎尖分生组织培养、茎尖培养与热处理相结合、花药培养四种，其中花药培养效果最好。
其次，加强栽培管理，注意田间清洁卫生，及时清除草莓田田间的垃圾和杂草。
必要的时候要添加有机肥，合理施用化肥，促进草莓健康生长。
及时清除病株、清除病叶和破坏对预防或减少疾病的发生有一定的作用。
草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展
江西农业学报2010，22(8)：88～90A ct a A gr i cul t ur ae J i an gxi草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展肖君泽，黄益鸿，姜放军，邓沛怡，阎珂(湖南生物机电职Ⅱk技术学院，湖南长沙410127)摘要：介绍了在草莓病毒病为害特点及其作用机理。
综述了热处理、茎尖培养、花药培养等草莓脱毒技术和运用指示植物、血清学和分子生物学等检测技术。
介绍了草莓无毒苗的栽培效果。
关键词：草莓；病毒病；脱毒；检测技术；无毒苗中图分类号：$668．4文献标识码：A文章编号：1001—8581(20LO)08—0088-03R esear ch P r ogr e s s i n D e t oxi cat i on and Tes t i ng of St raw berr y V i r us D i s ea seX I A O J哪一ze，H U A N G Y i—ha ng，JI A N G Fan g—j u n，D E N G P e i—yi，Y A N K e(H un an B i o l ogi cal a nd E l ec t r om ec hani cal P o l”e chni c，Chan gsha410127，Chi na)A bs t r act：111j S a rt i cl e i nt r oduced t he i niur i o us charact er is t i cs a nd act ion m ec ha ni sm of s t r aw ber r y vir us di seas c，sum m ar i zed s o m e detoxi cati on t echni ques of s t r aw b er r y vi r us di se ase．suc h签he at—t r ea t m ent，m er i s t em—t i p cul t ur e，ant h er cul t ur e，and de—scr i be d appl yi ng s ev er al t est i ng t echn i ques of st r aw ber r y vi r us di s eas e suc h as i nd i cat ion pl ant s，s er ol ogy and m ol ecul ar bi ology t o en‘s ur e a gre at deal of vi r us—f r ee s eedli ngs br ed f r om vi r us—f r ee m at er nal pl ants．K e y w o r ds：S t r aw ber r y；V i r u s di s eas e；D et oxi cat i on；T es t i ng t ech nol ogy；V i r u s—f r ee s eedl i ng草莓是蔷薇科草莓属宿根性多年生草本水果常绿植物，它具有适应性广、结果早、生长周期短、果实营养丰富、经济价值高的特点，是深受人们喜爱的时令水果之一。
草莓脱毒种苗研究进展
草莓组脱毒种苗培育研究进展马宗新阜阳市农业科学院摘要：本文综述了2006年-2013年最近几年来国内草莓脱毒种苗研究进展，提出了草莓脱毒种苗下一步研究的发展对策。
引言：草莓（Fragaria x ananassa ）是蔷薇科（Rosaceae）草莓属的浆果，为多年生草本植物，世界各地均有栽培。
自20世纪30年代以来，世界上很多国家都开展了草莓病毒病的研究，弄清了病毒病的发生和为害状况,实现了草莓无病毒栽培,获得了良好的经济效果。
我国是草莓的原产地之一，近年来，我国引进了一大批优良的草莓品种，生产发展很快，但草莓病毒病也随之加重。
[2、4、11、13、12]我国也曾对草莓主载区的病毒种类及其危害情况进行了调查研究。
[11,12]但由于我国起步较晚，投入力量少，就全国而言，仍处于种类不清，情况不明之中。
目前，世界各地已报道的草莓病毒病大约有30多种。
[12]其中对生产造成严重损失的病毒病害主要由草莓斑驳病毒(strawberry mottle virus ,SMV)、草莓皱缩病毒(strawberry crinkle virus , SCV)、草莓镶脉病毒(strawberry vein banding virus，SVBV)、草莓轻型黄边病毒( strawberry mild yellow edge virus ,SMYEV)等4种病毒引起。
[9,12]草莓病毒的发生具有特殊的复杂性，大部分草莓病毒都具有潜伏特性，在栽培种草莓上很少产生明显的症状，草莓病毒侵染的另一特点是，一些主要病毒常常是复合侵染，因此，对草莓病毒病的研究和防治、病毒鉴定和检验都需要特殊的方法。
草莓感染病毒后，通常造成品种退化。
而脱病毒培养是目前获得无毒苗的方式之一。
[2,4,11,12]我国在此方面研究较晚，始于80年代，北京农林科学院、中国农业科学院、沈阳农业大学、八一农学院等单位较早开展了利用草莓茎尖分生组织培养、花药组织培养、热处理等方法进行草莓脱毒研究工作，也获得一些脱毒苗，但均投有形成产业化。
我国草莓脱毒研究进展
无病 毒苗生产 的主要 方法有 ： 高温 脱毒 法 、 茎尖 培养 脱毒 法 、 高温 和茎 尖 培养相结合 脱 毒法 、 花药 培
收 稿 Ｕ期 ：［ Ｉ ｌ ０ ２Ｘ ０ ２ ）
２ 茎 尖 培养 脱 毒
２ ０世纪 ８ 代 初 ， 兰 英ｌｌ邓 明 琴【 裘 文 ０年 覃 ６、 ６ 、
莓 轻 型 黄 边 病 毒 （ Ｉ￣ Ｅ ） Ｓ ＩｑＶ 、草 莓 斑 驳 病 毒 Ｖ
养 脱毒 法。为 了有 利 于 草莓 脱 毒菌 的生 产 ， 将 我 现 国草莓 脱毒苗 的研究 现 状综述 如 下。
１ 高温 脱 毒 法
高 温 脱毒 法 是利 用 病 毒 粒子 不 耐高 温 的特点 ， 使 用高温 使病毒 粒 子 钝 化失 活 的原 理 来灭 活 病毒 。 廖 俊杰等 【 将 草莓栽 于盆钵 中置 ３ ℃温 箱 中处理 ， ５ ８ 发 现 处 理 １ ５ ｄ无 脱 毒 效 果 ， 理 ９ 处 ０ ｄ脱 毒 率 仅 ６ ％。所以 ， 温脱毒 时 间长 、 ６ 高 效果 差 。且长 时 间在
抗 病基 医直接 或 间接 产物与 溃疡病 菌无 毒基 因直 接 或间接 产物相 互 识 别 ， 着就 是 信 号传 导 过程 。这 接
一
时期 防卫基 因役 有 活 化 表达 ， 因此 叶 片 中的酶 包
３ 李 靖 窨 千 ． 文 静 黄 瓜 感 染 霜 霉 病 叶 片 中 一 些 酶 活 性 变 利 袁
高 温 下 的草 莓 容 易 死 亡 ， 要 将 根 部 进 行 降 温 处 理 需
（ ＭＤ 、 莓 皱 缩 病 毒 （ Ｃ Ｖ） 草 莓 镶 脉 病 毒 Ｓ Ｖ） 草 Ｓｒ 、 （ Ⅵ３ ． 国草莓 主栽 区 均存 在上 述 ４种 病 毒 ， ｓ ｖ） 我 长 江流域草莓 植 株 严 重退 化 主 要是 病 毒 引起 ， 面 大 积植 株感染 率达 ５ ％ 。防治 草莓 病毒 病 ， 高 草 ０ ｊ 提
草莓茎尖脱毒繁育体系研究进展
草莓茎尖脱毒繁育体系研究进展作者：马秀明缪军王俊峰韩伟孙杨来源：《安徽农业科学》2021年第24期摘要草莓茎尖脱毒技术能够从生产上解决草莓因长期无性繁殖，易受到多种病毒的侵染，从而导致植株长势变弱、果实品质劣化、产量下降等品种退化现象。
从草莓茎尖消毒、茎尖选取、培养基的筛选、多种脱毒方式结合、病毒检测、驯化移栽、种苗繁育等方面综述了草莓茎尖脱毒繁育体系的研究进展，以期为草莓茎尖脱毒繁育体系的建立提供参考。
关键词草莓;茎尖脱毒;种苗繁育中图分类号 S668.4 文献标识码 A文章编号 0517-6611（2021）24-0018-06doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.24.004Research Progress on Stem Apex Detoxification and Breeding System of StrawberryMA Xiu-ming，MIAO Jun，WANG Jun-feng et al （Institute of Vegetables，Shandong Academy of Agricultural Sciences，Shandong Provincial Key Laboratory of Vegetable Biology，Shandong Branch of National Center for Vegetable Improvement，Jinan，Shandong 250100）Abstract The technology of stem apex detoxification of strawberry can solve problems that finally results in the weakening of plant growth，deterioration of fruit quality and decline of yield，which due to long-term asexual reproduction that easily infected by a variety of viruses.This paper summarized the research progress on stem apex detoxification and breeding system of strawberry from the disinfection of stem apex，selection of stem apex，screening of culture medium，virus detection，combination of multiple detoxification methods，domestication and transplanting，seedling breeding and other aspects，in order to provide reference for the establishment of stem apex detoxification and breeding system of strawberry.Key words Strawberry;Stem apex detoxification;Seedling breeding基金项目 2021年度山东省农业科学院农业科技创新工程（CXGC2021A28）。
草莓病毒病及脱毒技术研究进展
草莓病毒病及脱毒技术研究进展
董佳鑫;刘鹏丽;吴景莹;张抗萍;王璐;张晶晶
【期刊名称】《现代园艺》
【年(卷),期】2024(47)9
【摘要】草莓()是一种多年生草本植物。
由于草莓具有栽培方式简单、生长周期短、产量高、休眠期短、繁殖速度快等特点,成为我国水果产业中发展最快的新兴果种。
但是,草莓无性繁殖方式容易导致病毒积累,产生品种退化现象,造成品质降低和产量下降,影响了商品价值和经济价值。
近年来,通过对草莓病毒的检测和试验,草莓脱毒技术被不断应用到生产当中,通过脱毒处理的草莓苗表现出长势旺盛、抗病性强、
亩产量高等特点,具有良好的栽培前景。
本研究综述了4种草莓病毒、4种草莓脱
毒技术和脱毒苗栽培繁育的内容,有助于掌握草莓病毒和草莓脱毒技术研究最新进展,为草莓脱毒技术进一步发展提供理论参考。
【总页数】3页(P75-77)
【作者】董佳鑫;刘鹏丽;吴景莹;张抗萍;王璐;张晶晶
【作者单位】太原学院
【正文语种】中文
【中图分类】S66
【相关文献】
1.草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展
2.草莓病毒病研究现状、脱毒技术及病毒鉴定研究进展
3.草莓病毒病、脱毒技术及病毒检测研究进展
4.草莓病毒病及脱毒技术研究现状
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
草莓生物技术研究领域及进展
仅２ ％。所以花 药培养 脱毒 苗有较 大的生 产价值 。但 从培 ０
养时 间和增殖率 来看 ，花药培 养均不 及茎 尖培养 ，若 以增 殖快繁为 目的仍 以茎尖培 养较 好。
何欢 乐等恻 现草莓 茎尖的成 活率与 剥取 的茎尖大 小有 关 ， 发 在 相同的 培养基上 ，剥 取茎尖越 大 ，成 活率越 高 ，通 常茎
对丰 富和 繁荣水 果 市场 、发展 食 品工业 均 有深 远 的意 义 。
近 年来 ，现代生物 技术广 泛应用 在草莓 育种 研究 中。如 已 开展 了茎尖脱毒培 养 、花 药脱毒 培养 、离体 胚培 养 、原 生 质体培 养与融合等 方面 的研究 ，在生物 育种 方面 的研究 及 分 子水平方面研究也取得 了突破性 进展。
中国园艺文摘 ２ 年第１期 ０１ １ ０
草莓生物技术研究领域及进展
韦持 章 王文林 邱文武
（ 广西南亚热 带农业科 学研 究所 ，广西 龙 州 ５２１） ５４５
摘 要 ：综述草莓 茎尖脱毒 培 养、花药脱毒培 养、快速繁殖等 方 面的脱毒快繁培 养研 究，生物 育种 方 面的单倍体
行这方面的研究 。侯喜林 究不 同品种和激素对草莓花药培 研
养的影响，发现不同品种草莓花药培养可经愈伤组织直接形成 不定芽 ，所获得的再 生植株有９ ％脱 除草莓病毒。杨振英等目 ４ 以 ‘ 美香莎 ’ ‘ 、 鬼怒甘 ’ ‘ 、 五丰二号 ’ ‘ 、 幸香 ’ ‘ 、 西班牙 １号 ’ ‘ １ 、 吐德拉 ’６ － ４ 草莓品种采用花药大规模培养无菌病毒
尖 取材在０ ５ ｍｍ以上成 活率可达 ９ ％。覃兰 英［ ． ８ ４ １ 认为 用于 快繁可 取较大茎尖 ，若用于脱毒苗则应 小于０ ５ Ｉｎ 。苟桂 ． ｎ ｌ
草莓脱毒技术研究进展
草莓脱毒技术研究进展草莓是一种受欢迎的水果，富含营养物质和天然抗氧化剂。
然而，由于生长过程中使用了很多化学肥料和农药，草莓也可能被污染而成为食品安全隐患。
因此，草莓脱毒技术的研究变得非常重要。
草莓中常见的农药残留包括有机磷、有机氯农药等，这些农药残留对人体健康有潜在影响，因此必须采取适当的脱毒技术来保证人们食用草莓的安全性。
目前，草莓脱毒技术主要分为化学法和物理法两种。
化学法是最为常见的草莓脱毒技术，主要包括漂洗、浸泡和喷洒等。
漂洗法是利用水流冲洗草莓，可去除表面的农药残留，但对于残留较多的农药并不十分有效。
浸泡法是将草莓浸泡于含有脱毒剂的溶液中，可去除草莓内部较深层次的农药残留，但需注意草莓使用的脱毒剂种类和浸泡时间等。
喷洒法是将草莓表面喷上脱毒剂，可有效降低草莓的农药残留，但可能会影响草莓的口感和质量。
物理法是一种无化学药剂的脱毒技术，主要包括红外线烘干、紫外线辐射和臭氧气体灭菌等。
红外线烘干法可通过加热杀死草莓中的病菌和病毒，但可能会影响草莓的口感和质量。
紫外线辐射法是利用紫外线照射草莓，可去除表面的细菌和病毒，但可能会影响草莓的质量。
臭氧气体灭菌法是利用臭氧气体对草莓进行灭菌处理，可去除草莓表面和内部的微生物和病菌，但需注意草莓暴露于臭氧环境的时间。
另外，还有一些新型的草莓脱毒技术在研究和应用中。
例如，利用微波辐射处理草莓，可有效地去除农药残留和微生物，同时保持草莓的口感和营养成分；利用超声波处理草莓，可破坏草莓细胞壁，有助于去除草莓内的农药残留。
总的来说，草莓脱毒技术是保证草莓安全、提高草莓质量的关键技术之一。
随着科技的不断进步，相信新型的脱毒技术将会不断涌现，让我们可以更加健康地享受美味的草莓！。
草莓组织培养与脱毒技术
草莓组织培养与脱 毒技术
张玉君 ，彭兴 龙 ，张哲 民 ，赵 珲
（ ． 卤二 门蛱 市林业 技术推 ， ，河南三 门峡 ４２０ ；２灵宝 草莓樱桃 专 家大院 ） １河 三 ’ 站 ７００ ．
摘 要 ：经过 多年试验研究 ， 已摸索 出草莓组 织培养和脱毒技术 ，利用茎尖和 花药做为外植体 。选择 ＭＳ为 增殖培养基 ，以 １２ ／ＭＳ为生根培养基本培养基 ，通过病毒检测技 术保存繁殖 无毒苗 ，已用组培出的草莓菌建 园 ２ ０ｈ ，生长结果表现 良好 ０ ｍ２
生最多的季节 ， 当生长到 １～ ０ ｍ长的时候从健壮 ５ ２ ｃ 的植株上，剪去长 ５ ｍ 左右 ，带有顶端的匍匐茎 ， ｃ 用水冲洗，除去尘土 。随后在 ７ 的次氯酸钠溶液 ５％ 中，进行 ５ ７ｍ ｎ的表面消毒 。由于匍匐茎表面茸 ～ ｉ 毛多，易附着气泡会降低灭菌效果 ，因此需用消毒 的镊子在其周围搅动数 次，再用无菌水多次冲洗， 在超净工作台上，应在解剖镜下剥去茎尖外面的幼 叶， 切取茎尖 ， 茎尖切取的长度为 ０ ｉ 左右 ， ．ｉ Ｉ ２ｎ！ 接 种到培 养基 上 。
Ｋｅ ｏ ｄ ： ｔ ａ ｙ Ｗ ｒ ｓ Ｓ ｒ ｗｂｅ ｒ Ｔ ｓ ｕ ｌ ｔ ｅ Ｖ ｒ ｓ ｆｅ ｃ ｎｏ ｏ ｙ ｒｙ； ｉ ｓ ｅ Ｃｕ ｕ ； ｉｕ — ｒ ｅＴｅ ｈ ｌ ｇ ｒ
草莓属于蔷薇科 ，草莓属 ，多年生草本植物 。 在世界小浆果生产 中，草莓荣举首位 。草莓是结果 最陕、成熟最早 、 株体最小 、 周期最短、管理方便、 病虫较少 、加工容易，便于调控 的一种果树 。它一
关键词：草莓 ；组织培养 ；脱毒技术
中图 分类 号 ：￥ ６ ． ６ ８４ 文 献标 识 码 ：Ｂ 文 章编 号 ：１ ０ ～ ６ ０（ ０ ９）０ — ０３ ０ ０３ ２３ ２ ０ １０７— ３
草莓脱毒技术研究进展
草莓脱毒技术研究进展草莓是一种人们非常喜爱的水果，其甜美可口的口感让人无法抗拒。
随着环境污染和化学农药的广泛使用，草莓的质量和安全性越来越受到关注。
由于草莓表面常常沾有各种农药残留和细菌，这些对人体健康造成潜在威胁的物质需要被有效去除。
草莓脱毒技术的研究成为当前的热点之一。
本文将介绍草莓脱毒技术的研究进展以及未来的发展方向。
一、传统的草莓脱毒方法传统的草莓脱毒方法主要包括水洗、漂洗和化学脱毒等方法。
水洗是最简单的一种方法，但是草莓的表面往往有许多微小的凹陷，水洗很难将其中的农药残留和细菌去除干净。
漂洗则是利用漂白水或其他化学药剂对草莓进行处理，虽然可以去除一部分农药残留和细菌，但是漂洗剂残留和对草莓口感的影响也成为了一个问题。
化学脱毒则是利用化学药剂对草莓进行浸泡或喷洒，虽然可以去除大部分的农药残留和细菌，但是化学药剂对人体健康的影响也成为了一个隐患。
传统的草莓脱毒方法存在各种问题，需要寻找新的解决方案。
二、生物脱毒技术的研究进展近年来，生物脱毒技术成为了草莓脱毒的研究热点。
生物脱毒技术是利用微生物或酶类对草莓进行处理，去除其中的农药残留和细菌。
与传统的化学脱毒方法相比，生物脱毒技术具有环保、安全、无残留物等优点，因此备受关注。
1. 微生物脱毒技术利用微生物对草莓进行腐解和降解是一种有效的生物脱毒技术。
研究表明，某些细菌和真菌具有分解农药的能力，可以将草莓中的农药降解成无毒物质。
青霉菌、放线菌等微生物被广泛应用于草莓脱毒领域。
这些微生物能够分解草莓中的农药残留，同时对草莓的口感和营养价值没有明显影响，因此在实际生产中具有很大的应用潜力。
2. 酶类脱毒技术除了微生物之外，酶类也被广泛应用于草莓脱毒领域。
酶类是一种天然的生物催化剂，可以高效地降解草莓中的农药残留和细菌。
目前，已经有许多酶类被发现具有脱毒作用，如过氧化物酶、脱氢酶等。
这些酶类可以在一定条件下高效地去除草莓中的有害物质，而且对草莓本身没有明显的影响。
草莓茎尖脱毒及原种苗的网室繁育技术
草莓是蔷薇科草莓属（
.）多年生草本植
物，果实酸甜适口，素有“水果皇后”的美称。果实成熟早，
温室栽培可以供应整个冬季市场，填补果品淡季，同时草
莓也是重要的食品加工原料。草莓是靠匍匐茎进行无性 繁殖的作物，经过几代后，容易感染多种病毒。感染病毒 病的草莓生长缓慢、叶片皱缩、果实小而畸形、品质变
收稿日期院2018-04-06 作者简介院赵霞（1972—），女，农艺师，主要从事果树技术研究与推广工作
1 草莓脱毒原理 植物体内的病毒是通过维管束纵向疏导和胞间连
丝横向传播的，茎尖是植物细胞分裂最旺盛的组织，其生 长点顶端还没有形成维管束，植物体内病毒的增殖、扩散 和传播速度较植物茎尖分生组织细胞的分裂速度慢，所 以茎尖分生组织往往不带病毒，因此通过茎尖培养可以 获得脱毒植株。茎尖脱毒为了取得较好的脱毒效果，在 保证成活率的前提下尽量切取较小的茎尖生长点。
果蔬博览
赵霞，等：草莓茎尖脱毒及原种苗的网室繁育技术
91
差。我国已鉴定明确的草莓病毒病主要有四种，即草莓斑 驳病毒（SmoV）、草莓轻型黄边病毒（SMYEV）、草莓镶脉 病毒( SVBV）、草莓皱缩病毒( SCrV）等。一旦感染病毒， 常规药剂很难进行防治，极大地制约了草莓产业的发展。
通常草莓脱毒苗在培养瓶中增殖扩繁，容易导致植 物激素的累积，造成后代变异，如不易成花、产量低、畸形 果多等，给草莓生产带来极大风险。采用热处理结合茎 尖组织培养，获得草莓试管苗，在试管内不增殖的情况 下，直接进行炼苗移栽，然后对移栽成活的试管苗，通过 指示植物法进行病毒检测，然后对获得的脱毒原种苗在 网室内进行繁育，进而获得新一代苗。通过这种方法繁 育的一代苗，比通过单纯用试管苗进行多代增殖繁殖的 变异小，生产风险降低，可以在草莓脱毒育苗中使用。针 对草莓脱毒快繁，进行了 5 年的观察试验，并对草莓脱毒 结合网室育苗技术进行总结如下：
草莓脱毒苗的培育技术
草莓脱毒苗的培育技术
1 草莓脱毒苗概述
草莓是我们常见的水果之一，品种上有不同的选择。
然而在种植
草莓时，病毒是极难避免的问题。
为了解决这个问题，草莓脱毒苗技
术应运而生。
2 草莓脱毒苗的原理
草莓脱毒苗是以植物白化病毒或其它草莓病毒作为污染源，获得
的参考对照苗为基础，通过进行无菌培养及药物处理、抑制、消毒等
多项技术，获得毒素完全清除的健康常规苗。
3 草莓脱毒苗的优点
草莓脱毒苗和传统草莓苗相比具有许多优点。
草莓脱毒苗生长快，移栽后生长周期也比传统草莓苗短。
草莓脱毒苗需要的温度和湿度比
传统草莓苗更低，也更适宜人工培育。
在种植季节富有市场倾向或流
行趋势某特定草莓品种，草莓脱毒苗可以确保大批量且高质量地进行
生产。
4 草莓脱毒苗的培育技术
草莓脱毒苗的培育需要进行无菌技术，确保生产的苗不受任何细
菌感染。
草莓的组织培养和无菌苗获得的技术主要应用于草莓繁殖和
脱毒苗的产生。
有两种主要的草莓无菌繁殖方法：第一，草莓茎尖经
化学处理后进行无菌培养，新株的形成经两个月左右时间；第二，草莓叶片经抗生素处理后进行切片培养，初步体系管理可另立新苗。
草莓脱毒苗的田间移植有生长适应期，有利于图谋在线运（苗期60-90天），并获得了果实产量的显著提高效果，获得的健康常规苗无需进行特别的防护管理，成年期果实品质也相应提升，草莓繁殖和脱毒苗的培育技术因此具备很大的发展前景。
北方果树脱病毒及栽培技术研究
北方果树脱病毒及栽培技术研究摘要:本文基于笔者多年从事北方果树技术服务的相关工作经验,以北方果树脱病毒方法及无病毒果树栽培技术研究对象,论文首先探讨了北方果树的病毒种类、无病毒研究与栽培现状,进而分析了常用的脱病毒方法,在此基础上,给出了无病毒果树栽培管理技术与特点,全文是笔者长期工作实践基础上的理论升华,相信对从事相关工作的同行能有所裨益。
关键词:北方果树脱病毒无病毒果树栽培无病毒栽培是当今果树的发展方向,美、法、日、英等国,自20世纪60年代开始有关果树病毒病研究,并建立无病毒苗生产基地,现已基本实现无病毒化栽培。
我国无病毒果树的研究和栽培起步较晚,1991年,无毒化栽培才被正式纳入生产计划。
1 果树病毒病在我国的危害状况果树是利用枝、根、芽等营养体通过嫁接、分株、扦插、压条等无性繁殖途径为主的多年生植物。
病毒通过营养体传递,因此,无性繁殖的数量愈大,病毒的传播愈快。
果树一旦被病毒侵染,将终生带毒持久危害,无法用化学药剂进行有效控制。
病毒多为系统侵染,树体周身带毒,轻者树体生长不良,果实产量下降,品质变劣,重者树体衰退枯死或造成果实畸形不堪食用,失去商品价值。
据调查,我国主栽的梨品种普遍带有病毒,平均带毒率达86.3%,其中苹果茎沟病毒(ASGV)侵染株率达32.8%,造成产量锐减,品质变劣。
草莓被病毒侵染株率达80.2%,其单种病毒侵染率为41.6%,2种或2种以上病毒复合侵染率为38.6%,病毒感染使许多优良品种严重退化,品质下降。
枣疯病几乎给枣树带来毁灭性的灾害。
该病广泛分布于各产枣区,尤以山东、河北、河南最严重。
目前,枣疯病已在部分地区蔓延成灾,致使大片枣林被毁。
苹果被潜隐病毒侵染时,若砧木或接穗不抗病,病毒往往导致植株死亡。
另外,由于高接换种带来的苹果衰退病,而导致高接树大量死亡。
2 北方果树的病毒种类、无病毒研究与栽培现状2.1 苹果苹果可感染12种病毒,包括退绿叶斑病毒、茎豆病毒、花叶病毒、皱叶病毒、大果海棠矮化病毒、大果海棠皱缩病毒、大果海棠鳞症病毒、软枝病毒、茎沟病毒、矮化病毒、丛枝病毒、番茄环斑病毒。
草莓花药脱毒培养技术研究
明显 的差 异 。 由极 差 分 析结 果可 以看 出 ，一 Ａ浓 度 对愈 伤 诱 导 率 ６Ｂ
１ 材料 和方法
１１ 试 验材 料 ．
以宁夏永宁县温室栽培 的草莓 品种 “ 卡麦 罗莎 ” 的花药为供
洗 ２ 次， ～３ 在超净工作 台上 先 用 ２ 次氯 酸钠 浸泡 ８ ｉ， ％ ｍｎ无菌
水冲洗后用 Ｏ１％升汞浸泡 ｌ ｍ ｎ用无 菌水冲洗 ３～４次 ， ． ｉ。 ２ 然后
将花蕾放入装有无菌滤纸 的培养皿 中备用。
１ ． 花 药愈 伤 组 织 的诱 导 ，２ ２
作 用大小依次其次为 ６ Ｂ － Ａ—Ｋ Ｎ Ａ 在以 Ｈ Ａ， Ｓ基本培养基进行
维普资讯
１ ０
２０ 第 ６ ０７年 期
宁夏农林 科技
草莓花药脱毒 培养技术研究
马 洪爱 ， 生虎 ， 郭 王敬 东， 高晓原
（ 夏农 林 科 学 院 农 业 生 物技 术 重 点实 验 室 ， 夏 银 川 ７ ００ ） 宁 宁 ５ ０ ２
摘要 ： 以草莓新品种“ 卡麦罗莎” 的花 药为供试材料 ， 系统地 筛选 了花药脱毒苗培养过程 中各阶段 的最适培养基 ，
打开瓶 口， 在室温 下炼苗 ３ ～５天后， 出小苗 ， 取 洗去根部残 留的
培 养 基 ， 植 在 已 经 灭 菌 处 理 过 的 基 质 中 ， 持 合 适 的温 度 、 栽 保 湿
度 即可 。
２ 结 果 与分 析
２１ 不 同激素 浓度配 比对花 药愈伤 组织诱 导率 的影响 ．
３ ～４月份 ， 采集刚露白的花蕾 ， 取花粉单核靠边 期的花蕾 选
草莓脱毒技术研究进展
草莓脱毒技术研究进展草莓是一种广泛受欢迎的水果。
由于草莓本身富含营养且口感鲜美，因此它的生产量和消费量在全球范围内不断增加。
然而，由于采摘、运输、销售等环节存在质量问题，草莓中常常存在有毒农药残留和微生物污染等问题。
因此，开发和研究草莓脱毒技术已成为当前学术界和工业界的热点问题之一。
本文将重点介绍草莓脱毒技术的研究进展。
1. 光照脱毒技术光照脱毒技术是一种简单、有效的草莓脱毒方法。
该方法利用紫外线照射或聚光灯照射草莓，能够有效杀灭细菌、病毒等微生物，并分解草莓中的农药残留。
多项研究表明，草莓经过光照处理后，菌落总数明显降低，残留农药量也减少了很多。
热处理脱毒技术是一种传统的脱毒方法，也是一种最为简单和易行的方法。
该方法利用高温烘烤或加热的方式来杀灭草莓中的微生物和降解农药残留。
研究表明，经过热处理的草莓在颜色和风味等方面与正常草莓无明显差异。
但这种方法需要一定的时间和精力，而且不同的草莓品种和生长环境对处理温度和时间的要求不同。
3. 化学方法脱毒技术化学方法脱毒技术是近年来发展起来的一种新型草莓脱毒技术。
该方法通过化学物质的应用来除去草莓中的有害物质，以达到脱毒效果。
研究表明，一些化学物质能够有效去除草莓别嘌呤残留、一氧化二氮等有害物质，并保持草莓的营养价值和食用性质。
但该方法对草莓自身也有一定的影响，需要进行深入的安全性和卫生性评价。
电子束脱毒技术是一种现代化的草莓脱毒方法。
该方法利用高能电子束照射草莓，能够杀死草莓中的各种微生物，并能分解草莓中的残留农药、激素等有害物质。
由于能直接照射到草莓表面内部，电子束脱毒技术脱毒效果很好，但需要适当控制辐射剂量，避免过度辐照导致草莓品质下降，同时加强安全和卫生监管。
综上所述，草莓脱毒技术的发展越来越多元化、专业化和精细化。
不同方法各有优缺点，选择适合的脱毒方法需要综合考虑生长条件、生产成本、产品质量、消费者健康安全等因素。
未来需要进一步加强草莓脱毒技术的研究，探索更加高效、环保的方法，推动草莓产业持续发展。
利用内标为基础的RT—PCR技术检测草莓四种病毒
利用内标为基础的RT-PCR技术检测草莓SCV、SVBV病毒史芳芳(新疆兵团第十二师农业科学研究所，乌鲁木齐830088)摘要：草莓皱缩病毒病（SCV）是草莓上为害性最大的病毒病，单独侵染，影响长势，与其他病毒复合侵染时，使感病品种植株严重矮化，通常与草莓镶脉病毒（SVBV）复合侵染。
本研究通过CTAB法与试剂盒提取RNA，以优质的总RNA为模板，进行梯度PCR，结合扩增内标的检测体系，建立了优化的SCV和SVBV的多重RT-PCR检测体系，可以对草莓田间植株进行快速稳定的病毒检测。
关键词: 草莓病毒; 内标; 多重RT-PCR; 病毒检测Detection of SCV and SVBV with Multiplex RT-PCR Based onInternal ControlShi Fang-fang（The Center of Popularization of Agricultural Technology of the 12th Division of Xinjiang Production and Construction Corps, Urumchi 830088）Abstract: Strawberry crinkle virus (SCV) was damage of the largest virus disease.When it was infected alone, it influenced the growth, and other complex virus infection to susceptible cultivars were severe stunting, usually mixed infection strawberry vein banding virus (SVBV) . By CTAB method and the kit, RNA was extracted, using high-quality total RNA as a template, gradient PCR with internal amplification target detection system, established a multiplex RT-PCR detection system of SCV and SVBV can fast and stable virus detection in field grown strawberries.Key words: strawberry virus; internal control; multiplex RT-PCR; virus detection 草莓种苗普遍感染病毒是草莓生产中的瓶颈问题，由于可侵染草莓的病毒经常复合侵染，因此草莓病毒病的田间症状表现极其复杂。
草莓茎尖超低温疗法脱毒技术体系的建立
草莓茎尖超低温疗法脱毒技术体系的建立草莓(Fragaria×ananassa Duch.)是蔷薇科(Rosaceae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物。
其果实鲜嫩多汁、色泽艳丽、香气怡人、口感酸甜适中,是我国传统的优秀浆果果品之一。
其繁殖主要采用传统的分株繁殖或匍匐茎埋压,这种无性繁殖的方式提高了病毒侵染植株的几率。
避免病毒给生产带来巨大的经济损失,实现草莓无病毒苗栽培生产化,必将是我国草莓业目前势在必行的发展趋势和目标。
而超低温疗法是一种新型、高效脱除植物病毒的新技术,备受各研究科学者的亲睐。
本试验以‘红颜’草莓(Fragaria×ananassa Duch.cv. Benihoppe)品种大田茎尖为试验材料,对超低温疗法关键程序(预培养、预处理和化冻条件)进行了筛选和优化,并以茎尖脱毒法为对照,建立起完善的超低温疗法脱毒技术体系。
在此基础上,研究者对多重RT-PCR病毒检测体系相关参数(Mg2+浓度、引物浓度、PCR程序等)进行了优化和改进,以期建立完善的多重RT-PCR病毒检测体系。
最后利用DNA相关软件筛选分析SSR-PCR引物,分析超低温疗法脱毒苗遗传性状的稳定性,实验结果如下：1.适合‘红颜’草莓苗的超低温疗法脱毒技术体系为：在含0.3 mo.L一预培养基上暗培养7 d,室温下LS装载60 min,0℃下PVS2脱水1 h,液氮处理1 h,40℃水浴化冻120 s,用含1.2 mol·L-1蔗糖的液体MS 培养基洗涤两次,每次10 mmin。
该体系同时脱除草莓四种主要病毒(草莓镶脉病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓皱缩病毒和草莓斑驳病毒)的比率高达100%,成活率为69.03%。
将该体系再用于‘蜀丰’‘丰香’以及‘章姬’,其存活率分别为68.15%、71.00%和69.78%,达到预期的试验目标。
2.适用于多重RT-PCR检测体系的引物是SC1/SC2、SM1/SM2、SY1/SY2、SV1/SV2、A1/A2,目的片段大小分别是345 bp、394 bp、861 bp、271 bp和295 bp；多重RT-PCR病毒检测体系是1μl cDNA、2 μl 10×PCR bufer、2.0 mmol·L-1 MgCl2、 0.2 mmol·L-1 dNTPs、0.5UTaq酶,引物浓度0.2 μmol·L-1 (SCV 0.25 μmol·L/1),最后用超纯水补至20μl; PCR程序：94℃预变性3 min,94℃变性1 min,55℃退火40 s,68℃延伸40s,35个循环,72℃再延伸5 min。
利用RT-PCR对脱毒草莓苗病毒检测研究
明进行 。Ｒ Ａ的检测步骤为 ： ５ｍ Ｎ Ｎ 取 ＬＲ Ａ与 Ｏ１ Ｌ ６ ． × ｍ Ｒ ＮＡ上样缓 冲液混合进行 １０Ｖ恒压琼脂 糖凝胶快速 ３
第一 作者 简介 ： 晓军 （９７）男 ， 士 ， 陈 １７ ， 硕 助理 研 究 员 ， 主要 从 事 现
植 物分 子生物 学 应 用研 究工作 。
作 为内部体 系参 照。研 究 中所 用 引物均 由北京奥科 生
物技 术 公 司合 成 。 表 １ ４种 草莓 病 毒 及 内标 扩 增 引物 序 列
毒， 以期 试 验 材 料 ．
脱毒草莓试材 由宁夏 自治区农业 生物技 术重点 实 验室经花药组培脱毒得 到 ， 取幼叶 ２ ， ５０ｍｇ为试 片 约 ０
一
套 较 为 完整 的 试验 方 法 。 关键 词 ： 草莓 脱 毒 苗 ； Ｔ Ｐ Ｒ Ｓ Ｖ；ＭＹ Ｖ；Ｖ Ｖ；Ｃ Ｒ －Ｃ ；Ｍｏ Ｓ Ｅ Ｓ Ｂ Ｓ Ｖ 中 图分 类 号 ： ６． 文献 标 识 码 ： Ｓ６８４ Ａ 文章 编 号 ：０ １ ００ （００２ － ０４ －０ １０ － ０ ９２ １ ）３ １６ ３ 购 自 Ｐｏ ｇ ｒｍｅａ生 物 技 术 公 司 ， 它 化 学 试 剂 均 为 分 其 析纯。
Ｎ ． Ｃ ０ １２ ） ｏＮ ０ ７５ 的基 因组 序 列和 文献 ［—］ ４５ 分别 设计 和
合 成 针 对 Ｓ Ｖ、ＭＹ Ｖ、Ｃ 和 Ｓ Ｂ 的 引物 （ １ 。 Ｍｏ Ｓ Ｅ Ｓ Ｖ Ｖ Ｖ 表 ）
（ ｔ ｗｂｒｙＣ ｉ ｌ Ｖ ｒｓ Ｓ Ｖ） 草 莓 轻 型黄 边 病 毒 Ｓｒ ｅｒ ｒｎ ｅ ｉ ， Ｃ 、 ａ ｋ ｕ
・
生物技术 ・
北 方 园 艺 ２０３１～４ ０ （ ） ４ １ １ ２ ：６ ８
草莓种苗的脱毒技术试验研究
草莓(Fragaria ananassa Duch.)属蔷薇科草莓属多年生草本植物,是一种重要的经济作物[1],在我国很多地方被广泛栽培,具有较好的经济效益。
草莓是一种以匍匐茎无性繁殖的作物,因长期种植,体内病毒逐年积累加重,病毒病发生严重[2]。
一旦草莓感染了病毒后,植株生长缓慢、叶皱缩、果实逐年变小、畸形、品质差,一般减产30%~80%[3],草莓病毒病已成为了草莓生产中的一大危害。
草莓病毒病,目前还没有一种比较好的药剂可用于防治。
培育无病毒母本苗,栽培无病毒苗木,是防治草莓病毒病的根本对策[4]。
目前世界上生产草莓无毒苗最普通、最有效的方法是用茎尖培养法培育草莓无病毒苗[5]。
草莓脱毒技术的研究,国内已有很多报道,上海交通大学农业与生物学院何欢乐等的研究结果[2]表明,最适宜的草莓脱毒法为改良热处理+茎尖培养法,即先将草莓匍匐茎放在40℃热水中处理4h,再剥取≤0.5mm 大小的茎尖进行培养,脱毒效果良好;高山林[3]的研究结果表明,把切取的草莓芽洗净后经过高温短时间热处理,然后用茎尖培养法获得无病毒草莓苗;刘健等[6]的研究表明,经40~42℃高温处理草莓匍匐茎后再剥取茎尖,得到的试管苗能达到100%脱毒率;顾地周等[7]的研究表明,利用试管内高温处理(在温度35~50℃条件下,培养30~80d)结合茎尖脱毒的方法可以完全脱除草莓病毒,从而建立了草莓脱毒体系;覃兰英等[8]的研究表明,将草莓在35℃下热处理7d 后,逐步升温至38℃,在湿度40%~68%、光照度4000~5000lx 条件下热处理35d 后,将长出的新茎茎尖再行组培,可获得100%的脱毒苗;童尧明等[9]的研究表明,以草莓茎尖分生组织0.2~0.4mm 一次性培养出组培苗,出苗率83%~90%,脱毒率达100%;高遐虹、李梅[10]的研究结果表明,采用草莓的茎尖2次脱毒法,对宝交早生等6个草莓品种的茎尖进行组培脱毒,经检测可全部脱除草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒和草莓皱缩病毒,茎尖2次脱毒法操作简便、易掌握,脱毒率达100%,分化率达79%。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1 . 2 . 3 草莓镶脉病毒 ( SVBV )
时, 无明显症状, 但会引起植株生长衰弱, 匍匐茎抽生量 减少, 草莓的产量和品质均下降; 与其他病毒复合侵染
收稿日期 : 2010 - 05- 07 基金项目 : 湖南省农业厅重点科研项目 章姬草莓脱毒快繁技术研究 ( 20097614) 。 作者简介 : 肖君泽 ( 1952 ) , 男, 湖南望城人 , 教授, 硕士 , 主要从事植物遗传育种、 栽培等方面教学与研究。
[ 6, 9, 10]
1. 1 病毒病的致病机理 病毒侵染草莓植株后, 在植株 体内的活细胞中迅速传播和繁殖。它既消耗植株的大量 能量, 又从植株体细胞中获取大量的核糖体、 核酸及蛋白 质以构建新的病毒个体, 进而影响草莓整个植株细胞的 正常代谢和生长发育 。同时, 病毒在代谢中还产生多 种醛类、 醌类或其他大分子有毒物质, 进而促进植株活细 胞的衰老和死亡。还有的病毒代谢产物能激活某些氧化 酶, 破坏活 细胞中叶绿 体的形 成, 造 成叶沿、 叶脉 失绿
草莓是蔷薇科草莓属宿根性多年生草本水果常绿植 物, 它具有适应性广、 结果早、 生长周期短、 果实营养丰 富、 经济价值高的特点, 是深受人们喜爱的时令水果之 一。在草莓的生产过程中, 为了发展和保持其优良品种 的经济性状, 人们一直采用匍匐茎埋压及分株等营养繁 殖技术繁育种苗, 这导致了病毒病不断地传播和积累, 为 害也日趋严重 。由于病毒病的为害, 植株生长衰弱、 结 果期推迟、 产量减少、 果品质量明显降低。
[ 17]
。
草莓皱缩病毒是对草莓
为害最大的病毒病之一。感病植株表现为叶片畸形, 叶 片上产生绿斑, 沿叶脉出现小而不规则的褪绿斑或坏死 斑, 叶脉褪绿透明, 幼叶生长不对称, 扭曲皱缩, 小叶黄 化, 叶柄缩短, 叶小, 植株矮化。病毒株草莓匍匐茎的抽 生量减少, 繁殖力下降, 果实变小, 强毒株单独侵染时可 造成草莓减产 35% ~ 40 % 。与其他病毒复合感染, 为害 更严重, 可导致草莓产量大幅度下降, 甚至绝收
江西农业学报 2010, 22( 8): 88~ 90 A cta A gr iculturae Jiangx i
草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展
肖君泽, 黄益鸿, 姜放军, 邓沛怡, 阎 珂
(湖南生物机电职业技术学院 , 湖南 长沙 410127 )
摘
要 : 介绍了在草莓病毒病为害特点及其作用 机理 。综 述了热处理 、 茎 尖培养 、 花药培 养等草莓脱毒技术 和运用指示
8期
肖君泽等 : 草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展
89
[ 1, 7, 13, 17 , 18]
后, 引起病株叶皱缩, 扭曲, 植株极度矮化, 小叶向背面反 卷, 形成黄色或紫色病斑, 匍匐茎抽生量明显减少, 成熟 叶片的网脉变黑或坏死, 后期部分或全株枯死 1. 2. 4 草莓皱缩病毒 ( SC rV )
[ 13, 14]
。因此, 为了能更好地
。
明确病毒种类而釆用了成套应用指示植物的做法, 常将 UC4、 UC5、 UC6 和 UC10这 4种指示植物同时应用, 并进行 比较分析, 从而保证了检测结果的准确性。在常用的指 示植物中, UC5 对多种草莓病毒的敏感性都比较高, 而且 生长势强、 叶柄粗、 易嫁接成活, 因此是一种检测草莓病 毒比较理想的指示植物
[ 4]
。
1 . 2 . 2 草莓轻型黄边病毒 ( SMYEV )
草莓轻型黄边病
。
毒单独侵染时, 无明显症状, 仅使植株轻微矮化, 草莓长 势变弱。该病毒与其他病毒复合侵染时, 容易引起叶片 黄化或叶缘失绿, 幼叶反卷, 成熟叶片产生坏死条斑或叶 脉坏死、 扭曲, 甚至出现叶片枯死。植株的矮化、 叶柄短 缩、 老叶变红, 造成草莓长势锐减, 产量和品质严重下降, 减产严重时可高达 75 %
[ 15, 16]
。草莓采用 37 ~ 38
恒温或 35 ~ 38
变温处理
能有效地减少热处理中植株的死亡。热处理中相对湿度 宜保持在 70 % ~ 80%, 在光照 5000 lx 下处理 16 h , 处理 后取其匍匐茎繁殖后代
[9 , 10, 12]
。
[ 11]
2. 2 茎尖培养脱毒技术 草莓植株在感染病毒后, 其传 播、 扩散速度迅速, 很快就能遍布全株。陈爱萍等 研 究报道, 病毒在植株的各器官和组织中分布并不均匀, 茎 尖和根尖分生组织一般都不会感染或很少感染病毒。在 解剖镜下, 把含有 2 个叶原基的 0. 2 mm 大小的茎尖切 下, 用无菌操作方法接种在培养基上, 在适宜的温度和光 照下培养, 组培苖在栽后 1周内宜保温、 保湿以使之成 活
[9 , 12]
研究报道, 检测草莓病毒病的植物有野生草莓的 2
。
个类 群: 森 林 草 莓 ( F. vesca ) 和深 红 草 莓 (F. virg in ianh ) 。目前国际检测草莓病毒病通用的是森林草莓中 的 EMC、 Ap line 、 UC4、 UC5 和 UC6, 以及深红草莓中的 C、 UC10、 UC11及 UC12。其中以 EMC、 Ap line 、 UC4 和 UC5 的 应用最广泛。马崇坚认为: 各种病毒在指示植物上虽有 不同的典型症状, 但在生产实践中, 同一株草莓大多有几 种病毒的复合侵染, 导致某种指示植物常有多种症状反 应, 使得症状的变化差异很大
[ 9~ 11]
现草莓脱除病毒的目的
。
3 草莓无病毒检测鉴定
许多报道表明, 釆用各种脱毒技术所获得的草莓苗 并不一定都能完全脱除病毒, 因此, 在把这些草莓植株作 为生产无病毒原种苗的母株之前, 需要进行无病毒检测 鉴定。 3 . 1 指示植物检测鉴定 指示植物检测鉴定是指通过 指示植物对某种或几种病毒及类似病原物敏感的特性, 能较快地显 现出 特 有症 状的 检 测鉴 定方 法。谷 建田 等
[ 1]
( 如草莓镶脉病和轻型黄边病 ) 或形成一些褪绿叶斑 ( 如 草莓斑驳病 )
[2 , 5~ 7]
。由于病毒的为害, 破坏了草莓植株
[ 8]
的正常代谢, 抑制了植株的正常生长, 降低了果实的产量 和品质, 同时, 还增加了植株对肥料的无效消耗 。 1 . 2 病毒病的为害 草莓病毒病为害面广, 是草莓生产 上的重要病害之一。病毒具有潜伏侵染的特性, 植株不 会很快表现出症状而被忽视。在诸多研究报道中, 由于 草莓病毒源不同, 表现的为害症状也各不相同。 1 . 2 . 1 草莓斑驳病毒 ( SM oV ) 草莓斑驳病毒分布极 广, 凡有草莓栽培的地方几乎均有分布。该病毒单独侵 染草莓时无明显症状, 但病株长势衰退, 果实品质下降。 与其他病毒混合侵染, 在指示种森林草莓上弱毒株系侵 染时, 病株叶片出现黄白不整齐的褪绿斑驳; 而强毒株系 侵染时, 病株出现严重的矮化, 叶片变小, 扭曲并产生褪 绿斑, 呈丛簇状, 叶脉透明, 脉序混乱
[9 , 10]
1 草莓病毒病及其为害
世界草莓种植区出现的病毒病、 类病毒病和菌原体 病害等有 25种之多, 其中分布广泛、 为害严重的有 6 ~ 7 种
[ 2, 3]
。在我国草莓生产区, 已调查和鉴定的草莓病毒
[ 2]
病主要有 4种: 草莓斑驳病毒病、 草莓轻型黄边病毒病、 草莓皱缩病毒病和草莓镶脉病毒病 。目前, 在生产上, 草莓带病毒株率平均为 80. 2%, 单 种病毒侵染 株率为 41 . 6 % , 2种以上病毒复合侵染株率为 38 . 6 %
[2, 10]
较大的分 生 组织 可 结合 短 期高 温 处 理, 以 提高 脱 毒 效果 。 2. 3 花药培养脱毒技术 自 20世纪 70年代日本大泽 胜次等发现草莓花药培养植株可以脱除病毒后, 乔奇、 孟 志卿、 马洪爱、 曹善东等研究并验证了通过花药培养可以 获得无病毒苗。因此, 花药培养已成为草莓培养无毒苗 的重要方法。采集草莓现蕾后 2~ 4 mm 大小的花粉发 育的单核期花蕾, 经过消毒处理后, 在无菌条件下取花药 进行接种培养, 诱导愈伤组织的产生, 再由愈伤组织分化 形成不定芽, 最后分化出带有茎叶的植株, 这样就可以实
[ 2, 14]
2 草莓病毒脱除技术
草莓与其它植物的营养繁殖途径一样, 在长期的营 养繁殖中, 多种病毒会不断地传播和蔓延。由于草莓植 株本身没有对病毒的免疫能力, 而且目前又没有特效的 药剂或方法治愈草莓病毒病。因此, 实现草莓无病毒栽 培的惟一有效途径就是脱除草莓植株中的病毒, 获得无 病毒原种母株, 而后以此大量繁育无病毒苗, 以不断满足 生产的需要
[ 15 , 16]
。
3 . 2 血清学检测鉴定 植物病毒是由蛋白质与核酸组 成的核蛋白。它是一种很好的抗源, 将其给动物注射后, 在动物体内产生抗体; 当抗原和抗体结合时, 就会产生血 清反应。由于抗体主要存在于血清中, 所以把含有抗体 [ 14] 的血清称为抗血清。马崇坚等 报道, 不同的病毒刺激 所产生的抗血清都有各自的特异性, 这样就可以用已知 病毒的抗血清检测出未知病毒的种类。抗血清在病毒检 测中已成为一种高度专化的试剂, 其特异性强、 检测速度 快, 是一种比较理想的病毒检测方法。用已知病毒的抗 血清来检测病毒的存在与否以及病毒的种类, 其中最为 常用的是酶联免疫吸附法 ( ELISA ) 。目前已有 14 种草 莓病毒或类似病毒可用 ELISA 进行检测
[ 9, 10]
2. 1 热处理脱毒技术 热处理脱毒是最早应用于培育 各种营养繁殖植物无病毒母株的有效方法。多数研究者 认为: 在一定的高温条件下, 能使一些病毒钝化。取下在 热处理期间长出的新芽进行实生嫁接, 以及对土壤进行 消毒, 或进行组织培养, 得到无病毒的原种植株。热处理 采用恒温或变温的热空气处理带病母株, 其脱毒效果较 好
[ 5]
。
。茎尖培养是目前草莓脱毒中应用最广的方法, 对
[11]