拟南芥筛选培养基(1L)
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1.拟南芥筛选培养基(1L)
1/2M或者MS培养基,
蔗糖30g
PH5.8
Agar 8g
Kan+75mg/L(50-100mg/l)
Hygromaycin25mg/L
1.取种子,1.5ml的Ep管中,种子的体积不超过100ul. 加入75%的乙醇处理5分种。
2.去除液体包括液体上的杂质等。加入10%的Bleach处理15分种,期间需要tap几次。
3.去除bleach,并用灭好的ddH2O,洗5次,期间需要tap几次。
4.将种子吸起后铺平板,9cm平板一般可以铺1.5个起始Ep管中的种子。
注意:如果第一次筛选种子,种子比较脏,步骤3后,用灭好的ddH2O洗3遍以上后,再加入10% bleach处理5-10分钟,再用灭好的ddH2O洗—7次。