小鼠转基因干眼模型
表达视网膜Müller细胞的转基因小鼠基因鉴定
【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】 Ｓｏｘ２Ｃｒｅ／Ｒｏｓａ２６ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅ；Ｇｅｎｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ
Lumican转基因小鼠形觉剥夺性近视眼模型眼球生物学参数变化要点
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒａｌａｔｅｒａｌ ｇｒｏｕｐｓ ａｎｄ
ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ
ｆＦ＝９．５２５．１０．０６７；Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ
ｍｅａｎ ａｘｉａｌ ｌｅｎｇｔｈ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｌｅｖｅｌ ｏｆ Ｌｕｍｉｃａｎ
Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｏｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ａｎｄ
Ｌｕｍｉｃａｎ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｎｏｃｕｌａｒｌｙ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ
ｍｙｏｐｉｃ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｍｕｔａｎｔ Ｌｕｍｉｃａｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ
Ｔａｏ Ｊｕｎ，Ｌｉｕ
Ｓｕｎ Ｍｉｎｇｓｈｅｎ‘，Ｓｏｎｇ Ｙａｎｚｈｅｎｇ，Ｚｈａｎｇ Ｔｏｎｇｒｅｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ １００７３０，Ｃｈｉｎａ
Ｌｅｖｅｌ
Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ（２０１３．２．０２３）
近视眼作为一类具有高发病率的难治性眼部 疾病，已日臻成为全球范围内的公共健康问题ｎ，。 临床中将出现并发症或眼底出现病理性改变的近 视眼称为病理性近视眼。病因学研究认为病理性 近视发病过程受“遗传＋环境”双重因素共同影响， 而其发病机制尚不完全清楚。’。Ｉ。在国内外对于近 视眼相关基因位点的诸多研究中睁１１，，位于ＭＹＰ３位 点内的Ｌｕｍｉｃａｎ基因是近年来的热点之一ｆ１２】。有研 究发现Ｌｕｍｉｃａｎ基因第二外显子存在突变位点 ｃ．５６９Ｔ＞Ｃ，并提出该突变可能是导致病理性近视眼 发生的原因之一【ｌ孔。也有相关Ｌｕｍｉｃａｎ基因敲除的 动物实验为此基因作为病理性近视眼重要候选基 因提供了理论支持”４‘１５１。然而采取Ｌｕｍｉｃａｎ基因敲 除方法进行建模可能对除眼部以外的其他部位 表达功能造成较大影响。应用携带确定突变位 点的Ｌｕｍｉｃａｎ基因转基因鼠模型可能有助于进一 步研究此基因在病理性近视眼发生发展过程中的 作用。 除遗传因素之外，环境因素在近视眼的发生发 展过程中也起到了重要的作用口＇№，。目前常用的近 视眼实验动物模型主要包括形觉剥夺性和光学离 焦性近视眼两类ｎ ７１。因镜片法或头罩法对小鼠依 从性要求较高，且易脱落，往往影响模型构建的效 果”７１，本实验选择眼睑缝合法这种已被证明为有 效、经典，且被广泛接受的近视眼模型构建方法。
小鼠转基因干眼模型
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
➢ 1.3.NOD其他衍生杂交小鼠 • 许多其他NOD衍生杂交小鼠被用来检测某些特定的基因与蛋白在原发性SS发病机制的
作用。 • NOD.IFN-γ-/-与NOD.IFN-γ R-/-小鼠外分泌腺并没有外分泌功能的损伤，表明IFN-γ是引发
上皮细胞损伤的关键因素。 • NOD Igμ-/-小鼠被用来研究B淋巴细胞与自身抗体在引起SS外分泌腺外分泌功能下降的
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
➢ 1.4.NFS/sld 小鼠 • 到目前为止基因突变NFS/sld小鼠己被运用于多项研究SS发病机理的研究中。 • 利用常规剂量的2,3,7,8-四氯二苯并二恶英干预新生NFS/sld小鼠以探讨环境因素在引发
SS过程中所起到的作用，结果显示2,3,7,8-四氯二苯并二恶英干预后的NFS/sld小鼠唾液 腺及其他外分泌腺体中能够观察到明显的淋巴细胞浸润。 • 口服粘膜保护剂瑞己匹特(a-[(4-氯苯甲酰基)氨基]-1,2-二氢-2-氧代-4-喹啉丙酸)能够抑制 CD4+T的活性及TH1的产生从而降低了自身抗体的产生。 • 实验证实免疫抑制剂环孢霉素能够明显改善NFS/sld小鼠眼干的症状。从金线吊乌龟中 生物碱千金藤素能够抑制NFS/sld小鼠中性粒细胞的活性，防止腺泡细胞损伤。
非肥胖性糖尿病小鼠干眼模型的初步建立
非肥胖性糖尿病小鼠干眼模型的初步建立崔红;李春华;李正日;李承霖;金海燕;任宁;汝新宇;李英俊【摘要】目的:初步建立非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠蒸发过强型干眼模型,通过研究小鼠眼表组织病理变化,初步探讨其作为糖尿病性干眼模型的可行性.方法:选取40只雌性NOD小鼠,NOD小鼠自发糖尿病为实验组,同时选取未自发糖尿病的NOD 小鼠作为正常对照组.实验组NOD小鼠置于40％以下湿度环境,每天皮下注射0.5mg/0.2mL氢溴酸菪胺,并置于可控干燥箱中,每天通风12h,制作蒸发过强型干眼模型.在造模后的第1、7、10、14d采用酚红棉线实验测量泪液分泌量,PAS染色检查结膜杯状细胞形态和数目;在造模后的第10d,进行角膜组织苏木精染色检测角膜上皮变化情况.结果:实验组NOD小鼠泪液分泌量随造模时间而逐渐降低,正常对照组未有明显变化.实验组的结膜杯状细胞体积变大,在造模后的第1d,杯状细胞密度较正常对照组减少(P=0.008),从造模后第7d开始,随时间延长,实验组杯状细胞数量逐渐减少,且较同一时间点正常对照组显著减少(均P<0.001).此外,观察两组第10d的角膜上皮情况,实验组NOD小鼠角膜上皮层变薄,部分角膜上皮细胞变性、基底细胞水肿.结论:初步建立了NOD小鼠干眼模型,其眼表变化与临床上干眼症表现类似.【期刊名称】《国际眼科杂志》【年(卷),期】2019(019)008【总页数】4页(P1293-1296)【关键词】NOD小鼠;糖尿病;干眼症;蒸发过强型干眼模型;结膜杯状细胞【作者】崔红;李春华;李正日;李承霖;金海燕;任宁;汝新宇;李英俊【作者单位】133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科【正文语种】中文0引言糖尿病是一种复杂的慢性全身性疾病，是20～74岁人群中最常见的主要致盲原因之一，已成为发展中国家和发达国家日益严重的公共社会问题[1-2]。
单纯环境因素诱导的小鼠干眼模型的开题报告
单纯环境因素诱导的小鼠干眼模型的开题报告
1.研究背景
干眼症是指眼部表面及/或泪膜因润滑不足等原因，导致眼睛疼痛、疲劳、视力
模糊等症状的疾病。
目前研究表明，环境因素，如空气污染、电脑辐射和空调使用等，是干眼症的主要诱因之一。
因此，建立单纯环境因素诱导的小鼠干眼模型，对探究干
眼症的病理机制和寻找治疗干眼症的方法具有重要意义。
2.研究目的
本研究旨在通过简单的环境因素干预，建立小鼠干眼模型，进一步研究环境因素对干眼症的作用机制。
3.研究方法
3.1 小鼠实验
通过将小鼠暴露于环境污染、电脑辐射和空调干燥等环境因素中，建立小鼠干眼模型。
采用Schirmer实验和荧光素染色检测方法，评估小鼠干眼的程度。
3.2 组织学分析
采用光镜和电镜等方法，对小鼠眼球组织进行形态学和病理学分析。
通过观察角膜上皮细胞、泪腺、结膜等组织的损伤程度，判断小鼠干眼模型的成功建立。
4.研究预期结果
通过本研究建立的小鼠干眼模型，可以深入研究环境因素对干眼症的影响和作用机制，为干眼症的治疗提供新思路和新方法。
同时，为研究干眼症的发病机制和预防
措施，提供重要的研究基础和实验模型。
5.研究意义
本研究对于揭示干眼症的病理机制和筛选治疗手段有着重要的理论和临床意义。
同时，对于环境因素对人体健康的影响以及人们的健康生活方式有着一定的科普作用。
干眼动物模型的最新研究进展
·３６２·史旦塞旦！垦型鲞查！Ｑ！！堡堡旦箜塑鲞箜！塑堡！垫！旦！！堕ＱＰ竺！！！垒卫堂！！！！，ｙ！！塑，堕！．璺时合并睑缘炎、角结膜炎症的干眼㈨·。
２．维生素Ａ缺乏：维生素Ａ参与合成角膜糖蛋白，影响角膜的能量代谢，正常含量的维生素Ａ对维持角膜上皮的正常生长与分化，抑制角化细胞生成有着重要意义。
马轶群等心¨以维生素Ａ完全缺乏的饲料喂养兔，４个月后可诱导出干眼动物模型，兔眼泪腺出现萎缩，结膜丧失杯状细胞，角膜上皮角化。
Ｔｏｓｈｉｎｏ［２２３给大鼠喂养维生素Ａ完全缺乏的饲料，也能诱导出严重的干眼，在角膜中还检测出影响角质形成细胞的转谷胺酰胺酶显著上调，并认为它可能是角膜出现角化的信使蛋白。
３．防腐剂：通常在长期使用滴眼液的患者中容易出现泪膜不稳定的情况，引起干眼症状，一般均认为与眼液中含有防腐剂有一定关系。
为得到证实，Ｘｉｏｎｇ乜纠使用０．１％苯扎氯铵给兔连续点眼１４天，在第３天出现虎红染色积分增加，第５天出现泪液分泌下降，角膜染色积分增加，第７天可检测到杯状细胞密度下降，同时出现泪膜中ＭＵＣ５ＡＣ表达下降。
在此实验基础上，Ｌｉｎ瞳４１使用０．２％苯扎溴铵给小鼠滴眼也可建立于眼模型，连续点眼后，小鼠除了会出现泪液分泌明显减少，角膜染色积分及虎红染色积分增加以外，角膜会出现炎性细胞浸润并同时伴有炎性介质ＴＮＦ一仪的上调，角膜上皮细胞凋亡增加，电镜下可观察到角膜上皮微绒毛的大小和间隔出现变化。
４．干燥环境：在现实生活中，当人处于干燥环境及空调环境中，泪液蒸发率会相应增加，容易出现干眼症状。
研究者通过模拟人类所处干燥环境，将１２周龄小鼠置于低湿气流环境中的培养箱（湿度１８．５％±５，ｌ％，气流１５Ｌ／ｍｉｎ），３天后即可诱导出眼表病理改变，结膜上皮层变薄，杯状细胞计数下降，同时伴有泪液分泌下降及角膜荧光素着色。
这是一个能很好对干燥环境引起干眼进行研究的动物模型，同样的实验方法，Ｃｈｅｎ瞳５１发现模型小鼠眼表可出现Ｃａｓｐａｓｅ一３表达上调，这是最重要的细胞凋亡效应性蛋白裂解酶，它的表达上调推测与干眼造成眼表细胞凋亡增加有关。
MMTV-PyMT转基因小鼠模型介绍
MMTV-PyMT转基因小鼠模型介绍
基因敲除小鼠是什么？是否就是我们平日所说的实验室用的小白鼠?其实小鼠有很多种，小白鼠只是其中一种，通常普通的小白鼠多被药厂用作临床试验，而基因敲除的小鼠，则用于更尖端的生物医学研究。
基因敲除小鼠技术原理：是先在小鼠的胚胎干细胞上通过基因重组的办法进行基因修饰——就是将胚胎干细胞中的靶向基因改掉,然后将“修饰”后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎,生成嵌合体小鼠。
这种嵌合体小鼠长大后,体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。
下面是，MMTV-PyMT转基因小鼠介绍
MMTV-PyMT转基因小鼠是一种人类乳腺癌动物模型。
该小鼠使用MMTV-LTR驱动多瘤病毒中间T抗原（PyMT）在小鼠乳腺组织的表达，使小鼠出现乳腺肿瘤的表型。
可用于研究乳腺肿瘤的发生、发展及转移，及乳腺肿瘤相关药物的筛选。
SOD1-G93A转基因小鼠模型介绍
SOD1-G93A转基因小鼠模型介绍这些 SOD1-G93A 转基因小鼠表达携带 G93A 突变的人 SOD1，可用于研究神经肌肉疾病，如肌萎缩侧索硬化症（ALS 或 Lou Gehrig 病）。
SOD1-G93A转基因小鼠详情SOD1-G93A（也称为G93A-SOD1）转基因半合子的小鼠可存活可育，并可表达携带G93A 突变的人SOD1。
此首建鼠品系（通常称为G1H）据报道具有高转基因拷贝数。
半合子小鼠表现出类似于人类肌萎缩侧索硬化(ALS)的表型；由于脊髓运动神经元丧失，可出现一个或多个肢体瘫痪。
转基因小鼠的寿命缩短：50% 小鼠的寿命为128.9 +/- 9.3 天（与之对比，C57BL/6J遗传背景下50% 寿命为157.1 +/- 9.1 天）。
与 LPS 诱导的小胶质细胞和活化的 M1/M2 巨噬细胞不同，由疾病进展活化的脊髓小胶质细胞未上调 M1（神经毒性）表型或 M2（保护性）表型偏好的基因。
在表达SOD1G93A 的活化小胶质细胞中的基因表达模式呈现了独特的 ALS 特异性特征。
在维持活体种群时，杰克森实验室发现雄性小鼠具有攻击性。
我们建议每笼饲养不超过 4 只雄鼠。
这些SOD1-G93A（也称为G93A-SOD1）转基因小鼠可用于研究神经肌肉疾病，包括肌萎缩侧索硬化症（ALS 或 Lou Gehrig 病）。
此品系运输时应携带 JAXTagTM 。
SOD1-G93A转基因小鼠模型开发SOD1-G93A（或G93A-SOD1）转基因携带突变型人SOD1 基因（携带 93 号密码子甘氨酸至丙氨酸的单个氨基酸替换），由其内源性人 SOD1 启动子调控。
将此转基因注射至B6SJLF1 小鼠的受精卵中，获得首建鼠。
B6SJL 混合遗传背景的转基因小鼠被送至杰克森实验室。
自身免疫相关性干眼动物模型的研究进展
自身免疫相关性干眼动物模型的研究进展
魏瑞华;郝永娜;赵少贞
【期刊名称】《眼科新进展》
【年(卷),期】2012(32)7
【摘要】干眼是最常见眼病之一,损伤眼表和视力,影响生活质量,其发病机制尚未完全明了,这严重限制了对干眼的有效治疗.值得关注的是,较为严重的干眼类型多见于自身免疫相关性干眼.近年来,随着转基因小鼠和敲除基因小鼠的出现及分子遗传学和免疫学等学科的飞速发展,人们已经成功建立了许多新的干眼动物模型,对自身免疫相关性干眼的研究有重大价值.
【总页数】4页(P690-693)
【作者】魏瑞华;郝永娜;赵少贞
【作者单位】300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学
院;300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学院;300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.干眼动物模型的研究进展 [J], 张晓博;陈蔚
2.间充质干细胞对自身免疫性干眼的免疫调控作用研究进展 [J], 王希莲;路晓晓;杨丽媛;粘红;魏瑞华
3.Sj(o)gren's综合征所致干眼动物模型的研究进展 [J], 朱培庆;刘立夏;程琳;张富文;段俊国
4.干眼动物模型制作的研究进展 [J], 刘莉;何慧琴
5.自身免疫性甲状腺炎实验动物模型的研究进展 [J], 邓莉;孙文;侯毅;刘铜华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法引言干燥综合征是一种以眼部干涩、口干、全身乏力及关节疼痛等表现为主的自身免疫性疾病。
为了深入研究干燥综合征的发病机制以及探索治疗方法，科研人员提出了一种干燥综合征小鼠模型的造模方法。
本文将介绍该方法的具体步骤和操作要点。
实验材料和设备1.4-8周龄的雌性C57BL/6小鼠。
2.放置冰片的无菌培养皿。
3.满足标准的实验室动物饲养设备。
4.干冰盒。
实验方法第一步：准备工作1.将小鼠放置在无菌环境下，并确保其适应环境至少一周。
2.准备好实验所需的材料和设备。
第二步：制备试剂1.准备好人工合成的干燥综合征自身抗体，浓度为1mg/m l。
2.制备盐水溶液，浓度为0.9%。
第三步：造模操作1.用放置在冰上的冰片麻醉小鼠，待小鼠完全麻醉后，移至培养皿中。
2.使用注射器，将人工合成的干燥综合征自身抗体以0.2m l/10g的剂量注射到小鼠腹腔内。
3.每隔两天，重复一次注射操作，连续注射14天。
4.在注射期间，每次注射后将小鼠恢复到温暖的环境中，并观察其行为变化。
5.在注射结束后，让小鼠自由饮用盐水溶液以保持其体液平衡。
结果分析行为观察在注射过程中，小鼠可能表现出口干、眼干、活动减少等症状，这与干燥综合征患者的临床表现相似。
病理检测可以通过检测小鼠的泪液分泌量、唾液分泌量以及相关器官组织的病理学变化，来评估小鼠是否成功建立了干燥综合征模型。
结论通过上述干燥综合征小鼠模型的造模方法，可以成功模拟干燥综合征的临床表现和病理变化。
此模型可为研究干燥综合征的发病机制和寻找治疗方法提供有力的实验性依据。
参考文献1.Sm it hK.G.,Jo nes R.B.,Bu rn sS.M.,e t al.R at mo de ls ofA N CA-a s so ci at ed va sc uli t is.A rt hr it is Res T he r,2011,13(6):207.2.小鼠实验动物模型制备方法标准操作规程，中国实验动物学杂志，2014，22(6)：590-591.。
AD小鼠模型介绍
AD小鼠模型介绍AD小鼠模型，即阿尔茨海默病小鼠模型，是研究阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，简称AD）的常用动物模型。
阿尔茨海默病是一种常见的神经退行性疾病，以认知障碍和记忆损害为主要特征，对患者的生活质量和家庭经济状况产生巨大影响。
转基因AD小鼠模型最早由L. Mucke团队于1995年创建。
这些转基因小鼠是通过将人源的突变前体蛋白质（amyloid precursor protein，APP）或其酶切产物的基因导入小鼠胚胎中，使其在大脑中过度表达β-淀粉样蛋白（amyloid-beta，Aβ），从而模拟AD患者大脑中β-淀粉样物质的沉积。
这些模型具有遗传稳定、可重现性好、Aβ沉积明显等特点，适用于研究Aβ沉积的动态变化和与其相关的病理生理学改变。
但由于转基因技术的限制，这些模型在建模之前就存在人为设计的缺陷，不完全反映人类疾病的自然历程，并且建模以及后续研究成本较高。
诱导AD小鼠模型是通过给予小鼠β-淀粉样蛋白前体的特定片段、神经毒性物质或化学药物等来诱导Aβ的沉积。
例如，诱导小鼠模型中最为常用的是通过给予β-胰岛素A肽（amylin）而诱导Aβ的形成。
这类模型具有好的可控性，可以通过调整给药剂量和方法来模拟AD的不同发展阶段，但模型建立和操作过程相对复杂，且一些诱导方式可能会导致非特异性的神经损伤。
1. 病理特征和病理生理学改变：通过观察模型小鼠大脑中Aβ的沉积情况、Tau蛋白的磷酸化等病理改变，以及相关神经元损伤和炎症反应等，揭示AD发病机制。
2.认知和行为表现：通过行为学测试，评估模型小鼠的认知和学习能力、空间记忆和工作记忆等，以反映AD小鼠模型的行为改变，从而评估新药对这些行为的干预效果。
3.药物疗效评价：通过给予模型小鼠潜在的抗AD药物，观察其对病理特征、记忆损害和认知功能的影响，评价药物的疗效，以及探讨药物的作用机制。
尽管AD小鼠模型在阿尔茨海默病研究中发挥了重要作用，但由于其与人类疾病的差异以及实验条件的限制，模型存在一定的局限性。
microRNA146a在干眼中的表达及作用
microRNA146a在干眼中的表达及作用王婷;李轩;王玉川;汤欣【摘要】目的研究microRNA146a在干眼小鼠模型中的表达及作用.方法 5周龄BALB/c雄性小鼠20只,左眼为正常对照组(20眼),右眼为干眼组(20眼).用2 g·L-1苯扎氯铵诱导小鼠建立中重度干眼模型.造模完成3 d后,采用泪膜破裂时间(break-up time,BUT)和角膜荧光素钠染色(fluorescein staining,FLS)对小鼠进行眼表相关检查;随后随机选取10只小鼠,采用HE染色观察正常对照组和干眼组角膜和结膜的组织结构差异,结膜PAS染色后计数杯状细胞的量并对比;剩余10只小鼠分别提取角膜与结膜组织的总RNA,采用实时荧光定量PCR检测microRNA146a、白细胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6、IL-8以及IL-1受体相关激酶1(IL-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor as-sociated factor-6,TRAF6)的相对表达量.结果完成干眼造模3 d后,干眼组BUT为(3.640±0.493)s,明显低于正常对照组的(10.645±0.583)s,差异有统计学意义(P<0.05);干眼组角膜FLS评分为(14.650±0.860)分,明显高于正常对照组的(1.233±0.927)分,差异有统计学意义(P<0.05).小鼠角膜和结膜组织HE染色结果显示:与正常对照组相比,干眼组角膜上皮欠平整,细胞数量增多,角膜基质层胶原纤维排列紊乱,成纤维细胞活化;干眼组小鼠结膜上皮细胞数量增多,排列欠规整,并伴有缺损.小鼠结膜PAS染色结果显示:干眼组结膜杯状细胞数量为(9.500±4.506)个,相较于正常对照组的[(29.667±8.756)个]明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).实时荧光定量PCR结果显示:干眼组角膜和结膜中microRNA146a、IL-1、IL-6、IL-8的相对表达量相较于正常对照组均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05).相较于正常对照组,干眼组角膜中I-RAK1的相对表达量降低,TRAF6的相对表达量升高,而干眼组结膜中IRAK1的相对表达量升高,TRAF6的相对表达量降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论干眼时机体可通过增加microRNA146a的表达,以及其对炎症中靶点的调控作用,从而形成对干眼炎症反应的负反馈调节机制.【期刊名称】《眼科新进展》【年(卷),期】2018(038)010【总页数】5页(P930-934)【关键词】干眼;炎症;microRNA146a;白细胞介素受体相关激酶1;肿瘤坏死因子受体相关因子6【作者】王婷;李轩;王玉川;汤欣【作者单位】300020 天津市,天津市眼科医院,天津市眼科研究所,天津医科大学眼科临床学院,天津市眼科学与视觉科学重点实验室;300020 天津市,天津市眼科医院,天津市眼科研究所,天津医科大学眼科临床学院,天津市眼科学与视觉科学重点实验室;300020 天津市,天津市眼科医院,天津市眼科研究所,天津医科大学眼科临床学院,天津市眼科学与视觉科学重点实验室;300020 天津市,天津市眼科医院,天津市眼科研究所,天津医科大学眼科临床学院,天津市眼科学与视觉科学重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R777干眼是由于泪液的量或质或流体动力学异常引起的泪膜不稳定和(或)眼表损伤，从而导致眼部不适症状及视功能障碍的一类疾病[1]。
角膜新生血管转基因老鼠模型的应用进展
角膜新生血管转基因老鼠模型的应用进展方健文; 袁晴; 邵毅【期刊名称】《《国际眼科杂志》》【年(卷),期】2019(019)011【总页数】4页(P1866-1869)【关键词】角膜; 角膜新生血管; 转基因; 老鼠; 动物模型【作者】方健文; 袁晴; 邵毅【作者单位】330006 中国江西省南昌市南昌大学第一附属医院眼科【正文语种】中文0引言角膜新生血管(corneal neovascularization，CNV)是一种在炎症、缺氧、创伤或角膜缘干细胞缺损情况下发生的病理状态[1]。
正常的角膜是无血管的，在某些情况下，毛细血管或淋巴管侵入角膜后会产生CNV[2]。
角膜的透明程度对于视力十分重要。
CNV的产生使得过多的血管从结膜向角膜生长，可能导致视力障碍，甚至失明，是一种常见的疾病后遗症[3]。
CNV可以通过新型抗血管生成疗法治疗，尽管目前治疗效果仍不理想[4]，但是通过在动物模型中进行参数对比和机制研究，同时进行组织学比较及药物治疗等研究将会为CNV的治疗带来新的方向。
1 CNV的形成机制CNV的形成机制涉及炎性介质、细胞、细胞因子和细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)之间的相互作用，是一个相互调节的复杂过程[5]。
正常情况下，血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)蛋白在角膜上皮细胞、内皮细胞和角膜缘血管内皮细胞中基础性表达，被内源性表达的可溶性VEGF 受体隔离，以维持角膜无血管的状态及其良好的透明度[5]。
在眼前段炎症、创伤和缺血等病理情况下，或是在角膜水肿、角膜瘢痕、脂质沉积、角膜移植等其他情况下，VEGF诱导CNV发生[6]。
碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)通过诱导CNV的内皮细胞产生尿激酶型纤溶酶原激活剂，使纤溶酶原转化为纤溶酶，纤溶酶激活胶原酶，溶解血管的基底膜，诱导内皮细胞移行，从而促进CNV生长[7]。
电针对干眼模型小鼠眼表形态结构及干扰素调节因子5的影响
电针对干眼模型小鼠眼表形态结构及干扰素调节因子5的影响鲁凡;丁宁;吴霞;甘丽祯;韦庆波【期刊名称】《江苏中医药》【年(卷),期】2024(56)6【摘要】目的:观察电针对干眼模型小鼠眼表形态结构和干扰素调节因子5(IRF5)的影响,探讨电针治疗干眼的作用机制。
方法:取若干只雄性C57BL/6J小鼠,采用皮下注射氢溴酸东莨菪碱的方法制备干眼模型,造模成功的小鼠随机分为模型组、西药组和电针组,每组10只,另取10只健康雄性C57BL/6J小鼠作为正常组。
西药组小鼠予氟米龙滴眼液滴双眼,每日3次,每次各1滴,连续14 d;电针组小鼠予电针双侧睛明和太阳穴,留针15 min,连续14 d;正常组和模型组正常饲养,不给予任何干预措施。
于造模前、造模第21日和末次干预后次日分别采用角膜荧光素钠染色评分评价各组小鼠角膜上皮的损伤情况;干预结束后次日,使用角膜共聚焦显微镜观察各组小鼠角膜形态学变化,苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠角膜和泪腺组织病理形态学表现,免疫组化法检测各组小鼠角膜组织中IRF5蛋白的表达情况,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组小鼠角膜组织中IRF5 mRNA的表达。
结果:模型组与西药组、电针组小鼠造模第21日角膜荧光素钠染色评分均明显高于本组造模前和同时期正常组(P<0.05),电针组和西药组末次干预后次日上述评分均明显低于本组造模第21日和同期模型组(P<0.05)。
角膜共聚焦显微镜观察结果显示,模型组小鼠角膜见大量球状免疫细胞,活化的基质层细胞边界不清、大小不规则,细胞间隙不规则,神经宽度发生改变,神经分支反射率降低并呈现分支断续;电针组和西药组小鼠角膜基质层细胞形态和神经反射均有改善。
HE染色病理图片显示,模型组小鼠角膜上皮细胞排列不规整,存在上皮细胞脱落,基质层胶原纤维排列不齐、肿胀;泪腺上皮细胞明显萎缩,腺腔扩张,局灶性淋巴细胞浸润。
电针组和西药组小鼠角膜上皮细胞脱落和基质层胶原纤维排列情况均有改善,泪腺组织上皮细胞萎缩和淋巴细胞浸润亦得到改善。
转化生长因子-β1转基因小鼠巩膜厚度研究
转化生长因子-β1转基因小鼠巩膜厚度研究刘海霞;杨坤禹;项楠;张虹【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】2007(036)005【摘要】目的采用转化生长因子-β1(TGF-β1)转基因小鼠,研究高水平的TGF-β1对巩膜厚度以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)水平的影响,以探讨TGF-β在巩膜重塑中的作用及可能的机制.方法应用Alb/TGF-β1(Cys223,225Ser)转基因小鼠模型作为实验对象,同窝出生的C57BL/6J野生型小鼠作为对照组.ELISA法测定血浆TGF-β1浓度.Western blot法测定巩膜组织TGF-β1、MMP-2及TIMP-2浓度,应用Whatman Biometria凝胶分析软件分析Western blot结果.对全眼球经视神经乳头正中石蜡切片进行数码图像分析测定后极部巩膜厚度.结果 TGF-β1转基因小鼠血浆TGF-β1浓度约为野生型对照小鼠的1.68倍(P＜0.01),转基因小鼠巩膜组织中TGF-β1的表达水平是野生型小鼠的2.68倍(P＜0.01),MMP-2的表达水平和野生型小鼠差异无显著性意义,TIMP-2的水平是野生型小鼠的3.15倍(P＜0.01),转基因小鼠后极部巩膜厚度较野生型小鼠显著增厚(P＜0.01).结论 TGF-β1浓度增高会导致巩膜增厚.TGF-β1通过升高TIMP-2的水平抑制MMP-2的活性,从而抑制胶原的降解导致巩膜增厚.【总页数】4页(P655-657,670)【作者】刘海霞;杨坤禹;项楠;张虹【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心,武汉,430023;华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R778.1【相关文献】1.转化生长因子-β(TGF-β)影响豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的研究 [J], 张兰兰;刘琼;于健;唐晓娟;徐静2.不同类型青光眼患者前部巩膜厚度与中央角膜厚度和眼轴长度的相关性分析 [J], 李梅;乔荣华;潘英姿;才瑜;方圆;王捷;3.碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β对人巩膜成纤维细胞的生长调控研究 [J], 傅亚娜;周翔天;付小莹;王教;吕帆;胡诞宁;瞿佳4.转化生长因子β1对人巩膜成纤维细胞Smad泛素化调节因子2和Ⅰ型胶原α1影响的研究 [J], 陈丽娟;陈婷;陈雪兰;叶文文;黄丽娟;胡建民5.巩膜外加压术后视网膜下液厚度与脉络膜厚度的变化 [J], 黄志坚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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• 与人体的SS的发生相类似，N0D.B 10-H2b小鼠SS的发生主要表现为B淋巴细胞的异
常活跃，刺激B细胞的异常增殖，产生过多的自身抗体。 • 有学者通过应用中华眼镜蛇蛇毒因子干预N0D.B 10-H2b小鼠以探究补体在N0D.B 10H2b小鼠SS的发生中所起的作用发现，中华眼镜蛇蛇毒因子由于能够特异性阻断C3
血清中亦能产生多种与SS发生相关的自身抗体，例如抗核抗体(ANA)，抗SSA/Ro，
抗SSB/La，抗120KDaα-胞衬蛋白抗体，抗毒蕈碱受体3抗体以及胰岛细胞自身抗体 等。 • 此外，据报道NOD小鼠血清及唾液腺中亦能找到一些与SS发生相关的细胞因子，例
如IL-10，INF-γ，IL-7，MSCF，IL-17，IL-11，IL-5以及IL-8。
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
1.1.非肥胖糖尿病小鼠(NOD小鼠)
• 除了能够在NOD小鼠胰腺中检测到炎性细胞的浸润，在外分泌腺中亦可发现淋巴细胞 的浸润而导致泪腺炎与涎腺炎。泪腺炎与涎腺炎的发生大约是在12周龄左右。 • 除了泪腺炎与涎腺炎炎性细胞浸润的病理与人类所发生的SS表现相似外，NOD小鼠
•
• •
NOD小鼠不仅是I型糖尿病自发模型小鼠，同时也是SS的自发模型小鼠。
其自发I型糖尿病的主要机理是，NOD小鼠胰腺遭到淋巴细胞的浸润而导致胰腺 炎引起胰腺细胞破坏，最终导致膜岛素的分泌不足。 此外，NOD小鼠具有独特的主要组织相容性复合体(MHC)II类分子H-2g7而导致
NOD小鼠疾病易感性增加。序列位点标记分析显示NOD小鼠I型糖尿病的发生与
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
1.5.IQI/Jic 小鼠
• 尽管直到8周龄左右雌性IQI/Jic小鼠颌下腺与雄性IQI/Jic小鼠泪腺中才检测到明显的 淋巴细胞浸润，但大约在小鼠四周龄左右便可在颌下腺与泪腺中检测到MHCII型分子， CD11c+与CD86+树突状细胞的存在，表明树突状细胞与表皮细胞可能是参与激活
• Ar K0小鼠血清中抗α-胞衬蛋白抗体化及α-胞衬蛋白水解片段与SS患者组织损伤相类 似。 • ArK0小鼠体内并不能检测到抗核抗体。
小鼠转基因干眼模型
2.基因工程模型小鼠：转基因与基因敲除鼠 ：
2.2.Ar K0 小鼠
工程SS小鼠模型，实验诱导型SS小鼠模型三方面论述。
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
• 许多SS自发模型小鼠都起源于非爬胖糖尿病小鼠(NOD小鼠),其中包括N0D.B10H26小鼠，C57BL/6小鼠，N0D-AeclAec2小鼠；其他品系的小鼠有NFS/sld小 鼠，IQI/Jic小鼠以及Aly/aly小鼠。 1.1.非肥胖糖尿病小鼠(NOD小鼠)
120千道尔顿器官特异性的抗原与人体内的α-胞衬蛋白序列是相一致的。但是当利用 免疫荧光标记法检测SS患者血清时，抗α-胞衬蛋白自身抗体与抗SSA/Ro自身抗体和 抗SSB/La自身抗体相比灵敏度与特异性相差较大。
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
1.4.NFS/sld 小鼠
• 到目前为止基因突变NFS/sld小鼠己被运用于多项研究SS发病机理的研究中。 • 利用常规剂量的2,3,7,8-四氯二苯并二恶英干预新生NFS/sld小鼠以探讨环境因素在引 发SS过程中所起到的作用，结果显示2,3,7,8-四氯二苯并二恶英干预后的NFS/sld小
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
1.3.NOD其他衍生杂交小鼠
• 许多其他NOD衍生杂交小鼠被用来检测某些特定的基因与蛋白在原发性SS发病机制 的作用。 • NOD.IFN-γ-/-与NOD.IFN-γ R-/-小鼠外分泌腺并没有外分泌功能的损伤，表明IFN-γ是
引发上皮细胞损伤的关键因素。
时便会出现SS样表现，但此时小鼠的外分泌腺并未遭到破坏并且此时小鼠血清检查 也未发现异常的自身抗体，表明SS的发病还有其他因素起作用。
小鼠转基因干眼模型
2.基因工程模型小鼠：转基因与基因敲除鼠 ：
2.2.Ar K0 小鼠
• 通常情况下，女性出现自身免疫性疾病的概率与男性相比明显要高，表明雌性激素在 自身免疫性疾病的发生过程中能起到重要作用。 • 实验证明雌性激素替代疗法能够明显降低卵巢切除小鼠SS的发病。口服雌性激素能
中存在着AQP5的分布异常。
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
1.6.Aly/aly 小鼠
• Aly/aly小鼠主要是由于常染色体纯合子隐性基因突变而导致淋巴组织发育不全，表现 为系统性淋巴结与集合淋巴结的缺失，脾脏与胸腺结构紊乱。Aly/aly小鼠在14周龄 时开始自发的出现唾液腺以及涎腺炎症，并随着年龄的増长而逐渐加重。
• 组织病理学观察发现，其炎性细胞的浸润主要以CD4+T细胞为主，浸润特征为由导管
周围区域向腺泡小叶逐渐扩散。 • y/aly小鼠的发病特点是泪腺浸润损伤情况比唾液腺更为严重，唾液腺中淋巴细胞浸 润损害较轻，有时甚至无淋巴细胞的浸润。
小鼠转基因干眼模型
2.基因工程模型小鼠：转基因与基因敲除鼠 ：
• NOD Igμ-/-小鼠被用来研究B淋巴细胞与自身抗体在引起SS外分泌腺外分泌功能下降 的机理。 • NOD.IL4-/-小鼠被用来探究TH1与TH2在引起SS唾液腺炎性细胞的浸润与唾液腺外分泌
功能降低所起到的作用，结果表明，虽然在NOD小鼠中可见到明显的口腔干燥表现以
及唾液腺中明显的T淋巴细胞浸润，但在NOD.IL4-/-小鼠并没有出现口腔干燥的症状， 表明TH1与TH2在引起SS小鼠口腔干燥起到决定作用。
淋巴细胞的浸润仅局限于外分泌腺。浸润的淋巴细胞主要为CD4+T淋巴细胞，而见少 量的CD8+T淋巴细胞与B220+B淋巴细胞。活化的CD4+T淋巴细胞则导致唾液腺中 IFN-γ，IL-2，IL-10和IL-12p40 mRNA的表达升高。
• NFS/sld小鼠外分泌腺中亦能检测到导管上皮细胞抗体。NFS/sld小鼠体内检测到的
中生物碱千金藤素能够抑制NFS/sld小鼠中性粒细胞的活性，防止腺泡细胞损伤。
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
1.5.IQI/Jic 小鼠
• 和NOD小鼠一样，IQI/Jic小鼠也是从ICR小鼠培育而来。6月龄的IQI/Jic小鼠唾液腺 及泪腺中能够见到明显的淋巴细胞浸润灶，并且在雌性IQI/Jic小鼠胸腺中B细胞数量 明显增多。
一品系的小鼠将出现与人类相类似的SS。Id3 K0 小鼠在八周龄唾液腺与泪腺导管和 血管周围将出现淋巴细胞的浸润，并且随着年龄的增长浸润情况将加重。 • 6至12月龄时泪腺与唾液腺将只表现为CD4+T淋巴细胞的浸润，12月龄左右时可在血
清中检测到抗SSA/Ro与SSB/La抗体阳性。值得注意的是此系列小鼠早在6到18周龄
2.1.Id3 K0 小鼠
• 转录调节因子Id3能够抑制碱性螺旋-环-螺旋结构域转录因子与DNA的结合从而对免 疫细胞及非免疫细胞的增殖及分化起到调节作用。 • Id3同时也参与T淋己细胞的选择与分化的信号转导。Id3 K0 小鼠的基本特征为免疫
系统的改变，结外边缘区B细胞的增殖，前B细胞残存以及出现MHC限制性。并且这
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
1.4.NFS/sld 小鼠
• 基因突变NFS/sld小鼠具有抑制舌下腺分化的常染色体隐性基因，能够影响腺体中腺 泡细胞分化成粘液分泌细胞。 • NFS/sld小鼠模型α-胞衬蛋白的异常水解是引起小鼠唾液腺损伤的最主要原因。胸腺
切除的NFS/sld小鼠出现α-胞衬蛋白活化，在出生后3天即可出现SS样表现，并且其
够明显减轻雌激素缺乏小鼠T淋巴细胞所介导的涎腺炎以及防止涎腺细胞的调亡。然
而，尚没有有关SS小鼠雌性激素受体缺乏的报道。 • 芳香化酶(Ar)基因主要是调控雌性激素的产生，芳香化酶基因敲除小鼠在12周龄时会 表现出T淋巴细胞的异常增生并且出现SS相类似的表现。这一类小鼠发病的特征是以
B220+细胞浸润为主，导致腺泡细胞结构的破坏以及唾液腺功能的损伤。
• 组织病理学发现IQI/Jic小鼠不光在外分泌腺腺体中能见到明显的淋巴细胞浸润，在其
他非分泌性器官中亦能见到显著的淋巴细胞浸润，例如肾脏、胰腺、肺脏等。值得注 意的是在IQI/Jic小鼠血清中仅能检测到结核抗体的表达水平升高而自身抗SSA/Ro与 SSB/La并没有检测到异常。
• 涎腺炎发生在雌性IQI/Jic小鼠的各年齡段，且随着小鼠年龄的增长涎腺炎症状逐渐加
鼠唾液腺及其他外分泌腺体中能够观察到明显的淋巴细胞浸润。
• 口服粘膜保护剂瑞己匹特(a-[(4-氯苯甲酰基)氨基]-1,2-二氢-2-氧代-4-喹啉丙酸)能够 抑制CD4+T的活性及TH1的产生从而降低了自身抗体的产生。 • 实验证实免疫抑制剂环孢霉素能够明显改善NFS/sld小鼠眼干的症状。从金线吊乌龟
小鼠模型阐述人类SS等多种疾病发生机制。 但是，使用小鼠来模拟人类SS的发生亦存在许多不足；例如，人与小鼠的居住环境 差异，进化史的不同，人与小鼠的固有免疫和适应性免疫间存在差异等。所以在我们
使用小鼠模拟人类SS发生时，须注意SS小鼠仅能反映出SS的某一些或某一类的特征，
而不能表现出其整个发病过程的特征。 • 此外，由小鼠模型所得出的实验数据应参考各品系小鼠不同的遗传背景及各自特点进 行综合分析，这样得出的实验结果才真实可靠。下面主要从SS自发小鼠模型，基因
分子而降低小鼠外分泌腺腺体淋巴细胞的浸润以及结核抗体(ANA)的表达水平。
• 亦有学者运用N0D.B 10-H2b小鼠探究性激素在SS发病过程中所起作用，表明卵巢切 除的N0D.B 10-H2b小鼠患SS的几率明显上升且症状表现突出，经激素替代疗法后可 得到明显的改善。 • 此外有报道显示表没食子儿茶没食子酸醋及绿茶提取物皆能改善NOD与N0D.B 10H2b小鼠的SS。