银杏叶总黄铜的提取
大孔吸附树脂分离纯化银杏叶总黄酮的研究
大孔吸附树脂分离纯化银杏叶总黄酮的研究李月;陈莹【摘要】利用4种大孔吸附树脂分离纯化银杏叶总黄酮.结果表明,HPD100型大孔吸附树脂最适合分离纯化银杏叶总黄酮,该树脂的静态饱和吸附量(以干树脂计)为63.8 mg·g-1,静态洗脱率为91.2%,动态饱和吸附-洗脱量为14.0 mg·g-1,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为4倍树脂体积,树脂可重复使用7个周期.%The total flavones from Folium ginkgo leaves were seperated and purified by four kinds of macroporous adsorption resin. The results showed that resin HPD100 was the most efficient one with static adsorption capacity of 63.8 mg·g-1, static elution rate of 91.2% and dynamic saturated adsorption capacity of 14.0 mg·g-1 with 4 BV 70% ethanol as elutingreagent.Furthurmore,resin HPD100 could be repeatly used for 7 cycles.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2009(026)007【总页数】3页(P55-57)【关键词】银杏叶总黄酮;大孔吸附树脂;分离纯化【作者】李月;陈莹【作者单位】中国医科大学附属第一医院药剂科,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学附属第一医院药剂科,辽宁,沈阳,110001【正文语种】中文【中图分类】TQ461大孔吸附树脂是一类有机高聚物吸附剂，广泛应用于中草药化学成分的分离与富集。
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
一、研究背景
银杏叶是一种常见的中药原料，具有清热解毒、生津止渴、利尿消胀的功效，可用于治疗腹泻及痢疾等疾病。
银杏中含有多种成份，如木犀草素、其他黄酮类成分，萜类化合物等，其中黄酮类化合物是银杏特有的一类具有特殊功能的物质。
随着对中药中有效成分含量研究的深入，对银杏叶中黄酮类成分及含量测定分析方法的研究受到了众多研究者的高度重视。
二、银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
1. 红外光谱
红外光谱是一种快速、灵敏的分析方法，可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，并对其含量进行快速测定分析，但是其准确性受到样品稳定性等因素的限制。
2. 液相色谱
液相色谱可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，也可以对其含量进行准确的测定，且具有准确度高的优点。
3. 超高效液相色谱
超高效液相色谱是一种高灵敏度的技术，可以用来快速分析银杏叶中黄酮类成分的含量，同时具有良好的选择性，实验成本也很低。
4. 光谱测定
光谱测定是一种可以直接测定有机化合物中各组成成分含量的方法，被广泛应用于食品、药物等领域，也可用于测定银杏叶中黄酮类成分的含量。
三、结论
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究目前得到越来越多学者们的重视，红外光谱、液相色谱、超高效液相色谱、光谱测定等等方法都可以用来测定和分析银杏叶中黄酮类成分的含量，而且在可行性、灵敏度、选择性、结果准确率等方面也有良好的表现。
银杏叶中黄酮类化合物的提取
银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺
常规提取法的溶剂一般选用水，醇水溶液，酮 水溶液。醇酮对黄酮成分提取率相近，而水的提 取率比较低，考虑到提取物的收率，提取溶剂的 成本以及操作安全陛，使用乙醇水溶液比酮水溶 液和水更合适。
恒压滴液漏斗法
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1、向恒压滴液漏斗中加入10克银杏叶粉末。 2、向烧瓶中加入200ml70%乙醇和适量沸石。 3、冷凝回流，水浴加热，进行连续萃取。 4、恒压滴液漏斗中的银杏叶粉末逐渐变白，烧瓶中的液 体变为绿色。 5、将萃取液进行减压蒸馏，得银杏浸膏粗产物，称重， 计算产率。 6、在500ml烧杯中，将银杏浸膏粗产物加250ml去离子水， 搅拌均匀。 7、再将此溶液转移至分液漏斗（大于350ml）中，分别用 60ml二氯甲烷萃取三次。合并萃取液。 8、用无水硫酸钠干燥。用旋转蒸发器蒸去二氯甲烷，蒸 馏剩余物为黄酮提取物。经干燥后称重，计算产率。
• 2-苯基色原酮分子结 构图
黄酮类化合物的六种结构式：
黄酮类化合物的理化性质
• 黄酮类化合物除少数游离外，大多与糖结合成苷。糖基多连在C8或C6 位置上，连接的糖有单糖（葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等），双糖（槐 糖、龙胆二糖、芸香糖等）、叁糖（龙胆三糖、槐三糖等）与酰化糖 （2-乙酰葡萄糖、吗啡酰葡萄糖等） • 黄酮类化合物多为结晶性固体，少数为无定型粉末。 • 黄酮苷元一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚 等有机溶剂，易溶于稀碱液。黄酮类化合物的羟基糖苷化后，水溶性 相应加大，而在有机溶剂中的溶解度相应减少。黄酮苷一般易溶于水、 甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等 有机溶剂。黄酮类化合物因分子中多有酚羟基而呈酸性，故可溶于碱 性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。有些黄酮类化合物在紫 外光（254nm或365nm）下呈不同颜色的荧光，氨蒸汽或碳酸钠溶液处 理后荧光更为明显。多数黄酮类化合物可与铝盐、镁盐、铅盐或锆盐 生成有色的络合物。
银杏叶中总黄酮的提取和测定_唐婧
第30卷第5期Vol 130 No 15长春师范学院学报(自然科学版)Journal of Changchun Normal Universi ty(Natural Science)2011年10月Oct.2011银杏叶中总黄酮的提取和测定唐 婧,郑胜彪,朱金坤(安徽科技学院理学院,安徽凤阳 233100)[摘 要]本试验比较了有机溶剂浸提法和超声波法提取总黄酮的效果,选择提取率较高的超声波法来提取。
对料液比、超声时间和乙醇体积浓度对银杏中总黄酮提取效果的影响进行了单因子试验,并采用正交试验法找出最佳提取条件为料液比1g B 30mL 、超声时间30min 、乙醇浓度70%。
采用紫外可见分光法检测黄酮类化合物的含量,不加显色剂,直接以258nm 作为最大吸收波长。
结果表明,银杏中总黄酮的平均含量稳定在2177%,精密度的RSD 为01302%,该方法的平均回收率为10013%。
本试验方法样品处理简单,准确度高,精密度好,适合于银杏叶中总黄酮的提取和测定。
[关键词]银杏叶;黄酮;正交试验[中图分类号]R284[文献标识码]A[文章编号]1008-178X(2011)05-0063-05[收稿日期]2011-07-19[作者简介]唐 婧(1982-),女,安徽马鞍山人,安徽科技学院理学院助教,从事天然产物分析研究。
银杏(Ginkgo biloba L 1)又名公孙树,是我国的特产植物,其叶中含有丰富的的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有改善心脑血管循环、抵制血小板活化因子、降低胆固醇、抗病毒、防癌抗癌以及清除自由基等功效[1-2]。
我国拥有世界银杏树资源的70%以上,其提取方法常见报道。
通过对银杏叶中黄酮类化合物最佳提取条件的研究,可提高叶片黄酮提取率,最大化地实现银杏叶的药用和经济价值,使我国丰富的银杏树资源得到更加有效的利用。
本实验以芦丁为对照品。
芦丁(Rutin),又称芸香甙(Rutioside),属于黄酮苷类化合物,具有多种药用、生理活性作用,临床上用于治疗各种因毛细血管脆性增加而引起的出血性疾病[3],如高血压等。
微波辅助法提取银杏叶总黄酮的研究
银杏 （ Ｇ ｉ ｎ ｋ ｇ ｏ ｂ ｉ ｌ ｏ ｂ ａ １ ） 系 银 杏 科 植 物 ，具 有
碳 超 临 界 提 取 法 、酶 解 法 、超 声 波 提 取 法 等 １ ］ 。 有 机 溶剂 提取 排污 量大 ；水 或热 水 提 取法 效 率 低 ； 氧化碳 超 Ｉ 临界 提 取 法 、酶 解 法 成 本 较 高 ；微 波 提取 法设 备 简 单 ，提取 效 率 高 ，是 一 个 比较 好 的
１ ． ２ ． ２银 杏 叶总 黄酮 样 品溶 液制 备 先 把 银 杏 叶粉
于紫外荧光灯下观察 ，显黄色斑 点。② 浓氨水溶
液 ：将样 品 点 在 纸 上 ，干 燥 后 ，将 滤 纸 在 浓 氨 水 瓶上 熏 ，立 即置 于荧 光 下 呈 现 极 明显 的 黄 色 荧 光
斑点 。
碎 、干燥 ，称取银杏 叶粉末 １ ｇ ，按 比例 加入一定 浓度乙醇作溶剂 ，置于微波设备 中提取浓缩 ，提 取液过滤 ，加 ３ ０ ％的乙醇溶解定容于 ５ ０ ｍ Ｌ ，摇匀
提取 方法 。因 此 ，本 实 验 用 微 波 辅 助 有 机 溶 剂
欣赏、经济 、药用等 多种价值 。近年来 ，银 杏叶
的药用 价值 备受关 注 ，引得 广 大学 者 去研 究 探讨 。 已发现 的 银 杏 叶 化 学 提 取 物 有 上 百 种 ，其 中主 要 有 黄酮类 、萜 类 、酚 类 、生 物 碱 等 ，而 近 年 来 的 研 究表 明 ：黄酮 类 物质 是银 杏 叶 的 主要 有效 成 分 。 黄酮类 化合 物 的结 构 特 点 是 具 有 Ｃ ６一ｃ ３一ｃ ６的 基 本 骨 架 ，根 据 中 间 三 碳 链 的 氧 化 程 度 、Ｂ 环 （ 苯基 ）连 接 位 置 （ ２一或 ３一位 ） 以及 三碳 链 是 否呈环 状 等特 点 ，分 为许 多类 型 ：黄酮 、黄酮 醇 、 二氢 黄 酮 、二 氢 黄 酮 醇 、异 黄 酮 、二 氢 异 黄 酮 、 查尔 酮等 化 合 物 ¨ 。现 已证 实 ，银 杏 叶 中含 有 的 黄酮类 化 合 物 具 有 优 异 的抗 氧化 活性 、抗 肿 瘤 活 性 、防治 心 血 管 疾 病 和 增 强 免 疫 力 等 作 用 。正 是 其上 述众 多 的 生 物 活 性 引 起 了 人 们 的 广 泛 重 视 ，
银杏黄酮制备实验
实验四、银杏黄酮的提取与检测一、实验目的：1、了解黄酮类物质的分离提取和检测方法。
2、了解大孔吸附树脂的特性和在生化分离中的应用。
二、实验原理：1、提取原理溶剂加到原料中进行提取的过程中，由于扩散、渗透作用，逐渐通过细胞壁透入细胞中，溶剂进入细胞后溶解可溶性物质，造成了细胞内外浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入植物细胞中，可溶性成分不断被提取出来，如此多次反复，直到细胞内外浓度相等，达到动态平衡为止。
2、大孔吸附树脂纯化原理：大孔吸附树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸附剂，是在离子交换剂和其它吸附剂应用基础上发展起来的一类新型树脂，为用于固体萃取而设计。
是依靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作的。
大孔吸附树脂吸附能力高，易解吸，内部微孔即多又大，表面积也大，具有较多的活性中心，使离子、分子扩散速率增大，交换速度加快，在使用上可以缩短生产周期，提高效率，而且大孔吸附树脂可以进行再生重复使用，因此使生产成本大为降低，适于工业化生产。
3、银杏黄酮含量的分光光度法测定原理黄酮类化合物的测定使用较广泛的是络合—分光光度法，该法的基本原理是，黄酮类化合物分子结构中，凡在C 3或C 5位上有羟基，都会与铝盐形成有颜色的配位化合物，见图：O O OAl 2+O OOAl2黄酮和铝盐的络合物芦丁因此，银杏叶中的黄酮类化合物包括单黄酮、双黄酮和黄酮苷都能与铝盐形成络合物，比色测定结果是总黄酮含量。
硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在500波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般与芦丁标准系列比较定量.如果细说,硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮，再加硝酸铝络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2’羟基查耳酮而显色.它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的.三、仪器：电子天平（0.1mg ）、紫外分光光度计、恒温水浴摇床、电热恒温水浴锅、索氏提取器、电热恒温干燥箱、微波炉、超声波破碎仪、超声波清洗机、旋转蒸发器、循环水式真空泵、布式漏斗、真空抽率瓶、真空泵。
银杏叶提取黄酮及分离纯化
银杏叶提取黄酮及分离纯化组员：李佳辉、黄埔、赵超武一、实验目的1.掌握传统的溶剂提取法并对银杏中的黄酮进行提取2.掌握紫外分光光度计的应用，以及相关溶液的配置3.学会自主设计实验，培养团队合作精神二、实验原理⑴关于黄酮：银杏中最具药用价值的成分，有提高人体免疫力的作用；并且抗衰老、调节内分泌，还具有抗炎、抗真菌的作用；⑵实验需设置空白参比液，由文献资料可知芦丁标准液的最大波长大概为510nm;⑶本实验采用硝酸铝（氯化铝）法测定银杏叶总黄酮的质量浓度，因为黄酮类化合物可以与铝盐发生络合显色反应。
其主要原理为：在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下，黄酮类化合物与铝盐发生螯合反应，加入氢氧化钠溶液后，溶液显橙红色，在510nm（左右）处有吸收峰，且符合定量分析的朗伯—比尔定律（即A=kbc）一般与芦丁标准溶液比较定量。
先用亚硝酸钠还原黄酮类化合物，再加铝盐络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2-羟基查尔酮而显色。
显色原理发生在黄酮醇类邻位无取代的邻二酚羟基部位，不具有邻位无取代的邻二酚羟基的黄酮类成分加入上述试剂时是不显色的。
（如二氢黄酮类化合物就不发生该显色反应）目前银杏叶黄酮的提取方法主要有：溶剂提取法、超临界流体萃取法（SFE法）、高速逆流色谱技术提取法（HSCCC)微波提取法、超色波提取法、酶提取法、分子烙印技术。
因溶剂提取法操作简单，所需试剂廉价易得，故通常使用此法来进行大规模生产。
其工艺流程如下：银杏叶—→粉碎—→NaOH-60%乙醇回流提取—→离心—→过滤—→滤液收集—→二次醇提—→合并两次滤液—→树脂吸附—→脱吸—→浓缩—→干燥—→提取物由于银杏叶黄酮中的类黄酮主要为芦丁，故用芦丁为对照物绘制标准曲线，并采用分光光度法进行测定。
三．实验材料及器材1.材料酸银杏叶、芦丁、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、95％乙醇、磷酸氢二钠、磷二氢钠、D101大孔吸附树脂、盐酸2.相关溶液的配制和树脂预处理0.20mg／mL芦丁标准溶液（500mL）、5％NaNO2（500mL）、10％AI(NO3)3（500mL）、1mol／LNaOH 、0.4mol／LNaOH（500mL）、0.4mol ／L HCl(500mL)、30%乙醇（500mL）30%乙醇（1）D101树脂预处理(500g)：商品树脂均残留惰性溶剂，故使用前根据应用需要，必须进行不同深度的预处理，在提取器内，加入高于树脂层10-20厘米的乙醇浸泡3—4小时，然后放净洗涤液，为一次提取过程。
超声波／回流法银杏叶总黄酮提取的研究
较； 同时 对超声 波 提 取 方法 的各 项 影 响 因 素 进 行 了
（ 材采 购站 ） 药 。
１２ 银杏 叶中黄酮 的提取 ．
将银 杏 叶烘 干 ， 碎备 用 。 粉
１２ １ 回流热 提 取 法 ．．
分别称取银杏叶 ５ 入 ３ ｇ置
个 圆底烧 瓶 中 ， 别 加 入 ９ ％ 乙醇 ３ ｍ ， 热 回流 分 ５ ０ Ｌ加
超 声 波提 取银 杏 叶总 黄 酮 比 回流 法提 取 率 高 ，
２ ２ ２ 温度 分 析 ．．
超声 波提 取 温 度 分别 设 定 在 ０ 、
５ １ 、５ ２ ℃ ， 取 时 间 ２ ｍ ｎ 然 后 过 滤 ， 压 蒸 、Ｏ １ 、ｏ 提 ５ ｉ， 减 馏 ， 别得 浓缩 液 。 分 ２ ２ ３ 提取 次数 分析 ．． （ ） 回流 状 态 下 ， 别提 取 １ ２ ３ ４ ５次 ， １在 分 、、 、 、 每
３ （ 间 分 别 为 ６ 、０ １ｒｎ ， 热 过 滤 ， 并 ３ 次 时 ０ ３ 、５ ｉ） 趁 ａ 合
超高压提取银杏叶总黄酮技术研究
（ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｆ ｏ ｏ ｄ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｉ ｒ ｎ ｇ ， Ｎ ｏ ｒ ｔ ｈ ｗｅ ｓ ｔ Ｓ ｃ ｉ － Ｔ ｅ ｃ ｈ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ａ ｇ ｉ ｒ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ ， Ｙ ａ ｎ ｇ ｌ ｉ ｎ ｇ ７ １ ２ １ ０ ０ ， Ｓ ｈ ａ ａ ｎ ｘ ｉ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
超高压提取银杏叶总黄酮技术研究
姜莉 ， 徐怀德 ， 李海鹏
（ 西北农林科技大学 食 品科学与工程学院 ， 陕西 杨凌 ７ １ ２ １ ０ ０ ）
摘 要： 采用不 同浓度 的乙醇为溶剂通过超 高压提取银杏叶黄酮类物质。 结果表明 ： 压力４ ０ ０ ＭＰ ａ 、 ３ ０ｍ ｉ ｎ 、 ３ ０ ％乙醇
的条件 下提取 物 总 黄 酮提取 量最 高达 到 ５ ５ ． ９ １ ７ ０ ｍｇ ／ ｇ ，在 ３ ０ ０Ｍ Ｐ ａ 、 ３ ０ｍ ｉ ｎ 、 ３ ０ ％ 乙醇 的 条件 下最低 达 到 ３ ６ ． ７ ３ ８ ０ ｍ ｇ ／ ｇ ， 均 高于对 照样 品最 高 ２ ９ ． ９ ５ ２ ０ ｍｇ ／ ｇ的水 平 。 通过 压 力 、 时间、 溶剂 浓度 三 因素 正 交试 验 优 化 得 到 组 合 ３ ０ ０ ＭＰ ａ 、 ４ ０ ｍ ｉ ｎ 、 ６ ０％ 乙醇 ， 总黄 酮提 取 量 最 高 为 ５ ６ ． ７ ９ ７ ８ ｍｇ ／ ｇ 。 关键词 ： 银杏 ； 提取 ； 黄 酮； 超 高压
银杏 （ 又名 白果 ） ， 属 裸子植 物 门银杏科 ， 为新生
段， 从而加速有效成 分进人溶剂 ， 提 高提取效果 ， 缩短
分光光度法测定银杏叶中的总黄酮探讨
分光光度法测定银杏叶中的总黄酮探讨摘要：总黄酮是自然界中植物次生代谢产物，具有较高的药用价值，测定银杏叶中总黄酮含量对于药品研究与制备具有极为重要的意义。
分光光度法是物质测定中比较常用的检测方式，相较于其他测定方法而言分光光度法的测定便捷，准确率较高，具有良好的应用价值。
分光光度法用于银杏叶总黄酮测定中能够利用其波长吸收度，了解银杏叶中总黄酮含量，探讨其最佳提取条件。
关键词：分光光度法；银杏叶；总黄酮银杏叶是自然界常见植物类型，其内部富含丰富的化学成分，在各类药物的制备中常用银杏叶入药，从而完成药品制备。
在银杏叶中各类有效成分中，总黄酮是广泛认同的具有较高应用价值的有机化合物，总黄酮属于黄酮类化合物具有改善心血管功能、止咳平喘、抗菌消炎等优质作用，总黄酮广泛存在于植物次生代谢物中，因此银杏叶中总黄酮的组成也较为丰富[1]。
但在实验室研究中，由于银杏叶本身所富含的丰富化学成分，想要有效测定银杏叶中总黄酮含量具有一定难度。
先进的分析和计量仪器能够对银杏叶总黄酮进行有效测定，其中分光光度法作为目前物质测定中最常用且相对便捷的测定方式能够利用银杏叶内总黄酮的特殊显像规律以及其在不同波长下的吸光度对其进行含量测定，从而达到良好的检测结果[2]。
分光光度法是一种操作便捷准确性相对较高的检测方式，而应用其进行银杏叶总黄酮的测定，也需要充分注意实验仪器的选择和实验方法的有效控制，尽可能保证检测的稳定性与结果的准确性。
一、实验仪器及原理1、仪器与试剂仪器：UV757CRT紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司），FA1004型电子天平（上海精密天平厂）。
试剂：70%乙醇、无水乙醇、三氯甲烷、三氯化铝、无水硫酸钠、银杏叶、98%芦荟丁。
所有仪器在检测前均按照国家计量检定要求，进行校正检定。
2、实验原理对总黄酮处在特定波长范围内光的吸收度，对其进行定性定量分析，由于总黄酮物质的含量不同，对光的吸收程度也不同，因此利用其特有的吸收光谱进行总黄酮存在测定，利用其光吸收程度测定总黄酮物质含量。
生物制药综合实验讲义
实验一银杏叶总黄酮的提取及测定1 实验目的（1）掌握银杏叶中黄酮的提取方法；（2）掌握银杏叶中黄酮的含量测定。
2 实验原理近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。
目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。
本实验采用有机溶剂浸提法提取银杏叶总黄酮，运用芦丁法测定银杏叶总黄酮含量。
3 实验材料、试剂和主要仪器3.1 实验材料与试剂银杏叶，芦丁标准品，无水乙醇，NaNO2，Al(NO3)3，NaOH。
3.2主要仪器移液枪，圆底烧瓶，水浴锅，旋转蒸发仪，布氏漏斗，容量瓶，10 ml刻度管，酶标仪。
4 实验步骤4.1银杏叶黄酮的提取称量2 g银杏叶放入圆底烧瓶中，加入100 ml 80%乙醇于圆底烧瓶中，于80℃下热回流提取2h，用漏斗过滤，弃渣留滤液，滤液用旋转蒸发仪浓缩并转入100 ml容量瓶中，用30%的乙醇定容，摇匀，供检测使用。
4.2芦丁标准曲线的绘制用80%乙醇配制0.03%（0.3 mg/ml）的芦丁标准储备液。
分别吸取刚配制好的芦丁标液0.0，15.6，31.3，62.5，125，250，500 μl置于7个1.5 ml EP管中，用80%的乙醇补足至0.5 ml，依次编号0~6，加入30 μl NaNO2（5%），摇匀静置6 min后加入30 μl A1(NO3)3 （10%），摇匀静置6 min后再加入400 μl NaOH （4%），混匀，用80%乙醇补至1 ml，静置l5~20 min，以0号试管为空白，用酶标仪在510 nm波长处测定吸光度，以吸光度(A)为横坐标，芦丁浓度(μg/ml)为纵坐标，绘制标准曲线。
4.3总黄酮含量的测定做2个样，取适量提取液置于1.5 ml EP管中，用80%乙醇补充至0.5 ml，加入30 μl NaNO2（5%），摇匀静置6 min后加入30 μl A1(NO3)3（10%），摇匀静置6 min后再加入400 μl NaOH（4%），混匀，用80%乙醇补至1 ml，静置l5~20 min，以0号试管为空白，用酶标仪在510 nm波长处测定吸光度。
总黄酮的提取和测定
总黄酮的提取和测定实验原理黄酮类化合物是植物的重要次生代谢产物，也是一些保健品和中药材的有效成分之一。
黄酮类化合物的定量方法常用的有 HPLC法和分光光度法，在实际生产和科研过程中，对于黄酮单体的定量常采用HPLC法，而对总黄酮的测定，考虑到方法的简便、快捷以及可行性，多采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。
在碱性条件下黄酮类化合物与铝盐形成络合物、在500nm波长处有最大吸收峰。
标准品选用芦丁。
试剂和器材一、试剂芦丁标准品。
5％NaNO2；10%A1(NO3)3；5％NaOH；70％乙醇。
二、材料新鲜银杏叶。
三、器材容量瓶10ml（×7），25ml（×1），100ml（×2）；吸管 0.5ml（×2），1ml（×2），2ml（×1），5ml（×1）；分光光度计。
操作方法一、制作标准曲线精密称取芦丁标准品5mg，用70％乙醇溶解，定容于25mL容量瓶中，摇匀，得0．2mg／mL的标准溶液。
精确吸取标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL，分别置于10mL容量瓶中，加入 5％NaNO2 0.4mL，摇匀，放置6min；加入10%A1 (NO3)3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入5％NaOH 4.0mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min。
以试剂空白作为参比溶液。
用1cm比色皿，在500nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。
二、总黄酮的提取把新鲜的银杏叶低温烘干，使水分小于8％，制成干粉。
精确称取干粉1．0g，置于 100mL容量瓶中，加入70％乙醇30mL，浸泡24h。
超声波提取30min，过滤，滤液用70％乙醇定容于100mL容量瓶中，得到黄酮提取液，待用。
三、测定吸取黄酮提取液1.00mL, 置于10mL容量瓶中，加入5％NaNO3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入10%A1(NO3)3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入5％NaOH 4.0mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min。
银杏叶中黄酮类化合物的提取
随着时间的↑ 随着时间的↑黄 酮类化合物提取 4h之前 率↑ ，4h之前 时间↑ 时间↑提取率的 影响比较明显， 影响比较明显， 4h之后时间的 之后时间的↑ 4h之后时间的↑ 提取率增加变缓。 提取率增加变缓。
实验条件：温度 ℃ 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：温度80℃ ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
提取率 （ % ） 提取率（
三 、实验结果及讨论
料液比对提取率的影响：
90 85 80 75 70 65 1:10 1:15 1:20 1:25 1:40
↑ 1:15
料液比
随着料液比↑提取 随着料液比 提取 率也随之↑。 率也随之 。在 1:15之前，对提 之前， 之前 取率的影响比较 明显， 明显，在1:15之 之 后，对提取率影 响变小。 响变小。
芦丁的化学结构式
二、研究内容
测量波长的选取： 测量波长的选取：
1.5 1.2
0.9 0.6 0.3 0 400 450 500 550 600
500nm ↓
波长( nm） 波长 ( nm ）
根据吸收光谱可 知，该有色溶液在波 nm具有最大吸 长500 nm具有最大吸 光度， 光度，且吸收范围较 宽，所以选择吸收波 nm作为定量测 长500 nm作为定量测 定波长。 定波长。
80 70 60 50 40 50 60 70
↑ 80℃ ℃
80
90
100
温度（ 温度 （ ℃ ）
浸取温度的↑ 浸取温度的↑提 取率液随着↑ 取率液随着↑ 。 80℃之前提取率 ℃ 增加迅速， ℃ 增加迅速，80℃ 之后， 之后，温度对提 取率的影响变小。 取率的影响变小。
实验条件：时间 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：时间4 h ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
银杏叶总黄酮提取工艺研究进展及应用
银杏叶总黄酮提取工艺研究进展及应用摘要：本论文综述了银杏叶中总黄酮的提取方法，包括溶剂萃取法、超声辅助酶法、超临界二氧化碳萃取法等，在此基础上提出低共熔溶剂对银杏叶总黄酮的提取并进行了展望，以期为低共熔溶剂的提取提供借鉴和参考。
银杏(Ginkgo biloba L)为银杏科银杏属植物，据记载银杏叶的医药价值自宋朝起就得到重视，《日用本草》、《本草纲目》、《本草品汇精要》等书籍均对银杏叶的医药价值有所记载，其资源分布广泛，中国为银杏资源分布大国，占世界比重达到85%，其主要分布在中国贵州、四川、江苏等省区。
银杏叶含有丰富的类黄酮、乙二醇、多糖等活性物质，可用于食品、医药、生物农药等领域；具有抗菌、消炎功效，是生产生物农药的良好原料[1]。
1 银杏叶总黄酮传统提取工艺1.1 溶剂萃取法溶剂萃取法是较为常见的一种提取方法，以乙醇、甲醇等有机溶剂为萃取溶剂，从植物中提取总黄酮。
其基本原理是根据不同的黄酮的极性，选用不同的有机溶剂进行萃取。
溶剂萃取法相较于其他提取方法更为简单简便，但也具有易挥发，操作不当会发生爆炸等安全问题的缺点[2]。
徐桂花等[3]选择银杏叶作为研究对象，通过对其最佳提取工艺的的研究，当采用溶剂萃取法提取银杏叶总黄酮时的提取条件为液料比为40:1(mL/g)，乙酵体积分数为75%，于70℃下提取4h，此时总黄酮得率达1.084%。
1.2 超声辅助酶法在提取前先对银杏叶粉末用酶进行预处理，达到一种破除细胞壁加速黄酮释放的作用，再利用超声波的强震、强速度、强的超声波空化作用，使天然产物的细胞壁受到强烈的损伤，从而促进了黄酮的释放，促进药物的渗透速度，缩短了提取时间，增加了有效成分的利用率。
通过对超声波提取方法的研究，证明该方法的最佳超声时间为20分钟，可以避免由于长时间的超声波作用而引起的活性物质的分解，以及由于时间的推移引起的杂质的增多，从而降低了能量消耗，从而达到节能、省时、高效的目的[4]。
银杏叶中总黄酮的提取工艺研究
银杏叶中总黄酮的提取工艺研究银杏叶是一种常见的中药材，具有多种药理作用，其中总黄酮是其主要有效成分之一。
因此，提取银杏叶中的总黄酮具有重要的研究价值和应用前景。
本文将介绍银杏叶中总黄酮的提取工艺研究。
一、总黄酮的提取方法目前，常用的总黄酮提取方法主要有超声波法、微波法、超临界萃取法、水提法、乙醇提法等。
其中，乙醇提法是最常用的方法之一，其操作简单、成本低廉、提取效果较好。
二、提取工艺的优化1.提取溶剂的选择乙醇浓度是影响提取效果的重要因素之一。
一般来说，乙醇浓度越高，提取效果越好。
但是，过高的乙醇浓度会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取溶剂的选择上进行优化。
2.提取时间的控制提取时间是影响提取效果的另一个重要因素。
一般来说，提取时间越长，提取效果越好。
但是，过长的提取时间会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取时间的控制上进行优化。
3.提取温度的控制提取温度是影响提取效果的另一个重要因素。
一般来说，提取温度越高，提取效果越好。
但是，过高的提取温度会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取温度的控制上进行优化。
三、总结总黄酮是银杏叶中的主要有效成分之一，其提取工艺的优化对于提高提取效果具有重要的意义。
在提取工艺的优化过程中，需要选择合适的提取溶剂、控制提取时间和提取温度，以达到最佳的提取效果。
未来，还需要进一步深入研究银杏叶中总黄酮的提取工艺，以提高其应用价值。
银杏叶中总黄酮的提取
银杏叶中总黄酮的提取
1 银杏叶中总黄酮的提取
银杏叶是以银杏树(Ginkgo biloba L.)叶片为原料，是世界上著名的汉药，具有活血、散瘀、抗氧化和神经保护等功效。
其中，总黄酮是其最重要的活性成分之一，具有明显的保护神经及消除氧自由基的功效。
因此，总黄酮的提取技术对于银杏叶药材活性成分的研究具有重要意义。
2 材料与方法
银杏叶样品（湖南洞庭湖产）500克，70%乙醇(200mL)，6次甲醇-水混合溶剂，1次甲醇提取。
多相混合物高效液相色谱法，仪器模式为Agilent1220树脂柱（AgilentC18(250mm×4.6mm，5μm)），流动相为缓冲溶液：锂溶液50mmol/L，流速A=0.2mL/min，B=0.2mL/min;从低比重A=0%，到高比重B=25%，线性升温时间15min。
常规参数为254nm检测器，测定波长320nm处的量值;样品灌注量20μL。
3 结果
提取中，银杏叶中总黄酮的提取量为2.37g，其含量约为0.47%。
除此之外，还检测到银杏叶中其他成分，其中主要成分为黄酮类化合物RG3、G4。
4 结论
通过对银杏叶中总黄酮的提取，证明了多相混合物高效液相色谱法是一个实用的提取技术，能够在银杏叶中有效提取总黄酮。
这种技术无论在提取效率，还是提取纯度方面，都获得较高的效果。
银杏叶中黄酮类化合物的提取
银杏叶中黄酮类化合物的提取，一般采用以下方法：
乙醇提取法：将银杏叶粉末与乙醇混合，浸泡一段时间，然后进行加热提取。
提取后的溶液经过过滤、浓缩、结晶等步骤，可以得到黄酮类化合物。
超临界流体提取法：将银杏叶粉末与超临界二氧化碳混合，进行提取。
该方法操作简便、效率高，可以得到高纯度的黄酮类化合物。
水提取法：将银杏叶粉末与水混合，加热提取，再通过蒸发浓缩、冷却结晶等步骤，可以得到黄酮类化合物。
超声波提取法：将银杏叶粉末与溶剂混合，在超声波作用下进行提取。
该方法操作简便、时间短，但需要注意超声波的功率和时间，以避免对黄酮类化合物的破坏。
以上几种方法各有优缺点，具体选择哪种方法应根据实际情况进行选择。
同时，提取过程中应注意控制温度、pH值等因素，以保证黄酮类化合物的稳定性和纯度。
银杏叶中黄酮的提取原理及方法)
银杏叶中黄酮提取及含量测定一、实验目的提取银杏叶中的总黄酮并测定其含量。
二、实验原理银杏系银杏科银杏属落叶乔木，银杏叶中含有多种生理活性成分，其中黄酮类化合物是重要的生理活性物质，具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。
因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。
银杏叶黄酮类化合物的提取方法目前研究的有水浸取法，成本低但浸取率低；有机溶剂浸取法中，乙醇浸取的效率高且无毒，是目前采用较多的方法；韩玉谦等采用超临界流体萃取法，在70%乙醇溶液中加热回流法和CO2 超临界流体萃取法提取银杏叶中的活性成分，银杏黄酮回收率为84 .4 % ，是常规萃取法回收率的2倍多；乙醇超声波浸取法, 黄酮提取率可达到8 6 . 7 %。
银杏黄酮含量的测定常用分光光度法和高效液相色谱法。
分光光度法自20世纪9 0年代以来一直是用来测定银杏黄酮的一种重要方法, 由于其成本低、便于操作等特点, 是一种快捷有效的方法[1]。
本实验采用乙醇作溶剂进行索氏提取，建立了用Al(NO3)3显色法对芦丁标准品和银杏叶提取液进行光谱扫描测定银杏叶总黄酮含量的方法[2]。
三、实验仪器和试剂材料：银杏叶粉末50g试剂：标准芦丁样品，无水乙醇（600ml），50mlAl(NO3)3（0.1mol/L），乙醚，5%NaNO2溶液，10%AL(NO3)3，4%NaOH溶液。
仪器：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、烘箱、烧杯、容量瓶（100ml1个、50ml1个、10ml6个）、索氏提取器、减压蒸馏装置、锥形瓶、沸石等。
四、实验步骤1.1提取银杏叶中总黄酮（1）将银杏叶洗净, 在103℃下烘干至恒重,用研钵捣碎制得银杏叶粉（2）准确称取10.0g，置于索氏提取器中，按下列条件加热回流提取：乙醇浓度80％，料液比1：20(g／ml)，回流温度85℃，回流时间2 h，平行进行1~3次实验。
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银杏叶总黄铜的提取
工艺方法2009-03-01 10:31:55 阅读254 评论0 字号：大中小
1.银杏叶总黄铜的提取
银杏叶干粉，用甲醇于60-70℃回流提取4-6h，提取液过滤蒸去甲醇后，将残留的糖浆样物料分散于水中，用氯仿萃取除去其中的类脂化合物和叶绿素，水溶液经离子交换树脂Amborlite×AD-7，甲醇洗脱，浓缩洗脱液至干粉状即为粗品。
其中以双黄酮为主的黄酮化合物含量为30.1%。
2.银杏叶总黄铜与银杏叶内酯的提取（）
银杏叶阴干粉碎，以65%乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取液600C减压浓缩成浸膏。
加水沉降3次，每次加水量为浸膏体积的6倍、2倍、和1倍，第一次水中加ZTC澄清剂，取ZTC-AⅡ用水溶解成1%溶液，溶24h，另取ZTC-BⅡ用1%乙酸溶解成1%溶液，溶24h，先加入体积2%的1%ZTC-AⅡ溶液，搅匀30min后，再加入等量的1%ZTC-BⅡ溶液，搅匀30min，升温至40C搅匀30min，静置8h后，得
红棕色澄明上清液。
沉降后的水不溶性残渣，用少量甲醇溶解成稠浸膏后，加乙酸乙酯沉降3次，滤取乙酸乙酯溶出液，浓缩后柱层析分离白果内酯和银杏内酯，最后加入提取物粉中。
合并沉降液取树脂4倍量，加盐酸调PH=3，上吸附柱，待液全部通过后，用PH=3的水洗涤树脂。
用量为树脂重量的13倍，再加入PH=3的25%乙醇洗涤，用量为树脂重量的7.5倍，流干洗涤液，再用
70%乙醇洗脱
70%乙醇洗脱液用10%氢氧化钠回调PH5-6，60C减压浓缩，喷雾干燥（2000C-800C），加入内酯部分，得总黄铜含量26%以上总内酯6%以上成品。
树脂处理：D-M-130大孔树脂先用8%氢氧化钠溶液冷浸3d，水洗中性，再用6%盐酸冷浸1d，水洗中性，然后用95%乙醇浸泡5d，回收乙醇，水洗除尽乙醇。
使用以后，树脂用95%乙醇洗至流出液无色后流干，水洗尽乙醇，即可重复使用，吸附5次后，再
用8%氢氧化钠再生。
黄酮薄层检查：硅胶G，加0.5%CMC制备薄板，110oC活化90min，展开剂为氯仿-甲醇-乙酸乙酯（2：1：1），喷5%三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，365nm波长下检查黄酮。
内酯成分检查：展开剂为甲苯-丙酮（7：3），展开后吹干，先喷水确定白色斑点，再用强热风加热30min，于荧光灯下365nm和254nm波长下观察斑点。
3,银杏叶超临界萃取有效成分（SCFE-CO2）
取绿色银杏叶干燥，粉碎到5目，动态提取90min，提取温度为40℃，CO2流量为15L，流体比3.5%，压力为20Mpa。
SCGE的萃取得率为3.4%。
提取物质量，银杏黄酮含量为28%，银杏内酯含量为7.2%。
无有机溶剂和重金属残留，萃取罐为10L（中试），萃取罐0.5L（小试），小试投料150g左右。
4.银杏叶中总黄酮的提取（叶中含量2.5%-3.8%）
银杏叶粉碎，加70%乙醇水或60%丙酮水浸泡过夜，55℃搅拌下加热5-6h，趁热过滤，叶渣，洗两次，压滤，合并滤液，减压回收，水相用石油醚、氯仿脱脂2次，浓缩干燥。
提取方法收率总黄酮含量（%）
醇水12.1 16.3
醇水9.6 17.6
醇水11.3 21.5
丙酮水12.5 21.8
丙酮水12.0 22.0
丙酮水12.7 23.7。