微生物的染色实验报告
细菌的简单染色和革兰染色实验报告

实验二:细菌的简单染色和革兰染色一、实验目的1.掌握细菌涂片的制备方法。
2.掌握细菌简单染色和革兰染色法的原理及操作步骤,识别细菌的革兰染色结果。
3.巩固显微镜油镜的使用方法。
4.学习无菌操作技术。
二、实验原理1、染色原理:细菌生长于酸性、中性和碱性溶液时常带负电荷,所以通常采用带正电荷的碱性染料(如美蓝、甲紫、碱性复红或孔雀绿等)使其着色。
当细菌分解糖类产酸时,细菌所带正电荷增加易被带负电的酸性染料(如伊红、酸性复红或刚果红)着色。
2、革兰染色法原理:革兰染色法可根据细菌细胞壁结构和成分的不同,将其分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。
革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态,细胞壁孔径大,不能阻止溶剂透入,因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色。
另外,革兰染色的差异并不能完全认为是化学的差别,也有物理结构不同的结果。
如酵母菌细胞壁的成份完全与细菌不同,但具有革兰染色阳性反应。
三、实验仪器,材料和用具1、仪器及用具:显微镜、酒精灯、火柴、接种环、载玻片、盖玻片、镊子、擦镜纸、镜油、无菌牙签2、菌种:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、葡萄球菌、牙垢、未知菌S1和S33、试剂:结晶紫染液、革氏碘液、洗脱液(95%乙醇溶液)、番红染液四、实验步骤(1)简单染色1、载玻片的处理:用纱布将取出的载玻片擦干,把要涂菌的部位在火焰上烤一下,冷却待用。
2、涂片:左手持菌液试管,右手持接种环在火焰上烧灼灭菌,待接种环冷却后在火焰旁从试管中取一环菌液,在洁净无脂的载玻片上涂一直径约2mm的均匀薄膜。
3、干燥:涂片后待其自然干燥。
4、固定:将以干燥好的涂片标本朝上,在酒精灯火焰上通过2~3次,要求载玻片温度不能超过60度,以手背触载片不烫为宜。
5、染色:滴加一滴结晶紫染液,染色1min。
革兰氏染色实验报告

革兰氏染色法的原理摘要:革兰氏染色反应是细菌重要的鉴别特征,所以学习微生物学,进行革兰氏染色实验是很重要的。
为保证染色结果的正确性,采用规范的的染色操作方法是十分必要。
本实验主要对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)进行革兰氏染色,观察它们的染色特征,辨别是革兰氏阴性还是阳性,从而掌握其染色方法。
染色方法与过程很清晰,但实验结果中金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach)多组呈现假阴性。
本实验的主要目的是熟悉并掌握革兰氏染色方法及原理,但要想做出很好的染色得多加练习。
本实验还可以锻炼显微镜操作技术和无菌操作技术。
关键词:革兰氏染色大肠杆菌(E.coli) 金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach) 枯草杆菌(B.subtilis)引言革兰氏染色是微生物学中最重要的鉴别染色方法,它可以直接将细菌分为革兰氏阴性和革兰氏阳性。
革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性(G+)和革兰氏阴性(G-)两种类型,这是由这两种细菌细胞壁结构组成与结构的差异所决定的。
经过一定的染色过程后,革兰氏阳性的细菌会因为细胞壁肽聚糖的含量高,脂质含量低而保持第一次染色的蓝紫色。
革兰氏阴性细菌细胞壁的脂质含量高,乙醇处理时脂质溶解,蓝色被洗脱,复染后变为红色。
革兰氏染色原理很简单,染色时需注意要注意使用处在活跃生长期的细菌,涂片不宜过厚,严格控制脱色时间。
大肠杆菌(E.coli)是革兰氏阴性细菌,金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach)与枯草杆菌 (B.subtilis)都是革兰氏阳性细菌,染色后在显微镜下容易区别。
同时它们的形态各异,可以根据具体颜色和形态差异来判断染色是否成功。
本实验还涉及到高倍油镜的使用。
使用油镜与用一般的镜头不同,具体使用在实验方法中描述。
微生物实验3之革兰氏染色

华中科技大学微生物学实验报告班级:生物制药1101班日期:2013 年 3 月16 日指导教师:邬建国实验组别:启明七组姓名:何明组员姓名:张玉涛、王远馨实验名称:革兰氏染色一、实验目的1.学习并掌握革兰氏染色的方法。
2.简单进行样品的革兰氏染色辨别样品中细菌类别二、实验原理1.革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,细菌先经碱性染料结晶紫染色,再经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌紫色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G-)。
2为观察方便,脱色后再用一种红色染料,如碱性番红等进行复染。
阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。
有芽孢的杆菌和绝大多数球菌,以及所有的放线菌和真菌都成革兰氏正反应;弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽孢杆菌都成负反应。
3.革兰式阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别,染色反应不一样,染色与细菌细胞壁的化学组成及结构有关。
4.阳性菌菌体等电点较阴性菌低,在相同pH条件下染色,阳性菌吸附碱性染料较多,因此不易脱去,阴性菌则相反。
三、实验材料菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌;检测样品:含活菌酸奶染料:草酸铵结晶紫液、路哥氏碘液、95%乙醇、番红液其他:显微镜、载玻片、接种环、酒精灯、无菌生理盐水、香柏油、二甲苯四、实验方法(一)涂片→干燥→固定→草酸铵结晶紫染色(1min )→水洗→路哥氏碘液媒染(1min )→水洗→95%乙醇脱色(30s )→水洗→番红复染(5min )→水洗→干燥→镜检。
关键点:1.严格掌握乙醇脱色程度,如脱色过度,则阳性菌被误染为阴性菌; 而脱色不够时,阴性菌被误染为阳性菌;2.菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间很长,或已死亡及部分自行溶解了,都常呈阴性反应。
(二)黑曲霉菌属于真菌,细胞较大,可用水片进行观察,,先在载玻片上滴一滴水,接种,盖上载玻片,即可拿到显微镜下观察.五、实验结果与分析1.对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌分别进行革兰氏染色(拍照,注明放大倍数)大肠杆菌放大倍数40x 金黄色葡萄球菌,放大倍数100x ,油浴2.对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片进行革兰氏染色(拍照,注明放大倍数)大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片,放大倍数100x,油浴3.酸奶中乳酸菌的革兰氏染色(拍照,注明放大倍数)4.黑曲霉菌水片观察六、思考题1.你的实验结果与课本中所述是否一致?如果不一致,试分析原因。
微生物实验报告范文

微生物实验报告范文一、实验目的1.了解微生物在日常生活中的广泛应用;2.探究微生物的生长特性和繁殖能力;3.学习一种简单的微生物染色技术;4.观察并研究微生物生态系统。
二、实验原理本实验采用常见的革兰氏染色法,革兰氏染色是细菌分离鉴定的重要方法之一、此方法能将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类,从而对细菌种类和数量进行初步分析。
三、实验器材和药品器材:培养基、恒温箱、显微镜、移液器、架子、微观移液棒、塑料杯、锡纸;药品:蓝尼罗红、革兰氏染色药液(碘液、乙醇、碱性溶液、脱脂牛奶)。
四、实验步骤1.选取培养基,将固体培养基倒入塑料杯中;2.加入足够的蓝尼罗红;3.使用移液器将所需的微生物液滴于培养基上;4.用移液器挖取适量的微生物液,均匀滴到培养基上并轻轻摇晃使其均匀分布;5.将杯子放入恒温箱中,以适合微生物生长的温度进行培养;6.观察培养基上的微生物生长情况,进行观察和记录;7.观察菌落特征,进行革兰氏染色。
五、实验结果和讨论通过实验观察,我们发现微生物在培养基上生长迅速。
菌落在培养基上形成并逐渐扩大,最终形成肉眼可见的结构。
通过革兰氏染色,我们能辨别出革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏染色能够将革兰氏阳性菌染色为紫色,而革兰氏阴性菌则被染色为红色。
通过观察染色后的微生物,我们可以从中获得有关细菌种类和数量的信息。
在实验中还观察了微生物的生态系统。
我们发现不同微生物在培养基上的生长速率和菌落形状各异,这可能是由于不同的细菌种类或菌株之间的差异造成的。
六、实验结论通过本次实验,我们了解了微生物在日常生活中的广泛应用,增加了对微生物的认识。
革兰氏染色技术的运用使我们能够进一步了解细菌的种类和数量。
同时,我们还观察并研究了微生物生态系统,发现微生物的生长速率和形态特征有一定差异。
七、实验中的注意事项1.在进行微生物培养实验时,要保持操作环境的清洁,避免细菌污染;2.实验过程中需要严格控制温度;3.在染色过程中,应注意使用染色药液的顺序和浓度。
细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告

细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告细菌是微生物中最常见的一类生物,它们广泛存在于自然界的各个角落,包括土壤、水体、空气等。
为了更好地了解细菌的形态和结构,科学家们开展了许多实验,其中包括细菌的简单染色和革兰氏染色。
一、细菌的简单染色实验细菌的简单染色是一种常用的染色方法,通过给细菌染色,可以使其在显微镜下更加清晰可见。
这种染色方法主要使用了一种叫做甲基蓝的染料。
在实验中,首先需要制备好细菌的涂片。
将一根无菌的钢丝棒蘸取一小滴细菌悬液,然后将其均匀地涂抹在玻璃片上。
待涂片干燥后,将其固定在火焰上加热的玻璃柱上,以使细菌附着在玻璃片上。
接下来,将制备好的涂片放入染色盒中,加入适量的甲基蓝染料,浸泡片刻。
然后,用蒸馏水轻轻冲洗涂片,直至水洗液不再有颜色流出。
最后,用纸巾轻轻吸干涂片上的水分,将其放入显微镜下观察。
在显微镜下观察,我们可以清楚地看到细菌的形态和结构。
不同种类的细菌可能会呈现出不同的形状,例如球状、杆状、螺旋状等。
通过简单染色,我们可以更好地观察和研究细菌的特征。
二、革兰氏染色实验革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,它可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
这种染色方法主要使用了紫晶染料和碘酒。
在实验中,首先需要制备好细菌的涂片,方法与简单染色相同。
然后,将涂片放入染色盒中,加入适量的紫晶染料,浸泡片刻。
接着,用蒸馏水轻轻冲洗涂片,直至水洗液不再有颜色流出。
接下来,将碘酒滴在涂片上,使其浸润全片,然后用蒸馏水轻轻冲洗涂片。
随后,滴入乙醇或酒精醛溶液,使其浸润全片,然后用蒸馏水轻轻冲洗涂片。
最后,滴入蓝色染料,浸泡片刻后用蒸馏水冲洗涂片。
在显微镜下观察,我们可以看到细菌的染色效果。
革兰氏阳性菌会呈现紫色或蓝色,而革兰氏阴性菌则呈现红色或粉色。
这是因为革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的胆固醇,可以吸附紫晶染料和碘酒,而革兰氏阴性菌的细胞壁则较薄,无法吸附这些染料。
微生物实验报告

微生物实验报告答案【篇一:微生物的革兰氏染色实验报告】=txt> 二、实验目的:1、学习并初步掌握革兰氏染色法;2、认识革兰氏染色的原理;3、稳固显微镜的使用。
三、实验原理:革兰氏染色是 1884 年丹麦病理学家 christain gram 氏创办的,是细菌学中最重要的鉴识染色法。
染色步骤分为四个部分:1、初染:加入碱性染料结晶紫固定细菌图片;2、媒染:加入碘液,碘与结晶紫形成一种不溶于水的复合物;3、脱色:利用有机溶剂乙醇或丙酮进行脱色;g- 和 g+ 细胞壁的比较:1、阳性( g+ )菌细胞壁特色:细胞壁厚,只有一层,主要由肽聚糖组成,肽聚糖含量高,构造密切,脂类含量低。
当乙醇脱色时,细胞壁肽聚糖层孔径变小,通透性降低,结晶紫和碘的复合物被保存在细胞壁内,复染后仍显紫色(如芽孢杆菌)。
2、阴性( g- )菌细胞壁特色:细胞壁薄,由两层组成,内壁层和外壁层,细胞壁中脂类中脂类物质含量较高,肽聚糖含量较低,网状构造交联程度低,乙醇脱色时溶解了脂类物质,通透性加强,结晶紫与碘的复合物易被乙醇抽提出来,所以,革兰氏阴性菌细胞被脱色,当复染时,脱掉紫色的细胞的细胞壁又着上红色(比如大肠杆菌)。
四、实验器械:1、菌种:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌。
2、溶液和试剂:革兰氏染液、草酸铵结晶紫染液、碘液、 95% 乙醇、番红复染液、水。
3、仪器及其余用品:酒精灯、载玻片、显微镜、接种环、试管架、滤纸、滴管。
五、实验步骤:1、取一个载玻片,将其洗净并沿一个方向擦抹洁净,直至液体不再其上缩短为止;将接种环整平,用灼烧过的接种环在混匀的菌种中取菌,按惯例方法图片,应涂大,不宜过厚。
2、翻开酒精灯,用火焰固定,不宜烤得太狠,不然菌种呈假阳性。
3 、轻旋结晶紫染液滴管,将其旋出,滴加 1 滴草酸铵结晶紫染液覆盖涂菌部位(轻晃使其完整覆盖),染色40s 。
4 、染色达成后倾去染液,水洗至流出水为无色。
5 、将玻片上残留水用滤纸吸去,待其干燥。
微生物学实验报告——细菌的染色观察

Report of Microbiology ExperimentSmears, Simple Staining, Gram Staining and Structural StainsXXX 2012/3/25 Shandong UniversityPurpose1.Understand the rationale and procedure of all the staining methods.2.Perform and interpret all the stains.3.Learn the shapes and structures of bacteria in deep.Background1.Smear PreparationSmear is to place a thin film of bacterial cells on a slide. The smear must be fixed to kill the bacteria; coagulated proteins from the cells will cause cells to stick to the slide. Fixing denatures bacterial enzymes, preventing them from digesting cell parts, which cause the cell to break. Fixing also preserves microbes with minimal shrinkage or distortion when stained.2.Simple StainStaining procedures use only one stain are called simple stains. The dyes are usually salts composed of charged colored ions. If the chromophore is a positive ion, the stain is considered a basic stain; if it is a negative ion, it is an acidic stain.Most bacteria are stained when a basic stain permeates the cell wall and adheres by weak ionic bonds to the bacterial cell, which is slightly negatively charged.3.Gram StainGram stain is a stain that classifies bacteria as either gram-positive or gram-negative.Bacteria differ in their rate of decolorization. Those decolorize easily are referred to as gram-negative, whereas those that decolorize slowly and retain the primary stain are called gram-positive. This difference is because of the chemical and physical differences in bacteria’s cell wall. Gram-positive cell walls contain multiple layers of peptidoglycans which gram-negative cells only have a thin layer.When decolorized by alcohol, the crystal violet in gram-positive cells cannot be washed out because of the compact peptidoglycan. So there will be different colors for different bacteria. When bacteria die, their cell walls degrade and may not retain the primary stain, giving inaccurate results.4. Structural StainsStructural stains can be used to identify and study the structure of bacteria when there is no electron microscope.Endospores are “resting bodies” of several genera of bacteria. They do not metabolize and are resistant to heating, various chemicals, and many harsh environmental conditions. To know whether a bacterium is an endospore-former and also the position of the endospores is helpful. Endospores are impermeable to most stains, so heat is usually applied to drive the stain into the endospore.Once stained, the endospores do not readily decolorize.Flagella are thin proteinaceous structures that originate in the cytoplasm and project out from the cell wall. They are very frafgile (usually 20-50nm) and arenot visible with a light microscope. But when they are coated with a mordant, which increases their diameter, they can be seen with light microscopes.The presence and location of fragella are helpful in identifying and classifying bacteria. There are two main types of fragella: peritrichous and polar.MaterialsCompound light microscopesSlidesInoculating loopAlcohol burnerAbsorbent paperMethylene blue(simple stain)Gram-staining reagents(Crystal violet, Gram’s iodine, Ethanol, Safranin)Endospore stain reagents(Malachite green and Safranin)Flagella stain reagents(A and B)Distilled waterCulturesEscherichia coli slantStaphylococcus aureus slantBacillus subtilis slant(24h&72h)Clostridium sporogenes slant(24h&72h)Pseudomonas aeruginosa slantProcedureⅠPreparing smears1.Clean the slides.2.Put a drop of distilled water on a slide.3.Sterilize the inoculating loop.ing the cooled loop, scrape a small amount of the culture off the slant andemulsify the cells in the drop of water.5.Let the smears dry.6.Pass the slide quickly through the blue flame with smear side up two or threetimes.ⅡSimple Stain(E.coli,S.aureus and B.subtilis)1.Prepare smears.2.Cover the smears with Methylene blue and leave them for about 1min.3.Gently wash off the Methylene blue with water.4.Blot the slides dry and examine stained smears microscopically.ⅢGram Stain(E.coli,S.aureus and B.subtilis)1.Prepare fixed smears.2.Cover the smears with crystal violet for 1-2 min.3.Gently wash off the Crystal violet with water.4.Cover the smears with Gram’s iodine for 1 min.5.Gently wash off the Gram’s iodine with water.6.Decolorize the smears with ethanol.7.Gently wash off the ethanol.8.Cover the smears with safranin for 2 min.9.Gently wash off the safranin.10.Blot the slides dry and examine stained smears microscopically.ⅣStructural StainsThe endospore stain(B.subtilis and C.sporogenes(24h&72))1.Prepare fixed smears of bacteria.2.Place a piece of absorbent paper over the smears.3.Cover the paper with Malachite green.4.Steam the slides for 5 min.5.Wash the smears with water.6.Cover the smears with Safranin for 2 min.7.Wash the smears with water and blot them dry.8.Examine stained smears with a microscope.The flagella stain(B.subtilis, E.coli and P.aeruginosa)1. Place a drop of distilled water on a side of a slide.2. Lightly touch the drop of water with the bacteria without touching the slide.3. Tilt the slide so the drop will flow to the opposite side of the slide.4. Allow the slide to air dry.5. Cover the dried smear with dye liquor A for 5 min.6. Gently wash off the dye liquor A with distilled water.7. Gently wash the slide with dye liquor B until brown color appears.8. Wash the smears with water and blot them dry.9. Examine stained smears with a microscope.ResultsSimple stainE.coli 1000×S.aureus 1000×B.subtilis 1000×Gram stainE.coli and S.aureus 1000×Unknown bacteria 1000× Gram positive & gram negative bacillusUnknown bacteria 1000× Gram negative bacillusEndospore stainB.subtilis 1000× Central, swollen endosporesC.sporogenes 1000× 24h Terminal, swollen endosporesC.sporogenes 1000× 72h Free endosporesFlagella stainB.subtilis 1000× Peritrichous flagellaE.coli 1000× Peritrichous flagellaP.aeruginosa 1000× Monotrichous flagellumRethink1.The microscopes should have a blue optical filter in the condenser to make surethe blank filed is white. That will be helpful to recognize the color of different stains.2.Heat-fixing is important in smear preparation to keep the shape of cells. Whenperforming flagella stains, I found that many bacterial cells looks larger than their normal size in the field. It may because of autolysis when cells die.3.When performing a Gram stain, the time of decolorizing should be handle toprevent excessive decolorizing.4.When performing flagella stains, violent shaking should be avoided to prevent theflagella from coming off. According to my results, bacteria with few flagellas will easily lose their flagellas when being stained.此实验报告存在一部分小错误和疏漏,比如个别的语法错误、用词不当,裁剪的图片未标明比例尺等。
细菌的简单染色实验报告

细菌的简单染色实验报告
《细菌的简单染色实验报告》
在生物学实验室中,我们进行了一项关于细菌的简单染色实验。
通过这个实验,我们希望能够观察和了解细菌的形态特征,为进一步的研究和分析奠定基础。
首先,我们准备了一份细菌样本,并将其涂抹在玻片上。
接着,我们使用了一
种叫做墨汁的染色剂,将其滴在细菌样本上。
墨汁中的颜料分子能够与细菌细
胞壁中的化学物质发生作用,使细菌在显微镜下更加清晰可见。
在染色完成后,我们将玻片放置在显微镜下进行观察。
通过放大镜头,我们可
以清晰地看到细菌的形态和结构。
有些细菌呈现出圆形或椭圆形,而有些则呈
现出长条状或弯曲形态。
这些观察结果为我们提供了宝贵的信息,帮助我们更
好地了解细菌的特征和分类。
通过这个简单的染色实验,我们不仅能够观察到细菌的形态特征,还能够为后
续的细菌研究提供重要的参考。
细菌在自然界中起着重要的作用,它们不仅存
在于我们周围的环境中,还对人类健康和生态平衡产生着重要影响。
因此,对
细菌的研究和了解具有重要意义,而这个简单的染色实验为我们提供了一个很
好的起点。
通过这次实验,我们不仅增加了对细菌的认识,还学会了使用染色技术来观察
微生物。
这将为我们今后的学习和研究打下坚实的基础,也让我们更加深入地
了解微生物世界的奥秘。
希望通过我们的努力,能够为细菌研究领域的发展做
出一些贡献。
微生物染色实验报告

一、实验题目:微生物的革兰氏染色二、实验目的:1. 学习并初步掌握革兰氏染色法;2. 了解革兰氏染色的原理;3. 巩固显微镜的使用;4. 培养实验操作技能,提高观察和分析能力。
三、实验原理:革兰氏染色是细菌学中最重要的鉴别染色法,根据细菌细胞壁的结构差异,将细菌分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)。
革兰氏阳性菌细胞壁结构致密,肽聚糖层厚,脂质含量少,乙醇不易渗入;革兰氏阴性菌细胞壁结构疏松,肽聚糖层薄,脂质含量多,乙醇易渗入。
在革兰氏染色过程中,G+菌被染成紫色且不被酒精脱色,而G-菌则被染成红色。
四、实验材料:1. 实验器材:已接种大肠杆菌的培养皿、接种环、酒精灯、玻璃铅笔、显微镜、香柏油、擦镜纸、二甲苯;2. 实验试剂:革兰染色液(结晶紫、卢戈碘液、95%乙醇、稀释复红染液)。
五、实验步骤:1. 涂片制备:取干净载玻片1块,用玻璃铅笔划分加样区域,做好标记,并在各分区分别用接种环取生理盐水2环,置于玻片上,接种环灭菌后,取细菌培养物少许与盐水混匀,并涂成均匀薄膜涂片。
如用液体材料,如痰、尿液、脓汁等可直接涂片,不必加生理盐水。
干燥:涂片最好在室温下自然干燥,必要时可将标本面向上,小心间断地在弱火高处烘干,但切勿紧靠火焰将涂膜烤枯。
固定:涂片干燥后,将标本片在酒精灯上快速的来回通过三次,共约2s~3s,注意温度不可太高,以涂片涂膜的反面触及皮肤觉轻微烫觉即可。
固定目的:杀死细菌;使菌体与玻片粘附较牢,在染色时不致被染液和水冲掉;菌体蛋白变性易着色。
2. 结晶紫初染:将涂片放入含有结晶紫的染液中,染色1分钟;3. 卢戈碘液媒染:将涂片取出,放入卢戈碘液中,媒染1分钟;4. 95%乙醇脱色:将涂片取出,放入95%乙醇中,脱色30秒~1分钟;5. 稀释复红染液复染:将涂片取出,放入稀释复红染液中,复染1分钟;6. 油镜观察:将涂片放入显微镜油镜下观察。
六、实验结果:1. 革兰氏阳性菌:细胞呈紫色,细胞壁较厚,边缘清晰;2. 革兰氏阴性菌:细胞呈红色,细胞壁较薄,边缘模糊。
微生物的革兰氏染色实验报告

微生物的革兰氏染色实验报告
摘要:
本实验旨在通过革兰氏染色方法来区分微生物的细胞壁类型,
进一步了解微生物的结构与分类。
首先,通过培养革兰氏阳性菌和
革兰氏阴性菌,获得纯净的微生物样本。
然后,按照革兰氏染色的
步骤进行染色,观察并比较两种类型的细菌在显微镜下的颜色和形
态特征。
实验结果显示,革兰氏阳性菌显示出紫色到紫蓝色,而革
兰氏阴性菌则呈现红色到粉色。
实验表明革兰氏染色是一种简单有
效的方法,可用于初步鉴定微生物的革兰氏阴性或阳性特征,对微
生物的分类和鉴定具有重要意义。
引言:
微生物是一类极小的生物体,包括细菌、真菌和病毒等。
通过
研究微生物可以深入了解它们的结构、生长特性以及与人类或环境
的相互作用。
微生物的分类与鉴定是微生物学研究的重要内容之一,而革兰氏染色则是微生物分类与鉴定中常用的方法之一。
革兰氏染色是以丹宁紫和碘为染料,通过染色剂与细菌细胞壁的反应来区分细菌的细胞壁类型。
革兰氏阳性菌的细胞壁由多层厚的胞外网状结构组成,可以保留紫色的染料,形成紫色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁相对较薄,不能保留紫色的染料,在洗净后体现为红色。
实验方法:
1. 准备革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌培养物。
2. 从培养物中取一小片菌落,加入一滴蒸馏水,用炉架加热一段时间,接种于两片玻璃片上。
3. 将两片玻璃片依次在蒸馏水、丹高威液、碘酒、乙醇和伊红中浸泡。
4. 用水洗净,倒置晾干。
5. 在显微镜下观察细菌的颜色和形态特征。
实验结果:。
微生物的革兰氏染色实验报告doc

微生物的革兰氏染色实验报告.doc 微生物的革兰氏染色实验报告一、实验目的和要求本次实验的目的是学习并掌握革兰氏染色的基本原理和操作方法,了解革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构和染色特性的差异,以及革兰氏染色在微生物学研究和临床诊断中的应用价值。
实验要求学生掌握革兰氏染色的步骤和注意事项,能独立进行革兰氏染色操作,并能对染色结果进行正确分析和解释。
二、实验原理和方法革兰氏染色是一种常用的细菌分类和鉴定方法,其基本原理是通过不同的染色步骤和处理条件,使细菌细胞壁上的化学成分产生不同的反应,从而导致细菌细胞呈现出不同的颜色。
革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,主要由肽聚糖和磷壁酸组成,能够抵抗革兰氏染色的脱色剂乙醇的处理,因此能够保留结晶紫的颜色,呈现出紫色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,主要由脂蛋白、磷脂和脂多糖组成,容易被乙醇脱色,再用复染剂番红染色后呈现出红色。
革兰氏染色的具体步骤如下:1.涂片:在干净的载玻片上滴一滴无菌水,用接种环取少量细菌与水滴充分混合,制成薄而均匀的涂片。
2.固定:将涂片在空气中自然干燥或用火焰固定。
3.初染:用结晶紫染色液染色1-2分钟,用水冲洗。
4.媒染:用碘液媒染1分钟,用水冲洗。
5.脱色:用95%乙醇脱色30秒-1分钟,用水冲洗。
6.复染:用番红染色液染色1-2分钟,用水冲洗。
7.镜检:用油镜观察并记录细菌的颜色和形态。
三、实验步骤和结果本次实验选用大肠杆菌(E. coli)和金黄色葡萄球菌(S. aureus)作为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的代表,按照上述步骤进行革兰氏染色操作。
具体步骤如下:1.在干净的载玻片上滴一滴无菌水,用接种环取少量大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别与水滴充分混合,制成薄而均匀的涂片。
2.将涂片在空气中自然干燥或用火焰固定。
3.用结晶紫染色液染色1-2分钟,用水冲洗。
4.用碘液媒染1分钟,用水冲洗。
5.用95%乙醇脱色30秒-1分钟,用水冲洗。
6.用番红染色液染色1-2分钟,用水冲洗。
革兰氏染色法实验报告

革兰氏染色法实验报告革兰氏染色法实验报告引言:革兰氏染色法是微生物学中常用的染色方法之一,它可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
本实验旨在通过革兰氏染色法的应用,观察不同菌落的染色效果,进一步了解细菌的结构和分类。
实验材料与方法:1. 实验菌株:选择了两种细菌,分别为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
2. 培养基:使用了含有足够营养物质的琼脂培养基。
3. 革兰氏染色试剂:包括结晶紫、碘酒和乙醇。
4. 实验器材:无菌培养皿、移液管、显微镜等。
实验步骤:1. 在无菌培养皿上分别接种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,并在恰当的温度下培养。
2. 将培养皿中的菌落取出,用无菌移液管加入适量的生理盐水,悬浮菌落。
3. 取一滴悬浮的菌液,滴于载玻片上,用火焰消毒玻片。
4. 将滴有菌液的玻片放在炉子中,用火焰烘烤至完全干燥。
5. 滴加结晶紫染色液,静置片面染色1分钟。
6. 用自来水冲洗玻片,直至水洗净。
7. 滴加碘酒,静置片面染色1分钟。
8. 用自来水冲洗玻片,直至水洗净。
9. 滴加乙醇,静置片面脱色30秒。
10. 用自来水冲洗玻片,直至水洗净。
11. 用吸水纸轻轻吸干玻片上的水分。
12. 将玻片放在显微镜下,观察菌落的染色效果。
实验结果与讨论:在显微镜下观察,革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。
这是因为在革兰氏染色法中,结晶紫染色液可以渗透进细菌细胞的胞质,使细菌呈紫色。
而碘酒可以形成结晶紫-碘复合物,使细菌细胞内的染色物质更稳定,不易被乙醇脱色。
乙醇的作用是脱去细菌细胞外的结晶紫,但革兰氏阳性菌由于细胞壁较厚,结晶紫不易脱色,因此呈紫色;而革兰氏阴性菌由于细胞壁较薄,结晶紫易被脱色,因此呈红色。
通过实验可以发现,革兰氏染色法是一种简单而有效的方法,可以快速区分细菌的类型。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在细胞结构上有所不同,革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,含有较多的胞质,而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,胞质较少。
这种区别导致了革兰氏染色法的染色效果不同。
芽孢染色法,实验报告(共4篇)

芽孢染色法,实验报告(共4篇)第一篇:芽孢染色法的介绍芽孢染色法是一种常见的微生物学实验方法,用来鉴定芽孢菌属的微生物。
芽孢是一种耐热、抗干燥的微生物,具有高度的抵抗力。
芽孢染色法是通过对芽孢进行特定的染色方法,将其区分出来。
整个过程需要一定的技术和经验,但是准确性较高,具有广泛的应用价值。
芽孢染色法通常采用的是后盖玫瑰染色法,这种方法可以使芽孢显现为紫色或红色,而其他细胞则呈现粉红色。
这种异染色效应可以清晰地区分出芽孢与其他微生物。
整个实验流程需要先将样品制备,然后进行固定、染色、脱色和显微观察等过程。
其中,脱色工作至关重要,需要根据样品类型和染色结果进行不同程度的脱色处理。
芽孢染色法在微生物学研究、食品卫生监测、化学工业、制药、农业等领域都有广泛的应用,并被广泛视为一种可靠的检测手段。
芽孢染色法是鉴定芽孢菌的常用方法之一,样品制备是整个实验流程的关键步骤之一。
样品采集需要注意无菌操作,以免在采集、贮存、传递过程中造成样品的污染。
通常采集的样品包括饮用水、土壤、食品、医院等具有可能存在芽孢菌属的环境。
样品制备主要分为前处理和后处理两个环节。
前处理通常包括样品的筛选、洗涤和杀菌处理。
样品筛选的过程中需要去除杂质和不易筛选的部分。
洗涤过程是为了去除样品表面的污垢、腐殖质和防止其他细菌的污染。
杀菌处理时,要选择合适的杀菌方法,同时对杀菌剂的用量和时间进行控制。
后处理通常包括提取和处理芽孢。
提取芽孢的方法通常采用加热和化学处理的方法,让其他微生物死亡,而芽孢则不受影响。
具体的处理方法根据实验需要和样品类型进行定制。
整个样品制备过程需要注意的是,要保持严谨的无菌操作,避免在制备过程中引入其他细菌,影响实验结果。
芽孢染色法是一种特殊的染色方法,需要严格控制每一个步骤。
对于不同的样品类型和设备要求,具体的操作步骤可能会有所不同。
一般而言,芽孢染色法的操作流程包括:准备工作、固定样品、染色、脱色和显微观察。
准备工作:包括准备好所需试剂和设备,做好垃圾清理和无菌操作。
酵母菌染色实验报告

1. 观察酵母菌的形态结构。
2. 学习使用显微镜观察酵母菌的基本技能。
3. 掌握酵母菌染色技术,区分死活细胞。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真核微生物,其细胞结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡等。
通过染色,可以使酵母菌的细胞结构更加清晰,便于观察。
美蓝染色是一种常用的染色方法,其原理是美蓝的氧化型呈蓝色,还原型无色。
活细胞内的美蓝会被还原,因此活细胞不会着色,而死细胞内的美蓝则不会被还原,因此会着色。
三、实验材料1. 酵母菌培养液2. 美蓝染液3. 碘液4. 载玻片5. 盖玻片6. 显微镜7. 吸管四、实验步骤1. 将酵母菌培养液稀释,取适量置于载玻片上。
2. 用滴管滴加适量美蓝染液,使菌液均匀染色。
3. 静置3-5分钟后,用吸管吸去多余的染液。
4. 滴加适量碘液,观察酵母菌的形态结构。
5. 将载玻片置于显微镜下观察,先低倍镜观察,再换高倍镜观察。
1. 酵母菌细胞呈卵圆形或圆形,大小不一。
2. 细胞壁较厚,细胞膜透明。
3. 细胞核呈圆形或椭圆形,位于细胞中央。
4. 细胞质中可见液泡,液泡大小不一。
5. 活细胞不着色,死细胞呈蓝色。
六、实验分析1. 酵母菌细胞壁较厚,具有保护作用。
2. 细胞核是酵母菌的重要器官,负责遗传信息的传递。
3. 液泡是酵母菌储存营养物质的地方。
4. 通过美蓝染色,可以观察到酵母菌的形态结构,区分死活细胞。
七、实验总结本次实验成功观察到了酵母菌的形态结构,学习了使用显微镜观察酵母菌的基本技能,掌握了酵母菌染色技术。
通过实验,加深了对酵母菌的认识,提高了实验操作能力。
八、注意事项1. 操作过程中要保持无菌操作,避免污染。
2. 染色时间不宜过长,以免影响观察效果。
3. 观察时要注意调整显微镜的焦距,使图像清晰。
九、思考题1. 酵母菌的繁殖方式有哪些?2. 酵母菌在食品工业中有哪些应用?3. 如何区分酵母菌的死活细胞?通过本次实验,我们了解了酵母菌的基本形态结构,掌握了酵母菌染色技术,为今后的学习和研究打下了基础。
微生物的染色与计数实验报告

一、实验题目:微生物的染色与计数本实验分三个部分:①革兰氏染色法②微生物显微镜直接计数法③海洋微生物菌群分析及形态观察二、实验目的与要求1.了解革兰氏染色的原理和重要性,学习并掌握革兰氏染色的方法。
2.重点掌握酵母等单细胞微生物的显微计数方法和技术要领。
3.掌握海洋样品中微生物菌群分离的一般方法,认识海洋霉菌并进行形态观察,学会细菌、霉菌菌群的辨认和优势度分析。
三、实验原理为了进一步认识微生物,我们需要对其进行染色和计数,革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状,它不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。
细菌对于革兰氏染色的不同反应,是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
染色过后就要对微生物进行计数,我们采用显微镜直接计数法,将小量待测样品的悬浮液置于血细胞计数板上,该计数板是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台;中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各列有一个方格网,每个方格网共分为九个大方格,中间的大方格即为计数室,每一个大方格中的小方格都是400个。
设五个中方格中的总菌数为A,菌液稀释倍数为B,本实验采用25个中方格的计数板,1mL菌液中的总菌数=A/5×25×104×B=50000AB个。
而为了研究在海洋环境下(潮间带海泥)中存在的细菌、霉菌、放线菌等微生物的数量和种类,将样品在微生物适宜生长的基本培养基上逐级进行平板稀释,达到检测待测物品中生活着的所有微生物的目的。
四、实验材料与用具1.溶液或试剂:大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,酵母菌悬液,革兰氏染色液,潮间带退潮后距离表层5㎝深处底泥样品制备菌悬液,胰蛋白胨大豆固体培养基(TSA),青霉素,链霉素,20%乙酸,乳酚棉兰染色液,无菌海水等2.仪器用具:血细胞计数板,显微镜,盖玻片,无菌毛细滴管,试管、小烧杯、天平、微量移液器、吸管、涂布器、接种环、载玻片,酒精灯,镊子等五、操作步骤可将整个实验分为三个阶段:第一阶段:革兰氏染色①制片:将先前培养的大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌分别作涂片,干燥、固定。
微生物的染色实验报告

微生物的染色实验报告
微生物染色实验报告
实验目的:通过染色实验观察和研究微生物的形态和结构特征,为进一步研究
微生物提供基础资料。
实验材料和方法:
材料:大肠杆菌、革兰氏染色试剂、显微镜等。
方法:
1. 取一定量的大肠杆菌悬液滴在玻片上,使其干燥。
2. 用革兰氏染色试剂对玻片上的大肠杆菌进行染色处理。
3. 用显微镜观察染色后的大肠杆菌样本,记录下其形态和结构特征。
实验结果:
经过革兰氏染色处理后,观察到大肠杆菌呈现出紫色的颜色,表明其为革兰氏
阳性菌。
在显微镜下观察,发现大肠杆菌呈现出长圆柱形,且具有明显的细胞
壁和胞质等结构。
实验结论:
通过本次染色实验,我们成功观察到了大肠杆菌的形态和结构特征,为进一步
研究微生物提供了重要的基础资料。
同时,本次实验也验证了革兰氏染色的可
靠性和有效性,为今后的微生物研究提供了重要的技术支持。
总结:
微生物染色实验是微生物学研究中的重要实验方法之一,通过染色处理可以更
清晰地观察微生物的形态和结构特征,为微生物学研究提供了重要的技术手段。
希望通过今后的实验研究,可以进一步深入了解微生物的生物学特性,为人类
的健康和环境保护做出更大的贡献。
微生物实验报告:普通染色和格兰染色

实验二细菌的普通染色和革兰氏染色一、实验目的1.掌握细菌涂片标本的制备方法和普通染色的步骤;2.掌握革兰氏染色法的步骤和关键点;3.识别细菌的革兰氏染色结果;4.学习无菌操作技术。
二、实验原理一般认为革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态,细胞壁孔径大,不能阻止溶剂透入,因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色。
虽然如此,革兰染色的差异并不能完全认为是化学的差别,也有物理结构不同的结果,因为酵母菌细胞壁的成份完全和细菌不同,但具有革兰染色阳性反应。
三、实验器材载玻片,盖玻片,接种环,酒精灯,显微镜、擦镜纸、镜油、擦镜液;结晶紫、革氏碘染液、95%酒精、番红染液;枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和未知菌的18小时的液体培养液,酵母菌平板,大肠杆菌平板,牙垢。
四、实验步骤1、涂片左手持菌液EP管,右手持接种环,在火上对接种环灭菌后,从EP管中取一环培养液,于载玻片中央涂成薄层(事先在背面做好标记圆圈),将接种环在火焰上烧灼灭菌。
若是从平板上取材,则事先在载玻片上滴一小滴水,在火焰附近把平板打开一小口,用接种环调取菌落边缘的物质涂于水滴上。
室温下自然干燥。
2、固定手持或镊子夹载玻片一端,标本面朝上,在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次,共约3~4秒。
要求玻片温度不超过60℃,以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜,放置待冷后染色。
3、初染滴加1滴草酸铵结晶紫染液,染色1分钟,水洗,吸干。
4、媒染用碘液冲去残留水,再加1滴碘液覆盖涂片1分钟,水洗,吸干。
5、脱色用吸水纸吸去玻片上的残留水,滴加95%的乙醇脱色,轻轻摇动玻片,倒掉脱色液,直至流出的乙醇无紫色时,立即水洗,吸干。
脱色时间20~30秒。
6、复染滴加1滴蕃红染液复染1-3分钟以上,水洗。
病原微生物玻片染色实验报告

病原微生物玻片染色实验报告实验报告:病原微生物的玻片染色实验一、实验目的1.了解病原微生物的常见染色方法和原理;2.掌握病原微生物玻片染色的操作步骤;3.观察和分析染色后的病原微生物的形态结构。
二、实验原理常见的病原微生物玻片染色方法有革兰氏染色、抗酸染色和假单胞杆菌染色等。
其中,革兰氏染色是应用最为广泛的染色方法,可通过染色的结果,将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
三、实验材料和设备1.革兰氏染色试剂盒:包括革兰氏碘液、革兰氏解显染液等;2.玻片和载玻片夹;3.热水浴;4.显微镜。
四、实验步骤1.准备样本:根据需要选择疑似病原微生物的培养液,挑取一个细菌菌落,将其悬于生理盐水中,制成液悬液。
2.制备玻片:将玻片进行充分清洗,用无菌火针将少量悬液滴于玻片上,待干燥。
3.固定:用火针将玻片烘烤固定。
4.革兰氏染色:用革兰氏碘液浸泡玻片1分钟,然后用蒸馏水冲洗;再滴加革兰氏解显染液,待显色后,用流动水冲洗并用滤纸吸干水分。
5.显微镜观察:将玻片夹于载玻片夹中,放置在显微镜观察平台上,用100倍或1000倍的放大倍数观察病原微生物的形态结构。
五、实验结果与分析根据实际需要,我们选择了一种常见的革兰氏阳性菌进行病原微生物玻片染色实验。
经过革兰氏染色后,我们通过显微镜观察到了革兰氏阳性菌的形态结构。
革兰氏染色后的革兰氏阳性菌呈现出蓝色或紫色,在显微镜下观察,我们发现它们有圆形、椭圆形、链状等多种形态。
同时,革兰氏阳性菌还具有特殊的细胞壁结构,在显微镜下可以看到其细胞壁呈现出两层结构,并且在细胞壁上有许多颗粒状的染色物质。
根据革兰氏染色的结果,我们可以初步推测该革兰氏阳性菌可能属于革兰氏阳性球菌或梭菌等菌属。
六、实验总结和思考通过本次实验,我们掌握了病原微生物玻片染色的操作步骤,并成功观察到了革兰氏染色后的革兰氏阳性菌的形态结构。
同时,我们也意识到玻片染色的结果仅能帮助我们初步分析病原微生物的形态结构,对于准确鉴定病原微生物的种类还需要结合其他实验手段进行进一步的分析与鉴定。
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微生物的染色实验报告
微生物的染色实验报告
一、引言
微生物是一类极小的生物体,包括细菌、真菌和病毒等。
它们在自然界中广泛存在,对人类的生活和健康具有重要影响。
为了更好地研究微生物的形态和结构,染色实验成为一种常用的方法。
本实验旨在通过染色技术观察微生物的形态和结构。
二、实验材料和方法
1. 实验材料:
(1)细菌标本:如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等;
(2)染色试剂:如甲基蓝、碘液等;
(3)显微镜和玻片。
2. 实验方法:
(1)制备细菌涂片:取一滴细菌液滴在玻片上,用另一块玻片将其均匀涂开。
(2)甲基蓝染色:将制备好的细菌涂片放入甲基蓝溶液中浸泡片刻,然后用水冲洗净。
(3)碘液染色:将经过甲基蓝染色的细菌涂片放入碘液中浸泡片刻,然后用水冲洗净。
(4)观察:将染好色的细菌涂片放在显微镜下观察,并记录所见。
三、实验结果
经过甲基蓝染色和碘液染色后,观察到细菌在显微镜下呈现出不同的形态和结构。
1. 大肠杆菌
大肠杆菌是一种革兰氏阴性细菌,呈杆状。
在染色后,我们观察到大肠杆菌呈现出深蓝色,细胞形态清晰可见。
通过放大镜,我们可以看到大肠杆菌的细胞体长约为2-3微米,直径约为0.5微米。
细菌细胞内部还可观察到细胞核和胞质等结构。
2. 金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性细菌,呈球状。
在染色后,我们观察到金黄色葡萄球菌呈现出浅蓝色,细胞形态圆润。
放大镜下,我们可以看到葡萄球菌的细胞直径约为1微米左右,呈团状生长。
细菌细胞内部可见到细胞壁和胞质等结构。
四、实验讨论
通过本实验,我们成功地使用染色技术观察了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的形态和结构。
染色技术能够使细菌在显微镜下更加清晰可见,有助于研究微生物的特征和生理功能。
细菌的染色实验是一种常用的方法,不仅可以观察细菌的形态和结构,还可以帮助鉴定不同种类的细菌。
在实际应用中,染色技术在医学、食品安全和环境监测等领域具有重要作用。
例如,医生可以通过染色技术快速鉴定细菌感染的类型,从而指导治疗方案的选择。
然而,染色技术也有一些局限性。
染色可能会对细菌的形态和结构产生一定的影响,有时甚至会导致细菌的损伤。
此外,染色方法的选择也需要根据具体实验目的和细菌种类进行调整。
综上所述,微生物的染色实验是一种常用的方法,能够帮助我们观察和研究微
生物的形态和结构。
通过染色技术,我们可以更好地了解微生物的特征和功能,为相关领域的研究和应用提供支持。
在今后的实验中,我们还将进一步探索不
同染色方法的优缺点,并结合其他实验手段,深入研究微生物的生态和代谢机制。