临床常见苛养菌的培养与鉴定
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红霉素 青霉素 （苯唑西林纸片） 复方新诺明
*头孢吡肟 *头孢噻肟 *阿莫西林*阿莫西林
克拉维酸
纸片扩散法检测药敏建议报告抗生素种类： 青霉素类：苯唑西林 大环内酯类：红霉素 磺胺类：复方新诺明 喹诺酮类：左氧 四环素类：四环素 糖肽类：万古霉素 增加使用D-抑菌圈试验或肉汤微量稀释法 检测诱导型克林霉素耐药的信息。
第11页
1.4 肺炎链球菌-药敏分析 PRSP的筛选
常规工作中可以用苯唑西林的纸片扩散法来检测青霉素的敏感性。 此法仅适用于 无生命危险感 染的患者。
苯 唑 西 林 抑 菌 圈 直 径
≥20mm
判定青霉素为敏 感
预测β-内酰胺 类抗生素敏感
≤19mm
可能是青霉素结 果不可靠
必须测定青霉 素的MIC
1. 培养条件：需氧，CO2环境中，最适宜
的培养基是巧克力平板（加入万古霉
素和制霉菌素），不同嗜血杆菌对因 子的需求不同。血平板上有卫星现象。
2. 菌落形态：35℃，18～24h培养形成微
小、无色透明、不溶血，呈露滴样小 菌落。 3. 涂片染色：革兰阴性小杆菌，无芽胞。 粘液型菌株有荚膜。
第20页
2.3 流感嗜血杆菌-检测方法
患者：男，足月出生九天，因无明显诱因出现发热,拟 “新生儿感染”收住入院儿科NICU。 入院后： 1. 2. 3. 4. 血常规：WBC10.01*09/L。脑脊液常规:无色透明，潘氏(+)，细胞计数0.316×109/L。 1 血培养及脑脊液: 血培养阳性，脑脊液培养阴性。送至CDC确认为B群脑膜炎奈瑟菌。 咽拭子培养:3名密切接触者检出一株B群脑膜炎奈瑟菌株（系患者的外祖母）。 2 药敏试验：对头孢三嗪、 头孢噻肟、 利福平、 氨苄西林、四环素、 米诺霉素、环丙 沙星均敏感；而对磺胺甲基异噁唑、复方新诺明均耐药。 治疗过程：予以独立病房隔离治疗，头孢曲松、青霉素抗感染及物理降温后，病情平稳。 3 4
不必进行常规的药敏试验，临床耐药率不高。 临床经验性用药通常有：青霉素是首选，对氯霉素，广谱的头孢菌素敏感。 对临床细菌性脑膜炎经验治疗失败的细菌，都应该进行β -内酰胺酶过筛和MIC试验
第30页
3.5 脑膜炎奈瑟氏菌-药敏分析
应该在生物安全柜中进行脑膜 炎奈瑟菌的相关操作
3.5 脑膜炎奈瑟氏菌-案例分析
＋ － ＋ － － － － － － －
－ － － － ＋ + D － － －
D D － － D － － － － －
D D D D ＋ ＋ － ＋ － －
+ + ＋ ＋ ＋ D － ＋ － －
D D D D － D － － － －
2.4 流感嗜血杆菌-药敏分析
流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌 氨苄西林 阿奇霉素 克拉霉素 A组 首选 试验 并常 规报 告 阿莫西林 复方新诺明 氨曲南 阿莫西林-克拉维酸 头孢克罗2 头孢丙烯2 头孢克肟3 头孢泊肟3 氨苄西林 -舒巴坦 头孢呋辛2 B组 首选 试验 选择 性报 告 C组 补充 试验 选择 性报 告 头孢洛林 头孢呋辛（口服） 环丙沙星 左氧氟沙星 头孢噻肟 头孢他啶 头孢曲松 莫西沙星 氧氟沙星
5
第16页
2.流感嗜血杆菌
2.1 概述 2.2 生物学性状 2.3 检测方法
2.4 药敏分析
第17页
嗜血杆菌属（Haemophilus）
呼吸道及全 身感染
牙龈部定植
流感嗜血杆菌 H. influenzae
溶血性 嗜血杆菌
H. paraphrophilus
口咽部定植
副流感 嗜血杆菌
H. parainfluenzae
第2页
目录
1.肺炎链球菌
2.流感嗜血杆菌
苛 养 菌
3. 脑膜炎奈瑟氏菌 4. 淋病奈瑟氏菌 5.布鲁氏菌属 6.放线菌属 7.星形诺卡菌 8.溶血隐秘杆菌
第3页
1.肺炎链球菌
1.1 概述 1.2 生物学性状 1.3 检测方法
1.4 药敏分析
1.5 案例分析
第4页
1.1 肺炎链球菌-概述
1. 肺炎链球菌社区感染常见病原菌之一，定植在正常人的鼻
1. 荚膜是肺炎链球菌的主要毒力因子之一。
2. 根据荚膜特异性多糖抗原性，分为近90个血清
型，成人致病以1--9型及12型最多，其中3型
毒力最强，常致严重肺炎。
3. 肺炎链球菌感染后，机体可建立较牢固的型特 异性免疫，同型病菌的再次感染少见。
第7页
1.3
1
肺炎链球菌-检测方法
传统手工法 干扰肺炎链球菌叶酸的合成 Optochin试验
V因子 V因子 MH平板
血平板
金黄色葡 萄球菌
细菌种类
血平板
MH平板
需要因 子
流感嗜血杆菌
副流感嗜血杆菌
+
+
+
X+V
V
2.3 流感嗜血杆菌-检测方法
因子实验 V
X
V
X
X+ V
黄色区域表 示细菌生长
X+ V
流感嗜血杆菌
副流感嗜血杆菌
第23页
MH平板
2.3 流感嗜血杆菌-检测方法
未定型为 无荚膜株
嗜血杆菌属根据吲哚、 脲酶和鸟氨酸脱羧酶可 分为8个生物型。
临床常见苛养菌的鉴定与药敏
无锡市第二人民医院
第1页
苛养菌概述 1. 苛养菌的基本特征：
对营养要求较高，在普通培养基上不生长或难以生长的一类细菌 体外培养需添加特殊因子或其他营养成分
2. 苛养菌分离和鉴定的基本要求：
采用 高营养 的培养基，延长培养时间 置于 CO2 或 微需氧 的环境，保持一定湿度 不能随意丢弃无法鉴定的细菌，极有可能是苛养菌及少见菌
形成化脓性脑脊髓膜炎。
4. 人工培养物如不及时转种，超过48h常死亡。该菌能产生自溶酶 ，故采集时标本不宜放冰箱，应保温立即送检。 5. 根据脑膜炎奈瑟菌夹膜多糖抗原的不同， 可分为A、B、C等13 个血清群，我国主要是由A群和C群引起。
第27页
3.2 脑膜炎奈瑟氏菌-生物学性状
1. 培养条件：5%-10%的CO2 ,培养基：血平板和巧克力。 2. 菌落形态：光滑、凸起、半透明、湿润。 3. 涂片染色：革兰阴性球菌，肾形或咖啡豆状，凹面相对、
细菌
B定型为 有毒株
生长因子 X V ＋ + ＋ ＋ + + － ＋ － ＋
荚 膜
溶 血
吲 哚
脲 酶
触 酶
鸟 AA
流感嗜血杆菌：a～f型 未定型 副流感嗜血杆菌：三个型 未定型 溶血嗜血杆菌 副溶血嗜血杆菌 杜克氏嗜血杆菌 埃及嗜血杆菌 嗜沬嗜血杆菌 副嗜沬嗜血杆菌
＋ + － － + － ＋ + + －
椭圆形 细菌生长 抑制区 判读抑菌浓度 （MIC ug/ml)
8
016
E-test法
第14页
1.4 肺炎链球菌-药敏分析
药物 敏感 中介 4 耐药 ≥8
1. 脑膜炎分离株，需尽快用可靠方法检 测和报告青霉素和头孢曲松(或头孢噻 肟或美罗培南)的MIC值
青霉素注射 ≤2 （非脑膜炎） 青霉素注射 （脑膜炎） 口服青霉素 ≤0.06
卫星试验 卟啉试验
1
2 3 4 5
传统手工法 自动化方法 乳胶凝集法 免疫学方法
糖发酵试验
吲哚快速法试验 尿素酶试验
基因检测法
质谱检测法
6
第21页
2.3 流感嗜血杆菌-检测方法
卫星试验
X因子 流感嗜血杆菌与金黄色葡 萄球菌在血琼脂培养基上共 同培养时可见卫星现象，因 葡萄球菌能合成V因子，使 其菌落周围生长的流感嗜血 杆菌菌落较大，远离者则较 小。
肺炎链球菌疫苗
咽部。 2. 以肺部感染为主，大叶性肺炎多见。同时会导致耳部及鼻 咽部的感染。严重时可继发胸膜炎、脓胸、脑膜炎和败血
症。
3. 常见送检标本类型有痰、咽拭子、尿液、脑脊液、血液、 穿刺液 。
易感人群：小于5岁及大于65岁
4. 肺炎球菌离开Байду номын сангаас体后很易死亡，痰培养分离率很低。
第5页
1.2 肺炎链球菌-生物学性状
1. 培养条件：CO2环境，哥伦比亚血平板。 2. 菌落形态：18-24h后血平板上形成草绿色
溶血、灰色、半透明、圆形、针尖样、表
面光滑（有些菌株可表现为粘液状）的菌 落;培养48h后，脐凹状菌落。 3. 涂片染色：G+球菌,矛头状 ,成双或链状排 列，尖端向外。
用放大镜观察
第6页
1.2 肺炎链球菌-生物学性状
诱导 实验
C组 补充试 验 选择 性报告
*头孢呋辛
*头孢曲松
头孢洛林(非 脑膜炎)
克林霉素
B组 首选试验 选择性报 告
多西环素 吉米沙星 左氧氟沙星 莫西沙星 氧氟沙星
*美罗培南
新 增
氯霉素
*厄他培南
修 订
*亚胺培南
泰利霉素 四环素 万古霉素
利奈唑胺
第10页 利福平
1.4 肺炎链球菌-药敏分析
用苯唑西林代替青霉素来进 行纸片扩散法检测
抑菌环直径≥14mm为敏感
抑菌环直径≥18mm 确认
甲 型 溶 血 链 球 菌
Optochin试验: 敏感 胆汁溶菌试验: 阳性 菊糖发酵试验: 阳性 荚膜肿胀试验：阳性 触酶 ：阴性 胆汁七叶甘 ：阴性
肺 炎 链 球 菌
(S)
(R)
第8页
1.3 肺炎链球菌-检测方法
2 乳胶凝集法 3 免疫学方法
成对排列位。脑脊液涂片时，常位于中性粒细胞内外。
第28页
3.4 脑膜炎奈瑟氏菌-药敏分析
试验条件 培养基：微量肉汤法：补充离子的MH肉汤，加 2%-5%的冻融马血。 琼脂稀释法：MH琼脂加5%的羊血。 接种物：直接菌落悬滴法，相当于0.5麦氏标准。 孵育： 35±2℃，5%CO2 ；20-24h
试验条件 培养基：纸片扩散法：嗜血杆菌试验培养基（HTM） 肉汤稀释法：HTM肉汤 接种物：直接菌落悬滴法，相当于0.5麦氏标准 孵育： 35±2℃，5%CO2 ；20-24h
1. 氨苄西林和阿莫西林是治疗流感嗜血杆菌的 首选药物。 2. β-内酰胺酶的检测可作为一种快速试验方便 地检出流感嗜血杆菌对氨苄西林和阿莫西林 的耐药性,常用的检测方法为显色头孢菌素法 -头孢硝噻吩法，我院目前阳性率在20%左右 。 3. 从脑脊液中分离的流感嗜血杆菌，常规中只 报告氨苄西林、一种三代头孢菌素、氯霉素 和美罗培南的试验结果。
第12页
1.4 肺炎链球菌-药敏分析
β -内酰胺类抗生素 K-B法未给出标准,推荐用MIC法
第13页
1.4 肺炎链球菌-药敏分析
细菌生长区
E test 塑料 条
256 128
MIC法试验条件
方法 ：微量稀释法直接上机(GP-68）及E-test法 接种物：0.5麦氏标准 孵育 ：35±2℃，5%CO2 ；20-24h
心内膜炎
嗜沫嗜血杆菌
H. aphrophilus
副嗜沫 嗜血杆菌
H. paraegyptius
杜克嗜血杆菌
H. ducreyi
亚急性心内膜炎
性病软下疳
第18页
2.1 流感嗜血杆菌-概述
1. 流感嗜血杆菌社区感染常见病原菌之一，常引 起急性化脓性感染，有荚膜的b型强毒株可以 通过呼吸道飞沫传播。 2. 流感嗜血杆菌感染可分为原发性感染和继发感 呼 吸 染。原发感染以小儿多见。继发感染：多是内 道 源性感染，以成人多见。 3. 常见送检标本类型有痰、咽拭子、肺泡灌洗 液、脑脊液、血液、穿刺液 。
厄他培南
仅用于流感
氯霉素
亚胺培南 利福平 泰利霉素 第25页
美罗培南
四环素
3. 脑膜炎奈瑟氏菌
3.1 概述 3.2 生物学性状 3.3 鉴别要点
3.4 药敏分析
3.5 案例分析
第26页
3.1 脑膜炎奈瑟氏菌-概述
1. 脑膜炎奈瑟菌存在于携带者和脑膜炎患者的鼻咽部。 2. 通过飞沫经空气传播，冬末春初为流行高峰。感染后多数患者呈 携带状态或隐性感染。 3. 少数出现呼吸道感染症状，仅极少数发展成败血症，累及脑膜，
继 发 感 染
鼻咽炎 喉头炎 急性气管炎 肺炎、中耳炎、 脑膜炎（2个月~3岁） 心包炎、化脓性关节炎
原 发 感 染
菌血症
败血症
第19页
2.2 流感嗜血杆菌-生物学性状
X因子 —— 血红素 X因子为存在于血红蛋 白中的一种血红素，为 含铁的卟啉，耐高温， V因子 —— 辅酶Ⅰ或辅 酶Ⅱ 血液中所含的V因子通常 处于被抑制状态，经80～ 90℃加热10min后可使V因 子释放
-
≥0.12
2. 对于非脑脊液标本中分离出的肺炎链
球菌，需同时使用脑膜炎和非脑膜炎
≤0.06
0.12-1 ≥2
的折点来报告青霉素的敏感性
第15页
1.5 肺炎链球菌-案例分析
患者：男60岁，因“突发高热，颈强直，脑膜刺激征，意
识不清住院”。 既往史：2008年脑科手术史，术后肺炎链球菌导致化脓性 脑膜炎。 入院后： 脑脊液常规：白色，混，WBC:3.08*106 1 脑脊液涂片:革兰阳性球菌 脑脊液培养：草绿色溶血、灰色、圆形、针尖样、脐凹状 3 2 菌落。Optochin试验: 敏感,胆汁溶菌试验: 阳性。 治疗过程：入院后经验用药：头孢曲松（广谱三代，容易 透过血脑屏障） 4 获知涂片报告后，加万古霉素。两周后，预后较好。
标本类型：菌液 4 基因检测法 5
标本类型：尿液、脑脊液 质谱检测法
科研
热点
第9页
1.4 肺炎链球菌-药敏分析
纸片扩散法
试验条件 培养基：纸片扩散法：含5%绵羊血的MHA 接种物：直接菌落悬滴法，相当于0.5麦氏标准 孵育： 35±2℃，5%CO2 ；20-24h
A组 首选试验 并常规报 告
肺炎链球菌
*头孢吡肟 *头孢噻肟 *阿莫西林*阿莫西林
克拉维酸
纸片扩散法检测药敏建议报告抗生素种类： 青霉素类：苯唑西林 大环内酯类：红霉素 磺胺类：复方新诺明 喹诺酮类：左氧 四环素类：四环素 糖肽类：万古霉素 增加使用D-抑菌圈试验或肉汤微量稀释法 检测诱导型克林霉素耐药的信息。
第11页
1.4 肺炎链球菌-药敏分析 PRSP的筛选
常规工作中可以用苯唑西林的纸片扩散法来检测青霉素的敏感性。 此法仅适用于 无生命危险感 染的患者。
苯 唑 西 林 抑 菌 圈 直 径
≥20mm
判定青霉素为敏 感
预测β-内酰胺 类抗生素敏感
≤19mm
可能是青霉素结 果不可靠
必须测定青霉 素的MIC
1. 培养条件：需氧，CO2环境中，最适宜
的培养基是巧克力平板（加入万古霉
素和制霉菌素），不同嗜血杆菌对因 子的需求不同。血平板上有卫星现象。
2. 菌落形态：35℃，18～24h培养形成微
小、无色透明、不溶血，呈露滴样小 菌落。 3. 涂片染色：革兰阴性小杆菌，无芽胞。 粘液型菌株有荚膜。
第20页
2.3 流感嗜血杆菌-检测方法
患者：男，足月出生九天，因无明显诱因出现发热,拟 “新生儿感染”收住入院儿科NICU。 入院后： 1. 2. 3. 4. 血常规：WBC10.01*09/L。脑脊液常规:无色透明，潘氏(+)，细胞计数0.316×109/L。 1 血培养及脑脊液: 血培养阳性，脑脊液培养阴性。送至CDC确认为B群脑膜炎奈瑟菌。 咽拭子培养:3名密切接触者检出一株B群脑膜炎奈瑟菌株（系患者的外祖母）。 2 药敏试验：对头孢三嗪、 头孢噻肟、 利福平、 氨苄西林、四环素、 米诺霉素、环丙 沙星均敏感；而对磺胺甲基异噁唑、复方新诺明均耐药。 治疗过程：予以独立病房隔离治疗，头孢曲松、青霉素抗感染及物理降温后，病情平稳。 3 4
不必进行常规的药敏试验，临床耐药率不高。 临床经验性用药通常有：青霉素是首选，对氯霉素，广谱的头孢菌素敏感。 对临床细菌性脑膜炎经验治疗失败的细菌，都应该进行β -内酰胺酶过筛和MIC试验
第30页
3.5 脑膜炎奈瑟氏菌-药敏分析
应该在生物安全柜中进行脑膜 炎奈瑟菌的相关操作
3.5 脑膜炎奈瑟氏菌-案例分析
＋ － ＋ － － － － － － －
－ － － － ＋ + D － － －
D D － － D － － － － －
D D D D ＋ ＋ － ＋ － －
+ + ＋ ＋ ＋ D － ＋ － －
D D D D － D － － － －
2.4 流感嗜血杆菌-药敏分析
流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌 氨苄西林 阿奇霉素 克拉霉素 A组 首选 试验 并常 规报 告 阿莫西林 复方新诺明 氨曲南 阿莫西林-克拉维酸 头孢克罗2 头孢丙烯2 头孢克肟3 头孢泊肟3 氨苄西林 -舒巴坦 头孢呋辛2 B组 首选 试验 选择 性报 告 C组 补充 试验 选择 性报 告 头孢洛林 头孢呋辛（口服） 环丙沙星 左氧氟沙星 头孢噻肟 头孢他啶 头孢曲松 莫西沙星 氧氟沙星
5
第16页
2.流感嗜血杆菌
2.1 概述 2.2 生物学性状 2.3 检测方法
2.4 药敏分析
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嗜血杆菌属（Haemophilus）
呼吸道及全 身感染
牙龈部定植
流感嗜血杆菌 H. influenzae
溶血性 嗜血杆菌
H. paraphrophilus
口咽部定植
副流感 嗜血杆菌
H. parainfluenzae
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目录
1.肺炎链球菌
2.流感嗜血杆菌
苛 养 菌
3. 脑膜炎奈瑟氏菌 4. 淋病奈瑟氏菌 5.布鲁氏菌属 6.放线菌属 7.星形诺卡菌 8.溶血隐秘杆菌
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1.肺炎链球菌
1.1 概述 1.2 生物学性状 1.3 检测方法
1.4 药敏分析
1.5 案例分析
第4页
1.1 肺炎链球菌-概述
1. 肺炎链球菌社区感染常见病原菌之一，定植在正常人的鼻
1. 荚膜是肺炎链球菌的主要毒力因子之一。
2. 根据荚膜特异性多糖抗原性，分为近90个血清
型，成人致病以1--9型及12型最多，其中3型
毒力最强，常致严重肺炎。
3. 肺炎链球菌感染后，机体可建立较牢固的型特 异性免疫，同型病菌的再次感染少见。
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1.3
1
肺炎链球菌-检测方法
传统手工法 干扰肺炎链球菌叶酸的合成 Optochin试验
V因子 V因子 MH平板
血平板
金黄色葡 萄球菌
细菌种类
血平板
MH平板
需要因 子
流感嗜血杆菌
副流感嗜血杆菌
+
+
+
X+V
V
2.3 流感嗜血杆菌-检测方法
因子实验 V
X
V
X
X+ V
黄色区域表 示细菌生长
X+ V
流感嗜血杆菌
副流感嗜血杆菌
第23页
MH平板
2.3 流感嗜血杆菌-检测方法
未定型为 无荚膜株
嗜血杆菌属根据吲哚、 脲酶和鸟氨酸脱羧酶可 分为8个生物型。
临床常见苛养菌的鉴定与药敏
无锡市第二人民医院
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苛养菌概述 1. 苛养菌的基本特征：
对营养要求较高，在普通培养基上不生长或难以生长的一类细菌 体外培养需添加特殊因子或其他营养成分
2. 苛养菌分离和鉴定的基本要求：
采用 高营养 的培养基，延长培养时间 置于 CO2 或 微需氧 的环境，保持一定湿度 不能随意丢弃无法鉴定的细菌，极有可能是苛养菌及少见菌
形成化脓性脑脊髓膜炎。
4. 人工培养物如不及时转种，超过48h常死亡。该菌能产生自溶酶 ，故采集时标本不宜放冰箱，应保温立即送检。 5. 根据脑膜炎奈瑟菌夹膜多糖抗原的不同， 可分为A、B、C等13 个血清群，我国主要是由A群和C群引起。
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3.2 脑膜炎奈瑟氏菌-生物学性状
1. 培养条件：5%-10%的CO2 ,培养基：血平板和巧克力。 2. 菌落形态：光滑、凸起、半透明、湿润。 3. 涂片染色：革兰阴性球菌，肾形或咖啡豆状，凹面相对、
细菌
B定型为 有毒株
生长因子 X V ＋ + ＋ ＋ + + － ＋ － ＋
荚 膜
溶 血
吲 哚
脲 酶
触 酶
鸟 AA
流感嗜血杆菌：a～f型 未定型 副流感嗜血杆菌：三个型 未定型 溶血嗜血杆菌 副溶血嗜血杆菌 杜克氏嗜血杆菌 埃及嗜血杆菌 嗜沬嗜血杆菌 副嗜沬嗜血杆菌
＋ + － － + － ＋ + + －
椭圆形 细菌生长 抑制区 判读抑菌浓度 （MIC ug/ml)
8
016
E-test法
第14页
1.4 肺炎链球菌-药敏分析
药物 敏感 中介 4 耐药 ≥8
1. 脑膜炎分离株，需尽快用可靠方法检 测和报告青霉素和头孢曲松(或头孢噻 肟或美罗培南)的MIC值
青霉素注射 ≤2 （非脑膜炎） 青霉素注射 （脑膜炎） 口服青霉素 ≤0.06
卫星试验 卟啉试验
1
2 3 4 5
传统手工法 自动化方法 乳胶凝集法 免疫学方法
糖发酵试验
吲哚快速法试验 尿素酶试验
基因检测法
质谱检测法
6
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2.3 流感嗜血杆菌-检测方法
卫星试验
X因子 流感嗜血杆菌与金黄色葡 萄球菌在血琼脂培养基上共 同培养时可见卫星现象，因 葡萄球菌能合成V因子，使 其菌落周围生长的流感嗜血 杆菌菌落较大，远离者则较 小。
肺炎链球菌疫苗
咽部。 2. 以肺部感染为主，大叶性肺炎多见。同时会导致耳部及鼻 咽部的感染。严重时可继发胸膜炎、脓胸、脑膜炎和败血
症。
3. 常见送检标本类型有痰、咽拭子、尿液、脑脊液、血液、 穿刺液 。
易感人群：小于5岁及大于65岁
4. 肺炎球菌离开Байду номын сангаас体后很易死亡，痰培养分离率很低。
第5页
1.2 肺炎链球菌-生物学性状
1. 培养条件：CO2环境，哥伦比亚血平板。 2. 菌落形态：18-24h后血平板上形成草绿色
溶血、灰色、半透明、圆形、针尖样、表
面光滑（有些菌株可表现为粘液状）的菌 落;培养48h后，脐凹状菌落。 3. 涂片染色：G+球菌,矛头状 ,成双或链状排 列，尖端向外。
用放大镜观察
第6页
1.2 肺炎链球菌-生物学性状
诱导 实验
C组 补充试 验 选择 性报告
*头孢呋辛
*头孢曲松
头孢洛林(非 脑膜炎)
克林霉素
B组 首选试验 选择性报 告
多西环素 吉米沙星 左氧氟沙星 莫西沙星 氧氟沙星
*美罗培南
新 增
氯霉素
*厄他培南
修 订
*亚胺培南
泰利霉素 四环素 万古霉素
利奈唑胺
第10页 利福平
1.4 肺炎链球菌-药敏分析
用苯唑西林代替青霉素来进 行纸片扩散法检测
抑菌环直径≥14mm为敏感
抑菌环直径≥18mm 确认
甲 型 溶 血 链 球 菌
Optochin试验: 敏感 胆汁溶菌试验: 阳性 菊糖发酵试验: 阳性 荚膜肿胀试验：阳性 触酶 ：阴性 胆汁七叶甘 ：阴性
肺 炎 链 球 菌
(S)
(R)
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1.3 肺炎链球菌-检测方法
2 乳胶凝集法 3 免疫学方法
成对排列位。脑脊液涂片时，常位于中性粒细胞内外。
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3.4 脑膜炎奈瑟氏菌-药敏分析
试验条件 培养基：微量肉汤法：补充离子的MH肉汤，加 2%-5%的冻融马血。 琼脂稀释法：MH琼脂加5%的羊血。 接种物：直接菌落悬滴法，相当于0.5麦氏标准。 孵育： 35±2℃，5%CO2 ；20-24h
试验条件 培养基：纸片扩散法：嗜血杆菌试验培养基（HTM） 肉汤稀释法：HTM肉汤 接种物：直接菌落悬滴法，相当于0.5麦氏标准 孵育： 35±2℃，5%CO2 ；20-24h
1. 氨苄西林和阿莫西林是治疗流感嗜血杆菌的 首选药物。 2. β-内酰胺酶的检测可作为一种快速试验方便 地检出流感嗜血杆菌对氨苄西林和阿莫西林 的耐药性,常用的检测方法为显色头孢菌素法 -头孢硝噻吩法，我院目前阳性率在20%左右 。 3. 从脑脊液中分离的流感嗜血杆菌，常规中只 报告氨苄西林、一种三代头孢菌素、氯霉素 和美罗培南的试验结果。
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1.4 肺炎链球菌-药敏分析
β -内酰胺类抗生素 K-B法未给出标准,推荐用MIC法
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1.4 肺炎链球菌-药敏分析
细菌生长区
E test 塑料 条
256 128
MIC法试验条件
方法 ：微量稀释法直接上机(GP-68）及E-test法 接种物：0.5麦氏标准 孵育 ：35±2℃，5%CO2 ；20-24h
心内膜炎
嗜沫嗜血杆菌
H. aphrophilus
副嗜沫 嗜血杆菌
H. paraegyptius
杜克嗜血杆菌
H. ducreyi
亚急性心内膜炎
性病软下疳
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2.1 流感嗜血杆菌-概述
1. 流感嗜血杆菌社区感染常见病原菌之一，常引 起急性化脓性感染，有荚膜的b型强毒株可以 通过呼吸道飞沫传播。 2. 流感嗜血杆菌感染可分为原发性感染和继发感 呼 吸 染。原发感染以小儿多见。继发感染：多是内 道 源性感染，以成人多见。 3. 常见送检标本类型有痰、咽拭子、肺泡灌洗 液、脑脊液、血液、穿刺液 。
厄他培南
仅用于流感
氯霉素
亚胺培南 利福平 泰利霉素 第25页
美罗培南
四环素
3. 脑膜炎奈瑟氏菌
3.1 概述 3.2 生物学性状 3.3 鉴别要点
3.4 药敏分析
3.5 案例分析
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3.1 脑膜炎奈瑟氏菌-概述
1. 脑膜炎奈瑟菌存在于携带者和脑膜炎患者的鼻咽部。 2. 通过飞沫经空气传播，冬末春初为流行高峰。感染后多数患者呈 携带状态或隐性感染。 3. 少数出现呼吸道感染症状，仅极少数发展成败血症，累及脑膜，
继 发 感 染
鼻咽炎 喉头炎 急性气管炎 肺炎、中耳炎、 脑膜炎（2个月~3岁） 心包炎、化脓性关节炎
原 发 感 染
菌血症
败血症
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2.2 流感嗜血杆菌-生物学性状
X因子 —— 血红素 X因子为存在于血红蛋 白中的一种血红素，为 含铁的卟啉，耐高温， V因子 —— 辅酶Ⅰ或辅 酶Ⅱ 血液中所含的V因子通常 处于被抑制状态，经80～ 90℃加热10min后可使V因 子释放
-
≥0.12
2. 对于非脑脊液标本中分离出的肺炎链
球菌，需同时使用脑膜炎和非脑膜炎
≤0.06
0.12-1 ≥2
的折点来报告青霉素的敏感性
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1.5 肺炎链球菌-案例分析
患者：男60岁，因“突发高热，颈强直，脑膜刺激征，意
识不清住院”。 既往史：2008年脑科手术史，术后肺炎链球菌导致化脓性 脑膜炎。 入院后： 脑脊液常规：白色，混，WBC:3.08*106 1 脑脊液涂片:革兰阳性球菌 脑脊液培养：草绿色溶血、灰色、圆形、针尖样、脐凹状 3 2 菌落。Optochin试验: 敏感,胆汁溶菌试验: 阳性。 治疗过程：入院后经验用药：头孢曲松（广谱三代，容易 透过血脑屏障） 4 获知涂片报告后，加万古霉素。两周后，预后较好。
标本类型：菌液 4 基因检测法 5
标本类型：尿液、脑脊液 质谱检测法
科研
热点
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1.4 肺炎链球菌-药敏分析
纸片扩散法
试验条件 培养基：纸片扩散法：含5%绵羊血的MHA 接种物：直接菌落悬滴法，相当于0.5麦氏标准 孵育： 35±2℃，5%CO2 ；20-24h
A组 首选试验 并常规报 告
肺炎链球菌