MS培养基配制

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MS培养基配方

MS 培养基配方1、配置MS母液母液配置：加热都是用温水浴加热，全部都要避光保存，用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可表2.1大量元素母液药品20x g/L 500ml（20 x）KNO338g 19gNH4NO333 g 16.5gMgSO4•7H2O7.4 g 3.7gCaCl2 6.644g 3.322gKH2PO4 3.4g 1.7g溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解CaCL2.2H2O 4.4g/L表2.2微量元素母液药品100x g/L 500ml（100x g/L）KIH3BO3MnSO4.4H2OZnSO4.7H2ONa2MoO4.2H2OGuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 0.083g0.6222.3 g0.86 g0.025 g0.0025 g0.0025 g0.0415 g0.31 g1.115 g0.43 g0.0125 g0.00125 g0.00125 g溶于100ml蒸馏水,定容至500ml表2.3有机母液药品100x 1L500ml(100x)肌醇10g5g烟酸0.05g0.025gVB60.05g0.025gVB10.1g0.05g甘氨酸0.2g0.1g表2.4铁盐母液药品100x g/L500mlFeSO4•7H2O 2.78g 1.39gNa2-EDTA. 2H2O 3.73g 1.865g铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于100ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，加水定容至500ml，置于小口瓶中，贴上标签2、固体MS培养基材料•找到4种母液：大量元素，微量元素，有机微量元素，铁盐母液•蔗糖，琼脂锥形瓶MS培养基配方：母液都稀释至1xMS培养基配方（1L）母液体积或重量(1L) 200ml大量元素20x50mL 10ml铁盐100x 微量100x 10mL 2ml 10mL 2ml有机100x10mL 2ml 蔗糖15g（15g/L）3g琼脂8g（8g/L） 1.6gPH先调至 5.85-5.88，最终灭菌后pH接近5.81）。

组织培养实验MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制注意：1．除CaCl2·2H2O单独配制外，大量元素按照使用时高10倍的数值称取，将各种化合物称量后，分别用少量水在不同的容器内充分溶解，然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液，加适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

A.制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

B.称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

二、培养基配制和灭菌一．养培养基配制程序(一).母液吸取量的计算配制培养基的升数母液吸取量= 母液体积（CC）×——————————母液浓缩倍数（二）各种母液按顺序编号排列A.大量元素；B.CaCl2.2H2O；C.微量元素；D.铁盐；E.有机物；F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。

MS培养基及配制注意事项

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。
2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。．生长调节剂母液配制：
为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。
不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升则含有生长调节物质0.5mg，配制后一般要求在低温（0~4℃）保存，配制培养基时如每升（1000ml）需添加的生长调节剂物质为 0.5mg时，则取1ml母液即可。
2.无菌操作可按以下步骤进行：
（1）在接种3天前用甲醛熏蒸接种室，并于接种前3小时打开其内紫外线灯进行杀菌；（2）在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯；（3）接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等；（4）上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工作台面；（5）先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干；（6）接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等；材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。（如叶片切成0.5cm2的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片叶原基）在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。

MS培养基的配制

MS 培养基的配制1、配制几种母液（1）配制MS 大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。

倍。

分别称取分别称取名称名称重量重量名称名称重量重量 NH 4NO 3 165g 82.5 KH 2PO4 17g 8.5 KNO 3 190g 95 CaCl 2·2H 2O 44g 22 MgSO 4·7H 2O37g18.5各自配成1L 1L（（500ml 500ml）的母液。

各自倒入）的母液。

各自倒入1L 1L（（500ml 500ml）试剂瓶中，存放于冰箱中。

）试剂瓶中，存放于冰箱中。

（2）配制MS 微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。

倍母液。

依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）名称名称重量重量名称名称重量重量 KI 0.083g Na 2MoO 4·2H 2O 0.025gH 3BO 3 0.62g CuSO 4·5H 2O 0.0025g MnSO 4·H 2O 1.69g CoCl 2·6H 2O 0.0025g ZnSO 4·7H 2O0.86g配成配成1L 母液，倒入1L 试剂瓶中，存放于冰箱中。

试剂瓶中，存放于冰箱中。

注：注：CuSO CuSO 4·5H 2O 和CoCl 2·6H 2O O 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。

可先配成调整液。

分别称取CuSO 4·5H 2O 0.05g O 0.05g，，CoCl 2·6H2O ·6H2O 0.05g 0.05g各自配成100ml 的调整液，然后取5ml 就还有0.0025g 的量。

的量。

（3）配制MS 有机母液一般配制成100倍MS 有机母液。

MS培养基配制方法-new

MS 培养基一、大量元素母液1：大量A母液2：大量B母液3：Fe盐注：配制顺序如下1. 称取3.73 g Na2-EDTA•2H2O溶解于200 ml去离子水中，并置于70℃预热(A)；2. 称取2.78 g FeSO4•7H2O溶解于200 ml去离子水中(B)；3. 将B缓慢倒入A中混合，边倒边搅动，置于70 ℃水浴锅中螯合2 h；4. 冷却后定容至1 L。

二、微量元素母液4：微量三、有机物质母液5：有机（不含肌醇）℃注：配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel；肌醇也可加入有机母液。

四、抗生素和激素母液试剂名称配制方法母液浓度Amp（氨苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Km（卡那霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Str（链霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Cb（羧苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml NAA（萘乙酸）1M NaOH溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解，双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml五、乙酰丁香酮(Acetone-syringone, AS)称取196.2 mg AS用10 ml DMSO溶解，母液浓度100 mM，-20℃避光保存，工作浓度100 ~ 200 μM六、MS溶液的混合5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中，混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA和NAA），定溶至1000 ml，用1M NaOH调pH至5.8。

最后加Phytagel （Sigma）4.4g或Agar 10g。

灭菌完后，在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素（IAA）。

实验一 MS培养基配制和灭菌

实验一MS培养基配制和灭菌一．目的和要求：1. 学会MS培养基的制作方法;2. 掌握高压灭菌的方法和基本操作。

二、仪器与试剂1. 仪器：灭菌锅、解剖刀、枪状镊子、烧杯（500ml）、培养皿、移液管等2. 试剂：MS的Macro-e、Micro-e、有机母液、Fe盐、肌醇蔗糖，琼脂粉，1N NaoH 和1N HCl三、方法步骤（一）配方设计: 以MS为基本培养基（mg/L）（二）配制培养基(1)溶化琼脂：量取300ml左右蒸馏水，加入4.8g琼脂粉，加热溶解直至完全融化。

(2) 各种母液的吸取：Macro-e 50mlMicro-e 1ml有机成分1mlFe盐5ml肌醇10ml加在一起，倒入烧杯（1L)（3）加入糖:称取30g 蔗糖，溶于溶有琼脂的300ml 蒸馏水中。

（4）根据实验设计，量取生长调节剂:加在一起，倒入烧杯。

（5）定容:加蒸馏水（用量杯）。

（6）调节pH至，用pH试纸进行测定，用1molHcl或1Mol NaoH调节。

（7）分装:30～40 ml/瓶6，培养基勿碰三角瓶口。

（8）用具清理和洗涤：各种母液按原位置摆整齐，用过的量筒，移液管、烧杯、铝锅等用水洗涤干净，然后按次序放回原处。

（三）灭菌：用高压蒸汽消毒器灭菌，其压力为～,温度为120～126℃，保持15~20 min。

具体操作步骤：1. 加水；2. 把包扎好的培养基装入高压锅；3. 盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀；4. 加热；5. 排除冷空气；6. 排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到1Kg位置时，开始计算灭菌时间，一般在1Kg 压力(121℃)下灭菌15~20 分钟即可，但要注意保持稳定压力。

7. 灭菌时间达到20 分钟后，停止加热，待压力自动降到0磅时，打开放气阀，打开热压灭菌锅盖(注意对角扭松螺帽)稍待冷后再把培养基取出。

四.作业1. 总结配制培养基的注意事项。

2. 制作培养基前为何要提前配制母液实验二短柄五加无性系建立一．目的和要求：1.学习并掌握外植体的消毒方法及具体操作;2. 掌握无菌操作技术。

MS培养基配方

MS培养基母液的配制：20×MS大量元素(1 L)：38 g KNO3，33 g NH4NO3，8.8 g CaCl2·2H2O，7.4 gMgSO4·7H2O，3.4 g KH2PO4。

200×MS微量元素(1 L)：0.166 g KI，1.24 g H3BO3，4.46 g MnSO4·4H2O，1.72 g ZnSO4·7H2O，0.05 g Na2MoO4·2H2O，0.005 g CuSO4·5H2O，0.005 g CoCl2·6H2O。

200×MS维生素和氨基酸(1 L)：20 g肌醇，0.1 g烟酸，0.1 g盐酸吡哆醇(VB6)，0.02 g盐酸硫胺素(thiamine hydrochloride, VB1)，0.4 g甘氨酸。

200×MS铁盐(1 L)：5.56 g FeSO4· 7H2O，7.46 g Na2EDTA· 2H2O，先溶于500 mL ddH2O，加热，调pH至5.5，定容至1 L。

注意：配制大量元素母液时，为避免产生沉淀，要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用分析纯。

化学药品先以少量重蒸馏水充分溶解后然后混合，混合时需注意边搅拌边混合。

CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解CaCl2·2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的CO2，以防沉淀。

配制铁盐母液时，FeSO4和Na2-EDTA 应分别加热溶解后混合，并置于磁力搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20-30 min)，调pH值至5 .5，室温放置冷却后，再冷藏。

使用上述配好的母液，按照稀释倍数，配制基础MS培养液：1×MS大量元素，1×MS微量元素，1×MS维生素和氨基酸，1×MS铁盐，蔗糖30 g/L，定容后调节pH至5.8，高温高压灭菌。

MS培养基的配制

一、MS培养基的配制1. 培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的10倍或100倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。

2. 按配方表配制MS培养基母液：大量元素50×，微量元素配100×，铁盐、有机成分配制成100×，母液贮存于4℃的冰箱中。

激素配成浓度为0.1mg/mL.3. 配制各种母液是，成分顺序加入，上一成分溶解后再加下一成分。

钙液和铁盐都单独配制。

生长素配制时，先用微量1MNaOH溶解，再以蒸馏水定容；细胞分裂素配制时，先用微量0.1MHCl溶解，再以蒸馏水定容。

二、MS母液配制取作表序号药品名称MS量(mg/L）扩大倍数母液量(g)定容取作量(mg/L)甲液NH4NO3KNO3MgSO4.7H20KH2PO41650190037017050×41.2547.59.254.25500ml 20钙液无水CaCl2440 100×11 500ml 20乙液MnSO4.4H2O或MnSO4. H2OZnSO4.7H2OH3BO3KI22.316.98.66.20.83100× 1.120.850.430.310.0415500ml 10铁盐Na2.EDTA.2H2OFeSO4.7H2037.227.8100× 1.861.39500ml 10有机成分盐酸吡哆醇(VB6)烟酸甘氨酸0.50.52100×0.0050.0050.02100ml 10丙液ⅠNa2MoO4.2H2O.2H2OCuSO4.5H2OCoCl2.6H2O0.250.0250.025100×0.01250.001250.00125500ml 10丙液Ⅱ肌醇100 100× 2 200ml 10丙液Ⅲ盐酸硫胺素(VB1) 0.4 50×0.02 100ml 2附注琼脂5.5-6.5g/L 蔗糖30g/LpH5.8-6.2备注：1钙液的母液量由于易沉淀所以取11g2丙液Ⅰ由于取的量太少所以先去12.5mg,溶于10mL水，再取1mL溶液稀释三、注意事项1、药品的质量问题：为了避免杂质及有害物质对组织培养的影响，必须注意药品质量，国内药品采用国际上通用标准，分为：一级，即保证试剂、优质纯试剂Guaranteed Reagent, GR级；二级，即分析纯试剂，Analytical Reagent, AR级；三级，即化学纯试剂，Chemical Pure, CP级；四级，即实验试剂，Laboratory Reagent, LR级。

MS培养基的配置

MS培养基的配置一、母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。

优点：（1）保证各物质成分的准确性；（2）便于配置时快速移取；（3）便于低温保藏。

1、MS大量元素母液（50X）称10升量溶解在200 ml蒸馏水中。

配1升培养基取20 ml。

注：CaCl2·2H2O单独配置2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

注：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0．25 mg的量。

3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

注：配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。

混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。

4、MS有机物母液（200X）称10升量溶解在50ml蒸馏水中。

配1升培养基母液5ml。

二、MS固体培养基的配制1、将配制好的MS培养基母液从冰箱中取出，按顺序排列，并逐一检查是否沉淀或变色，避免使用已失效的母液。

2、取少量的蒸馏水（约为配制培养基量的2/3）加入烧杯中。

注意：配500ml培养基用1000ml烧杯。

3、按母液顺序和规定量，用量筒、移液管或微量移液器取母液，依次放入烧杯中。

每1000ml培养基，需要：MS大量元素母液 20mlMS微量元素母液 10mlMS铁盐母液 10mlMS有机物母液 5ml4、通过计算，用微量移液器取所需的各种生长调节剂母液。

5、加入蔗糖（30g/L），溶解。

6、定容：用容量瓶。

7、调pH值：用0.1 N 和0.5N 的NaOH，一般pH=5.8。

注意：①经高温高压灭菌后，培养基的pH值会下降0.2—0.8，故调整后的pH值应高于目标pH值0.5个单位。

MS培养基的配制-母液法

• 在过滤灭菌加入激素和抗生素等时,应避免产生气泡,或尽快去除气泡
• 配好的培养基一般放置1-2条观察无菌落后方可使用
• 配好的培养基在15-20℃存放,并尽快在一个月内使用
组培室的卫生?
• 定期消毒,熏蒸 • 组培污染物的处理 • 污染的培养材料或培
养瓶,灭菌后洗涤 • 升汞等,回收后集中
灭菌温度与灭菌时间和培养基体积的关系
培养基的配制（母液法）
• 培养基配制过程 • /v_show/id_XMTE2Nzg
3MjA=.html • /player.php/sid/XM
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0.025
25
铁盐
Na2-EDTA
37.3
3730
FeSO4˙4H2O
27.8
100
2780
1000
10
微生素等
Gly VB1 VB2 VB6 肌醇
2.0
100
0. 1
5
0.5
525
100
5000
母液的配制
• 以MS培养基为例，其母液如下： • MS大量组份（扩大20倍）； • MS微量（扩大1000倍）； • MS有机组分（扩大50倍）； • MS铁盐（扩大100倍）；
2，配制分工：
• 1.配制母液 • MS大量------第1组 • MS微量------第2组 • MS有机------第3组 • MS铁盐------第4组 • 6-BA母液（50mL;1mg/ml） ------第5组 • NAA母液（50mL;1mg/ml） ------第6组 • 2,4-D母液（50mL,1mg/,mL)---第7组 • 0.1% 溶液升汞，2000mL ---第8组 • 来苏尔液—1000MmL-----第9组 • 75%酒精 ------------1000mL---第10组

MS培养基配方

实验八 MS培养基的配制和灭菌一、实验目的：了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。

天平、牛角匙、量筒、烧杯、搅拌机、胶桶、组培瓶、6种母液、白沙糖、活性炭、卡拉胶、实验材料:三、方法步骤1母液配制大量元素(母液I ) mg/L 100ml。

⑵ 微量元素(母液U ) (3)铁盐(母液川)⑷ 有机成分(母液W) IV A和W B⑸ 植物生长调节物质(2, 4-D, NAA)以上各种营养成分的用量，除了母液I为10倍浓缩液外，其余的均为100倍浓缩液。

其中，母液I、母液U及母液V的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到 1 L o母液川的配制方法是：将称好的FeS04 7H2O和Na2-EDTA 2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将 pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。

MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0.1 mg/mL)。

其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL ,即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。

2、培养基配制(1)配制培养液用量筒从各种母液中分别取出所需的用量：母液I为100 ml，母液U、M、V A和V B各10ml。

再取2，4-D 10ml、NAA 2ml，与各种母液一起放入烧杯中。

(2)称取54g卡拉胶；300g蔗糖；活性炭1g。

(3)在胶桶中加入规定量的各种母液，包括生长调节物质。

MS培养基的配制

MS培养基配方表
编辑本段注意事项：
1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。

2.母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。

3.MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。

其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水
浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。

4.组织培养是否能够获得成功，主要取决于对培养基的选择。

不同的培养基具有不同的特点，也就适合于不同的植物种类和接种材料。

在开展组织培养项目时，首先要对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择合适的使用。

组培用的培养基一般包括基础培养基和激素，但是植物激素的种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料有变化，因此各培养基配方中均不列入植物激素。

常用的基础培养基除了有MS培养基，还有B5培养基，N6培养基。

ms培养基配方

ms培养基配方MS培养基是一种广泛用于植物细胞培养的抗生素添加的标准培养基，可以用于各种植物细胞生物学实验，是一种快速高效的植物细胞培养方法。

MS培养基（Murashige and Skoog，1962）主要由六种化学复配组成，包括氯化钾、磷酸钾、硝酸钾、谷氨酸、氯化钠和B5维生素混合液。

这六种补充物是培养细胞生长和发芽的重要成分，可以通过调整不同组分的比例来获得更高的营养价值，以满足不同植物的生长需求。

MS培养基的组成比例可以调整，以便满足不同植物的生长需求。

氯化钾是培养基中最重要的钾源，每克培养基含有0.5-2.0毫克氯化钾，磷酸钾作为钾的替代品，其含量为0.2-0.8毫克每克培养基。

硝酸钾是细胞生长所需的重要组分，每克培养基含有0.15-0.8毫克硝酸钾。

谷氨酸作为一种有机氮源，每克培养基含有0.1-0.4毫克谷氨酸；氯化钠可维持培养基的离子平衡，每克培养基含有0.1-0.5毫克氯化钠；B5维生素混合液通常为2-9％，用于维持正常细胞生长。

此外，MS培养基作为植物细胞培养的标准培养基，也可以添加24种氨基酸和多种无机盐，以满足细胞生长和发芽的需求。

24种氨基酸中，非必需氨基酸比饱和氨基酸高出2倍左右，作为某些特殊植物细胞特殊需要的氨基酸，如甘氨酸和苏氨酸，可以根据细胞的特殊需求以不同的比例添加进去。

常用的无机盐包括硫酸钾、硫酸钠、氟化钠、氯化钠、酸钠、硫酸胺和亚硝酸钠等，细胞在此无机盐环境中才能正常发芽。

MS培养基是根据美国科学家Murashige和Skoog（1962）提出的植物培养技术来配制的，是一种标准化的植物细胞培养基配方，由营养物质如钾、磷、氮和铁等成分通过恰当的比例混合而成。

它具有组成比例可调、配方固定、细胞发芽率高、培养效率高、平衡缺乏及对细胞有利等特点，常用于植物细胞的培养实验，广泛用于植物细胞的生物学实验和栽培。

MS培养基的制备和使用步骤要求严格，首先，经过精制的培养基配方应由专家进行审核，确保其品质和效果，然后将所有组分称量、混合、离心、灭菌并过滤后，使其具有良好的稳定性。

MS培养基的配制,灭菌等注意事项

一、MS培养基母液注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。

不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。

MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

MS培养基配方

植物组织培养MS 培养基配方母液配制与保存配制培养基时，如果每次配制都要按着杨成分表依次称量，既费时，又增加了多次称量误差。

为了提高配制培养基的工作效率，一般将常用的基本培养基配制成10～200倍，甚至1000倍的浓缩贮备液，即母液。

母液贮存于冰箱中，使用时，将它们按一定的比例进行稀释混合，可多次使用，并在配制较多数量的培养基时，降低工作强度，也提高试验的精度。

基本培养基的母液有四种：大量元素（浓缩20倍），微量元素（浓缩100倍），铁盐（浓缩200倍），除蔗糖之外的有机物质（浓缩100倍） 1.大量元素配制大量元素母液时要分别称量，分别溶解，在定容时按表1中的序号依次加入容量瓶中，以防出现沉淀。

倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保存。

表1 大量元素母液（配1L20倍的母液）序号成分配方用量/（mg.L -1）称取量/g 配1L 培养基吸取量/mL1 NH 4NO 3 1650 33502 KNO3 1900 38 3 KH 2PO4 170 3.4 4 MgSO 4.7H 2O 370 7.4 5无水CaCl 2 440 6.6442.微量元素母液在配制微量元素母液时，也应分别称量和分别溶解，定溶时不分先后次序，可随意加入溶量瓶中定容（表2），一般不会出现沉淀现象。

倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保有存。

表2 微量元素母液(配制1L100倍母液)成分配方用量/(mg.L -1)称取量/g 配制1L 培养基吸取量/mLKI 0．83 0.083 10MnSO 4.H 2O 22．3 1.69 H 3BO 3 6．2 0.62 ZnSO 4.7 H 2O 8．6 0.86 Na 2MoO 4.2 H 2O 0．25 0.025 CuSO 4.5H 2O 0．025 0.0025 CoCl 2.6H 2O 0．0250.00253.铁盐母液由于铁盐无机化合物不易被植物吸收利用，只有基螯合物才能被植物吸收利用，因此需要单独配成螯合物母液表3）。

ms基本培养基母液的配制方法

ms基本培养基母液的配制方法一、准备所需材料1. 酸性植物激素溶液：包括吲哚乙酸（IAA）、纯度较高的激素（如6-苄基腺嘌呤，BA）等。

2. 碱性植物激素溶液：如生长素（GA3）等。

3. 无机盐溶液：包括硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钾、硼酸、锌硫酸、硼酸等。

4. 维生素溶液：如次黄嘌呤核苷酸（NAA）等。

5. 蔗糖溶液：用于提供能量和碳源。

6. 琼脂：用于凝固培养基。

二、配制步骤1. 称取适量的无机盐溶液成分，按照MS基本培养基的配方比例将各种盐溶解在蒸馏水中，常用的浓度为1/2或1/4的MS培养基。

2. 将酸性植物激素溶液和碱性植物激素溶液分别加入到溶液中，注意控制激素的浓度。

3. 加入维生素溶液，按照配方比例加入到溶液中。

4. 加入适量的蔗糖溶液，用来提供能量和碳源。

5. 最后将琼脂加入到溶液中，搅拌均匀。

6. 调节溶液的pH值，通常为5.8左右。

7. 用蒸馏水补充溶液至总体积，并充分搅拌均匀。

8. 将配制好的培养基溶液进行高温高压灭菌处理，一般条件下为121摄氏度，压力为0.1MPa，持续20分钟。

三、注意事项1. 在配制过程中，要保持实验室卫生，使用无菌操作。

2. 使用高质量的试剂和蒸馏水，避免杂质的干扰。

3. 激素的浓度要根据实验需要进行调整。

4. 配制过程中要注意酸碱度的调节，尽量控制在5.8左右。

5. 琼脂的加入要充分搅拌均匀，避免结块。

6. 灭菌处理要按照规定的条件进行，确保培养基的无菌性。

通过以上步骤，我们可以成功地配制出MS基本培养基的母液。

这种培养基在植物组织培养、植物细胞和胚胎发生研究中起着重要的作用。

根据实验的需要，可以在母液的基础上进一步调整培养基的成分和浓度，以满足不同植物材料的培养要求。

希望以上内容对您有所帮助。