链霉亲和素磁珠(Beads Streptavidin)
修饰磁珠的链霉亲和素
修饰磁珠的链霉亲和素好嘞,今天咱们聊聊“修饰磁珠的链霉亲和素”。
这个听起来很高大上的东西,其实就是个能帮助科学家们搞定各种实验的“小助手”。
你知道,科学实验就像做饭,有时候缺少了调料,味道就差了很多。
而链霉亲和素,正是那种不可或缺的调味品,让整个实验过程变得更加顺畅。
先说说磁珠。
磁珠就像那些小小的金豆豆,轻巧又灵活,能在实验室里帮助你“抓”住你想要的东西。
它们的表面可以被各种东西修饰,而链霉亲和素就是其中一个明星角色。
链霉亲和素这玩意儿,哎呀,别看它名字长,实际上就是一种能够特异性结合生物分子的蛋白质。
想象一下,你在参加聚会,突然看到一个老朋友,哇,一下就心生亲切感,那种感觉也就是链霉亲和素和目标分子之间的默契。
修饰磁珠的过程就像是在给这些小珠子穿上漂亮的衣服,让它们在实验中更有魅力。
你想想,光光的磁珠有点单调,是吧?加上链霉亲和素后,它们就变成了万众瞩目的焦点。
每当你把这些珠子放到样本中,它们就像热情的舞者,迅速和目标分子缠绵在一起。
嘿,别小看这一步,成功与否就看这一刻了。
很多实验都需要用到链霉亲和素。
比如,搞基因测序,研究人员就得用它来捕获特定的DNA片段。
这个过程就像是在海里捞鱼,链霉亲和素就是那条“网”,网住你心仪的那条大鱼。
捞鱼的时候,得小心别漏掉那些小虾米,要不然,成果就不那么美好了。
链霉亲和素的精准性就在于它能“识别”目标分子,这就像是你在找同样爱吃火锅的朋友,能一眼看出谁最对味。
修饰磁珠的链霉亲和素还可以用在药物开发上。
想象一下,你正在开发一种新药,目标分子在样本中简直是比针掉在大海里还难找。
这个时候,链霉亲和素就像是那根拐杖,让你一步步接近目标。
修饰后的磁珠能帮助你更有效地分离出所需分子,研究新药的效果。
像是给药物研发插上了翅膀,飞得更高,走得更远。
很多人可能会问,修饰过程到底怎么做?也不复杂,首先得把链霉亲和素和磁珠搭上线,然后用一些化学反应把它们粘在一起。
就像做手工,粘贴时小心别把手弄脏了。
链霉亲和素磁珠制备
链霉亲和素磁珠制备1. 简介链霉亲和素(Streptavidin)是一种具有高度亲和力的蛋白质,可与生物素结合。
利用链霉亲和素磁珠可以实现对生物素标记的分子或细胞的快速富集、纯化和检测。
本文将详细介绍链霉亲和素磁珠的制备方法及其在科学研究中的应用。
2. 制备方法2.1 材料准备•磁性微珠:选择具有较好磁性、稳定性和表面活性的微珠作为载体材料。
•交联剂:选择适合与微珠表面反应并实现交联固定链霉亲和素的交联剂。
•链霉亲和素:从可靠来源购买纯度较高的链霉亲和素。
2.2 制备步骤步骤一:表面修饰将磁性微珠与交联剂进行反应,使其表面引入活性基团,以便与链霉亲和素进行交联固定。
具体步骤如下: 1. 将磁性微珠分散在适量的溶剂中,并充分悬浮均匀。
2. 加入适量的交联剂,与磁性微珠进行混合反应。
反应条件可以根据具体交联剂而定,一般需要一定的时间和温度。
3. 反应结束后,用磁力使磁性微珠沉淀,并将上清液去除。
步骤二:链霉亲和素固定将链霉亲和素与修饰后的磁性微珠进行交联固定,形成链霉亲和素磁珠。
具体步骤如下: 1. 将修饰后的磁性微珠分散在适量的溶剂中,并充分悬浮均匀。
2. 加入适量的链霉亲和素溶液,与磁性微珠进行混合反应。
反应条件可以根据具体要求而定,一般需要一定的时间和温度。
3. 反应结束后,用磁力使链霉亲和素磁珠沉淀,并将上清液去除。
3. 应用领域3.1 蛋白质纯化利用链霉亲和素磁珠可实现对带有生物素标记的蛋白质的快速富集和纯化。
通过与链霉亲和素的特异性结合,可以将目标蛋白质从复杂的混合物中高效地富集出来,提高纯化效率。
3.2 细胞分离链霉亲和素磁珠在细胞分离中具有重要应用价值。
通过将链霉亲和素磁珠与特定生物素标记的抗体结合,可以实现对特定细胞亚群的选择性富集。
这对于研究细胞表型、功能以及疾病机制具有重要意义。
3.3 分子检测链霉亲和素磁珠可用于分子检测中的信号放大。
通过将链霉亲和素磁珠与带有生物素标记的探针结合,可以实现对目标分子(如核酸、蛋白质)的高灵敏度检测。
BeaverBeadsTM Streptavidin 链霉亲和素磁珠说明书
链霉亲和素磁珠(BeaverBeads TM Streptavidin )产品简介链霉亲和素-生物素(SA-Biotin )系统具有极高的结合亲和力(Kd=10^-15),在生物领域具有广泛的应用。
BeaverBeads TM Streptavidin 采用海狸专利的蛋白偶联技术将SA 共价连接于固相载体表面,可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。
本产品采用超顺磁性微球,粒径均一、形貌规整,有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。
本产品可配套自动化设备进行高通量操作。
产品信息产品信息 SA 磁珠(300 nm )生物素化IgG 结合性能 20μg/mg 磁珠 磁珠浓度 10 mg/mL 磁珠表面 亲水基团保存溶液 1×PBS ,含0.1%(w/v )BSA ,0.1%(v/v )proclin-300 保存条件 2-8 ℃ 保质期2年产品应用范围适用于体外诊断体系磁微粒化学发光免疫诊断操作流程(本操作以两步双抗体夹心CLIA 法为例)1. 使用前准备1.1. 检测试剂:包括捕获抗体、待测物标准品、待测样品、酶标记抗体、底物液等,使用前平衡至室温1.2. Washing buffer :用户根据需求配制洗液,使用时平衡至室温 1.3. 化学发光96孔平底微孔板1.4. 96孔平底微孔板磁性分离器:可选用海狸磁性分离器,Cat.No.60302 1.5. 漩涡振荡器 1.6. 真空吸液泵 1.7. 化学发光仪 1.8. 移液器2. 磁微粒化学发光免疫诊断操作流程2.1.调整磁珠至合适浓度(建议0.8mg/ml ),将磁珠置于漩涡振荡器上20 s ,振荡重悬磁珠。
用移液器移取50 μL 磁珠至96孔板中,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
2.2. 每孔加入100 μL 生物素化捕获抗体,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min 后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
亲和素(Avidin)和链霉亲和素(Streptavidin)的特性
亲和素(Avidin)和链霉亲和素(Streptavidin)的特性亲合素( A/ AV)和链霉亲合素(SA)是生物素的天然特异性结合物。
(实际应用中多用链霉亲合素)二者均为大分子蛋白,目前所有用于标记的物质均可与亲合素(AV)或链酶亲合系(SA编OsineHOu2能与生物活性分子抗原、抗体结合,也能与示踪物结合。
多与酶、荧光素及胶体金偶联。
提示:SA的pI低,表面所带正电荷少,且不含糖基,非特异性结合远低于AV,目前以SA标记的酶结合物更为常用小稻草相关推荐Streptavidin(链霉亲和素)Streptavidin-thiol(巯基化链霉亲和素)链霉亲和素修饰的上转换纳米粒子(40nm)Streptavidin Polystyrene Particles, 1% w/v, 1.5-1.9um(链霉亲和素包被的聚苯乙烯微球)Streptavidin coated glass slides(链霉亲和素修饰的载玻片)SA链霉亲和素Streptavidin-QD510SA链霉亲和素Streptavidin-QD530SA链霉亲和素Streptavidin-QD550SA链霉亲和素Streptavidin-QD610DSPE-PEG-Streptavidin 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-链霉亲和素NH2-PEG-Streptavidin MW:2K 氨基-聚乙二醇2000-链霉亲和素链霉亲和素修饰四氧化三铁(100nm)ICG-Streptavidin吲哚菁绿标记的链霉亲和素链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点链霉亲和素修饰金纳米簇SA链霉亲和素Streptavidin-QD630链霉亲和素修饰四氧化三铁(1μm)链霉亲和素标记PS微球(1μm)。
链霉亲和素磁珠连接生物素dna
链霉亲和素磁珠连接生物素dna以链霉亲和素磁珠连接生物素DNA链霉亲和素磁珠(Streptavidin Magnetic Beads)是一种广泛应用于生物学研究中的实验工具。
它具有高亲和力和高特异性,可用于连接或纯化含有生物素结构的分子。
本文将介绍链霉亲和素磁珠的原理、应用以及相应的实验步骤。
链霉亲和素磁珠主要由核心磁性颗粒和表面覆盖有链霉亲和素的包被层组成。
链霉亲和素是一种从链霉菌中提取的蛋白质,它具有高度特异性结合生物素的能力。
生物素是一种维生素B家族的成员,与链霉亲和素之间形成非常稳定的亲和力。
通过将链霉亲和素磁珠与含有生物素结构的分子连接,可以实现对这些分子的纯化、富集或检测。
链霉亲和素磁珠广泛应用于生物学研究中的多个领域。
其中一个重要的应用是DNA纯化和富集。
在研究中,科学家常常需要从复杂的混合物中纯化或富集特定的DNA片段。
通过在DNA片段上引入生物素标记,可以利用链霉亲和素磁珠将这些片段方便地富集到磁珠上,然后通过磁场将磁珠与其他杂质分离。
这种方法可以高效地富集目标DNA,并去除大量的杂质,从而提高后续实验的准确性和可靠性。
链霉亲和素磁珠连接生物素DNA的实验步骤如下:1. 准备实验材料:包括链霉亲和素磁珠、含有生物素标记的DNA 样品、缓冲液等。
2. 将链霉亲和素磁珠与DNA样品混合:将一定量的链霉亲和素磁珠加入含有生物素标记的DNA样品中,轻轻混匀,使磁珠与DNA 充分接触。
3. 孵育反应:将混合物在适当的温度和时间下孵育,使链霉亲和素与生物素结合。
4. 磁珠分离:将孵育后的混合物放入磁场中,利用磁性颗粒的特性将链霉亲和素磁珠与其他杂质分离。
通过去除上清液,可将富集了生物素DNA的磁珠洗涤和收集。
5. 洗涤和收集DNA:对于富集了生物素DNA的磁珠,可以进行一系列洗涤步骤以去除非特异性结合的杂质。
最后,使用适当的缓冲液溶解磁珠,并收集溶液中的DNA样品。
通过以上步骤,我们可以利用链霉亲和素磁珠连接生物素DNA,并高效地富集或纯化目标DNA。
Strep-TagII蛋白纯化磁珠(BeadsMagroseStrep-Tactin)
Strep-TagII蛋白纯化磁珠(BeadsMagroseStrep-Tactin)Strep-Tag II蛋白纯化磁珠(Beads Magrose Strep-Tactin)货号:M2350规格:5mL保存:2-8℃,保质期2年产品内容:Strep-Tag系统是模拟链霉亲和素-生物素系统的新型蛋白纯化系统,Strep-Tactin对Strep-Tag II 的亲和能力与链霉亲和素相比,至少强10倍以上,且分离纯化条件温和,在生理条件下即可实现蛋白的分离纯化;此外,与其他tag相比,Strep-Tag II为8个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,仅为1kDa左右,不影响融合后蛋白质的结构和功能。
这些温和的纯化参数能保存蛋白质的生物活性,并仅经一步提取即可产出超过99%的纯度。
Beads Magrose Strep-Tactin磁珠采用特殊的蛋白偶联工艺,将Strep-Tactin蛋白共价偶联到超顺磁性磁珠表面,制备了一种专为高效、快速分离纯化Strep-tag II蛋白的一种新型功能化材料,实现并搭建了提取速度、提取量及纯度兼得的蛋白纯化平台。
产品特性:产品名称Beads Magrose Strep-Tactin磁珠粒径30~150μm配基含量~6mg Strep-Tactin/mL Gel融合蛋白结合量1~7mg Strep-tag II蛋白/mL Gel悬液浓度10%(v/v)磁珠悬液保存液1×PBS(0.1%Tween-20+0.05%NaN3)Binding/Washing Buffer10mM Tris-HCl,150mM NaCl,1mM EDTA,pH8.0Elution Buffer 2.5mM desthiobiotin in Binding BufferRegeneration Buffer0.5M NaOH or1mM HABA in Binding Buffer注意:磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关,此处仅做参考值。
链霉亲和素Streptavidin 说明书
链霉亲和素Streptavidin说明书货号:S9170规格:1mg/5mg/10mg保存:-20℃干燥保存,有效期至少保持2年。
纯度:≥95%活性:≥15Units/mg,(Green改良法测定)。
产品来源:大肠杆菌发酵工程菌株。
分子大小:60kDa产品简介:链霉亲和素(SA)是阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)分泌的一种同型四聚体蛋白。
与生物素具有很高的亲和力,本制品为127AA最佳核心结构,每分子SA结合4个生物素分子,国际比活性12-15 U/mg。
SA与禽类亲和素(Avidin,AV)相比特异性更强,与生物素结合后半衰期长达6小时,而AV半衰期仅为1小时。
由于SA不含糖基且等电点接近于中性,因此SA在检测应用中具有比AV更低的非特异性背景。
本制品已广泛应用于包被免疫检测用微孔板,制备SA偶联酶制剂(如SA-HRP、SA-AP等),SA偶联荧光素(即荧光染料,如SA-FITC,SA-Cy2,SA-Cy3等)、SA偶联磁珠等,进而参与酶联免疫吸附和酶催化放大实验,免疫组化化学、亲和色谱填料制备、含StrepTagⅡ标签(8-AA寡肽)的蛋白纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究和生物芯片被料等生物技术领域。
使用方法:一、微孔板包被1.用碳酸钠缓冲溶液(pH9.6)溶解冻干粉,将浓度稀释成3-10ug/ml(客户可设定梯度进行实验)注意:由于SA等电点是7.4,包被不建议使用中性缓冲液。
2.用移液器吸取100ul/孔,4℃过夜包被或者37℃包被2h;3.洗涤:倒尽板孔中液体,加200ul洗涤液,静放三分钟,反复三次,最后将反应板倒置在吸水纸上,使孔中洗涤液流尽,扣干4.后续进入封闭、洗涤、抗原抗体结合流程若不立即进入下游实验,包被板需要进行烘干保存时。
包被前,将包被液中加入20%蔗糖作为活性保护剂。
二、SA偶联磁珠2.1NHS活化1.充分混匀磁珠后,取100μl PangoBeads COOH磁珠到1.5ml离心管中,置于磁性分离上,待固液分离后去除上清液;2.取200μl MES溶液(25mM,pH 5.0)加入到离心管中,置于磁性分离上,待固液分离后去除上清液。
链霉亲和素磁珠原理
链霉亲和素磁珠原理链霉菌素(Streptavidin)是一种来源于链霉菌(Streptomyces avidinii)的蛋白质,具有高度的亲和力和特异性结合生物素(Biotin)的能力。
而链霉亲和素磁珠则是将链霉菌素与磁珠结合,用于生物分离、纯化和检测等领域。
本文将介绍链霉亲和素磁珠的原理及其在生物科学领域中的应用。
链霉亲和素磁珠的原理主要基于链霉菌素与生物素的特异性结合。
生物素是一种小分子有机化合物,与链霉菌素结合后形成极为稳定的复合物,其结合力极强,不受pH、离子强度等因素的影响。
因此,链霉亲和素磁珠可通过链霉菌素与生物素的结合来实现对生物分子的特异性捕获和纯化。
在实际应用中,链霉亲和素磁珠通常被用于分离和富集含生物素标记的分子。
例如,研究人员可将生物素标记的抗体与链霉亲和素磁珠结合,然后利用磁场将目标分子特异性地富集到磁珠表面,再通过洗涤等步骤将非特异性结合的杂质去除,最终获得纯净的目标分子。
这种方法不仅操作简便、快速,而且能够避免对目标分子的损伤,因此在生物学实验中得到了广泛的应用。
除了在分离和富集生物素标记的分子方面,链霉亲和素磁珠还可用于生物分子的亲和纯化和检测。
例如,研究人员可将生物素标记的核酸与链霉亲和素磁珠结合,通过磁场将目标核酸富集到磁珠表面,然后进行亲和纯化和检测。
这种方法不仅能够高效地富集目标核酸,而且还能够避免对核酸的降解,因此在分子生物学和诊断领域具有重要的应用前景。
总之,链霉亲和素磁珠作为一种高效、特异性的生物分离和纯化工具,在生物科学领域具有广泛的应用前景。
通过充分利用链霉菌素与生物素的特异性结合原理,链霉亲和素磁珠能够实现对生物分子的特异性捕获、纯化和检测,为生命科学研究和生物医学诊断提供了重要的技术支持。
相信随着技术的不断进步和创新,链霉亲和素磁珠在生物科学领域中的应用将会越来越广泛,为人类健康和生命科学研究做出更大的贡献。
一种链霉亲和素磁珠及其制备方法和应用
一种链霉亲和素磁珠及其制备方法和应用
链霉亲和素磁珠是一种新型生物材料,它可以在蛋白质分离纯化、酶催化、基因检测等生物技术领域发挥非常重要的作用。
本文将从制
备方法、应用方向等几个方面来详细介绍链霉亲和素磁珠的相关知识。
制备方法:
1、选取高纯度的N-甲基二乙酸丙烯酰胺作为载体材料,通过化
学反应在其表面共价结合上羧甲基二亚胺链霉素分子。
2、通过反应后去除载体颗粒即可制得链霉亲和素磁珠。
3、链霉亲和素磁珠在实际使用中,可以通过磁性质来快速地对
其进行回收和重新利用。
应用方向:
1、蛋白质纯化领域:链霉亲和素磁珠可以通过对目标蛋白质的
亲和作用,快速地将其与混合物中的其他蛋白质分离开来,获得高纯
度的目标蛋白质。
2、酶催化领域:链霉亲和素磁珠作为酶载体,可以快速地将酶
与其它物质分离开来,提高催化反应的效率。
3、基因检测领域:链霉亲和素磁珠可以在DNA片段的末端与特
异性序列结合,快速地将目标DNA分离并进行检测。
总之,链霉亲和素磁珠是一种在生物技术领域中十分具有潜力的
生物材料,它可以在生物制药、医学科学等领域发挥其作用。
在未来
的发展中,链霉亲和素磁珠有望成为生物技术领域不可或缺的重要生
物材料之一。
StreptavidinMagneticBeads亲和磁珠产品特点
StreptavidinMagneticBeads亲和磁珠产品特点
Streptavidin Magnetic Beads亲和磁珠特点
1)磁含量高,磁响应速度快;
2)结合能力高;
3)提供多种生物配体,适合目标分子的靶向标记;
4)从复杂材料中分离出目的产物,并保持其生物活性;
5)稳定性好,批次间可重复性高,应用中结果的一致性。
亲和磁珠为均匀、单分散的磁性颗粒,可选粒径包括纳米(50 nm, 100 nm)、亚微米(150 nm, 200 nm)和微米(0.5-12 μm)。
纳米及亚微米Ab功能磁珠具有顺磁性,单层牛血清白蛋白(BSA)以共价方式偶联于磁性材料表面,使得磁珠表面特性更优,稳定性增强,非特异性结合降低。
微米功能磁珠具有顺磁性,由交联的聚苯乙烯和均匀分布的磁性材料组成。
丰富的亲和配体通过共价方式引入到磁珠表面,使得Absolute Mag™亲和磁珠具有更多的生物结合位点,磁珠使用量少,非特异性结合率低,已被应用于免疫分析、蛋白纯化、核酸分离提取、细胞分选、酶的固定等多个领域。
链霉亲和素磁珠使用说明
链霉亲和素磁珠使用说明货号:S7210规格:1mL(10mg/mL)保存:2-8℃产品内容:Beads Mag SA磁珠是采用定向固定技术将重组中性链霉亲和素共价偶联到形态规整、粒径均一的磁性微球上,形成单分子固定层,可用于生物素化核酸、抗体或其他生物素化配体和靶分子的分离和检测。
由于具有单层的链霉亲和素,绝大多数生物素结合位点在空间上不仅可以结合游离生物素,而且还可以结合生物素化的配体/靶标,具有快速液相反应动力学特性。
形状确定的特异性表面便于进行高效捕获、分离和下游操作,链霉亲和素单层可确保没有明显泄漏,而通过避免吸附过量的链霉亲和素,批次一致性和结果的可重复性得到了保证。
Beads Mag SA以聚合物为基材的实心微球,主要用于免疫检测、免疫沉淀、细胞分选等。
产品特性:产品名称Beads Mag SA基质Polymer粒径2μm浓度10mg/ml保存条件PBST(pH7.4,0.01%Tween-20),2-8℃结合量1000pmol free biotin/mg of beads20μg biotinylated antibody/mg of beads400pmol biotinylated oligonucleotides/mg of beads注意事项:1.请勿离心、干燥或者冷冻磁珠,这些操作可能导致磁珠的聚集从而降低结合活性;2.从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀,操作过程中应避免产生气泡;3.生物素标记好蛋白或核酸后,用脱盐柱去掉多余的游离生物素;4.尽量减少蛋白降解,包括制备细胞裂解液中包含的蛋白酶抑制剂;5.生物素化分子的大小会影响磁珠的载量,用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
手动操作步骤:以下操作过程需要准备的试剂:注:用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH1.固定化核酸1.1将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s,振荡重悬磁珠,取100μl 磁珠到新的离心管中,置于缓冲液名称成分Buffer I(适用于结合生物素化核酸)10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM EDTA,1M NaCl ,0.01%~0.1%Tween-20Buffer II (适用于结合生物素化抗体/蛋白)PBS,pH7.4,含0.05%Tween-20,可根据需要添加0.01%~0.1%BSA磁力架上,1min后移除上清液;注意:用户可根据生物素化分子的多少,参考磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量,建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
链霉亲和素磁珠原理
链霉亲和素磁珠原理
链霉亲和素磁珠原理是一种基于链霉亲和素和磁性珠子的结合反应原理。
链霉亲和素是一种特异性结合DNA的蛋白质,它可以与DNA序列特异性地相互作用,从而实现DNA的捕获和富集。
磁性珠子则是一种具有磁性的微珠,通过外加磁场可以实现对其运动的控制。
在链霉亲和素磁珠的原理中,首先将链霉亲和素分子固定在磁性珠子的表面。
然后将含有目标DNA的样品与链霉亲和素磁珠混合,由于链霉亲和素和DNA之间的特异性相互作用,目标DNA会与链霉亲和素结合在一起。
接下来,通过外加磁场的作用,链霉亲和素磁珠可以被吸附在反应容器的壁上或磁性架上,而其他非特异性结合物质则会被洗脱掉。
这样就可以将目标DNA分离出来,实现其富集和纯化。
最后,通过改变环境条件,例如改变盐浓度或pH值,可以破坏链霉亲和素和DNA之间的结合,释放出目标DNA。
通过这种原理,可以快速、高效地富集和纯化目标DNA,为后续的分析和应用提供了基础。
需要注意的是,在文中不能再出现与标题相同的文字,这样以避免重复和冗余。
链霉亲和素磁珠
链霉亲和素磁珠链霉亲和素磁珠保存:2~8℃保存,有效期1年。
产品说明:链霉亲和素-生物素(SA-Biotin)系统具有极高的结合亲和力(Kd=10^-15),在生物领域具有广泛的应用。
Streptavidin采用蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面,可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。
本产品采用超顺磁性微球,粒径均一、形貌规整,有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。
本产品可配套自动化设备进行高通量操作。
产品信息:产品信息SA磁珠(1μm)SA磁珠(2μm)游离生物素1100pmol/mg磁珠1000pmol/mg磁珠生物素化单链寡核苷酸(24nt)500pmol/mg磁珠400pmol/mg磁珠生物素化IgG20μg/mg磁珠20μg/mg磁珠磁珠浓度10mg/mL磁珠表面亲水基团保存溶液1×PBS,含0.1%(v/v)Tween-20,0.1%(w/v)NaN3产品应用范围:(1)免疫检测、分离蛋白、细胞分选等。
Streptavidin可特异性地结合生物素化抗体或抗原,作为免疫检测、ELISA等固相反应载体,或用于分选细胞等。
(2)分离核酸、制备核酸探针等。
Streptavidin可特异性地结合生物素化的核酸探针,广泛应用于DNA、RNA的杂交实验。
(3)DNA-蛋白质相互作用研究。
Streptavidin可特异性地结合生物素化的靶点DNA或RNA片段,可用于蛋白质与核酸相互作用研究。
结合生物素化分子操作流程(本操作以适用于链霉亲和素磁珠系列所有产品)1.使用前准备1.1缓冲液:以下为常用的缓冲液成分,用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH1.2Buffer I(适用于结合生物素化核酸):10mM Tris-HCl (pH7.5),1mM EDTA,1M NaCl,0.01%~0.1% Tween-201.3Buffer II(适用于结合生物素化抗体/蛋白):PBS,pH7.4,含0.05%Tween-20,可根据需要添加0.01%~0.1%BSA1.4磁性分离器:可选用海狸磁性分离器,适用于1.5mL、2mL或15mL离心管1.5漩涡振荡器1.6旋转混合仪1.7移液器及吸头1.8合适的离心管2.结合生物素化核酸2.1.将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s,振荡重悬磁珠。
链霉亲和素纳米磁珠说明书
版本2022/09/08(02)
链霉亲和素纳米磁珠(100-300nm )说明书1/1链霉亲和素纳米磁珠(100-300nm )产品说明书
【产品名称】链霉亲和素纳米磁珠(100-300nm )
【英文名称】Streptavidin Nano Magnetic Beads (100-300nm)
【订货信息】
纳米磁珠/纯水【简介】
东纳生物科技有限公司提供链霉亲和素纳米磁珠(100-300nm ),链霉亲和素磁珠可与生物素化的多肽、蛋白、抗体等生物配体高效偶联,应用于免疫分析、基因分析和纯化PCR 产物等。
【产品参数】
图1:100nm 链霉亲和素磁珠扫描电镜(左图,100±10nm )、200nm 链霉亲和素磁珠扫描电镜(中图,
220±30nm )以及300nm 链霉亲和素磁珠扫描电镜(右图,310±20nm )。
【注意事项】
1.磁珠取用前应充分混匀,防止取用改变磁珠浓度,避免长时间超声对磁珠表面破坏;
2.磁珠取用后,使用前请进行磁分离并用纯水或所用缓冲溶液清洗2-3遍;
3.磁珠使用和保存过程中应避免冻融。
【生产单位】
公司名称
南京东纳生物科技有限公司地址
南京市江宁区龙眠大道568号南京生命科技小镇5号楼北楼6楼邮政编码
210000电话号码
025********电子邮箱
**************公司网站。
链霉亲和素磁珠使用说明
链霉亲和素磁珠,亲水性链霉亲和素磁珠概述链霉亲和素磁珠由 1 μm 超顺磁微粒与高纯度链霉亲和素共价结合而成。
磁珠可用于捕获生物素标记的底物,包括生物素标记的抗原、抗体和核酸(1,2)。
由于生物素-链霉亲和素的相互作用很强,其结合常值(Ka)为1015 M-1,并且链霉亲和素的非特异性结合率很低,使得被捕获的底物可满足后续实验要求,包括mRNA 的分离和一抗、二抗的获得(3,4)。
亲水性链霉素亲和磁珠由 2 μm 超顺磁颗粒与高纯度链霉亲和素共价结合形成。
由于这种磁珠有50-60%的磁性成分,因而使得它非常适用于自动化高通量实验操作。
它们也可用来捕捉生物素标记的底物,比如像抗原、抗体和核酸(1,2)。
对蛋白质和核酸的非特异结合非常低。
支持基质1 μm 无孔超顺磁微粒(#S1420)或2 μm 无孔超顺磁微粒(#S1241)。
结合能力1 mg S1420 可结合1000 pmol 以上的游离生物素,或500 pmol 以上的生物素标记的20 bp 单链寡核苷酸。
1 mg S1421 可结合800 pmol 以上的游离生物素,或400 pmol 以上的生物素标记的20 bp单链寡核苷酸。
磁珠以下列形式提供:4 mg/ml 磁珠悬浮在磷酸缓冲液(pH 7.4),0.1% BSA 和0.02%NaN3 组成的体系中。
参考文献(1) Chung, S. et al. (2005) J. Biol. Chem ., 280, 4578.(2) Tang, B. et al. (2003) Genome , 46, 833–840.(3) Zhang, X. et al. (2006) J. Clin. Invest ., 116, 3050–3059.(4) Fernandez-Cabezudo, M.J. et al. (2004) Internat.Immunol ., 16,1215–1223.。
产品说明书Dynabeads M-280 Streptavidin
Dynabeads® M-280 Streptavidin描述链霉亲和素偶联的Dynabeads® 是生物素化核酸、抗体或其他生物素化配体和靶分子分离和处理的金标准。
链霉亲和素-生物素相互作用所具有的极高结合亲和力(Kd=10^-15) 已在大量应用中使用。
这些均一的超顺磁珠直径为2.8 µm,具有共价连接到表面并另外用BSA 封闭的单层–而不是多层–重组链霉亲和素。
由于具有单层的链霉亲和素,绝大多数生物素结合位点在空间上不仅可以结合游离生物素,而且还可以结合生物素化的配体/靶标。
它们显示出快速液相反应动力学特性。
形状确定的特异性表面便于进行高效捕获、分离和下游操作。
链霉亲和素单层可确保没有明显泄漏,而通过避免吸附过量的链霉亲和素,批次一致性和结果的可重复性得到了保证。
优点和特点:∙直接快速分离任何生物素化分子∙低带电和中性微珠,非常适合与蛋白质、肽和抗体结合∙方案灵活,具有温和高效的液相反应动力学∙生物磁方案可轻松用于自动化平台∙批次间可重复性高,确保应用中结果的一致性应用:在过去15 年中,Dynabeads® M-280 Streptavidin 已经在众多应用中得到使用和引用。
重要应用包括制备单链DNA 模板,分离RNA 和DNA 结合蛋白,固定大DNA 片段,纯化测序产物以及特异性捕获核酸。
您知道吗?全世界有超过25000 个日常IVD 设备使用Dynabeads®结合能力:分子的大小和生物素化步骤会影响结合能力。
该能力还取决于空间可用度以及珠和分子间及分子之间的电荷相互作用。
完成固定后,珠表面上的每个链霉亲和素分子上有两至三个生物素结合位点。
一毫克Dynabeads® M-280 Streptavidin 通常结合:∙650-900 pmol 游离生物素∙约200 pmol 生物素化肽∙约10 µg 生物素化IgG∙约10 µg ds-DNA∙约200 pmol ss-寡核苷酸。
磁珠纯化原理
磁珠法纯化DNA原理磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。
硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式AMPure bead :1.2M NaCl,7% PEG8000标准的AMPure xp是用来筛选掉100bp的DNA片段,通过改变PEG8000的含量可改变至(MAX 300bp,MIN 50bp),PEG8000的浓度越高越能筛选出片段小的DNA Streptavidin magnetic bead (链霉亲和素磁珠):Streptavidin(SA)链霉亲和素,magnetic磁性的,亲和素能与生物素之间存在强度最高的非共价作用(称作BAS系统)二者结合形成复合物的解离常数很小,呈不可逆反应性;而且酸、碱、变性剂、蛋白溶解酶以及有机溶剂均不影响其结合。
玻璃奶:是一种白色硅颗粒,能0.2kb到50kb大小的DNA(双链,单链,线状,超螺旋),结合原理:在高盐状态下,玻璃奶周围的负电荷被打破,并允许DNA磷酸负电荷与玻璃奶特异性结合,在低盐时(H20或1X TE)溶解分离DNA<100bp时,高盐状态下结合率高;DNA>100bp时,低盐状态下结合率高;pH<7.0时,结合率高。
氧化硅羟基磁珠:此种微球具有核壳结构,即超顺磁性核心以及无机氧化硅外壳,硅烷醇集团(羟基)在chaotropic(盐酸胍、异硫酸氰胍等)存在条件下,能够与溶液中的核酸通过疏水作用、氢键作用和静电作用等发生特异性结合,而不与蛋白质和其它杂质结合氧化硅羧基磁珠:该磁珠表面修饰有羧基官能团,能够在特殊试剂(如EDC)作用下将蛋白、寡聚核苷酸等生物配体共价偶联到磁珠表面,可应用在蛋白纯化,核酸纯化,亲和层析等领域。
Streptavidin Beads 6FF
Streptavidin Beads6FF目录1.产品介绍 (1)2.纯化流程 (1)3.填料清洗 (3)4.订购信息及相关产品 (3)1.产品介绍Streptavidin Beads6FF利用生物素与链霉亲和素配体之间的相互作用纯化生物素或生物素化的蛋白、抗体等物质。
链霉亲和素与生物素之间的亲和力很强,需要在变性条件下洗脱,链霉亲和素对亚氨基生物素的亲和力相对较弱,可以在pH9.5-11.0结合,pH4.0时洗脱,不需要使用变性剂所以能更好的保持亲和素偶联物的活性。
Streptavidin Beads6FF采用高度交联的6%琼脂糖介质,可耐受较高的流速及化学稳定性,适合大规模纯化。
具体性能见表1。
表1.Streptavidin Beads6FF产品性能性能指标基质高度交联的6%琼脂糖微球配体链霉亲和素载量>200nmol Biotin/ml介质粒径(μm)45-165最大流速0.3MPa,3barpH稳定范围4-9储存缓冲液含20%乙醇的1XPBS储存温度2°C-8°C2.纯化流程2.1缓冲液的准备所用水和缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
生物素或生物素化物质的纯化平衡/洗杂液:20mM NaH2PO4,0.15M NaCl,pH7.4洗脱液:8M盐酸胍,pH1.5亚氨基生物素标签物质的纯化平衡/洗杂液:50mM碳酸铵,0.5M NaCl,pH10.0洗脱液:50mM碳酸铵,0.5M NaCl,pH4.02.2样品准备上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用平衡/洗杂液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用平衡/洗杂液透析。
样品在上样前建议离心或用0.22μm或0.45μm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
2.3Streptavidin Beads6FF装填Streptavidin Beads6FF被广泛应用于工业纯化,因此,涉及到各种中压色谱层析柱的填装,下面介绍使用Streptavidin Beads6FF填装层析柱的方法。
streptavidin beads原理
链霉亲和素(Streptavidin)磁珠是一种在生物技术和免疫学研究中广泛应用的固相载体。
其原理基于链霉亲和素与生物素(Biotin)之间极高特异性和亲和力的非共价相互作用。
这种结合是自然界中最紧密的非共价键之一,具有极低的解离常数(Kd≈10^-15 M),这意味着一旦生物素化分子遇到链霉亲和素,它们会迅速且牢固地结合。
工作原理:1.链霉亲和素与生物素结合:o链霉亲和素是一个四聚体蛋白质,每个亚基都有一个高度疏水的生物素结合位点。
因此,一个链霉亲和素分子理论上可以结合多达四个生物素分子,但由于空间构象限制,通常结合效率为3-4个生物素分子。
2.生物素标记物:o在实验中,研究人员首先将目标分子(如抗体、酶、核酸、肽或细胞表面抗原等)通过化学方法生物素化,即在这些分子上连接生物素标签。
3.磁珠耦合:o链霉亲和素被固定在磁性微珠上,形成链霉亲和素磁珠。
这些磁珠一般由二氧化硅、聚合物或其他材料制成,并具有磁响应性,可以通过外部磁场进行定向移动和分离。
4.结合与分离过程:o生物素化的靶分子溶液与链霉亲和素磁珠混合时,由于链霉亲和素对生物素的高亲和力,生物素化的分子会被快速捕获到磁珠表面,从而实现固液相转换。
o通过应用磁场,可以轻易地将结合了靶分子的磁珠从溶液中分离出来,而未结合的物质则可以通过离心或者倾倒废液去除。
5.应用举例:o在T细胞活化实验中,链霉亲和素磁珠可以用于结合生物素化的抗CD3抗体和其他共刺激分子(例如生物素化的抗CD28抗体),形成人工APC(Antigen Presenting Cell模拟物)。
当T细胞与这些磁珠上的抗体复合物接触时,能够提供激活所需的双信号,从而实现高效、可控的T细胞活化。
6.纯化与检测:o链霉亲和素磁珠也广泛应用于样品纯化,如生物素标记的cDNA、蛋白质以及其他生物分子的分离和纯化,以及在各种诊断和药物筛选平台中作为固相吸附剂。
综上所述,链霉亲和素磁珠利用了生物素-链霉亲和素系统的高度特异性结合性质,成为一种灵活且高效的生物技术工具,在多种科研和临床应用中发挥重要作用。
链霉亲和素亲和素Avidinandstreptavidin简介及产品分类
链霉亲和素亲和素Avidinandstreptavidin简介及产品分类一、链霉亲和素性质链霉亲和素(streptavidin,SA)是由链霉菌streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质,分子量为65kD。
链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成,其氨基酸组成中,甘氨酸和丙氨酸的含量较大,而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基;链霉亲和素是一种稍偏酸性(pH6.0)的蛋白质,并且不带任何糖基。
链霉亲和素分子中每条肽链都能结合一个生物素,因此与亲和素一样,一个链霉亲和素分子也能结合4个生物素分子,二者亲和常数(K)亦为1015L/mol。
在蛋白水解酶作用下,链霉亲和素可在N端10~12和C端19-21间断裂,形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。
链霉亲和素的活性单位也是以结合1μg生物素所需的量来表示,1mg链霉亲和素的最高活性可达18U。
二、亲和素和链霉亲和素的比较相同点:1、生物素结合能力:AV:13~15U,SA:14~18U2、活性中心依赖于色氨酸-懒氨酸:亲和素在氨基酸序列的70-70和110-111两个位点有色氨酸-懒氨酸,链霉亲和素在氨基酸序列的79-80和120-121两个位点含有色氨酸-懒氨酸。
不同点:1、分子量:AV=66KD, SA=54KD2、等电点:AV=10.5, SA=6.0, AV带正电较多,非特异性结合较强。
3、位阻效应:SA的生物素结合位点较AV深,位阻效应较强,长臂生物素更适合。
4、生物素的结合:AV随机结合,SA协同结合。
5、氨基酸序列:AV含二硫键和10%糖,SA含甘氨酸丙氨酸较多,无糖和二硫键。
三、链霉亲和素在ELISA中的应用酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。
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链霉亲和素磁珠(Beads Streptavidin)
保存:2~8℃保存,有效期1年。
产品说明:
链霉亲和素-生物素(SA-Biotin)系统具有极高的结合亲和力(Kd=10^-15),在生物领域具有广泛的应用。
Beads Streptavidin采用蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面,可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。
本产品采用超顺磁性微球,粒径均一、形貌规整,有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。
本产品可配套自动化设备进行高通量操作。
产品信息:
产品信息SA磁珠(300nm)
生物素化IgG结合性能5μg/mg磁珠
磁珠浓度10mg/mL
磁珠表面亲水基团
保存溶液1×PBS(10mM PBS)PH7.4,含0.1%(v/v)Tween-20,0.1%(w/v)NaN3产品应用范围:
适用于体外诊断体系
磁微粒化学发光免疫诊断操作流程(本操作以两步法双抗体夹心ELISA为例)
一、使用前准备
1.检测试剂:包括捕获抗体、待测物标准品、酶标记抗体、底物液等,使用前平衡至室
2.Wash buffer:用户根据需求优化洗液成分,使用时平衡至室温
3.化学发光96孔平底微孔板
4.96孔平底微孔板磁性分离器
5.漩涡振荡器
6.旋转混合仪
7.移液器
二、磁微粒化学发光免疫诊断操作流程
1.确保磁珠已调整至合适浓度,将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s,振荡重悬磁珠。
用移液器移取50μL合适浓度的磁珠至96孔板中,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
2.加入100μL捕获抗体,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔。
3.加入200μL的Wash buffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
4.加入50μL待测物标准品,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔。
5.加入200μL的Wash buffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
6.加入100μL酶标记抗体,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔。
7.加入200μL的Wash buffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
8.加入150μL的底物液,充分震荡重悬磁珠,避光孵育5min。
9.将96孔板放入化学发光仪读数,并进行相应数据处理。
三、注意事项
1.应避免对磁珠进行干燥、冷冻和离心等操作。
2.为减少磁珠损失,每次磁性分离的时间应不少于1min。
3.从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。
操作过程中应避免产生气泡。
4.建议使用低吸附的移液器吸头和反应管,避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。
5.磁珠与生物素化分子的结合性能与分子量大小有关,用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
6.本产品仅供研究使用。