实验8 血细胞计数板的使用
血细胞计数板的使用
评估治疗效果
抗生素治疗效果评估
通过血细胞计数板监测白细胞数量变 化，有助于评估抗生素治疗效果，指
导抗生素的合理使用。
贫血治疗效果评估
通过血细胞计数板监测红细胞参数变 化，有助于评估贫血治疗效果，指导
贫血治疗方案的调整。
血液肿瘤治疗效果评估
通过血细胞计数板监测异常细胞数量 变化，有助于评估血液肿瘤治疗效果，
02
血细胞计数板使用步骤
准备阶段
01
02
03
04
清洁与准备
确保计数板和盖玻片清洁，无 污渍和尘埃。
标记与编号
在血细胞计数板的每个大方格 上标记样本编号，以便后续识
别。
样本制备
将待测血液样本进行稀释，通 常使用等量稀释法，即将一滴 血液加入等量的稀释液中。
温度与时间
确保实验室温度适宜，避免温 度波动影响实验结果。
03
血细胞计数板使用注意事 项
清洁度要求
清洁计数板
每次使用前，应确保计数板清洁 无污染，避免杂质干扰计数结果 。
清洗方法
使用温和的洗涤剂清洗，然后用 清水冲洗干净，最后用干净的纱 布擦干。
操作规范
样本制备
将待测血液样本稀释至适当浓度，以便在计数板 上进行准确计数。
计数步骤
按照规定的操作步骤，逐格进行计数，并记录每 个格子中的血细胞数量。
血细胞计数板使用原理基于血细胞的体积和数量之间的关系 。由于不同种类的血细胞具有不同的体积，因此可以通过测 量一定体积的血液样本中包含的血细胞数量来计算各种血细 胞的浓度。
通过将血液样本滴入计数板的网格中，并使用显微镜观察， 可以计算每个小格中血细胞的数量。然后，通过计算整个血 液样本中包含的血细胞数量，可以得出各种血细胞的浓度。
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法血球计数板是临床实验室中常用的一种设备，用于进行血细胞计数。
正确的计数方法对于获得准确的结果至关重要。
下面将介绍血球计数板的计数方法，以便能够正确操作并获得可靠的结果。
首先，准备工作。
在进行血球计数之前，需要准备好所需的材料和设备，包括血球计数板、显微镜、血液样本、稀释液、计数计。
确保所有设备都经过清洁消毒，并且处于良好的工作状态。
接下来，进行稀释。
取一定量的血液样本，加入适量的稀释液进行稀释。
稀释的目的是使血液细胞在显微镜下能够清晰可见，并且数量适中，便于计数。
然后，装载计数板。
将稀释后的血液样本吸入到血球计数板的计数室中，填满计数室的深度。
注意避免气泡的产生，以免影响计数的准确性。
接着，进行计数。
将计数板放置在显微镜下，选择合适的倍率进行观察。
通过目镜和物镜的调节，使细胞能够清晰可见。
然后，在计数室的方格中进行血细胞的计数。
通常情况下，我们会选择若干个方格进行计数，然后取平均值作为最终结果。
最后，计算结果。
根据所选取的方格数目和计数结果，进行计算得出血液细胞的浓度。
根据浓度和稀释倍数，最终可以得出原始血液样本中细胞的数量。
需要注意的是，进行血球计数时，要保持专注和耐心，避免疏忽和错误。
另外，在进行计数前后，要对设备和材料进行清洁和消毒，以确保实验结果的准确性和可靠性。
总之，血球计数板的计数方法是一项重要的实验操作，正确的操作方法能够保证实验结果的准确性。
希望以上介绍能够帮助大家正确使用血球计数板，并获得准确可靠的实验结果。
血细胞计数板实验步骤
血细胞计数板实验步骤
血细胞计数板实验步骤如下：
1.准备样本：将待测血液样品放在离心管中。
2.离心：将离心管放入离心机中，以适当的速度和时间进行离心，以分离血细胞和血浆。
3.准备计数板：取出血细胞计数板，用酒精棉球擦拭清洁表面。
4.稀释液：根据实验要求，制备适当浓度的稀释液。
将稀释液
注入计数板上的红细胞板和白细胞板中。
5.取样：用移液管吸取一定量的离心后的血液样品，滴在红细
胞板和白细胞板的相应计数区域中。
6.观察与计数：将计数板放在显微镜下，使用10倍或40倍镜
头观察计数区域。
计数红细胞时，注意红细胞在四个计数方块中的数量，并计算平均值。
计数白细胞时，注意白细胞在五个计数方块中的数量，并计算平均值。
计数时注意避免重复计数和漏计。
7.结果计算：根据计数区域的大小和样本稀释倍数，计算出单
位体积内的红细胞和白细胞个数。
8.结果分析：根据实验目的和标准，对结果进行分析和判断。
9.清洗清理：使用结束后，用盐水或蒸馏水清洗计数板，擦干后可存放。
注意事项：
- 操作时要注意无菌操作，避免外界污染。
- 测定时要保持计数板表面的清洁，避免出现人为误差。
- 离心时应根据实验要求设定正确的离心速度和时间，以充分分离血细胞和血浆。
- 在显微镜下观察时，要注意聚焦和调整光线，以获得清晰的图像。
- 仪器使用完毕后要进行清洗和消毒，以保持实验室的卫生和安全。
细胞计数板使用方法
细胞计数板使用方法细胞计数板是生物实验室中常用的一种实验工具，用于进行细胞计数和浓度测定。
正确的使用方法能够保证实验结果的准确性，下面将介绍细胞计数板的使用方法。
首先，准备工作。
在开始使用细胞计数板之前，需要确保仪器和试剂的清洁和完整。
检查细胞计数板是否有损坏或者污垢，需要使用前用70%乙醇擦拭干净。
另外，还要准备好显微镜、移液器、细胞计数液等相关设备和试剂。
其次，取样。
将需要计数的细胞悬液充分摇匀后，用移液器吸取适量的细胞悬液，然后将其滴入细胞计数板的计数室。
注意不要使细胞悬液溢出计数室，以免影响计数结果。
接着，观察计数。
将装有细胞悬液的细胞计数板放置在显微镜上，调整镜头，通过目镜观察计数室中的细胞。
通常情况下，使用40倍或者100倍镜头进行观察。
在观察的过程中，需要仔细数清每个小方格中的细胞数量，以确保准确的计数结果。
然后，计算浓度。
根据所观察到的细胞数量，结合细胞计数板的划分规则，可以计算出细胞的浓度。
通常情况下，细胞计数板的计数室是由若干个小方格组成的，通过计算每个小方格中的细胞数量，再结合相应的倍数和稀释倍数，就可以得出细胞的浓度。
最后，清洗和保存。
使用完毕后，需要将细胞计数板进行彻底的清洗和消毒。
首先用蒸馏水冲洗干净，然后用70%乙醇擦拭，最后晾干或者用吹风机吹干。
清洗干净后，将细胞计数板放置在干燥通风处保存，避免阳光直射和污染。
综上所述，正确的使用细胞计数板需要注意准备工作、取样、观察计数、计算浓度以及清洗和保存等步骤。
只有严格按照操作规程进行，才能保证实验结果的准确性和可靠性。
希望本文对您正确使用细胞计数板有所帮助。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法
血球计数板是一种用于测量血液中各种血球数量的实验室工具。
下面是使用血球计数板的一般步骤：
1. 准备工作：
- 清洁血球计数板：使用酒精或其他适当的清洁剂将血球计
数板彻底清洁，并确保完全干燥。
- 准备血液样本：采集血液样本，并将其置于抽血管中。
2. 充填血液样本：
- 将橡胶管连接至抽血管的一端，并将另一端放入含有适当
稀释液（例如乙醇，盐水等）的试管中。
- 轻轻压抽血管，让血液与稀释液混合，确保样本适当稀释。
3. 填充计数室：
- 将计数室的一角放入混合好的血液样本液中。
- 逐渐放松手指，使液体自然充满整个计数室。
4. 观察计数室：
- 使用显微镜，在10倍或40倍放大倍数下观察计数室的血
球图像。
- 记录计数室内的血球数量。
5. 计算血球数量：
- 将计数室中各种血球的数量进行计算和统计。
- 根据计数室内的面积和深度，计算总血球数量。
- 可以使用计数室所覆盖的血球数量与已知的面积，以得出
总血球数量的近似值。
6. 清洗和储存：
- 使用适当的清洁剂彻底清洗计数室，确保无血液残留。
- 将计数室储存在干燥，洁净的地方，以防止污染和损坏。
请注意，使用血球计数板可能需要一定的实验室训练和技巧，以确保准确性和可靠性。
在进行血液分析时，应遵循实验室的操作指南和安全规定。
血球计数板使用(好)
• 例2
（1）在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶 中取培养原液计数的做法是错误的，正确的 方法是 摇匀培养液后再取样 _ 和 。 培养后期的样液稀释后再计数
（2）实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球 计数板的做法是错误的，正确的方法 浸泡和冲洗 是 。
Байду номын сангаас
血球计数板使用
一、血球计数板的规格
• 2mm×2mm×0.1mm计数室 • 1mm×1mm×0.1mm计数室
计数室
二、血球计数板的使用方法步骤
• 1．镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行 镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；
• 2．加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖
计数室的规格之一
• 1．16×25型的计数 1mm×1mm×0.1mm计数室 细胞个数／1mL＝100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
• 2．25×16型的计数板
1mm×1mm×0.1mm计数室 细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80×400×10000×稀释倍数
第1天
第4天
第6天
死亡
第7天
活菌数
对于压在小方格界线上的酵母菌应 取相邻两边及顶角计数。
例题 • 例1：用血球计数板对培养液中酵母菌进行 计数，若计数室为1mm×1mm×0.1mm方 格，由400个小方格组成，如果一个小方格 内酵母菌过多，难以计数，应先 稀释 后 再计数。若多次重复计数后，算得每个小 方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养 液中酵母菌总数有 2×108 个。 解析 ：根据公式：5×400×10000×10＝2×108
血球计数板及其使用方法
血球计数板及其使用方法血球计数板是一种用于细胞计数和分类的实验工具，在医学、生物学等领域具有广泛的应用。
它对于研究细胞生长、增殖和凋亡等生命活动具有重要意义，也是疾病诊断和治疗的重要依据。
本文将详细介绍血球计数板的定义、原理和使用方法，并通过应用实例阐述其重要性和应用前景。
血球计数板的定义与原理血球计数板是一种用于细胞计数的实验工具，通常由一块载玻片和一块盖玻片组成。
载玻片上具有方格状沟槽，便于细胞分布和计数。
盖玻片则具有与载玻片相匹配的沟槽，可防止细胞逸出。
使用时，将样本溶液滴加在载玻片上，盖上盖玻片，然后在显微镜下观察和计数。
血球计数板的工作原理基于以下步骤：将样本溶液滴加在载玻片上；盖上盖玻片，确保没有气泡；将血球计数板置于显微镜下观察；根据方格状沟槽对细胞进行计数和分类。
血球计数板的使用方法使用血球计数板进行细胞计数和分类的步骤如下：样本处理：将待测样本溶液进行适当稀释，以便在显微镜下观察到单个细胞。
一般情况下，使用生理盐水或无血清培养液进行稀释。
仪器调试：将血球计数板放在显微镜下，调整显微镜焦距，使视野清晰。
同时，确保盖玻片与载玻片之间的密封性，以避免细胞逸出。
数据读取：在显微镜下逐个方格计数细胞。
根据细胞大小、形状和染色等特点对其进行分类。
通常情况下，血球计数板可分为白细胞计数板和红细胞计数板。
结果分析：根据计数结果，计算细胞浓度。
细胞浓度（个/mL）=方格内细胞数 /方格个数 /稀释倍数。
应用实例血球计数板在医学和生物学领域具有广泛的应用。
例如，在医学领域中，血球计数板可用于血常规检查，以监测白细胞、红细胞和血小板等血液细胞的数量和变化。
在生物学领域中，血球计数板可用于研究细胞生长、增殖和凋亡等生命活动。
例如，通过对比不同药物对肿瘤细胞生长的影响，可以为抗癌药物研发提供有力支持。
血球计数板作为细胞计数和分类的重要工具，在医学、生物学等领域具有广泛的应用。
通过血球计数板的使用，可以快速、准确地获得细胞数量和类型分布，为临床诊断、疾病治疗和科学研究提供有力支持。
血细胞计数板使用方法
血细胞计数板使用方法
血细胞计数板是一种用于直接计数血液中各种细胞数量的实验仪器。
下面是使用血细胞计数板的一般步骤：
1. 准备工作：
- 将血细胞计数板放在平坦的台面上。
- 清洁计数板上的两个计数网格，使用适量的酒精擦拭。
- 使用打火机或者酒精灯点燃火种，将火种放在计数板下方，以产生对比度，使细胞更容易观察。
2. 取血：
- 使用消毒酒精消毒指尖。
- 使用一次性血液采集器（如针头）在指尖处戳破皮肤，让血滴在计数板上的适应深度的点上。
3. 观察与计数：
- 使用显微镜，放大10倍或40倍，直接观察计数板上的血液样本。
- 计数板上的每个计数网格都有一定的面积，在10倍放大时，每个计数网格相当于0.1 mm²。
- 细胞计数的原则是在一个或多个网格内计数，并计数总共有多少个细胞。
可以按照上下或者左右方向移动计数网格，以覆盖较多的面积。
- 对于每种血细胞（如红细胞、白细胞和血小板），在一个或多个网格内计数，
并计算平均值。
注意事项：
- 操作前请确保计数板上的网格清洁且无损坏。
- 采血操作时需要注意卫生，使用一次性血液采集器，一次使用后丢弃。
- 使用显微镜时，需要调节焦距以确保观察到清晰的图像。
- 在计数之前务必摇匀血样，确保细胞分布均匀。
- 记录计数的结果和每个网格的计数次数，以便计算平均值时使用。
以上是血细胞计数板的一般使用方法，具体的使用步骤可能会根据不同的血细胞计数板和实验要求而有所差异。
建议在操作之前，详细阅读和遵守设备使用说明书和实验方案。
实验八 血球计数板的使用
四、实验内容与操作步骤
(一)血球计数板的使用 一
1. 计数样品制备：按无菌操作要求，用1mL无菌吸管自稀释 倍的酵母菌 计数样品制备：按无菌操作要求， 无菌吸管自稀释10倍的酵母菌 无菌吸管自稀释 培养液试管中吸取菌液1mL移人 移人9mL无菌水中，充分混匀，即得稀释 无菌水中， 培养液试管中吸取菌液 移人 无菌水中 充分混匀， 100倍的计数样品。原则以每个小格菌数为 倍的计数样品。 个为宜来记数进行稀释。 倍的计数样品 原则以每个小格菌数为5-10个为宜来记数进行稀释。 个为宜来记数进行稀释 2. 清洗计数板：将血球计数板及专用的厚盖玻片用药棉沾取 ％酒精轻轻 清洗计数板：将血球计数板及专用的厚盖玻片用药棉沾取95％ 擦洗，然后用自来水冲洗，再让其自然晾干或吸水纸吸干。 擦洗，然后用自来水冲洗，再让其自然晾干或吸水纸吸干。 3. 滴加菌液：将盖玻片盖在计数板的方格网上，用无菌吸管 或无菌玻棒 滴加菌液：将盖玻片盖在计数板的方格网上，用无菌吸管(或无菌玻棒 或无菌玻棒) 吸取少许稀释100倍的酵母菌液，从盖玻片的一端注入，使菌液沿二玻 倍的酵母菌液， 吸取少许稀释 倍的酵母菌液 从盖玻片的一端注入， 片间渗入，勿使菌液流到盖玻片或两边平台上， 片间渗入，勿使菌液流到盖玻片或两边平台上，多余的菌液则用吸水纸 吸去。 吸去。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
五、思考题
1．计算每毫升(每克 所测样品的含菌数 ．计算每毫升 每克 所测样品的含菌数? 每克)所测样品的含菌数 2．用血球计数板测定微生物细胞数量有何 ． 优缺点?
中格
25X16规格 规格
一个中格的小格
在进行观察计数 时，由于菌体在血球 计数板上处于不同的 空间位置， 空间位置，要在不同 的焦距下才能看到。 的焦距下才能看到。 所以观察时必须不断 调节微调螺旋方能数 到全部菌体， 到全部菌体，防止遗 漏。如菌体位于小格 的线上， 的线上，计数时则数 上线不数下线， 上线不数下线，数左 线不数右线，这样做， 线不数右线，这样做， 即可减少误差。 即可减少误差。酵母 菌的芽体细胞达到母 细胞大小一半时， 细胞大小一半时，即 可作为两个菌体计算， 可作为两个菌体计算， 每个样品应重复计数2每个样品应重复计数 3次(每次数值差数不应 次 每次数值差数不应 过大，否则应重测)再 过大，否则应重测 再 取其平均值。 取其平均值。
血球计数板的使用流程
血球计数板的使用流程1. 准备工作在使用血球计数板之前，需要进行一些准备工作。
具体步骤如下： - 确保工作区域干净整洁，无灰尘和杂物的干扰。
- 对血球计数板进行相关的消毒处理，确保无菌。
- 打开血球计数板包装，准备进行接下来的实验操作。
2. 取血样本取血样本是进行血球计数的前提，下面是具体的步骤： - 准备抽血工具，如针头、一次性采血针、采血管等。
- 先在病人的臂部进行消毒，使用无菌棉球涂匀75%酒精。
- 用一次性采血针将针头直接插入病人的静脉血管中。
- 使用采血管采集足够的血液。
3. 注射血液样本注射血液样本到血球计数板中是进行计数的关键步骤，以下是具体操作： - 将血球计数板放置在水平的台面上。
- 拿起一根塑料吸管，用力将其插入计数板的吸管孔中。
- 尽量避免产生气泡，将血液从吸管中缓慢注入到血球计数板的计数室中。
- 注入适量的血液后，停止注射，并等待数分钟以确保血细胞充分沉降。
4. 观察计数板观察计数板是进行数目统计的重要步骤，以下是具体操作： - 将放置血液的计数室放置在显微镜下，调节显微镜的目镜和物镜，以获得清晰明亮的视野。
- 使用显微镜对计数室中的细胞进行观察，使用目测或计数器进行细胞数目的统计。
- 记录所观察到的不同类型的血细胞数目，如红细胞、白细胞和血小板。
5. 结果分析与记录根据观察到的血细胞数目，进行结果分析和记录，以下是具体步骤： - 根据所观察到的红细胞数目和白细胞数目，计算相对百分比，比如红细胞比例和白细胞比例。
- 根据观察到的血小板数目，计算血小板计数。
- 将结果记录在相关的数据表格中，并进行必要的数据分析和统计。
6. 清洁和消毒在使用完血球计数板后，需要进行清洁和消毒，以下是具体步骤： - 将计数室中的血液倒掉，并用纯水冲洗干净。
- 使用无菌棉球蘸取75%酒精，擦拭计数室和其他部件，确保彻底消毒。
- 将血球计数板放置在通风干燥的地方，晾干后可以收起备用。
血球计数板的使用(有图指导)
血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.。
血细胞计数板使用方法和注意事项
血细胞计数板使用方法和注意事项使用血细胞计数板，这玩意儿可不简单，但也没你想的那么复杂。
准备工作得做好。
把计数板拿出来，仔细检查一下有没有灰尘，别小看这细节，毕竟一粒灰尘可能就会让你数错细胞。
你知道，实验室里最怕的就是误差，这可真是让人头疼。
然后，别忘了戴上手套，毕竟我们可不想把自己的“指纹”留在样本上。
哎，说到手套，有时候真想看看那些小小的细胞们，像一群调皮的小孩子，等着被数数呢。
好了，接下来要取样。
别着急，这一步可是关键，得小心翼翼。
先用采血针扎一下，取点血样。
记得要快准狠，扎得快，别让人疼得直叫唤。
取完血，滴到计数板的中心，像是在给它准备一顿丰盛的晚餐。
样本放好后，静静等待，不要心急。
心态放平和，心态放平和。
样本均匀分布在计数板上，恰似铺满了一片美丽的花海。
数细胞的时候，要用显微镜，调到适合的放大倍数，别把眼睛盯得太近，不然可能就像盯着电视剧里的情节，眼睛花了，脑袋也跟着晕。
数细胞的时候，记得保持专注。
细胞像小朋友一样，有的活泼好动，有的则安静得像个小书虫。
要细心观察，别把它们搞混了。
数的时候，建议用铅笔或白板笔做标记，这样你就能把每次数到的细胞一一记录下来，不然你很可能会数到十又数到八，最后傻傻地想不起来到底有多少。
记得，有的时候数出来的数字会让你怀疑人生，怎么就这么多或者这么少？这时，别急，深吸一口气，调整心态，再来一遍，老话说得好，三思而后行，真是有道理。
然后，要分析数据了。
这部分就像写作业一样，得认真对待。
对比一下正常范围，看看自己数出来的细胞是不是在合理的区间。
要是超标了，别慌，先冷静。
每个人的身体状况都不一样，有时候这些数值也是受很多因素影响。
记得，数据不是最终的裁判，只是一个参考。
在整个过程中，有些小细节也别忽视。
比如，要保持实验室的清洁和安静。
实验室就像一个神秘的世界，稍微一声响，可能就会打扰到那些正在努力“工作”的细胞们。
记得用完器材后，要认真清洗，给他们一个干净的家。
实验结束后，样本和废弃物得处理妥当，环保意识要时刻保持。
细胞计数板使用方法
细胞计数板使用方法
细胞计数板是实验室常用的一种工具，用于在显微镜下对细胞数量进行准确计数。
正确的使用方法能够确保实验结果的准确性，下面将介绍细胞计数板的使用方法。
首先，准备工作。
在开始使用细胞计数板之前，需要确保仪器是清洁的。
用96%乙醇将细胞计数板和盖玻片擦拭干净，然后用无菌纱布擦干。
这样可以避免细胞计数板表面的污染对实验结果的影响。
其次，取样。
将需要计数的细胞悬液均匀搅拌后，用吸管吸取适量的悬液，然后将悬液滴在细胞计数板的计数室中。
注意不要使悬液溢出计数室，以免影响计数结果。
接着，放置盖玻片。
将盖玻片轻轻放在计数室上，让悬液充分填满计数室，同时避免产生气泡。
然后，观察计数。
将细胞计数板放在显微镜下，调整合适的放大倍数，通过目镜和物镜观察计数室中的细胞数量。
细胞通常呈现为圆形或椭圆形，可以根据自己的实验需要选择计数室中的一个小方格或整个计数室进行计数。
最后，计数。
使用显微镜中的目镜标尺进行计数，根据每个小方格或整个计数室中的细胞数量进行计算，得出细胞密度。
通常情况下，细胞计数板的计数室是一个正方形，每个小方格又被划分成16个小格，因此可以通过计算每个小格中的细胞数量来得出总的细胞密度。
在使用完细胞计数板后，要及时清洗和消毒，以确保下次使用时的准确性。
细胞计数板的使用方法并不复杂，但需要一定的耐心和细致。
正确的使用方法能够保证实验结果的准确性，为科研工作提供可靠的数据支持。
希望本文介绍的细胞计数板使用方法能够对您有所帮助。
血球计数板使用说明
1、稀释液应该是等渗的，不能带有颗粒（如果有应该先用滤纸过滤）；
2、稀释的时候样品的体积至少要用50ul，同时取样前应该用200ul的枪吹打10次，并马上取样；稀释后的样品也要用200ul枪吹打10次再取样计数；
3、稀释后的样品四个中格的细胞数应该保证50-150个/中格；四个的总数应该大于200个；
取样：
1、样品应该保证充分的均匀的情况下才有意义；
2、样品应该尽量减少结团情况，如有结团应该吹散（或者用胰酶消化）后再计数；
3、样品的体积大概250ul（大概5-7滴）；
4、如果体积大于100ml，取样应该保证在两个以上；
5、如果是生产的技术应该取三个样，并每次都要充分混匀后取样；
6、样品的体积只有进口的离心管和吸管的数据可以取信，但是离心管会有一定的波动误差，应该计算有15ml（-100ul）50ul（-300ul）；
②血盖片应具有一定的重量，平整、光滑、无裂痕，厚薄均匀一致，可使用卡尺多点测量（至少在9个点），不均匀度在0.002mm之内。必要时采用平面平行仪进行测量与评价，要求呈现密集平行的直线干涉条纹。最简单的评价方法是将洁净的盖片紧贴于干燥的平面玻璃上，若能吸附一定的时间不脱落，落下时呈弧线形旋转，表示盖片平整、厚薄均匀。同时，合格的盖片放置在计数室表面后，与支持柱紧密接触的部位可见到彩虹。精选出的盖片与其他盖片紧密重合后，在掠射光线下观察，如见到完整平行的彩虹条纹表示另一枚盖片质量也符合要求。
计数：
1、每个样品应该计数至少三次（否则会有很大偏离）；
2、每个方格的数应该在50-150间，计数的标准应该统一，如果是团就记为一个，但是可以明确分出是几个细胞的可以据实计数；
3、遵守记上不记下，记左不记右；细胞品测试，同一个样品的细胞数总量应该在10个以内（或者是5%波动）；同一个样品稀释后计数的数据波动应该在5%以内；
血细胞计数板操作步骤
血细胞计数板操作步骤以下是血细胞计数板操作步骤的详细说明：一、基本动作要领1. 准备工作- 首先呢，要把血细胞计数板擦干净。
这计数板可精贵着嘞，得轻轻擦，用擦镜纸擦就好啦，可别用粗糙的东西刮，我之前就不小心刮到过一次，差点把计数板弄坏了，那可就没法准确计数了。
- 然后把盖玻片盖在计数板的计数室上。
这盖玻片也要挑好的，得是平整、没有划痕而且厚度合适的哦，要是盖玻片不合适，那计数就会出大问题呢。
2. 样本处理- 如果是血细胞的悬液样本，得先把样本充分混匀。
就像你冲咖啡得把咖啡粉搅匀了一样，这里不能偷懒。
从样本瓶里吸取样本的时候呢，要用专门的移液管，而且要准确地吸取一定的量。
比如说我们要吸取10μL，那就要看准刻度啦，这个见过那种小的注射器一样的移液管吧，它上面的刻度可不能看错，我有一次就看错了刻度，结果计数完全不对，真是欲哭无泪啊。
3. 充液- 把吸取好样本的移液管口轻轻放到计数板的一个小槽口上，然后慢慢把样本注入计数室。
这一步得特别小心，要让样本自己慢慢地充满计数室，不能太快啦，要是太快就可能会有气泡，气泡要是进去了可就麻烦了，我就吃过这个亏。
像滴眼药水一样，慢慢滴才好。
二、个人小技巧- 对了这里可以在吸取样本前稍微把样本瓶颠倒几下，再轻轻混匀，这样能让细胞分布得更均匀。
还有啊，在充液的时候，可以把计数板稍微倾斜一点，这样液体能流得更顺畅，就像倒水的时候把杯子倾斜一点一样，但是倾斜角度千万别太大哦，太大了样本就流出去啦。
三、容易忽视的细节- 在盖盖玻片的时候，要确保它完全覆盖计数室，而且不能有任何的晃动或者缝隙。
感觉就像给房子盖屋顶一样，得盖得严严实实的，不然细胞可能会跑到不该跑的地方去。
另外，在计数前最好等一会儿，让细胞都沉淀一下、稳定下来再计数，我以前也没等，结果数出来的结果总是变化很大。
四、常见问题- 要是计数室内有杂质，这个有时候会和细胞混淆。
所以你看样本的时候要特别仔细，杂质可能看起来不规则，不像细胞基本上都是圆形或者椭圆形那种比较规则的形状。
血细胞计数板使用方法
血细胞计数板使用方法计数公式一、2mm×2mm方格的计数2mm×2mm表示计数室的边长，即一个大方格的边长。
由于计数室厚度为0.1mm，所以计数区的总体积为0.4mm3。
计数室通常也有两种规格：一种是16×25型，即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是25×16型，即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。
1．16×25型的计数公式为：酵母细胞个数／1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×100×10000×稀释倍数2．25×16型的计数公式为：酵母细胞个数／1mL ＝80个小方格细胞总数/ 80 ×100×10000×稀释倍数二、1mm×1mm方格的计数1．16×25型的计数公式：酵母细胞个数／1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数2．25×16型的计数公式：酵母细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数红细胞计数方法准备显微镜红细胞稀释液（Hamyem液枸橼酸钠稀释液）计数板盖玻片微量吸管洗耳球刻度吸管1 准备计数板弄干净计数板和盖玻片2 加稀释液往试管里加2ml红细胞稀释液3 加血加10微升末梢血或抗凝血，吸打2-3次，混匀4 充池用微量吸管或玻璃棒将红细胞悬液充入计数池5 静置室温下3-5min6 计数用正中5个中方格内的红细胞数7 计算红细胞/L=N*25/5*10*10的6次方*200=N/100*10的12次方N 为5个中方格内的红细胞计数原则：数上不数下，数左不数右（以上图为例，压了上方和左边红线的都要数，就算在方框外也要算，只要它压了线，压了下方和右边红线的都不数，就算在方框里也不能计算），计数路线是上图的城墙型。
细胞计数板的使用方法
血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。
2．取洁净的细胞计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。
3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。
4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。
5．计数时若计数区是由16个大方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。
如果是25个大方格组成的计数区，除数上述四个大方格外，还需数中央1个大方格的菌数（即80个小格）。
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血球计数板的使用
Questions：
1.亚甲蓝染色液怎么配制？
2.计数时是全部计数还是选取其中一部分计数？
3.菌悬液怎么制备？
4.加样时可以先加样再盖玻片么？
5.计数时，若有菌体处于边界线上应怎么计数？
一、实验目的
1.能正确进行染色操作；
2.能正确使用显微镜；
3.能用血球计数板对微生物进行计数。
二、实验原理
血球计数板可计算活菌和死菌的数目，其用优质厚玻璃制成。
每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。
计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。
计数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大方格，每个大格面积为1.0mm².容积为0.1mm（ul），其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为16个小方格。
四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。
根椐国际标准局（NBS）规定，大方格每边长度允许误差为±1%。
三、实验仪器
显微镜、血球计数板、接种环、酒精灯
四、实验步骤
1.菌悬液的制备
用平板培养的微生物怎么制备菌悬液？
操作过程中是否需要无菌操作？
2.染色
注意染色剂浓度过稀菌体不能充分染色的情况。
3.血球计数板计数室洁净度检查
若有污染，清洗吹干后方能使用。
4.加样
血球计数板盖上盖玻片后，从盖玻片边缘加入菌液，此过程不可有气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽内多余菌液。
用什么加样？
5.显微计数
静止5min后，观察技术，以每小格内有5-10个菌体为宜。
先用低倍镜，再用高倍镜。
观察时注意调整光源亮度（可适当调弱）。
为什么要静止5min？
6.计算
7.清洗血球计数板
用水冲洗，不要用硬物擦洗，以免损坏网格刻度。
自行晾干或吹干放入盒内保存。
五、注意事项
1.计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。
2.今天实验只计算四个（五个）格子内的总菌数。
不用考虑稀释倍数等。
3.菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。