血培养中污染菌和致病菌的判断
血培养病原菌分布及污染菌判定的实验室检查
摘 要 ： 目的 通 过 回顾 该 院 的血 培 养病 原 菌检 出情 况 以 及 污 染 茵 的判 定 分 析 ， 了解 该 院血 流 感 染 的 主 要 病 原 茵 构 成 比 ， 并 证 实 开展 双侧 双瓶 采血 检 测 等 实 验 室 检 查 方 法 ， 有 效 提 高 阳性 率 和 血 培 养 污 染 菌 的 判 定 。方 法 对 该 院 ２ １ 能 ０ ０年 ７ １ ～ ２月 的
的 安 危 。在 大 多 数 情 况 下 ， 可从 血 培 养 中分 离 得 到 代 表 着 真 正 菌 血 症 或 真 菌 血 症 的病 原 菌 （ 黄 色 葡 萄 球 菌 、 肠 埃 希 菌 、 金 大 铜
１２ 仪 器 与 材 料 Ｂ ＴＥ ９ ２ ． ＡＣ Ｃ １０全 自 动 血 培 养 仪 （ Ｄ， Ｂ 美
ｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ａ ｔ ｒ ．Ｔｏ ｓｄ ｓ ａ ｄ ｔ ｗ— ｏ ｔ ｓ ｃ ｌ ｃ ｉｎ ｏ ｌ ｏ ｐ ｃｍｅ ｓ ｗｅ ｅｐ ｒｏ ｍｅ ｎ ｐ ｒ ｆｐ ｔｅ ｔ ｏ ｅ ａ ｕ ｔ ｈ ｌ — ａ ｈ ｇ ｎ ｃｂ ｃ ｅ ｉ ａ ｗ— ｉｅ ｎ ｏ ｂ ｔｌ ｏ ｌ ｔｏ ｆ ｏ ｄ ｓ ｅ ｉ ｎ ｒ ｅ ｆ ｒ ｄ ｉ ａ ｔｏ ａ ｉ ｎ ｓｔ ｖ ｌ ａ ｅｔ ｅｃ ｉ ｅ ｅ ｂ ｎ ｉａ ｉ ｎ ｆ ａ ｃ ｆ ｈ ｓｍｅ ｈ ｄ ｆ ｒｔ ｅ ｉ ｅ ｔｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｏ ｔ ｍｉ ａ ｔ ，ｔ ｋ ｎ ｏ ｇ ｌ ｓ ｅ ａ ｉ ｅＳ ａ ｈ ｌ ｃ ｃ ｕ （ ｃ ｌ ｇ ｉ ｃ ｎ ｅｏ ｉ ｔ ｏ ｏ ｈ ｄ ｎ ｉ ｃ ｔ ｆｃ ｎ ａ ｎ ｎ ｓ ａ ｉ ｇ ｃ ａ ｕａ ｅ ｎ ｇ ｔ ｔ ｐ ｙｏ ０ ｃ ｓ ＣＮＳ ｏ ｘ ｍ ｐ ｅ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｖ ）ｆ ｒｅ ａ ｌ ．
如何看痰培养血培养
PPD的临床意义
• B、阴性反应的意义： （1）未受结核菌的感染 未受结核菌的感染，一般测定有无结核菌的 未受结核菌的感染 感染多用5IU PPD测定。 （2）已受结核菌的感染： • ①变态反应前期 变态反应前期，一般受结核菌感染后需经4-8周才 变态反应前期 经 周才 能建立免疫反应，在这之前的时期称变态反应前期， 能建立免疫反应 这时结素试验反应可为阴性，在建立免疫反应后， 重复结素试验可呈阳性反应； • ②免疫系统受干扰，如急性传染病、发热、机体应 免疫系统受干扰， 免疫系统受干扰 如急性传染病、发热、 免疫抑制剂的应用等； 激、免疫抑制剂的应用等 • ③免疫功能低下 重症结核病（粟粒性，结核性脑 免疫功能低下：重症结核病 免疫功能低下 重症结核病（粟粒性， 膜炎） 膜炎）、无反应性结核病、慢性消耗性疾病（如糖 尿病、慢性肾炎）、肿瘤、结节病、艾滋病、结缔 结缔 组织病、高龄等； 组织病 • ④质量问题或注射技术不妥以及判断错误。
本病例：
支持： 支持： 病史 症状 治疗情况 辅检 结核病史 下午或晚间发热 咳嗽 美罗培南、抗CMV治疗无效 结核抗体阳性 结缔组织病可能 接种过卡介苗者非活动性IgG可阳性 PPD阴性 痰抗酸染色阴性，痰培养不动杆菌 胸部CT示左下肺感染 体温39~40℃ 白粘痰 不支持： 不支持：
血培养
内容
是感染还是定植？---3.最后一招诊断性治疗
• 针对性抗菌药物之后临床症状减轻 临床症状减轻（缓 临床症状减轻 解），同时感染部位目标性细菌数减少 目标性细菌数减少则 目标性细菌数减少 为病原菌 病原菌； 病原菌 • 仅有数量减少 临床症状没有改变 数量减少而临床症状没有改变 数量减少 临床症状没有改变则最大 可能为定植菌 定植菌。 定植菌
是感染还是定植？---2.结合临床综合判断
血培养中污染菌和致病菌的判断课件
环境因素
空气、水、土壤等环境中 的微生物可能污染血培养 瓶。
实验室操作
实验室操作过程中，如皮 肤接触、仪器污染等也可 能导致血培养瓶的污染。
致病菌的来源
感染病灶
致病菌通常来自感染病灶 ，如肺部感染、尿路感染 等。
肠道菌群
肠道中的某些细菌在特定 条件下可能进入血液，引 起败血症。
免疫系统受损
免疫系统受损或疾病导致 身体对致病菌的抵抗力下 降，容易引发感染。
污染菌与致病菌的鉴别
培养时间
污染菌通常在培养初期出现， 而致病菌需要较长时间才能生
长。
菌落特征
污染菌通常是单一菌落，而致 病菌可能形成多种菌落。
临床表现
致病菌引起的感染通常有明显 的临床症状，如发热、寒战等 ，而污染菌通常没有明显症状 。
抗生素敏感性
致病菌对抗生素敏感度较高， 而污染菌可能对抗生素不敏感
重要性
血培养是诊断血液感染的金标准 ，对于指导临床治疗、评估病情 和预后具有重要意义。
血培养的采集和运
采集
血培养的采集通常选择在患者发热或 寒战时进行，采血量一般为10-20ml ，采集部位为肘静脉或股静脉。
运输
采集后的血液样本应尽快送至实验室 进行培养，运输过程中需保持温度和 避免剧烈震荡，以确保样本质量。
04
在治疗过程中，需要密 切监测患者的病情变化 ，及时调整治疗方案。
05
血培养中污染菌和致病菌的预防 与控制
提高采血技术
采血前准备
确保采血环境清洁、无菌，采血 人员手部消毒，选择合适的采血
器材和容器。
采血操作规范
掌握正确的采血技巧，避免反复 穿刺和过度挤压，减少皮肤表面
细菌进入血液的机会。
某三甲医院血培养的分布特点及阳性污染情况_幸运
目 前 ，实 验 室 诊 断 菌 血 症 主 要 依 据 血 培 养 阳 性 报 警 时 间 和
多 瓶 培 养 结 果 ，符 合 以 下 几 个 标 准 之 一 的 诊 断 为 病 原 菌 ：（１）两 次或两次以上血培养检出 菌 为 同 一 细 菌；（２）阴 性 杆 菌 阳 性 报 告时间小于４８ｈ；（３）血培养 阳 性 分 离 菌 为 明 确 致 病 菌；（４）血 液与其他感染部位分离菌一致。致病菌血培养阳性平均报警 时间为１３．９ｈ，污染菌为４２．０ｈ，污 染 菌 的 血 培 养 阳 性 时 间 明 显 长 于 致 病 菌 。 ［１３］
参考文献
［１］ 陶黎黎，胡必杰，周春妹，等．３ ６４４瓶阳性血培 养 病 原 菌 分 析 及 双 份血培养意 义 评 价 ［Ｊ］．中 华 医 院 感 染 学 杂 志，２０ｌ０，２０（２）：２５８－ ２５９．
血培养操作指南
血培养操作指南采血指征入院的危重患者，不能除外细菌感染的可能时，在进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养。
患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指证:1、发热（≥38︒C）或低温（≤36︒C）。
2、寒战。
3、白细胞增多（计数大于10,000⨯109/L，特别有“核左移”未成熟的或杆状核粒细胞）。
4、粒细胞减少（成熟的粒细胞小于1,000⨯109/L）。
5、血小板减少。
6、皮肤粘膜出血。
7、昏迷。
8、多器官衰竭。
9、血压降低。
10、呼吸加快。
当患者具备以上一种或几种体征时应采血培养。
在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，很少培养出细菌, 应该补充尿液和脑脊液培养。
肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁或以下的幼儿）一般出现于门诊，常伴有明显发热（≥38.5︒C）和白细胞增多（总数≥20,000x109/L）。
老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要信号。
最佳采血时机1、对间歇性寒战，采集血培养标本应该在估计寒战或体温高峰到来之前采血。
2、采集血液标本应在抗菌药物使用之前，对已使用抗菌药物治疗的患者，可在患者下次使用抗菌药物之前采集。
同时为减少抗菌药物的影响我们会采用带有抗生素吸附功能的血培养瓶。
血培养标本的数量及采血量一次静脉采血注入到多个培养瓶中（一个需氧瓶加一个厌氧瓶）应视为单份血培养。
其中厌氧瓶的使用除有利于血中厌氧菌的生长，同时对于兼性厌氧菌如肠杆菌科细菌阳性报警时间早于需氧瓶。
由于多数菌血症的患者细菌为间断性入血，研究已经证实，2~3份血培养可足以检测所有的菌血症和真菌菌血症。
建议在全身不同部位，采集2~3份标本，以保证血培养检测的阳性率。
多次、多部位采血有利于我们判断致病菌和污染菌。
采血量成人每瓶8~10ml（不少于5ml），儿童每瓶1~2ml（无需常规采集厌氧瓶）。
对特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建议：1、怀疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者：应短时间内采集2或3份血培养，快速进行血培养。
血培养采集的方法及注意事项2017
美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和
判断标准，是国内临床细菌检验遵循的标准。由 于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物 力，所以大多数国家包括中国都还没有建立自己 的标准而依赖CLSI的方法和标准
CLSI标准每年更新
关键要点
采血指征 采血时间 采血套数 采血次数 接种血量 消毒灭菌
血培养采集的方法及注意事项
2017-05-22
血培养的概念
血培养是一项实验室检查，是采集患者血液标本并接种到培 养瓶，用以发现、识别导致患者感染的病原微生物
是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法 对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义
血培养的目的
证实有感染性的病原体
97 95 3 100 0 0
3 3 37 0 25 0
2－3套血培养，有助于污染的判断
Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333
血培养套数与阳性检出率（％）
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 1套
Cockerill, CID 2004
标本采集部位：从两侧上肢静脉采血“双瓶双侧”，必要时从下肢
静脉采血做第三套血培养
采多种血液标本时一定最先采集血培养标本
怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集
无需保留的：从独立的外周静脉采集2套血培养，无菌状态下取出导管
并剪下5cm导管尖端或近心端于无菌试管内送实验室进行培养
需要保留的：采取至少2套血培养，其中至少1套来自外周静脉，并做好
这些研究中，使用“配对需氧/厌氧血培养瓶”比用“两个需氧
血培养报阳时间在判断血流感染病原菌中的作用
中国乡村医药·检验与影像·血培养报阳时间在判断血流感染病原菌中的作用林德金晶黄黎俐血流感染是严重的全身感染，严重危及患者的生命。
血培养是血流感染的金标准，然而血培养由于采血消毒不彻底，不可避免地存在污染情况，所以早期准确地鉴别病原菌和污染菌十分重要。
目前，还没有一种方法能早期、快速、准确地鉴别分离菌是否为病原菌。
笔者分析我院阳性菌株的阳性报警时间和患者的临床资料，探讨血培养阳性报警时间在血流感染鉴别诊断中的作用和价值。
1 材料与方法1.1 标本来源2016年9月至2017年3月送检7637份血培养标本，其中阳性菌株863株（11.3%）。
按照血培养病原菌与污染菌判断标准[1]，将863株细菌分成感染组644株（74.6%）和污染组219株（25.4%）。
1.2 仪器与试剂全自动血培养仪B acT/Alert及配套中和抗生素血培养瓶（包括需氧瓶、厌氧瓶和儿童瓶），VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定及药敏系统，布鲁克MALDI-TOF质谱仪。
1.3 检测方法1.3.1 血培养处理严格按照临床检验操作规程无菌采集血液（成人8～10ml/每瓶，儿童1～3ml），注入相对应的血培养瓶，放入BACT/Alert血培养仪培养，5天未报警者为阴性。
阳性标本取出后用无菌注射器抽取瓶内培养液接种哥伦比亚血平板、麦康凯平板和巧克力平板，同时进行涂片革兰染色，镜检阳性的报告涂片危急值。
1.3.2 细菌鉴定及药敏试验采用布鲁克MALDI-TOF质谱仪、VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定及药敏系统对作者单位：323000 浙江丽水市人民医院检验科通信作者：林德，Email:Volin@ 细菌进行鉴定及药敏试验。
2 结果血培养阳性菌株863株中革兰阴性菌408株（47.3%），革兰阳性菌307（35.6%），真菌106株（12.3%），其他42株（4.9%）。
感染组报阳时间由快到慢依次为大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、其他革兰阴性菌、肠球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、凝固酶阴性葡萄球菌、链球菌、其他革兰阳性菌、厌氧菌、棒状杆菌、真菌，感染组报阳时间明显短于污染组。
血培养-临床医生应该知道什么
Grace CJ, Lieberman J, Pierce K, et al. Usefulness of Blood Culture for Hospitalized Patients Who Are Receiving Antibiotic Therapy. Clin Infect Dis 2001; 32: 1651-5
芬兰2 31% 11% 6% 4% 11% 5% 3% 5% 5%
Michael B. Edmond, Sarah E. Wallace, Donna K. McClish, et al. Nosocomial Bloodstream Infections in United States Hospitals: A Three-Year Analysis. Clin Infect Dis 1999; 29: 239-44. Lyytikainen O, Lumio J, Sarkkinen H, et al. Nosocomial Bloodstream Infections in Finnish Hospitals during 1999– 2000. Clin Infect Dis 2002; 35: e14-9
2002 Navarre Amox Amox/Clav Oral Ceph Clari Azi Majorca Amox 383 376 370 277 97 225
2003 358 366 268 82 208 363
2004 385 356 240 70 169
60% 54.3% 50% Navarre Majorca
呼吸频率
PaCO2 脉搏 收缩压 白细胞计数
-0.021
-0.017 0.003 -0.010 -0.001
痰培养、血培养检验报告的解读
一、临床医生阅读微生物报告前需要了解的问题首先是标本类型，是来源于无菌部位还是有菌部位，如果是无菌部位，那培养的阳性结果与感染更相关，如果是有菌部位，如呼吸道，要了解是否存在正常菌群或定植菌。
其次是标本采集部位、采集方式。
如痰标本，是咳痰、吸取物、肺泡盥洗液，还是防污染毛刷、气切管分泌物。
如尿液标本，是中段尿、导管尿，还是耻骨上穿刺尿。
如血标本，是外周血、导管血，采血量是多少，抽了几套血。
采血前是否使用抗生素，过去的微生物学检查结果是什么。
二、痰标本质量评估痰标本易受到口咽部定值菌污染，不一定真正代表下呼吸道感染菌。
送检时必须痰涂片和培养同时开。
采集前应使用清水或生理盐水漱口，有假牙的应先取下假牙，嘱病人采集深部咳痰，直接收集入无菌螺旋口痰杯。
1-2小时内送检，否则苛养菌（肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等）易死亡。
显微镜检查取脓性部分涂片，做革兰染色，每低倍镜视野中鳞状上皮细胞<10,白细胞>25,为合格下呼吸道标本。
对照痰涂片结果，仅对优势菌进行鉴定和药敏试验。
非常强调痰涂片的重要性，不仅可以判断痰标本是否是下呼吸道标本，甚至根据微生物的形态和特殊染色，可以初步判断感染菌的类型，一个工作日内可以发报告，有助于临床尽早调整用药。
例如，涂片提示可疑放线菌，放线菌是厌氧菌，需要厌氧环境培养，可以提示临床医生加开厌氧菌培养申请单。
需要临床医生的理解支持，才能鼓励检验科老师大胆创新，更好的为临床服务。
高质量下呼吸道标本包括：1、支气管肺泡灌洗液。
定量培养>104CFU/ml,具有诊断意义。
离心涂片>1%细胞为鳞状上皮细胞提示污染，培养菌量可能假性提高。
2、保护性毛刷。
毛刷约仅能获得0.01-0.001ml标本，在空气中很快会干燥导致细菌死亡，从而影响检出率，应放置于1ml液体运送培养基（如无菌生理盐水和无菌肉汤），振荡后，定量培养>103CFU/ml,具有诊断意义。
3、肺组织活检。
血培养的原则和规程;批准指南的解读
中国医科大学附属盛京医院 孙继梅
内容提纲
抗菌药物临床应用国家新政策 血培养批准指南的引用 临床微生物检验 血培养采集指征 血培养的原则和规程
合理应用抗菌药物
全球细菌耐药现状 我国细菌耐药现状 国家的法律法规 临床抗菌药物应用指导原则 抗菌药物临床应用专项整治活动 抗菌药物临床应用管理办法
实验室与临床沟通是关键
医生
检验 人员
护士
微生物与临床密不可分
抗感染之路任重道远
抗菌药物敏感试验方法
纸片扩散法 抑菌圈直径 稀释法 最小抑菌浓度（MIC） 肉汤稀释法（常量、微量） 琼脂稀释法 E-test法 仪器法 肉汤稀释法 优点：操作简便、快速，结果准确、灵敏 专家系统：罕见耐药表型的提示 缺点：阈值药敏，流行病学调查和比较
明确抗菌药物临床应用管理责任制 开展抗菌药物临床应用基本情况调查 建立完善抗菌药物临床应用技术支撑体系 严格落实抗菌药物分级管理制度 建立抗菌药物遴选和定期评估制度，加强抗菌 药物购用管理 加大抗菌药物临床应用相关指标控制力度 定期开展抗菌药物临床应用监测与评估
专项整治动重点内容
加强临床微生物标本检测和细菌耐药监测
正确评价细菌培养结果
引起人类感染的微生物种类繁多，生物学特性 各异 没有一种检测方法能检测所有的微生物，更没 有一种培养基能解决临床所有问题 主动了解患者病史，根据临床症状和初步诊断 选择适当的检测方法，才能更好地为临床提供 服务 检验与临床的合作和交流非常重要! 根据药敏试验结果合理选择抗菌药物
正确评价细菌培养结果
血流感染血培养标准采集- - 副本
备注：
替加环素对MRSA具有抗菌活性，特殊情况 下（多种细菌混合感染）可以使用替加环素， 但缺乏临床研究依据。
金黄色葡萄球菌
MRSA
首选：万古霉素去或甲万古霉素
次选：利奈唑胺、 替考拉宁、 达托霉素、 磺胺甲噁唑/甲氧苄啶
70%酒精擦拭静脉穿刺部位30秒。 1%或2%碘酊作用30秒，从穿刺点由里向 外,涂圆圈擦拭，直径为1.5-2.0厘米。 对酒精过敏患者，用酒精脱碘60秒。
对采血人员的干预
污染的可能性贯穿于整个采血过程。环境准备、操作者准 备、合格的血培养瓶、选择特定穿刺部位等。 其中对采血人员额干预最为重要。 国外相关循证医学证明；未经过与经过培训的采血人员进 行研究比较，污染率为8.4%和1.2%，发现有显著差异。 对采血人员的培训，对降低血培养的污染率有积极的意义。
赫氏埃希菌
蜂房哈夫尼亚君 肺炎克雷伯菌 摩根摩根菌 奇异变形杆菌 潘氏变形杆菌 普通变形杆菌 雷氏普罗威登斯菌 斯氏普罗威登斯菌 沙门菌和志贺菌 黏质沙雷菌 小肠结肠炎耶尔森菌
R
R R R R R R R R R
抗菌药物 微生物
R R R
对β-内酰胺类无固有耐药
R
R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R § R
肠球菌：氨曲南、多粘菌素B/粘菌素、 萘啶酸、 头孢菌素、 低水平氨基糖苷类、 克林 霉素、复方新诺明。
不能常规报告的药物
分离于scf中的细菌： 一二代头孢菌素（除cxm注射液） 头霉素 克林霉素 大环内酯类 四环素类 氟喹诺酮类 仅通过口服给的药物
血培养污染菌判定的实验室检查
２ ． Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ，Ｃ ｌ ￣ｏ ｒ ｄ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ，Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ，Ｇ ｕ ｎｇ ａ ｄ ｏ ｎ ｇ ５ １ ０ ０ ４ ９ ； ３ ． ＭＩ Ｃ Ｕ，Ｇ ｕ ｎｇ ａ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｉ ａ ｌ Ｋ ｅ ｙ Ｌ ｂｏ ａ ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｒ ｆ ｏ Ｇ ｅ ｒ ｉ ｔ ａ ｒ ｗ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｏ ｒ ｇ ｎ ａ Ｆ ｕ ｃｔ ｎ ｉ ｏ ｎ Ｓ ｕ ｐ ｐ ｏ ｒ ｔ ，Ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｌ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ｌ ａ ｆ ｏ Ｇ ｕ ｎｇ ａ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｍｉ ｌ ｉ ｔ ａ ｒ ｙ Ｃ ｏ ｍ ｍａ ｎｄ ｆＰ ｏ Ｌ Ａ，
Ｗ ＡＮＧ Ｌ ｕ — ｘ ｉ ａ ，Ｓ ＨＩ Ｌ ｉ ｎ ｇ — ｂ ｏ ，ＧＵＯ Ｚ ｈ ｅ ｎ ｇ — ｈ ｕ ｉ ，Ｃ ＨＥ Ｎ Ｒｕ ｉ ，ＨＵ Ｈｕ ｉ — ｌ ｉ ｎ ，Ｌ Ｉ Ｊ ｉ ａ ｎ — ｘ ｕ ｎ ，Ｌ Ｉ Ｗｅ ｉ ，
性 预测值 、 阴性预测 值分别 为 ９ ３ ． ３ ％、 ６ ５ ． ７ ％、 ５ ３ ． ８ ％和 ９ ５ ． ８ ％； Ｃ Ｒ Ｐ￣ ＜５ １ ． ７ ｍ ｇ ／ Ｌ时 ， 诊断血 培养 污染 的敏感性 、 特异 性、 阳性 预测值 、 阴性 预测值分 别为 ７ ６ ． ７ ％、 ６ ４ ． ３ ％、 ４ ７ ． ９ ％和 ８ ６ ． ６ ％； Ｐ Ｃ Ｔ￣ ＜０ ． ５ ｎ ｇ ／ ｍｌ 时， 诊断 血培养污 染 的敏 感性 、 特 异性 、 阳性 预测值 、 阴性预 测值分 别为 ９ ６ ． ７ ％、 ８ ４ ． ３ ％、 ７ ２ ． ５ ％和 ９ ８ ． ４ ％； 三项指 标联 合 时 ， 诊断 血培 养污 染 的敏感
血培养操作方法
血培养操作方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：血培养是一种常见的临床检验方法，用于检测血液中是否存在细菌、真菌、病毒或寄生虫等微生物。
这种方法可以帮助医生诊断、治疗感染性疾病，并且在临床实践中具有重要的意义。
在本文中，我们将介绍血培养的操作方法，以帮助读者更好地了解这一检验过程。
一、准备工作1. 收集标本：首先需要收集病人的血液样本，通常是通过采血管方法获取。
在采集样本之前，务必进行充分的消毒和穿戴手套，以避免污染。
2. 准备培养基：选择适用于血液培养的培养基，通常是含有富含营养物质的琼脂培养基。
确保培养基处于无菌状态。
3. 准备培养皿：将培养基倒入培养皿中，使其均匀分布在培养皿底部。
然后将培养皿封闭并标记上相关信息。
二、操作步骤1. 开启培养皿：取出封闭的培养皿，用无菌物品打开培养皿盖。
注意不要将培养皿底部暴露在外界环境中，以免污染。
2. 加入血液样本：用无菌的采血针或吸管，取出一定量的血液样本，滴入培养皿中。
通常每个培养皿中需要滴入约1-2毫升的血液样本。
3. 均匀涂抹：用无菌的吸管或细胞平板，将血液样本均匀涂抹在培养基表面。
确保血液样本与培养基完全混合，以促进微生物生长。
4. 封闭培养皿：将培养皿盖盖好，避免培养过程中的外界污染。
封闭后，将培养皿放入培养箱或恒温箱中，以保持适宜的生长环境。
5. 观察生长情况：在培养过程中，定期观察培养皿的生长情况。
通常在24-48小时后，可见到微生物在培养基上的生长。
三、结果解读1. 阳性结果：如果在培养皿上观察到有微生物的生长，表明血液样本中存在感染源。
医生需要根据具体情况，选择合适的抗生素进行治疗。
2. 阴性结果：如果在培养皿上未观察到微生物的生长，表明血液样本中未检测到感染源。
医生需要综合其他检查结果，继续诊断病因。
血培养是一种简单而有效的检验方法，可以帮助医生准确诊断感染性疾病。
正确的操作方法和结果解读对于提高诊断的准确性和有效性至关重要。
希望本文对读者有所帮助，希望大家能够在实践中熟练掌握血培养的操作技巧，为患者的健康提供更好的保障。
血液中常见病原体的检测方法
血液中常见病原体的检测方法血液检测是一种常见的临床实验室检查方法，可以帮助医生确定疾病的原因和诊断，尤其是对于血液中常见的病原体的检测具有重要意义。
本文将介绍血液中常见病原体的检测方法。
一、细菌的检测方法细菌是导致人们多种疾病的常见病原体，血液中的细菌检测对于早期诊断和治疗非常重要。
目前常用的细菌检测方法主要包括以下几种：1. 血培养法：通过将患者的血液样本接种到富含营养物质的培养基中，利用适宜的温度和环境来培养细菌，观察培养基中是否有细菌生长。
这种检测方法可以快速识别出感染性细菌，并进行药物敏感性测试，从而指导合理的治疗方案。
2. PCR法：聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外合成DNA的技术，可以通过扩增细菌DNA的特定区域，进而检测细菌的存在。
PCR法能够快速、准确地检测出微量的细菌DNA，对于感染性疾病的早期诊断具有重要意义。
3. 免疫学方法：免疫学方法主要包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫测定（RIA）等，通过检测血液中的特定抗体或抗原来判断是否感染细菌。
这些方法准确度较高，并且可以同时检测多种细菌感染。
二、病毒的检测方法病毒是引起多种传染性疾病的主要病原体，对于血液中常见病毒的检测具有重要的临床意义。
下面介绍几种常用的病毒检测方法：1. 核酸扩增技术：包括聚合酶链式反应（PCR）、实时荧光定量PCR等，主要通过扩增病毒核酸的标记区域来判断是否感染病毒。
这些技术具有高灵敏度和高特异性，可以快速检测出病毒感染，如乙型肝炎病毒、人免疫缺陷病毒等。
2. 血清学方法：通过检测血液中的病毒抗体来判断是否感染病毒。
常用的方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）和中和试验等。
这些方法可以同时检测多种病毒抗体，对于病毒感染的早期诊断十分重要。
三、寄生虫的检测方法寄生虫感染是一种常见的血液传播性疾病，对于寄生虫的检测可以帮助医生确定病因和制定治疗方案。
以下是寄生虫的常见检测方法：1. 血涂片法：将患者的血液涂在载玻片上，经染色后观察寄生虫卵或幼虫的存在。
血培养一二级报告
血培养一二级报告血培养是一种常用的检验方法，用于检测患者血液中是否存在细菌或真菌引起的感染。
本报告将对血培养的一二级结果进行详细描述和分析。
一、检验方法本次血培养使用的是常见的血琼脂培养基方法。
具体步骤如下：1.从患者的外周静脉采集血液样本，注意采样时需严格遵守无菌操作规范，以防止外源性污染。
2.用无菌针将血液样本均匀地接种到两个培养瓶中，即一级血培养和二级血培养。
3.将培养瓶置于体温孵育箱中，分别孵育24小时和48小时。
4.孵育结束后，观察培养瓶是否有菌落形成。
二、一级血培养结果一级血培养是迅速筛查血液中是否有细菌感染的重要步骤。
在本次实验中，一级血培养的结果显示如下：1.阴性：表示在接种的血液样本中未检测到任何细菌或真菌的生长。
2.阳性：表示在接种的血液样本中检测到了细菌或真菌的生长。
阳性结果需要进一步进行二级血培养确认。
三、二级血培养结果二级血培养是对一级阳性结果的进一步确认和鉴定。
在本次实验中，二级血培养的结果显示如下：1.阴性：表示在经过进一步培养的血液样本中未检测到任何细菌或真菌的生长。
2.确认性阳性：表示在经过进一步培养的血液样本中检测到了细菌或真菌的持续生长，该结果可以确定患者存在感染。
3.疑似阳性：表示在经过进一步培养的血液样本中出现了一些异常菌落，但尚未确定为致病菌。
需要进一步进行分离、培养和鉴定以确定感染源。
四、结果分析与讨论根据本次血培养的结果，一级血培养和二级血培养的阴性率较高，说明大多数患者并未感染细菌或真菌。
这可能是由于血液样本采集过程中的无菌操作，以及患者自身免疫功能的正常抵抗能力所致。
然而，一级血培养中出现阳性结果的样本需要进行进一步的二级血培养确认。
对于确认性阳性的样本，说明患者存在感染，并需要进行相应的治疗。
对于疑似阳性的样本，需要进一步进行细菌分离、培养和鉴定，以确定感染源并选择有效的治疗措施。
在实际操作中，血培养一二级结果的准确性和可靠性对于判断患者的感染状态至关重要。
血培养采集的方法及注意事项2017
2017-05-22
血培养的概念
血培养是一项实验室检查，是采集患者血液标本并接种到培 养瓶，用以发现、识别导致患者感染的病原微生物
是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法 对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义
血培养的目的
证实有感染性的病原体 鉴定病原体，做药敏试验 指导抗菌药物的使用
（但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒）
皮肤消毒程序（三步法）
70%乙醇擦拭静脉穿刺部位，待干30秒
1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒， 从穿刺点向外画圈消毒,直径1.5-2cm
用70%乙醇消毒 60秒（脱碘），待酒 精挥发干燥后采血
细菌是干死的，不是淹死的
培养瓶的消毒程序
1. 去掉培养瓶口的塑料瓶盖 2. 70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒 3. 自然待干 4. 将标本注入培养瓶内 5. 颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集
肺炎克雷伯菌
肠球菌
葡萄球菌
厌氧瓶检出致病菌时间更短
同样检出致病菌，BACTEC平均检测时间比Bact/Alert少4.36小时
Zadroga R et al. Clin Infect Dis. 2013;56:790-797
厌氧瓶、需氧瓶互相补充：提高检出率
J Microbiol Immunol Infect. 2007;40:445-449
❖ it is recommended that routine blood cultures include paired aerobic/anaerobic blood culture bottles.50-52
❖ When less than the recommended volume of blood is drawn for culture, the blood should be inoculated into the aerobic vial first; any remaining blood should then be inoculated into the anaerobic vial.
血培养中污染菌和致病菌的判断ppt课件
4.血培养污染菌鉴别依据
• • •
血培养污染的鉴别主要依靠以下几个方面：微生物鉴定、阳 性检出时间，重复培养结果以及临床特征（体温，白细胞， PCT，内毒素等）
其中判断价值最大的是：PCT， （由药物等因素所致，国内文献报道高浓度的头孢他啶可使 大鼠产生较少的PCT，牛磺酸可减少婴幼儿体外循环下PCT 的释放
有疑问时，多与临床沟通，共同学习， 断
1.血培养污染的主要原因
皮肤正常菌群是血培养污染最常见的细菌，说明皮肤消毒不彻 底和采血技术不当。
2.血培养污染菌的主要来源
2.1静脉穿刺时，因局部皮肤消毒不全，细菌随针刺带入被检血液而 被培养出来。
2.2长期留置血管导管的患者，其导管长期暴露在皮肤外界，而造成 外界皮肤菌群的移生，在经导管采血过程中将导管内的移生细菌带入 被检血液而被培养出来。
3 常见的血培养污染菌
3.1 造成血液培养污染的菌丛绝大多数为革兰氏阳性菌。 3.2 革兰氏阳性菌中,造成污染的机率远大于感染者,包括:凝固 酶阴性的葡萄球菌 、芽孢杆菌种、棒状杆菌及其它革兰阳性杆 菌。
凝固酶阴性的葡萄球菌从过去以来一直是所有血液培养中CNS 亦是最常出现菌种,也是血液培养污染最为常见菌种。
PCT当PCT水平不高，而临床不能排除血流感染时，应结合c反应蛋 白和白细胞计数等综合判定。
1.体温：≥38℃≤36℃ 2.WBC:≥1*10^9/L (可以在病历中查到)
3.降钙素原（最重要的判断依据） 疾 病 浓度（ug/L） 慢性炎症，自身免疫障碍 <0.5 病毒性感染，如急性乙肝 <0.5 轻度或局部细菌性感染 <0.5 肺炎 0.5~10 全身炎症反应综合症，复合性损伤，烧伤 0.5~2
4.7.报阳时间：菌血症时，血液含菌量越大，所以生长时间较
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4.超敏CRP 5.内毒素
4.6观察一组血培养瓶中的阳性瓶数目、并以此来判定是病原 菌还是污染菌,这种方法也已被采用。
双瓶双套中的一瓶报阳（污染）
单套双瓶中的一瓶报阳（无法判断是否污染，如果是厌氧瓶 报警，需要染色判断是否是厌氧菌感染。）
4.7.报阳时间：菌血症时，血液含菌量越大，所以生长时间较
血培养中污染菌的鉴别
1.血培养污染的主要原因
皮肤正常菌群是血培养污染最常见的细菌，说明皮肤消毒不彻 底和采血技术不当。
2.血培养污染菌的主要来源
2.1静脉穿刺时，因局部皮肤消毒不全，细菌随针刺带入被检血液而 被培养出来。
2.2长期留置血管导管的患者，其导管长期暴露在皮肤外界，而造成 外界皮肤菌群的移生，在经导管采血过程中将导管内的移生细菌带入 被检血液而被培养出来。
3 常见的血培养污染菌
3.1 造成血液培养污染的菌丛绝大多数为革兰氏阳性菌。
3.2 革兰氏阳性菌中,造成污染的机率远大于感染者,包括:凝固 酶阴性的葡萄球菌 、芽孢杆菌种、棒状杆菌及其它革兰阳性杆
菌。
凝固酶阴性的葡萄球菌从过去以来一直是所有血液培养中CNS亦 是最常出现菌种,也是血液培养污染最为常见菌种。
快，报警时间越短(多数在48小时内报警)
4.8
•
当分离出的微生物为金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠
埃希菌以及其他肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌
时，90%以上是血流感染病原菌。分离出化脓性链球菌、无
乳链球菌、产单核李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、
流感嗜血杆菌、脆弱拟杆菌其他假丝酵母菌和新型隐球菌时
，污染的肯能性更低，相反棒状杆菌、微球菌、芽孢杆菌、
丙酸杆菌、草绿色链球菌和凝固酶阴性葡萄球菌等很少是菌
血症的病原菌。
有疑问时，多与临床沟通，共同学习， 共同进步。
4.血培养污染菌鉴别依据
•
血培养污染的鉴别主要依靠以下几个方面：微生物鉴定、阳
性检出时间，重复培养结果以及临床特征（体温，白细胞，
PCT，内毒素等）
•
其中判断价值最大的是：PCT，
•
（由药物等因素所致，国内文献报道高浓度的头孢他啶可使
大鼠产生较少的PCT，牛磺酸可减少婴幼儿体外循环下PCT的
释放
PCT当PCT水平不高，而临床不能排除血流感染时，应结合c反应蛋白 和白细胞计数等综合判定。
1.体温：≥38℃≤36℃ 2.WBC:≥1*10^9/L (可以在病历中查到)
Hale Waihona Puke 3.降钙素原（最重要的判断依据）
疾 病 浓度（ug/L） 慢性炎症，自身免疫障碍 <0.5 病毒性感染，如急性乙肝 <0.5 轻度或局部细菌性感染 <0.5
肺炎 0.5~10 全身炎症反应综合症，复合性损伤，烧伤 0.5~2