实验十二 糖发酵实验(0)

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实验十
糖发酵试验
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一.实验目的及要求
1、了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的 作用。 作用。 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 2、掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
二.基本原理
糖发酵试验是最常用的生化反应, 糖发酵试验是最常用的生化反应,在肠道细菌的鉴 定上尤为重要。 定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳 源和能源, 源和能源,但是它们在分解糖的能力上有很大的差 有些细菌能分解某种糖并产酸( 乳酸、醋酸、 异,有些细菌能分解某种糖并产酸(如乳酸、醋酸、 丙酸等)和气体( 甲烷、二氧化碳等);有 丙酸等)和气体(如氢、甲烷、二氧化碳等);有 些细菌只产酸不产气。 些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和 葡萄糖产酸并产气; 葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不 产气,不能分解乳糖; 产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌分解葡萄糖产 酸产气,不能分解乳糖。 酸产气,不能分解乳糖。 酸的产生可利用指示剂来断定。 酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预 先加入溴甲酚紫[pH5. 溴甲酚紫[pH5 黄色) 紫色) 先加入溴甲酚紫[pH5.2(黄色)-6.8(紫色)], 当发酵产酸时,可使培养基由紫色变为黄色。 当发酵产酸时,可使培养基由紫色变为黄色。气体 的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡 来证明。 来证明。
三.实验器材
菌株:大肠杆菌,枯草杆菌、 菌株:大肠杆菌,枯草杆菌、土壤分离菌 材料:盛有葡萄糖发酵培养基的试管( 材料:盛有葡萄糖发酵培养基的试管(内装 有倒置的德汉氏小管),试管架, ),试管架 有倒置的德汉氏小管),试管架,接 种 环等。 环等。
四.实验步骤
1、编号用记号笔在各试管上分别标明发酵培 养基名称和所接种的菌名。 养基名称和所接种的菌名。 接种:取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3 2、接种:取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3 按编号1支接种大肠杆菌, 支,按编号1支接种大肠杆菌,另1支接种 产气肠杆菌, 支接土壤分离菌种, 产气肠杆菌,第3支接土壤分离菌种,每一大 组留一只管不接种,作为对照。 组留一只管不接种,作为对照。 3、将上述已接种的葡萄糖发酵试管和对照管 37℃温室中培养24小时 温室中培养24小时。 置37℃温室中培养24小时。 观察结果。 4、观察结果。
五.实验结果
将实验结果填入课本上的表格。“++”表示 将实验结果填入课本上的表格。 ++” 产酸产气; 表示产酸不产气; 产酸产气;“+”表示产酸不产气;“-”表 示不产酸不产气。 示不产酸不产气。
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