糖发酵试验
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糖发酵试验
一、目的要求了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用
掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法
二、试验原理糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌鉴定中尤为重要,绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源,但是它们在分解糖的能力上有很大的差异, 有些细菌能分解某种糖并产酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢、甲烷、二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖。
酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫[pH5.2(黄色)-6.8(紫色)],当发酵产酸时,可使培养基由紫色变为黄色。
气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证
三、实验器材1、菌种大肠杆菌,枯草芽孢杆菌斜面各1支;
2、培养基盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各2支(内装有倒置的德汉氏小管)
3、仪器或其他用具试管架,接种环等。
四、操作步骤
1、编号
用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。
2、接种
取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支,按编号1支接种大肠杆菌,另1支接种枯草芽孢杆菌,第3支不接种,作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支,同样1支接种大肠杆菌,1支接种枯草芽孢杆菌,第3支不接种,作为对照。
3.将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37℃温室中培养24小时。
4.观察结果。
五、实验结果
结果
将实验结果填入下表。“”表示产酸产气;“+”表示产酸不产气;“-”表示不产酸不产气。