发育生物学实验
发育生物学实验指南简要
实验一小鼠骨髓间充质干细胞的分离培养一、目的要求1.掌握小鼠骨髓间充质干细胞的分离培养方法。
2.了解小鼠骨髓间充质干细胞的鉴定方法。
3.了解小鼠骨髓间充质干细胞定向分化和鉴定方法。
二、材料与设备1.动物:SD大鼠。
2.主要试剂:胎牛血清(FBS),DMEM--LG培养基,PBS,抗体(NSE和GFAP)。
3.主要器材与仪器:手术剪,手术镊,眼科剪,眼科镊,培养瓶,培养皿,称量瓶,刻度离心管,吹打管,注射器,倒置相差显微镜,CO2培养箱三、实验步骤1.小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSC)的分离培养:⑴小鼠BMSC的分离和原代培养:①以颈髓离断法处死小鼠。
在无菌条件下取出小鼠股骨,除去骨表面附着的组织,用PBS 清洗干净。
②用剪刀去除股骨两端,暴露骨髓腔。
无菌条件下用5ml注射器抽取PBS约3-4ml将小鼠股骨内的骨髓冲出,收集骨髓冲洗液,将收获的全部骨髓用注射器反复抽吸,以打散组织成为细胞悬液。
③收集细胞悬液约7ml并将其转入15毫升离心管中,1500r/min离心5min,弃上清液及脂肪层。
④在细胞沉淀中加入5-6ml含10%胎牛血清的DMEM一LG培养基,倒置显微镜下观察,37℃、5%CO2 培养箱中培养。
2. 带学生在电脑上观看以往的小鼠间充质干细胞免疫荧光图片。
实验二大鼠神经干细胞的分离培养一、目的要求1.掌握大鼠胚胎神经干细胞的分离培养方法。
2.了解大鼠胚胎神经干细胞的鉴定方法。
3.了解大鼠胚胎神经干细胞定向分化和鉴定方法。
二、材料与设备1.动物:孕龄约15天的Wistar或SD孕鼠2.试剂:条件培养基(DMEM/F12+20ng/mlbFGF+20ng/mlEGF+20μl/mlB27),D-Hank’s液(NaCl 8g, KCL0.4g,Na2HPO4.12H2O 0.1g, KH2PO4 0.06g, NaHCO3 0.35g, 加水1000ml溶解,调PH 值为7.2-7.4,高压灭菌后,4℃储存备用),0.25%胰蛋白酶(D-Hank’s液配制,过滤灭菌,-20℃储存),抗体(巢蛋白、NSE、GFAP)。
发育生物学实验
发育生物学实验指导2008-2009学年第二学期2009年4月2日实验一1原理卵巢表面为单层立方或扁平的表面上皮,上皮下方为薄层致密结缔组织构成的白膜。
卵巢实质分为皮质和髓质。
皮质含不同发育阶段的卵泡、黄体和白体,卵泡间结缔组织由低分化的梭形的基质细胞、网状纤维及散在的平滑肌纤维构成。
髓质有血管和淋巴管。
近卵巢门处有少量门细胞,其结构和功能类似睾丸间质细胞,可分泌雄激素,在FSH和LH刺激下,每个周期有一批卵泡发育,其中之一发育成熟并排卵。
卵泡的发育分为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡四个阶段。
①原始卵泡体积小,由一个初级卵母细胞和一层扁平的卵泡细胞构成。
初级卵母细胞为圆形,直径约40μm,核大而圆,染色浅,核仁明显,胞质嗜酸性。
初级卵母细胞是在胚胎时期由卵原细胞分裂分化形成,并停滞在第一次减数分裂前期,直至排卵前才完成分裂。
②初级卵泡为原始卵泡在FSH的作用下发育形成。
初级卵母细胞增大,在靠近质膜的胞质中出现电子致密的溶酶体,称皮质颗粒。
卵泡细胞增生,由扁平变为立方形或柱状,由单层变为多层;最内一层卵泡细胞为柱状,呈放射状排列,称放射冠。
在初级卵母细胞与放射冠的卵泡细胞之间出现一层均质状、嗜酸性的透明带。
构成透明带的蛋白中,ZP3为精子受体。
③次级卵泡其内出现卵泡腔,腔内充满卵泡液;初级卵母细胞、透明带、放射冠及部分卵泡细胞突入卵泡腔内形成卵丘;卵泡腔周围的数层卵泡细胞形成卵泡壁,称颗粒层,卵泡细胞改称颗粒细胞。
初级卵泡和次级卵泡合称生长卵泡,其周围形成卵泡膜。
卵泡膜内层有多边形或梭形的膜细胞,具有分泌类固醇激素细胞的特征;外层有胶原纤维和平滑肌纤维,膜细胞合成雄激素,雄激素进入颗粒细胞,转化为雌激素,故雌激素由两种细胞联合产生。
④成熟卵泡在LH刺激下,次级卵泡发育为成熟卵泡。
初级卵母细胞直径可达150μm。
由于卵泡液急剧增多卵泡体积显著增大,直径可超过2cm,并向卵巢表面突出。
在排卵前36~48小时,初级卵母细胞完成第一次减数分裂,形成次级卵母细胞和第一极体。
发育生物学的实验教学方法
发育生物学的实验教学方法发育生物学是研究生物体从受精卵到成熟个体的发育过程的学科。
实验教学在发育生物学中起着至关重要的作用,通过实验可以直观地观察和理解生物体发育的过程和机制。
本文将介绍一些发育生物学的实验教学方法,以帮助学生更好地学习和理解这一学科。
一、观察胚胎发育过程观察胚胎发育过程是发育生物学实验教学的重要环节。
学生可以通过显微镜观察受精卵的分裂、胚胎的形态变化等。
可以使用小鼠、果蝇、斑马鱼等模式生物进行实验,这些生物的发育过程相对较短,方便学生观察和实验操作。
通过观察胚胎发育过程,学生可以深入了解细胞分裂、器官形成等发育过程的细节。
二、基因敲除实验基因敲除是一种重要的实验方法,通过敲除特定基因,可以观察到这个基因在发育过程中的作用。
学生可以选择一个感兴趣的基因,通过基因敲除技术将其敲除,然后观察敲除个体的发育过程和表型变化。
这种实验可以帮助学生深入了解基因在发育过程中的作用,并探索基因与发育的关系。
三、细胞培养实验细胞培养是发育生物学实验中常用的方法之一。
学生可以通过细胞培养实验观察细胞的分裂、分化和形态变化等。
可以选择动物细胞或植物细胞进行培养实验,通过观察细胞的生长和变化,学生可以更加直观地理解细胞的发育过程和机制。
四、基因表达实验基因表达是发育生物学中一个重要的研究方向。
学生可以选择一个感兴趣的基因,通过基因表达实验观察该基因在发育过程中的表达情况。
可以使用荧光标记等方法来标记基因的表达,然后观察标记物在胚胎或组织中的分布情况。
通过这种实验,学生可以了解基因在发育过程中的动态表达模式。
五、模型构建实验模型构建是发育生物学实验中常用的方法之一。
学生可以选择一个发育过程进行模拟,通过构建模型来观察和理解发育过程中的关键因素和机制。
例如,可以构建一个模拟胚胎发育的系统,通过调控不同因素的作用来观察胚胎发育的变化。
通过模型构建实验,学生可以更加深入地理解发育过程中的复杂性和动态性。
综上所述,发育生物学的实验教学方法多种多样,通过观察胚胎发育过程、基因敲除、细胞培养、基因表达和模型构建等实验,可以帮助学生更好地理解和探索发育生物学的奥秘。
模式动物发育生物学实验报告——斑马鱼胚发育背轴节调节因子
山东大学模式动物发育生物学实验报告
斑马鱼体节发育调节因子对胚胎发育的影响
姜政 2012/10/4 实验目的:
练习用显微注射法向斑马鱼受精卵中注射体节发育调节因子的mRNA,观察两种体节调节因子过表达作 用下斑马鱼胚胎发育的形态特点和规律,了解两种调节因子作用于斑马鱼体节发育的机理。 实验方法:
3
Antivin(Lefty)是TGF-β(Transforming Growth Factor-β)超家族中的一个子家族,Antivin的过表达会阻 碍斑马鱼头部和躯干中胚层的发育。Activin的表达与体节调节过程并存,主要作用是减弱原肠期体节信号通 路,是体节调节通路中Cyc和Sqt的拮抗剂,因此Antivin与Sqt等组成了原肠期体节发生的正、负反馈调节因子。 Antivin过表达使斑马鱼体节调节控件Cyc、Sqt作用降低,反过来,Antivin的影响也可以被Cyc和Sqt的过表达 消除。体节分化过程中反馈调节的大致过程是:上游的调节因子启动Sqt、Cyc等的表达,并形成正反馈循环, 同时起始Antivin在中胚层的表达形成体节调节的负反馈循环(图3,右)。Antivin作为拮抗剂可能的机理是阻 断了体节调节受体与Sqt等配体的结合,使受体无法被激活[7]。通常,Antivin过表达的胚胎仅仅由前脑和眼 睛构成[6],而实验观察发现,多数胚胎最终并没有发育出完整的眼睛,而且Nodal通路的受阻也彻底破坏了 胚胎的血液循环系统(图2)。在胚胎发育的体节期晚期,Lefty家族蛋白(Lefty1、Lefty2等)分别在胚胎左 侧的中脑和基板不对称表达,这显示了Lefty家族蛋白在胚胎左右轴决定(图4)中的作用[8]。
体节信号通路(Nodal Signaling)是斑马鱼中内胚层分化的最初步骤。Squint(Sqt)是一种在中胚层形成 和分化过程中与体节调节相关的生长因子[1]。通常,Sqt与其同系物cyclops(Cyc)共同在体节通路上发挥作 用(图3,左)。Cyc和Sqt都在囊胚期末期的中内胚层胚盘边缘处表达,其中Sqt在卵黄合胞体层(YSL)表达, 两者都是中胚层分化的诱导信号。Cyc和Sqt的同时缺失会导致原肠期中胚层的退化并进一步导致大部分中胚 层和内胚层的缺失,表现为头部、躯干缺失以及胚环不能形成[2, 3, 4]。
发育生物学实验讲义
发育生物学实验讲义主编:余雪松贾伟章李浩明2007年7月(仅供内部使用,请勿外传)前言发育生物学被公认为是当今生命科学的前沿分支学科,是研究生物体发育过程及其调控机制的一门学科。
发育生物学不同于传统的胚胎学,它是生物化学、分子生物学、细胞生物学、遗传学等学科与胚胎学相互渗透的基础上发展形成的一门新兴的学科,是胚胎学的继承和发扬。
发育生物学同时又是一门实验的科学,正是由于发育生物学实验技术的进步才推动了发育生物学的发展。
关于发育生物学实验,国内目前尚无系统的实验教材。
考虑到我院生物科学专业本科的课程设置特点以及我院的实验条件,在编写这本实验教材时设置了相关的实验,参考有关资料进行编写。
考虑到学生用活胚胎作实验缺乏经验和实验内容尽可能多的涵盖重要的发育原理和研究方法,实验内容为生物发育模式的形态观察,以切片观察为主,同时以活的胚胎来观察发育过程并进行实验为补充。
对于部分因课时和实验条件的限制可能暂时无法开展的实验,利用教学录像等多种手段让学生了解发育生物学实验技术的发展和应用。
通过一些实验手段对生物的发育机制进行探讨。
本课程通过对几种模式动物(海胆、文昌鱼、斑马鱼、鲫鱼、蛙、鸡等)生殖和发育过程的实验观察,促进学生对发育的时空连续性变化的理解和对生命系统的敏锐认识和重视;同时掌握发育生物学重要的原理和研究实验的基本技能。
培养学生成为具有独立实验操作技能和一定分析解决问题能力的创新人才。
由于时间仓促,水平有限,在内容和方法上可能还存在不少缺点错误,欢迎批判指正,以便在今后进行实验内容的调整和改进。
余雪松贾伟章李浩明广东药学院生命科学与生物制药学院2007年7月目录实验一........................................... 海胆早期胚胎发育4 实验二......................................... 文昌鱼早期胚胎发育7 实验三 ......................................... 文昌鱼组织结构观察10 实验四 ......................................... 斑马鱼早期胚胎发育13 实验五 ........................................... 鲫鱼早期胚胎发育16 实验六 ........................................... 鲫鱼组织结构观察20 实验七 ............................................. 蛙早期胚胎发育24 实验八 ................................. 蛙的人工催产及体外跌卵实验29 实验九 ............................... 鸡卵的人工孵育和胚胎发育观察32实验一:海胆早期胚胎发育一、实验生物海胆,别名刺锅子、海刺猬,体形呈圆球状,就像一个个带刺的紫色仙人球,因而得了个雅号—“海中刺客”。
分子发育生物学国家重点实验室开放课题
分子发育生物学国家重点实验室是我国重要的科研评台,致力于开展前沿的发育生物学研究。
为了促进科研成果的交流与共享,实验室决定开放一些课题给其他感兴趣的科研人员进行合作研究。
以下是本实验室开放的具体课题:一、课题名称:植物胚胎发育调控机制研究1.1 课题简介:植物胚胎发育是植物生命周期中一个至关重要的阶段,对植物生长发育和繁殖具有重要意义。
本课题旨在探索植物胚胎发育的调控机制,包括转录因子的调控网络、激素信号传导的作用机制等方面的研究内容。
1.2 研究内容:(1)分析植物胚胎发育关键时期的基因表达谱,筛选关键调控因子;(2)利用生化和分子生物学方法研究植物激素在胚胎发育中的作用机制;(3)通过对突变体的筛选和功能分析,阐明植物胚胎发育调控网络。
1.3 预期成果:(1)揭示植物胚胎发育的关键调控因子和调控网络;(2)阐明植物激素在胚胎发育中的作用机制;(3)构建植物胚胎发育的调控模型。
二、课题名称:动物器官发育中的信号通路研究2.1 课题简介:动物器官发育是动物生长发育过程中的重要环节,本课题旨在深入探讨动物器官发育过程中的信号通路调控机制,包括Wnt、Notch、TGF-β等信号通路的相互作用和调控机制。
2.2 研究内容:(1)利用转基因技术构建动物模型,研究特定信号通路在器官发育中的作用;(2)通过RNA测序和蛋白质组学等手段,分析不同信号通路在器官发育过程中的调控网络;(3)研究不同信号通路之间的相互作用及其对器官发育的影响。
2.3 预期成果:(1)深入理解动物器官发育中不同信号通路的作用机制;(2)揭示不同信号通路之间的相互作用关系;(3)为相关疾病的防治提供理论基础和实验依据。
三、课题名称:发育生物学中的表观遗传学研究3.1 课题简介:表观遗传学是近年来备受关注的一个新兴领域,本课题旨在探讨发育生物学中的表观遗传学调控机制,包括DNA甲基化、组蛋白修饰等表观遗传标记在发育过程中的作用和调控机制。
植物发育生物学实验指导
实验一低拷贝质粒的大量提取——碱法【实验原理】质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体。
作为一个具有自身复制起点的复制单位独立于细胞的主染色体之外,质粒DNA上携带了部分的基因信息,经过基因表达后使其宿主细胞表现相应的性状。
在DNA重组中,质粒或经过改造后的质粒载体可通过连接外源基因构成重组体。
从宿主细胞中提取质粒DNA,是DNA重组技术中最基础的实验技能。
分离质粒DNA有三个步骤:培养细菌使质粒扩增,收集和裂解细菌,分离和纯化质粒DNA。
在质粒提取过程中,由于机械力、酸碱度、试剂等的原因,可能使质粒DNA链发生断裂。
所以,多数质粒粗提取物中含有三种构型的质粒:共价闭合环状DNA(cccDNA):质粒的两条链没有断裂;超螺旋开环DNA(ocDNA):质粒的一条链断裂;松弛的环状分子线形DNA(lDNA):质粒的两条链均断裂;线性分子质粒DNA的分子构型。
质粒DNA琼脂塘凝胶电泳模式图可分为:松弛线性的DNA;松弛开环的OC构型;超螺旋的SC构型。
由于琼脂糖中加有嵌入型染料溴化乙锭,因此,在紫外线照射下DNA电泳带成橘黄色。
道中的SC DNA走在最前沿,OC DNA则位于凝胶的最后边;道中的L DNA 是经核酸内切限制酶切割质粒之后产生的,它在凝胶中的位置介于OC DNA 和SC DNA 之间。
碱法提取质粒是R.Treisman尚未发表的方法,同时也是Brinboim和Doly(1979)及Ish-Horowicz和Burke(1981)所用方法的改进。
该方法对于目前使用的所有大肠菌菌株都卓有成效,并可与随后的纯化步骤,如聚乙二醇沉淀或氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心等,一并联合使用。
【药品试剂】1、溶液I:50 mmol/L葡萄糖、 25 mmol/L Tris.Cl(pH8.0)、10mmol/L EDTA(pH8.0)。
溶液I可成批配制,在10 lbf/in2(6.895x104Pa或者是115 ℃)高压下蒸气灭菌15min,贮存于4 ℃。
发育生物学实验_北京师范大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年
发育生物学实验_北京师范大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年1.果蝇胚胎收集完成后,经过清洗后,应该放入()液体中进行保存,可以在-20℃保存一年。
参考答案:甲醇2.石蜡切片常用的透明剂是()。
参考答案:二甲苯3.质粒DNA转化农杆菌感受态细胞常用的方法()参考答案:电击转化法_热激法4.50%漂白水的作用是去除卵壳。
参考答案:正确5.在胚胎收集过程中,若要只收集中间阶段的胚胎,应该等到该时间段再更换培养皿,然后直接收集其中的胚胎。
参考答案:错误6.果蝇胚胎免疫荧光染色实验中的所有步骤都要尽量避光。
参考答案:错误7.在荧光显微镜下,DAPI染色后的物质通过紫外光的激发可以呈现蓝色荧光,荧光显微镜下可观察到被染成蓝色的细胞核。
参考答案:正确8.配制果蝇玉米培养基时,待培养基煮沸后可立即加入干酵母粉,酵母粉均匀的撒在培养基表面,充分搅拌至完全溶解。
参考答案:错误9.培养基的质地较硬且贴壁紧密,可采用倒扣转移法,即将该培养管放在新培养管的上方,轻叩新培养管的底部,让成蝇落入新的培养基上。
参考答案:正确10.果蝇成虫分头、胸、腹三部分,头部有1对大的复眼,3个单眼和1对触角;胸部有3对足,1对长于腹部末端的翅和1对平衡棒;腹部背面有黑条纹,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端;全身还有许多体毛和刚毛。
参考答案:正确11.在冷冻切片过程中,柔软稚嫩含水分的组织选择相对较低的切片温度。
参考答案:错误12.果蝇胚胎免疫荧光染色实验中包含以下步骤()参考答案:DAPI染色_免疫荧光染色_胚胎的收集固定13.本次实时荧光定量PCR属于下列哪种实验类型?参考答案:相对定量14.鸡的胚胎发育的第一阶段是()参考答案:胚胎内部器官发生的阶段15.下列哪项不是实时荧光定量PCR产物的荧光标记?参考答案:GFP16.实时荧光定量PCR反应体系中,不包括下列哪项?参考答案:Oligo dT17.受精卵在输卵管中进行卵裂,约经()的细胞分裂和分化形成一个早期的胚胎参考答案:24 h18.照蛋时胚胎卵黄囊血管向四周伸展,形似蜘蛛,俗称“小蜘蛛”。
发育生物学实验心得
发育生物学实验心得
我进行了一个关于显微镜下观察果蝇发育过程的实验,对于果蝇
的发育过程有了更深入的了解。
我的实验中,首先需要培育果蝇幼虫,我选择了用玉米面培养,
因为这是一种简便而且容易获取的方法。
在观察果蝇幼虫时,我使用
了高倍率显微镜,以便更清晰地观察它们的发育过程。
随着观察时间
的推移,果蝇幼虫的身体逐渐变长,内部器官也逐渐形成。
当果蝇幼
虫发育到一定阶段时,它们会形成蛹,这是它们进入蛹期的标志。
在观察果蝇的蛹期时,我发现果蝇的眼睛和触角已经初步形成,
而其它器官也在逐渐发育。
在蛹期结束后,果蝇将会开始破蛹而出,
进入成虫时期。
我在实验中观察了不同发育阶段的果蝇,从而对果蝇
的生命周期有了更全面的了解。
此外,在实验过程中还发现了一些有趣的现象,比如不同果蝇幼
虫发育速度有差异,有些幼虫会比其它的更快地发育成熟。
这些现象
让我对果蝇发育的过程产生了更多的兴趣,也让我更好地理解了发育
生物学的相关知识。
综上所述,这个实验让我对果蝇的发育过程有了更深入的了解,
同时也让我意识到了发育生物学的重要性。
通过观察果蝇的发育过程,我更好地理解了动物发育的过程,对于这一领域有了更深入的认识。
发育生物学实验
发育生物学实验合作合同甲方(委托方):_____________________________________地址:_____________________________________________联系电话:__________________________________________法定代表人:_______________________________________乙方(承办方):_____________________________________地址:_____________________________________________联系电话:__________________________________________法定代表人:_______________________________________为确保发育生物学实验项目的顺利开展,甲乙双方在平等自愿的基础上,根据相关法律法规及科研规范,就发育生物学实验项目的合作事宜达成如下协议:一、项目概述1.1 项目名称:发育生物学实验1.2 项目目标:通过实验研究特定生物的发育过程,探索发育机制和调控因子。
1.3 项目内容:_______________________________________(如细胞分化、基因表达调控、胚胎发育等具体实验内容)1.4 实验地点:_______________________________________1.5 项目周期:自______年___月___日起至______年___月___日止。
二、甲方的权利与义务2.1 甲方应提供项目所需的实验材料、设备或数据,并确保其完整性与真实性。
2.2 甲方有权根据项目进展对乙方的实验方案、实验操作提出建议,并有权对实验的实施进行监督。
2.3 甲方应按约定及时支付实验费用,并协助乙方解决实验过程中遇到的特殊问题。
2.4 甲方有权在项目完成后获得实验结果、数据及相关报告,且甲方对实验数据拥有使用权。
小鼠发育生物学实验内容
小鼠发育生物学实验内容实验一:小鼠卵母细胞和精子的形态观察一、实验目的:掌握胚胎体外操作工具的制备、小鼠超数排卵方法以及小鼠精子和不同发育阶段观卵母细胞的收集方法,观察精子结构和运动状态,评估精子活力,观察卵母细胞结构,了解体外授精操作过程。
二、操作过程:1 胚胎体外操作工具制备在酒精喷灯上将玻璃管拉成直径1mm的细管,连上乳胶管即可。
2 小鼠的抓去与保定3 收集精子断颈处死公鼠,打开腹腔,找到睾丸和附睾,剪取附睾尾,剪碎,置1.5ml离心管底部,加0.5ml 生理盐水,置37度水浴锅20分钟,用吸管从离心管上部取50微升液体,置细胞计数板,观察精子结构、密度和活力。
精子活力计算公式:精子活力=视野中直线运动的精子数/视野中总精子数4 收集卵母细胞成熟卵母细胞的收集:母鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素PMSG(每只10单位),48小时后再注射人类绒毛膜促性腺HCG(每只10单位),18小时后断颈处死母鼠,打开腹腔,剪下输卵管,用镊子刺破输卵管壶腹部,释放卵母细胞,用透明质酸酶溶液(10毫克/毫升生理盐水)处理卵母细胞以除去颗粒细胞,在实体显微镜下观察卵母细胞的结构。
未成熟卵母细胞的收集:断颈处死性成熟前母鼠,打开腹腔,剪取卵巢,加入1毫升盐水,用刀片或镊子捣碎卵巢,寻找生发泡状态的卵母细胞,观察卵母细胞结构。
5 体外授精将卵母细胞与精子共培养(微滴培养法)(演示)三、实验结果各种精子和卵子的形态绘图;精子活力;精子密度四、实验收获与体会,存在问题和改进意见。
实验二:小鼠早期不同发育阶段胚胎的收集、观察以及胚胎移植一、实验目的:掌握小鼠附植前胚胎收集方法,观察不同发育阶段小鼠胚胎的结构,认识小鼠早期胚胎形态学,并了解体内发育阶段与所处生殖器官位置的关系,了解小鼠胚胎移植的基本原理和操作过程。
二、操作过程:1 小鼠超数排卵程序中午12时腹腔注射PMSG,48小时后腹腔注射HCG并与公鼠合笼交配,次日清晨检查阴道栓,如果发现阴道栓则妊娠0.5天。
发育生物学实验报告
发育生物学实验报告发育生物学实验报告引言发育生物学是研究生物体从受精卵到成熟个体的发育过程的科学。
通过实验研究,我们可以深入了解生物的发育机制,揭示生命的奥秘。
本实验旨在通过观察和记录昆虫的发育过程,探索其发育规律和影响因素。
材料与方法在实验中,我们选择了果蝇(Drosophila melanogaster)作为研究对象,因其短寿命、繁殖力强以及遗传学研究的便利性。
我们从实验室中获得了果蝇的受精卵,并将其放置在特定的培养基中。
我们将实验分为以下几个步骤:1. 取出果蝇受精卵:使用显微镜和细长的玻璃棒,小心地取出果蝇受精卵,并将其放入培养基中。
2. 培养受精卵:将培养基置于恒温箱中,保持适宜的温度和湿度条件。
观察受精卵的发育情况,并记录下来。
3. 观察幼虫的发育:当受精卵孵化为幼虫后,我们将其转移到新的培养基中。
每天观察幼虫的体长、体重和外部形态的变化,并记录下来。
4. 观察蛹的形成:当幼虫进入蛹化阶段时,我们将其转移到另一个培养基中。
观察蛹的外部形态变化,以及蛹壳的颜色和硬度的变化。
5. 观察成虫的出现:当蛹化完成后,成虫开始出现。
我们将其转移到新的培养基中,并观察其外部形态、行为特征和寿命。
结果与讨论通过实验观察和记录,我们得出了以下结论:1. 发育过程的时间:果蝇的发育过程相对较短,从受精卵到成虫出现,大约需要10-14天的时间。
其中,受精卵孵化为幼虫的时间约为3-4天,蛹化过程大约持续5-7天。
2. 发育过程的特征:果蝇的发育过程经历了受精卵、幼虫、蛹和成虫四个阶段。
每个阶段都伴随着特定的形态和生理变化。
例如,幼虫阶段的果蝇会经历多次蜕皮,体长和体重会不断增加。
3. 发育过程的影响因素:果蝇的发育过程受到多种因素的影响,包括温度、湿度、养料和遗传因素等。
例如,较高的温度可以加快果蝇的发育速度,而缺乏养料则会延缓其发育进程。
4. 遗传变异的观察:通过观察果蝇群体中的遗传变异现象,我们可以深入了解基因对发育过程的影响。
虫白蜡生理生态和发育生物学的实验研究方法
虫白蜡生理生态和发育生物学的实验研究方法虫白蜡(Coccus hesperidum)是一种重要的农业害虫,主要危害柑橘树和其他果树。
虫白蜡的生理生态和发育生物学是了解其习性和生命周期的重要方面。
实验研究方法在揭示虫白蜡的这些特性方面起着关键作用。
本文将介绍虫白蜡生理生态和发育生物学的实验研究方法。
一、虫白蜡生理生态研究方法1. 虫白蜡的生理特性观察可以使用显微镜观察虫白蜡的形态结构和生理特征。
通过观察虫白蜡的口器结构、足部特征、种群密度等信息,可以了解其适应环境的特点。
2. 虫白蜡的生态习性调查通过实地调查虫白蜡的生态习性,如寄主植物选择、迁飞行为、季节波动等,可以揭示其生活史和适应策略。
这可以通过观察虫白蜡在不同植物上的分布情况和种群密度,以及对不同环境条件的反应来实现。
3. 虫白蜡的生理活动监测通过监测虫白蜡的生活活动,如觅食、繁殖、蜕皮、虫蚀等行为,可以获得其生理活动的时序数据。
可以利用现代昆虫行为学的研究方法,如跟踪记录虫白蜡的运动轨迹和食物取食行为。
4. 虫白蜡的生态相互作用研究研究虫白蜡与其它生物之间的生态相互作用,如寄生昆虫、天敌、共生菌等,可以深入了解虫白蜡种群的动态变化和生态位的特征。
可以利用田间观察、实验室实验和分子生态学方法来研究虫白蜡的生态相互作用。
二、虫白蜡发育生物学研究方法1. 虫白蜡的发育观察通过观察虫白蜡的发育过程,如卵的孵化、幼虫期、蛹期和成虫期等,可以揭示其发育阶段的特征和时序。
可以使用显微镜观察虫白蜡不同发育阶段的形态结构。
2. 虫白蜡的发育速度测定利用时间序列数据测定虫白蜡的发育速度,可以得到不同发育阶段的发育时间和发育速度参数。
这可以通过定期检查种群中个体的发育阶段,并记录其相应的时间来实现。
3. 虫白蜡的发育影响因素研究研究虫白蜡的发育过程受到的环境因素的影响,如温度、湿度、食物质量和数量等,可以揭示其发育生物学的适应性和响应性。
可以通过设置不同的实验条件,并对虫白蜡的发育进行观察和记录来实现。
小鼠发育生物学与胚胎实验方法
小鼠发育生物学与胚胎实验方法我折腾了好久小鼠发育生物学与胚胎实验方法,总算找到点门道。
小鼠胚胎实验特别棘手,我一开始真是瞎摸索。
就拿获取小鼠胚胎来说吧,那真是小心翼翼的活。
我最开始老是失败,还找不到原因。
就像在黑夜里找东西,完全没方向。
我试过用传统的器械去取胚胎,可那器械稍微用不好就可能伤到胚胎,小老鼠的胚胎那么小又那么脆弱,真的是跟伺候小祖宗似的。
后来我想啊,是不是操作环境有问题呢。
于是我费了好大劲把实验室环境的温度和湿度都重新调校了一遍。
我心想这就跟人睡觉一样,环境舒服了才睡得好,胚胎在合适的温湿度下或许也能更好地被操作。
这中间我也不确定是不是做无用功,但是死马当作活马医呗。
调整完之后呢,发现胚胎存活率好像真的提高了一点,但也不是特别显著。
再说到胚胎的培养,这就像是种小豆芽一样,要有合适的营养液。
我试过好多种商业的和自己配置的胚胎培养液,都快成调药剂的大师了。
在自己配置培养液的时候,那配方里的材料称量一点都不能错,就像做饭放盐一样,多一点少一点味道就不对了。
有一次我把一个成分的量稍微配错了一点,哎呀,那一批胚胎长得那叫一个歪瓜裂枣,那次可真是个深刻的教训啊。
还有胚胎的观察手段。
显微镜那是必不可少的啊。
我最开始不太会调整显微镜的参数,看到的胚胎图像那叫一个糊,根本没办法好好观察发育的细节。
我就不停地摆弄那些旋钮,这就跟调音师调音响一样,一点点找感觉,最后终于能清楚看到胚胎的细胞结构啥的了。
对于小鼠发育生物学的研究,了解胚胎各个阶段的发育时间也很关键。
这个可不好把握啊,我就自己天天守着那些小鼠胚胎做记录,就像老母鸡孵蛋时一直盯着蛋似的。
有时候看着看着别的实验就耽误了,但这一步必须要做好。
只有掌握了准确的发育时间,才能准确地在合适的时间点进行干预和观察啊。
我还在实验中发现小鼠的品种有时候也会影响胚胎实验的结果。
有一些品种的胚胎似乎更皮实一些,另一些就很娇弱。
就好比有的孩子天生身体好,有的就弱一些。
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方法与步骤 青蛙排卵季节,携带长柄 铁勺,水桶、10%福尔马 林及玻璃小瓶若干,在早 上5点半——6点到达蛙卵采
集地。
如见雌蛙产卵,即用铁勺轻 轻捞取新鲜卵于水桶中(水 和草用原地的)如未见产卵, 可捞取胶膜清新透明,动植 物极黑白分明的新鲜卵团。 并迅速用10%福尔马林固定一 些新鲜卵于小瓶中。
hCG与垂体促性腺激素的 功能相似,有促进卵巢成熟、 排卵、黄体形成与生长,促使 雄性动物排精等作用,其主要 功能是延长黄体的寿命,维持 妊娠黄体,并使雌激素和孕激 素的合成由卵巢顺利地过渡到 胎盘。
由于hCG具有促进性腺活 动的作用,且在妊娠早期开始 分泌,月经过期15天左右,孕 妇尿中已含有足量的hCG,临 床上即利用这些特点来作早期 妊娠诊断。
方法与步骤
①蟾蜍试验 将受试尿注入雌蟾蜍背部 皮下,8—16小时后蟾蜍
排卵为阳性。
②雄蛙试验 将受试尿注入雄蛙腹部或 背部皮下,2-4小时后, 从其穴肛取出尿液,显微 镜下观察有精虫者为阳性。 ③可注射生理盐水为对照。
方法三
绒毛膜促性腺激素对蛙卵 巢、精巢的作用
目的要求
观察绒毛膜促性腺激 素制剂对蛙卵巢、精 巢的作用、精子的形 态、活动、精原细胞 分裂、精子的变态。
按固定顺序,用吸管吸取卵于 载玻片上,于双目解剖镜下(或 显微镜低倍下)观察蛙卵的发育 时期。 如蛙卵上有尘土,可 将蛙卵吸到手心里,用解剖针 压破胶膜,并在手心里来回拨 动几次,使胶膜与卵分离。然 后用吸管将卵吸回载玻片上观 察。
方法二 蟾蜍的早期胚胎发育
基本原理 原理同上 方法与步骤 用绒毛膜促性腺激素的方 法使卵受精。镜下观察卵 裂至囊胚的发育过程。并 加以描述。
方法与步骤
①从池塘捉一些蝌蚪并将 它们带回实验室。
②将养鱼缸装满池塘水, 并铺入一些石头和水草。
蛙的变态发育过程
孵化后时间 主要形态特点 生态特点
2天
形体小,外鳃 粘固于水
呼吸
草上
3天
形体生长, 附着生活
头部明显
4周
外鳃萎缩,内 浮游生活
鳃呼吸,见到 吞食藻类
后肢芽、尾发
达
孵化后时间 10周 12周
注意事项 实验蛙和对照蛙注射药液
及任氏液时,注入的部位及 容量要相同。
思考题 垂体前叶分泌何种与性
腺有关的激素?有什么生 理作用?
方法二、
孕妇尿对蛙精巢和卵巢的 作用
目的要求
观察孕妇尿中人绒毛膜促 性腺激素对蛙精巢和卵巢 的作用。
基本原理 人绒毛膜促性腺激素hCG
由合体滋养层细胞合成分泌, 其合成活动受细胞滋养层产生 的黄体生成素释放因子所控制, hCG在妊娠第2周开始分泌,第 8周达高峰,第12周以后逐渐 下降。
方法与步骤 1、用注射器将1ml垂体提取
物从蛙的皮下注入腹腔, 记上“实验”标签。 2、取另一只蛙,注入lml任 氏液,记上“对照”标 签。
3.放置约90min后,检查每 只蛙的泄殖腔内是否有卵子。 检查方法是用手握蛙,利用其 腹部外翻压力,使输卵管内少 量卵被推出,在泄殖腔的开口 处便可见到。如没有见到卵子, 可以再放些时间再观察。
二、两栖类早期Βιβλιοθήκη 胎发育 (设计)方法一 青蛙的早期胚胎发育
目的要求 观察青蛙的 早期胚胎发育
基本原理 蛙卵是观察两栖类早期胚胎
发育的好材料。青蛙一般早上6 时产卵,随即受精,2小时后即 分裂为2细胞期,以后每隔1-1.5 小时分裂一次,依次经过2、4, 8、16.32,64……个细胞期,到
下午已达胚囊期。
三、两栖类的变态发育 (设计)
方法一 蛙的变态发育
目的要求
观察蛙的变态发育过程, 明确激素对变态发育的影 响。
基本原理
蝌蚪和蛙成体的差别很大,蝌 蚪生长在水中,用鳃呼吸,无 四肢,有尾;蛙则可以生活在 陆地,用肺呼吸,有四肢、无 尾。这些形态上的改革又是集 中在短时期内完成的,称为变 态发育。
方法与步骤 从池塘中捞取蟾蜍同一大小的 蝌蚪或是捞取蟾蜍卵带回实验 室进行孵化。把蝌蚪分成两组, 每组10个,用等量水分养在相 同的两个大口瓶里。瓶内装水 不要太满,每天换一次水。
将鸡蛋煮熟,取蛋黄捏碎晒 干,制成蛋黄粒,放在干燥 处,每天用几粒蛋黄和煮热 的菜叶碎片来喂养蝌蚪。一 直养到蝌蚪的身体和尾之间 出现肢芽时为止。
从药店购买10片甲状素片, 把药片研碎和等量的面粉混 合均匀加水调成糊状,倒在 玻璃片上阴干,然后将阴干 的混合物捏碎贮藏起来备用。
基本原理 同方法二
方法与步骤 提示: ①腹部皮下注射。 ②人的注射量为5000-10000个 单位,现试剂为200个单位/ml, 用量?
③生理盐水对照。 ④2-4小时镜下观察精子 的活动状态及发育情况并 记录描述。 ⑤排卵排精的时间?
思考题 1、说明实验原理及选择实
验方法的依据。 2、记录实验过程,描述实
一、促性腺激素对蛙 卵巢、精巢的作用 (设计实验)
方法一、 垂体激素对蛙 卵巢的作用
目的要求 观察促性腺激素对
蛙卵巢活动的作用
基本原理 垂体前叶分泌促性腺
激素,能调节雌性机体的 卵巢周期性活动。虽然两 栖类的正常排卵是有季节 性的,但也可以通过体外 注射垂体激素而刺激其排 卵。
动物与器材 成熟的雌蛙或蟾蜍; 2m1注射器2只; 500ml烧杯; 垂体提取液; 任氏液;
16周
主要形态特点 生态特点 前肢长出, 食小植物 尾开始退化 后肢长成, 开始登陆 肺代替鳃, 尾缩短 蝌蚪变成蛙 登陆
③将蝌蚪装入缸内。 ④在以后几周期间观察
并与上表进行对照。
方法二 甲状腺对蝌蚪发育的影响
目的要求
明确甲状腺素对蝌蚪 变态发育的影响。
基本原理
动物的生长发育,除养料,温 度等外界条件外,还受甲状腺, 脑垂体等所分泌的激素影响。 甲状腺分泌的甲状腺素过少, 幼年动物的发育就会受到阻滞, 适量的增加甲状腺素,就能促 进幼年动物的发育。
验结果。 3、简述实验体会。
附:蟾蜍性别鉴定方法(3种) 1、蟾蜍性别的鉴定主要靠
前肢2-4趾侧部的黑疣,此为黑 色的色素突起,雄性蟾蜍有此黑 疣,雌体无。雄性生殖季节在前 肢第4趾下方有类似的椭圆形抱 雌疣。
2、雄性有鸣囊,可鸣叫, 雌蛙则无。
3、把动物提起,前肢作环 抱状者为雄性,前肢呈 垂直状者为雌性。