2014届高考二轮复习课件 第17讲
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4 .植物组织培养技术的理论基础是植物细胞具有全能性,过
程是
脱分化 离体的植物组织、器官或细胞 ――→ 愈伤组织
再分化 ――→ 胚状体或丛芽―→试管苗 。
5.植物体细胞杂交技术中用 纤维素酶和果胶酶 去除细胞壁获 得原生质体;诱导细胞融合的方法有 离心、振动、电激 等
【典例1】
(2013 ·高考全国课标卷 Ⅰ , 40) 【现代生物科技专题】 阅读
如下材料: 材料甲 科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到 了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育 出转基因烟草。
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材料乙
T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码
7.转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加
(2010·江苏,18B)( 8.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 (2010·浙江,4A)( 答案 1.√ 2.× 3.√ 4.√ 5.× 6.× 7.× 8.×
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必考点一 基因工程与蛋白质工程
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(3)材料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期 胚胎移植到__________种的、生理状况相同的另一个雌性动 物体内,使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例
中,兔甲称为__________体,兔乙称为__________体。
4.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
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5.应用 DNA探针技术可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基 因的存在及其完全表达 (2011·四川,5D)( ) ) ) ) 6.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA整合到 细菌DNA上,属于基因工程 (2010·大纲全国Ⅱ,5D)(
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(二)对基因工程基本操作程序的思考 1.目的基因的获取途径
(1) 直接分离 :从自然界已有的物种中分离,如从基因文库
中获取。 (2)人工合成目的基因(常用方法如下): ①化学合成法:已知核苷酸序列的 较小 基因,直接利用 DNA合成仪 用化学方法合成,不需要模板。
②人工合成法:以 RNA 为模板,在 逆转录酶 作用下人
植物细胞 常用方法 农杆菌转化法 、基因 枪法、花粉管通道法 动物细胞 微生物细胞
显微注射 感受态细胞 技术 (用 Ca2+ 处理) 受精卵
受体细胞
受精卵、体细胞
原核细胞
(2)转化的实质:目的基因导入受体细胞染色体基因组中并表 达和发挥作用。
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形成幼苗;②小鼠体细胞经诱导培育成小鼠 (2012·江苏卷,22A、D)( 加倍的细胞 细胞的伤害 (2013·重庆,5B)( (2013·重庆,5A)( (2011·浙江,6B)(
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) ) ) )
2 .在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体
3 .消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对
4.目的基因的检测与鉴定 (1)导入检测: DNA分子 杂交技术(使用DNA探针)。
转录检测:分子杂交技术检测mRNA (2)表达检测 翻译检测:用相应的抗体进行抗原—抗体杂交
(3)个体生物学水平鉴定:如对转基因作物进行抗虫或抗病等 的接种实验。
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是无性繁殖,都可称为克隆,都不涉及减数分裂; (2)均为无菌操作,都需要适宜的温度、pH等条件。
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2.比较下表中的植物体细胞杂交和动物细胞融合 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 (单克隆抗体的制备) 细胞膜的流动性、 细胞增殖 __________ 注射特定抗原的免疫 ①物化法:与促进植 物原生质体融合的方
专题八 现代生物科技专题
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第十七讲 基因工程和细胞工程
考纲点击 1.基因工程:(1)基因工程的诞生(Ⅰ)。(2)基因工程的原理
及技术(Ⅱ)。(3)基因工程的应用 (Ⅱ )。(4)蛋白质工程 (Ⅰ)。2.克隆技 术:(1)植物的组织培养(Ⅱ)。(2)动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)。 (3)细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。
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1.基因工程是通过体外 DNA重组 和 转基因 等技术,赋予生
物以新的遗传特性。目的是按照人们的愿望,进行严格地设
计,创造出更符合人们需要的新的生物类型和 生物产品 。 2.基因工程操作的关键步骤是 基因表达载体的构建 。 3.蛋白质工程是通过基因 修饰 或基因 合成 对现有蛋白质进 行改造,或制造一种新的蛋白质。
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特别提醒
① DNA连接酶连接两个 DNA片段,而 DNA聚合
酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。 ②限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列,并使两条链在
特定的位置断开,而解旋酶是将DNA的两条链间的氢键打开
形成两条单链。
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项目
过程
植物组织培养 离体的植物器官、组 动物胚胎或出生不久的幼 脱分化 愈伤 龄动物的器官或组织―→ 织或细胞 ――→ 原代 培养―→ 传代 培养 组织 再分化 根、芽 _____ _____ ――→ ―→细胞群 ―→植物体
动物细胞培养
能否培养 成个体
不能
能 繁殖 、培育 快速________ 无病毒 植株;生产药 _______ 物;制造人工种子; 培育转基因作物等
识别特定的 作用 核苷酸序 特点 列; (条 在特定位点 件) 上切割 E·coli DNA连接 酶只能连接黏性 末端;T4DNA连 接酶能连接黏性 末端和平末端
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稳定 能在宿主细胞内_____ 存在 并 大量复制 ; 有多个限制酶切割位 点; 特殊的标记基因 具有________________
T4溶菌酶的基因进行改造,使其表达的 T4溶菌酶的第 3位的 异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸
之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。
材料丙 兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将 兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内,成功产出兔甲 的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
(3)同 供
受
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【链接提升】 (一)基因工程的基本工具 限制酶 DNA连接酶 载体
目的基 拼接 DNA片段 , 携带目的基因进入受体 切割______ 作用 因和载体 __________ 形成重组DNA 细胞
作用 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间 磷酸二酯键 部位 的___________
物理方法或 聚乙二醇
等化学方法。
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6.动物细胞工程常用的技术手段: 动物细胞培养 细胞核移植技术、 动物细胞融合 等。
、动物
7 .动物细胞培养过程:取动物组织块 ― →分散组织细胞 ( 用 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理)―→配制细胞悬液―→____ 原代 ______________________
培养―→ 传代 培养。
8.动物细胞融合技术中涉及的促融方法有 聚乙二醇 (化学 方法)、 灭活的病毒 (生物方法)或 电激 (物理方法)等。 9.杂交瘤细胞既能 无限增殖 ,又能产生某种特异性抗体(单 克隆抗体)。
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1 .下列事实能体现细胞全能性的是:①棉花根尖细胞经诱导
答案 法
(1)目的基因 DNA分子杂交
限制酶和DNA连接酶 愈伤组织
(2)农杆菌转化
(3)标记基因、启动子、终止子 细胞的全能性
(4)脱分化和再分化
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必考点二 克隆技术(细胞工程)
1.比较下表中的动物细胞培养和植物组织培养 项目 动物细胞培养 植物组织培养
是否插入了目的基因,需要采用________技术。
(3)除a外基因表达载体中还必须包含的部分是________。 (4)由外植体培养为转基因植株的③、④过程为________,图 中b代表________。该过程的理论依据是________。
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解析 读懂题干提供的材料信息,从题中的设问入手,结合 在教材中所学的基因工程、蛋白质工程、胚胎工程等相关知 识作答。
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答案
(1) 显微注射
限制酶
DNA 连接酶
农杆菌可感染
植物,将目的基因转移到受体细胞中 (2)蛋白质 现有的蛋白质 新蛋白质 氨基酸
大规模生产有重要价值的 生物制品 ,如病毒疫苗、 _________ 应用举例 干扰素、单克隆抗体等; 皮肤 移植;检测______ 有毒物 ______ 质的毒性 等 __________
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特别提醒
(1)两种技术手段培养过程中都进行有丝分裂,都
工合成。 ③利用 PCR 技术扩增。
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2.基因表达载体的构建——重组质粒的构建
标记基因 (1)表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+________
+复制原点。
(2)启动子和终止子:启动子是 RNA聚合酶 结合位点,启动
转录;终止子是 终止转录 的位点。
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回答下列问题: (1)材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的 受精卵中常用__________法。构建基因表达载体常用的工具 酶有__________和____________。在培育转基因植物时,常
用农杆菌转化法,农杆菌的作用是___________________。
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思维激活 1.转基因抗虫棉的培育涉及到哪些生物工程? 提示 基因工程、植物组织培养。
2 .基因工程的基本操作步骤中哪几步用到了限制酶,又有哪
几步涉及碱基互补配对? 提示 第一步和第二步用到了限制酶;第一、二、四步涉及 碱基互补配对。
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【应用1】 (2013·泰安5月模考)基因工程打破了物种之间交流的界限, 为花卉育种提供了新的技术保障。下图为花卉育种的过程 (字母代表相应的物质或结构,数字代表过程或方法)。
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(1)花卉基因工程可细分为花色基因工程,花形基因工程、香 味基因工程等,不同的基因工程所需要获取的 ________ 不 同,①过程需要的酶有________。 (2) ②所常用的方法是 ________ ,检测转基因生物的 DNA 上
无菌;用 胰蛋白酶 处理, 前处理 使组织细胞相互分散开
无菌、离体
葡萄糖 、氨基酸、无机盐、 矿质元素、蔗糖 、 培养基 促生长因子、微量元素、动 维生素、植物 成分 激素 等 物 血清 等 _____ 培养基 状态
液体 培养基
固体 培养基
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(2)材料乙属于______________工程范畴。该工程是指以分子 生物学相 关理论为 基础 ,通 过基因修 饰或基因合成 , 对 ____________进行改造,或制造一种____________的技术。 在该实例中,引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶
肽链的______________序列发生了改变。
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(3)基因表达载体的构建过程:
(4)基因表达载体的构建必须用到同一种限制酶吗?
答案 酶。 不一定。只要切下的末端相同,也可使用不同的限制
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3.将目的基因导入受体细胞——转化
(1)导入方法因受体细胞的种类不同而异