核型分析

生命科学学院实验报告书

一、实验背景

1．学习和掌握核型分析的方法。

2．进一步了解染色体形态特征、在细胞分裂中的联会形象以及染色体组、核型及染色体数目、结构变异与生物进化的关系。

二、材料和方法

1. 大蒜

2. 实验器具：尺子，小剪刀，镊子，培养皿，培养箱，水浴锅，EP管，载玻片，盖玻片，滤纸，等。

3. 试剂：固定液（甲醇：冰乙酸=3:1，现用现配）、预处理液：8-羟基喹啉（0.002mol/L ）、保存液：70%乙醇、解离液：1 mol/L HCl、染色液：卡宝品红

4. 实验方法

4.1 大蒜根尖获得

大蒜水中浸泡、蒜瓣去皮后在培养皿中水培，每天换一次水。当根尖长到5-15mm时，在9:00-10:00或14:00-15:00点剪下在预处理液中3-6h，水洗3次，去除预处理液，用固定液浸泡4-24h。95%乙醇洗去预处理液，保存于70%乙醇中。

4.2 染色体中期相的获得

①压片：取除去乙醇的根尖于载玻片上，切去伸长区，将分生组织纵剖后，卡宝品红染色1-5min，盖盖玻片，压片。

②显微镜下找寻染色体集中而不重叠，主、次缢痕和随体清晰，染色体长度适中而不弯曲的，染色体数正确的中期相，在40×物镜下拍照，放大，成染色体图片。

4.3 染色体测量

①初步编号：目测相片上每条染色体长度，按长短顺序初步编号，写在每条染色体相应位置；

②测量与记录：用尺子逐个测量每条染色体长度，换算出各条染色体的相对长度、臂比及着丝粒位置，有随体的染色体。将测量和计算的数据分别记录。

4.4 排列核型图

剪贴配对：按上述标准及计算结果，将照片上的染色体剪贴配对。排列好后进行分析比较，确定其核型是否正常。

粘贴：将剪下的每条染色体图按照着丝粒排在同一水平线上，短臂在上，长臂在下，按短臂长度从长到短排列的原则粘贴。

绘制核型模式图：用绘图纸和坐标纸绘制核型模式图。横坐标为染色体序号，纵坐标为染色

体的相对长度。

三、实验结果与讨论

大麦根尖有丝分裂中期染色体原图

大麦根尖有丝分裂中期染色体处理图（11和13标反了）

四、结论与心得

大麦有14条染色体，且均为中部着丝点染色体。其中11,13,3,8染色体上有随体。