生化分生实验练习题讲解
生化实验试题及答案
生化实验试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 以下哪种物质不是蛋白质的组成成分？A. 氨基酸B. 核苷酸C. 肽键D. 碳链答案：B2. 酶促反应中，酶的作用是：A. 降低反应的活化能B. 提高反应的活化能C. 改变反应的平衡位置D. 增加反应物的浓度答案：A3. DNA复制过程中，互补配对的碱基是：A. A-TB. G-CC. A-GD. T-C答案：B4. 下列哪种物质是细胞膜的主要成分？A. 蛋白质B. 脂质C. 碳水化合物D. 核酸答案：B5. 以下哪种方法可用于测定蛋白质的浓度？A. 紫外吸收法B. 比色法C. 电泳法D. 离心法答案：A二、填空题（每空1分，共10分）1. 细胞内负责合成蛋白质的细胞器是________。
答案：核糖体2. 酶的活性中心通常由________组成。
答案：氨基酸残基3. 真核细胞中，DNA复制主要发生在________。
答案：细胞核4. 细胞膜上的脂质主要是________。
答案：磷脂5. 蛋白质的一级结构是由________连接而成的。
答案：肽键三、简答题（每题5分，共20分）1. 简述DNA复制的过程。
答案：DNA复制是一个涉及解旋、合成和校对的复杂过程。
首先，DNA 双螺旋被解旋酶解旋，形成复制叉。
接着，DNA聚合酶在模板链上添加互补碱基，形成新的互补链。
同时，DNA连接酶将新合成的片段连接起来，形成完整的DNA分子。
2. 描述酶的专一性。
答案：酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类化学反应的特性。
这主要是因为酶的活性中心具有特定的形状和化学性质，能够与特定的底物结合，从而催化特定的反应。
3. 解释什么是基因表达。
答案：基因表达是指基因信息被转录成mRNA，然后翻译成蛋白质的过程。
这个过程包括转录和翻译两个主要步骤，是基因信息从DNA到蛋白质的传递过程。
4. 描述细胞凋亡的过程。
答案：细胞凋亡是一种程序化的细胞死亡过程，由一系列基因控制。
它包括细胞膜的凋亡信号接收、凋亡信号的传导、核DNA的断裂和细胞质的凝缩，最终导致细胞的分解和死亡。
生化和分子实验技能考试内容(最终)
4、研钵内不能有水
5、研磨操作应快速
6、研磨后样品粉末迅速放置到容器
电泳技术
SDS-PAGE电泳
1、凝胶板的洗涤（次序、干净面的保证）
2、凝胶板的安装
3、电泳槽的安装（板的上下）
4、如何正确用琼脂封底？
5、胶配置的注意事项（冰箱保存、顺序、凝固温度）
6、灌胶
7、电泳液添加的位置
8、样品的制备（2×溶液的使用、பைடு நூலகம்何沸水浴）
6、称量完毕后，应把砝码放回砝码盒中，把游码移回零处，使天平恢复原来的状态。
容量瓶使用
容量瓶使用
1、使用前要检验是否漏水。程序是：加水→倒立，观察→瓶塞旋转180°→倒立，观察。
2、容量瓶不能用于溶解溶质，更不能用玻璃棒搅拌。因此溶质要先在烧杯内溶解，然后再转移到容量瓶中。
3、不能将热的溶液转移到容量瓶中，更不能给容量瓶加热。如果溶质在溶解时是放热的，则须待溶液冷却后再移液。
2、距离薄板下沿2cm
3、少量多次点(1-5)，每点一次用吹风机冷风吹干
4、几个不同的样要在同一直线上
展层
1、展层剂的选择
2、层析缸的使用
3、展层剂的界面要低于点样线
Rf测定
1、Rf值为原点到层析点中心的距离（r）与原点到溶剂前沿的距离（R）的比值
溶液配制
缓冲液的配制
1、配方
2、容量瓶的使用
3、配制方法
转化技术
热激处理
1、热激处理的时间
2、热激处理的温度
特别要控制热激时间（42℃，90 s）
超净台的使用
1、使用前应开启风机
2、用75%的酒精擦拭台面。注意有机玻璃面不能用酒精擦
3、紫外灯照射30分钟，然后关闭紫外灯。
生化分离技术 考试复习题库(含详细答案)
《生化分离》考试复习题库一、选择题1.下列不是超临界萃取工艺的方法是（）。
A 等温法B 等压法C 吸附法D 交换法2.影响絮凝效果的因素有很多，但不包括（）。
A 絮凝剂的浓度B 溶液pH值C 溶液含氧量D 搅拌速度和时间3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱，在化合物分离中，先被洗脱下来的为（）。
A 杂质B 小分子化合物C 大分子化合物D 两者同时下来4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（）。
A 增大B 减小C 先增大，后减小D 先减小，后增大5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是（）。
A 增大滤过面积B 降低料液温度C 加压或减压D 加入助滤剂6.下列方法中，哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法A 调节等电点B 降低温度C 添加表面活性物质D 添加助滤剂7.助滤剂应具有以下性质（）A 颗粒均匀、柔软、可压缩B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩C 粒度分布广、坚硬、不可压缩D 颗粒均匀、可压缩、易变形8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法，不包括（）A 沉淀法B 变性法C 吸附法D 萃取法9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是（）A 样品可被分离成一系列的样品组分区带B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质C 离心时间越长越好D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。
以下不属于助滤剂的是（）A 氯化钙B 纤维素C 炭粒D 硅藻土11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类，下列不属于机械法的是（）A 加入金属螯合剂B 高压匀浆法C 超声破碎法D 珠磨法12.萃取操作是利用原料液中各组分（）的差异实现分离的操作。
A 溶剂中的溶解度B 沸点C 挥发度D 密度13.两相溶剂萃取法的原理为：A 根据物质在两相溶剂中的分配系数不同B 根据物质的熔点不同C 根据物质的沸点不同D 根据物质的类型不同14.下列溶液不是双水相的是（）。
A PEG/葡聚糖B PEG/磷酸盐C PEG/硫酸铵D 磷酸盐/硫酸铵15.在萃取操作中，分离系数越小，组分（）分离。
《生化分离工程》思考题及答案
《生化分离工程》思量题及答案第一章绪论1、何为生化分离技术？其主要研究那些内容？生化分离技术是指从动植物组织培养液和微生物发酵液中分离、纯化生物产品的过程中所采用的方法和手段的总称。
2、生化分离的普通步骤包括哪些环节及技术？普通说来，生化分离过程主要包括 4 个方面：①原料液的预处理和固液分离，常用加热、调 PH、凝结和絮凝等方法；②初步纯化(提取)，常用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作；③高度纯化(精制)，常选用色谱分离技术；④成品加工，有浓缩、结晶和干燥等技术。
3、生化分离工程有那些特点，及其重要性？特点： 1、目的产物在初始物料(发酵液)中的含量低； 2、培养液是多组分的混合物，除少量产物外，还有大量的细胞及碎片、其他代谢物(几百上千种)、培养基成份、无机盐等； 3、生化产物的稳定性低，易变质、易失活、易变性，对温度、pH 值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面张力等非常敏感； 4、对最终产品的质量要求高重要性：生物技术产品普通存在于一个复杂的多相体系中。
惟有经过分离和纯化等下游加工过程，才干制得符合使用要求的产品。
因此产品的分离纯化是生物技术工业化的必需手段。
在生物产品的开发研究中，分离过程的费用占全部研究费用的 50％以上；在产品的成本构成中，分离与纯化部份占总成本的 40~80％；精细、药用产品的比例更高达 70~90％。
显然开辟新的分离和纯化工艺是提高经济效益或者减少投资的重要途径。
5、为何生物技术领域中往往浮现“丰产不丰收”的现象？第二章预处理、过滤和细胞破碎1、发酵液预处理的目的是什么？主要有那几种方法？目的：改变发酵液的物理性质，加快悬浮液中固形物沉降的速率；出去大部份可溶性杂质，并尽可能使产物转入便于以后处理的相中(多数是液相)，以便于固液分离及后提取工序的顺利进行。
：①加热法。
升高温度可有效降低液体粘度，从而提高过滤速率，常用于粘度随温度变化较大的流体。
控制适当温度和受热时间，能使蛋白质凝结形成较大颗粒，进一步改善发酵液的过滤特性。
生化与分子生物学实验指导
⽣化与分⼦⽣物学实验指导⽣化与分⼦⽣物学实验指导-（)————————————————————————————————作者:————————————————————————————————⽇期:实验⼀氨基酸纸层析法⼀、实验⽬的通过氨基酸的分离，了解层析法的基本原理和操作⽅法。
⼆、实验原理纸层析法(ｐａp ｅｒ c ｈro ｍａt ｏgr ａphy ）是⽣物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常⽤技术,可⽤于蛋⽩质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。
纸层析法⼜称纸⾊谱法,是⽤滤纸为⽀持物,所⽤展层溶剂⼤多由⽔和有机溶剂组成,滤纸纤维与⽔的亲和⼒强,与有机溶剂的亲和⼒弱,因此在展层时，纸纤维上吸附的⽔分是固定相,有机溶剂是流动相。
溶剂由下向上移动的,称上⾏法；由上向下移动的,称下⾏法。
将样品点在滤纸上(此点称为原点),进⾏展层，样品中的各种氨基酸在两相溶剂中不断进⾏分配。
由于它们的分配系数不同,不同氨基酸随流动相移动的速率就不同,于是就将这些氨基酸分离开来，形成距原点距离不等的层析点。
溶质在滤纸上的移动速率⽤Rf 值表⽰：在⼀定条件下某种物质的Ｒf 值是常数。
Ｒf 值的⼤⼩与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关。
只要条件(如温度、展层溶剂的组成）不变,Rf 值是常数,故可根据Ｒf 值作定性判断。
样品中如有多种氨基酸，其中某些氨基酸的R ｆ值相同或相近,此时如只⽤⼀种溶剂展层,就不能将它们分开。
为此，当⽤⼀种溶剂展层后，将滤纸转动90度,再⽤另⼀溶剂展层,从⽽达到分离⽬的,这种⽅法称为双向纸层析法。
氨基酸⽆⾊,可利⽤茚三酮显⾊反应,将氨基酸层析点显⾊作定性、定量⽤。
所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽与茚三酮反应都产⽣蓝紫⾊物质,只有脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产⽣(亮)黄⾊物质。
三、药品器材1器材层析滤纸（新华1号)、喷雾器、剪⼑、层析缸、⽑细管、电吹风、刻度尺、铅笔。
R ｆ=原点到层析斑点中⼼的距离原点到溶剂前沿的距离2试剂(1)氨基酸溶液:赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸溶液以及他们的混合溶液(各组分浓度0．5％)。
生化实验解析
生化实验小题纲（整理b y C Z J）生物化学的基本操作判断玻璃仪器洗涤干净的标准是什么？答：器壁内外既不聚成水滴也不成股流下。
若容器内附有油污，应怎样洗涤？答：若仍不干净附有油污等，则须于干后放入铬酸洗液内浸泡数小时，然后倒净（或捞出）洗液，用自来水充分冲洗至水不显黄色后再冲几次，最后用少量蒸馏水冲洗2~3次晾干备用。
玻璃仪器的一般洗涤方法答：一般非计量玻璃仪器或粗容量仪器，可直接用毛刷蘸清洗剂刷洗，然后用自来水冲洗，直至器壁内外既不聚成水滴也不成股流下即可。
最后用少量蒸馏水冲洗内壁2~3次，倒置晾干即可。
玻璃仪器干燥时，若不急用应怎样干燥，若急用应怎么办？容量玻璃仪器（如容量瓶、吸量管、滴定管）以及烧结、结构复杂的玻璃仪器，能否烘烤？若不能，该怎么办？答：一般地说，洗净后的玻璃仪器如不急用应倒放在晾架上令其自然干燥。
若用急用可放在烘烤箱中110°C~120°C烤干，但容量玻璃仪器，如容量瓶、吸量管、滴定管以及烧结、结构复杂的玻璃仪器等，严禁烘烤，此类仪器，如急用可采用水泵抽气法干燥。
硝酸纤维素的塑料离心管加热时会发生爆炸，所以决不能放在烘箱中干燥，只能用冷风吹干。
请准确量取一定量液体从一个器皿转移至另一器皿中。
答：①刻度吸管：Ⅰ.执管：将中指和拇指拿住吸量管上口以食指控制流速，刻度数字应朝向操作者。
Ⅱ.取液：把吸量管插入液体内（切忌悬空，以免液体吸入洗耳球内），用洗耳球吸取液体至所取液量的刻度上端1~2c m处，然后迅速用食指按紧吸量管上口，使管内液体不再流出。
Ⅲ.调准刻度：将已吸足的液体的吸量管提出液面，用滤纸片抹干管尖外壁液体，然后垂直提起吸量管于供器内口（管尖悬离供器内液面）。
用食指控制液流至所需刻度，此时液体凹面、视线和刻度应在同一水平面上，并立即按紧吸量管上口。
Ⅳ.放液：放松食指，让液体自然流入容器内（如移液管标有“吹”字，则应将管口残余液滴吹入受器内），此时管尖应接触受器内壁，但不应插入受器内的原有液体之中，以免污染吸量管。
生化分离 实验题目及答案
1. 在咖啡因的提取实验中，为什么加CaO?答:吸取水分，防止咖啡因蒸汽溶于水；中和鞣酸；2.索氏提取装置有哪几部分组成？（画图）3. 咖啡因升华过程中用到了什么？咖啡因的升华结晶应注意哪些操作？答：用升华装置包括：蒸发皿、电热套、漏斗（滤纸、牙签、棉花）注意：1.要控制好温度，始终都需用小火间接加热，如温度太高，会使产物发黄。
2. 漏斗颈部棉花松紧适宜。
3.滤纸的孔数适宜，也不能将滤纸放反了。
4.若漏斗上有水蒸气应用滤纸擦干4. 茶叶咖啡因的提取实验中，浓缩去除乙醇的过程中用到了哪些设备？答：旋转蒸发器、水浴锅、循环水式真空泵等5.动物脏器DNA提取实验中，蛋白质是如何去除的？答：用含辛醇或异戊醇的氯仿振荡核蛋白溶液，使其乳化，然后离心除去变性蛋白质，6.动物脏器DNA提取实验中,如何鉴定DNA的纯度？答：DNA在紫外区有强吸收，最大吸收波长为260nm，而Pro 在280nm处有强吸收，若其中含有Pro，则A260 /A280小于1.6，若含有RNA，则大于2.0，纯的DNA溶液为1.8左右，据此可判断DNA纯度。
7.动物脏器DNA提取实验中,RNA是怎样去除的？答：在浓NaCl溶液（1～2mol/L）中，DNA核蛋白的溶解度很大，RNA核蛋白的溶解度很小；而在稀NaCl溶液（0.14mol/L）中，DNA核蛋白的溶解度很小，RNA核蛋白的溶解度很大。
将提取的细胞核物质先溶解与浓NaCl溶液中充分搅拌一定时间后，加水稀释，降低DNA溶解度使DNA沉淀出来，倒去上清即除去RNA。
8.动物脏器DNA提取实验中,氯仿—异戊醇的作用是什么？离心后分哪几层？答：氯仿—异戊醇的作用使核蛋白乳化变性分三层：上层为DNA和DNA核蛋白的水层中间层为变性蛋白凝胶下层为氯仿-异戊醇的有机溶剂层9.动物脏器DNA提取实验中,为什么用0.1MNacl—柠檬酸间歇式的搅拌猪肝？答：与细胞等渗溶液，在搅碎时，保持细胞内外渗透压，防止细胞核破碎；间歇性搅拌是为了避免搅碎细胞核（剪切力）10.离子交换层析分离鸡卵粘蛋白实验（上半部），粗提过程中用哪种试剂去除杂蛋白？用哪种试剂沉淀得到粗黏蛋白？答：10%TCA去除杂蛋白预冷丙酮沉淀黏蛋白以得粗提取物11.鸡卵黏蛋白离子交换层析实验中，所用的树脂是哪种？树脂为什么预处理？如何预处理？答：1.DEAE—纤维素树脂2. ①去除交换剂中存在的杂离子②使其充分溶胀3. DEAE—纤维素→碱性溶液中浸泡一定时间→洗至中性→酸性溶液中浸泡一定时间→水洗至中性→保存在缓冲溶液中备用补充：对于OH型：先碱洗，再洗至中性，再酸洗，再洗至中性。
【2019年整理】生化分离每章练习题
第一章绪论1．生物分离工程在生物技术中的地位？2、生物分离工程的特点是什么？3、生物分离过程的一般流程？4、不同生物物质分离提取常用的单元操作？5. 生化分离和化工分离的主要区别是什么?6.对于氨基酸类物质通常采用哪些分离纯化方法？并说明理由。
7.对于蛋白质类物质通常采用哪些分离纯化方法？并说明理由。
8.提取与精制技术在现代生物化学工程中占有十分重要的地位，与传统化学化工中的分离过程相比，阐述生物技术产品对提取与精制技术的特殊要求及近几年来发展起来的一些新方法新技术。
第二章．发酵液预处理、细胞破碎及固液分离一、名词解释1. 凝聚和絮凝答：（1）凝聚：在中性盐的作用下，可以使菌体表面双电位层排斥，电位下降（即中和沉淀物质的电荷）。
（2）凝絮：向含菌的料液中加入高分子絮凝剂，可使菌体之间产生架桥作用而产生较大的凝聚颗粒。
2．渗透压冲击法破碎细胞答：是较温和的一种破碎细胞的方法，将细胞放在高渗透压的介质中，达到平衡后介质突然被稀释或者将细胞转入水中或缓冲液中，由于渗透压的突然变化，水迅速进入细胞内，引起细胞壁的破裂。
渗透压冲击法仅对细胞壁较脆弱的或者细胞壁预先用酶处理的或合成受抑制而强度减弱时才是适合的。
3．高压匀浆细胞破碎法答：细胞悬浮液在高压作用下，从阀座与阀之间的环隙高速喷出后撞击到碰撞环上，细胞受到高速撞击作用后，急剧释放到低压环境中，从而在撞击力和剪切力等综合作用下破碎。
此法不适用于团状或丝状真菌、较小的革兰氏阳性菌及含有包含体的基因工程菌。
适用于酵母菌和大多数细菌细胞的破碎。
4．超声波破碎法答：细胞的破碎是由于超声波的空穴作用，从而产生一个极为强烈的冲击波压力，由它引起的粘滞性漩涡在介质的悬浮细胞上造成了剪切应力，促使细胞内液体发生流动，从而使细胞破碎。
适用于多数微生物细胞的破碎。
5．差速离心答：主要采用逐渐提高离心速度的方法分离不同大小细胞器的方法。
二、单项选择题1. 去除高价金属离子Mg2+，加入( B ) 试剂。
《生化分离工程》思考题及习题
《生化分离工程》思考题及习题第一章绪论1、何为生化分离工程bioseparation engineering/下游加工过程, biotechnology？其主要研究那些内容？2、生化分离技术依据的分离原理有哪些？3、生化分离工程有那些特点？其包括那几种主要分离方法？4、何为传质分离过程？5、简述生化分离工程的发展趋势。
6、亲和技术目前已衍生出那些子代分离技术？7、生化反应与生化分离耦合技术有那些特点？8、为何在生物技术领域中往往出现“丰产不丰收”的现象？9、生物产品与普通化工产品分离过程有何不同？10、设计生物产品的分离工艺应考虑哪些因素？11、初步纯化与高度纯化分离效果有何不同？12、如何除去蛋白质溶液中的热原质？13、生物分离为何主张采用集成化技术？14、若每一步纯化产物得率为90%，共6步纯化得到符合要求产品，其总收率是多少？第二章预处理与固-液分离法1、发酵液预处理的目的是什么？主要有那几种方法？2、何谓絮凝？何谓凝聚？各自作用机理是什么？3、絮凝剂可分为那三种？有那些因素影响絮凝过程？4、在生化工业中常用的过滤方式那两种？各自有何特点？5、离心分离分那两大类？各自有何特点及用途？常用离心法有那几种？6、何谓密度梯度离心？其工作原理是什么？7、如何使用助滤剂?8、错流微滤与传统过滤相比有何优点？第三章细胞破碎法1、细菌细胞壁与真菌（酵母）细胞壁在组成上有何区别？2、细胞破碎主要有那几种方法？3、机械法细胞破碎方法非机械破碎方法相比有何特点？4、何谓脂溶破碎法？其原理是什么？包括那几种？5、酶法细胞破碎常用那几种酶类？6、包涵体是如何产生的?如何使重组蛋白复性?7、如何测定细胞破碎程度？第四章沉淀法1.理解概念：盐溶，盐析2.常用的沉淀法有哪几种？3.生产中常用的盐析剂有哪些？其选择依据是什么？4.何谓分步盐析沉淀？5.有机沉淀法与盐析沉淀法相比有何优缺点？第五章溶剂萃取法1、何谓溶剂萃取？其分配定律的适用条件是什么？2、在溶剂萃取过程中pH值是如何影响弱电解质的提取？3、何谓乳化液？乳化液稳定的条件是什么？常用去乳化方法有那些？4、在发酵工业中，去乳化有何实际意义？5、理解概念：HLB，分配系数，分离因子，介电常数，带溶剂6、生物物质的萃取与传统的萃取相比有哪些不同点？7、pH 对弱电解质的萃取效率有何影响？8、发酵液乳化现象是如何产生的？对分离纯化产生何影响? 如何有效消除乳化现象？9、什么叫超临界流体？10、为何在临界区附近，稍微改变流体的压力和温度，都会引起流体密度的大副变化？11、要提高超临界流体萃取的效率，可以考虑哪些方面？12、名词解释：胶束/反胶束13、影响反胶束萃取蛋白质的因素有哪些？第六章双水相萃取1、何谓双水相萃取？2、双水相体系可分为那几类？目前常用的体系有那两种？3、为什么说双水相萃取适用于生物活性大分子物质分离？4、影响双水相萃取的因素有那些？当电解质存在，PH是如何影响双水相萃取的？5、用双水相萃取细胞破碎（匀浆）液时，一般是把目标产物分布在上相，而细胞碎片、杂蛋白等杂质分布在下相，为什么？6、何谓双水相亲和萃取？第七章膜分离法1、何谓膜分离？主要有那几种膜分离方法？2、膜在结构上可分为那几种？膜材料主要用什么？3、膜组件在形式上有那几种？各自有何优缺点？4、为何说非对称性膜的发明为膜分离走向工业化奠定了基础？5、简述微滤、超滤膜、反渗透膜在膜材料、结构、性能及其应用等方面的异同点6、膜分离的表征参数有那些？何谓膜截留分子量？7、何谓浓差极化现象？它是如何影响膜分离的？减少浓差极化现象的措施？8、膜的清洗及保存方法有那几种？9、膜分离设备按膜组件形式可分为几种？相比较的优缺点？10、反渗透与超滤在分离机理上有何区别？11、超滤、反渗透膜分离主要有那些方面应用？12、比较膜分离技术与亲和层析技术的特点13、亲和剂由哪几部分组成？14、简述亲和膜分离的过程？15、液膜由哪几部分组成？各自的功能是什么？17、影响液膜稳定性的因素有哪些？第八章吸附法1、吸附作用机理是什么？2、吸附法有几种？各自有何特点？3、大孔网状聚合物吸附与活性炭吸附剂相比有何优缺点？4、影响吸附过程的因素有那些？5、何谓穿透曲线？6、膨胀床吸附的特点是什么？第九章离子交换法1、何谓离子交换法?一般可分为那几种?2、离子交换树脂的结构、组成？按活性基团不同可分为那几大类？3、离子交换树脂的命名法则是什么？4、离子交换树脂有那些理化性能指标？5、何谓真密度、湿真密度？6、大孔径离子交换树脂有那些特点？7、pH值是如何影响离子交换分离的？8、普通型离子交换树脂为何不能用来分离提取蛋白质分子？9、各类离子交换树脂的洗涤、再生条件是什么？10、软水、去离子水的制备工艺路线？11、对生物大分子物质，离子交换剂是如何选择的？12、理解概念：交换容量，工作交换容量，膨胀度，湿真密度，交联度13、为何阴树脂交换容量用动态法测定而阳树脂用静态法测定？第十章色层分离1、何谓色层分离法？可分为那几大类？2、何谓保留值、分配容量K、分离度？3、色层图中分离度有那几种表示方法？4、层析剂有那几种？各自有何特点？5、何谓亲和色层分离法？亲和力的本质是什么？亲和色层中常用的亲和关系有那几种？6、何谓疏水作用层析？其最大的特点是什么？7、柱层析法与固定床吸附法有何异同点？8、苯硼酸亲和介质用于分离哪些目标物？原理是什么?9、凝胶层析分离机理是什么?10、亲和层析的机理是什么？11、配基偶联后残留电荷对分离有何影响？如何消除？12、小分子配基为何需插入手臂？13、何谓色层分离法？可分为那几大类？14、简述柱层析系统的工艺流程。
生化测验及部分问题详解
基础生物化学测验一（核酸、蛋白和酶）一、符号（写出下列英文缩写的中文名称）m62Am IMP cGMP Ψ Trp FH4 FMN TPP DNFB CoI二、名词解释三链DNA DNA减色效应 DNA 熔解温度比活力盐溶和盐析 Northern 杂交亚基酶的活性中心必需氨基酸诱导契合学说同工酶结构域三、选择1．下列哪种DNA 的二级结构不是右手螺旋（）A．A 型DNA B．B 型DNA C．Z 型DNA D．H 型DNA2．下面哪种细胞器中不含遗传物质（）A．细胞核 B．质网 C．线粒体 D．叶绿体3．下面哪种因素能够促进DNA 解开双螺旋（）A．增加G/C 比例 B．增加核苷酸链长度 C．降低温度 D．去除溶液中的离子 4．下列哪种RNA 中富含稀有碱基（）A．mRNA B．tRNA C．rRNA D．snRNA5．原核生物不含哪种rRNA（）A．5S B．5.8S C．16S D．23S6．酶促反应速度要达到最大Vmax 的1/3，[S]应为Km 的多少倍（）A．1/2 B．1/3 C．2 D．37．镰刀型贫血病是由于血红蛋白β 亚基上的Glu被（）取代A．Ser B．His C．Asp D．Val8．丝心蛋白和角蛋白中富含哪种二级结构单元（）A．α-螺旋和β-折叠 B．β-折叠和α-螺旋 C．α-螺旋和β-转角D．β-折叠和β-转角 9．转氨酶的辅助因子是（）A．TPP B．生物素 C．磷酸吡哆醛 D．FAD10．非竞争性抑制对酶促动力学参数的影响是（）A．Vmax 不变，Km 变大 B．Vmax 不变，Km 变小C．Vmax 变小，Km 不变 D．Vmax 变大，Km 不变11．1 克蛋白氮含量为0.12 克的酶制剂的纯度为（）A．70% B．75% C．85% D．90%12．蛋白的紫外吸收能力与下面哪种氨基酸无关（）A．Phe B．Trp C．Tyr D．Pro13．有机磷杀虫剂和磺胺类抗生素的作用机理是（）A．不可逆抑制和竞争性抑制 B．非竞争性抑制和竞争性抑制C．不可逆抑制和反竞争性抑制 D．不可逆抑制和非竞争性抑制14．构成蛋白的20 种常见氨基酸中茚三酮反应显色明显不同于其他氨基酸的是（）A．Phe B．Trp C．Pro D．His15．以1 分钟生成1µmol 产物为一个活力单位，25mg 酶蛋白催化足量底物反应20 分钟产生400µmol 产物，则其比活力为（）U/gA．20 B．8 C．2000 D．80016．关于酶原激活描述错误的是（）A．蛋白一级结构不发生改变 B．蛋白的高级结构改变C．保护产生蛋白的细胞 D．蛋白的生物学活性发生改变17．下列哪种组分没有紫外吸收能力（）A．Pro B．DNA C．mRNA D．Phe18．下列哪种蛋白沉淀试剂可以不破坏蛋白的生物学活性（）A．氯化汞 B．硫酸铵 C．三氯乙酸 D．苯酚 19．下列因素哪种不是导致酶的催化作用具有高效性的原因（）A．邻近效应 B．诱导契合作用 C．有亲水反应中心 D．共价催化20．下面哪种氨基酸最容易出现α-螺旋末端（）A．Leu B．Trp C．His D．Pro21．核酸变性不会破坏下列哪种化学键（）A．氢键 B．德华力 C．疏水作用 D．C-N 糖苷键22．下列对tRNA描述错误的是（）A．有3′特征结构 B．稀有碱基多 C．含量比mRNA 少 D．种类比mRNA 少23．某极性氨基酸的pK1′=2.36, pK2′=8.24,pK R′=3.84，则其等电点为（）A．7.22 B．3.10 C．5.30 D．6.0424．糖苷酶按照系统分类法属于哪一类（）A．氧化还原酶 B．裂合酶 C．水解酶 D．转移酶25．下面哪种学说与酶降低反应活化能的机理无关（）A．中间产物学说 B．化学渗透学说 C．过渡态理论 D．稳态理论四、判断对错1．T 是构成构成DNA 特有的基本碱基，因此不可能出现在RNA 分子中。
生化课后题目及问题详解
2 蛋白质化学2．测得一种血红蛋白含铁0.426%，计算其最低相对分子质量。
一种纯酶按质量计算含亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%，问其最低相对分子质量是多少？解答：〔1〕血红蛋白：55.8100100131000.426⨯⨯=铁的相对原子质量最低相对分子质量＝＝铁的百分含量〔2〕酶：因为亮氨酸和异亮氨酸的相对分子质量相等，所以亮氨酸和异亮氨酸的残基数之比为：1.65%:2.48%=2:3，因此，该酶分子中至少含有2个亮氨酸，3个异亮氨酸。
()r 2131.11100159001.65M ⨯⨯=≈最低()r 3131.11100159002.48M ⨯⨯=≈最低3．指出下面pH 条件下，各蛋白质在电场中向哪个方向移动，即正极，负极，还是保持原点？〔1〕胃蛋白酶〔pI 1.0〕，在pH 5.0；〔2〕血清清蛋白〔pI 4.9〕，在pH 6.0；〔3〕α-脂蛋白〔pI 5.8〕，在pHpH 9.0；解答：〔1〕胃蛋白酶pI 1.0＜环境pH 5.0，带负电荷，向正极移动；〔2〕血清清蛋白pI 4.9＜环境pH 6.0，带负电荷，向正极移动；〔3〕α-脂蛋白pI 5.8＞环境pH 5.0，带正电荷，向负极移动；α-脂蛋白pI 5.8＜环境pH 9.0，带负电荷，向正极移动。
6．由如下信息求八肽的序列。
〔1〕酸水解得 Ala ，Arg ，Leu ，Met ，Phe ，Thr ，2Val 。
〔2〕Sanger 试剂处理得DNP-Ala 。
〔3〕胰蛋白酶处理得Ala ，Arg ，Thr 和 Leu ，Met ，Phe ，2Val 。
当以Sanger 试剂处理时分别得到DNP-Ala 和DNP-Val 。
〔4〕溴化氰处理得 Ala ，Arg ，高丝氨酸内酯，Thr ，2Val ，和 Leu ，Phe ，当用Sanger 试剂处理时，分别得DNP-Ala 和DNP-Leu 。
解答：由〔2〕推出N 末端为Ala ；由〔3〕推出Val 位于N 端第四，Arg 为第三，而Thr 为第二；溴化氰裂解，得出N 端第六位是Met ，由于第七位是Leu ，所以Phe 为第八；由〔4〕，第五为Val 。
生化分离考点
1. 生化分离过程的特点：（1）生物物质的生活活性大多是在生物体内的温和条件下维持并发挥作用的；（2）用作医药、食品和化妆品的生物产物与人类生命息息相关；（3）原料液中常存在与目标分子在结构、构成成分等理化性质上极其相似的分子及异构体，形成用常法难于分离的混合物；（4）原料液中目标产物的浓度一般很低，有时甚至是微量的。
2. 分离效率的评价（三个指标）：浓缩程度、分离纯化程度、回收率3. Stokes 沉降方程式中，d p 为固体颗粒径（m ），ρs 为固体密度（kg/m ³），ρL 为液体密度（kg/m ³），g 为重力加速度（kg/m ³），v g 为重力沉降速度（kg/m ³），μL 为液体黏度。
4. 区带分离法：是生化研究中的重要分离手段，根据立新操作条件不同，分为差速区带离心和平衡区带离心，两种区带离心法均事先在离心管中用某种低分子溶质调配好密度梯度，在密度梯度之上加待处理的料液后进行离心操作。
5. 离心分离设备：常用的有管式和碟片式两大类。
6. 革兰氏阴性和阳性的区别：革兰阳性菌的细胞主要由肽聚糖层组成，而革兰阴性菌的细胞壁在肽聚糖层的外侧还有分别由脂蛋白和脂多糖及磷脂构成的两层外壁层。
革兰阳性菌的细胞壁比较厚，约15-50nm ，肽聚糖含量占40%-90%；革兰阴性菌的肽聚糖层约1.5-2.0nm ，外壁层约8-10nm 。
因此，革兰阳性菌的细胞壁比革兰阴性菌坚固，较难破碎。
7. 习题：管式离心机的转筒内径为12cm ，筒长70cm ，转数为15000r/min 。
设离心机的校正系数为一，利用其浓缩酵母细胞悬浮液，处理能力为4.0L/min 。
（1）计算酵母细胞的重力沉降速度；（2）破碎该酵母细胞后，细胞碎片直径减小到原细胞的1/2，液体黏度上升3倍，在相同条件下离心浓缩该细胞破碎液，试计算此时离心机的处理能力。
(1)2222g Lr w Q v g π=,72222249.8 4.1810/1500022 3.140.70.12()60g Qg v m s Lr w π-⨯===⨯⨯⨯⨯⨯ (2)21212111,,216p p L L g g d d v v μμ=== 8. 盐析原理： 蛋白质在高离子强度的溶液中溶解度降低、发生沉淀的现象称为盐析(Salting-out)。
生化分离技术考试题目
第一章1.1何谓生化分离技术的集成化概念？请举例加以说明。
1) 利用已有的和新近开发的生化分离技术，将下游过程中的有关单元进行有效组合(集成);2) 或把两种以上的分离技术合成为一种更有效的分离技术，达到提高产品收率、降低过程能耗和增加生产效益的目标；例子⑴多种分离、纯化技术相结合，包括新、老技术的相互渗透与融合，形成所谓融合技术；⑵生化分离技术（下游技术）与发酵工艺（上游技术）相结合或称耦合，形成系统工程；1.2说明生化分离的主要步骤并指出胞内产物和胞外产物的分离纯化流程不同之处①材料及处理来源丰富，含量相对较高，杂质尽可能少②目的物的提取将目的物从材料中以溶解状态释放出来，方法与存在部位及状态有关③分离纯化核心操作，须据目的物的理化性质，生物性质及具体条件定④浓缩，结晶，干燥⑤保存整个过程应有快速灵敏准确的分析方法来衡量效果（收率、纯度）（胞内外的区别就是在于破壁）2.1简要说明常用细胞破碎的主要方法、原理、特点、适用范围及细胞破碎今后的发展方向。
①胞捣碎法，原理：机械运动产生剪切力适用于动植物组织②高速匀浆法，破碎程度较上法好，且机械剪切力对生物大分子的破坏较小，处理量大。
原理：利用高压使细胞悬浮液通过针型阀，由于突然的减压和高速冲击撞击环使细胞破碎。
适用于：较柔软、易分散的组织细胞。
③研磨法和珠磨法适用于微生物与植物细胞④挤压瓶适用于细菌（G-）⑤超声破碎⑦物理法（反复冻融动物材料、渗透压冲击细胞壁脆弱的微生物、急冷骤热（细菌病毒等热不敏感的物质））⑧干燥法（热空气干燥法适用于酵母，真空干燥法适用于细菌，冷冻干燥法适用于不稳定的酶）⑨化学法，1、溶剂处理法丙酮、氯仿、甲苯等脂溶性溶剂可溶解胞膜上脂质化合物，使细胞结构破坏。
2、表面活性剂法添加如十二烷基磺酸钠、去氧胆酸钠等，通过破坏细胞膜而破碎细胞，释放目的物。
此法常需与其它方法结合应用⑩酶解法，1．自溶法，将欲破碎细胞在一定条件（pH、T）下保温一定时间，通过细胞本身存在的酶系的作用，将细胞破坏，使胞内物质释放。
生化练习题含答案
生化练习题含答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、体内核糖核苷酸链合成的方向是A、3’→5’B、C→NC、N→C.D、5’→3’E、既可自3’→5’,亦可自5’→3’正确答案：D2、肝糖原可以直接补充血糖,因为肝脏有A、磷酸葡萄糖变位酶B、磷酸己糖异构酶C、果糖二磷酸酶D、葡萄糖-6-磷酸酶E、葡萄糖激酶正确答案：D3、每分子钙结合蛋白(Ca-BP)可运载多少分子钙:A、1分子Ca2+进入小肠粘膜细胞内B、2分子Ca2+进入小肠粘膜细胞内C、3分子Ca2+进入小肠粘膜细胞内D、4分子Ca2+进入小肠粘膜细胞内E、5分子Ca2+进入小肠粘膜细胞内正确答案：D4、1,25-(OH) 2-D3提高钙、磷水平的途径中下列哪项是不对的:A、促进小肠对钙、磷吸收B、与PTH协同促进骨钙游离入血C、促进磷脂分解D、增加肾小管对钙磷的重吸收E、抑制小肠对钙、磷吸收正确答案：C5、HMGCoA合成酶是什么代谢途径的限速酶A、胆固醇合成B、胆固醇分解C、胆固醇代谢转变D、酮体分解E、酮体生成正确答案：E6、过氧化氢酶的辅基是:A、CoQB、铁硫中心C、血红素D、FMNE、NAD+正确答案：C7、血红素调节珠蛋白的合成,其作用机理是血红素抑制A、蛋白激酶活化B、DNA复制酶C、RNA聚合酶D、核蛋白体大,小亚基聚合E、mRNA与核蛋白体结合正确答案：A8、丙氨酸和α-酮戊二酸经谷丙转氨酶和下述哪一种酶的连续催化作用才能产生游离的氨?A、谷氨酸脱氢酶B、谷氨酰胺合成酶C、α-酮戊二酸脱氢酶D、谷草转氨酶E、谷氨酰胺酶正确答案：A9、下列哪种对TG生理功用的描述是不正确的?A、一克TG氧化产生9.3千克的能量B、对机械撞击起缓冲作用C、TG可防止热量的丧失D、以TG为主要成分的脂肪组织具有脂肪垫的作用E、贮存一克的脂肪比贮存一克的糖元要多贮存1/6的能量正确答案：E10、指出下列胰岛素对糖代谢影响的错误论述A、促进糖变为脂肪B、促进糖原合成C、促进肝葡萄糖激酶的活性D、促进糖的异生E、促进细胞膜对葡萄糖的通进性正确答案：D11、多肽链上可磷酸化的氨基酸是A、甘氨酸B、酪氨酸C、脯氨酸D、C.端氨基酸E、甲酰蛋氨酸或蛋氨酸正确答案：B12、人体内的肽大多是A、开链B、多末端C、环状D、单末端链,余为环状E、分支正确答案：A13、关于米氏常数Km的说法,哪个是正确的:A、降低一半速度时的抑制剂浓度B、速度达最大速度半数时的底物浓度,C、饱和底物浓度的一半D、饱和底物浓度时的速度E、在一定酶浓度下,最大速度的一半正确答案：B14、乙酰CoA羧化酶和丙酮酸羧化酶的共同点是:A、受柠檬酸的调节B、受乙酰CoA的调节C、以NAD+为辅酶D、以HSCoA为辅酶E、以生物素为辅酶正确答案：E15、关于皮质醇的描述那一项是正确的A、盐皮质激素B、由肾上腺髓质合成C、需NADH参予合成D、糖皮质激素E、性皮质激素正确答案：D16、下列关于RNA分子中""帽子""的叙述哪一项是正确的?A、可使tRNA进行加工过程B、存在于tRNA3'-末端C、是由多聚A组成D、仅存在于真核细胞的mRNA上E、用于校正原核细胞mRNA翻译中的错误正确答案：D17、C.GMP是由下列哪种物质转变生成的?A、GTPB、GDPC、GMPD、5'-GMPE、其他的物质正确答案：A18、血红蛋白的α亚基与O2结合后,产生变构效应随后:A、促进其他亚基与O2结合B、抑制其他亚基与O2结合C、促进α亚基与O2结合,抑制β-D、抑制另一α亚基与O2结合,促进β-亚基与O2结合亚基与O2结合E、促进其他亚基与CO2结合正确答案：A19、谷胱甘肽是由几个氨基酸残基组成的小肽A、39B、3C、10D、2E、9正确答案：B20、3 哺乳动物核蛋白体大亚基的沉降常数是A、70SB、80SC、40SD、30SE、60S正确答案：E21、催化真核mRNA的转录的酶是A、RNA聚合酶IB、MtRNA聚合酶C、RNA聚合酶ⅢD、RNA复制酶E、RNA聚合酶Ⅱ正确答案：E22、下列关于酶辅基的正确叙述是:A、是一种小肽,与酶蛋白结合紧密B、只决定酶的专一性,与化学基团传递无关C、一般不能用透析的方法与酶蛋白分开D、是酶蛋白的某肽链C末端的几个氨基酸E、是酶的活性中心内的氨基酸残基正确答案：C23、关于变构效应剂与酶结合的叙述正确的是A、与酶活性中心催化基因结合B、与酶活性中心底物结合部位结合C、与调节亚基或调节部位结合D、通过共价键与酶结合E、与酶活性中心外任何部位结合正确答案：C24、成熟红细胞的主要生命活动能量来源是A、糖醛酸途径B、糖的有氧氧化C、磷酸戊糖途径D、脂肪酸β氧化E、糖酵解正确答案：E25、下列关于DNA双螺旋结构的叙述哪一项是正确的?A、磷酸核糖在双螺旋外侧,碱基位于内侧B、碱基平面与螺旋轴垂直C、遵循碱基配对原则,但有摆动现象D、碱基对平面与螺旋轴平行E、核糖平面与螺旋轴垂直正确答案：A26、估计人体内含有蛋白质总数为A、几十万B、几百C、几千D、几十E、几万正确答案：A27、泛酸是下列那种酶辅酶的组成成分:A、FMNB、NAD+C、NADP+D、TPPE、CoASH正确答案：E28、1摩尔乙酰乙酸生成过程中参与反应的乙酰CoA共有多少:A、2摩尔B、3摩尔C、1摩尔D、4摩尔E、5摩尔正确答案：B29、酶的竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应?A、Vmax和Km都不变B、Vmax减小,Km不变C、Vmax不变,Km减小D、Vmax增大,Km不变E、Vmax不变,Km增大正确答案：E30、辅酶的作用机理主要在于A、在酶与底物的结合中起桥梁作用B、在酶促反应中起运载体的作用C、辅酶为小分子物质有利于酶在介质中发挥酶促作用D、维持酶蛋白的空间构象E、构成酶的活性中心正确答案：B31、关于密码子,错误的叙述是A、某些密码子不代表氨基酸B、每一密码子代表一种氨基酸C、蛋氨酸只有一种密码子D、一种氨基酸只有一种密码子E、密码子无种族特异性正确答案：D32、影响细胞内cAMP含量的酶是A、磷酸二酯酶B、A.TP酶C、酪氨酸蛋白激酶D、磷脂酶E、蛋白激酶正确答案：A33、嘌呤核苷酸循环中AMP脱氨基生成的是:A、XMPB、IMPC、GMPD、CMPE、UMP正确答案：B34、真核生物蛋白质生物合成的特异抑制剂是A、嘌呤霉素B、氯霉素C、利福霉素D、环己酰亚胺E、青霉素正确答案：D35、调节物质代谢体内最基础的层次是A、细胞水平B、激素水平C、神经调节D、整体水平E、器官水平正确答案：A36、细胞内含量最多的有机成分为A、糖B、核酸C、脂类D、酶E、蛋白质正确答案：E37、呼吸链的电子递体中,有一种组分不是蛋白质而是脂质,这就是:A、NAD+B、FMNC、Fe-SD、CoQE、Cyt正确答案：D38、每摩尔葡萄糖在体内完全氧化时可释放的能量(以千焦计)是A、28.4B、30.5C、3840D、384E、2840正确答案：E39、下列关于别构酶的叙述,哪一项是错误的?A、所有别构酶都是寡聚体,而且亚基数目往往是偶数B、别构酶除了活性部位外,还含有调节部位C、亚基与底物结合的亲和力因亚基构象不同而变化D、亚基构象改变时,要发生肽键断裂的反应E、酶构象改变后,酶活力可能升高也可能降低正确答案：D40、蛋白质合成时,氨基酸的被活化部位是A、硫氢基B、烷基C、羧基D、氨基E、羟基正确答案：C41、胆绿素还原酶活性需辅助因子:A、NADH+H+B、NAD+C、O2D、NADPH+H+E、NADP+正确答案：D42、溶血性黄疸时下列哪一项不存在?A、血中游离胆红素增加B、粪胆素原增加C、尿胆素原增加D、尿中出现胆红素E、粪便颜色加深正确答案：D43、成熟的真核生物mRNA 5’末端具有A、聚A帽子B、m7UpppNmPC、m7CpppNmPD、m7ApppNmPE、m7GpppNmP正确答案：E44、脂肪酸进行β-氧化前,必需先活化转变为脂酰CoA,主要是因为:A、脂酰CoA水溶性增加B、有利于肉毒碱转运C、是肉毒碱脂酰转移酶的激活D、作为脂酰CoA脱氢酶的底物激活物E、作为烯脂酰CoA水合酶的底物正确答案：D45、β-转角主要出现在什么蛋白质分子中A、纤维状蛋白质B、单纯蛋白质C、脂蛋白D、球状蛋白质E、糖蛋白正确答案：D46、下列辅酶或辅基中哪一个不含B族维生素?A、NAD+B、CoA.C、CoQD、NADP+E、FMN正确答案：C47、反复发作的血栓病人,其病因是由于:A、抗纤溶物质减少B、纤维蛋白含量增加C、纤溶激活物减少D、纤溶抑制物减少E、抗凝物质增加正确答案：C48、下列关于DNA变性的叙述哪一项是正确的?A、升高温度是DNA变性的唯一原因B、DNA热变性是种渐进过程,无明显分界线C、变性必定伴随有DNA分子中共价键的断裂D、核酸变性是DNA的独有现象, RNA无此现象E、凡引起DNA两股互补链间氢键断裂的因素,都可使其变性正确答案：E49、D.TMP的嘧啶环中第五位碳原子上的甲基来源于:A、S-腺苷蛋氨酸B、N5N10-CH2-FH4C、N5-CH3FH4D、N10-CHOFH4E、N5N10=CH-FH4正确答案：B50、肝功能不良时对下列哪种蛋白质的合成影响较小?A、清蛋白B、免疫球蛋白C、纤维蛋白原D、凝血酶原E、凝血因子VIII、IX、X正确答案：B51、具下列顺序的单链DNA 5'-CpGpGpTpAp-3'能与下列哪一种RNA杂交?A、5'-GpCpCpApTp-3'B、5'-GpCpCpApUp-3'C、5'-UpApCpCpGp-3'D、5'-TpApGpGpCp-3'E、5'-TpUpCpCpGp-3'正确答案：C52、以下对mRNA的转录后加工的描述错误的是A、mRNA前体需在5'端加m7GpppNmp的帽子B、mRNA前体需进行剪接作用C、mRNA前体需在3’端加多聚U的尾D、mRNA前体需进行甲基化修饰E、某些mRNA前体需要进行编辑加工正确答案：C53、甘油三酯脂肪酶是甘油三酯什么代谢途径中的限速酶A、转变B、分解C、合成D、储存E、动员正确答案：B54、下列有关维生素的叙述哪一项是错误的A、维持正常功能所必需B、在许多动物体内不能合成C、体内需要量少,但必须由食物供给D、它们的化学结构彼此各不相同E、是体内能量的来源正确答案：E55、脂肪酸β-氧化的酶系存在于A、胞液B、线粒体内膜C、线粒体基质D、微粒体E、溶酶体正确答案：C56、氯霉素的抗菌作用是由于抑制了细菌的A、核蛋白体上的转肽酶B、二氢叶酸还原酶C、嘌呤核苷酸代谢D、基因表达E、细胞色素氧化酶正确答案：A57、基因表达产物是A、DNAB、RNAC、蛋白质D、大部分是蛋白质和RNA正确答案：D58、下列关于限制性内切酶的叙述哪一项是错误的?A、它能识别DAN特定的碱基顺序,并在特定的位点切断DNA.B、切割点附近的碱基顺序一般呈回纹结构C、它能专一降解经甲基化修饰的DNA.D、是重组DNA的重要工具酶E、主要从细菌中获得正确答案：C59、酶促反应中决定酶特异性的是A、催化基团B、作用物的类别C、酶蛋白D、金属离子E、辅基或辅酶正确答案：C60、组成蛋白质的氨基酸中支链氨基酸有几种A、3B、20C、5D、2E、10正确答案：A61、你知道人血红蛋白与血浆白蛋白的分子量大约多少吗(×1000)?A、60-70B、50左右C、30左右D、10左右E、100左右正确答案：B62、C.AMP能直接激活什么激酶活性A、PKAB、PKGC、PKCD、PKNE、PKB正确答案：A63、生物体系下列信息传递方式中哪一种还没有确实证据?A、DNA→RNA.B、RNA→蛋白质C、蛋白质→RNA.D、RNA→DNAE、以上都不是64、酶具有高效催化能力是由于下列何种效应:A、降低底物的能量水平B、降低反应的自由能变化C、降低反应的活化能D、提高反应的温度正确答案：C65、下列哪一种维生素不能由肠道细菌合成?A、维生素KB、维生素B12C、叶酸D、生物素E、维生素C.正确答案：E66、COOHCH2C(OH)CH3CH2CO-CoA是下列哪一种化合物的前体?A、不饱和脂酸B、胆碱C、谷氨酸D、丙二酰CoA.E、胆固醇正确答案：E67、肝内酮体生成的限速酶是A、HMGCoA还原酶B、HMGCoA合成酶C、乙酰辅酶A羧化酶D、乙酰乙酸还原酶E、β-羟丁酸脱氢酶正确答案：B68、肝脏进行生物转化时葡萄糖醛酸的活性供体是A、GAB、UDPGC、ADPGAD、UDPGAE、CDPGA69、不通过胞内受体发挥作用的激素是A、性激素B、肾上腺素C、维生素DD、甲状腺素E、糖皮质激素正确答案：B70、D.NA的碱基组成规律哪一项是错误的?A、分子中A=C,G=TB、分子中A+G=C+TC、人与兔DNA碱基组成可有不同D、同一个体不同组织器官其DNA碱基组成相同E、年龄、营养状态及环境的改变不影响DNA的碱基组成正确答案：A71、能够与DIFP结合的氨基酸残基是以下哪一种?A、CysB、SerC、ProD、LysE、正确答案：E72、氨基酸是通过下列哪种化学键与tRNA结合的?A、糖苷键B、酯键C、酰胺键D、磷酸酯键E、氢键正确答案：B73、一般细胞内蛋白质分子中二硫键数目要比分泌性蛋白质A、多B、一样C、不一定D、不确定正确答案：A74、以下那种蛋白质是单纯蛋白质A、色蛋白B、糖蛋白C、血浆白蛋白D、免疫球蛋白E、核蛋白正确答案：C75、下列哪种物质是氨基甲酰磷酸合成酶I的变构激活剂?A、谷氨酰胺B、乙酰CoAC、GTPD、N-乙酰谷氨酸E、NAD+正确答案：D76、有降低细胞内cAMP浓度的激素是:A、肾上腺皮质激素B、降钙素C、A.DHD、胰岛素E、甲状旁腺素正确答案：D77、A.MP分子中第六位碳原子上的氨基来源于:A、谷氨酰胺的酰胺基B、谷氨酸C、天冬酰胺的酰胺基D、甘氨酸E、天冬氨酸正确答案：E78、从低等的单细胞生物到高等的人类,能量的释放、贮存和利用都以下列哪一种为中心?A、GTPB、UTPD、ATPE、CTP正确答案：D79、男性尿17-酮类固醇的最主要来源是:A、雄激素B、皮质醇C、醛固酮D、雌激素E、孕酮正确答案：A80、酶原激活的实质是:A、激活剂与酶结合使酶激活B、酶蛋白的变构效应C、酶原分子一级结构发生改变从而形成或暴露出酶的活性中心D、酶原分子的空间构象发生了变化而一级结构不变E、以上都不对正确答案：C81、与前胶原赖氨酸和脯氨酸残基羟化有关的维生素是A、核黄素B、生物素C、尼克酰胺D、抗坏血酸E、生育酚正确答案：D82、芳香族氨基酸是指A、丙氨酸、丝氨酸B、胱氨酸、半胱氨酸C、缬氨酸、亮氨酸D、蛋氨酸、组氨酸E、酪氨酸、苯丙氨酸正确答案：E83、转氨酶的辅酶含有维生素:A、B1C、B.6D、PPE、C.正确答案：C84、下列哪一生化反应主要在线粒体内进行?A、脂酸ω氧化B、甘油三酯分解C、胆固醇合成D、脂酸β氧化E、脂酸合成正确答案：D85、精氨酸与赖氨酸属于哪一类氨基酸A、芳香族B、中性极性C、碱性D、酸性E、中性非极性正确答案：C86、下列哪种维生素参与呼吸链氧化磷酸化?A、硫胺素B、钴胺素C、泛酸D、生物素E、核黄素正确答案：E87、糖无氧酵解途径中,可生成ADP的反应是:A、葡萄糖→G-6-PB、G-6-P→F-6-PC、3-磷酸甘油醛→1,3-二磷酸甘油酸D、1,3-二磷酸甘油酸→3-磷酸甘油酸E、3-磷酸甘油酸→2-磷酸甘油酸正确答案：A88、下列哪个关于三羧酸循环的叙述是正确的?A、它不含有由葡萄糖生成的中间产物?B、它含有氨基酸合成的中间产物C、它消耗1克分子葡萄糖所产生的ATP分子比糖酵解要少D、它是一个无氧过程E、它是葡萄糖合成的主要同化途径正确答案：B89、1958年Meselson和Stahl利用15N及14N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制?A、DNA能被复制B、DNA基因可转录为mRNAC、DNA基因可表达为蛋白质D、DNA的半保留复制机制E、DNA的全保留复制机制正确答案：D90、关于酶含量的调节哪一项是错误的A、酶含量调节属快速调节B、产物常遏制酶的合成C、酶含量调节属细胞水平的调节D、底物常可诱导酶的合成E、激素或药物也可诱导某些酶的合成正确答案：A91、基因中被转录的非编码序列A、外显子B、单顺反子C、内含子D、UsnRNPE、多顺反子正确答案：C92、关于未结合胆红素在肝内的转变,下列哪种说法是正确的?A、正常情况下主要与1分子葡萄糖醛酸形成复合物B、胆红素主要与葡萄糖醛酸结合C、不经转变直接由胆道排出D、胆红素主要与硫酸结合E、葡萄糖醛酸的半缩醛羟基与胆红素上羟基形成苷正确答案：B93、两个核酸制品经紫外检测其制品A的A260/A280=2,制品B的A260/A280=1,下面对此二制品纯度的描述哪种是正确的?A、A制品的纯度高于B制品B、B制品的纯度高于A制品C、A .B两制品的纯度均高D、AB两制品的纯度均不高E、无法判断此二制品的纯度正确答案：A94、生物体系下列信息传递方式中哪一种还没有确实证据?A、DNA→RNA.B、RNA→蛋白质C、蛋白质→RNA.D、RNA→DNA.E、以上都不是正确答案：C95、干扰素可以诱导2'5'-寡聚腺苷酸合成酶的合成,此酶能催化:A、ATP转变为2,5A.B、CTP转变为2,5CC、GTP转变为2,5GD、UTP转变为2,5UE、TTP转变为2,5T正确答案：A96、脂肪酰CoA在肝脏进行β-氧化,其酶促反应的顺序是A、脱氢、再脱氢、加水、硫解B、硫解、脱氢、加水、再脱氢C、脱氢、加水、再脱氢、硫解D、脱氢、脱水、再脱氢、硫解E、加水、脱氢、硫解、再脱氢正确答案：C97、ALA合成酶的辅酶是:A、B2B、磷酸吡哆醛C、生物素D、NAD+E、FAD.正确答案：B98、稀有核苷酸存在于下列哪一类核酸中?A、核蛋白体核糖核酸(rRNA)B、信使核糖核酸(mRNA)C、转运核糖核酸(tRNA)D、核仁DNAE、线粒体DNA.正确答案：C99、血红素加氧酶分布于肝、脾、骨髓中网状内皮细胞的什么部位:A、胞液内B、微粒体内C、溶酶体内D、线粒体内E、质膜上正确答案：B100、下列有关酶的概念哪一项是正确:A、所有蛋白质都有酶活性B、酶都有活性中心C、其催化活性都需特异的辅助因子D、一些酶的活性是可以调节控制的E、以上都不对正确答案：B。
生化实验思考题参考答案解析[1]
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⽣化实验思考题参考答案解析[1]⽣化实验讲义思考题参考答案实验⼀淀粉的提取和⽔解1、实验材料的选择依据是什么？答：⽣化实验的材料选择原则是含量⾼、来源丰富、制备⼯艺简单、成本低。
从科研⼯作的⾓度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和⽣长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和⽣理状态等，微⽣物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。
2、材料的破碎⽅法有哪些？答：(1) 机械的⽅法：包括研磨法、组织捣碎法；(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等；(3) 化学与⽣物化学⽅法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。
实验⼆总糖与还原糖的测定1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定⽅法各有何优缺点？答: 我们采⽤的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。
间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在⽣成单质碘和转移反应产物的过程中容易引⼊误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。
实验五粗脂肪的定量测定─索⽒提取法（1）本实验制备得到的是粗脂肪，若要制备单⼀组分的脂类成分，可⽤什么⽅法进⼀步处理？答：硅胶柱层析，⾼效液相⾊谱，⽓相⾊谱等。
（2）本实验样品制备时烘⼲为什么要避免过热?答：防⽌脂质被氧化。
实验六蛋⽩质等电点测定1、在等电点时蛋⽩质溶解度为什么最低？请结合你的实验结果和蛋⽩质的胶体性质加以说明。
蛋⽩质是两性电解质，在等电点时分⼦所带净电荷为零，分⼦间因碰撞⽽聚沉倾向增加，溶液的粘度、渗透压减到最低，溶解度最低。
结果中pH约为4.9时，溶液最浑浊，达到等电点。
答：2、在分离蛋⽩质的时候，等电点有何实际应⽤价值？答: 在等电点时，蛋⽩质分⼦与分⼦间因碰撞⽽引起聚沉的倾向增加，所以处于等电点的蛋⽩质最容易沉淀。
在分离蛋⽩质的时候，可以根据待分离的蛋⽩质的等电点，有⽬的地调节溶液的pH使该蛋⽩质沉淀下来，从⽽与其他处于溶液状态的杂质蛋⽩质分离。
(完整版)生物分离工程练习题二(第4-5章)
《生物分离工程》练习题二（第4～5章)一、选择题（22分）1、以下哪项不是在重力场中，颗粒在静止的流体中降落时受到的力( B ）A.重力 B。
压力 C.浮力 D. 阻力2、颗粒与流体的密度差越小,颗粒的沉降速度( A ）A.越小B.越大 C。
不变 D.无法确定3、等密度区带离心的密度梯度中最大密度（ A ）待分离的目标产物的密度.A.大于B.小于C.等于D.以上均可4、差速区带离心的密度梯度中最大密度（ B ）待分离的目标产物的密度。
A.大于B.小于C.等于D.以上均可5、以下各物质可用于密度梯度离心介质的是（ D ）。
A。
蔗糖 B。
聚蔗糖 C。
氯化铯 D。
以上均可6、当两种高聚物水溶液相互混合时，二者之间的相互作用不可能产生（D）A。
互不相溶，形成两个水相 B. 两种高聚物都分配于一相，另一相几乎全部为溶剂水C。
完全互溶，形成均相的高聚物水溶液 D. 形成沉淀7、超临界流体萃取中，如何降低溶质的溶解度达到分离的目的(C）A.降温 B升高压力 C。
升温 D。
加入夹带剂8、物理萃取即溶质根据（B）的原理进行分离的A。
吸附 B.相似相溶 C分子筛 D 亲和9、超临界流体萃取法适用于提取（ B ）A、极性大的成分B、极性小的成分C、离子型化合物D、亲水性成分10、在萃取液用量相同的条件下，下列哪种萃取方式的理论收率最高（C）A。
单级萃取 B。
三级错流萃取 C.三级逆流萃取 D.二级逆流萃取11、关于萃取下列说法正确的是(C)A。
酸性物质在酸性条件下萃取 B碱性物质在碱性条件下萃取C. 两性电解质在等电点时进行提取D. 两性电解质偏离等电点时进行提取12、液一液萃取时常发生乳化作用，如何避免（D)A.剧烈搅拌 B低温 C.静止 D.加热13、在葡聚糖与聚乙二醇形成的双水相体系中，目标蛋白质存在于（A）A.上相 B下相 C.葡聚糖相 D。
以上都有可能14、超临界流体萃取中,如何降低溶质的溶解度达到分离的目的（C）A.降温 B升高压力 C.升温 D.加入夹带剂15、关于反萃取的概念,下列说法正确的是：（A)。
网上找的生化分生实验练习题
一、1．某蛋白样品的浓度大约在1-5μg左右，应使用下列哪种方法进行定量() A．凯氏定氮法B．双缩脲法C．Folin-酚试剂法D．考马斯亮蓝法E．紫外吸收法2．使用紫外吸收法测定蛋白质含量时应使用（）()A．玻璃比色皿B．塑料比色皿C．萤石比色皿D．陶瓷比色皿E．石英比色皿3．凝胶层析是根据待分离样品的（）进行分离的方法。
()A．电荷性质B．电荷多少C．分子大小D．吸附力E．分配系数4．相对离心力是（）()A．在离心场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数B．在离心场中，作用于颗粒的地球重力相当于离心力的倍数C．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的乘积D．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的和E．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的差5．下列关于电泳时pH值、颗粒所带电荷和电泳速度的关系描述正确的是：() A．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越多，电泳速度越慢B．pH值里等电点越近，颗粒所带电荷越多，电泳速度越快C．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越少，电泳速度越快D．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越多，电泳速度越快6．聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，除一般电泳电荷效应外，欲使分辨力提高还应有的作用是（）()A．浓缩作用B．扩散作用C．分子筛作用D．电渗作用7．常用的小量制备质粒DNA的方法不包括：()A．煮沸法B．碱裂解法C．去污剂法D．层析法8．下列关于限制性内切酶的描述，错误的是：()A．一种限制性内切酶只能识别并切割一种特定的核苷酸序列B．限制性内切酶的活性受温度影响C．限制性内切酶需保存于-20℃D．限制性内切酶可以切割RNA分子9．现需要吸取液体100μl，请选择合适量程的移液器:()A．0.1-2.5μlB．1-10μlC．2.5-20μlD．10-200μlE．100-1000μl10．目前实验室常用的制备感受态的方法是：()A．CaSO4法+热激法B．MgCl2法+热激法C．CaCl2法+热激法D．CaSO4法+低温变性答案：DECAD CDDDC二、1．紫外吸收法是利用蛋白质中含有哪些氨基酸残基，使蛋白质具有吸收紫外光的性质的？()A．Tyr及TrpB．Tyr及GlyC．Trp及AlaD．Phe及CysE．Phe及Ser2．利用分光光度法测定蛋白质含量时吸光度的范围应为（）()A．0.01-1.0B．0.05-1.0C．0.01-0.5D．0.05-0.5E．0.5-1.03．凝胶层析过程中最先从凝胶柱中流出的是（）()A．最小的分子B．最大的分子C．较大的分子D．较小的分子E．中等大小的分子4．下列选项是使用离心机时的注意事项，除了（）()A．必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物B．转头中绝对不能装载单数的管子C．当转头只是部分装载时，管子必须互相对称地放在转头中D．每个转头必须在其最高允许转速和使用累计期限内使用E．必须使用塑料离心管5．某蛋白样品的PI= 7.3，那么在PH8.6的电泳缓冲液中进行电泳，其涌动方向是（）() A．向负极移动B．向正极移动C．不运动D．同时向正极和负极移动6．聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，其优点是()A．机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B．机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高C．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高7．碱裂解法提取质粒DNA时，氯仿/酚的作用是：()A．去除染色体DNAB．去除脂类物质C．去除杂蛋白D．去除RNA8．在分子克隆技术中，限制性内切酶主要用于：()A．目的基因的提取和导入B．目的基因的导入和检测C．目的基因与载体的结合D．目的基因的切割和提取9．现需要吸取液体2.5μl，请选择合适量程的移液器:()A．0.1-2μlB．1-10μlC．2.5-20μlD．10-200μlE．100-1000μl10．基因工程中使用最为广泛的基因载体是：()A．质粒B．粘粒C．噬菌体D．病毒答案：ABBEB BCDBA三、1．利用双缩脲法测定蛋白质含量时，标准品的浓度为10mg/ml，标准的OD520=0.5，样品的OD520=0.8，那么样品的浓度为（）()A．16mg/mlB．6.25 mg/mlC．8 mg/mlD．12.5 mg/mlE．24 mg/ml2．在凝胶层析过程中样品分子的运动方式是（）()A．只做垂直向下运动B．只做不定向扩散运动C．自由运动D．横向运动E．既做垂直向下运动又做不定向扩散运动3．RCF是指：（）()A．每分钟转数B．重力加速度C．转头的角速度D．相对离心力E．向心力4．下列选项是影响电泳迁移率的因素，除了（）()A．电场强度B．溶液的PH值C．溶液的离子强度D．凝胶长度5．SDS-PAGE电泳系统中的物理效应不包括（）()A．扩散效应B．浓缩效应C．电荷效应D．分子筛效应6．微量移液器使用时，应注意很多事项，不包括在内的是：()A．选择合适量程，不能超过规定量程B．取液时，按到第一档，放出液体是按到第二档打出C．取液时，按到第二档，放出液体是按到第一档打出D．移液器不能直接接触溶液7．制备的质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳时，通常以三条带形式出现，不包括下列哪种：() A．线性B．开环C．闭环超螺旋D．单链DNA8．DNA琼脂糖凝胶电泳中，上样缓冲液的成分是：()A．氨基黑，甘油B．考马斯亮蓝，蔗糖C．苏丹红，蔗糖D．溴酚蓝，蔗糖9．下列影响琼脂糖凝胶DNA迁移率的因素，不包括：()A．DNA分子的分子量B．DNA分子的带电荷性质C．DNA的带电荷量D．DNA分子的空间构象E．DNA分子的浓度答案：AEDDA CDDE四、1．利用标准曲线法测定蛋白质含量时，标准曲线的范围是（）()A．被测物质浓度的1/4到4倍之间B．被测物质浓度的1/3到3倍之间C．被测物质浓度的1/4到2倍之间D．被测物质浓度的1/2到2倍之间E．被测物质浓度的1/2到3倍之间2．可见分光光度计是依据物质对可见区辐射光产生的特性吸收光谱及（）定律，测量物质对不同波长单色光的吸收程度进行定量分析的仪器。
生化课后题目及问题详解
2 蛋白质化学2．测得一种血红蛋白含铁0.426%，计算其最低相对分子质量。
一种纯酶按质量计算含亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%，问其最低相对分子质量是多少？解答：（1）血红蛋白：55.8100100131000.426⨯⨯=铁的相对原子质量最低相对分子质量＝＝铁的百分含量（2）酶：因为亮氨酸和异亮氨酸的相对分子质量相等，所以亮氨酸和异亮氨酸的残基数之比为：1.65%:2.48%=2:3，因此，该酶分子中至少含有2个亮氨酸，3个异亮氨酸。
()r 2131.11100159001.65M ⨯⨯=≈最低()r 3131.11100159002.48M ⨯⨯=≈最低 3．指出下面pH 条件下，各蛋白质在电场中向哪个方向移动，即正极，负极，还是保持原点？（1）胃蛋白酶（pI 1.0），在pH 5.0；（2）血清清蛋白（pI 4.9），在pH 6.0；（3）α-脂蛋白（pI 5.8），在pH 5.0和pH 9.0；解答：（1）胃蛋白酶pI 1.0＜环境pH 5.0，带负电荷，向正极移动；（2）血清清蛋白pI 4.9＜环境pH 6.0，带负电荷，向正极移动；（3）α-脂蛋白pI 5.8＞环境pH 5.0，带正电荷，向负极移动；α-脂蛋白pI 5.8＜环境pH 9.0，带负电荷，向正极移动。
6．由下列信息求八肽的序列。
（1）酸水解得 Ala ，Arg ，Leu ，Met ，Phe ，Thr ，2Val 。
（2）Sanger 试剂处理得DNP -Ala 。
（3）胰蛋白酶处理得Ala ，Arg ，Thr 和 Leu ，Met ，Phe ，2Val 。
当以Sanger 试剂处理时分别得到DNP -Ala 和DNP -Val 。
（4）溴化氰处理得 Ala ，Arg ，高丝氨酸内酯，Thr ，2Val ，和 Leu ，Phe ，当用Sanger 试剂处理时，分别得DNP -Ala 和DNP -Leu 。
解答：由（2）推出N 末端为Ala ；由（3）推出Val 位于N 端第四，Arg 为第三，而Thr 为第二；溴化氰裂解，得出N 端第六位是Met ，由于第七位是Leu ，所以Phe 为第八；由（4），第五为Val 。
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一、1．某蛋白样品的浓度大约在1-5μg左右，应使用下列哪种方法进行定量() A．凯氏定氮法B．双缩脲法C．Folin-酚试剂法D．考马斯亮蓝法E．紫外吸收法2．使用紫外吸收法测定蛋白质含量时应使用（）()A．玻璃比色皿B．塑料比色皿C．萤石比色皿D．陶瓷比色皿E．石英比色皿3．凝胶层析是根据待分离样品的（）进行分离的方法。
()A．电荷性质B．电荷多少C．分子大小D．吸附力E．分配系数4．相对离心力是（）()A．在离心场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数B．在离心场中，作用于颗粒的地球重力相当于离心力的倍数C．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的乘积D．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的和E．在离心场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的差5．下列关于电泳时pH值、颗粒所带电荷和电泳速度的关系描述正确的是：() A．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越多，电泳速度越慢B．pH值里等电点越近，颗粒所带电荷越多，电泳速度越快C．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越少，电泳速度越快D．pH值里等电点越远，颗粒所带电荷越多，电泳速度越快6．聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，除一般电泳电荷效应外，欲使分辨力提高还应有的作用是（）()A．浓缩作用B．扩散作用C．分子筛作用D．电渗作用7．常用的小量制备质粒DNA的方法不包括：()A．煮沸法B．碱裂解法C．去污剂法D．层析法8．下列关于限制性内切酶的描述，错误的是：()A．一种限制性内切酶只能识别并切割一种特定的核苷酸序列B．限制性内切酶的活性受温度影响C．限制性内切酶需保存于-20℃D．限制性内切酶可以切割RNA分子9．现需要吸取液体100μl，请选择合适量程的移液器:()A．0.1-2.5μlB．1-10μlC．2.5-20μlD．10-200μlE．100-1000μl10．目前实验室常用的制备感受态的方法是：()A．CaSO4法+热激法B．MgCl2法+热激法C．CaCl2法+热激法D．CaSO4法+低温变性答案：DECAD CDDDC二、1．紫外吸收法是利用蛋白质中含有哪些氨基酸残基，使蛋白质具有吸收紫外光的性质的？()A．Tyr及TrpB．Tyr及GlyC．Trp及AlaD．Phe及CysE．Phe及Ser2．利用分光光度法测定蛋白质含量时吸光度的范围应为（）()A．0.01-1.0B．0.05-1.0C．0.01-0.5D．0.05-0.5E．0.5-1.03．凝胶层析过程中最先从凝胶柱中流出的是（）()A．最小的分子B．最大的分子C．较大的分子D．较小的分子E．中等大小的分子4．下列选项是使用离心机时的注意事项，除了（）()A．必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物B．转头中绝对不能装载单数的管子C．当转头只是部分装载时，管子必须互相对称地放在转头中D．每个转头必须在其最高允许转速和使用累计期限内使用E．必须使用塑料离心管5．某蛋白样品的PI= 7.3，那么在PH8.6的电泳缓冲液中进行电泳，其涌动方向是（）() A．向负极移动B．向正极移动C．不运动D．同时向正极和负极移动6．聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，其优点是()A．机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B．机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高C．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高7．碱裂解法提取质粒DNA时，氯仿/酚的作用是：()A．去除染色体DNAB．去除脂类物质C．去除杂蛋白D．去除RNA8．在分子克隆技术中，限制性内切酶主要用于：()A．目的基因的提取和导入B．目的基因的导入和检测C．目的基因与载体的结合D．目的基因的切割和提取9．现需要吸取液体2.5μl，请选择合适量程的移液器:()A．0.1-2μlB．1-10μlC．2.5-20μlD．10-200μlE．100-1000μl10．基因工程中使用最为广泛的基因载体是：()A．质粒B．粘粒C．噬菌体D．病毒答案：ABBEB BCDBA三、1．利用双缩脲法测定蛋白质含量时，标准品的浓度为10mg/ml，标准的OD520=0.5，样品的OD520=0.8，那么样品的浓度为（）()A．16mg/mlB．6.25 mg/mlC．8 mg/mlD．12.5 mg/mlE．24 mg/ml2．在凝胶层析过程中样品分子的运动方式是（）()A．只做垂直向下运动B．只做不定向扩散运动C．自由运动D．横向运动E．既做垂直向下运动又做不定向扩散运动3．RCF是指：（）()A．每分钟转数B．重力加速度C．转头的角速度D．相对离心力E．向心力4．下列选项是影响电泳迁移率的因素，除了（）()A．电场强度B．溶液的PH值C．溶液的离子强度D．凝胶长度5．SDS-PAGE电泳系统中的物理效应不包括（）()A．扩散效应B．浓缩效应C．电荷效应D．分子筛效应6．微量移液器使用时，应注意很多事项，不包括在内的是：()A．选择合适量程，不能超过规定量程B．取液时，按到第一档，放出液体是按到第二档打出C．取液时，按到第二档，放出液体是按到第一档打出D．移液器不能直接接触溶液7．制备的质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳时，通常以三条带形式出现，不包括下列哪种：() A．线性B．开环C．闭环超螺旋D．单链DNA8．DNA琼脂糖凝胶电泳中，上样缓冲液的成分是：()A．氨基黑，甘油B．考马斯亮蓝，蔗糖C．苏丹红，蔗糖D．溴酚蓝，蔗糖9．下列影响琼脂糖凝胶DNA迁移率的因素，不包括：()A．DNA分子的分子量B．DNA分子的带电荷性质C．DNA的带电荷量D．DNA分子的空间构象E．DNA分子的浓度答案：AEDDA CDDE四、1．利用标准曲线法测定蛋白质含量时，标准曲线的范围是（）()A．被测物质浓度的1/4到4倍之间B．被测物质浓度的1/3到3倍之间C．被测物质浓度的1/4到2倍之间D．被测物质浓度的1/2到2倍之间E．被测物质浓度的1/2到3倍之间2．可见分光光度计是依据物质对可见区辐射光产生的特性吸收光谱及（）定律，测量物质对不同波长单色光的吸收程度进行定量分析的仪器。
()A．爱迪生B．朗伯-比尔C．牛顿D．阿基米德E．特斯拉3．在凝胶层析过程中行程最长的分子是（）()A．最小的分子B．最大的分子C．较大的分子D．较小的分子E．中等大小的分子4．为了保证离心机正常使用，必须做到下述选项，除了（）()A．使用带有棉垫的套管B．平衡离心管及其内容物后将其插入套管中C．将平衡好后的离心管对称放置于离心机中D．离心过程中应随时观察离心机的运转情况E．低温离心需先预冷转头5．聚丙烯酰胺凝胶聚合时使用的催化剂是()A．丙烯酰胺B．甲叉双丙烯酰胺C．TEMEDD．过硫酸铵6．本学期的Western Blot实验在转膜过程中，凝胶与膜的位置关系是（）() A．膜在负极，胶在正极B．膜在正极，胶在负极C．胶在上，膜在下D．膜在上，胶在下7．DNA 分子在电泳缓冲液中，带何种电荷：()A．正电荷B．负电荷C．不带电荷8．在分子克隆技术中，连接酶主要用于：()A．目的基因的提取和导入B．目的基因的导入和检测C．目的基因与载体的链接D．目的基因的提取9．碱裂解法分离提取质粒DNA的基本原理是：()A．碱性条件下染色体DNA变性，去除变性条件后，可以复性；而质粒DNA则相反。
B．碱性条件下质粒DNA变性，去除变性条件后，可以复性；而染色体DNA则相反。
10．在质粒提取实验中，solution III处理后，离心进行分离，此时，质粒DNA存在于：() A．上清液B．沉淀答案：DBABD ABCAA五、1．考马斯亮蓝法测定蛋白质含量时使用的检测试剂是？()A．考马斯亮蓝R250B．考马斯亮蓝G250C．溴酚蓝D．铁氰化钾E．磷酸苯二钠2．有甲、乙两份不同浓度的有色物质溶液，甲溶液用1.0cm吸收池，乙溶液用2.0cm吸收池,在同一波长下测得的吸光度的值相等，则他们的浓度关系为（）()A．甲是乙的1/2B．甲等于乙C．乙是甲的二倍D．乙是甲的1/2E．不确定3．聚丙烯酰胺凝胶聚合时使用的催化剂是()A．丙烯酰胺B．甲叉双丙烯酰胺C．TEMEDD．过硫酸铵4．Western Blot是通过（）进行检测的。
()A．DNA与DNA相互作用B．DNA与RNA相互作用C．蛋白质与蛋白质相互作用D．蛋白质与DNA相互作用E．蛋白质与RNA相互作用5．作为基因工程中常用的载体，质粒必需具备一些条件，下列哪个不属于载体的必备要素：A．环状DNA分子，能够自我复制B．有多个限制性酶切位点C．有筛选标记基因D．跟随染色体DAN复制而复制E．方便从宿主细胞中提取分离6．制备的质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳时，通常以三条带形式出现，不包括下列哪种：() A．线性B．开环C．闭环超螺旋D．单链DNA7．基因工程技术中，切割载体和目的基因的限制性内切酶和切口必备的条件是：() A．可用不同的限制性内切酶，产生的粘性末端必需相同B．必需用相同的限制性内切酶，产生的粘性末端不需要相同C．必需用相同的限制性内切酶，产生的粘性末端必需相同D．可用不同的限制性内切酶，产生的粘性末端不必相同8．琼脂糖凝胶电泳分离DNA时，加样孔端应该临近电泳仪的：()A．阳极B．阴极9．微量移液器使用时，应注意很多事项，不包括在内的是：()A．选择合适量程，不能超过规定量程B．取液时，按到第一档，放出液体是按到第二档打出C．取液时，按到第二档，放出液体是按到第一档打出D．移液器不能直接接触溶液10．质粒DNA提取分离中，solution II的作用是：()A．裂解菌体，使DNA分子变性B．悬浮菌体，稳定菌体性质C．中和碱性，使DNA分子复性D．去除杂蛋白答案：BDDCD DABCA六、1．利用双缩脲法测定蛋白含量时，样品的吸光度为1.6，下一步应如何操作？() A．利用标准曲线法计算样品含量B．利用标准管法计算样品含量C．将样品进行稀释从新检测D．将样品进行浓缩从新检测E．另取一定量样品从新检测2．利用分光光度技术检测蛋白质含量时，下列哪种做法是错误的？()A．机器预热20-30分钟B．选择合适波长C．用空白管调零时，不应把装有待测样品的比色皿放在分光光度计表面D．将样品倒入比色皿后应用吸水纸将比色皿毛面擦净E．不能用手接触比色皿的光面3．带电粒子在电场中的移动与下列哪个选项无关:()A．粒子的大小B．粒子所带电荷C．粒子的形状D．电泳方式4．下列选项中可以加速聚丙烯酰胺凝胶聚合的是（）()A．升高温度并充氧B．升高温度并隔绝氧C．降低温度并充氧D．降低温度并隔绝氧5．提取分离质粒DNA时，加入的2倍体积的冰预冷的无水乙醇的目的是：() A．去除杂蛋白B．去除脂类物质C．沉淀质粒DNAD．沉淀RNA6．在质粒提取实验中solution III处理后，离心进行分离，此时细菌染色体DNA存在于：() A．上清液B．沉淀7．质粒DNA提取分离中，solution II 的作用是：()A．裂解菌体，使DNA分子变性B．悬浮菌体，稳定菌体性质C．中和碱性，使DNA分子复性D．去除杂蛋白8．DNA琼脂糖凝胶电泳中，上样缓冲液的功能是：()A．沉淀杂蛋白B．加快电泳速度C．提高分辨率D．沉降样品至加样孔和前沿指示9．质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳时,电泳迁移率按照从大到小的顺序排列，正确的是：() A．线性DNA>闭环DNA>超螺旋DNAB．闭环DNA>线性DNA>超螺旋DNAC．超螺旋DNA>闭环DNA>线性DNAD．超螺旋DNA>线性DNA>闭环DNA10．琼脂糖凝胶电泳分离DNA时，加样孔端应该临近电泳仪的：()A．正极B．负极答案：CDDBC BADCB七、1．参比溶液（空白管）的作用是（）()A．消除背景效应B．获取标准品吸光度C．获取样品吸光度D．消除待测物对光的吸收2．利用分光光度法测定蛋白含量时，比色皿中加入溶液的量应为比色皿容积的（）() A．1/3B．1/2C．2/3D．3/5E．4/53．血清γ球蛋白的分离纯化中，蛋白质粗提使用的方法是？()A．有机溶剂沉淀B．免疫沉淀C．盐析D．渗析4．凝胶层析分离混合物的基本原理是：()A．吸附力差异B．分子筛作用C．离子交换D．配体亲和差异5．离心机按转速分类，分为高速离心机、低速离心机和（）()A．分析离心机B．制备离心机C．冷冻离心机D．超速离心机E．台式离心机6．对酶的分离纯化进行评估的指标是()A．酶的纯度B．酶的收率C．酶的纯度及收率D．酶的活性E．酶的重量7．颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是（）()A．颗粒带净电荷量越大或其直径越小，在电场中的泳动速度就越快B．颗粒带净电荷量越小或其直径越小，在电场中的泳动速度就越快C．颗粒带净电荷量越大或其直径越大，在电场中的泳动速度就越快D．颗粒带净电荷量越大或其直径越小，在电场中的泳动速度就越慢8．质粒DNA提取分离中，solution I的作用是：()A．裂解菌体，使DNA分子变性B．悬浮菌体，稳定菌体性质C．中和碱性，使DNA分子复性D．去除杂蛋白9．常用的小量制备质粒DNA的方法不包括：()A．煮沸法B．碱裂解法C．去污剂法D．层析法10．提取分离质粒DNA时，加入的70%的冰预冷无水乙醇的目的是：() A．去除杂蛋白B．洗涤质粒DNAC．沉淀质粒DNAD．沉淀RNA答案：ACCBD CABDB。