紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸

实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸

1 实验试剂与仪器

试剂

苯甲酸（AR），雪碧汽水

仪器

日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿

2 实验原理与方法

为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。

3 实验步骤

苯甲酸标准储备液配制

称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。标准曲线绘制

取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），

找出λ

max ，然后在λ

max

处测定五个标准溶液的吸光度A。

样品处理和测定

雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ

max

处测定吸光度。

4 实验结果

测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值

表1 标准液吸光度测定

标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12

吸光度

图1 苯甲酸标准溶液标准曲线

测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为

=μg/ml

从曲线上找出相应的苯甲酸浓度C

x

: 样品定容后体积为100ml

V

1

V

: 所取样品体积为 25ml

2

因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故μg/ml≈μg/g=kg

根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。

5 实验分析

本实验的R2= 在实验线性回归的范围内，但是有待提高。

1.可以在苯甲酸定容的时候注意操作来提高。

2.可以在配置标准曲线的时候注意移液的规范操作。

3.在上机对比色皿的表面的擦洗。要用擦镜纸。

6 思考题

1.举例说明日常生活中遇到的哪些食品中有防腐剂？

答：低盐酱菜、酱类、蜜饯、葡萄酒、果酒、软糖、酱油、食醋、果酱

2. 用什么方法从样品中把苯甲酸分离出来？

答：（1）蒸馏法，加入无水硫酸钠、磷酸和水，加热蒸馏出样品中的苯甲酸。

（2）加入盐酸酸化，然后用乙醚提取

3. 食品中苯甲酸检测还有哪些方法？

答：气相色谱法，液相色谱法，衍生后比色分析法

4. 苯甲酸通过什么排泄？

答：口服迅速从消化道吸收，与甘氨酸在肝内结合形成马尿酸，后者在 12小时内迅速从尿中排出，在最初 4小时内即达用量 97％。如口服剂量大，部分可以偶合的苯甲酰

基葡糖醛酸从尿中排泄。

5. 如何利用一元线性回归法绘制标准曲线及计算样品中苯甲酸含量？

答：先分别配出浓度为0μg/ml 、2μg/ml、 4μg/ml、 8μg/ml、 12μg/ml的苯甲酸标准溶液，以水为参比溶液，测出五个标准溶液的吸光度，用FINDGRAPH绘制出标准曲线。测出样品的吸光度，在标准曲线中找出对应的样品苯甲酸浓度值，计算样品苯甲酸含量。