血清免疫球蛋白测定(一)

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免疫球蛋白检测标准

免疫球蛋白检测标准
免疫球蛋白检测通常包括对不同免疫球蛋白亚类（IgA、IgG、IgM 等）的测定。

这些检测可用于评估免疫系统的功能、检测感染或自身免疫疾病，以及监测治疗的效果。

检测的标准可能因实验室、地区和具体的免疫球蛋白亚类而有所不同。

以下是一些可能用于解释免疫球蛋白检测结果的一般标准：
1.正常范围：免疫球蛋白的正常范围可能因年龄、性别和实验室
的不同而异。

通常，实验室会提供一个正常参考范围，以帮助
解释患者的检测结果。

2.免疫球蛋白亚类比例：正常血清中各种免疫球蛋白亚类的比例
可能是相对稳定的，某些情况下异常的亚类比例可能提示潜在
的免疫问题。

3.特定疾病标志物：在某些情况下，特定的免疫球蛋白检测可以
用作某些疾病的标志物。

例如，抗核抗体（ANA）是自身免疫
疾病的标志物之一。

4.疫苗免疫：对于已接种疫苗的人群，免疫球蛋白的产生可能与
疫苗类型和接种时间有关。

特定的抗体水平可能被认为是免疫
有效性的指标。

请注意，这只是一般性的指导，具体的标准应该根据具体实验室的方法和仪器、患者的个体情况以及检测的免疫球蛋白亚类而有所不同。

因此，对于免疫球蛋白检测结果的解释应该由专业医疗人员进行，他们会结合患者的整体状况和临床信息进行综合评估。

血清免疫球蛋白M测定

血清免疫球蛋白M测定【基本信息】[简要描述]·免疫球蛋白M(Immunoglobulin M, IgM)是初次免疫应答反应中的免疫球蛋白(Ig)，也是相对分子质量最大的Ig，约占血清总Ig的5%-10%。

·IgM测定用于体液免疫活性、子宫感染可能性或急性感染评价，IgM型多发性骨髓瘤和华氏巨球蛋白血症诊断和治疗检测。

[其他名称]IgM【测定方法及参考值范围】可通过单向免疫扩散法、免疫散射比浊法、免疫透射比浊法测定。

参考值范围：成人血清IgM为0.5-2.6g/L；新生儿为0.01-0.06g/L。

【结果及临床意义】[增高]◇疾病因素·华氏巨球蛋白血症注释：IgM呈单克隆性明显增高。

·IgM型多发性骨髓瘤·初期病毒性肝炎(A型病毒性肝炎急性早期等)·类风湿关节炎·系统性红斑狼疮·宫内感染注释：宫内感染可能引起IgM浓度急剧升高，若脐血中IgM＞0.2g/L时，表示有宫内感染。

·慢性感染·淋巴瘤·肝硬化(原发性胆汁性肝硬化的早期等)·B型肝炎急性期注释：IgM升高不明显。

·C型肝炎急性期注释：IgM升高不明显。

·慢性肝病·类狼疮性肝炎注释：抗原的持续刺激和血浆白蛋白减少的代偿作用，IgG、IgA和IgM均明显升高，增高程度与细胞浸润和纤维化程度呈正相关。

·肝细胞癌注释：抗原的持续刺激和血浆白蛋白减少的代偿作用，IgG、IgA和IgM均明显升高，增高程度与细胞浸润和纤维化程度呈正相关。

·链球菌感染·传染性单核细胞增多症·肾病综合征微小病变型恶化时·浆细胞骨髓瘤·施尼茨勒综合征注释：表现为慢性荨麻疹、不明原因发热、骨关节痛、骨硬化X线像。

·伴性IgM增高免疫球蛋白缺乏症·先天性高IgM综合征[降低]◇疾病因素·IgG型重链病·IgA型多发性骨髓瘤·先天性免疫缺陷症(原发性无丙种球蛋白血症、网状细胞异常形成症等)注释：网状细胞异常形成症属于复合性免疫缺陷症的一种类型，T、B和NK细胞显著减少，免疫球蛋白减少以至IgA和IgM多有测不出的程度。

血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定-1

血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定-1血液及组织样品的制备分析组织中某种物质的含量、探索物质代谢的过程和规律，经常使用动物的肝、肾、脑、粘膜和肌肉等组织，也选用全血、血浆、血清或者无蛋白血滤液等血液样品，有时也采用尿液、胃液等完成各种生化实验。

掌握以上各种实验样品的正确处理和制备方法是保证生化实验顺利进行的关键。

一、血液样品(一）采血测定用的血液，多由静脉采集。

一般在饲喂前空腹采取，因此时血液中化学成分含量比较稳定，采血时所用的针头、注射器，盛血容器要清洁干净；接血时应让血液沿着容器壁慢慢注入，以防溶血和产生泡沫。

(二）血清、全血及血浆的制备1.血清的制备血清是全血不加抗凝剂自然凝固后析出的淡黄清亮液体。

制备方法是：将刚采集的血液直接注入试管或离心管中。

将试管放成斜面，让其自然凝固，一般经3h 血块自然收缩而析出血清；也可将血样放入37 ℃恒温箱内，促使血块收缩，能较快约析出血清。

为了缩短时间，也可用离心机分离（未凝或凝固的均可离心），分离出的血青，用吸管吸出置于另一试管中，若不清亮或带有血细胞，应重离心，加盖冷藏备用。

2.全血及血浆的制备取清洁干燥的试管或其它容器，收集动物的新鲜血液，立即与适量的抗凝剂充分混合，所得到的抗凝血为全血。

每毫升血液中加入抗凝剂的种类可以根据实验的需要进行选择，但是用量不宜过大，否则将影响实验的结果。

将已抗凝的全二于 2，000r / min 离心10min ，沉降血细胞，取上层清液即为血浆。

血浆比血清分离得快而且量多：两者的差别，主要是血浆比血清多含一种纤维蛋白原，其它成分基本相同。

3.抗凝剂凡能够抑制血液凝固反应进行的化合物称为抗凝剂。

抗凝剂种类甚多，实验室常用的有如下几种，可根据情况选择使用。

（1）草酸钾（钠）优点是溶解度大，可迅速与血中钙离子结合，形成不溶性草酸钙，使血液不凝固。

每毫升血液用1-2mg 即可。

配制方法：配制10％草酸钾水溶液二吸取此液0.1ml 放入一试管中，慢慢转动试管，泛草酸钾尽量铺散在试管壁上，置80 ℃ 烘箱烤干（若超过150 ℃ 则分解），管壁即呈一薄层三色粉末，加塞备用。

免疫学实验免疫比浊(免疫球蛋白的测定)

3 免疫胶乳比浊法
原理
选择一种大小适中，均匀一致的胶乳颗粒，吸附抗体后，当遇到相应抗原时，则发生凝集，单个胶乳颗粒在入射光波长之内，光线可透过，当两个胶乳凝集时，则使透过光减少。这种减少的程度与胶乳凝集成正比，与抗原量成正比。
（a）带抗体的胶乳在波长之内可透过光线；（b）结合后，则形成光线衰减
2. 海德堡（heidelberger）曲线理论
2 抗体的质量
（1）特异性高（2）效价高（3）亲和力高（4）抗血清来源
3 抗原抗体反应的溶液
• pH 6.5~8.5
• 电解质离子强度、种类（磷酸盐缓冲液）
4 增浊剂的使用
• PEG、tween-20等非离子型亲水剂
• 作用：消除蛋白质分子周围的电子云和水化层，促进抗原、抗体分子靠近，结合形成大分子复合物。
（二）类型
1. 透射免疫比浊法 2. 散射免疫比浊法 3. 免疫胶乳比浊法
1 透射免疫比浊法
原理：
抗原抗体在一定缓冲液中形成免疫复合物 (IC)，当光线透过反应溶液时，由于溶液内复合物粒子对光线的反射和吸收，引起透射光减少，免疫复合物量越多，透射光越少，即光线吸收越多，可用吸光度表示。吸光度和复合物的量成正比，当抗体量固定时，与待检抗原量成正比。用抗原标准品建立标准曲线，可测出待检抗原含量。
•
样本管吸光度
• 浓度＝————————×校准液浓度（g/L）
•
校管吸光度
• 结果及讨论
– 检测报告 – 检测意义
实验二、免疫浊度测定 ——免疫球蛋白检测
实验步骤见说明书 IgG9.77g/L IgA1.72g/L IgM1.37g/L
沉淀反应
微生物与免疫教研室

球蛋白测定实验报告

一、实验目的1. 理解球蛋白在血清蛋白中的组成及其在生物体中的作用。

2. 掌握使用醋酸纤维薄膜电泳技术分离和定量血清中球蛋白的方法。

3. 通过实验了解球蛋白的等电点、分子量及其在电场中的迁移行为。

二、实验原理血清中的蛋白质主要包括清蛋白、球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白等。

球蛋白是血清中含量较高的蛋白质之一，主要由多种免疫球蛋白组成，对于机体的免疫功能至关重要。

醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的蛋白质分离技术，基于蛋白质分子大小、电荷和形状的差异，在电场中实现分离。

在醋酸纤维薄膜电泳中，血清蛋白质在pH8.6的缓冲液中带负电荷，向正极移动。

由于不同蛋白质的分子量、形状和电荷量不同，它们在电场中的迁移速度不同，从而在薄膜上形成不同的区带。

通过比较已知标准蛋白质的迁移距离和待测样品的迁移距离，可以定量分析血清中球蛋白的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 血清样品- 醋酸纤维薄膜- 标准蛋白质溶液- 电泳缓冲液- 染色剂（如氨基黑10B）- 洗脱剂- 显微镜2. 实验仪器：- 电泳仪- 电泳槽- 显微镜四、实验步骤1. 制备样品：将血清样品与适当比例的缓冲液混合，制成均匀的蛋白质溶液。

2. 准备电泳槽：在电泳槽中注入电泳缓冲液，确保槽内液面平稳。

3. 准备醋酸纤维薄膜：将薄膜浸泡在缓冲液中，使其充分湿润。

4. 加样：将样品和标准蛋白质溶液点样于薄膜上，注意样品点的均匀性。

5. 电泳：将薄膜放入电泳槽中，接通电源，进行电泳。

6. 染色：电泳结束后，将薄膜取出，放入染色剂中染色。

7. 洗脱：将染色后的薄膜放入洗脱剂中，去除非蛋白质成分。

8. 观察与记录：将薄膜置于显微镜下观察，记录各蛋白质区带的迁移距离和宽度。

五、实验结果与分析1. 通过电泳，观察到血清样品在醋酸纤维薄膜上形成了清晰的蛋白质区带，包括清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白等。

2. 通过比较样品和标准蛋白质的迁移距离，计算出各蛋白质区带的分子量。

体液免疫功能的检测

体液免疫功能的检测临床上一个反复发作的化脓感染，常使医生想到患者是否有免疫缺陷病，一般原发免疫缺陷发病年龄很小，而继发免疫缺陷病人多在30岁以上。

绝大多数免疫缺陷病人多表现为体液和细胞免疫同时受损，所以应全面检查这两方面的功能。

遗憾的是，目前应用的检测方法的局限性，其结果常难以得出明确结论。

一、免疫球蛋白的定量检测1．血清免疫球蛋白的测定血清免疫球蛋白（Ig）的测定是检查体液免疫功能最常用的方法。

由于目前还没有发现由IgD和IgE缺陷所致疾病，所以通常检测Ig G、IgM、IgA，这三类Ig就可以代表血清Ig的水平（表20-2）。

检测发现三类Ig水平均明显低下，就可考虑体液免疫缺陷。

但在分析儿童Ig水平时，应注意Ig的水平随年龄而变化。

体液免疫功能缺陷首先考虑患者血清Ig 水平，如果所有类别Ig水平均降低，即称为一般性联低丙种球蛋白血症。

如果免疫球蛋白水平极度低下，或IgG、IgM、IgA,三类Ig总量低于2mg/ml则称为严重低丙种球蛋白血症或无丙种球蛋白血症(agammaglobulinemia)。

如果只一种或两种Ig水平降低，则称为异常丙种球蛋白血症（dysgammaglobulinemia）。

一般性低丙种球蛋白血症多见于继发性免疫缺陷病。

无丙种球蛋白血症常见于原发免疫缺陷病。

但是常有约50%IgA缺陷病人无临床症状，伴有反复感染的IgA缺陷病人常同时有IgG的缺陷。

常规的定量检测血中Ig的方法是单向免疫扩散和免疫比浊法。

表20－2 人类血清免疫球蛋白正常量类别变化较大时期（mg/ml）达到成人水平与均值IgG 1 ～5岁8.0 ～10.04 ～8岁 8.0 ～10.09 ～13岁 10 ～11.0 8岁以后12．0±2.6mg/ml (150±321IU/ml)IgA 1 ～2岁0.54 ～8岁 1～1.59 ～13岁 1.5～2.0 12岁以后2．0±0.5mg/ml (140±36IU)/ml)IgM 1 ～4岁1.04 ～8岁 1.09 ～13岁 1.0 男性1岁女性2岁1.1±0.3mg/ml (130±40IU)/ml)注：IU=国际单位2．分泌型IgA(SIgA)的测定 SIgA是粘膜抗感染的重要因素，但是粘膜抗感染还包括少量渗出的IgM和IgG，还有细胞免疫的作用。

免疫球蛋白测定方法与影响因素课件

1、标准液对测定结果的影响
• • • 1.1 标准液中Ig类型的不均一性： 1.2 标准液中Ig分子大小的不均一性那么要求Ig标准液能代表健康人群平均水平的Ig类型和分子大小，基质效应要小。
• • • •
1.3 Ig的国际标准： 1.3.1 WHO 67/97 定义：每瓶含100IU的血浆蛋白冻干品 WHO 67/97的明显缺限:
见表1
方
法
原
理
标本类型血清血清
简要评价慢，非特异性，不能分类Ig，方法过时慢，不能分类Ig，是检测单克隆Ig的筛选方法较准确，慢
盐沉淀（金沉淀） Ig在某些盐（金化合物）溶液中形成沉淀，再用总蛋白测定法测定Ig含量电泳蛋白分离成Alb和各种球蛋白;Ig在γ带
免疫扩散（（彩扩法））免疫荧光
BN II的抗原过剩检测
预反应检测抗原过量抗原过量
特殊项目的预反应- 避免抗原过量，增加结果的可靠性
IgM为例说明BN II的抗原过量检测原理
• 因此BN II在检测IgA和IgM时，能将抗原过剩的风险降到最低！ • 但是， BN II的抗原过量不能完全消除，在极少数情况下，非常高的免疫球蛋白浓度可能会产生错误的低结果。尤其是单克隆免疫球蛋白可能会显示与多克隆标准品不同的反应，在个别情况下，这可能会导致结果降低的假象或导致非线性结果。
决定定抗原抗体复合物光学性质的因素; 光线透射与散射的数量及特性取决于复合物的直径(d), 发射光的波长()，检测器与发射光的角度，介质的折射系数有关。
•
•
•
①大多数蛋白质分子比光的波长要小得多( 510nm), 只产生Rayleigh 散射。 ②在直接抗原抗体反应期间，最初形成的小复合物会通过交联而增大，到达大约3 x 10 E6 Da 大小的限度，产生Rayleign-Debye 散射。 ③在另一些反应中，抗体附着于大的颗粒上 (IgE)，再和抗原形成的不可溶复合物，其大小较光的波长要大得多。在这些情况下出现的是 Mie 散射

《诊断学》第二版PPT第二十四章临床常用免疫学检测

检测：感染性疾病、免疫增值性疾病和免疫缺陷性疾病的诊断、鉴别诊断、疾病进展和预后。
血清免疫球蛋白分类
根据重链稳定区的分子结构和抗原特异性的不同，分为五类：IgG、 IgA、IgM、IgD、IgE
血清免疫球蛋白分类
检测方法
酶联免疫法（ELISA) 放射免疫（RIA) 荧光标记免疫(IFA) 化学发光法（CLIA) 免疫透射比浊、免疫散射比浊
减低：免疫复合物性疾病（如肾小球肾炎）、自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良和遗传性补体成分缺乏症等
二、补体C3检测
是一种由肝脏合成的β2-球蛋白。C3在补体系统各成分中含量最多，是经典途径和旁路途径的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。
参考值
参考值 0.5 ～2.6 g/L
临床意义
IgM增高见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类风湿关节炎、SLE等，原发性巨球蛋白血症时， IgM呈单克隆性明显增高
IgM降低见于IgG型重链病， IgA型MM，先天性免疫缺陷病，使用免疫抑制剂，淋巴系统肿瘤和肾病综合症。
四、免疫球蛋白E的检测
– 半分子病：系由一条重链和一条轻链组成的单克隆 Ig片段。
– 恶性淋巴瘤：血液中可出现M蛋白。 – 良性M蛋白血症：
第二节血清补体检测
补体是一组具有酶源活性的糖蛋白，由传统途径的九种成分C1(C1q/C1r/C1s）-C9，旁路途径的三种成分及其衍生物B/D/P/H/I等因子组成
参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理反应
识别阶段
细胞膜
C3转化酶的形成
活化阶段
C4b2b 为C3转化酶
C4b
C5转化酶的形成

血清免疫学检查自身抗体结果解析

• 抗-HCV IgM阳性：常见于急性HCV感染，是诊断丙肝的早期敏感指标；
是HCV活动的指标，是判断HCV传染性的指标。
五、感染免疫学指标检测
• 血清抗链球菌溶血素“O”测定
• 参考值：乳胶凝集法（LAT）：＜500U • 意义：增高常见于A组溶血链球菌感染相关疾病，如扁桃腺炎、感染性
心内膜炎、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎等。
抗-HBe 乙肝E抗体
乙肝五项
阳性表示感染乙肝阳性表示对乙肝已免疫阳性表示传染性强，复制活跃阳性表示传染性小，复制活性低阳性表示曾经感染过乙肝常见结果解读： 1.+ - + - + 大三阳，传染性强 2.+ - - + + 小三阳，传染性低 3.- + - - - 注射疫苗后已产生抗体 4.- + - + + 乙肝感染恢复期
ASO 在A组溶血链球菌感染后1周开始升高，4~6周达高峰，可持续几个月
或几年。
血清C-反应蛋白（CRP）测定
C-反应蛋白是一种由肝脏合成的，能与肺炎双球菌C多糖体起反应的急性时相反应蛋白，具有激活补体，促进吞噬和免疫调理作用。
• 参考值：＜8.2mg/L（免疫比浊法）
• 意义：组织损伤，如大手术，严重创伤，烧伤，心肌梗死等，发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下降。 • 风湿热活动期，可达200mg/L以上。 • 细菌性感染常明显升高，病毒性感染升高不明显或轻度升高。 • 恶性肿瘤，器官移植后排斥反应，妊娠等可见明显升高可在发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下降至正常。
艾滋病血清学检查
• 艾滋病抗体检测（抗HIV）：筛查方法包括ELISA法、化学发光法或免疫荧光试验、快速检测等，确证试验常用的方法是免疫印迹法。如复查后仍有一种或两种试剂呈阳性反应，需进行HIV抗体确证试验。 HIV病毒载量测定检测PCR法：预测疾病进程、提供开始抗病毒治疗依据、评估治疗效果、指导治疗方案调整以及HIV感染早期诊断的参考指标。

实验报告 - 医学免疫学

实验报告 - 医学免疫学
实验名称：人类血清免疫球蛋白含量测定实验
一、实验目的：
本实验旨在通过学习单因素比较法测定人类血清免疫球蛋白的含量。

二、实验原理：
本实验采用单因素比较法，利用已知浓度标准品与待测样品进行比较，从而测定待测样品中免疫球蛋白的含量。

在本实验中，用样品与标准品混合后进行免疫共沉淀，得到的沉淀物可以用BCA法或者Bradford法定量，从而测定待测样品中免疫球蛋白的含量。

三、实验步骤：
1. 准备标准品和待测样品，标准品为人类免疫球蛋白。

2. 将标准品和待测样品分别加入试管中，每个试管加入1 ml。

3. 加入NaCl溶液至试管至5 ml。

4. 加入100 μl的兔抗人IgG抗血清，覆盖瓶口，置于4℃静置过夜。

5. 旋转离心，取上清液并分别定量。

四、实验结果：
本实验得到的结果如下表所示：
样品编号 | 试剂盒编号 | 每1 ml含IgG量（mg）
--------- |----------| ---------------------
样品1 | 001 | 10.2
样品2 | 002 | 9.6
样品3 | 003 | 12.0
样品4 | 004 | 11.5
标准品 | 005 | 13.0
根据实验结果可以看出，样品中免疫球蛋白的含量相对于标准品略有差异，但整体来说，差异并不明显，说明本实验所使用的测定方法准确可靠。

本实验结果为进一步的医学研究提供了重要数据，可为医生提供更准确的诊断结果，为医学研究提供了有力支持。

血清免疫球蛋白M的测定及其医学意义

血清免疫球蛋白M的测定及其医学意义
Ting Bao was revised on January 6, 20021
血清免疫球蛋白A、G、M的测定及其医学意义
免疫球蛋白G（IgG）
【正常参考值】6～16g/L
【临床意义】
免疫球蛋白的血清含量与年龄有一定关系，儿童偏低，随着年龄的增长其含量逐渐升高。

增高：见于IgG型多发性骨髓瘤、慢性肝病、慢性感染、结缔组织病、过敏性紫癜、恶性淋巴瘤、牛皮癣、麻风病、疟疾、肾炎。

减低：先天性免疫缺陷病、肾病综合征、病毒感染、蛋白丢失性疾病、免疫抑制治疗。

免疫球蛋白A（IgA）
【正常参考值】0.76～3.9g/L
【临床意义】
增高：肝脏疾病、结缔组织疾病、IgA型多发性骨髓瘤、肺结核、急性肾炎等。

减低：免疫缺陷病、选择性IgA缺陷病、后天性低丙种球蛋白血症、肾病综合征、慢性淋巴细胞性白血病、何杰金病。

免疫球蛋白M（IgM）
【正常参考值】0.4～3.45g/L
【临床意义】
增高：巨球蛋白血症、病毒性肝炎急性期、结缔组织疾病、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多症、伤寒、梅毒、黑热病、疟疾、丝虫病、支原体肺炎、风疹等。

减低：免疫缺陷病、IgA、IgG型的多发性骨髓瘤、何杰金病、慢性淋巴细胞性白血病、先天愚型、蛋白丢失性胃病、网状内皮细胞增生性疾病、尿毒症。

免疫球蛋白的检测方法

免疫球蛋白的检测方法免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称Ig）是一类在机体免疫应答中起关键作用的蛋白质，它能够识别和结合抗原，参与免疫反应的调节和执行。

因此，对免疫球蛋白的检测具有重要的临床意义。

本文将介绍免疫球蛋白的检测方法，以及各种方法的优缺点和适用范围。

一、免疫球蛋白的定量检测方法。

1. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）。

ELISA法是一种常用的免疫球蛋白定量检测方法，其原理是利用酶标记抗体与待测血清中的免疫球蛋白结合，再通过底物的反应产生显色反应来定量测定免疫球蛋白的含量。

ELISA法操作简便，灵敏度高，且能够同时检测多个样本，因此被广泛应用于临床诊断和科研领域。

2. 免疫荧光法。

免疫荧光法是利用荧光标记的抗体与待测血清中的免疫球蛋白结合，再通过荧光显微镜观察荧光信号来定量测定免疫球蛋白的含量。

该方法操作简单，对样本的要求较低，且具有较高的特异性和灵敏度，适用于多种免疫球蛋白的检测。

二、免疫球蛋白的定性检测方法。

1. 免疫固定电泳法。

免疫固定电泳法是一种通过电泳分离待测血清中的免疫球蛋白亚型的方法。

该方法操作简便，能够快速、准确地对免疫球蛋白的亚型进行鉴定，对于某些免疫球蛋白病的诊断具有重要意义。

2. 免疫印迹法（Western Blot）。

免疫印迹法是一种通过将待测血清中的免疫球蛋白分离并转移至膜上，再通过特异性抗体的结合来检测免疫球蛋白的方法。

该方法具有高度的特异性和灵敏度，能够对免疫球蛋白进行准确的定性鉴定。

三、各种方法的优缺点和适用范围。

1. ELISA法的优点是操作简便，灵敏度高，适用于大规模样本的检测，但其缺点是对待测物质的亲和性要求较高。

2. 免疫荧光法的优点是具有较高的特异性和灵敏度，适用于多种免疫球蛋白的检测，但其缺点是需要荧光显微镜等专门设备。

3. 免疫固定电泳法的优点是操作简便，能够快速、准确地对免疫球蛋白的亚型进行鉴定，但其缺点是不能进行定量测定。

4. 免疫印迹法的优点是具有高度的特异性和灵敏度，能够对免疫球蛋白进行准确的定性鉴定，但其缺点是操作较为繁琐，且耗时较长。

IgE检测的临床意义

IgE检测在临床中具有重要的意义，它主要通过测定血液中IgE（免疫球蛋白E）的水平来反映机体的过敏状态和免疫功能。

IgE是一种介导Ⅰ型变态反应的抗体，在血清中含量相对较少，但其水平的变化与多种疾病密切相关。

以下是IgE检测的临床意义：1. 过敏诊断IgE检测在过敏性疾病的诊断中起着关键作用。

对于有过敏症状的患者，如过敏性鼻炎、哮喘、湿疹、荨麻疹等，IgE检测有助于明确过敏原。

当患者接触过敏原后，体内会产生特异性IgE抗体，检测这些抗体可以确定过敏原的种类，从而指导患者避免接触过敏原和进行特异性免疫治疗。

2. 寄生虫感染评估在寄生虫感染时，机体的免疫反应会导致IgE水平升高。

因此，IgE检测可以作为寄生虫感染的辅助诊断指标之一，如蛔虫、钩虫、绦虫等感染。

但需要注意的是，IgE检测并不是寄生虫感染的唯一诊断依据，还需要结合临床症状、粪便检查等综合判断。

3. 免疫性疾病监测IgE水平的变化也与某些免疫性疾病相关，如过敏性紫癜、系统性红斑狼疮等。

定期检测I gE水平可以帮助医生了解疾病的进展和治疗效果，从而调整治疗方案。

4. 儿童免疫系统评估儿童的免疫系统尚在发育中，IgE水平的变化对于评估其免疫功能和过敏倾向具有参考价值。

例如，婴幼儿时期IgE水平可能会随着年龄增长而逐渐变化，异常升高可能提示存在潜在的过敏问题。

5. 药物反应监测免疫调节剂等药物可能会影响免疫系统，导致IgE水平的改变。

因此，在用药治疗期间进行IgE检测可以监测药物的免疫相关副作用，及时调整治疗策略。

6. 特应性皮炎诊断特应性皮炎是一种常见的慢性炎症性皮肤病，与遗传和免疫因素密切相关。

IgE检测在特应性皮炎的诊断和病情评估中具有重要意义，高水平的IgE往往与疾病的严重程度和复发风险相关。

7. 病情严重程度评估IgE的水平还可以反映过敏反应的严重程度。

一般来说，IgE水平越高，说明过敏反应越严重。

这有助于医生评估患者的病情，并采取相应的治疗措施。

血清免疫球蛋白IgG提取

实验一血清免疫球蛋白IgG的提取
此处添加副标题内容免疫球蛋白IgG提取原理；
熟悉血清免疫球蛋白IgG提取操作过程和方法
原理 1
IgG是血清中主要的免疫球蛋白，占全部抗体含量的70 ％－75％，在临床免疫学检验技术中常用到的第二抗体就是通过用纯化人IgG作抗原免疫动物而来
结果判断
效价可用免疫双扩散试验判断特异性则可通过双扩、免疫电泳或交叉凝集试验进行考察
1
思考题
2
盐析法提取免疫球蛋白的实验原理？
盐析法提取免疫球蛋白时，主要的影响因素有哪些？
注意事项
蛋白质的浓度、盐的浓度、PH值、温度对盐析的效果有影响
饱和硫酸铵溶液的滴加方式
盐析后放置时间、离心操作的速度、时间
透析袋的使用
01 方法评价
02 硫酸铵水中溶解度高，受温度影响小，不易使蛋白质变性，操作简单，为盐析中常用的中性盐
硫酸铵中含有氮，会干扰蛋白质的测定，且溶液的缓冲能力差，故多用于大量蛋白的粗提。若要获得纯化的免疫球蛋白，必须经过凝胶过滤、离子交换层析和亲和层析进一步提纯
分在此时不易沉淀，通过离心可将两者分离。
原理
02
材料
样本正常人血清
试剂
○ 生理盐水、饱和硫酸铵溶液、 ○ 透析缓冲液
主要器材离心机冰箱透析袋紫外分光光度计等
操作步骤
1.25ML血清＋1.25ML生理盐水滴加饱和硫酸铵溶液2.5ML
室温静置30min, 离心4000rpm,10min
弃去上清液（含清蛋白）
沉淀溶于生理盐水,使体积达1.25ML 滴加饱和硫酸铵溶液0.625ML
室温静置30min,
重
离心4000rpm,10min

临床常用免疫学检查

临床常用免疫学检查
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血清免疫球蛋白的检测
免疫球蛋白是指由浆细胞所产生的,具有抗体活性和(或)抗体样结构的球蛋白.
主要分为IgG,IgA,IgM,IgE和IgD五类.
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一免疫球蛋白G检测
IgG是人体含量最多和最主要的Ig, 占总Ig的70%-80%,是唯一能通过胎盘的Ig.具有抗细菌、抗病毒和抗寄生虫等功能。 [参考值]单向免疫扩散法：7.6-16.6g/L
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2. 3个月后不转阴,以变为慢性: 慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌
3.慢性HBsAg携带者
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HBsAb:针对HBsAg产生,有一定的中和作用,阳性表明机体有一定免疫力. [参考值]阴性 [临床意义]①阳性提示急性感染后康复, 在发病后转阳或效价升高有意义.一般36月后出现,可持续多年. ②判断疫苗的质量最主要的指标. ③接受HBsAb阳性血的受血者,可出现短暂阳性.
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HCV-IgG:出现慢,2-6月后阳性 [参考值]阴性 [临床意义] ①抗HCV-IgG阳性表明已有HCV ②献血员筛选
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肿瘤标志物检测
肿瘤标志物(tumor marker):肿瘤在发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或机体对肿瘤反应而产生的一种物质。反映细胞恶变各阶段表型及基因特征性。
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2 CH50降低：更有意义。见于肾小球肾炎、自身免疫性疾病（SLE、RA）、感染性心内膜炎、病毒性肝炎、慢性肝病和遗传性血管神经水肿。
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四补体C3检测
C3是补体系统中含量最多的物质，在传统途径和旁路途经中发挥重要作用。 [参考值]单向免疫扩散法：1.14+0.27g/l [临床意义]1增高：急性炎症、传染病早期、肿瘤、排斥反应。 2降低：①消耗增多：肾炎、活动性SLE、 RA。②合成不足：肝病。③大量丧失：肾病综合症、大面积烧伤等。

血清免疫学自身抗体检查结果解析

IgE。
作用及意义：测定人体血清免疫球蛋白的含量，是了解机体免疫功能的重要方
法，对自身免疫性疾病的诊断有一定的价值，特别是对浆细胞恶变、体液免疫缺陷的诊断是很重要的指标。此外，对观察疾病的疗效也有一定价值。但血清免疫球蛋白的变化范围较大，又很少有特异性，因此，在诊断及分析其意义时必须密切结合临床疾肝炎抗体：是HCV感染的标志，抗-HCV的存在一般表示
有传染性。一旦查出丙肝抗体阳性，只能说明曾经感染过，但是现在体内是否还有病毒，则需要进行 HCV-RNA的化验。
• HCV-RNA测定：HCV-RNA阳性与HCV现存感染有关，明确病毒有无复
制和传染性，阳性需进一步治疗。
补体名称临床意义
增高：见于恶性肿瘤、急性炎症、急性组织损伤及妊娠检测以红细胞50%溶血。总补体溶血活性试管法：为判定终点，测知总补降低：见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病、亚急性（CH50） 50000~100000U/L 体溶血活性。感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。主要由巨噬细胞和肝脏合成，在经典激活途径免疫比浊法与旁路激活途径中发挥 0.85~1.70g/L 重要作用。由肝脏、吞噬细胞合成，单向免疫扩散法：参与补体的经典激活途 0.197+/-0.109/L 径。增高：作为急性时相蛋白，在急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥反应时增高。降低：补体消耗过多（链球菌感染后肾小球肾炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节炎及移植排斥反应）；合成原料不足（肝硬化、慢性活动性肝炎和重症急性肝炎）；丢失太多（于外伤、手术和大失血）；先天性补体缺乏临床意义基本与C3相似，降低还见于多发性骨髓瘤、 IgA肾病、遗传性C4缺乏症等。