第十一章 动物实验技术
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3) 二、豚鼠 1. 耳缘切口采血： 0.5ml。 2. 心脏采血： 3. 足背正中静脉采血：
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三、家兔 1. 耳缘静脉采血：5-10ml。 2. 耳中动脉采血：15ml。 3. 心脏采血：20-25ml。
4. 四、犬 5. 前肢皮下头静脉和后肢外侧小隐静脉采血：10-
20ml。 6. 颈静脉采血： 7. 心脏采血：
D(土SC1s1))、后月存77 龄活(日土数2天的)差、异生，理选精择神170同状品态系、、饲性养别条(件雌等、小雄95鼠各3半0)只、，体依重 随机数字2表随机分为3组，在相12同条件下接种菌苗，后11观察存活
日数如下5表。
6
6
▪
4
6
3
4
7
10
实用文档
4. 随机区组设计
5.
在动物实验时，可将一窝小鼠或大鼠划为
20
实用文档
第五节 动物实验基本设计
一、设计原则 1.对照（antitheses）性原则：
是要求在实验中设立可与实验组比较，用于消除 各种无关因素影响的对照组。
空白对照：不施加任何处理因素 实验条件对照：
不用处理因素，但施加某种与处理因素相同的实 验条件。 标准对照 ：
用现有标准方法对照，如已知有效药物、公认标 准疗法。
实用文档
举例： 给某种动物饲喂一种药物，预实验中每月体重增
长比对照增加30±15g（均值±标准差）。设显著水平 为95%，检验能力为80%，则正式实验所需样本含量n 为：
n=2152（1.96+0.842）2/302=3.93 即每组只需4只动物。
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二、基本设计方法
1. 单组比较设计 指在同一个体上观察实验处理前后某种观测指
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1) 一般估测的样本数 小动物(大鼠、小鼠、蛙、鱼)：每组10-30例,计量资 料每组不少于10例, 计数资料每组不少于30例；
中等动物(豚鼠、家兔) 每组8-20例,计量资料每组不 少于8例, 计数资料每组不少于20例；
大动物(犬、猫、猪、羊等) 每组6-20例,计量资料每 组不少于6例, 计数资料每组不少于20例.
犬、猫
大鼠、小鼠 兔
大鼠 兔
大鼠、小鼠
给药途径 静脉 腹腔 腹腔
静脉 腹腔 腹腔 腹腔
腹腔 静脉 腹腔 静脉 皮下或肌肉
剂量(mg/kg) 30
40～50 40～50
常用浓度(％) 3 3 2
15-20
2
40
1
15-20
1
10-40
10
100～200
10
80-100
2
50
2
750-1000
30
800-1000
实用文档
2．随机（random）化原则 动物实验一般采用完全随机分配或分层随机分配。
小动物实验一般先配对或配伍，然后“对”内或“伍” 内进行随机分配
大动物多半先分层，然后在层内随机分配。
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3．重复（repetition）的原则
指同一处理要设置多个样本例数降低试验误差。
应该在保证实验结果具有一定可靠性的条件下，确定 最低的样本例数
灌 胃 皮下注射
2mL
lmL
16号(钝头) 6号
lmL 9号(钝头)
0.4mL 5 l/2号
3mL
LmL
16号(钝头) 6 1/2号
20 mL
10号导尿 管
2mL 6 1/2号
肌肉注射 0.4mL 6号 0.4mL 5 1/2号 0.5mL 6 1/2号 2mL 6 1/2号
腹腔注射 2mL 6号 lmL
5 1/2号 4mL 7号 5mL 7号
静脉注射 4mL 5号 0.8mL 4号 5mL 5号 10mL 6号
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人与实验动物之间药物剂量的换算
人与实验动物对同一药物的耐受性，动 物比人大，即单位体重的用药量比人要 大。 1. 一般可按下列比例换算，每单位体重人 的药量为1，则小鼠、大鼠为25-50， 兔、豚鼠为15-20，狗、猫为5-10。
而且解释困难。
1. 举例：观察绝经促性腺激素(HMG)、绒促激素 (HCG)及其交互作用，随机将20只幼雌大白鼠分成4 组。第一组空白，第二组每天注射HMG l个单位， 第三组每天注射HCG 20单位，第四组每天HMG l 单位、HCG 20单位，一定时间后取卵巢称重，以每 10g大白鼠体重卵巢mg数表示(mg/10g)，结果如 表：
▪ 缺点：应考虑种属、品系、性别、年龄与体重、同 父母、同胎次出生等因素对实验结果的影响。
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大白鼠对别
正常饲料组
VitE缺乏组
1
3.95
2.65
2
3.80
3.35
3
3.45
2.45
▪ 举例：为研4究VitE缺乏饲料对大3.鼠35肝脏中VitA含量(u2/.6m5 g)的影
响，选取同5性别(雌、雄各半)、3同.70月龄(断乳1个月)、2同.65体重
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2. 在新药药效研究中多以下列公式转换人 及不同动物之间的药量：
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人及不同实验动物之间药物量对应值
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例如： 某药物在60kg体重的病人的剂量为 21.0g.kg-1 . d-1， 一只5kg的猴为53.6 g.kg-1 . d-1， 一只10kg重的犬为40.4 g.kg-1 . d-1 ， 一只20g的小鼠则为260.6 g.kg-1 . d-1 。
一个区组，确定数个区组后，按区组随机化原则将
各区组的动物随机分配到处理组和对照组。
▪ 优点：均衡性好，可减少误差，提高实验效率，统 计分析也较简易。
▪ 缺点：抗数据缺失能力较低。若一个区组的某个动 物发生意外，那么整个区组都得放弃，或不得已采 取缺项估计。
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大鼠种系
0.2
0.4
0.8
1
16
116
自身。 2. 来源于动物的年龄、体重、同窝动物的数量
及其它可能在实验前就已经存在的差异。 3. 基因型和环境之间的相互作用对实验间和实
验内变异以及处理有不同的影响。
实用文档
实用文档
2) 按统计学方法测算的样本数 n=2б2(tα+tβ)2/δ2 n为样本含量，б为标准差； tα取有显著性的t分布值，t0.05=1.96； tβ为无显著性的t分布值，1-β为实验检验能力，动物 实验一般取1-β=0.80，t0.20=0.842； δ为处理组与对照组均值间的差异，可从预实验或文 献资料库中获得。
145
▪ 举例：2有人用4种不4同2种系的未成6年8大鼠做实验1，15每一
种雌以性同激3窝素(雌m大g白/1鼠003g7只0)后，，随在机相分同配1条注11件射下3种称不其同子剂宫13量重3 的量
(g)，见4 表：
42
358
480
▪
实用文档
5. 析因设计
6.
可以分析多种交互作用，但一般采用较简
单的析因试验。当水平和因素过多，不但计算复杂
(50g+2g)6等正常大鼠配成10对3.，90对每对中每只大鼠3按.15随机数字
表(或抽签)7随机分配到给以正常3饲.80料组和VitE缺乏饲料2.9组0 ，分饲
条件相同的8不同笼中，经1个月3饲.05食后杀掉，按每对分1.9别0 取肝脏，
测得VitA含量(u/mg)如表。
9
3.65
1.70
▪
10
标的变化。 ▪ 优点：能排除个体间生物差异。 ▪ 缺点：不适用于在同一个体上多次进行实验和观察
的情况。
实用文档
2. 配对比较设计
3.
指实验前将动物按性别、体重或其它有关
因素加以配对，以基本相同的两个动物为一对，配
成若干对，然后将一对动物随机分配到两组中。
▪ 优点：减少两组实验误差及动物间的个体差异。
实用文档
常用实验动物的 最大安全采血量与最小致死采血量
动物种类 小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 狗 猴
最大安全采血量(mL) 最小致死采血量(mL)
0.1
0.3
1
2
5
10
10
40
50
300
15
60
ห้องสมุดไป่ตู้实用文档
常用麻醉剂的用法及剂量
麻醉剂 戊巴比妥钠
硫喷妥钠
氯胺酮 氯醛糖 乌拉坦
动物种类 犬、兔
大鼠、小鼠、 豚鼠 犬、兔 大鼠 小鼠
复性。 ▪ 实验结果必须是建立在可重复实验的基础上。
实用文档
2. 实验内变异 1. 包括：实施实验过程造成的变异、分析变异、
个体内变异和固有的个体间变异。 2. 通过明显的减少实验结果中个体间变异来减
少实验动物数量是可行的。
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3. 动物实验间和实验内变异的来源 1. 动物实验中变异的一个重要来源是实验动物
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实验动物的血样采取
一、小、大鼠 剪尾采血
1) 此法每鼠可采10次以上。 2) 小鼠每次0.1ml。 3) 大鼠每次0.4ml。
2. 眼眶后静脉丛采血 1) 小鼠每次0.2-0.3ml。 2) 大鼠每次0.5ml。
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3. 股动脉采血 1) 小鼠每次0.5ml。 2) 大鼠每次2.0ml。
第十一章 动物实验技术
▪第一节 实验动物的固定、标记 ▪第二节 实验动物的给药途径和采血方法 ▪第三节 实验动物用药量的确定及计算方法 ▪第四节 实验动物的麻醉和处死方法 ▪第五节 动物实验基本设计
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常用药物的最大给药量
动物 大鼠 小鼠 豚鼠 家兔
项目 最大给药量 使用针头 最大给药量 使用针头 最大给药量 使用针头 最大给药量 使用针头
实用文档
1 空白
9 12 11 13 10 ∑ 55
2 HMG
12 11 14 15 13 65
3 HCG
14 17 16 13 19 79
4 HMG+HCG
39 29 41 46 40 195
实用文档
三、实验结果变异分析 1. 实验间变异 ▪ 处理会使对照组和实验组平均度量值发生变
化，即实验间变异 。 ▪ 降低实验间效应变异将减少对同一实验的重
2.00
2.50
实用文档
3. 完全随机化设计
4.
将动物随机分配到处理组及对照组做实验观察。
▪ 优点：统计分析也比较简单，抗数据缺失能力较强。
▪ 缺点：对非实验因素缺乏有效控制 ，适用于实验对 象同质性较好的实验设计。
实用文档
9D
11C
DSC1
2
5
7
4
6
11
3
8
6
▪ 举例：为2 比较小白鼠接种3种不5 同菌型伤寒杆菌(9D、6 11C、
实用文档
三、家兔 1. 耳缘静脉采血：5-10ml。 2. 耳中动脉采血：15ml。 3. 心脏采血：20-25ml。
4. 四、犬 5. 前肢皮下头静脉和后肢外侧小隐静脉采血：10-
20ml。 6. 颈静脉采血： 7. 心脏采血：
D(土SC1s1))、后月存77 龄活(日土数2天的)差、异生，理选精择神170同状品态系、、饲性养别条(件雌等、小雄95鼠各3半0)只、，体依重 随机数字2表随机分为3组，在相12同条件下接种菌苗，后11观察存活
日数如下5表。
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4. 随机区组设计
5.
在动物实验时，可将一窝小鼠或大鼠划为
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第五节 动物实验基本设计
一、设计原则 1.对照（antitheses）性原则：
是要求在实验中设立可与实验组比较，用于消除 各种无关因素影响的对照组。
空白对照：不施加任何处理因素 实验条件对照：
不用处理因素，但施加某种与处理因素相同的实 验条件。 标准对照 ：
用现有标准方法对照，如已知有效药物、公认标 准疗法。
实用文档
举例： 给某种动物饲喂一种药物，预实验中每月体重增
长比对照增加30±15g（均值±标准差）。设显著水平 为95%，检验能力为80%，则正式实验所需样本含量n 为：
n=2152（1.96+0.842）2/302=3.93 即每组只需4只动物。
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二、基本设计方法
1. 单组比较设计 指在同一个体上观察实验处理前后某种观测指
实用文档
1) 一般估测的样本数 小动物(大鼠、小鼠、蛙、鱼)：每组10-30例,计量资 料每组不少于10例, 计数资料每组不少于30例；
中等动物(豚鼠、家兔) 每组8-20例,计量资料每组不 少于8例, 计数资料每组不少于20例；
大动物(犬、猫、猪、羊等) 每组6-20例,计量资料每 组不少于6例, 计数资料每组不少于20例.
犬、猫
大鼠、小鼠 兔
大鼠 兔
大鼠、小鼠
给药途径 静脉 腹腔 腹腔
静脉 腹腔 腹腔 腹腔
腹腔 静脉 腹腔 静脉 皮下或肌肉
剂量(mg/kg) 30
40～50 40～50
常用浓度(％) 3 3 2
15-20
2
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2．随机（random）化原则 动物实验一般采用完全随机分配或分层随机分配。
小动物实验一般先配对或配伍，然后“对”内或“伍” 内进行随机分配
大动物多半先分层，然后在层内随机分配。
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3．重复（repetition）的原则
指同一处理要设置多个样本例数降低试验误差。
应该在保证实验结果具有一定可靠性的条件下，确定 最低的样本例数
灌 胃 皮下注射
2mL
lmL
16号(钝头) 6号
lmL 9号(钝头)
0.4mL 5 l/2号
3mL
LmL
16号(钝头) 6 1/2号
20 mL
10号导尿 管
2mL 6 1/2号
肌肉注射 0.4mL 6号 0.4mL 5 1/2号 0.5mL 6 1/2号 2mL 6 1/2号
腹腔注射 2mL 6号 lmL
5 1/2号 4mL 7号 5mL 7号
静脉注射 4mL 5号 0.8mL 4号 5mL 5号 10mL 6号
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人与实验动物之间药物剂量的换算
人与实验动物对同一药物的耐受性，动 物比人大，即单位体重的用药量比人要 大。 1. 一般可按下列比例换算，每单位体重人 的药量为1，则小鼠、大鼠为25-50， 兔、豚鼠为15-20，狗、猫为5-10。
而且解释困难。
1. 举例：观察绝经促性腺激素(HMG)、绒促激素 (HCG)及其交互作用，随机将20只幼雌大白鼠分成4 组。第一组空白，第二组每天注射HMG l个单位， 第三组每天注射HCG 20单位，第四组每天HMG l 单位、HCG 20单位，一定时间后取卵巢称重，以每 10g大白鼠体重卵巢mg数表示(mg/10g)，结果如 表：
▪ 缺点：应考虑种属、品系、性别、年龄与体重、同 父母、同胎次出生等因素对实验结果的影响。
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大白鼠对别
正常饲料组
VitE缺乏组
1
3.95
2.65
2
3.80
3.35
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3.45
2.45
▪ 举例：为研4究VitE缺乏饲料对大3.鼠35肝脏中VitA含量(u2/.6m5 g)的影
响，选取同5性别(雌、雄各半)、3同.70月龄(断乳1个月)、2同.65体重
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2. 在新药药效研究中多以下列公式转换人 及不同动物之间的药量：
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人及不同实验动物之间药物量对应值
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例如： 某药物在60kg体重的病人的剂量为 21.0g.kg-1 . d-1， 一只5kg的猴为53.6 g.kg-1 . d-1， 一只10kg重的犬为40.4 g.kg-1 . d-1 ， 一只20g的小鼠则为260.6 g.kg-1 . d-1 。
一个区组，确定数个区组后，按区组随机化原则将
各区组的动物随机分配到处理组和对照组。
▪ 优点：均衡性好，可减少误差，提高实验效率，统 计分析也较简易。
▪ 缺点：抗数据缺失能力较低。若一个区组的某个动 物发生意外，那么整个区组都得放弃，或不得已采 取缺项估计。
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大鼠种系
0.2
0.4
0.8
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自身。 2. 来源于动物的年龄、体重、同窝动物的数量
及其它可能在实验前就已经存在的差异。 3. 基因型和环境之间的相互作用对实验间和实
验内变异以及处理有不同的影响。
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2) 按统计学方法测算的样本数 n=2б2(tα+tβ)2/δ2 n为样本含量，б为标准差； tα取有显著性的t分布值，t0.05=1.96； tβ为无显著性的t分布值，1-β为实验检验能力，动物 实验一般取1-β=0.80，t0.20=0.842； δ为处理组与对照组均值间的差异，可从预实验或文 献资料库中获得。
145
▪ 举例：2有人用4种不4同2种系的未成6年8大鼠做实验1，15每一
种雌以性同激3窝素(雌m大g白/1鼠003g7只0)后，，随在机相分同配1条注11件射下3种称不其同子剂宫13量重3 的量
(g)，见4 表：
42
358
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5. 析因设计
6.
可以分析多种交互作用，但一般采用较简
单的析因试验。当水平和因素过多，不但计算复杂
(50g+2g)6等正常大鼠配成10对3.，90对每对中每只大鼠3按.15随机数字
表(或抽签)7随机分配到给以正常3饲.80料组和VitE缺乏饲料2.9组0 ，分饲
条件相同的8不同笼中，经1个月3饲.05食后杀掉，按每对分1.9别0 取肝脏，
测得VitA含量(u/mg)如表。
9
3.65
1.70
▪
10
标的变化。 ▪ 优点：能排除个体间生物差异。 ▪ 缺点：不适用于在同一个体上多次进行实验和观察
的情况。
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2. 配对比较设计
3.
指实验前将动物按性别、体重或其它有关
因素加以配对，以基本相同的两个动物为一对，配
成若干对，然后将一对动物随机分配到两组中。
▪ 优点：减少两组实验误差及动物间的个体差异。
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常用实验动物的 最大安全采血量与最小致死采血量
动物种类 小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 狗 猴
最大安全采血量(mL) 最小致死采血量(mL)
0.1
0.3
1
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10
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50
300
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60
ห้องสมุดไป่ตู้实用文档
常用麻醉剂的用法及剂量
麻醉剂 戊巴比妥钠
硫喷妥钠
氯胺酮 氯醛糖 乌拉坦
动物种类 犬、兔
大鼠、小鼠、 豚鼠 犬、兔 大鼠 小鼠
复性。 ▪ 实验结果必须是建立在可重复实验的基础上。
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2. 实验内变异 1. 包括：实施实验过程造成的变异、分析变异、
个体内变异和固有的个体间变异。 2. 通过明显的减少实验结果中个体间变异来减
少实验动物数量是可行的。
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3. 动物实验间和实验内变异的来源 1. 动物实验中变异的一个重要来源是实验动物
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实验动物的血样采取
一、小、大鼠 剪尾采血
1) 此法每鼠可采10次以上。 2) 小鼠每次0.1ml。 3) 大鼠每次0.4ml。
2. 眼眶后静脉丛采血 1) 小鼠每次0.2-0.3ml。 2) 大鼠每次0.5ml。
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3. 股动脉采血 1) 小鼠每次0.5ml。 2) 大鼠每次2.0ml。
第十一章 动物实验技术
▪第一节 实验动物的固定、标记 ▪第二节 实验动物的给药途径和采血方法 ▪第三节 实验动物用药量的确定及计算方法 ▪第四节 实验动物的麻醉和处死方法 ▪第五节 动物实验基本设计
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常用药物的最大给药量
动物 大鼠 小鼠 豚鼠 家兔
项目 最大给药量 使用针头 最大给药量 使用针头 最大给药量 使用针头 最大给药量 使用针头
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1 空白
9 12 11 13 10 ∑ 55
2 HMG
12 11 14 15 13 65
3 HCG
14 17 16 13 19 79
4 HMG+HCG
39 29 41 46 40 195
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三、实验结果变异分析 1. 实验间变异 ▪ 处理会使对照组和实验组平均度量值发生变
化，即实验间变异 。 ▪ 降低实验间效应变异将减少对同一实验的重
2.00
2.50
实用文档
3. 完全随机化设计
4.
将动物随机分配到处理组及对照组做实验观察。
▪ 优点：统计分析也比较简单，抗数据缺失能力较强。
▪ 缺点：对非实验因素缺乏有效控制 ，适用于实验对 象同质性较好的实验设计。
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▪ 举例：为2 比较小白鼠接种3种不5 同菌型伤寒杆菌(9D、6 11C、