胚胎移植讲义
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
2.诱导双胎; 3.濒危动物的拯救与保护。将胚胎移入同种或近缘
种生殖道内,以获得存活动物; 4.保存遗传资源、胚胎库; 5.胚胎移植是胚胎工程操作的重要步骤。
2020/6/22
7
二、胚胎移植的生理学基础与 基本原则
1.胚胎移植的生理学基础 2.胚胎移植的基本原则
2020/6/22
8
1.胚胎移植的生理学基础
胚胎移植技术
2020/6/22
1
一 、胚胎移植概述
1.胚胎移植的概念 2.胚胎移植技术的发展简史 3.胚胎移植在畜牧生产上的意义
2020/6/22
2
1.胚胎移植的概念
胚胎移植(embryo transfer,ET)也称受精 卵移植,是指将一头良种母畜配种后的早期 胚胎取出,或者由体外受精及其他方式获得 的胚胎,移植到另一头同种的生理状态相同 的母畜体内,继续发育成为新个体,所以又 称之为人工授胎或借腹怀胎。
绵羊:FSH剂量(150300 IU)周期为12天,开
始注射,6次3d,递减,在第4天注射FSH时,肌 肉注射氯前列烯醇0.2mg。
2020/6/22
17
各种动物的超排程序
山羊:减量法6次注射3d, 100IU×1+75IU×1+ 50IU×3+25IU=350IU 或 100+50×4+ 25×1=325IU,首次注射后36h撤栓,并在36h和 48h分别注射PG 0.1mg。
• 提供胚胎的个体称为------供体(donor)
• 接受胚胎的个体称为------受体(recipient)
2020/6/22
3
2.胚胎移植技术的发展简史
• 2.1初始阶段
• 189ห้องสมุดไป่ตู้-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔 的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内, 分别获得仔兔2只。
• 2.2初级阶段
1970-1980 加美开始成立牛胚胎移植公司, 1973年牛冻胚移植成功(英)。
• 2.5实用化研究阶段
1982- 大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、 胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日 德广泛开展。克隆羊诞生。
2020/6/22
6
3.胚胎移植在畜牧生产上的意义
1.提高优良母畜繁殖力,加快优良品种改良和动物育 种步伐;
• 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵 羊、山羊小家畜方面研究,成功率35%左 右。
2020/6/22
4
• 2.3发展阶段
• 1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功, 之后日、美采用非手术法移植成功。胚胎 移植成功率达70-80%。
2020/6/22
5
• 2.4实用化初始阶段
2020/6/22
12
三、胚胎移植的技术程序
受体
– 土种动物或者本地品种 – 体格接近,营养良好 – 无疾病 – 繁殖生理特点与供体相似,比如多周期发情
移植前2个月进行编号和补饲
2020/6/22
13
三、胚胎移植的技术程序
2.供体超数排卵 Superovulation or Multiple ovulation
超排应用的主要激素
– 促性腺激素 FSH(中科院动物所 宁波 加拿大 日本)
PMSG(eCG)及APMSG(抗PMSG) LH hCG
– GnRH(促排3号)
– P4
– PG(氯前列烯醇 Cloprostenol,ICI-80996)
2020/6/22
14
• 超排方法:在发情周期的一定时期, 用PMSG或FSH促进卵泡发育,于 发情开始后12-16h和20-24h各配
种(输精)一次,并于第一次配种 后静脉注射hCG或LH,以便排出 多数卵子。
2020/6/22
15
2020/6/22
16
各种动物的超排程序
牛:供体发情后913d中的任何一天开始(日本 进口FSH为9~11天)连续4d (8次)递减注射 FSH,在FSH注射结束前1d,上、下午分别注射 氯前列烯醇0.6mg和0.4mg
2.前列腺素及其类似物处理法 对有功能性黄体的母 畜于注射后4896h内发情:一次PG法、二次PG 法
2020/6/22
22
4、供体配种
• 人工授精 • 自然交配
配种次数应比平常多12次
2020/6/22
23
5、胚胎回收与鉴定
• 收集胚胎就是在配种或输精后的适当时间,从超排供体回 收其胚胎,以备给受体移植,亦称胚胎回收或胚胎采集, 简称采卵。采卵的效果与采集时间、方法和检卵技术均有 关系。
2020/6/22
18
超排效果好的卵巢 黄体
2020/6/22
19
超排效果不好的 卵巢黄体
2020/6/22
20
3.受体的同期发情
对母畜进行同期发情一般采取两种手段: – 一种是延长黄体期:最常用的方法是进行孕激素处理。
常用的有孕酮、甲孕酮、甲地孕酮、炔诺酮、氯地孕 酮等。处理方法是皮下埋植、阴道栓、口服和肌肉注 射等。
9
2. 胚胎移植的基本原则
① 种的一致性:供体和受体属于相同的种 ② 动物生理状态的一致性:黄体期 ③ 解剖部位的一致性:子宫角或者输卵管
2020/6/22
10
胚胎移植原则图解
2020/6/22
11
三、胚胎移植的技术程序
1、供受体的选择与饲养管理 供体
– 遗传品质优秀 – 繁殖性能良好 – 营养状况好,体格健壮 – 无疾病
(1)采卵时间:一般将配种当日定为0 天,由配种后第二 天开始计算采卵天数。根据采集目的不同,决定在第几天 采卵。
(2)采卵方法:有手术法和非手术法两种。在大家畜基本 上已将手术法淘汰,但在绵羊、山羊、猪和实验动物由于 受解剖特点的限制,一直采用手术方法。不管用何种方法,
– 另一种方法是缩短黄体期的方法有①注射促性腺激 素②注射促性腺激素释放激素③注射前列腺素 等。
2020/6/22
21
同期发情的方法
1.孕激素阴道栓法 孕激素可通过口服、注射、皮下 埋植和阴道放置孕激素缓慢释放装置等方法。皮 下埋植或阴道放置缓慢释放装置使用方便易行、 效果可靠、成本低廉,尤其是阴道栓法。
• 成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡,在外源激 素作用下,每个发情期的卵泡发育和排卵数可达十 数个;
• 每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育; • 早期胚胎处于游离状态; • 胚胎发育不存在免疫问题; • 胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组联系; • 胚胎的遗传性不受受体的影响;
2020/6/22
种生殖道内,以获得存活动物; 4.保存遗传资源、胚胎库; 5.胚胎移植是胚胎工程操作的重要步骤。
2020/6/22
7
二、胚胎移植的生理学基础与 基本原则
1.胚胎移植的生理学基础 2.胚胎移植的基本原则
2020/6/22
8
1.胚胎移植的生理学基础
胚胎移植技术
2020/6/22
1
一 、胚胎移植概述
1.胚胎移植的概念 2.胚胎移植技术的发展简史 3.胚胎移植在畜牧生产上的意义
2020/6/22
2
1.胚胎移植的概念
胚胎移植(embryo transfer,ET)也称受精 卵移植,是指将一头良种母畜配种后的早期 胚胎取出,或者由体外受精及其他方式获得 的胚胎,移植到另一头同种的生理状态相同 的母畜体内,继续发育成为新个体,所以又 称之为人工授胎或借腹怀胎。
绵羊:FSH剂量(150300 IU)周期为12天,开
始注射,6次3d,递减,在第4天注射FSH时,肌 肉注射氯前列烯醇0.2mg。
2020/6/22
17
各种动物的超排程序
山羊:减量法6次注射3d, 100IU×1+75IU×1+ 50IU×3+25IU=350IU 或 100+50×4+ 25×1=325IU,首次注射后36h撤栓,并在36h和 48h分别注射PG 0.1mg。
• 提供胚胎的个体称为------供体(donor)
• 接受胚胎的个体称为------受体(recipient)
2020/6/22
3
2.胚胎移植技术的发展简史
• 2.1初始阶段
• 189ห้องสมุดไป่ตู้-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔 的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内, 分别获得仔兔2只。
• 2.2初级阶段
1970-1980 加美开始成立牛胚胎移植公司, 1973年牛冻胚移植成功(英)。
• 2.5实用化研究阶段
1982- 大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、 胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日 德广泛开展。克隆羊诞生。
2020/6/22
6
3.胚胎移植在畜牧生产上的意义
1.提高优良母畜繁殖力,加快优良品种改良和动物育 种步伐;
• 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵 羊、山羊小家畜方面研究,成功率35%左 右。
2020/6/22
4
• 2.3发展阶段
• 1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功, 之后日、美采用非手术法移植成功。胚胎 移植成功率达70-80%。
2020/6/22
5
• 2.4实用化初始阶段
2020/6/22
12
三、胚胎移植的技术程序
受体
– 土种动物或者本地品种 – 体格接近,营养良好 – 无疾病 – 繁殖生理特点与供体相似,比如多周期发情
移植前2个月进行编号和补饲
2020/6/22
13
三、胚胎移植的技术程序
2.供体超数排卵 Superovulation or Multiple ovulation
超排应用的主要激素
– 促性腺激素 FSH(中科院动物所 宁波 加拿大 日本)
PMSG(eCG)及APMSG(抗PMSG) LH hCG
– GnRH(促排3号)
– P4
– PG(氯前列烯醇 Cloprostenol,ICI-80996)
2020/6/22
14
• 超排方法:在发情周期的一定时期, 用PMSG或FSH促进卵泡发育,于 发情开始后12-16h和20-24h各配
种(输精)一次,并于第一次配种 后静脉注射hCG或LH,以便排出 多数卵子。
2020/6/22
15
2020/6/22
16
各种动物的超排程序
牛:供体发情后913d中的任何一天开始(日本 进口FSH为9~11天)连续4d (8次)递减注射 FSH,在FSH注射结束前1d,上、下午分别注射 氯前列烯醇0.6mg和0.4mg
2.前列腺素及其类似物处理法 对有功能性黄体的母 畜于注射后4896h内发情:一次PG法、二次PG 法
2020/6/22
22
4、供体配种
• 人工授精 • 自然交配
配种次数应比平常多12次
2020/6/22
23
5、胚胎回收与鉴定
• 收集胚胎就是在配种或输精后的适当时间,从超排供体回 收其胚胎,以备给受体移植,亦称胚胎回收或胚胎采集, 简称采卵。采卵的效果与采集时间、方法和检卵技术均有 关系。
2020/6/22
18
超排效果好的卵巢 黄体
2020/6/22
19
超排效果不好的 卵巢黄体
2020/6/22
20
3.受体的同期发情
对母畜进行同期发情一般采取两种手段: – 一种是延长黄体期:最常用的方法是进行孕激素处理。
常用的有孕酮、甲孕酮、甲地孕酮、炔诺酮、氯地孕 酮等。处理方法是皮下埋植、阴道栓、口服和肌肉注 射等。
9
2. 胚胎移植的基本原则
① 种的一致性:供体和受体属于相同的种 ② 动物生理状态的一致性:黄体期 ③ 解剖部位的一致性:子宫角或者输卵管
2020/6/22
10
胚胎移植原则图解
2020/6/22
11
三、胚胎移植的技术程序
1、供受体的选择与饲养管理 供体
– 遗传品质优秀 – 繁殖性能良好 – 营养状况好,体格健壮 – 无疾病
(1)采卵时间:一般将配种当日定为0 天,由配种后第二 天开始计算采卵天数。根据采集目的不同,决定在第几天 采卵。
(2)采卵方法:有手术法和非手术法两种。在大家畜基本 上已将手术法淘汰,但在绵羊、山羊、猪和实验动物由于 受解剖特点的限制,一直采用手术方法。不管用何种方法,
– 另一种方法是缩短黄体期的方法有①注射促性腺激 素②注射促性腺激素释放激素③注射前列腺素 等。
2020/6/22
21
同期发情的方法
1.孕激素阴道栓法 孕激素可通过口服、注射、皮下 埋植和阴道放置孕激素缓慢释放装置等方法。皮 下埋植或阴道放置缓慢释放装置使用方便易行、 效果可靠、成本低廉,尤其是阴道栓法。
• 成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡,在外源激 素作用下,每个发情期的卵泡发育和排卵数可达十 数个;
• 每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育; • 早期胚胎处于游离状态; • 胚胎发育不存在免疫问题; • 胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组联系; • 胚胎的遗传性不受受体的影响;
2020/6/22