红曲霉菌株的分离鉴定及产红曲色素发酵条件优化

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能 的测 定 [ . 刀 上海 交 通 大学 学 报 ( 业 科 学版 ) 20 ,7 4 :6 — 农 ,09 2 () 3 3
3 . 67
参 数对红 曲 霉 RP 1液 体 发 酵 产 红 曲色 素 色 价 有 影 一 响, 接种量 为 1 、 5 培养 基初 始 p 值 为 6 0时 , 有 H . 最
菌 目( uoil ) 红 曲 菌 科 ( n sae e 、 曲 菌 属 E rt e 、 as Mo acca ) 红
乳酸, 无水 乙醇 。 高 压灭 菌锅 , 电热恒 温培 养 箱 , 温摇 床 , 恒 超净 工 作 台 , 微镜 , 一1 0型分 光光度计 等 。 显 UV 2 0
c u iu 2 0 @ y h o c r。 h weh a 0 2 ao .o n
目— —— —— ——— —一 —— ——— ——— —
庄 懿 :曲 菌 的 离 定 产 曲 素 酵 件 化22 簟 禧 等红 霉 株 分 鉴 及 红 色 发 条 优 /1 9l o年 N i
E ] 邢 旺兴 , 荣 珍 , 鹤 鸣 。 几 种 常 见 红 曲霉 的 生 理 学 特 性 研 究 2 程 宓 等. [ . 刀 药学 实 践 杂 志 。0 1 1 ():3 -3 . 2 0 ,94 2 124
步有 必 要对 分离 到 的 R 一 P 1进行 1 S r 8 DNA、 GC含 量 测 定 以进 行准确鉴 定 。
, av loJC, i O, a dyA,t I ip 1 3 C rah Os i P n e e a Bo ime t f m o s hB . g ns r M - o n su :tansl t n c r i rd cinadclrs bly J . ac sSri e ci ,ii npo u t n oo t it[] e o tn o a i
摘 要 : 市售 红 曲发 酵 产 品 中成 功 分 离得 到 1 株 红 曲霉 纯 培养 茵株 , 中一 株 肉眼观 察 高 产红 色素 , 过 形 态 特 从 5 其 通
征 观 察‘ 定该 红 曲霉 菌 株 为 红 色红 曲茵 ( n s s ue )命 名 为 R - 。对 红 曲霉 R _ 液 体 摇 瓶 发 酵 工 艺 进 行 了 , 确 Moac br , ur P1 P1的 初 步研 究 , 结果 发 现 : 当接 种 量 为 1 %、 养 基初 始 p 值 为 60时 , 5 培 H . 最有 利 于红 曲色素 的 合 成 。
色 素相 比 , 红曲色素 具 有安 全 性 高 、 定 性好 、 稳 色调 柔
0 1 p 值 6 0 . ,H .。
1 3 方 法 .
I 3 1 红 曲霉菌株 的分离 . .
称 取 1 . 0 0g红 曲粉 , 加入 到 9 OmL带玻璃球 的无 菌生理 盐 水 中 , 摇 1 n 1 振 0 mi , 0倍 梯 度 稀 释 。 吸 取 0 1mL . 稀释 液涂 布 于 分 离 培 养 基 上 , 0℃ 培 养 3 3 ~ 7d 挑取单 菌 落转移 接 种 到新 的分 离 培 养基 培养 , , 经
培养基 ) ( ) 氏琼脂培 养基 ; 3 P A 培养基 。 ;2 察 () D 液 体发 酵 培 养 基 ( g・L 1 : 萄 糖 9 , 白 胨 -)葡 O蛋
3 O,K H2 PO4 . 1 0,M gS 1 0,M n O4 . SO4 .1,Zn 0 SO4
素 、 色素 和紫红 色素 [4。急性 毒性 试 验 、 橙 3] . 亚急 性 毒
关键词 : 曲茵; 离; 化; 定; 红 分 纯 鉴 色素 ; 酵 条 件 发 中 图分 类 号 : 1 . Q 84 1 文献标识码 : A 文章 编 号 : 6 2 4 5 2 1 ) 9 0 4 0 1 7 —5 2 ( 0 2 0 —0 6 - 3
红 衄霉 菌 属 真 菌 界 ( u c p ya 、 囊 菌 门 E my o h t) 子 ( cmy oa 、 Aso c t) 真子 囊 菌 纲 ( u so cts 、 子 囊 E ac my ee ) 散
Br zl n Ar h v s o i l g n c n l g 2 0 , 8( ): 8 - a i a c i e f B o o y a d Te h o o y, 0 5 4 6 8 5 i
8 4 9 .
[] Ma ai , esn K F, asn T O,ta E poigfn a 6 pr S A S Nil L re e 1 x lr u g l e . n
究 表 明 , ~z % 的接 种 量 、 养基 初 始 p 值 7 0 5 o 培 H . 最 有利 于红 曲色素 的合 成 。他 们的研究 结果 与本研究
有 所差别 , 明红曲霉 不 同菌 株 产色 素 能力 有 着 很 大 表 差 异 , 化发 酵条件可 以显 著提 高色素色价 , 优 因此进行 色 素高产 菌株筛选 和发酵 条件优 化是十分 有必要 的 。
反 复分离 纯化得 到较 纯的菌 株 , 保藏 。
L3 2 菌 株形态学 观察 .
红 曲菌生 物资源 做 了有 益探索 。
1 实验
1 1 材 料 、 剂 和 仪 器 . 试
将 筛选 的菌株 的孢子划 线接种 到形 态鉴定 培养 基 平板上 , 放人 培养箱 中 ,0℃倒 置培养 , 天观察 记 录 3 每 各菌 株 的菌落形态 。菌丝 和孢子显微结 构 的观察采 用 插 片培养 法E 将接种 好 的培 养皿置 于 3 , 0℃恒 温 培养
市售 功能性 红 曲米 粉 , 曲发酵饲 料 , 腐乳等 。 红 红
收 稿 日期 :0 2 0 — 1 21- 5 9
作者简介 : 庄禧 懿 (9 1 ) 男 , 江 金 华 人 , 士 研 究 生 , 18 一 , 浙 硕 主要 从 事 微 生 物 方 面 的 研 究 ; 讯 作 者 : 卫 华 , 士 , 教 授 , - i 通 储 博 副 Ema . l -
和 、H 值 稳定 、 蛋 白质 的着 色力 强且 兼 具抗 菌 性等 p 对
特点, 是一 种具有悠 久应 用历史 的天然色 素 ] 。
作者 从市售不 同红 曲发酵产 品 中分离 得 到红 曲霉
纯 培养菌 株 , 根据形 态学 特征进行 属和种 的鉴定 , 并对 其 发酵产 红 曲色 素工 艺进 行 初 步研 究 , 为进 一 步 发 掘
性试验 、 慢性毒 性试验 和致 突变试 验表明 , 曲色 素无 红
毒副 作用 和致 突变作 用 。随着人 们对合成 食 品添 加剂
和 化学药 物对人体 毒 副作 用 的认 识 , 世界 各 国掀 起 了
食 用绿色食 品和使 用天 然 药 物 的热潮 , 曲作 为药 食 红 兼 用的天 然制品 , 引起 了极 大 的关 注 。与化 工合 成 的
红 曲霉 菌株 的分 离鉴定 及产 红 曲色素发 酵 条件 优化
庄 禧懿 储 卫华 。 , 马兴旺 朱 , 卫
( . 国药科 大 学生命 科 学与技 术 学院 , 苏 南京 2 0 0 ; 1中 江 1 0 9
2 南京 日升康 生物工程 有限公 司 , 苏 南京 2 10 ) . 江 1 1 3
bid v r iy f r t e p o u to f wa e - o u l i me t s p — o i e st o h r d c i n o t r s l b e p g n s a o
tnil aua o ooatl] C re t iini itc n l— et trlodclrnsJ . urn no Boeh oo an f , Op n
利 于红 色素 的合 成 。
参考文献 :
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版 社 ,0 : ~ 6, 1 4 —8 2 03 2 l ,54.
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分 离培养基 :1 马铃薯 葡 萄糖 琼脂 培 养 基 ( DA () P 培养基 ) ( ) 加拉 红培 养基 ; 3 麦 芽 汁 液体 培 养基 ;2 孟 ()
加乳酸 调 p 值 2 5 加 1 %( 积分数 , H ., 0 体 下同) 乙醇 。 形态 鉴定平板 培养基 :1 麦 芽汁琼脂 培养 基 ( () Wa
1 2 培 养 基 .
( n su)1。 由红 曲菌 接 种 于 大 米 发 酵 得 到 的 红 Mo ac s[ ]
曲具 有 防 腐 、 毒 、 食 活 血 、 脾 燥 胃之 功 效 E 同 解 消 健 , 时 , 曲菌具 有很强 的产 色素能力 , 曲色 素作为 天然 红 红 色素应 用 于 食 品着 色 历 史 悠 久 。红 曲色 素 分 为 黄 色
[ ] W o gH Kohe . tn o n su-ime tpo u— 3 n C, elrP E Mua tfrMoacspg n rd c
t n J. odSine1 8 ,6 3 :5 —5. i I] F o c c,9 1 4 ( )9 69 7 o- e
[ 1 B i D, h n W a ,t 1Mi ola ime t oe — 4 a M C e gCH, nH M e a. c agl g nsptn r p t l s y rd csnl i rd cin J.o ra o eT i nI— i po ut i i dpo u t [] Ju nl fh awa n aa b p o t
21,o2 N . 0 VI 9 o9亿 与 生 物 Z 程 2 .
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s iu e o t t fCh mia g n e s 2 1 4 ( ): 8 — 8 . t e c lEn i e r , 0 1, 2 5 7 3 7 6
3 结论
从市 售红 曲发酵产 品 中成 功分 离得 到 1 5株 红 曲 霉 纯培养 菌株 , 中一株 肉眼观察 高产红 色素 , 其 通过形 态 特征观 察 , 步鉴定 该 菌株 为 红 曲属 ( n su ) 初 Mo ac s 中 的 红色红 曲菌 ( n su u e ) 命名 为 RP 1 Mo ac s br , r 一 。下 一
g 2 0 1 2 2 1 2 8 Y, 0 5, 6( ): 3 — 3 .
源自文库
对红 曲霉 R 一 P 1的液体 摇 瓶发 酵工 艺进 行 了初 步
研究, 结果 发现 , 接种量 以及培养 基初始 p 值等 发 酵 H
[ ] 周 长 林 . 生物 学 实 验 与指 导 ( 二 版 ) M] 北 京 ; 国 医 药 科 技 7 微 第 [ . 中
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