果蝇培养基配制ppt课件

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果蝇的饲养与观察-PPT课件

实验一果蝇的观察和饲养
厦门大学生命科学学院
原理和目的
果蝇英文俗名fruit fly或vinegar fly ，果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地内如果园，菜市场等地区内皆可见其踪迹。除了南北极外，目前至少有1000个以上的果蝇物种被发现，大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。
果蝇的生活史
图1 果蝇的生活史 1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫
果蝇营养需求

在不供给食物的情况下，果蝇可存活50 小时左右，在不供给水的情况下，果蝇无法活过一天。蛹期果蝇在其正常5天生活周期下可取食其体重3~5倍之食物，雌果蝇在产卵期每日可取用与其体重等重之食物。果蝇成虫的食物内需有醣类，而蛹期果蝇则可只依赖酵母即可生育。
原理和目的

黑腹果蝇(Drosophila )是双翅目昆虫特点：生活史短，易饲养，繁殖快，
染色体少，突变型多，个体小
是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物
背景资料

以果蝇作为遗传学研究的材料，利用突变株研究基因和性状之间的关系已近一百年，至今，各种研究遗传学的工具已达完善的地步，果蝇提供我们对今日的遗传学的知识有其不可磨灭的贡献；从1980年初，Drs. C. NessleinVolhard和E. Weichaus以果蝇作为发育生物学的模式动物，利用其完备的遗传研究工具来探讨基因是如何调控动物体胚胎的发育，也带动了其它模式生物（线虫、斑马鱼、小鼠和拟南芥等）的研究，且有非常具体的成果。
果蝇操作方法

搬移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶
– 取新培养瓶一瓶，将棉塞略为松动，放置于右手侧，取欲转移之果蝇培养瓶置于左手侧，以左手握住瓶颈，两指轻扣棉塞顶部，以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面，将培养瓶置于左手侧，拔起棉塞以左手两指夹住棉塞外端，再将置于右手侧之新培养瓶棉塞拔起，以右手两指夹住棉塞外端，再以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上，再以左手握住两瓶口相接处，翻转使新培养瓶位于下方，然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底，使果蝇掉落于新培养瓶瓶底，然后迅速盖上各瓶棉塞。

实验一-果蝇的观察和饲养培训课件

实验一果蝇的观察和饲养
厦门大学生命科学学院
精
1
原理和目的
果蝇英文俗名fruit fly或vinegar fly ，果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因
此在人类的栖息地内如果园，菜市场等地区内皆可见其踪迹。除了南北极外，目前至少有1000个以上的果蝇物种被发现，大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。
精
4
果蝇的生活史
图1 果精蝇的生活史
5
1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫
果蝇营养需求
在不供给食物的情况下，果蝇可存活50 小时左右，在不供给水的情况下，果蝇无法活过一天。蛹期果蝇在其正常5天生活周期下可取食其体重3~5倍之食物，雌果蝇在产卵期每日可取用与其体重等重之食物。果蝇成虫的食物内需有醣类，而蛹期果蝇则可只依赖酵母即可生育。
精
6
果蝇培养基配制
取三角瓶以适当大小之棉塞密闭开口，置入高温高压灭菌釜内，以121℃，1.5 大气压消毒12至15分钟。消毒完成后，待灭菌釜内压力降至常压后开启釜门使其半开，再以灭菌釜干燥培养瓶之棉塞 30分钟，完成后取出使其冷却备用。
精
7
果蝇培养基配方
玉米粒粉
50克
红糖
20 克
干燥酵母粉 15 克
精
19
双翅目：一对翅膀+一对平衡棒
精
20
野生型：翅膀有横隔脉
精
21
野生型：眼睛颜色为砖红色，饱满圆形
精
22
野生型：刚毛——头胸部以及复眼的周
围具有平直，先端略弯的长型粗黑硬毛

《果蝇培养基配制》课件

《果蝇培养基配制》PPT 课件
本课程将详细介绍如何制备优质的果蝇培养基。掌握这一关键技能是进行果蝇研究的基础。
概述
果蝇培养基的制备是进行果蝇实验研究的关键步骤。本节将介绍培养基的组成及其重要性。
材料准备
果蝇卵
从可靠的供应商处获得新鲜的果蝇卵。
瓶子和盖子
使用干净无菌的玻璃瓶和盖子作为培养基的容器。
麦芽粉、酵母、玉米粉和糖
这些材料是构成果蝇培养基的关键成分。
制备步骤
1
准备容器
使用洗净的玻璃瓶和盖
按照一定比例混合麦芽粉、酵母、玉米
粉和糖，并称量后加入容器中。
3
加入水和搅拌
加入适量的水，并搅拌均匀，确保混合
蒸煮培养基
4
物充分溶解。
使用自制的压力锅对培养基进行蒸煮，
时间约为30分钟，以确保杀灭细菌。
5
灭菌
采取适当的方法对培养基进行灭菌处理，
冷却和倒入培养皿
6
保证其无菌性。
待培养基冷却后，将其倒入准备好的培养皿中，以准备加入果蝇卵。
结束语
基础步骤
制备果蝇培养基是进行果蝇研究的重要基础步骤。
后续实验
有了无菌的培养基，我们才能进行后续的果蝇实验和研究。

培养基的配制灭菌(共10张PPT)

两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
7
第7页，共10页。
4) 用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除
锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温
度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控
4) 用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。
15～30分钟进行灭菌。时间的长短可根据灭菌物品种类和数量的不
同而有所变化，以达到彻底灭菌为准。这种灭菌适用于培养基、工
1MPa(相当于15Ib/in2或1.
作服、橡皮物品等的灭菌，也可以用于玻璃器皿的灭菌。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。
高压蒸汽灭菌的基本原理：将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。 5℃，15～30min可达到彻底灭菌的目的。
手提式高压蒸汽灭菌锅的操作步骤如要挑取处女蝇、不同品种杂交、子代性状检查，需要先做麻醉处理，有选择性转入接种瓶。
接种果蝇：拔出接种瓶、亲本瓶的棉塞，夹在指 6. 1) 首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
一般培养基用0. 05kg/cm2)，121.
缝中间，迅速将亲本瓶口倒扣在接种瓶上方，轻拍亲本这种灭菌适用于培养基、工作服、橡皮物品等的灭菌，也可以用于玻璃器皿的灭菌。
3
第3页，共10页。
4. 灭菌：置121℃高压蒸汽灭菌15分钟。
5. 培养酵母菌：待培养基冷却后，在培养基的表面
滴加1-2滴新鲜酵母液，放置1d待培养基表面干燥后再接
当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。

实验三果蝇的性状观察、雌雄鉴别及饲养方法.ppt

挑处女蝇 1周
杂交开始 1周
去除亲本 1周
F1观察及自交开始 1周
去除亲本 1周
F2观察及记录 1周
统计及分析
果蝇作为遗传材料具有很多突出的优点：染色体数目少，2n＝8；具有许多可遗传的突变性状；世代周期短，在25C 下约9~10天就完成一
个世代；个体小，易于饲养，费用低廉；繁殖能力强，一次杂交可产生大量后代供统
计分析。
果蝇的生活史
果蝇为昆虫纲双翅目昆虫，生活史经过：卵－幼虫－蛹－成虫，是完全变态的昆虫。
蛹幼虫经过4～5d的发育开始化蛹。一般附着在瓶壁上，颜色淡黄。随着发育的继续，蛹的颜色逐渐加深，最后为深褐色。在瓶壁上看到的几乎透明的蛹是已经羽化完而遗留的蛹的空壳。
成虫刚羽化出的果蝇虫体较长，翅膀也没有完全展开，体表未完全几丁质化所以成半透明透乳白色。随着发育，身体颜色加深，体表完全几丁质化。羽化出的果蝇在8～12h后开始交配，成体果蝇在 25℃ 条件下的寿命为 37d 。
4.突变性状的观察眼色：红眼与白眼
红眼与白眼是一对相对性状，分别由X染色体上的基因+与w（或X+ 和Xw）决定
其它眼睛突变
Cinnabar：朱色 Sepia: 棕褐色
残翅（Vestigial wing, vgvg)
长翅和残翅是一对相对性状，由位于第二染色体上的基因 +/vg决定
小翅（miniature wing，mm），
Drosophila life cycle
蛹
Pupa
21/2 - 3 days
Adult 成虫
31/2 - 41/2 days in pupal stage
三龄幼虫 Third

果蝇的性状生活史观察及饲养ppt课件

腹部末端，全身有许多体毛和刚毛。
在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确
3.成虫雌雄的鉴别
雌果蝇
雄果蝇
体形较大
体形较小
腹部椭圆形，末端稍腹部末端钝圆尖
腹部背面有明显的五腹部背面有三条黑色花纹，前两条细，后
在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确
生活史：
完全变态：最适温度：20-25℃ 生活史周期：
12-15 day (20-25℃) 10 day (26℃) 57 day (10℃) 羽化后： 8-12h 交配两天后产卵成虫存活：15 day (25℃)
2 果蝇性状的观察
1）果蝇的麻醉处理在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等
操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方法如下：（1）准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶，并配以脱脂棉塞。（2）去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶在上，一手稳住两瓶，另一手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶中。
配制好的培养基
在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确
2）果蝇继代培养
将果蝇转移到新配制的培养基中繁殖。转移时要
注意转移的手法，不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞
出。一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶，使其飞
X/A=1 则为雌性；X/A=0.5 则为雄性。 X/A＞1，为超雌；X/A＜0.5，则为超雄；0.5＜X/A ＜1则为中间性。雌雄基因平衡理论：果蝇X染色体上有很多雌性基因，常染色体上有很多雄性基因，Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因，因此性别决定于基因的平衡。

遗传学实验——设计果蝇杂交实验PPT

表型
长翅灰体长翅黑檀短翅灰体短翅黑檀
总计
观察数理论数偏差值 X2值
五、实验结果记录表格
（3）伴性遗传： P: ♀26 红 × ♂6 白
实验日期：
世代
♀红数目 ♂红数目 ♂白数目
总计
比例
F1
F2
X2检验：（F2代）
表型
பைடு நூலகம்
♀红
♂红
♂白
总计
观察数
理论数
偏差值
X2值
六、预期实验结果
六、预期实验结果
四、实验步骤（技术路线）
各实验具体步骤三.伴性遗传： 1.选择处女蝇 2.杂交：6号雄果蝇和26号雌果蝇杂交，25℃恒温培养。 3. 弃除亲本：待F1幼虫出现即可弃除亲本。 4.观察F1：观察F1眼色、性别。 5.F1互交：在新的培养瓶中，放入3-5对F1果蝇并培养。 6.弃除F1：待F2幼虫出现即可放掉并处死F1果蝇。 7.观察F2：观察F2眼色、性别后处死，连续观察并统计数据。 8.数据处理及统计分析：分析实验结果与预期理论的符合程度。
世代
黑檀数目
F1
F2
实验日期：
灰体数目总计
X2检验：（F2代）表型观察数理论数偏差值 X2值
黑檀
灰体
比例
总计
五、实验结果记录表格
（2）自由组合定律:
P: ♀26 黑檀长翅 × ♂6 灰体短翅
实验日期：
世代 F1
长翅灰体长翅黑檀数短翅灰体数短翅黑檀数总计比例
数目
目
目
目
F2
X2检验：（F2代）
二、实验原理
二、实验原理
（一）果蝇（Drosophila melanogaster）属于昆虫纲，双翅目。果蝇形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养简便，染色体数目少，突变性状多，是遗传学研究的好材料。

果蝇培养基配制方法遗传学

果蝇培养基配制方法及果蝇的转接饲养一、果蝇培养基配制方法配方：760ml水+6.2g琼脂+82.5g玉米粉+62g白糖+7g克酵母+5g丙酸（一）、准备工作：1、清洗试管:规格20*30。

2、烘干试管：电热鼓风干燥箱烘干（60-70度）或自然风干。

塞上棉塞。

另外做一试管滤纸。

3、包扎试管：2层报纸包扎。

包扎镊子；包扎一块大小适中的4层纱布4、高压灭菌：将上述包扎好的试管、镊子、纱布高压灭菌（高压锅切勿忘记加水，121度0.1Mpa，维持20-30分钟）5、高压后取出烘干（60-70度）。

（二）、准备工作1、用酒精棉球将操净工作台台面、侧壁消毒。

2、将上述灭菌好的试管、纱布，一个250或300毫升的三角烧瓶，酒精灯、火柴，小红桶放入操净工作台内，紫外灭菌20分钟，同时开启风机。

（注意；紫外灭菌后，要风机开启10分钟后方可用）也可在超净工作台外倒培养基（三）、培养基配制步骤：1、量筒量取760毫升自来水（或者蒸馏水），置入搪瓷缸内，电炉加热（注意：电炉下垫电板，以免烧坏新实验台面）2、称取琼脂条6.2克，剪成小段，放入上述水中加热溶解。

3、材料：玉米粉82.5克、白糖62克、酵母粉7克、5毫升丙酸。

4、加入顺序：等琼脂完全溶解后，将玉米粉少量慢慢加入，一边搅拌一边加入，待完全成糊状，煮出香味、煮熟为止。

再加入白糖，搅拌均匀溶解。

离开电炉，放凉至60度左右，加入酵母粉搅匀，最后再放入丙酸搅匀。

5、倒培养基：酒精棉球消毒手，点燃酒精灯，将试管插入三角瓶，将培养基直接倒入试管内，作成斜面6、培养基倒好后，直接用灭菌纱布封住试管口。

拉下操净工作台的门，风机开着（目的是让试管内的水蒸气蒸发得更快）。

7、 3-4天后，水汽蒸发完全后，即可塞上棉塞，拿出操净工作台。

二、果蝇的转接饲养1、在果蝇培养基试管内加入一片灭菌滤纸（助于吸收水分和果蝇产卵），2、转接果蝇：新管在上，果蝇管在下，试管口对口，这样果蝇就会自动向上爬行，待有5对左右时即可。

果蝇培养基的制作ppt课件

8
培养容器
培养果蝇的饲养瓶，常用的有牛奶瓶，大中型试管，并用纱布包裹的棉花球作瓶塞。
试管棉塞不但能保护试管内物质不受外界微生物污染，并且能保证管内有供果蝇呼吸的气体。
9
棉塞的制作
10
培养基的分装
将熬制好的培养基分装到试管中 1、每支试管中分装30ML (约3~4厘米试管高
度)。 2、分装时勿将培养基大面积粘连试管壁。
★压力为1.05kg/cm2,121.3℃ ,20----30min •（5）出锅；隔断热源，自然降温，待压力表指针回到零，打开排气阀，稍等一些时间，再开盖取物。 12
作业
• 1、果蝇作为遗传学经典实验材料具有哪些优点？
• 2、制作果蝇培养基的关键是什么？ • 3、棉塞是否能用大小等同的硅胶塞代替，
为什么？
13
1
米糠饲料 100
2
10
-
8
8
-
1.5
1
香蕉饲料 100
3
-
-
-
-
100 1.5-2 1
7
玉米粉培养基的制备
A:琼脂1~1.5克、蔗糖10克加入40毫升水中煮沸溶解； B:玉米粉15克，加入60毫升水中搅拌成糊状混匀；
将B慢慢倒入A中，并不停搅动混合，加热成糊状后，再加1.5克酵母粉，混合均匀，稍冷却后加入1毫升丙酸，调匀后即可分装到培养瓶中。
5
三、培养基的制备
果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为生，而是食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料。
6
果蝇培养基配方
几种常用培养基配方
水琼脂蔗糖玉米粉米糠麸皮香蕉浆酵母粉丙酸

果蝇的麻醉、主要课件

3.果蝇的培养基：果蝇的食物主要是酵母，凡是能使酵母发酵的基质都能做培养基，最常用、效果最好的是玉米粉培养基。
果蝇培养基的配制：
水琼脂 750ml 10g
蔗糖 80g
玉米粉 100g
乙酸酵母 5ml 数粒
1、配制时先将琼脂放入烧杯中。
2、用水将玉米粉调成糊状，加入烧杯中煮沸，最后加糖煮沸数分钟即可，滴入乙酸即可。
3、待培养基稍凉，每个广口瓶倒入10-30mL的培养基，冷却后加入少量酵母粉。
果蝇雌雄外形辨别雌果蝇体型大于雄果蝇
雌果蝇有6节体节，腹部底部为产卵管，呈現圆锥狀凸出。
雄果蝇有4节体结，腹部底部为交尾器，呈現黑色圆形外观。雄果蝇在前肢先端第二節具有性梳。
刚毛野生型，头胸部以及复眼的周围具有平直，先端略弯的长型粗黑硬毛。
果蝇的麻醉、主要性状观察和雌雄的辨别
实验目的： 1、掌握果蝇的麻醉方法 2、果蝇的雌雄辨别，从而为以后进行果蝇为材料的遗传试验做好准备。
二、实验材料：果蝇
1.果蝇的生活史：昆虫纲双翅目昆虫，生活史经过：卵－幼虫－蛹－成虫，是完全变态的昆虫。
2.果蝇的生活周期和温度的关系： 20－ 25C是果蝇的最适生长温度，生活周期为10 天。
பைடு நூலகம்

《果蝇培养基配制》课件

学会了如何选择和配制适合实验需求的培养基
了解了不同种类培养基的特点和应用场景
课程总结
掌握了培养基质量检测与保存的方法课程不足
部分同学对于某些专业术语的理解存在困难
课程总结
01
实验操作环节时间紧张，部分同学未能充分实践
02
部分培养基的配制方法需要进一步优化和改进
课程展望
未来研究方向探索更多新型的培养基成分和配方
矿物质和维生素其他成分
为果蝇提供能量来源，常用葡萄糖、蔗糖等。
维持果蝇正常生理功能，如磷酸盐、硫酸盐、维生素B等。
03
果蝇培养基的配制过程
Chapter
准备器具与材料
玻璃棒
用于搅拌培养基。
恒温烘箱
用于烘干和消毒。
烧杯
用于配制培养基的容器。
电子天平
用于称量各种成分。
试剂和原料
蔗糖、酵母粉、琼脂粉、磷酸二氢钾等。
适用于大规模培养或自动化培养设备，能够提高培养效率和实验可重复性。
特殊培养基
根据研究需要，可添加特定成分或药物的特殊培养基，用于特定条件下的果蝇培养。
培养基的成分
提供果蝇所需的氨基酸、蛋白质等营养成分，常用酵母粉、蛋白胨等。
根据需要添加抗生素、抗真菌剂等，以抑制杂菌生长。
碳源氮源
配制步骤
按照配方比例称取各种原料，并记录下每种成分的质量。
在烧杯中加入适量的水，然后加入蔗糖、酵母粉和磷酸二氢钾，搅拌均匀。
将琼脂粉加入上述溶液中，继续搅拌至溶解。
将培养基倒入灭菌的培养皿中，待其冷却凝固后即可使用。
将溶液加热至沸腾，并保持沸腾状态约10分钟，以便琼脂充分溶解和培养基充分消毒。

2011-果蝇培养及操作

第一部分果蝇培养基的配制培养基的配制：培养果蝇前需要配制培养基，培养基成分如下表（表1）所示：果蝇培养基2000ml表1 果蝇培养基配方表成分含量成分含量果蝇培养基①玉米粉180g ②大豆粉20g③琼脂15g ④啤酒酵母37g⑤糖稀80g ⑥麦芽糊精80g⑦对羟基苯甲酸甲酯溶液（防腐剂）16ml（2.5g对羟基甲酸甲酯固体粉末溶于16ml95%的乙醇中）操作：1）先1.5L水烧开，然后①玉米粉溶于额外500ml水中，慢加并混匀，再慢慢加入已煮沸的1.5L水中，混匀，煮沸后，调节温度至50度，保温3-4小时（约50度左右）2）大约保温3小时左右，回到实验室，进行接下来的预备工作。

将②、③、④、⑥混合搅匀，一块加入保温的玉米糊中，边加边搅拌至混合均匀。

3）紧接着，加入⑤，慢加快搅，此步很重要，务必防止糖稀粘锅煮糊。

4）然后，将温度调大一块煮沸，再将温度降下来，冷却至60度左右（可用冷水浴约3min 的方法较快速降温），待温度冷却下来，即加入⑦防腐剂，用玻璃棒搅拌均匀后分装到培养瓶内，注意在分装时不要把培养基倒在瓶壁上。

用瓶塞塞好，使多余的水分蒸发出去，待培养基冷却后塞好瓶塞，放入冰箱。

分装至每瓶高1cm左右。

注：2L 培养基可倒瓶约100-120个左右。

若配置1L 培养基，以上成分均减半。

注意在分装时不要把培养基倒在瓶壁上。

刚配制完的培养基放凉后在瓶壁上会有许多水滴，这时如果把果蝇放进去，水滴可能将果蝇的翅膀粘住，为避免发生此事，可将配好的培养基放在温箱内2～3d，待水分蒸发后再使用，或用酒精棉将瓶壁上的水分擦掉。

分装培养基时，注意不要将培养基倒在侧壁上，这样果蝇会将大量的卵产在壁上，产在壁上的卵是无法孵化的。

在配制培养基的过程中，既要尽量避免培养基被煮糊，又要注意在装瓶的过程中尽量不出现培养基贴壁现象，只有整个过程中的细致和耐心才能使这个大实验得以顺利进行，如果培养基一旦出现问题，会对所有同学的实验进度和结果产生很大影响。