影响血型鉴定常见的问题及处理方法

3.急性大出血
❖ 处理的方法：
1.将抗－A、抗－B和抗－A，B试剂与洗涤过的红细胞
在室温或4℃孵育30min，以增强抗原、抗体的结
合
。
2.用木瓜酶、菠萝蛋白酶处理红细胞，以增强抗原、
抗体的结合。
3.应用抗－AB、抗－A1、或抗－H检测红细胞。
4.用人血清抗－A、抗－B进行吸收放散试验， 检测弱A、B抗原，且同时要做O型血吸收放 散试验作对照。
二、红细胞额外反应 所致的ABO正反定不符 ❖ 常见的原因 1.获得性B红细胞（类B）
2.混合视野凝集(mf ) 3.红细胞被致敏
获得性B红细胞的特征
1.常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生 在正常人；
3.常伴有T和Tn多凝集红细胞出现(细菌感染时)； 4.自身抗-B不与自身获得性B抗原反应(无自凝现象)
❖ 4.血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或 高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如缗钱 状红细胞的非特异凝集。
❖ 5.血清中含抗－A、抗－B以外的其他红细胞 抗体，如抗－M、抗－I等。
❖ 6.患者接受了ABO血型不同的骨髓移植。
❖ 7.患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体。 ❖ 8.ABO抗体被输入的液体稀释。
❖ 4.使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的 血浆或血清中含针对抗－A、抗－B试剂中染 色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应。
❖ 5.患者血清中有高活性、高浓度冷自身抗体严重致 敏自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体 试剂的特异性免疫反应所致。 6.红细胞表面包被IgG类抗体
7.静脉输入高分子药物如甘露醇、右旋糖酐等，可导
致红细胞成緍钱状。
五、血清标本的问题
❖ 1.纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血 液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维 蛋白的血清标本时出现假阳性。
❖ 2.免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或 消失。老年人ABO抗体减弱。
❖ 3.新生儿—6个月内婴儿血清中ABO抗体阴性 或很弱，一般只测正定不测反定。
纤维蛋白凝块，误判为阳性； (3)受检细胞与抗血清孵育的时间过长； (4)定型血清中含有事先未被检测的其他特异性
抗体，造成假阳性定型结果；
❖ (5)多凝集细胞，造成定型的假阳性，如MM。 ❖ (6)检定用器材或抗体被污染，造成假阳性。 ❖ 2.导致Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因 ❖ (1)DAT强阳性。 ❖ (2)红细胞与血清比例失调。 ❖ (3)定型试剂漏加、错加、失效。 ❖ (4)观察不仔细 ❖ (5)弱D抗原
二、试剂问题
❖ 血型定型试剂是做好定型的基础。现在单克 隆试剂是通过杂交瘤技术生产的，其效价、 特异性、亲和力都较人血清有很大进步，但 试剂的运输、贮存等条件不适可导致试剂变 质失效，造成鉴定错误。在实验前进行试剂 外观、效价等项目质量控制。不同抗凝剂的 血液制备的标准红细胞质量也不同，各实验 室依据要求正确配制红细胞浓度。
结果分析和处理的基本步骤
1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等 错误。
2.查询患者临床诊断、既往病史、输血史、用 药史、骨髓移植史。
3.彻底洗涤标本或试剂红细胞。 4.应用抗－AB、抗－A1、或抗－H检测红细胞。
5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或 自身冷抗体干扰。
6.室温孵育30min后，离心观察结果，以检测 弱的抗原抗体反应。
三、实验者操作技术错误
1.造成假阴性结果原因： (1)未加入抗体或血清 (2)未识别溶血 (3)血清与红细胞比例不当 (4)离心速度、时间不够 (5)使用失效或错误试剂 (6)实验结果记录、解释错误
❖ 2. 造成假阳性结果原因： ❖ (1)离心速度过大、时间过长
(2)使用了受到细菌污染的试剂 (3)试验器皿不干净 (4)实验结果记录、解释错误
获得性B红细胞的鉴定
1.酸化血清抗-B试剂pH至6.0时，检测无凝集，即不 与获得性B细胞反应
2.乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常B细胞不受影 响
3.临床追踪，感染控制后“类B”现象消失
混合视野凝集
❖ 1.非O型人近期输用O型血； ❖ 2.骨髓移植后做血型； ❖ 3 A3(B3)细胞与抗－A(抗-B)呈典型的混合视
影响血型鉴定常见的问题及处理 方法
卢艳 2012.8.31
❖ 准确的血型鉴定是临床安全有效输血的重要 保证，使输血的成分能在受着体内有效存活， 无不良反应，即输入的红细胞在受着体内必 须不凝集不溶血，输入的血浆成分不导致受 者自身红细胞显著破坏，才能使受者获得恢 复健康所需的血液。
ABO定型试验中常见的问题： 一、标本问题 二、试剂问题 三、实验者操作技术的错误 四、红细胞标本问题 五、血清标本的问题
四、红细胞标本问题
❖ 1.患者近期接受了大量ABO血型相容但不同 型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型人 接受O型红细胞。
❖ 2. 某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细 胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细 胞ABO抗原太弱，应用抗－A、抗－B试常，如获得性B 抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞，人血清抗 －A、抗－B试剂可能与这些异常的红细胞反 应。
正定被易被误认为AB型，反定易被误认为O型，用 递增温度(22℃，37℃，45℃)洗涤红细胞后再做血 型鉴定 7.血清蛋白过高 试剂红细胞多呈假凝集，如肝脏疾病、MM等，加 盐水稀释后凝集散开
Rh血型
1.导致Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因
(1)直抗(DAT)阳性； (2)标本抗凝不当，受检过程中出现凝血或出现
(1)D：正常D抗原 (2)弱D：抗原数量减少，表位基本完整,D抗原
只是量的减少，无质的改变
野凝集现象； ❖ 4.双精子受精（嵌合体）
红细胞被致敏
❖ 1.患HDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免 疫的成人，其红细胞严重包被IgG抗体分子；
❖ 2.与含一定蛋白质浓度的试剂（抗－D、抗－ A、抗－B）产生凝集；
❖ 3.处理方法：45 ℃放散后，抗体解离，即可 准确定型；
三、意外的血清学反应所致的ABO正 反定不符
常见的原因及处理方法：
1.抗体太弱或消失 如﹤4-6个月幼儿，老年人、免疫抑制患者，应注意
患者的年龄和临床诊断 2.非正常高浓度的抗－A、抗－B可引起前带现象，导
致假阴性，将血清稀释或用EDTA（2.5％）处理可 消除；
3.A2、A2B或其他ABO亚型，人血清中可能有抗－A1， 抗－A1只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细 胞；
7. 做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干 扰。
ABO正反定不符的分类 一、抗原表达减弱或丢失所致的ABO正反定不
符 二、红细胞额外反应所致的ABO正反定不符 三、意外的血清学反应所致的ABO正反定不符
一、抗原表达减弱或丢失 所致的ABO正反定不符
❖ 常见的原因：
1.ABO亚型红细胞
2.白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗 原太弱，应用抗－A、抗－B试剂未能出现预 期的凝集反应
4.患者静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类 似凝集现象，如缗钱状凝集， 将血清用生理盐水稀 释3倍或用盐水替换技术可消除；
5.冷自身抗体 ①所有试剂及细胞37℃孵育,37℃下判读结果;
②将冷自身抗体在4℃吸收在做血型,③将血清 用0.01mol/L 二硫苏糖醇(DTT)处理完再定 型；
6.自身免疫性温型抗体
一、标本问题
血型鉴定血液标本的严格要求是安全输血的 关键性措施之一，首先对标本进行科学管理， 确保标本一一对应防止“张冠李戴”。 1.所用标本要能够恰当反映受血者目前的免 疫学状态。 ❖ 2.受血者配血试验的血标本必须是输血前3 天内采集的。 ❖ 3.如果受血者需要再次输注红细胞，尤其是 受血者最后一次输注红细胞间隔了24小时， 应重新采集一份血样进行交叉配血试验，防 止新的不规则抗体产生。