--乳腺癌HER2基因FISH检测的意义

HER2－人表皮生长因子受体2
细胞膜 细胞质
细胞外配体结合区 (632 氨基酸)
跨膜区 (22氨基酸)
细胞内区 (580氨基酸) 具有酪氨酸激酶活性
HER2 受体跨膜二聚体的信号传导途 径
生长因子
接合部
细胞膜
信号传导 至细胞核
酪氨酸激酶 活性部分
细胞浆
细胞核
癌基因活化 细胞分裂
HER2过度表达
胃癌 6.5%
肺癌 7.6%
结肠和直肠癌 9.3%
近数十年来，国内、外在治疗方法上虽 然经过了多方面的改进，但其病死率迄今 并未见明显降低，可手术患者总的10 年生 存率在40%～ 50% 左右，若手术时已经发 生淋巴转移，则降为25% 左右
早发现、早治疗，以及采取正确、有效的检测、 治疗方式是治疗乳腺癌的关键
正常
扩增/过度表达
细胞质
3
C
B
A
细胞膜
A = HER2 DNA B = HER2 mRNA C = HER2 receptor protein
细胞核
2 1
4
1 = 基因拷贝数 2 = mRNA 转录 3 = 细胞表面受体蛋白表达 4 = 细胞外受体功能域释放
HER2 状态: 预示肿瘤对治疗的反应
HER2阳性状态与乳腺肿瘤的预后差相关 HER2是肿瘤复发和总生存期长短的独立预后因子 HER2是有别于肿瘤大小、淋巴结及激素受体外的重要预后因子
否
否 否
是
否
定量 PCR 基因扩增
否
否 是
否
是
荧光原位杂交 Fluorescence In Situ
Hybridization 是一种分子细胞遗传学技术，通过 荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂 交。在荧光显微镜下，与细胞和（或）组织原位 观察并分析细胞核内杂交于DNA靶序列的多种猜 测探针信号，以获得细胞内多条染色体（或染色 体片段）或多种基因状态的信息。
❖ HER2状态测定方法的比较
方法
测定异常目标 可在切片上完成
IHC 冰冻/新鲜 组织
蛋白过度表达 是
受储存影响
可在穿刺活检标本中 完成
有商业化试剂盒
是 困难
尚无
FDA批准
不能针对治疗
IHC 石蜡包埋
组织 蛋白过度表达
是
是 是
是
可针对治疗
FISH
基因扩增 是 否 是 是
可针对治疗及预后
ELISA (血清) 蛋白过度表达
Fish信号计数指导表
IHC/FISH检测HER2基因
0 正常
1+
2+
3+
正常
HER2基因低度表 达
HER2基因高度表 达
赫赛汀靶向HER2的人源化单抗
95% 人源化, 5% 鼠抗，具有高度亲和性 (Kd=0.1nM) 和 特异性，显著降低免疫原性(HAMA)
用于治疗HER2阳性乳腺癌
MBC：生存率提高达45% EBC：复发风险降低50％
赫赛汀作用机制
HER2 过度表达细胞
赫赛汀与 HER2受体结合
生长信号 被 阻断
抑制肿瘤 细胞生长
巨噬细胞
NK细胞
赫赛汀与过度表 达HER2受体的细 胞表面结合
诱导NK细胞和巨 噬细胞攻击肿瘤
细胞
NK细胞和巨噬细胞 释放各种活性因子
溶解肿瘤细胞
赫赛汀一线联合多西紫杉醇延缓疾病进
展时间
1.0
赫赛汀® +多西紫杉醇
HER2阳性状态的患者无病生存期亦
缩短
淋巴结阳性
淋巴结阴性
无病生存概率
100
1.00
80 HER2 基因 <3 拷贝数 0.75
无扩增
60 HER2基因 ³ 3 拷贝数 0.50
40
扩增
基因扩增: >10 拷贝数
20
0.25 无基因扩增: <3拷贝数 临界值: 不包括
对数秩检验 p=0.001
Log rank p<0.001
0
死亡时间 (月数)
0
0
24
48
72
96 120 144
死亡时间 (月数)
HER2检测的准确性非常重要
检测方法包括：免疫组织化学（IHC）、荧光原位 杂交（FISH）、酶联免疫分析（EIA）、酶联免疫 吸附分析（ELISA）、聚合酶链反应（PCR）等。
在上面提到的检测方法中FISH是其中一种比较 可靠的检测方法。
运用FISH方法检测基因扩增
FISH显示乳腺癌HER2基因的扩增数（桔红色信 号为HER2基因，绿色信号为17号染色体的着色颗
粒）
目前HER2测定中的推荐意见
肿瘤标本 （石蜡包埋）
IHC
FISH
0/1+
2+
3+
-
+
FISH
重新检测
-
+
FISH 重新检测
+
赫赛汀® 治疗
赫赛汀® 治疗
赫赛汀® 治疗
0.8
多西紫杉醇
0.6
生存概率
0.4
0.2
0 0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 时间Hale Waihona Puke Baidu(月)
Extra et al. Eur J Cancer. 2004:125.
乳腺癌HER2基因 FISH检测的意义
内容
1 乳腺癌在我国的发病情况 2 HER2作为乳腺癌预后和预测的指标 3 HER2状态的测定 4 赫赛汀的应用
我国女性的乳腺癌发病率为20.1/10万
其他 29.5%
乳腺癌 22.7%
食管癌2.9%
宫颈癌 9.7%
肝癌 3.6%
子宫体癌 卵巢癌
3.9%
4%