动物细胞工程.ppt

动物胚胎或幼龄动 动物细胞培养过程： 物的组织、器官
动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞
胰蛋白酶 （分解弹性纤维蛋白）
单个细胞
加培养液
网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。
细胞悬浮液 原代培养
10代细胞
遗传物质 细胞株
未改变
50代细胞 传代培养
遗传物质 细胞系
已改变
无菌、无毒
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境
防止培养过程 的污染
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养——合成培养基
防止细胞代谢产物
（葡萄糖、氨基酸、促生长因子积、累造成危害
无机盐、微量元素、动物血清等。）
3、温度和PH 36.5±0.5度, 7.2-7.4
保证Hale Waihona Puke Baidu胞顺利的 生长增殖
4、气体环境——CO2培养箱 维持培养液的pH
被身体排斥。
如果一个大面积烧伤的病人来说，自体皮 肤有限，其他渠道的皮肤来源不足。如何才能 获得大量的自体健康皮肤？
取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植
动物细胞培养
请同学们阅读课本后，简述动物 细胞培养的基本过程？
1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞 的吗？ 没有
２、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞 的吗？ 是
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原 代细胞。（分装前的细胞培养）
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制 成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养 瓶中继续培养，称为传代培养。
（在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转 移到其它培养瓶中培养就是传代培养） 15、传代培养的细胞能一直传代下去吗？
不都能
8、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能
9、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物 组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？
注意时间的控制 １０、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组 织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细 胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容 易培养。
11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无 毒？ 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖
16、有些为何能一直传下去吗？
发生突变，朝着癌细胞方向发展 17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞 吗？ 不是 18、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞，因为传至10－50代 时部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少 部分还发生突变向癌细胞方向发展
有关概念
细胞株：传代培养的细胞一般传至10代左 右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数 细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血 清？
血清是天然培养基中最有效和最常用的培养 成分。血清中已知的成分主要有蛋白质、氨基酸 、葡萄糖、激素等。蛋白质主要是白蛋白和球蛋 白。氨基酸有多种，其中有些氨基酸动物细胞本 身不能合成，必须由培养液提供。血清激素有胰 岛素、生长激素等。此外，它含有许多维持细胞 生长繁殖和保持细胞生物学性状不可缺少的未知 成分，如多种细胞生长因子、促贴附因子及其多 活性物质。与合成培养基合用，能使细胞顺利增 殖生长。
无限传代
请总结出动物细胞培养的定义
• 动物细胞培养就是从动物机体内取出 相关的组织，将它分散成单个细胞， 然后，放在适宜的培养基中，让这些 细胞生长和增殖。
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中 ，根据你所学的知识，思考并讨论以下问题： 1、体外培养细胞时需要提供哪些物质？
充足的营养供给、适宜的温度、适宜 的pH和气体环境 2、体外培养的细胞需要什么样的环境条件？
动物细胞工程
动物 细胞 工程 常用 技术
动物细胞培养 核移植 动物细胞融合 单克隆抗体技术
细胞工程考纲
要求备注： I：对所列知识点要知道其含义，能够在试题所给予的相对简单的情境中识别和使用它 们。 Ⅱ：理解所列知识和其他相关知识之间的联系和区别，并能在较复杂的情境中综合运 用其进行分析、判断、推理和评价。
12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再 分裂、增殖？
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫 接触抑制。 13、如此时细胞数量并未达到人们的需求， 应该怎样办？ 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然 后继续增殖。这样的过程叫做传代培养
14、如何理解原代培养和传代培养？
４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？
先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理
５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明 细胞间的物质是什么成份？
胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质 6、用胃蛋白酶行吗？为什么？ 不行。因为多数动物细胞培养的适宜pH 为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有 活性。
7、细胞膜的主要成份是什么？蛋白质和磷脂
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传 物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。
19、动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？ 为什么？
一般而言，动物细胞培养不需经过脱分 化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变 窄，失去了发育成完整个体的能力，所以， 动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养 时的脱分化过程了。要想使培养的动物细胞 定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞， 使其分化成所需要的组织或器官。
３、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个 细胞的呢？
成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生 长和增殖
（分散成单个细胞、细胞群(团）后容易培养，细胞所需的营 养容易供应，其代谢废物容易排出；而用大块组织培养时，内 部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较困难，因此，这些细 胞在体外长时间的生存和生长就较困难。）
考点解读
❖ 动物细胞培养与体细胞克隆——要注意注意 原理、步骤、方法，
❖ 细胞融合与单克隆抗体——要注意与必修整 合（细胞结构、遗传、免疫等），注意技术 步骤
皮肤烧伤，如果创面很小（不大于硬币）只 要保持清洁，甚至深度烧伤，也可能自愈。如果 下层真皮受损面积较大，常常需要植皮。植皮需 要的健康皮片，可以取自烧伤病人自身未烧伤的 部位（自体植皮），也可取自其他活人或尸体 （异体植皮）等。自体植皮是永久性的，取自其 他人或动物的植皮是暂时性的，是在创面愈合过 程中为保护创面而采取的措施，10～14天后就要