3组织化学染色

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淋巴瘤内存在大量网状纤维 脑膜瘤和胶质瘤:脑膜瘤有网状纤维。胶质
瘤少
结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维染色的应用
某些梭形细胞肿瘤的诊断:已被免疫组化取代,很少用 ①平滑肌瘤的瘤细胞间可见大量平行分布的网状纤维; ②纤维肉瘤则见大量网状纤维密集包绕细胞; ③滑膜肉瘤的梭形细胞产生网状纤维少。
特殊染色在临床病理学中的应用
染色的意义和目的
用染料对组织切片进行处理,使组织中的不同 成分被染上相应的颜色,产生不同的折射率,以 利于光镜观察和分析。病理染色属于生物性染色 的范畴。
特殊染色(special staining)
应用某些能与组织细胞化学成分特异性结合的显 色剂,显示组织或细胞的正常结构或病理过程中出现 的异常物质、病变及病原体等,称特殊染色(Special staining) 。
从而使脂质着色。
染料和染色的原理
三、染料的原理
化学机制: 组织和细胞中含有碱性和酸性物质,分别与染料中的阳
离子和阴离子结合。 如HE染色:细胞核主要由核酸构成,与碱性染料-苏木
素结合,而胞浆主要由碱性物质构成,与酸性染料-伊红 结合。
染色的常用术语
普通染色:又称常规染色,即指HE染色(haematoxylin and eosin HE)
特殊染色:除HE以外的所有染色,显示特定的组织结构 和成分。
单一染色:用一种染料进行的染色,如甲苯胺蓝染幽门螺 杆菌
多色染色:用两种以上染液染色的方法,如三色染色 对比染色:又称复染或衬染,先将某一成分或结构染色后,
再用另一种染料染其他成分,如苏木素衬染细胞核
染色的常用术语
进行性染色:渐进性染色,采用低浓度的染液,使 组织成分着色自浅入深,直到达到合适强度,
染料和染色的原理
二、染料的分类
染料的来源分类:天然和合成染料 化学反应分类:碱性染料、酸性染料、中性染料 用途分类:
细胞核染料:苏木素,核固红,结晶紫等 细胞质染料:伊红,酸性复红,苦味酸等 脂肪染料:油红O,苏丹III,苏丹IV 纤维结缔组织染料:苦味酸,亮绿等
染料和染色的原理
三、染料的原理
染色液的有效期和保存方式 染色液的浓度和pH值 染色时间的控制 染色前切片的预处理:如脱甲醛色素,脱汞
盐固定液的汞结晶等
染色中易出现的问题和对策
• 注意特染的应用范围,如某种病变应用什么方法染色才能 达到目的,一般根据HE切片所见,选择适当的特染方法。
• 必须掌握各种特殊染色的结果,避免导致错误的结论或严 重的误诊,如在网染时把胶元纤维误以为网状纤维。
肌组织染色,神经组织染色 按染色对象种类分类:切片染色法,组织块
染色法,大体标本染色法
染色方法的命名
按发明者姓名命名:如Van. Gieson(VG) 染色
按所有染料分类:如苏丹IV染色,锇酸染色 按所染组织分类:如网状纤维染色 其他分类:
染色中易出现的问题和对策
选择适当的组织处理方法:包括固定液和切 片的选择,如脂肪和酶类染色需冰冻切片
• 应做阳性切片作对照,保证染色结果的可靠性。 • 染色所用的器皿都必须清洗。
常用染色方法和应用
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结缔组织染色
结缔组织由细胞和细胞间的骨架成分构成, 分为无定形的间质(如硫酸盐和非硫酸盐黏多 糖)和定形或纤维型间质(如胶原纤维,弹力 纤维。网状纤维)。各种纤维成分的识别有助 于病理学的诊断和鉴别诊断。
结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维的特性
网状纤维是构成组织的网状支架 广泛分布于实质器官内,其中最丰富的区域是肝脏、脾脏、
淋巴结、骨髓、基膜、血管等 形态学上为交织成网的纤细纤维 化学成分为网状蛋白,一种特殊的胶原蛋白,抗酸 病理状态下可转化为胶原纤维 具有嗜银性,又称嗜银纤维 HE染色着色淡,特殊染色可显示
物理机制: 毛细管渗透作用:染色剂沿组织间微孔渗透到组织中。 吸收或溶解作用:组织吸收或溶解染料而着色,如脂肪染
色 吸附作用:染料的色素粒子浸润组织中,因分子引力,色
素粒子被吸附而染色
• 例如脂肪染色:
苏丹类染色剂在脂质中的溶解度>酒精中的溶 解度
溶解于酒精的苏丹类染色剂与组织中的脂质 接触时,染色剂就从溶液中“转移”到脂质中,
染料和染色的原理
一、染料的特点:
组织病理学染料是生物学染色剂 对所染组织成分具有亲和力 染色剂中同时具备发色团和助色团才具有染色功
能 发色团是使染料显色的化学团(色原),一种染
料由一个或多个发色团,染料颜色取决于发色团 多少和强弱。 助色团指使色原产生电离成为盐类,对被染物产 生亲和力的原子团
结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维染色的原理
网状纤维染色方法很多,但基本原理相同,即经过 氧化剂的氧化使网状纤维对银离子具有选择性的亲和 能力(嗜银性),并在媒染剂的作用下网状纤维吸附 二氨合银离子,在经甲醛将其还原为黑色金属银而显 示出网状纤维。
结缔组织染色——网状纤维染色
常用网状纤维的染色方法 Gomori染色法
分化:指用某种溶液选择性脱去过深的着色,并使 不应着色的组织细胞成分脱色的过程,HE染色时的 盐酸酒精分化
蓝化作用(返蓝):苏木素在酸性条件下呈红色, 碱性条件下呈蓝色,HE染色时在酸分化后,再用碱 性水使核变蓝,称蓝化
染色方法的分类
按照染色方法分类 一般方法分类:常规染色,特殊染色等 按主要组织和细胞成分分类:结缔组织染色,
结果:网状纤维呈黑色,胶原纤维呈黄色或黄 褐色,细胞核呈灰黑色。
特点:此法简单可靠,染色时间短,常用于活 检病理组织检查。
结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维染色的应用 肿瘤的诊断和鉴别诊断: 癌和肉瘤的鉴别:癌巢周围存在网状纤维;
肉瘤中网状纤维围绕每个细胞 尤文氏瘤和淋巴瘤:尤文氏瘤无网状纤维,
退行性染色:又称后退性染色,先使组织着色过度, 再用某些溶液脱去多余染液,达到合适染色强度
媒染剂:具有促进染色能力,对染料和组织都有亲 和力并与染料和组织结合在一起的试剂。如硫酸铝 钾等
染色的常用术语
促染剂:促使染料着色,增强染色能力,但本身不 参与染色反应,如乙酸
异染性染色:组织经过盐基性染料染色后,出现与 染料不同的颜色
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