生化思考题

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生化实验思考题

⽣化实验思考题1. 氨基酸的纸层析分离1. 什么是纸层析技术是利⽤混合物中各组分物理化学性质差异，使其以不同速度移动的⼀种物理分离⽅法。

2. 什么是分配系数分配系数是指溶质在固定相中的浓度和溶质在流动相中的浓度的⽐值。

3. 层析技术的种类1 吸附层析2 分配层析3 离⼦交换层析4 凝胶过滤层析5 亲和层析6 ⽓象层析7 固相层析8 柱层析9 纸层析10 薄层层析11 ⾼效液相层析4. 影响Rf值的因素有哪些1 纸层析时纸层析时要在密闭仪器中加⼊平衡试剂使纸层析上吸附的溶剂达到饱和.2 滤纸要保持洁净,点样时要适量斑点不能过⼤.3 样品物分⼦结构和极性4 滤纸的厚薄和纤维松紧度不⼀样，结合的⽔量也不⼀样。

2. 酵母RNA的提取和分离1. 试验中为什么选择⼲酵母做实验材料？酵母中RNA含量较⾼（2.67%~10.0%），DNA含量少2. 提取RNA的⽅法有⼏种？稀碱法和浓盐法3. 加⼊酸性⼄醇的⽬的？在碱提取液中加⼊酸性⼄醇溶液可使解聚的核糖核酸沉淀，由此得到RNA的粗制品。

4. 如何鉴定RNA的组分？现象如何？RNA中含有核糖，碱基，磷酸各组分。

核糖与浓盐酸和苔⿊酚共热产⽣绿⾊；嘌呤碱与银铵络离⼦共热⽩⾊絮状嘌呤银化物沉淀；磷酸与钼酸铵试剂作⽤产⽣黄⾊的磷钼酸铵，加硫酸煮沸可使其⽔解，从⽔解液中可以测出上述组分的存在。

3. 球蛋⽩提取及含量测定1. 蛋⽩质沉淀⽅法有哪些？分可逆沉淀法和不可逆沉淀法两种。

其中可逆沉淀法有等电点沉淀，中性盐沉淀法，有机溶剂沉淀法；不可逆沉淀法有加热沉淀，重⾦属盐沉淀，⽣物碱沉淀。

2. 蛋⽩质含量测定的⽅法紫外分光光度计，可见光光度计，双缩脲法，福林酚法3. 分光光度计的使⽤及注意事项1 接电源，打开样品室暗箱盖，预热20min2 调节所需波长3 开盖放⿊⾊⽐⾊⽫，关盖，调T%为0%4 放空⽩对照，放样品液到⽐⾊⽫2/3到3/4处，⽤擦镜纸擦⼲表⾯，在对照组处调T为100%5 调节T%到ABS，分别测各样品分光光度值4. 盐析原理将⼤量盐加到蛋⽩质溶液中,⾼浓度的盐离⼦（如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的⽔化⼒,可夺取蛋⽩质分⼦的⽔化层,使之“失⽔”,于是蛋⽩质胶粒凝结并沉淀析出.盐析时若溶液pH在蛋⽩质等电点则效果更好.由于各种蛋⽩质分⼦颗粒⼤⼩、亲⽔程度不同,故盐析所需的盐浓度也不⼀样,因此调节混合蛋⽩质溶液中的中性盐浓度可使各种蛋⽩质分段沉淀.4. 影响酶促反应速度的因素1. 影响酶促反应速度的因素有哪些？温度，pH，抑制剂，激活剂2. 唾液淀粉酶的抑制剂，激活剂分别是？激活剂：Cl-；抑制剂：Cu2+3. NaOH对v反应实验，做碘反应实验前为何加盐酸因为碘遇NaOH变NaI和NaIO3，⽽不能与淀粉发⽣反应，所以加⼊盐酸中和氢氧化钠。

生化各章思考题及答案

各章思考题及答案一糖类化学糖蛋白中的寡糖链有些什么功能？糖蛋白的种类繁多，功能也十分广泛。

一般来说，糖蛋白的寡糖链可保护其蛋白部分免遭蛋白酶的水解，而延长其生物半衰期。

此外寡糖链还影响蛋白质构象、聚合和溶解性等。

在某些糖蛋白中寡糖链参与蛋白质在细胞内的分拣和运输。

一些属于糖蛋白的酶，其寡糖链结构可影响酶的活性。

许多激素为糖蛋白，其寡糖链的结构与激素的生物活性密切相关。

存在于细胞表面的糖蛋白，其寡糖链还参与蛋白质分子之间的相互识别和结合作用。

二脂类化学试述生物膜的两侧不对称性。

生物膜的不对称性表现在：a) 磷脂成分在膜的两侧分布是不对称的。

b) 膜上的糖基（糖蛋白或糖脂）在膜上分布不对称，在哺乳动物质膜都位于膜的外表面。

c) 膜蛋白在膜上有明确的拓扑学排列。

d) 酶分布的不对称性。

e) 受体分布的不对称性。

膜的两侧不对称性保证了膜的方向性功能。

三蛋白质化学1 某氨基酸溶于pH7的水中，所得氨基酸溶液的pH为6，问此氨基酸的pI是大于6、等于6还是小于6?氨基酸在固体状态时以两性离子形式存在。

某氨基酸溶于pH7的水中，pH从7下降到6，说明该氨基酸溶解于水的过程中放出了质子，为了使该氨基酸达到等电点，只有加些酸，因此氨基酸的等电点小于6。

2 一系列球状的单体蛋白质，相对分子质量从10 000到100 000，随着相对分子质量的增加，亲水残基与疏水残基的比率将会发生什么变化?随着蛋白质相对分子质量的增加，表面积与体积的比率也就是亲水残基与疏水残基的比率必定减少。

假设这些蛋白质是半径为r的球状蛋白质，由于蛋白质相对分子质量的增加，表面积随r2的增加而增加，体积随r3的增加而增加，体积的增加比表面积的增加更快，所以表面积与体积的比率减少，因此亲水残基与疏水残基的比率也就减少。

3 从热力学上考虑，一个多肽的片段在什么情况下容易形成α-螺旋，是完全暴露在水的环境中还是完全埋藏在蛋白质的非极性内部?为什么?当多肽片断完全埋藏在蛋白质的非极性内部时，容易形成氢键，因为在水的环境中，肽键的C＝O和N－H基团能和水形成氢键，亦能彼此之间形成氢键，这两种情况在自由能上没有差别。

高级生化思考题

第一章概论1.生物分子提取和纯化的一般过程？2.细胞破碎的方法？3.抽提有效成分的影响因子：4.生物大分子常用的浓缩纯化方法？5.纯化方案的评价指标是什么？6.生物分离技术（纯化方案）设计的基本原则是什么？7.纯化生物产品的总收率是如何计算的？第二章沉淀法1.蛋白质沉淀方法有哪些？2.盐析的概念及机理是什么？3.硫酸铵饱和度：4.影响盐析的因素有哪些？5.硫酸铵盐析的方法有哪几种？6.盐析常数（Ks）：7.常用的脱盐方法：8.透析法注意事项：9.有机溶液能降低蛋白质溶解的原理：10.用乙醇沉淀蛋白质时应注意哪些事项？第三章吸附层析1.吸附层析分离物质的基本原理：2.吸附层析常用的吸附剂的种类：3.吸附剂的选择：4.羟基磷灰石(HA) ：5.硅胶吸附剂：6.洗脱剂符合条件：7.柱层析的设备：8.柱层析操作的一般过程：9.核酸在HA层析柱上分离的次序是双链RNA、杂链RNA、双链DNA，为什么？10.薄层层析(TLC)：第四章离子交换层析1.离子交换剂有哪几部分组成？何为阳离子和阴离子交换剂？2.影响离子交换选择性的因素：3.常用的离子交换剂应满足的要求？4.常用离子交换剂的分类？5.常用的离子交换剂的载体有：6.影响离子交换剂膨胀度的因子有哪些？哪个是关键因子？为什么？7.离子交换层析中，以0.1-0.5mol/L的NaCl梯度的缓冲液洗脱（总体积200mL，梯度瓶直径相同），通过层析柱75mL时， NaCl浓度是多少？0.25 mol/L8.现有肌苷样品溶液100mL，浓度为2mol/L，若每克干树脂总交换容量为3.5mmol，而实际交换容量是总交换容量的5%，问大约需要多少树脂？200/3.5=57.1 /0.05=1143g第五章凝胶过滤层析1.凝胶层析：2.凝胶过滤层析分离大分子物质的机制是什么？3.凝胶过滤的特点：4.用凝胶过滤层析法测定分子质量的局限性：5.分子质量为8×104和10×104的蛋白质能否在SephadexG-75柱中分开？为什么？（SephadexG-75的分离范围为3000 -70000）6.制备合格的凝胶柱应注意哪几点？7.概述哪些因子影响凝胶层析的分辨率？为什么？第六章亲和层析1.亲和层析：以亲和吸附剂为固定相，以特异性溶液为流动相。

生化思考题

\第一章蛋白质化学思考题1、组成蛋白质的AA 有哪些根据R 基的极性如何对其进行分类根据R 基的极性分：非极性R 基氨基酸共9种，均为中性AA ，疏水R 基AA 。

包括甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和甲硫氨酸（蛋氨酸）。

极性R 基氨基酸共11种，均为亲水R 基AA 。

根据R 基在生理pH 下带电与否分：（1）不带电荷的极性R 基AA ：共有6种，均为中性AA 。

包括丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺。

）（2）带负电荷的极性R 基AA ：共有2种，均为酸性AA 。

包括天冬氨酸和谷氨酸。

(3)带正电荷的极性R 基AA ：共有3种，均为碱性AA 。

赖氨酸、精氨酸和组氨酸。

2 、什么叫pI 有何生物学意义pI ：氨基酸蛋白质中的常见氨基酸：蛋白质的基本组成单位。

共20种。

蛋白中的稀有氨基酸：只在某些蛋白质中存在。

非蛋白质氨基酸：细胞、组织中有，蛋白质中无。

&当氨基酸主要以两性离子形式存在时'（或所带的正负电荷数相等，净电荷等于0，在外电场作用下既不向正极移动，也不向负极移动）所处溶液的pH值就称为该氨基酸的等电点。

当溶液中pH = pI时，AA净电荷为零；pH ＞ pI时，AA带负电；pH ＜ pI 时，AA带正电。

a、可据此利用电泳及离子交换层析法分离氨基酸和蛋白质。

b、等电点时AA的溶解度最小，易沉淀，可据此利用等电点沉淀法分离氨基酸和蛋白质。

.c、等电点时由于净电荷为零，AA在电场中不移动，可据此利用等电聚焦法分离氨基酸和蛋白质。

3 、什么叫Edman 反应有何生物学意义Edman反应（氨基酸与异硫氰酸苯酯的反应）氨基酸的α-NH2与异硫氰酸苯酯（PITC；苯异硫氰酸酯）间的反应。

可用于鉴定多肽或蛋白质的N-端氨基酸。

意义：测N-端；测氨基酸序列；测肽链数目。

—4 、什么叫肽肽单位肽平面二面角肽：氨基酸分子间通过脱去一分子水而相互连接成的链状化合物。

生化各思考题

生化各思考题第七章、代谢调控1、什么是新陈代谢？新陈代谢简称代谢，是细胞中各种生物分子的合成、利用和降解反应的总和。

一般来说，新陈代谢包括了所有产生和储藏能量的反应，以及所有利用这些能量合成低分子量化合物的反应。

但不包括从小分子化合物合成蛋白质与核酸的过程。

生物新陈代谢过程可以分为合成代谢与分解代谢。

2、什么是代谢途径？代谢途径有哪些形式。

新陈代谢是逐步进行的，每种代谢都是由一连串反应组成的一个系列。

这些一连串有序反应组成的系列就叫做代谢途径。

在每一个代谢途径中，前一个反应的产物就是后一个反应的底物。

所有这些反应的底物、中间产物和产物统称为代谢中间产物，简称代谢物。

代谢途径具有线形、环形和螺旋形等形式。

有些代谢途径存在分支。

3、简述代谢途径的特点。

生物体内的新陈代谢在温和条件下进行：常温常压、有水的近中性环境。

由酶催化，酶的活性受到调控，精密的调控机制保证机体最经济地利用物质和能量。

代谢反应逐步进行，步骤繁多，彼此协调，有严格顺序性。

各代谢途径相互交接，形成物质与能量的网络化交流系统。

ATP是机体能量利用的共同形式，能量逐步释放或吸收。

4、列表说明真核细胞主要代谢途径与酶的区域分布。

代谢途径（酶或酶系）细胞内分布代谢途径（酶或酶系）细胞内分布糖酵解胞液尿素合成胞液、线粒体三羧酸循环线粒体蛋白质合成内质网、胞液磷酸戊糖途径胞液DNA合成细胞核糖异生胞液mRNA合成细胞核糖原合成与分解胞液tRNA合成核质脂肪酸β氧化线粒体rRNA合成核仁脂肪酸合成胞液血红素合成胞液、线粒体呼吸链线粒体胆红素合成微粒体、胞液胆固醇合成内质网、胞液多种水解酶溶酶体磷脂合成内质网5、三个关键的中间代谢物是什么？在代谢过程中关键的代谢中间产物有三种：6-磷酸葡萄糖、丙酮酸、乙酰CoA。

特别是乙酰CoA是各代谢之间的枢纽物质。

通过三种中间产物使细胞中四类主要有机物质：糖、脂类、蛋白质和核酸之间实现相互转变。

6、细胞对代谢的调节途径有哪些？调节酶的活性。

生化实验思考题总结

生化实验思考题总结1.蛋白质定量测量的方法有哪些？简要说明其原理。

答：a.紫外吸收，在280nm处有最大吸收峰。

b.定氮法，利用蛋白质中氮元素含量为16%固定比例来测定。

c.分光光度计法，利用OD值和蛋白质浓度成正比的原理。

显色剂为考蓝。

d.双缩脲法。

也是利用显色反应。

e.Folin酚法。

2.如果凝胶过滤层析分离的蛋白质样品中含有多种蛋白质，在各蛋白质分子量已知的情况下，如何判断哪一种蛋白质时所想要的？答：现在假设有三种蛋白质a b c，分子质量a>b>c。

那么，a最先流出，在体积V1处有一个洗脱体积，对应的a的溶液浓度在V1处也最高，就会有一个OD值的峰值。

b c同理。

由不同的OD峰值，对应不同的洗脱体积，就可以筛选出想要的蛋白质。

如果想要b，那么在第二个吸收峰的时候，找到相应的洗脱体积，然后在其附近的所接到的溶液进行选取。

就会得到想要的蛋白质。

3.如果盐析后的样品不经脱盐处理便上样电泳，对其结果有何影响？答：如果没有去除清蛋白里面的盐分，则会使电泳速度下降。

原因在于溶液离子强度太大，蛋白质表面的电荷减少，所以导致电泳速度下降，甚至无法泳动。

4.对电泳所得的结果如何进行定量分析？答：将电泳完毕的样品（凝胶），按条带宽度的分布剪下，分别把每个小块样品用NaOH溶液漂洗，再将漂洗过的溶液进行OD值的测量。

5.使SDS-PAGE具有高分辨率的三个因素是什么？答：浓缩效应。

电荷效应。

分子筛效应。

6.实验所得的各点数据中，哪些易出现较大的误差？答：有两个点。

第一个，在三十秒的点，反应速度太快，时间如果掌握不准，容易出现误差。

另一个，在3min的点，反应速度很慢，斜率小，则倒数大，所以时间掌握不好，也容易出现大误差。

7.假如把碱性磷酸酶对底物的亲和力提高十倍，实验方案该如何修改？答：把底物和酶的浓度都降低。

8.请举出三种提取质粒的方法，并简要说明其中一种方法的原理。

答：碱裂解（要求原理，书上有）；一步法（见书上46，47页有关TELT试剂的内容）；SDS法；煮沸法。

生化考试的实验思考题

X9 肌糖原的酵解A）人体和动植物体中糖的存储形式是什么？实验时，为什么可以用淀粉代替糖原？人体中糖的储存形式为肌糖原与肝糖原，植物体中为淀粉。

因肌肉糜中含有可以酵解淀粉与糖原的酶类，最终在无氧条件下分解生成乳酸，参与显色反应。

B）试述糖酵解作用的生理意义？糖酵解是生物界普遍存在的供能途径，但其释放的能量不多，而且在一般生理情况下，大多数组织有足够的氧以供有氧氧化之需，很少进行糖酵解，因此这一代谢途径供能意义不大，但少数组织，如视网膜、睾丸、肾髓质和红细胞等组织细胞，即使在有氧条件下，仍需从糖酵解获得能量。

在某些情况下，糖酵解有特殊的生理意义。

例如剧烈运动时，能量需求增加，糖分解加速，此时即使呼吸和循环加快以增加氧的供应量，仍不能满足体内糖完全氧化所需要的能量，这时肌肉处于相对缺氧状态，必须通过糖酵解过程，以补充所需的能量。

在剧烈运动后，可见血中乳酸浓度成倍地升高，这是糖酵解加强的结果。

又如人们从平原地区进入高原的初期，由于缺氧，组织细胞也往往通过增强糖酵解获得能量。

在某些病理情况下，如严重贫血、大量失血、呼吸障碍、肿瘤组织等，组织细胞也需通过糖酵解来获取能量。

倘若糖酵解过度，可因乳酸产生过多，而导致酸中毒。

X10 脂肪酸的β-氧化A）为什么说做好本实验的关键是制备新鲜的肝糜？新鲜的肝糜中酶的活性高，所以生成丙酮的量才高如果不新鲜，酶的活性太低了，丙酮的量太低甚至没有，那实验就会失败B）什么叫做酮体？为什么正常代谢的产生的酮体量很少？在什么情况下血中的酮体含量增高，而尿中也能出现酮体？答：1、乙酰乙酸、β-羟基丁酸及丙酮，三者统称为酮体；2、因为代谢正常的情况下，血糖能够供给人体足够的能量，满足机体的需要。

这时就不需要脂肪大量分解来提供能量。

酮体的生成就是来自于肝内脂肪酸的分解。

脂肪不大量分解，自然没有大量脂肪酸分解成酮体。

3、但若人体血糖量不足，为了维持血糖稳定，就会促进脂肪的分解，生成一定的能量供给人体正常需要。

必做思考题(生化)

生物化学
必做思考题
1
第一章蛋白质的结构与功能
1. 检测食品中蛋白质含量的原理和方法是什么？
Hale Waihona Puke 2第二章核酸的结构与功能
1. DNA双螺旋结构模型的要点。
3
第三章酶
1. 酶的竞争性抑制：概念、特点、动力学参数及药理学应用。
4
第四章糖代谢
1. TAC的概念、步骤、限速酶、生理意义。 2. 试计算1mol 乳酸在心肌内彻底氧化可生成多少mol ATP？
8
第八章核苷酸代谢
1. 嘌呤核苷酸与嘧啶核苷酸合成的原料、特点、转变水平、限速酶、抗代谢物。
9
第九章物质代谢的联系与调节
1. 葡萄糖、脂肪和氨基酸之间相互转变的途径和枢纽。
10
第十五章细胞信号转导
1. 以肾上腺素升高血糖为例，叙述ACcAMP-PKA信号转导途径。
11
第十六章血液生化
1. 血红素合成的主要器官、亚细胞定位、合成原料及限速酶。
12
第十七章肝的生物化学
1. 两种胆红素理化性质的比较。
13
End
14
5
第五章脂类代谢
1. 糖尿病如何引起酮症酸中毒？ 2. 从营养物代谢的角度，解释为什么在 “减肥”的过程中要减少糖类物质的摄入量？
6
第六章生物氧化
1. 呼吸链中电子传递体的排列顺序。 2. 氧化磷酸化偶联（ATP生成）部位。
7
第七章氨基酸代谢
1. 鸟氨酸循环的器官、亚细胞定位、步骤、限速酶、生理意义。

生化思考题

蛋白质1.20种氨基酸的名称（一字符三字符），*AA结构通式，特点，**分类。

（重点是几个特殊的氨基酸及酸性、碱性氨基酸）2.**AA及蛋白质理化性质、等电点;蛋白质溶液稳定因素。

3. **Pr的一、二、三、四级结构的概念及相应的维持力4. **Pr二级结构的几种形式。

5. 肽键** 模序（motif）** 结构域（domain) ** 蛋白质亚基**协同效应* 变构效应蛋白组学6.举例说明蛋白质一级结构是空间结构的基础以及空间结构决定其特定功能。

7.何谓分子病*？举例说明；何谓蛋白质构象病*？举例说明；两者有何区别？8.试说明几种蛋白质分离纯化方法的原理。

(至少3种**）9.Pr变性**、复性及沉淀的定义10.了解测定蛋白质一级结构、空间结构目前常用的方法.酶*1.酶分子组成分类，非蛋白部分成分及功能*2.B族Vit与辅酶的关系**3.酶活性中心与必需基团4.同工酶*及临床意义*5.酶促反应特点*6.酶提高反应速率机制7.**酶促反应速率的影响（酶浓度、pH、温度、底物浓度、Km、Vmax意义）8.酶的抑制剂对酶促反应速率影响（各种抑制剂作用机制）核酸1.核酸的化学组成,**分子间如何连接。

**2.组成核酸的5种碱基名称、单字符以及在DNA和RNA中的存在情况,异同点。

3.核酸的一级结构指的是它的核苷酸排列顺序，为什么又可以称为碱基排列顺序？**4.DNA的双螺旋结构模型要点*5.双螺旋结构模型多样性*6.原核生物和真核生物DNA高级结构7.DNA多链螺旋碱基间形成的氢键形式8.RNA主要有哪些类型及结构特点*？它们各自功能如何？** 9.核酸理化性质**概念：DNA变性及复性增（减）色效应DNA融解温度（Tm)限制性内切酶核酶核酸酶退火核酸分子杂交糖代谢1 以图表的形式简述糖代谢的基本内容。

2* 何谓糖的无氧分解（糖酵解）？其生理意义？3 *简述有氧氧化的三个阶段，并指出每个阶段的主要事件。

生化复习思考题

生物化学期末复习思考题第一章蛋白质结构与功能1.试从含量及生物学性质说明蛋白质在生命过程中的重要性。

2.组成蛋白质的元素有哪几种?其中哪一种的含量可以看作是蛋白质的特征?此特性在实际上有何用途?3.蛋白质的基本组成单位是什么?蛋白质经过怎样处理才可产生这些基本组成单位?4.自然界中只有20多种氨基酸，其所组成的蛋白质则种类繁多，为什么?5.天然氨基酸在结构上有何特点?氨基酸是否都含有不对称碳原子?都具有旋光性质?6.氨基酸为什么具有两性游离的性质?7.何为兼性离子?8.沉淀蛋白质的方法有哪些?各有何特点?9.蛋白质一、二、三、四级结构及维持各级结构的键或力是什么?10.蛋白质二级结构有哪些主要形式?11.举例说明蛋白质一级结构与功能的关系，空间结构与功能的关系。

12.什么是蛋白质的等电点?当溶液PH>PI时，溶液中的蛋白质颗粒带什么电荷?13.什么是蛋白质的变性作用?举例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子。

14.维持蛋白质胶体稳定性的因素是什么?15.名词解释：肽键、肽键平面、亚基、蛋白质的两性电离和等电点、蛋白质的变性、蛋白质沉淀、变构作用、分子病、盐析。

第二章核酸结构与功能1.试比较RNA和DNA在结构上的异同点。

2.试述DNA双螺旋结构模式的要点及其与DNA生物学功能的关系。

3.试述RNA的种类及其生物学作用。

4.与其它RNA相比较，tRNA分子结构上有哪些特点?5.什么是解链温度?影响特定核酸分子Tm值大小的因素是什么?为什么?6.DNA与RNA分子组成有何差别?7.维持DNA一级结构和空间结构的作用力是什么?8.生物体内重要环化核苷酸有哪两种?功能是什么?9.按5′→3′顺序写出下列核苷酸的互补链。

①GATCCA ②TCCAGC10.试从以下几方面对蛋白质与DNA进行比较：①一级结构②空间结构③主要生理功能11.名词解释：稀有碱基、DNA的一级结构、核酸的变性、复性、Tm值、核酸杂交、第三章酶1.何谓酶?酶作为催化剂有哪些特点?2.辅助因子的化学本质是什么?何谓辅酶和辅基?辅酶与酶蛋白有何关系?3.主要辅酶(辅基)有哪些?它们的主要功能各是什么?4.试述酶作用的机理及影响酶促反应的因素。

生化实验思考题

思考题实验：糖的颜色反应、蛋白质及氨基酸的呈色反应P521、鉴别蛋白质的方法有哪些？简述其原理。

（1）.灼烧产生烧焦羽毛的气味是蛋白质。

（2.）遇浓HNO3变性产生黄色不溶物是蛋白质。

原理：蛋白质中含有苯环的氨基酸遇硝酸硝化。

（3.）磨浆过滤，取滤液，先加NaOH，再加入双缩脲试剂，出现紫色反应，就为蛋白质。

原理：铜离子在碱性条件下与两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键发生反应，生成紫色络合物。

2、能否利用茚三酮反应可靠鉴定蛋白质的存在？为什么？不能，和茚三酮反应的除了蛋白质外还有胺和氨基酸类等，它不是蛋白质的专一试剂。

实验：蛋白质沉淀反应P541、用蛋清作为铅或汞中毒的解毒剂的依据是什么？铅和汞是重金属，会使蛋白质变性，而人体组织中蛋白质是必不可少的组成成分，比如胃、食道等组织。

误服铅或汞后，吞入大量鸡蛋清（鸡蛋清中含有大量蛋白质），可使铅与汞先与蛋清反应，减少与机体组织的接触，进而减轻毒性。

2、在蛋白质的沉淀反应里，哪些是可逆的，哪些是不可逆的？不可逆：重金属盐沉淀蛋白质，乙醇沉淀蛋白质，生物碱试剂沉淀蛋白质。

可逆：蛋白质盐析作用。

实验：卵磷脂的提取和鉴定P301、卵磷脂提取的过程中，加入热95%的乙醇的作用是什么？增加溶解度2、卵磷脂的生物学功能有哪些？是生物膜的重要组成成分；促进脂肪代谢，防止出现脂肪肝；促进体内转甲基代谢的顺利进行；具有免疫调节功能；促进神经传达。

实验：酵母RNA的提取与鉴定P1261、加热提取RNA后为什么要加乙酸中和至微酸性？乙酸能不能多加？为什么？.加热后中和至微酸性可以除去蛋白质、多糖等杂质，不能多加，否则RNA会酸水解。

2、加乙酸后进行离心分离，上清液及沉淀物中各主要含什么物质？上清液主要为RNA，沉淀物中主要含蛋白质、多糖等杂质。

3、除了稀碱法外，还有没有其他提取RNA的方法？他们各有何优缺点？1、苯酚法；2、去污剂法、3、盐酸胍法。

2022生化思考题详细答案解析(医学本科生适用)

生物化学思考题1、叙述L-α氨基酸结构特征，比较各种结构异同并分析结构与性质的关系。

结构特点：氨基酸是较酸分子的a-氢原子被氨基取代直接形成的有机化合物，即当氨基酸的氨基与殁基连载同一个碳原子上，就成为a-氨基酸。

氨基酸中与竣基直接相连的碳原子上有个氨基，这个碳原子上连的集团或原子都不一样，称手性碳原子，当一束偏振光通过它们时，光的偏振方向将被旋转，根据旋转的方向分为左旋和右旋即D系和L系，L-a-氨基酸再被骗争光照射时，光的偏正方向为左旋。

R为侧链，连接-COOH的碳为a-碳原子为不对称碳原子（除了甘氨酸）不同的氨基酸其R基团结构各异。

根据测链结构可分为：①含煌链的为非极性脂肪族氨基酸，如丙氨酸；②含极性不带电荷的为极性中性氨基酸，如半胱氨酸；③含芳香基的为芳香族氨基酸，如酪氨酸；④含负性解离基团的为酸性氨基酸，如谷氨酸；⑤含正性解离基团的为碱性氨基酸，如精氨酸。

2、简述蛋白质一级结构、二级结构、三级结构、四级结构基本概念及各结构层次间的内在关系。

蛋白质的一级结构就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序，也是蛋白质最基本的结构。

主要化学键是肽键，二硫键也是一级结构的范畴。

蛋白质的二级结构是指多肽链中主链原子的局部空间排布即构象，不涉及侧链部分的构象。

主要化学键为氢犍。

蛋白质的多肽链在各种二级结构的基础上再进一步盘曲或折迭形成具有一定规律的三维空间结构,称为蛋白质的三级结构，蛋白质三级结构的稳定主要靠次级键，包括氢键、疏水键、盐键以及范德华力等。

具有二条或二条以上独立三级结构的多肽链组成的蛋臼质，其多肽链间通过次级键相互组合而形成的空间结构称为蛋白质的四级结构，其中，每个具有独立三级结构的多肽链单位称为亚基。

层次之间的关系：一级结构是空间构象的基础，决定高级结构；氨基酸的残基影响二级结构的形成，二级结构以一级结构为基础；在二级结构的基础上，肽链还按照一定的空间结构进一步形成更复杂的三级结构;具有三级结构的多肽链按一定空间排列方式结合在一起形成的聚集体结构称为蛋白质的四级结构。

生化实验思考题答案

生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解1、实验材料的选择依据是什么？答：生化实验的材料选择原那么是含量高、来源丰富、制备工艺简单、本钱低。

从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。

2、材料的破碎方法有哪些？答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法；(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等；(3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。

实验二总糖与复原糖的测定1、碱性铜试剂法测定复原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定复原糖的含量。

间接法的优点是操作简便、反响条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反响产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反响原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。

实验五粗脂肪的定量测定─索氏提取法〔1〕本实验制备得到的是粗脂肪，假设要制备单一组分的脂类成分，可用什么方法进一步处理？答：硅胶柱层析，高效液相色谱，气相色谱等。

〔2〕本实验样品制备时烘干为什么要防止过热?答：防止脂质被氧化。

实验六蛋白质等电点测定1、在别离蛋白质的时候，等电点有何实际应用价值？答: 在等电点时，蛋白质分子与分子间因碰撞而引起聚沉的倾向增加，所以处于等电点的蛋白质最容易沉淀。

在别离蛋白质的时候，可以根据待别离的蛋白质的等电点，有目的地调节溶液的pH使该蛋白质沉淀下来，从而与其他处于溶液状态的杂质蛋白质别离。

实验七氨基酸的别离鉴定－纸层析法1、如何用纸层析对氨基酸进展定性和定量的测定？答: 将标准的氨基酸与待测的未知氨基酸在同一X层析纸上进展纸层析，显色后根据斑点的Rf值，就可以对氨基酸进展初步的定性，因为同一个物质在同一条件下有一样的Rf值；将点样的未知氨基酸溶液和标准氨基酸溶液的体积恒定，根据显色后的氨基酸斑点的面积与点样的氨基酸质量成正比的原理，通过计算斑点的面积可以对氨基酸溶液进展定量测定。

生化思考题

第一章蛋白质的结构和功能1.组成人体Pr的AA的名称、结构通式、分类及分类依据。

具有哪些理化性质并如何应用于检测中3*.Pr的一、二、三、四级结构的概念及相应的维持力4 .简述Pr二级结构的几种形式及结构特点。

5*.模序（motif）结构域（domain) 蛋白质亚基蛋白质的等电点蛋白质变性盐析6*.以牛核糖核酸酶变性复性实验说明蛋白质的一级结构和功能的关系7*.协同效应变构效应以Hb结合O2为例，解释此两概念。

8.蛋白质理化性质，及应用9.*蛋白质分离纯化常用方法及原理。

第二章核酸的结构和功能1.核酸的化学组成**, 分子间如何连接。

**2.组成核酸的5种碱基名称、单字符以及在DNA和RNA中的存在情况,异同点。

3.核酸的一级结构指的是它的核苷酸排列顺序，为什么又可以称为碱基排列顺序**的双螺旋结构模型要点5.原核生物和真核生物DNA高级结构6**.RNA主要有哪些类型及结构特点它们各自功能如何7.核酸理化性质**概念：DNA变性DNA复性增色效应DNA融解温度（Tm)限制性内切酶核酶核酸酶退火核酸分子杂交第三章酶1.单纯酶与结合酶组成区别2.与维生素或维生素类物质相关的辅酶及其功能3.酶的活性中心、必需基团、同工酶、活化能、酶原激活、别构调节4.酶促反应的特点酶如何通过促进底物形成过渡态而提高酶促反应速度5.米氏方程公式，并指出何谓Km值、Vm如何测定Vm、Km的意义及其在三种可逆抑制反应的变化如何.6.什么是酶的最适pH、最适温度7.从酶促反应的角度阐明重金属及有机磷农药中毒，及解救的原理8.何谓竞争性抑制。

用竞争性抑制的原理解释磺胺类药物抑菌的机制9.酶的活性调节有几种10.按酶促反应的性质，酶可分哪几类第四章糖代谢**掌握各代谢途径的概念**代谢途径及关键酶的英文单词1.机体内糖（淀粉）的消化吸收主要部位及吸收机制、形式*2.机体内糖代谢的基本概况3.**自己根据所学糖代谢途径，总结糖酵解、糖有氧氧化途径，及关键酶，产能/耗能，CO2及脱氢部位。

生化习题(复习思考题)

《生物化学》习题生物化学期末复习思考题第一章蛋白质结构与功能12?其中哪一种的含量可以看作是蛋白质的特征?此特性在实际上有何用途?3?蛋白质经过怎样处理才可产生这些基本组成单位?420多种氨基酸，其所组成的蛋白质则种类繁多，为什么?5?氨基酸是否都含有不对称碳原子?都具有旋光性质?6?7?8?各有何特点?9?10?1112?当溶液PH>PI时，溶液中的蛋白质颗粒带什么电荷?13?举例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子。

14?15质的变性、蛋白质沉淀、变构作用、分子病、盐析。

第二章核酸结构与功能1RNA和DNA在结构上的异同点。

2DNA双螺旋结构模式的要点及其与DNA生物学功能的关系。

3RNA的种类及其生物学作用。

4RNA相比较，tRNA分子结构上有哪些特点?5?影响特定核酸分子Tm值大小的因素是什么?为什么?6DNA与RNA分子组成有何差别?7DNA一级结构和空间结构的作用力是什么?8?功能是什么?95′→3′顺序写出下列核苷酸的互补链。

①GATCCA ②TCCAGC10DNA进行比较：①一级结构②空间结构③主要生理功能11DNA的一级结构、核酸的变性、复性、Tm值、核酸杂交、第三章酶1?酶作为催化剂有哪些特点?2?何谓辅酶和辅基?辅酶与酶蛋白有何关系?3(辅基)有哪些?它们的主要功能各是什么?4及影响酶促反应的因素。

米氏常数的意义是什么?5?比较三种可逆抑制作用的特点。

6?磺胺药物作用的生化机理是什么?7全酶、酶蛋白、活性中心、酶原、酶原激活、同功酶、变构酶、必需基团、酶的专一性。

第四章糖代谢1?简述糖酵解的部位、关键酶及终产物。

2?3?分哪几个阶段?关键酶是什么?4?5?6?有何生理意义?7?简述血糖的来源和去路。

8?如何影响?91011(已知体内谷氨酸脱氨后可变为α—酮戊三酸) 12第五章脂类代谢1脂类?脂类的生理功能是什么?2?产物是什么?3?请计算出1分子软脂酸彻底氧化成CO2和H2O共产生少分子ATP?4?有何生理意义?5?每种的主要生理功能是什么?6?胆固醇在体内可转变为哪些物质?789β—氧化、酮体、血脂、血浆脂蛋白、必需脂肪酸、载脂蛋白、脂肪的动员、酮症。

生化复习思考题(填)

生化复习思考题一、名词解释：1、必需氨基酸:不能在体内合成，必须由食物提供的氨基酸。

2、肽单元：又称为肽基（peptide group），是肽键主链上的重复结构。

是由参于肽链形成的氮原子，碳原子和它们的4个取代成分：羰基氧原子，酰氨氢原子和两个相邻α-碳原子组成的一个平面单位。

3、同工酶：指催化相同的化学反应，但酶蛋白的分子结构，理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。

4、糖酵解：在缺氧情况下，由葡萄糖分解供能，形成乳酸的过程。

5、氧化磷酸化:指代谢物脱氢经呼吸链传递给氧生成水的同时，释放能量用以使ADP磷酸化生成ATP.6、酮体:乙酰乙酸，B-羟丁酸及丙酮的统称7、呼吸链：位于线粒体内膜一组排列有序的递氢体和递电子体构成的功能单位。

8、转氨基作用：在转氨酶的作用下，氨基酸的a-氨基与a-酮酸的酮基相互交换，生成新的相应的氨基酸和a-酮酸。

9、一碳单位：一些氨基酸在分解代谢过程中可以产生含有一个碳原子的基团，这种含有一个碳原子的基团称为一碳单位。

10、嘌呤核苷酸的从头合成：利用磷酸核糖、氨基酸、一碳单位及CO2等简单物质为原料合成嘌呤核苷酸的过程11、半保留复制：复制时，母链的双链DNA解开成两股单链，各自作为模板，指导合成新的互补子链新合成的子代双链DNA分子，其中一股单链从亲代完整地接受过来，称为母链另一条链则完全重新合成，称为子链。

由于碱基互补，两个子细胞的DNA双链，都和亲代母链DNA碱基序列一致。

12、冈崎片段：随从链中不连续复制的片段称为冈崎片段13、逆转录：以病毒RNA为模板，利用宿主细胞中四种dNTP作为底物，合成与RNA互补的DNA链的过程。

14、增色效应：在DNA解链的过程中，由于有更多的碱基得以暴露，DNA在260nm 处的吸光度增加，这种现象称为DNA增色效应.15、解链温度:在解链过程，紫外吸光度的变化^A260达到最大变化值一半时的温度称为DNA的解链温度16、不对称转录：当一个基因DNA片段进行转录时，双链DNA分子中只有一条链作为转录的模板，这种转录方式称为不对称转录。

生化思考题答案

第一章绪论1.生物分子之间的作用力有哪些？2.分子识别？1、范德华力、氢键、盐键、疏水作用力、芳环堆积作用、卤键都属于次级键（又称分子间弱相互作用2、分子识别是指分子选择性的相互作用，例如抗原与抗原之间、酶与底物之间、激素与受体之间。

分子识别是通过两分子各自的结合部位来实现的。

识别要求：要求两分子各自的结合部位结构互补；要求两个结合部位有相应的基因，相互作用之间能够产生足够的作用力，是两个分子能够结合在一起。

糖链、蛋白质、核酸、脂质之间相互之间都存在分子识别。

第二章糖类化学1.是不是所有的糖都有变旋现象？为什么？2.是否一切糖都是还原糖？什么样的糖是还原糖？3.举出几例重要单糖衍生物及生理作用？ 4．淀粉、糖原组成及结构特点？二者的异同点？5．环糊精的结构特点及应用？ 6.淀粉糊化？淀粉凝沉？变性淀粉？变性淀粉在纺织工业上的应用。

1：不是，糖分子当中必须有游离的醛基和酮基或者游离的半缩醛羟基.所有寡糖都有旋光性，但是并非所有寡糖都有变旋性，蔗糖由于分子中不存在半缩醛羟基，因此不具有变旋性，除二羟基丙酮外，单糖都，是旋光性物质2：不是，糖里面含有醛基和酮基的具有还原性。

单糖都是还原糖3：（1）取代单糖----氨基糖决定血型和细菌的细胞壁；（2）糖醇和糖酸：重要的工业产品；糖苷：多种中药的有效成分，糖醇（常见的有甘露醇和山梨醇）：可防止龋齿的发生，可抑制血糖的发生，；抗坏血酸（山梨醇制造）：可以保护蛋白质中的半胱氨酸。

山梨醇：甜味剂、保湿剂、防冻剂、防腐剂等使用，同时具有多元醇的营养优势，即低热值、低糖、防龋齿等甘露醇：利尿剂，降低颅内压、眼内压及治疗肾药、脱水剂、食糖代用品，无吸湿性，干燥快，化学稳定性好，爽口的甜味，用于麦芽糖、口香糖、年糕等食品的防粘，以及用作一般糕点的防粘粉。

4：淀粉是由许多a-D-葡萄糖分子以糖苷键连接而成，天然淀粉（淀粉粒状存在）有两种类别一种是溶于水的直链淀粉，一种是不溶于水的支链。

生化思考题答案-生科

第一章核酸的结构和功能1、有一噬菌体的突变株其DNA长度为15μm，而野生型的DNA长度为17μm，问该突变株的DNA中有多少个碱基对缺失？答案：17-15=2μm =2000nm 2000/0.34=5882.42、把下列说法转化成公式，并判断正误！1.嘌呤碱基总数等于嘧啶碱基总数，各占全部碱基总数的50%。

2.在双链DNA分子中，两个互补配对的碱基之和的比值与该DNA分子中每一单链中这一比值相等；且等于其转录形成的mRNA中这一比值。

3.DNA分子一条链中，两个不互补配对的碱基之和的比值等于另一互补链中这一比值的倒数。

解析1.A+G=T+C,(A+G)/(A+G+T+C)=(T+C)/(A+G+T+C)=50%，错;未说明是单双链2.3、变性、复性与增色、减色之间的关系？原因？！影响DNA双螺旋结构稳定性因素与变性、复性及Tm值之间的关系？！解析：1.核酸变性产生增色效应，复性产生减色效应。

原因：变性过程中，核酸双螺旋结构中碱基之间的氢键断裂，其内部暴露碱基增多，260nm紫外线吸收值升高，故产生增色效应；而复性对应单链重新缔合的过程，暴露碱基数目减少，紫外线吸收降低，故产生减色效应。

2.影响DNA双螺旋结构稳定性的因素有：互补碱基对间的氢键、碱基堆集力、带负电荷的磷酸基团的静电斥力、碱基分子内能。

氢键越多、碱基堆集力越强，分子的稳定性越高，变性越难，复性越易，Tm值越高；带负电荷的磷酸基团的静电斥力越强、碱基分子内能越高，分子稳定性越低，变性越容易，复性越难，Tm值越低。

4、有两个DNA样品，分别来自两种未确认的细菌。

这两个DNA样品中腺嘌呤碱基（A）含量分别占它们DNA总碱基的32%和17%。

其中哪一种DNA是取自温泉（64℃）环境下的细菌，哪一种是取自嗜热菌？为了防止DNA变性或保持其双螺旋结构，DNA应保存在蒸馏水中！对吗？原因？解析：1.占DNA总碱基的32%的细菌取自温泉。

因为G-C间有三个氢键，而A-T间仅有两个氢键，A含量高，对应G-C含量低，则该DNA 稳定性相对较差，不宜在高温条件下生存；2.不对，因为由脱氧核糖和磷酸间隔形成的亲水骨架在双螺旋的外侧，易与水结合，从而使氢键断裂。