蛋白质分离纯化练习题文稿

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蛋白质的提取和分离专题训练

蛋白质的提取和分离专题训练一．选择题1．下列有关蛋白质的提取和分离的操作，其中排序正确的是()。

A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定2．下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是()。

A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱3．在蛋白质的提取和分离中，下列对样品处理过程的分析正确的是()。

A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B．洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的结果C．洗涤过程选用质量分数0.1%的NaCl溶液(生理盐水)D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质4．下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是()。

A．可采集猪血作为实验材料B．用蒸馏水重复洗涤红细胞C．血红蛋白释放后应低速短时间离心D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液5．蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。

下列叙述不正确的是()。

A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质6．凝胶色谱法分离蛋白质时使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(SephadexG—75)，其中G、75的含义分别是()。

A．G表示凝胶的使用量，75表示加75 g水B．G表示凝胶的交联程度，75表示需加热75 ℃C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示每克凝胶膨胀时吸水7.5 g D．G表示凝胶的膨胀体积，75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm37．用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质()。

酶的研究与应用+蛋白质的提取和分离练习题

④
在恒温水浴中保温，并用玻璃棒不时搅拌
10min
10min
（3）取出两个烧杯，同时进行过滤．观察（或比较）
，并记录结果．
实验结果的预测及结论：
如果是
，则说明果胶酶对果胶的水解具有催化作用．
第 5页（共 47页）
高中生物选修一
[课题二]探索果胶酶催化果胶水解适宜的 pH
（1）本课题实验步骤中，在完成“烧杯中分别加入苹果泥、试管中分别注入果胶酶溶液、
组．
（3）微生物是生产果胶酶的优良生物资源．分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培
养基应以
为唯一碳源；如需进一步纯化果胶酶，可根据果胶酶分子的
（至
少写出两点）等特性进行分离提纯．由于果胶酶的活性容易受到外界环境因素的干扰，
所以应利用
技术减少影响从而保护酶的活性．
（4）该兴趣小组进一步探究了一定浓度的果胶酶制剂乙在不同浓度果汁下的作用，实验结
（1）在缺水状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复
状态，一般是将干酵母放在
中进行活化．活化前应选择足够大的容器，因为酵母
细胞活化时
．
（2）影响实验成败的关键步骤是
．
（3）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目
．
（4）观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明
的检测。
（3）制作葡萄酒时，温度应该控制在
。在酸性条件下，可用
来检测发酵产
物中是否有酒精产生。若想进一步获得纯化的酵母菌，可采用
甚。
（4）发酵完成后，某小组制作葡萄酒品质非常好，为方便后续年级使用该菌种，可将菌液
用
的方法长期保存。另一组的同学用葡萄制做的果酒酒味醇正，放置一段时间后，

生物分离纯化习题 (1)

第一章绪论一、名词解释生物物质生化分离技术二、填空题1.生物物质的来源、、、、。

2.生物分离纯化工作按照生产规模可分为、、三个层次。

3.蛋白质保存方法、、。

三、选择题1.选择生物物质分离纯化技术和工艺的依据（）A、物理性质B、化学性质C、生物学性质D、生理性质2、生物活性越高的成分，一般它在物质中的含量越（）。

A、高B、低C、一般D、无法提取3分离纯化过程需要加入（）保持生物大分子的活性。

A、糖类B、缓冲溶液C、中性盐D、半胱氨酸四、简答题1.生物分离纯化的特点？2.生物分离纯化原材料的选择要注意哪些问题？3.影响生物产品保存的主要因素？第二章预处理技术一、名词解释凝聚作用絮凝作用凝聚值二、填空题1．组织与细胞的破碎方法有、、、。

2.降低发酵液黏度的方法、。

3.加入助滤剂的方法、。

4.除去杂蛋白的常用方法、、。

5.凝聚值越小，则凝聚剂的凝聚能力越。

6.检查细胞破碎效果的方法有、、。

三、选择题1.大多数蛋白质的等电点在（）范围。

A、酸性B、碱性C、中性D、不固定2.加入助滤剂可使滤液（）A、滤速增大B、滤速减小C、增加成本 D 、保持渗透性3.除去钙离子的试剂（）A、草酸B、草酸钙C、草酸钠D、铁离子4．分离DNA、RNA混合物（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法5．分离大小不同、密度不同的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法6．分离大小相近、密度不同的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法7．分离大小不同、密度相近的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法四、简答题1.改变发酵液过滤特性的方法有哪些？2.影响絮凝效果的因素有哪些？3.超声波破碎法的特点？4.进行细胞破碎所使用的表面活性剂有哪些？5.影响离心效果的因素有那些？6.常用的离心设备有哪些？第三章固相析出分离法一、名词解释（每题2分）1．结晶2．盐析法二、填空（每空1分）1．常用的盐析用盐有、、2．盐析方法有两种类型，分别为、，其中用于提取的前期，用于提取的后期3．盐析用中性盐的浓度多用来表示，也就是把饱和时的浓度看作1或100%。

苏教版选修一生物成分的分离与测定技术作业

第四章第一节课时作业一、选择题1•下列关于蛋白质的纯化方法的叙述，错误的是（）A •纯化主要是根据蛋白质以及蛋白质与其他物质之间的理化性质的差异进行的B •透析法可去除小分子化合物杂质，原理是不同分子所携带净电荷不同C.通过控制离心速率，可使分子大小，密度不同的蛋白质沉降分层，从而分离不同的蛋白质D •不同的物质在同一电场中的泳动速度不同，因此可用电泳法分离蛋白质解析：透析法分离纯化蛋白质是因为蛋白质的分子大，不能透过半透膜。

答案： B2•相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程，可表示为图中的（）A B C 0解析：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。

相对分子质量大的蛋白质只能从凝胶间隙通过，路程短，速度快，先到达色谱柱的下端；相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢。

答案： B3•下列有关提取和分离血红蛋白的实验叙述错误的是（）A •该实验的材料必须选用鸡血B •通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取C •凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质D •电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离解析：该实验的材料不能选用鸡血，而应用哺乳动物成熟的红细胞，因为后者没有细胞核和各种细胞器，有利于得到较纯净的血红蛋白。

答案： A4•在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是（）A •磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程B •血红蛋白是一种两性物质，需要酸进行中和C・防止血红蛋白被氧气氧化D .让血红蛋白处在稳定的 pH范围内，以维持其结构和功能解析：在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变，从而有利于血红蛋白的分离。

答案： D5.下列说法不正确的是（）A .血红蛋白在释放时，加蒸馏水到原血液的体积，再加40%体积的甲苯，充分搅拌10 min , 红细胞破裂释放出血红蛋白B •血红蛋白溶液离心后分为4层，第1层为白色薄层固体C.血红蛋白溶液离心后分为4层，第4层为暗红色沉淀物D .血红蛋白溶液离心后分为4层，第3层为红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液解析：血红蛋白溶液离心后，试管中的溶液分为4层，第1层为无色透明的甲苯层，第2层是白色薄层固体，即脂溶性物质的沉淀层，第3层是血红蛋白的水溶液，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。

蛋白质分离纯化试题版

一、已知某生物中一种蛋白质的分子量约为62000，请最大限度的分离纯化这种蛋白，根据下列要求写出具体的分离纯化方法。

（1）利用溶解度差别进行分离（2）利用蛋白分子大小进行分离（3）根据不同的电荷进行分离（4）利用已制备对的抗体进行分离（5）蛋白质纯度坚定答：（1）根据溶解度不同进行分离纯化影响蛋白质溶解度的外部条件有很多,比如溶液的pH值、离子强度、介电常数和温度等。

但在同一条件下,不同的蛋白质因其分子结构的不同而有不同的溶解度,根据蛋白质分子结构的特点,适当地改变外部条件,就可以选择性地控制蛋白质混合物中某一成分的溶解度,达到分离纯化蛋白质的目的。

常用的方法有等电点沉淀和pH值调节、蛋白质的盐溶和盐析、有机溶剂法、双水相萃取法、反胶团萃取法等。

等电点沉淀和pH值调节是最常用的方法。

每种蛋白质都有自己的等电点,而且在等电点时溶解度最低;相反,有些蛋白质在一定pH值时很容易溶解。

因而可以通过调节溶液的pH值来分离纯化蛋白质。

（2）根据分子大小不同进行分离纯化蛋白质是一种大分子物质,并且不同蛋白质的分子大小不同,因此可以利用一些较简单的方法使蛋白质和小分子物质分开,并使蛋白质混合物也得到分离。

根据蛋白质分子大小不同进行分离的方法主要有透析、超滤、离心和凝胶过滤等。

透析和超滤是分离蛋白质时常用的方法。

透析是将待分离的混合物放入半透膜制成的透析袋中,再浸入透析液进行分离。

超滤是利用离心力或压力强行使水和其它小分子通过半透膜,而蛋白质被截留在半透膜上的过程。

这两种方法都可以将蛋白质大分子与以无机盐为主的小分子分开。

它们经常和盐析、盐溶方法联合使用,在进行盐析或盐溶后可以利用这两种方法除去引入的无机盐。

（3）根据电荷不同进行分离纯化根据蛋白质的电荷即酸碱性质不同分离蛋白质的方法有电泳和离子交换层析两类。

在外电场的作用下,带电颗粒(如不处于等电点状态的蛋白质分子)将向着与其电性相反的电极移动,这种现象称为电泳。

蛋白质纯化试题整理

名词解释1. 截留分子量(molecular weight cut-off, MWCO)：不能通过膜的最小分子量2. 超滤：选择合适孔径的超滤膜，在离心力或较高压力下，使水分子和其他小分子物质通过超滤膜，而目标蛋白样品分子被截留不能通过超滤膜，从而增加蛋白样品浓度，达到浓缩效果的方法3、陶南效应：离子交换剂表面pH与溶液pH是不一致的。

在阳IE表面的微环境中，H＋被吸引而OH－被排斥，交换剂表面pH比周围低1个pH单位；而阴IE表面的微环境中，H＋被排斥，交换剂表面pH比周围高1个pH单位4、离子交换剂的有效（实际）交换容量：指在一定的实验条件下，每克干介质或每毫升湿胶吸附蛋白质的实际容量5. 聚沉（coagulation）是指在聚沉剂的作用下，溶液中的蛋白质相互聚集为较大在聚沉物（＞1mm）的过程•常见的聚沉剂：无机盐类（如氯化锌、氯化铁、氯化铝、硫酸锌、硫酸铝），聚合无机盐（聚合铝、聚合铁等）•聚沉条件：-20℃以下，pH3~6，较高离子强度，高多价金属离子（Fe3+、Al3+）6. 絮凝（flocculation）是指在絮凝剂的作用下，通过吸附、交联、网捕，把蛋白质聚结为大絮体沉降的过程•常见的絮凝剂：淀粉、树脂、单宁、离子交换树脂及纤维素衍生物•絮凝作用一般在聚沉作用之后使用；絮凝剂的选择应根据成本、毒性等具体情况考虑；应通过试验筛选获得最适合的絮凝剂类型、用量及作用条件7、盐溶：蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随着盐浓度的增高而上升8、盐析：但当盐浓度增高到一定数值时，其溶解度又逐渐下降，直至蛋白质析出9、透析：利用小分子能通过，而大分子不能透过半透膜的原理，把不同性质的物质彼此分开的一种方法。

对于蛋白质样品，透析过程中因蛋白质分子体积很大，不能透过半透膜，而溶液中的无机盐小分子则能透过半透膜进入水中，因此不断更换透析用水即可将蛋白质与无机盐小分子物质完全分开。

蛋白的分离纯化过程中常用此法脱去无机盐（如硫酸铵）10、排阻极限：指不能进入凝胶颗粒内部网孔的最小蛋白的分子量11、凝胶颗粒的分级范围：指能进入凝胶颗粒内部网孔的最大分子和最小分子的分子量范围12、过滤：利用多孔介质（滤纸、滤膜等）阻截大的颗粒物质，而使小于孔隙的物质通过的一种的分离方法。

2019年高考生物一轮重要考点《蛋白质的提取与分离》练习卷

蛋白质的提取与分离1．蛋白质的分离与提纯技术是蛋白质研究的重要技术，下列有关叙述不正确的A．根据蛋白质分子不能通过半透膜的特性，可将样品中各种不同蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质2．蛋白质提取过程中有关透析的叙述，错误的是A．用于透析的薄膜要具有选择透过性B．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的C．透析能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内D．透析可用于更换样品的缓冲液3．下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是A．是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B．在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢，以致最后流出C．凝胶内部有很微细的多孔网状结构，其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D．一般情况下，凝胶对要分离的物质没有吸附作用，因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来4．将处理破裂后的红细胞混合液以 2 000 r/min的速度离心10 min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是A．血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、细胞破碎物沉淀层B．甲苯层、细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层C．脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、细胞破碎物沉淀层D．甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层5．为了提取血红蛋白，从学校附近的屠宰场取新鲜的猪血，对猪血处理的正确操作是A．要在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠B．取血回来后，马上进行高速长时间离心C．将离心后的血细胞加入清水缓慢搅拌D．重复洗涤直到上清液呈红色为止6．相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程，可表示为图中哪一个A．B．C．D．7．下列有关血红蛋白的提取与分离的实验操作的叙述，正确的是A．分离红细胞时采用低速长时间离心B．红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水即可C．分离血红蛋白溶液要低速短时间离心D．透析时要用20 mmol/L的磷酸缓冲液，透析12 h8．镰刀型细胞贫血症是一种由基因突变引起的遗传病，患者的红细胞是弯曲的镰刀状。

蛋白质生化导论习题1

SDS给蛋白质包裹上一层带着的电荷。

a.阳离子B.阳性c.以上都不正确。

d.中性E..阴性1.Drag the right answers to the right positions. （将正确的答案拖到正确的位置。

）Nascent polypeptide Folding intermediate disaggregation unfolding Misfolded protein aggregation remodeling 新生多肽折叠中间体分解展开错误折叠蛋白质聚合重塑2.蛋白质分子引起280nm光吸收的最主要成分是a. 肽键b. 半胱氨酸的-SH基c. 苯丙氨酸的苯环d. 组氨酸的咪唑环e. 色氨酸的吲哚环含芳香环的氨基酸是a. 异亮氨酸b. 天冬氨酸c. 酪氨酸d. 缬氨酸e. 赖氨酸3.蛋白质变性是由于a. 以上都不是b. 蛋白质一级结构改变c. 蛋白质水解d. 辅基的脱落e. 蛋白质空间构象的改变下列有关蛋白质β折叠结构的叙述正确的是a. 以上都正确b. 肽单元折叠成锯齿状c. 若干肽链骨架平行或反平行排列，链间靠氢键维系d. β折叠结构的肽链较伸展e. β折叠结构为二级结构4.可用于蛋白质定量的测定方法有[单选题]a. 以上都可以维系蛋白质一级结构的化学键是a. 氢键_____是一种脂族氨基酸，但它与其他氨基酸不同，因为它的侧链与主链的和结合。

a、脯氨酸；氮；α-碳b、苯丙氨酸；氮；α-碳c、苯丙氨酸：氮；羰基氧d、脯氨酸；α-碳；羰基氧。

生物分离与纯化技术模拟试卷三答案

生物分离与纯化技术模拟试卷三答案一、名词解释（每小题3分，共15分）1．CM-Sephadex C-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。

2．絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程3．离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高4．膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。

5．层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在两个相中。

二、单选题（每小题1分，共15分）1．适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是（ B ）。

A．活性炭 B.氧化铝 C.硅胶 D.磷酸钙2．下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的？（ B ）A.该酶的活力高B.对底物有高度特异亲合性C.酶能被抑制剂抑制D.最适温度高E.酶具有多个亚基3．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷，破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点4．凝胶色谱分离的依据是（B）。

A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同5．如果要将复杂原料中分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用（D）。

A、Sephadex G-200B、Sephadex G-150C、Sephadex G-100D、Sephadex G-506．工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀，一般先将其转变为（B）。

A、钠型和磺酸型B、钠型和氯型C、铵型和磺酸型D、铵型和氯型7．下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（ A ）。

酶的研究与应用+蛋白质的提取和分离练习题(教师)

一、酶的研究与应用1．（2015春•沭阳县期中）如下是制备固定化酵母细胞的实验步骤，请回答：酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞（1）在缺水状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态，一般是将干酵母放在蒸馏水中进行活化．活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时体积会增大．（2）影响实验成败的关键步骤是配制海藻酸钠溶液．（3）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目少．（4）观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明海藻酸钠浓度偏高，制作失败．（5）固定化细胞技术一般采用包埋法固定化，原因是细胞个体大，不易从包埋材料中漏出．（6）该实验中CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉．（7）将海藻酸钠与酵母细胞混合时要等海藻酸钠冷却至室温，再加入活化的酵母细胞．2．（2015春•雨城区校级月考）工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出果汁率。

为研究温度对果胶酶活性的影响，某学生设计了如下实验：①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管，在100C水浴中恒温处理10min（如图A）。

②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10℃水浴恒温处理10min（如图B）。

③将步骤②处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量（如图C）。

（1）果胶酶能破除细胞壁，是因为果胶酶可以促进细胞壁中的果胶水解。

（2）实验结果表明，在上述8组实验中，当温度为40℃时果汁量最多，此时果胶酶的活性最高。

当温度再升高时，果汁量降低，说明酶活性降低。

（3）实验步骤①的目的是避免果汁和果胶酶混合时影响混合物温度，从而影响果胶酶活性。

实验操作中，如果不经过步骤①的处理，直接将果胶酶和苹果泥混合，是否可以？请解释原因。

3．（2018•未央区校级模拟）果胶酶能分解果胶等物质，可以用来澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用．回答下列问题：（1）果胶酶是分解果胶的酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶．食品工业中之所以使用果胶酶澄清果蔬饮料，是因为果胶酶能破坏植物的细胞壁结构．（2）微生物是生产果胶酶的优良生物资源．分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培养基应该以果胶为唯一碳源；为了纯化该生物，需要在固体（填“固体”或“液体”）培养基上接种菌种，最常用的接种方法有平板划线法或稀释涂布平板法．（3）在榨汁果汁前，要将果胶酶和果泥混匀保温，目的是提高出汁率；过滤后要用果胶酶处理果汁，目的是使果汁变澄清．（1）霉菌发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用量最大的酶制剂．某科研小组为了筛选出果胶酶的高产菌株，进行了相关实验．第一步：取样．如果你是该小组的成员，你最好从果园中的土壤或腐烂的水果中去取样分离产果胶酶的菌株．第二步：制备培养基．筛选果胶酶高产菌株的培养基，主要营养成分有：水、果胶、硝酸钾、高碘酸（果胶的降解产物可以溶于高碘酸而在培养基上形成透明圈）等．在该配方中，硝酸钾是微生物需要的氮源和无机盐．为了便于分离纯化目的菌株，培养基中除了加入上述物质外，还必须加入琼脂．培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法．第三步：培养及筛选．培养基上接种后，在300C恒温箱中培养48h，挑选出周围形成透明圈最大的菌落作为生产果胶酶的菌种．从筛选出的微生物中分离提取的果胶酶通常需要检测酶的活性，以确定其应用价值．（2）在利用筛选出的霉菌进行生产时，科研人员发现影响果胶酶生产的因素很多，并且它们之间还可能相互影响．他们首先研究了温度对酶产量的影响，实验结果如图甲，然后又分别研究了碳源、氮源浓度（各五个水平）对生产的影响，得到图乙和丙．①科研人员在研究碳源浓度对酶产量的影响时，应设定的培养温度是30℃，如果将温度控制在5．C，能否到的图乙所示图象：不能，原因是温度太低导致酶的活性过低．②在生产中他们根据上述研究结果，将各个变量都设定为最适条件，却发现酶的产量不是最高的，要想继续探究最佳的培养条件，他们该如何进一步进行实验：将各种影响因素的不同水平逐一组合，依次实验．5．（2010•浙江）“生物技术实践”模块请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上。

中图版高中生物选修1第六章第一节蛋白质的提取和分离课后训练

蛋白质的提取和分离1 蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。

下列有关叙述不正确的是（）。

A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过层析技术分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心技术分离蛋白质2 各种动物血清内乳酸脱氢酶同工酶的组成是不同的。

可以比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶差异的大小来判断动物之间亲缘关系的远近。

下列各种实验方法中，不能采用的方法是（）。

A．测乳酸脱氢酶同工酶的氨基酸序列B．测控制乳酸脱氢酶同工酶合成的基因碱基序列C．用电泳法比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的电泳带D．检测不同动物的乳酸脱氢酶同工酶的pH3 电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（）方向的电极移动的现象。

A．相同B．相反C．相对 D．相向4 使用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（）。

A．电荷的多少 B．分子的大小C．肽链的多少 D．分子形状的差异5 蛋白质提取和分离分为哪几步？（）A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定6 对凝胶电泳的相关认识中，错误的是（）。

A．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率不取决于分子的大小B．蛋白质在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率取决于分子的大小C．SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离D．凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响参考答案1 解析：蛋白质分子不能透过半透膜，据此可利用半透膜除去样品中相对分子质量小的杂质。

答案：A2 解析：生物是由共同的原始祖先进化而来的。

各种生物之间具有或近或远的亲缘关系。

亲缘关系越近，则其对应的基因的碱基序列相似程度也越高。

【生物】高考生物总复习第六章第1节蛋白质的提取和分离能力提升含解析中图版选修1

【关键字】生物高考生物总复习第六章第1节蛋白质的提取和分离能力提升（含解析）中图版选修11.蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。

下列有关叙述不正确的是( ) A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过层析技术分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心技术分离蛋白质解析：选A。

蛋白质分子不能透过半透膜，据此可利用半透膜除去样品中相对分子质量小的杂质。

2.下列叙述不正确的是( )A．蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快B．蛋白质所带的电荷数越少，移动得越快C．电荷数相同时，相对分子质量越大，移动越慢D．电荷数相同时，相对分子质量越小，移动越快解析：选B。

在电泳中，蛋白质所带的电荷数越多，移动越快，电荷数相同时，相对分子质量越小，则移动越快。

3.某蛋白质等电点为7.5，在pH为6.0的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为( ) A．向负极移动B．向正极移动C．不运动D．同时向正极和负极移动解析：选A。

在pH＝6.0的缓冲液中蛋白质带正电荷，其泳动方向为向负极移动。

4.有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pH分别为4.5、5.2、6.6、7.2，电泳时欲使其中三种泳向正极，缓冲液的pH应该是( )A．2.0 B．5.0C．6.0 D．7.0解析：选D。

在缓冲液的pH为7.0的溶液中，pH分别为4.5、5.2、6.6的蛋白质均带负电荷，在电泳时移向正极。

5.在血清蛋白的提取和分离过程中，所使用的染色液是( )A．新制血清5 μLB．质量浓度为/mL的蔗糖溶液C．质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液D．质量分数为0.1%的溴酚蓝指示剂答案：C6.(2012·长安一中高二检测)在用电泳法对蛋白质进行提取和分离时，常用的脱色液是( )A．考马斯亮蓝R250染色液B．醋酸溶液C．蔗糖D．甘油答案：B7.下列有关电泳现象的叙述，不正确的是( )A．相同蛋白质的溶液，经过同一个电场电泳后，会在支持物凝胶上形成相同的带纹B．不同蛋白质的混合溶液，经过同一个电场电泳后，在支持物凝胶上形成不同的带纹C．每一种带纹可能就是一种蛋白质D．每一种带纹一定不是一种蛋白质解析：选D。

蛋白质的提取和分离练习题

蛋白质的提取和分离练习题【基础达标】1．选用猪、牛、羊成熟的红细胞作分离蛋白质的实验材料,下列是其优点的是（）A.血红蛋白是无色蛋白B.红细胞有细胞核C.红细胞蛋白质含量高D.红细胞DNA含量高【答案】C【解析】哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,核物质也消失,所以红细胞内几乎没有DNA；血红蛋白是有色蛋白，红细胞蛋白质含量高。

故选C。

2．血红蛋白释放时，红细胞破裂的原因不包括（）A.红细胞吸水膨胀B.磁力搅拌器的充分搅拌C.血红蛋白变性D.甲苯对细胞膜的溶解【答案】C【解析】血红蛋白释放时，红细胞破裂的原因是红细胞吸水膨胀、甲苯对细胞膜的溶解、磁力搅拌器的充分搅拌等，血红蛋白不会变性。

故选C。

3．蛋白质分离和提取的步骤可分为（）A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定【答案】C【解析】蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。

故选C。

4．将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，第2层是（）A.甲苯B.血红蛋白水溶液C.脂溶性物质的沉淀层D.其他杂质的沉淀【答案】C【解析】A项错误：甲苯层位于第1层；B项错误：血红蛋白水溶液位于第3层；C项正确：第2层是脂溶性物质的沉淀层；D项错误：其他杂质的沉淀物位于第4层。

5．下列有关提取和分离血红蛋白的程序叙述错误的是（）A.样品处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B.通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取C.可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化D.可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度【答案】BA项正确：样品处理是洗涤红细胞,使血红蛋白释放出来,通过离心法得到血红蛋白溶液； B项错误：透析的原理是透析袋能使小分子物质自由进出,而袋内的大分子物质留在袋内即可除去样品中相对分子质量较小的杂质； C项正确:凝胶色谱法中的凝胶内部通道只允许相对分子质量较小的蛋白质通过,而相对分子质量较大的蛋白质则被排阻在凝胶颗粒之外，即达到样品纯化的目的；D项正确：判断纯化的蛋白质是否达到要求,通常用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法对蛋白质的纯度进行鉴定。

“生物大分子分离纯化及检测”试题

2005级硕士研究生“生物大分子分离纯化及检测”试题一、简述或解释（70分）1、电渗？逆回效应？肽图？电泳迁移率？（8分）电渗即电解质在电场中的相对位移。

原因：固体支持物与溶液中会形成双电层，在电场作用下会是电解质进行相对位移，我们称之为电渗。

电渗与固体支持物本身的性质有关。

在对流免疫电泳中利用电渗效应，而在其他电泳中尽量消除电渗作用。

逆回效应：分析样品为血清蛋白时，虽电泳时间的不同，可得到不同的电泳图谱，在20个小时的电泳过程中，分离区带的顺序也会发生变化，称逆回效应。

原因：样品中含有电解质，在电泳过程中，由于电解质的存在，样品各成分所带的实际电荷发生改变，从而造成某种成分移动方向的改变，而表现出逆回效应。

如果将血清样品先对所用电泳缓冲液进行透析，就不会出现逆回效应，各条区带的移动与时间呈线性关系。

电泳迁移率：在一定电场下，带电质点的迁移速度。

U=Q/6hrpai.2、测定蛋白质等电点方法的基本原理？（6分）在等电聚焦电泳中，由于载体两性电解质在电场作用下形成PH梯度，加入样品蛋白质以后，由于蛋白质所带电荷的性质及程度不同，在电泳过程中就会向不同的方向（与其带相反电荷的方向）移动，当蛋白质移动到与其等电点相等的PH区域时，由于蛋白质本身所带净电荷为0，故停止移动，因此在电泳结束后蛋白质所在位点的环境PH就是蛋白质的等电点。

3、狭义亲和层析的基本原理？（5分）狭义亲和层析基本原理：生物大分子之间有一种特异的相互作用，比如：抗原-抗体、酶-底物、配体-受体等等。

将其任何一方固定来分离纯化另一方（通过特异相互作用结合，改变环境条件使分离纯化成分解离）。

4、离子交换层析的洗脱方法及方式？（6分）离子交换层析的洗脱方法：⑴、改变起始缓冲液的PH，是牢固吸附状态的组份变为有限吸附状态或完全解吸状态。

⑵、增加起始缓冲液的离子强度（加中性盐、缓冲盐等），以增加洗脱液的洗脱能力。

⑶、改变起始缓冲液PH的同时，增加其离子强度，以增加洗脱液的洗脱能力。

2018-2019高中生物第4章现代生物技术 4.2 蛋白质的提取和分离练习北师大版选修1

第2节蛋白质的提取和分离课时过关·能力提升一、基础巩固1.下列相关说法不正确的是( )A.提取乳酸脱氢酶同工酶时要用新鲜的动物心脏、肝脏、骨骼肌等B.乳酸脱氢酶一般含有5种同工酶C.提取乳酸脱氢酶同工酶可在任意条件下进行,包括环境温度等D.最终观察电泳乳酸脱氢酶的结果应该是5个条带答案:C解析:同工酶检测必须依靠其具有催化活性的特点,从而使其和其他的可溶性蛋白质区分开来。

因此在提取此类蛋白质时必须提供必要的缓冲系统和低温环境以保持其生物活性。

2.下列有关蛋白质提取和分离的说法,错误的是( )A.透析法提纯蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B.采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来C.离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离D.蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动答案:D解析:蛋白质在电场中的迁移,主要与其所带电荷的性质和多少、分子的形状和大小有关,向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。

3.蛋白质各种特性的差异,可以用来分离不同种的蛋白质。

下列可以作为分离依据的是( )A.分子的大小、形状和溶解度B.所带电荷的性质和多少、吸附性质C.对其他分子的亲和力D.以上三项都是答案:D解析:可依据分子的大小、形状和溶解度、所带电荷的性质和多少、吸附性质以及对其他分子的亲和力来分离不同种类的蛋白质。

4.凝胶色谱分离法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是( )A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度C.将酶或细胞固定在凝胶中D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速度答案:A解析:凝胶的种类较多,但每一种凝胶内部都有孔隙。

相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。

生物中图选修课后训练：第六章第一节蛋白质的提取和分离含答案

蛋白质的提取和分离练习1 蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。

下列有关叙述不正确的是（）。

可以比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶差异的大小来判断动物之间亲缘关系的远近。

下列各种实验方法中，不能采用的方法是（）。

A．相同B．相反C．相对 D．相向4 使用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（）。

答案：A2 解析：生物是由共同的原始祖先进化而来的。

各种生物之间具有或近或远的亲缘关系。

亲缘关系越近，则其对应的基因的碱基序列相似程度也越高。

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