医院纤维蛋白原测定(FIB)凝固法操作规程
凝血四项操作规程(共4张PPT)
血浆活化部分凝血活酶时间测定
（APTT）
• 方法原理：用部分凝血活酶代替血小板膜磷脂，为凝 缩方短法， ：见冯于克先劳天斯性法因、子光学5增法多和、磁口珠服法避及孕P药T衍和生血法栓{形PT成完性成疾时病，。全部纤维蛋白原转变成纤维蛋白，纤维蛋白产生的浊度与纤维蛋白含量成正比
。血浆凝血酶时间测定（TT）
维生素K缺乏症、严重肝脏疾病及血中抗凝物质增加； 减用少激为 活先剂天激性活纤12维、蛋11白凝原血含因量子低。下。
血方浆法纤 ：维冯蛋克白劳原斯测法定、（光学FIB法）和磁珠法及PT衍生法{PT完成时，全部纤维蛋白原转变成纤维蛋白，纤维蛋白产生的浊度与纤维蛋白含量成正比
浆浊度、粘稠度增加直至凝固。 。待检血浆中加入足量的激活剂、部分凝血活酶悬液和钙离子用来启动内源凝血系统来形成纤维蛋白，使血浆浊度、粘稠度增加直至凝固。
减血少浆为 凝先血天酶性时纤间维测蛋定白（原TT含）量低下。
• 临床意义：延长，见于内源凝血系统因子（12、11、 待减检少血 为浆先中天加性入纤足维量蛋的白激原活含剂量、低部下分。凝血活酶悬液和钙离子用来启动内源凝血系统来形成纤维蛋白，使血浆浊度、粘稠度增加直至凝固。
。减少为先天性纤维蛋白原含量低下。
钙离子用来启动内源凝血系统来形成纤维蛋白，使血 缩（短AP，TT见是于监先测天肝性素因治子疗5增剂多量、的口首服选避指孕标药）和血栓形成性疾病。
方法原理：将在稀凝释血的酶血作浆用加下入，足待量检的血凝浆血中酶纤使维纤蛋维白蛋原白转原变转成变纤成维纤蛋维白蛋，白使，血测浆定浊其度凝及固粘时稠间度，增凝加血 直时至间凝的固长。短与血中纤维蛋白原含量成反比
缩短，见于先天性因子5增多、口服避孕药和血栓形成 方，法利原 用理浊：度将的稀变释化的测血得浆纤加维入蛋足白量原的含凝量血（酶散使射纤比维浊蛋法白和原透转射变比成浊纤法维，蛋原白理，为测将定测其得凝的固浊时度间变，化凝与血 校时准间血的浆长浊短度与的血变中化纤比维较蛋而白得原到含其量含成量反）比}
FIB操作规程一例(sop)
FIB操作规程一例纤维蛋白原测定（FIB）一、项目名称:纤维蛋白原凝结时间测定（Fibrinogen coagulative time, FIB）二、检验方法名称：凝结法三、方法学原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂。
加入试剂后，采用波长为660nm 的光照射样本。
凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。
从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method方法求得凝血时间。
四、方法学溯源：纤维蛋白原测定（Clauss法）原理：凝血酶将可溶性的血浆蛋白纤维蛋白原转化为不溶性的多聚体，纤维蛋白。
当凝血酶浓度较高（约为100NIH/ml）且纤维蛋白原浓度较低（0.05—0.8g/L）时该反应决定于纤维蛋白原浓度。
如在双对数坐标纸上画点，凝血酶凝块时间与纤维蛋白原浓度相比较呈线形关系。
五、仪器：（一）型号：Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪（二）分析和计算参数：1．处理量：约120个测试/小时2．所需样本量：10μl3．检验时间：在最长检验时间之内测出结果，典型最长检验时间：100秒4．重复性：CV≤4%5. 计算参数：纤维蛋白原浓度（Fbg）六、试剂及配套品：（一）试剂：1. 凝血酶试剂（Thrombin Reagent）（1）商标：德灵（DADE BEHRING）（2）包装规格：Pack for 10×1ml（3）代码：B4233 G25 E0533 (961) W（4）成分：牛凝血酶冻干粉（lyophilized preparation of bovine thrombin）（近似100 NIH units/ml）2．佛罗那巴比妥缓冲液（Dade® Owren'S Veronal Buffer）（1）商标：德灵（DADE BEHRING）（2）包装规格：Pack for 10×10ml（3）代码：B4234-25（4）成分：1）2.84×10­²M的巴比妥钠(sodium barbital)2）1.25×10­¹M的氯化钠(sodium chloride)3) PH 7.35±0.13. 清洗液（Cleaning）2%次氯酸钠溶液（自配）（二）配套品：1.标准血浆（Standard Human Plasma）(1) 商标：德灵（DADE BEHRING）(2) 代码：No. ORKL2.校准质控血浆（Ci-Trol®）(1) 商标：德灵（DADE BEHRING）(2) 代码：Level 1, B4244-10Level 2, B4244-20Level 3, B4244-303.质控血浆（Control Plasma）(1) 商标：太平洋（Pacific Hemostasis）(2) 代码及规格：Level 1 (Normal), 100595 10×1mlLevel 2 (Abnormal), 100596 10×1mlLevel 3 (Abnormal), 100597 10×1ml七、操作步骤：（一）开机：开机前，先打开连机的打印机。
C3510血浆纤维蛋白原(FIB)磁珠法
血浆纤维蛋白原（FIB）测定（分析仪器法）1实验原理：光电磁珠法测试杯两侧的有一组驱动线圈，它们产生恒定的交替电磁场，使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动。
凝血激活剂加入后，随着纤维蛋白的产生增多，血浆的粘稠度增加，小钢珠的运动振幅逐渐减弱，仪器根据另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化，当运动幅度衰减到50%时确定凝固终点。
2标本采集2.12.23.831长时间4566.16.2 ,室温保存7.7.17.27.37.4 仪器技术参数:7.4.1 速度:最快检测速度350测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2 试剂位:24个,具冷藏功能。
7.4.3 样本位:80个,可自动连续添加。
7.5 仪器校准程序:7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤:8.1 检查前准备:8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。
8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)。
8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。
8.2 开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,8.38.3.1试项目8.48.5 按,→测8.6 每日维护:完成每日的测定后,关机前维护。
8.6.1 用蘸有清洗液的纱布或棉签擦拭加样针和试剂的外表面。
8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯，检查清洗液是否充足。
8.6.3 检查预温及测量通道内是否有掉落的钢珠，如果有请清除。
8.6.4仪器连续工作24小时后需要关机1次。
9 检验结果的判断与分析:9.1 仪器测定FIB的线性范围在5-120秒,测定完成后仪器显示FIB秒数等参数。
若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:﹡﹡﹡.﹡出现错误,不能得到分析数据ˉˉˉ.ˉ不能计算参数＋＋＋.＋数值超出线性范围.9.2 仪器设定FIB参考范围在2-4g/L,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:﹡出现错误信息< 数据低于可报告的低限> 数据高于可报告的高限10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失1111.111.1 F11.1.1所致。
纤维蛋白原(FIB)测试盒使用说明
纤维蛋白原（FIB）测试盒使用说明货号：BC0050试剂名称规格(200T)试剂主要成分R1凝血酶试剂（液体）1ml×6瓶>100u/ml牛凝血酶，稳定剂适量，防腐剂适量。
R2纤维蛋白原标准品1ml×1瓶200～400mg/dL纤维蛋白原，缓冲液适量，稳定剂适量。
R3咪唑缓冲液（IBS）75ml×2瓶 2.84×10-2M巴比妥钠，稳定剂适量。
一、适用范围:适用于凝固法为原理的各类半自动及全自动血凝仪检测人血浆中纤维蛋白原含量。
二、试剂保存和稳定性:2～8℃保存，未开封试剂有效期内稳定。
凝血酶试剂（液体）：开封后2～8℃下可稳定1周。
纤维蛋白原标准品：复溶后在2～8℃下可稳定4小时。
缓冲液2～8℃保存。
三、操作过程:1、检测前准备凝血酶试剂：使用前轻摇颠倒混匀.纤维蛋白原标准血浆：按标签要求用去离子水复溶。
静置使其完全溶解，轻摇颠倒混匀。
禁用含防腐剂的水。
2、样本收集和处理:新鲜静脉血与0.109gM的柠檬酸三钠按9：1（V/V）混合均匀，以3000rpm离心15分钟，收集上层血浆，在2～3小时内进行实验。
3、检测流程:①、标准曲线制作：将复溶后的纤维蛋白原标准品用缓冲液分别作1:5（100μl血浆+400μl缓冲液）、1:10、1:15、1:20、1:30稀释，取此不同浓度的标准血浆各200μl，37℃预温3分钟，然后分别加入凝血酶试剂100μl（不需预温），测定凝固时间。
②、待测血浆用缓冲液作1:10稀释，取待测血浆200μl，37℃预温3分钟，加入凝血酶试剂100μl，测定凝固时间。
③、标准曲线绘制：以不同浓度的纤维蛋白原标准品含量（mg/dL）为横坐标，以相应的凝固时间为纵坐标，在双对数纸上作出标准曲线，或把FIB的浓度与相应的凝固时间输入到血凝仪中。
不同稀释度的标准血浆浓度计算：以测标本时1:10的稀释倍数与其它稀释倍数的比值作为稀释系数计算。
医院纤维蛋白原测定(FIB)凝固法操作规程
****医院纤维蛋白原测定（FIB）凝固法操作规程一、检验目的二、工作原理三、方法学溯源四、标本采集及处理五、参考范围与危急值处理六、报告审核制度七、临床意义一、检验目的：纤维蛋白原测定（FIB）二、工作原理：被测血浆加入带不锈钢球的检测杯内温育后，加入激活试剂血浆开始凝固，被测血浆粘度不断增加，不锈钢球在检测杯底沿弯曲的轨道运动逐渐减慢，并且振幅减小，此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。
三、方法学溯源：纤维蛋白原测定（Clauss法）原理：凝血酶将可溶性的血浆蛋白纤维蛋白原转化为不溶性的多聚体，纤维蛋白。
当凝血酶浓度较高（约为100NIH/ml）且纤维蛋白原浓度较低（0.05—0.8g/L）时该反应决定于纤维蛋白原浓度。
如在双对数坐标纸上画点，凝血酶凝块时间与纤维蛋白原浓度相比较呈线形关系。
线性范围：6-12g/L四、标本采集及处理：试剂准备：按照试剂瓶标签上标明的量，用蒸偏水复溶Fg试剂，使用前预温到室温(20—25°C)。
1、采血步骤(1)登记：登记的内容包括病人的姓名、病历号、采血时间、登记编号、送检部门等。
(2)识别病人：问清病人并识别病人是至关重要的。
了解近期用药情况和特殊生理状况，并记录。
例如阿斯匹林、潘生丁等药物能抑制血小板聚集；口服避孕药会使血小板粘附、聚集功能、纤维蛋白原及多种凝血因子活性明显增高；当剧烈运动或输注肾上腺素时VD因子活性会快速上升。
应注明。
(3)病人的体位：坐位采血；卧位采血；采血时病人的口中不准含食物、口香糖或口表等，以防意外。
(4)选择适当的静脉，最宜采血的肘窝静脉，也可在腕，手，踝静脉采血。
2、注意事项:(1)病人宜处于休息状态，并在早餐前采血(乳糜血影响检测结果)。
(2)针头不应小于21GAVGE。
国际推荐用21G1.5或20G1.5号针头,确保针头与空针联接牢固，以免产生泡沫。
如果采血时产生泡沫，可能导致纤维蛋白原和vin因子变性。
FIB-SOP操作程序
FIB定值血浆：纤维蛋白原、稳定剂。
试剂稳定性与贮存
试剂2～8℃保存，可稳定至标签所示失效日期。
FIB凝血酶试剂溶解后2～8℃可保存7天，若于4小时﹣20℃内冻存，可保存20天，使用时37℃迅速解冻，勿反复冻融。
FIB定值血浆溶解后2～8℃可保存8小时，也可冻存。
注意事项
将FIB凝血酶用规定体积的蒸馏水复溶，轻摇混匀，并置于仪器试剂位。
将FIB定值血浆用1.0ml蒸馏水复溶，室温静置3分钟，轻摇混匀。用FIB缓冲液稀释成不同浓度的标准点。
根据血凝仪使用说明书及FIB试剂使用说明书选择合适的参数，在仪器主菜单中选择FIB项目进行检测，绘制标准曲线。
【方法学评价】
正常质控（混合）血浆时间：2~4g/L；
线性：线性相关系数r应大于0.98；
重复性：重复试验的变异系数（CV）≤5％；
瓶间差：瓶间相对极差≤6％。
【检验方法】
凝固法
【检验原理】
采用Clauss凝固法原理，在凝血酶过剩时，待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原含量成反比关系。可用不同浓度定值血浆纤维蛋白原含量为横坐标，以相应的凝固时间为纵坐标，绘制标准曲线，待测样本FIB含量即可从标准曲线上读出。
【检验试剂】
测定时的各组成成分
FIB凝血酶：凝血酶、缓冲液、稳定剂、防腐剂；
血液与抗凝剂的比例，一般为9:1（枸橼酸钠浓度为10.9～12.9mmol/L）。若病人血细胞比容超过55%或小于20%时，则应调整抗凝剂用量。抗凝剂体积（ml）= 0.00185×血液体积（ml）×（100－比容）。
溶血可激活凝血因子并影响结果，黄疸或脂血症对结果也有影响。
【检验步骤】
打开血凝仪，等候一定时间，使仪器达到分析温度。
纤维蛋白原FIB（免疫比浊法）SOP
[试剂稳定性与贮存]
试剂自生产之日起避光贮存 2-8℃可稳定 18 个月。
[标本的收集与处理]
用血凝试验专用 1：9 枸橼酸钠抗凝真空采血管抽取静脉血，轻摇抗凝。3000r/m 离心 10 min，获乏血小板血浆。如样本不能及时测定应置于 2-8℃保存。
[质量控制品] STA 血凝质控物两种
[操作步骤] 1，将标本离心吸取血浆。 2，编码后上机检测。
[意义]
纤维蛋白原主要功能为参与凝血。增高时常见于感染症、恶 性肿瘤、手术后、脑血栓、 心肌梗塞、糖尿病；低值则见于低纤维蛋白原症、肝硬化大出血、大剂量使用尿激酶后。
xxxx 医院 临床检验实验室
纤维蛋白原 Fg
文件编号： XXXX
版序：xxxx 页码：第 1 页，共 1 页
[测定原理]
人血浆中的纤维蛋白原与其相应抗体在液相中相遇，立即形成 抗原-抗体复合物，形成一 定浊度。该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。
[试剂组成]
纤维蛋白原抗体：羊抗人纤维蛋白原血清，表面活性剂，电解质，防腐剂，动物蛋白等。
FIB-Clauss标准操作流程
纤维蛋白原(Clauss法)标准操作流程目录1 目的2 检测原理3 产品信息4 试剂准备5 试剂保存和稳定性6 警告和注意点7 样本收集和准备8 检测需要但试剂盒中未提供的耗材9 质量控制10定标11定标方法 (如需要)12检测程序13结果计算14 结果解释15局限性/干扰16 参考范围17 性能特征18 参考文献1 目的此程序提供在ACL 8000，ACL 9000仪器上使用HemosIL™ Fibrinogen-C 试剂用于纤维蛋白原(Clauss法)定量检测。
2 测试原理将试剂加入稀释的样本中，试剂中过量的牛凝血酶可直接作用血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，反应过程的速率和纤维蛋白原的浓度呈函数关系。
3 产品信息HemosIL™ Fibrinogen-C纤维蛋白原测定试剂盒包含：牛凝血酶： 8 x 2 mL (P/N8469110)或者10 x 5 mL(P/N20003900) 冻干牛凝血酶(35 UNIH/瓶) ，内含牛血浆白蛋白，CaCl 2，缓冲液和稳定剂。
异常质控血浆：2 x 1 mL 冻干人枸橼酸抗凝血浆，含低值的纤维蛋白原，缓冲液和稳定剂（仅P/N8469110含有）。
4试剂配制牛凝血酶：用2 mL （或5mL ） NCCLS II 型或相同质量的去离子水溶解1瓶牛凝血酶，盖上盖子，轻摇至完全溶解，15-25˚C 室温平衡30分钟，使用前充分颠倒混匀。
不可用力振摇。
异常质控血浆：每瓶用1 mL NCCLS II 型或相同质量的去离子水溶解。
盖上盖子，轻摇至完全溶解，15-25˚C 室温平衡30分钟，使用前充分颠倒混匀。
不可用力振摇。
5 试剂保存和稳定性未开封的试剂可稳定至2-8 o C 至试剂盒上标明的有效期。
牛凝血酶：复溶后于原瓶中2-8 o C 稳定3天；于原瓶中-20 o C 稳定1个月；在ACL 8/9000上（15o C ）稳定8小时。
为了最佳试剂保存，建议不使用时，将试剂从仪器系统撤回，使用原瓶，保存于2-8 o C 。
纤维蛋白原(FIB)
纤维蛋白原（FIB）一、测定原理：1、仪器自动加样并记录待测血浆在凝血活酶的参与下所需的凝固时间。
2、仪器检测原理（凝固法）：检测杯两侧独立的线圈产生相反的磁场，驱动钢珠在杯底沿弯曲的轨道运动。
一旦被测血浆开始凝固（加入少激活试剂），血浆粘度增加，改变了钢珠的运动，使其减慢，并且振减小。
此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。
二、标本要求：1、凝血专用管（CTAD管，枸椽酸钠0.109M，蓝帽）抽取静脉血至刻度线，充分混匀。
2500转离心10分钟后2小时内测定完毕。
2、测定量 5ul血浆1：20稀释三、试剂：1、STAGO公司原装试剂STA®-FIBRINOGEN、OWREN-KOLLER（稀释液）2、保存条件：2-8°C3、使用条件：使用前加蒸馏水5ml混匀，条码扫描后放入仪器试剂柜。
使用时试剂柜内（17±2°C）稳定4天四、仪器和材料：1、STA 全自动血凝仪2、含有磁珠的反应杯五、标准和质控：1、标准：预定标，标准曲线由厂家在试剂中提供。
2、质控品为原装STA-COAG CONTROL N+P两批号定值血浆干粉，保存条件2-8℃。
使用前加蒸馏水1ml，混匀，开启后试剂柜内稳定8小时。
编写：伍海波制定日期：2011.12.1六、操作程序：1、装卸试剂：F2键打开试剂柜，条码扫描后确认试剂量，放入合适孔即可。
2、定标与室内质控：更换试剂批号时仪器自动定标，24小时室内质控自动测定一次，未通过仪器有提示报警。
3、标本测定：F1键打开标本柜，输入号码后随机插入标本孔，选择测定项目后关闭标本柜。
仪器1：20稀释血浆加100ul入反应杯，预温240秒后加入50ul试剂并开始计时，根据曲线自动得出含量。
4、传送并核收结果。
七、注意事项：1、血量与抗凝剂比例适宜，离心时间充分以确保血浆中无血小板干扰测定结果。
2、标本无凝固。
七、计算和参考值计算由仪器自动完成，正常参考值：2-4g/L八、方法学特性1、分析范围：1.5-9g/L，低于1.5g/L仪器可自动减少稀释倍数重测2、不精密度：CV 3.85% （批内）CV3.57%（批间）3、干扰实验编写：伍海波制定日期：2011.12.1。
纤维蛋白原(FIB)测试盒使用说明
纤维蛋白原（FIB）测试盒使用说明货号：BC0050试剂名称规格(200T)试剂主要成分R1凝血酶试剂（液体）1ml×6瓶>100u/ml牛凝血酶，稳定剂适量，防腐剂适量。
R2纤维蛋白原标准品1ml×1瓶200～400mg/dL纤维蛋白原，缓冲液适量，稳定剂适量。
R3咪唑缓冲液（IBS）75ml×2瓶 2.84×10-2M巴比妥钠，稳定剂适量。
一、适用范围:适用于凝固法为原理的各类半自动及全自动血凝仪检测人血浆中纤维蛋白原含量。
二、试剂保存和稳定性:2～8℃保存，未开封试剂有效期内稳定。
凝血酶试剂（液体）：开封后2～8℃下可稳定1周。
纤维蛋白原标准品：复溶后在2～8℃下可稳定4小时。
缓冲液2～8℃保存。
三、操作过程:1、检测前准备凝血酶试剂：使用前轻摇颠倒混匀.纤维蛋白原标准血浆：按标签要求用去离子水复溶。
静置使其完全溶解，轻摇颠倒混匀。
禁用含防腐剂的水。
2、样本收集和处理:新鲜静脉血与0.109gM的柠檬酸三钠按9：1（V/V）混合均匀，以3000rpm离心15分钟，收集上层血浆，在2～3小时内进行实验。
3、检测流程:①、标准曲线制作：将复溶后的纤维蛋白原标准品用缓冲液分别作1:5（100μl血浆+400μl缓冲液）、1:10、1:15、1:20、1:30稀释，取此不同浓度的标准血浆各200μl，37℃预温3分钟，然后分别加入凝血酶试剂100μl（不需预温），测定凝固时间。
②、待测血浆用缓冲液作1:10稀释，取待测血浆200μl，37℃预温3分钟，加入凝血酶试剂100μl，测定凝固时间。
③、标准曲线绘制：以不同浓度的纤维蛋白原标准品含量（mg/dL）为横坐标，以相应的凝固时间为纵坐标，在双对数纸上作出标准曲线，或把FIB的浓度与相应的凝固时间输入到血凝仪中。
不同稀释度的标准血浆浓度计算：以测标本时1:10的稀释倍数与其它稀释倍数的比值作为稀释系数计算。
血浆纤维蛋白原测定
血浆纤维蛋白原（Fbg）测定1. 实验原理将试剂加入稀释的抗凝血浆中，试剂中过量的牛凝血酶可直接作用血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，此反应过程的速率即反映了纤维蛋白原的浓度和功能。
通过660nm光照射血浆，测定其凝固反应的散射浊度变化。
2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。
2.23.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml，混匀。
3. 标本存放全血贮存在4～10oC不超过2小时，最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆，此血浆在室温22～24oC 下可存放2小时，在2～4oC可存放4小时，在-20oC可存放2周，长时间保存需在冰冻条件下，在-70oC可存放6个月。
冷冻血浆融化时，应将盛血浆的容器置37oC水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解冻后立即测试。
冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果不准确。
4. 标本运输：低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。
6. 实验材料：6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。
1）FIB-C测定试剂盒（代号P/N:8469110）冻干牛凝血酶（>35uNIH/ml）8瓶异常质控血浆2瓶2）定标血浆Calibration Plasma（代号P/N: 20003700）3）正常质控血浆Normal control plasma（代号P/N: 20003110）4）低纤维蛋白原质控血浆 Low fibrinogen control（代号P/N:20004200）5）因子稀释液（代号P/N:9757600）6）清洗液A Cleaning solution（代号P/N:9831700）7）清洗液B Cleaning agent（代号P/N:9832700）6.2试剂准备牛凝血酶：用2mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶牛凝血酶，盖上盖子，轻摇至完全溶解，置15～25oC 30分钟，用前摇匀，勿用力振摇。
纤维蛋白原(FIB)
纤维蛋白原（FIB）含量测定方法操作规程一.【产品名称】纤维蛋白原（FIB）含量测定试剂盒（凝固法）二.【预期用途】用于体外人血浆中纤维蛋白原含量测定,用于辅助诊断。
三.【临床意义】FIB含量增高：见于糖尿病及其酸中毒，动脉粥样硬化，急性传染病，急性肾炎尿毒症，休克，外科术后及轻度肝炎等。
FIB含量减低：见于DIC，原发性纤溶症，重症肝炎，肝硬化等。
四.【检验原理】采用Clauss凝固法原理，高浓度凝血酶存在时，待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原（FIB）含量成反比关系。
五.【主要组成成分】1.FIB凝血酶：5瓶/6瓶（内含凝血酶、缓冲液、高岭土、稳定剂、防腐剂）2. FIB定值血浆：1瓶，定值见瓶标FIB定值血浆经HBsAg、HIV抗体、HCV抗体检测，结果为阴性，但仍需如病人样本一样小心处理。
3.FIB缓冲液：2瓶（内含缓冲液、防腐剂）4.说明书：1份注：不同批号试剂盒中各组份不可互换。
六.【储存条件及有效期】未开启试剂于+2℃～+8℃保存可稳定至标签所示失效日期。
FIB凝血酶试剂复溶后于+2℃～+8℃可保存7天；4小时内-20℃冻存，可稳定20天，使用时37℃迅速解冻，勿反复冻融。
FIB定值血浆复溶后于+2℃～+8℃可保存8小时。
七.【适用仪器】血凝分析仪。
八.【样本要求】1. 静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液（1份抗凝液+9份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，轻轻颠倒混匀，3000rpm（或2500g）离心15分钟，收集上层液（血浆，黄色）。
2.不宜使用EDTA●Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂。
3.红细胞比容超过55%或小于20%时，应调整抗凝剂用量。
抗凝剂体积（ml）=0.00185x血液体积（ml）x（100 - 比容）。
4.样本采集避免溶血及组织液污染。
5.样本保存时间如下：+2℃～+8℃保存，不宜超过8小时。
九.【检验方法】1. 试剂重建与保存每瓶FIB凝血酶加入瓶标标示体积的蒸馏水，轻摇溶解。
凝血四项操作方法
凝血四项操作方法凝血四项是一种常用的血液检查项目，用于评估出血和血液凝聚功能。
其包括四个指标：凝血酶原时间（PT），活化部分凝血活酶时间（APTT），纤维蛋白原（FIB）和血小板计数（PLT）。
操作方法如下：1. 凝血酶原时间（PT）：- 准备一根清洁的皮肤穿刺器、一支无菌试管和一根无菌的塑料吸管。
- 用皮肤穿刺器抽取适量的患者静脉血样。
- 将血液样本滴入无菌试管中。
- 在试管中加入适量的凝血酶原时间试剂，并迅速混匀。
- 将试管放入恒温水浴中，在37摄氏度下孵育一定时间后，观察凝血的时间。
2. 活化部分凝血活酶时间（APTT）：- 准备一根清洁的皮肤穿刺器、一支无菌试管和一根无菌的塑料吸管。
- 用皮肤穿刺器抽取适量的患者静脉血样。
- 将血液样本滴入无菌试管中。
- 在试管中加入适量的活化部分凝血活酶时间试剂，并迅速混匀。
- 开始计时，同时观察试管中血液凝聚的时间。
3. 纤维蛋白原（FIB）：- 准备一根清洁的皮肤穿刺器、一支无菌试管和一根无菌的塑料吸管。
- 用皮肤穿刺器抽取适量的患者静脉血样。
- 将血液样本滴入无菌试管中。
- 在试管中加入适量的纤维蛋白原试剂，并迅速混匀。
- 观察试管中血液中纤维蛋白原的凝聚情况。
4. 血小板计数（PLT）：- 准备一根清洁的皮肤穿刺器、一支无菌试管和一根无菌的塑料吸管。
- 用皮肤穿刺器抽取适量的患者静脉血样。
- 将血液样本滴入无菌试管中。
- 使用血小板计数仪具体测量血液中的血小板计数。
需要注意的是，以上方法仅为一般操作流程，具体操作需根据实验室设备和试剂的要求进行。
在操作过程中需要保持操作无菌、准确掌握试剂用量、注意操作时间等，以确保检测结果的准确性。
此外，还需要合理的样本采集、保存和处理，以确保血液样本的完整性和稳定性。
最后，操作完毕后要对操作用具进行适当的处理和清洁，以防止交叉感染的发生。
纤维蛋白原(FIB)含量测定标准操作规程
纤维蛋白原（FIB）含量测定标准操作规程1.检验原理：采用Clauss凝固法原理，在过量凝血酶作用下，待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原（FIB）含量呈双对数负相关。
在光学比浊法仪器上测定凝固时间，从标准曲线得出纤维蛋白原含量。
2.试剂主要组成成分：R1：FIB试剂：牛凝血酶、稳定剂R2：咪唑缓冲液：咪唑；R3：FIB定值血浆：纤维蛋白原、稳定剂。
3.样本要求：3.1.采集静脉血，立即按9份血：1份抗凝剂比例与0.109mol/L枸橼酸钠充分混合均匀。
室温3000rpm离心12分钟，上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。
3.2血浆室温放置，宜在2小时内检测。
3.3血浆若不能及时检测，用塑料吸管分离，-20℃可保存2周。
测定前37℃快速融化，轻微混匀后立即检测。
4.检验方法：全自动血凝分析仪测定（详见雷杜RAC-1830标准操作规程）5.参考区间：2—4g/L6.检验结果的解释：报告FIB含量，单位为g/L，检验结果与各实验室的参考值范围相关。
7.检验方法的局限性7.1凝血过程中从因子激活到纤维蛋白激活到纤维蛋白形成的一系列反应。
因此，检验结果可能受到治疗药物（干扰物）、检验操作、检验系统等因素的影响，应考虑这些因素。
7.2试剂被污染，或者样品杯、吸管等被凝血试剂污染，会导致凝血异常，需严格控制。
7.3纤维蛋白原降解产物（FDP）含量过高会延长凝固时间，产生假性纤维蛋白原低水平。
8产品性能指标8.1重复性：用质控血浆重复测试所得结果的变异系数（CV），正常值应不超过5.0%，异常值应不超过8.0%8.2瓶间差：用质控血浆测试，瓶间差应不超过6.0%。
8.3线性：FIB试剂在测试范围内，线性相关系数r应大于0.98.9临床意义FIB含量增高：见于糖尿病及其酸中毒，动脉粥样硬化，急性传染病，急性肾炎尿毒症，休克，外科术后及轻度肝炎等。
FIB含量减低：见于DIC，原发性纤溶症，重症肝炎，肝硬化等。
FIB-SOP操作程序
凝固法
【检验原理】
采用Clauss凝固法原理，在凝血酶过剩时，待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原含量成反比关系。可用不同浓度定值血浆纤维蛋白原含量为横坐标，以相应的凝固时间为纵坐标，绘制标准曲线，待测样本FIB含量即可从标准曲线上读出。
【检验试剂】
测定时的各组成成分
FIB凝血酶：凝血酶、缓冲液、稳定剂、防腐剂；
线性：线性相关系数r应大于0.98；
重复性：重复试验的变异系数（CV）≤5％；
瓶间差：瓶间相对极差≤6％。
FIB缓冲液：咪唑缓冲液、防腐剂；
FIB定值血浆：纤ຫໍສະໝຸດ 蛋白原、稳定剂。试剂稳定性与贮存
试剂2～8℃保存，可稳定至标签所示失效日期。
FIB凝血酶试剂溶解后2～8℃可保存7天，若于4小时﹣20℃内冻存，可保存20天，使用时37℃迅速解冻，勿反复冻融。
FIB定值血浆溶解后2～8℃可保存8小时，也可冻存。
注意事项
材料：FIB凝血酶、FIB缓冲液、FIB定值血浆；
质控血浆；
试剂准备：FIB凝血酶用规定体积的蒸馏水复溶，FIB定值血浆用1.0ml蒸馏水复溶，FIB缓冲液为即用式。
【检验标本】
类型：血浆
稳定性：2～8℃保存，不宜超过8小时。
注意：
采血时避免溶血和组织液的污染。
采血后应立即用枸椽酸钠抗凝并混匀，不能用肝素或EDTA抗凝。
检验室
文件编号：
FIB-SOP-01-01
纤维蛋白原（FIB）操作程序
版序：2015-5
页码：第1页，共2页
【检验目的】
用于体外人血浆中纤维蛋白原含量测定。
【检验摘要】
FIB含量增高：见于糖尿病及其酸中毒，动脉粥样硬化，急性传染病，急性肾炎尿毒症，骨髓瘤，休克，外科术后及轻度肝炎等。
FIB
修改纪录：1目的本操作书的制定的目的是，为操作者进行血浆纤维蛋白原定量测定提供正确的操作方法。
2适用范围适用于血浆纤维蛋白原定量测定3定义纤维蛋白原是一种分子量为340000道尔顿的糖蛋白，正常血浆中的浓度范围是2 - 4g/L(200 - 400 mg/dl),它在肝脏（1.7 - 5g /天）和巨核细胞内合成，纤维蛋白原合成受β链上遗传基因密码控制，这些基因存在多态性，血浆纤维蛋白原水平存在个体差异，半衰期是3 - 5天。
纤维蛋白原由6条链组成：2Aα,2Bβ和2γ，凝血酶（因子Ⅱa）将纤维蛋白原分子裂解成两个纤维蛋白肽A片段（从Aα链）和两个纤维蛋白肽B片段（从Bβ链），纤维蛋白单体由此产生，然后聚合，最后被因子XIIIa 稳定，首先是两个纤维蛋白单体由两条γ链稳定，这个稳定源于D-二聚体，降解产物是特定的纤维蛋白碎片。
纤维蛋白原能被纤维蛋白溶酶降解。
纤维蛋白原水平增高见于糖尿病，炎症应激反应，肥胖症。
纤维蛋白原水平降低见于DIC,纤维蛋白溶解。
不仅如此，纤维蛋白原也被用于心血管意外的致病性研究。
4测定原理和临床意义4.1测定原理在过量的凝血酶存在下，被稀释血浆的凝固时间可直接反映血浆中纤维蛋白原水平。
4.2临床意义可作为溶栓治疗的重要监测指标。
增高：见于脑血栓、心肌梗塞、恶性肿瘤、感染症（如胆囊炎、肺炎、肾炎、风湿性关节炎）、糖尿病、肥胖症、手术及放疗后等。
减低：见于严重肝病、DIC、大量失血、先天性纤维蛋白原缺乏症等。
5实验室条件5.1实验场所中心实验室临检室5.2温湿度要求室温：15-30℃湿度：20-80%6标本要求6.1标本种类6.1.1标本种类血浆6.1.2标本量最适量：3ml最小量：2ml分析量：100ul不适标本的处理：采集量过少、抗凝剂错误、血液凝固等情况下，拒收标本，及时与临床联系，并做好登记。
6.1.3容器枸橼酸钠抗凝管---9体积血采集到1体积0.109 M枸椽酸钠抗凝剂中（NCCLSH3-A3，H21-A21标准）6.1.4采集条件采集时间：检查对象生活饮食处于日常状态，安静。
凝血四项标准操作程序
凝血四项标准操作程序（SOP）【】PT凝血酶原时间APTT活化部分凝血活酶时间FIB纤维蛋白原TT凝血酶时间【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报述人员批准签字：专业主管、科主任。
【适用范围】本产品适用于检测凝血因子。
【操作步骤】1、使用1：9枸橼酸钠抗凝管采血2ML，离心速度为3000转/分，10分钟取用上层血浆。
2、用加珠器在每个样品杯中放一粒钢珠，把样本杯置于预温槽内。
3、进入主菜单，用光标键移动光标，选择“测试”，按键“确认”，进入实验菜单。
4、将试剂放于相应位置，预温孔或室温孔。
5、将标本加入样品杯（PT50ul，APTT50ul,FIB20ul血浆加180ulFIB稀释液再取100ul，TT100ul）按预温槽相应的ABCD键，计时启动。
6、当达到预温时间时，发出嘟嘟声通知操作者，将样品杯从预温槽中移至测试槽中，加入试剂（PT100ul，APTT50ul氯化钙，FIB100ul，TT100ul）进行测试。
7、使用联动加样器时，加试剂的同时，仪器自动启动计时器开始计时。
8、实验完成，记下各结果。
【维护与保养】1，维护和保养方法保持清洁，特别是测试孔内的清洁尤为重要，严禁有异物进入。
防止受潮，腐蚀，远离强电磁场干扰源。
应使用干燥的软布进行仪器表面的清洁，不得使用强酸或强碱消毒剂擦拭仪器表面。
仪器应放置在平稳的工作台面上，不得摇晃与振荡。
避免阳光直晒，远离强热物体。
电源电压：220V,频率：50HZ，如当地电压不稳定，应使用稳压电源。
输入功率：不大于100VA(W),不与大功率电器共线并用。
熔断器的更换：当用户更换熔断器内的保险管时，应先关闭本系统，拔下电源线，并严格按熔断器座旁标记的规格型号进行更换（熔断器规格：2A/250V/20mm）仪器内△标记警告用户：仪器装有加热装置，保持设定的恒温+℃，请不要在通电情况下触及。
加珠器严禁放入搅拌孔内，也不要放入邻近孔内，以免钢珠磁化。
纤维蛋白原FIB测定简介
纤维蛋白原FIB测定简介用途人血浆中纤维蛋白原定量测定。
概述和解释纤维蛋白原降解见于：a)获得性低纤维蛋白血症或无纤维蛋白血症获得性纤维蛋白原缺乏见于凝血酶（凝血病理性消耗，如产科术后），蛇毒或纤溶酶（链激酶或尿激酶或tPA治疗产生的原发性纤维蛋白溶解亢进）引起血管内纤维蛋白原水解。
而且，中度低纤维蛋白原血症见于合成减低（急性或慢性肝病），血容量降低（如腹水或急性出血，红斑症）或降解增加（休克或肿瘤）。
b)先天性低纤维蛋白原血症和无纤维蛋白原血症纤维蛋白原水平暂时升高见于纤维蛋白原作为“急性相蛋白”时：a)一过性高纤维蛋白原血症可见于手术、创伤、心脏病发作和感染。
b)持续性高纤维蛋白原血症可见于肿瘤和慢性感染性疾病。
纤维蛋白原水平随年龄轻度增高。
纤维蛋白原水平增高有心血管疾病危险性。
方法学原理纤维蛋白原是一种蛋白质，因凝血酶的作用使可溶性蛋白质转换成不溶性多聚体，形成纤维蛋白凝块。
稀释血浆的凝血酶凝固时间与纤维蛋白原血浆含量成反比。
根据此原理，Clauss建立了一种简单的定量纤维蛋白原方法，即加入过量的凝血酶测量稀释血浆的凝固时间。
然后，与纤维蛋白原标准品的凝固时间进行比较。
试剂成分凝血酶试剂：冻干的牛凝血酶（约100NIH单位/ml）制剂，含稳定剂和缓冲液。
纤维蛋白原标准品：枸橼酸抗凝血浆（人），含HEPES缓冲液，稳定且冻干。
纤维蛋白原含量采用可凝固蛋白测定方法。
瓶标签上注明标准品浓度。
缓冲液：2.84×10-2M巴比妥钠溶解于1.25×10-1M氯化钠溶液中，pH7.35±0.1。
警告和注意事项1.仅适用于体外诊断。
2．纤维蛋白原标准品含有人源性物质。
当作感染性物质处理。
每位供血者或供血个体都经EU或FDA认可的体外诊断检测方法检测，皆为HIV1、HIV2、HBV及HCV阴性。
因为至今仍没有一种方法可以完全排除传染性抗原的存在，因此所有人源性的血制品都应该谨慎处理。
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纤维蛋白原测定(FIB)凝固法操作规程
一、检验目的
二、工作原理
三、方法学溯源
四、标本采集及处理
五、参考范围与危急值处理
六、报告审核制度
七、临床意义
一、检验目的：
纤维蛋白原测定（FIB）
二、工作原理：
被测血浆加入带不锈钢球的检测杯内温育后，加入激活试剂血浆开始凝固，被测血浆粘度不断增加，不锈钢球在检测杯底沿弯曲的轨道运动逐渐减慢，并且振幅减小，此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。
三、方法学溯源：
纤维蛋白原测定（Clauss法）原理：凝血酶将可溶性的血浆蛋白纤维蛋白原转化为不溶性的多聚体，纤维蛋白。
当凝血酶浓度较高（约为100NIH/ml）且纤维蛋白原浓度较低（0.05—0.8g/L）时该反应决定于纤维蛋白原浓度。
如在双对数坐标纸上画点，凝血酶凝块时间与纤维蛋白原浓度相比较呈线形关系。
线性范围：6-12g/L
四、标本采集及处理：
试剂准备：按照试剂瓶标签上标明的量，用蒸馏水复溶Fg试剂，使用前预温到室温（20－25℃）。
1、采血步骤
（1）登记：登记的内容包括病人的姓名、病历号、采血时间、登记编号、送检部门等。
（2）识别病人：问清病人并识别病人是至关重要的。
了解近期用药情况和特殊生理状况,并记录。
例如阿斯匹林、潘生丁等药物能抑制血小板聚集；口服避孕药会使血小板粘附、聚集功能、纤维蛋白原及多种凝血因子活性明显增高；当剧烈运动或输注肾上腺素时Ⅶ因子活性会快速上升。
应注明。
（3）病人的体位：坐位采血；卧位采血；采血时病人的口中不准含食物、口香糖或口表等，以防意外。
（4）选择适当的静脉，最宜采血的肘窝静脉，也可在腕，手，踝静脉采血。
2、注意事项:
（1）病人宜处于休息状态，并在早餐前采血（乳糜血影响检测结果）。
（2）针头不应小于21GAVGE。
国际推荐用21G1.5或20G1.5号针头，确保针头与空针联接牢固，以免产生泡沬。
如果采血时产生泡沫，可能导致纤维蛋白原和Ⅷ因子变性。
（3）抽血时要“一针见血”，如抽血过慢或不太顺利，将会影响检测结果。
（4）取样完毕，立即与抗凝剂充分混合，混合抗凝标本时需轻微的但彻底的混匀，因为纤维蛋白在剧烈振荡混匀时可能变性,一般轻轻的翻转5至10次，要避免用力振摇，以免标本溶血影响结果。
（5）采血的注射器应是硅化玻璃或塑料注射器，并要求收集管刻度精确，所有试管应与参比管一一比较，弃去所有不符合要求的试管。
（6）不可在输液侧手臂采血，更不宜在输液针头内抽血。
采血前也不要拍打静脉。
3、抗凝剂的选择:
血液与抗凝剂的比例为9：1，并且应根据HCT调整抗凝剂比率；为了保证比例准确，推荐使用真空采血管含抗凝剂浓度为109MMOL/L的枸椽酸钠。
4、标本的送检:
（1）标本采取前先将标本编号贴在采血管上，采血后应进行核对。
（2）标本应带盖存放；存贮时间为2-8℃＜4小时；-20℃＜2周；-80℃＜6个月；因此取血后应及时送至实验室，以免检测结果受影响。
5、标本处理
(1) 检验人员收到标本后应首先逐个检查其是否符合检验要求。
如果不符合检验要求的标本需通知临床重新采血，
(2) 包括抽血量不标准（过多或过少）、目测发现采血管中存在小血丝或小血块，如果排除病人体内自身溶血的情况，人为造成的溶血标本以及重度乳糜血的标本等。
(3) 核对化验单申请检验项目，编号登记。
(4) 标本应在采集后离心，离心力1500G，15分钟，4小时内检测。
6、试剂准备
按照试剂瓶标签上标明的量，用蒸馏水复溶Fg试剂，使用前预温到室温（20－25℃）。
五、参考范围与危急值处理：
纤维蛋白原Fg：2-4g/L
凡是Fg<0.6g/L，且无使用抗凝药者。
启动危急报告程序，记录电话报告临床并记录相应信息，如患者姓名、病历号、标本唯一编号、病房及床号、检验结果、报告时间（精确至分钟）、接电话人的姓名。
六、报告审核制度：
实验报告发出前要求：
审核者需检查整个实验过程是否符合操作规程并核对相关信息方可发出报告。
1.室内质控合格
2.病人的各项信息有登记
3.报告发出时除急诊病人需有检验者与审核者双签字或盖章。
七、临床意义：
1、纤维蛋白原减少：
原发性纤维蛋白原减少的病例极少。
一种先天性纤维蛋白原缺乏症是极为罕见的遗传性疾病，通过常染色体隐性基因遗传，此患者肝脏不能合成纤维蛋白原。
男、女两性均能发生，但以男婴为多见，患婴出生时，半数出现脐带出血。
其血液凝固缓慢或只有部分凝固。
继发性血浆
纤维蛋白原减少是由于纤维蛋白溶酶溶解纤维蛋白所致如胎盘早剥，分娩时羊水进入血管形成血栓，引起弥漫性血管内凝血，激活纤维蛋白溶酶原，使血中纤维蛋白溶酶活力增加，溶解纤维蛋白，消耗了体内原有的纤维蛋白原，使其含量减少，有时可降至0.5g/L以下。
严重的肝实质损害，如各种原因引起的肝坏死、慢性肝病晚期、肝硬化等都可出现纤维蛋白原的减少。
此类疾病还常伴有凝血酶及第Ⅶ因子缺乏，也往往是病性严重的先兆。
此外，严重的低纤维蛋白原血症也可见于肺及前列腺手术中。
2、纤维蛋白原增加：
纤维蛋白原是一种急性时相蛋白，增加往往是机体的一种非特异反应，常见于下列疾病：
（1）感染：毒血症、肺炎、轻型肝炎、胆囊炎、肺结核及长期的局部炎症。
（2）无菌炎症：肾病综合征、肿瘤、风湿性关节炎等。
（3）其他：如外科手术、放射治疗、月经期及妊娠期可见轻度增高。