高中生物 第六章 第二节 DNA片段的扩增——PCR技术课后训练(含解析)中图版1

DNA片段的扩增—-PCR技术

1 具有x个碱基对的一个DNA分子片段含有m个腺嘌呤，该片段利用PCR技术完成了第n次循环后需要多少游离的胞嘧啶脱氧核苷酸？（）

A．(2n－1）（x－m) B．2n(x－m)

C．（2n－1)（x/2－m）D．2n（x/2－m）

2 引物的作用是( ）。

A．打开DNA双链

B．催化合成DNA子链

C．使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制

D．提供模板

3 关于PCR技术的应用，错误的一项是（）。

A．古生物学研究、刑侦破案、DNA序列分析

B．诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学研究

C．DNA序列分析、基因克隆、刑侦破案

D．诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列分析

4 关于DNA复制,下列叙述正确的是( ）.

A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5′端延伸DNA链

B．DNA复制不需要引物

C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合

D．DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸

5 PCR利用了DNA的（）原理，来控制DNA的解聚与结合。

A．特异性B．稳定性

C．热变性D．多样性

6 PCR技术最突出的优点是（).

A．原理简单

B．原料易找

C．Taq酶具有耐热性

D．快速、高效、灵活、易于操作

7 PCR操作中，从第二轮循环开始扩增的DNA片段( )。

A．固定长度B．一端固定

C．都不固定D．不能确定

8 PCR技术可扩增DNA分子,电泳技术是将待测样品放在光滑的凝胶薄膜上,并加上直流电场，可利用分子带电荷不同，分离分析氨基酸和多核苷酸片段等有机物。这两项技术综合应用于现代刑侦，可以获得最可靠的证据.下图是一次寻找嫌犯的测试结果：甲是把遗迹中含有21个氨基酸的多肽进行水解,将氨基酸混合物进行电泳的结果；乙是通过提取罪犯B遗迹DNA和四位嫌犯的DNA进行扩增,并采用特定限制酶处理后进行电泳，所得到的一组DNA指纹图谱。

甲：其氨基酸混合物电泳结果

乙：DNA指纹图谱（F1～F4为待测男性其中一位是B）请据图回答，多肽由几种氨基酸组成和B最可能的对象分别是

（）。

A．6和F4B．4和F1

C．6和F2D．7和F2

9 PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。防止污染的办法不包括（）。

A．将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行

B．吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头小套、小离心管应一次性使用，以免交叉污染

C．所有的PCR试剂都应放置于大瓶分装，以减少重复加样次数，避免污染机会

D．PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存，不应放于同一冰盒或同一冰箱

10 在PCR扩增的实验中，加入一种提取物（一种模板DNA 片段），但实验得到的产物却有2种DNA。其原因可能是（）。

A．基因突变

B．TaqDNA聚合酶发生变异

C．基因污染

D．温度过高

11 下面关于DNA对高温的耐受性的说法不正确的是

( ）.

A．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强

B．超过80 ℃后DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复

C．不同生物的DNA的“变性”温度不一定相同

D．深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强,其

DNA中鸟嘌呤所占的比例更高

12 美国科学家莫里斯发明的PCR技术，是一种DNA分子“复印机”，它可以在数小时内将一个DNA分子复制出1千亿个，解决了检测样本扩增的难题。在人类基因组计划实施中，PCR技术使每个核苷酸的识别成本降至5~10美元。莫里斯因发明PCR技术荣获了诺贝尔奖.

（1)DNA分子在复制时需要大量的________作原料，在DNA 聚合酶的催化下，以解旋后的单链DNA为________,进行生物合成。

（2）在DNA分子解旋时必须加热，普通的酶容易________，耐93 ℃左右高温的TaqDNA聚合酶的发现,解决了酶重复使用的难题,使链式反应成为可能。

（3)高温酶的发现应用说明了地球生物________的重要性,大自然的______库是人类的宝贵财富.

13 近10年来，PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（右图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体.

(1）加热使DNA双链打开，这一步是打开________键,称为________，在细胞中是在________酶的作用下进行的。

(2）当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2条DNA分子，此过程中的原料是________，遵循的原则是________。

（3）PCR技术的必需条件，除了模板、原料、酶以外，至少还要三个条件，即：液体环境、适宜的________和________。

（4）通过PCR技术使DNA分子大量复制，若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制4次之后，则15N标记的脱氧核苷酸链占全部脱氧核苷酸链总数的比例为________。

参考答案

1 解析：该DNA片段具有x个碱基对,则有2x个碱基；m个腺嘌呤对应着m个胸腺嘧啶,则每个DNA分子含胞嘧啶脱氧核苷酸（x －m）个.如果完成n次循环，则有DNA分子2n个，除去原有的胞嘧啶,还需要(2n－1）（x－m）个。

答案：A

2 解析：DNA分子的复制具有方向性，即只能从引物的3′端开始，从子链的5′端向3′端延伸。引物的作用是与DNA聚合酶结合促使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制。

答案：C

3 解析:PCR技术能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。这项技术有效地解决了因为样品中DNA 含量太低而难以对样品进行分析研究的问题，被广泛应用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学研究、基因克隆和DNA序列分析等各方面,而不能用于合成核苷酸。

答案：D

4 解析：由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3′端延伸DNA链，所以模板链首先复制的是3′端,即复制方向3′→5′；由于DNA分子是反向平行的,子链是依据碱基互补配对原则，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向5′→3′。

答案：C

5 答案：C

6 答案:D

7 解析：PCR扩增产物可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限制在两个引物链5′端之间，是需要扩增的特定片段。进入第二轮循环后,引物除与原始模板结合外，还要