Agilent 1260液相色谱仪场地准备.
安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。
2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。
3.有关责任：化验室精密仪器室4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材5.规程内容：5.1开机前准备5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。
5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。
5.2.采样前准备5.2.1打开计算机,进入Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。
5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。
5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。
5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确定”。
5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。
(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。
)5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。
Agilent1260液相色谱仪联用柱后衍生标准操作规程
Agilent 1260液相色谱仪+Vector柱后衍生仪标准操作规程一、Agilent 1260液相色谱仪1 操作程序1.1 操作前准备1.1.1 样品过滤1.1.1.1 用流动相或比流动相弱的溶剂溶解。
1.1.1.2 过滤样品确保样品中不含固体颗粒。
1.1.1.3 进样量尽量小。
1.1.2 流动相过滤不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器，降低泵的性能。
遵从下列建议可以提高性能，延长溶剂过滤器的寿命。
1.1.2.1 使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。
1.1.2.2 流动相使用HPLC级。
1.1.2.3 用滤膜过滤溶剂去除微生物（滤膜最大0.45μm，最好0.22μm）。
1.1.2.4 每二天更换或过滤。
1.1.2.5 避免溶剂瓶直接日照。
1.2 仪器组成1.2.1 Agilent 1260高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱和检测器等部件组成。
1.2.2 各部分的操作及数据处理均由工作站计算机控制完成，其操作系统为Windows 7，工作站软件名称为Control Panel。
1.3 开机操作1.3.1 接通电源，打开计算机及工作站其他各部件开关，约30s后，各部件预热完毕，进入待机状态，指示灯为黄色。
1.3.2 打开Agilent ChemStations，进入仪器1联机状态，约30s后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：1.3.2.1 最上方为命令栏，依次为文件，运行控制，仪器等；命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件……等；1.3.2.2 左边为样品信息栏；1.3.2.3 中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器——输液泵——柱温箱——检测器——数据处理——报告；1.3.2.4 中下部为动态监测信号；1.3.2.5 右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
安捷伦1260全自动高效液相操作规程
安捷伦1260全自动高效液相操作规程
1.样品的准备：最好使用流动相溶解样品；进样前样品需过滤膜，除去悬浮不溶杂质。
2.流动相的选择和处理：使用高纯度试剂，所有含盐或含水溶剂必须膜过滤，100%色谱纯有机试剂，滤膜过滤后方可使用；流动相现配现用，剩余的流动相（水相）及时清理，实验间隔>2天，建议倒掉；任何溶剂，如果有可见悬浮物、菌丝，不可使用；更换流动相之前，必须事先阅读色谱柱的说明书；除非有说明，反相柱不得使用100%水。
3.开机注意事项：先开HPLC仪器开关、脱气机、泵和紫外检测电源；等各电源开启后（30s），打开在线软件；冲柱子和平衡时，暂不开紫外灯；平衡完后，打开紫外灯，设置梯度和波长或引用方法。
4.实验结束：C18反相柱应用色谱甲醇保存，不能含任何酸、盐；用甲醇替换通道，四个过滤头均存放于有机溶剂瓶中，以防长菌；流速调零，再关闭软件，最后依次关闭脱气机、泵和紫外检测器的电源。
Agilent1260液相色谱仪操作规程
Agilent 1260 液相色谱仪操作规程一、准备工作a)启动计算机：打开计算机,登陆windows操作系统。
b)启动工作站：开启Agilent 1260各模块电源，待Agilent 1260各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击LC1260(联机)。
c)开启工作站：进入工作站，点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图：选择“视图->系统视图”，即可显示仪器控制视图。
d)配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形上单击鼠标左键，点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积，也可设定低体积关泵；溶剂要求：色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇，二次蒸馏水。
e)冲洗流动相管路：反时针旋开泵模块上的溶液排空阀。
右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。
对于G1311X(四元泵)分别将A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为100%，冲洗至管线内无气泡为止; 设置溶剂比例为初始比例，“流速”为1ml/min，关闭Purge阀。
f)开启模块：开启模块：鼠标右键点击每个模块的空白处都会弹出提示框，选择“控制”即可在新的窗口中选择打开或者关闭各个模块。
也可在仪器视图中选择“打开”。
g)监视基线：点击“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
h)平衡色谱柱、进样分析：监视压力和信号基线等待平稳后，可以进样采集分析。
二、数据采集方法编辑a)方法编辑：在“方法和运行控制”状态下，单击“方法”菜单，选择菜单中“新建方法”，调用化学工作站的默认方法DEF-LC.M ，选择“方法”菜单下的“编辑完整方法”，设置好泵参数、进样方式、柱箱温度、波长、积分参数等，即可开始编辑一个完整地方法。
b)方法存贮：在“方法和运行控制”状态下，单击“方法”菜单，选择菜单中“方法另存为”选项，方法以检测项目名存贮。
三、样品信息编辑a)运行单个样品：在“方法和运行控制”状态下，单击“运行控制”菜单，选择“样品信息”进行样品信息编辑。
安捷伦1260高效液相操作规程
安捷伦液相1260高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料（最好是外文文献）了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。
如果还不清楚样品是什么物质，最起码也应该对其极性进行了解，为选择合适的流动相和固定相打好基础。
流动相选择注意事项：①避免使用高粘度的溶剂作为流动相；②所选用的流动相一定要与样品相溶；③各流动相之间可以很好的相溶；固定相选择注意事项：a.正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
b.反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。
2.准备工作①用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过0.15µm过滤器过滤，必须达到均匀而无颗粒的状态；②流动相一定要选用色谱级别的（最好是默克、飞世尔、时联等牌子的），并且在使用之前一定要使用0.4µm过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气处理20-30min；③在连接柱子和色谱仪之前，阀件或管路一定要清洗干净，（一般用异丙醇将管路清洗）3.仪器操作（一）将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中：棕色瓶对应A 泵，该瓶中只能加双蒸水或娃哈哈纯净水；B、C、D泵根据需要添加。
注：若流动相中有水、乙腈最好现用现处理，不宜放置太长时间。
安捷伦1260操作规程
安捷伦1260操作规程安捷伦（Agilent）1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器，具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。
该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。
二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。
2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。
3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充，以及是否有足够的溶剂。
三、方法设置1. 打开色谱软件，并选择合适的方法模板。
2. 根据分析需求，在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。
3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。
四、进样操作1. 打开进样器的盖子，将待测样品加入样品瓶中。
2. 点击软件中的进样按钮，设置样品名称和进样量。
3. 将样品瓶放入进样器，并关闭盖子。
4. 点击软件中的进样按钮，开始进样。
5. 进样完成后，从进样器中取出样品瓶，并将它放入垃圾桶中。
五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门，并将柱端与色谱柱连接。
2. 检查色谱柱是否没有泄漏，如果有泄漏，则需重新连接。
3. 检查色谱柱的温度，确保它处于合适的温度范围内。
六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源，并连接到电脑上。
2. 设置合适的流速和梯度梯度。
3. 点击软件中的启动按钮，开始进行分析。
七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。
2. 根据需要选择适当的数据处理方法，如峰面积计算、定量分析等。
3. 导出分析结果并保存。
八、仪器维护1. 分析结束后，关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。
2. 清洗色谱柱和进样器，保持其清洁。
3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。
九、安全操作1. 在操作仪器时，注意安全，避免接触到有害化学品。
2. 在操作过程中，严禁随意触摸仪器或移动连接线。
3. 在操作过程中，如遇到异常情况，请及时停止分析并向管理员报告。
通过以上操作规程，可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。
Agilent 1260 HPLC高效液相色谱仪操作规程
3.3 上述技术指标检查正常后，进行样品测试分析。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。
3.4 测试完成后，在HPLC工作站的交互式图谱中对检测结果进行分析和计算,打印出结果报告。
4关机。
4.1 依次关闭泵、检测器、HPLC工作站、计算机、通风设备。
4.2切断电源。
4.3 对检测过程中的废液应按相关的要求处理。
4.4 填写仪器使用记录，清洁整理工作现场。
5 注意事项
在测试过程中，仪器设备出现异常情况，应立即停止测试，并关机，上报单位处理。
Agilent 1260 HPLC高效液相色谱仪操作规程
1 开机前的准备
1.1 查看“仪器使用记录”，检查电源、环境条件。
1.2 根据检测项目，连接泵、分离柱、检测器的流动相管道，用排气阀对管路进行排气。
1.3 长时间未使用或者换了新的流动相，应对泵和进样阀进行冲洗。
2 开机
接通电源。依次打开计算机、HPLC工作站。检查流动相管道连接，看有无漏液等现象。进入HPLC控制界面主菜单。
Agilent1260液相色谱仪器操作规程(新)
Agilent1260液相色谱仪器操作规程一.生产厂家：美国Agilent二.到货日期：2011年1月三.附件：电脑、打印机四.使用范围：用于三聚氰胺，维生素A、D、E,β-胡萝卜素，牛磺酸，山梨酸、苯甲酸，乳糖、蔗糖等的检测五.工作环境：温度15℃~30℃，湿度20%~80%六.操作步骤:1.开机前准备：1.1.打开仪器室的空调。
1.2.配制流动相（按国标）,准备好蒸馏水、乙腈和甲醇。
2.开机：2.1.打开1260液相色谱仪器的进样器、泵、柱温箱和检测器的电源。
2.2.打开计算机。
2.3.打开“仪器1联机”图标，各模块完成自检。
2.4.点击“打开”图标，进入化学工作站。
3.设置运行模块和方法3.1.进样器（自动进样器）3.1.1.设置进样量，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，按照国标，检测不同物质，设定不同的进样量。
反相：最大进样量为100ul，抽取速度一般设定200ul/min。
正相：最大进样量为500ul，抽取速度一般设定200~500ul/min。
3.1.2.设置进样器停止时间，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，如标样的出峰时间为7分钟，停止时间可以设置为8分钟以上。
3.2.泵（四元泵或单泵）3.2.1.泵的流速：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，按照国标要求，如设置1.00ml/min。
3.2.2.如果是四元泵，可选择溶剂瓶，输入需要使用的各溶液的比例，如B 蒸馏水90%，C乙腈10%，点击“确认”。
3.2.3.在“泵”的模块中点击鼠标右键，点击“控制”，选择“泵”（打开），确认。
3.2.4. 设置泵停止时间：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，一般选择“与进样器一致/无限制”。
3.2.5. 压力限值：最小值一般设0bar，最大值一般设100bar。
3.3.柱温箱3.3.1.设置柱温箱的温度：在“柱温箱”模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，左边按照国标要求可设置，比如35度，一般右边设置同左边。
agilent 1260高效液相色谱仪标准操作规程
标准操作规程STANDARD OPERATING PROCEDURE的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于Agilent 1260高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows 7画面。
4.1.2 打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。
待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。
（注意：在“仪器1脱机”关闭的情况下，“仪器1联机”方能打开。
）4.1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。
4.1.4 保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。
单击“确定”。
（注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。
4.1.5 轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。
右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量，从0 ml/min 逐渐变为3ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。
右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。
4.1.6 右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量为：0ml/min，单击“确定”，轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。
4.2 数据采集方法、系列编辑：4.2.1 编辑完整方法：4.2.1.1 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。
4.2.1.2 方法信息：在“方法注释”中写入方法的相关信息。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min 内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
Agilent 1260高效液相色谱仪实验操作
实验十七 Agilent 1260高效液相色谱仪实验操作一、实验目的1．熟悉液相色谱仪的整套装置、工作原理、工作流程；熟练操作和使用液相化学工作站。
2．掌握高效液相色谱仪定性、定量描述未知物含量的实验方法。
3．了解高效液相色谱仪的基本维护与保养细则。
二、实验原理液相色谱法就是同一时刻进入色谱柱中的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱中运行时，在两相间进行反复多次（103～106次）地分配过程，使得原来分配系数具有微小差别的各组分，产生了保留能力明显差异的效果，进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开来，最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器，在记录仪上或色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。
根据各组分在色谱图上的保留时间（或保留距离），可直接进行组分的定性；根据各组分峰面积的大小，即可作为定量测定的参数，采用工作曲线法（即外标法）测定相应组分的含量。
液相色谱仪工作原理图三、仪器与试剂1．仪器Agilent 1260 高效液相色谱系统（包括G4212B型二级管阵列检测器、G1311B 型四元泵、标准自动进样器、液相色谱工作站），电子分析天平，微波消解萃取工作站，超声波清洗器。
2．试剂色谱甲醇、超纯水、99.8% A标准对照品。
3. 色谱条件色谱柱：ZORBAX-SB-C18 色谱柱(150 mm×4.6 mm，5μg )；流动相：甲醇:水= 60:40，流速为1mL/min；检测波长：250 nm，柱温：室温25℃。
四、实验操作内容1．标准溶液配制准确称取一定量的A标准对照品，用甲醇配成一定浓度的对照品溶液。
2. 供试样品溶液的制备准确称取0.5g粉碎均匀的试样( 精确到0.0001g )于萃取罐中，加入超纯水25 mL，在60℃下微波提取30 min，冷却至室温，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液供测定。
Agilent 1260高效液相色谱仪标准操作规程
1 目的规范Agilent1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。
2 范围本公司化验室Agilent1260高效液相色谱仪的维修、保养。
3 责任仪器负责人负责本规程的实施。
4 内容4.1系统组成本系统由G1311C输液泵、G1329B自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B DAD 检测器和M8307AA色谱工作站组成。
4.2开机前准备4.2.1根据实验要求配制流动相，经0.45μm滤膜过滤，超声3～5min。
4.2.2配制对照品溶液和样品溶液（也可在平衡系统时配制），经0.22μm微孔滤膜过滤。
4.3进样前准备4.3.1打开计算机，进入Windows系统。
打开各模块电源（不分先后），待各模块自检完成后，双击桌面上的HPLC（联机）图标，自动进入化学工作站联机界面。
4.3.2选择“视图->方法和运行控制”，也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗，正常情况会默认进入此界面。
选择“视图->系统视图”，即可显示仪器控制视图；选择“视图->样品视图”，即可显示样品信息视图。
4.3.3轻轻旋开泵模块上的冲洗阀（逆时针转约1圈，不可用力太过），右击“四元泵”图标，单击“方法”，设置“流量”为5ml/min，A通道设到100%，单击“确定”。
4.3.4右击“四元泵”图标，单击“控制“，选中“打开”，点击“确定”，则系统开始排气，直到管路内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止（一般为5分钟）；切换通道同法继续冲洗，直到所有要用通道均无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。
4.3.5右击“四元泵”图标，单击“方法”，设置“流量”为0ml/min，单机“确定”，轻轻旋紧冲洗阀（顺时针），设置“流量”为方法所需流速，冲洗色谱柱20～30min。
4.3.6设置“流量”为0ml/min，把冲洗液换成流动相，排气后，运行方法，待柱压基本稳定后，打开检测器等，观察基线情况。
4.3.7单击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标，输入溶剂瓶A、B内流动相的实际体积（为保护泵和色谱柱，请按实际体积输入）和停泵的体积单击“确定”，如果各溶剂瓶溶剂体积小于停泵体积，泵将自动停止，避免气泡进入系统。
Agilent 1260 液相现场培训手册
Agilent 12Agilent 1260 LC60 LCAgilent 12Agilent 12660 LC0 LC[Agilent OpenLAB 中文中文]中文中文现场培训教材现场培训教材现场培训教材现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部.lsca-c 800-820-3278 Agilent OpenLAB1 Agilent 1260 液相现场培训手册一、目录二、培训目的.................................................. . (3)三、培训准备.................................................. . (3)1. 仪器准备.................................................. . (3)2. 溶剂准备.................................................. . (3)四、方法建立.................................................. . (3)1. 开机准备.................................................. . (3)2. 数据采集方法编辑.................................................. (9)G1310A 单元泵 (9)G1312X 二元泵/G1311X 四元泵 (10)G1313A 标准型自动进样器，G1329B 自动控温自动进样器 (11)G1367E 高性能自动进样器 (12)G1328A 手动进样器 (14)G1316A/C 柱温箱 (15)G1314BC/E/F 可变波长紫外检测器 (15)G1315C/D ,G4212A/B 二极管阵列检测器/ G1365C/D 多波长紫外检测器 (17)G1362A 示差检测器 (18)G1321A 荧光检测器 (19)G4218A 蒸发光散射检测器 (21)3. 数据分析方法编辑.................................................. . (22)谱图优化.................................................. .. (22)积分参数优化.................................................. (23)校正.................................................. . (25)打印报告.................................................. .. (27)光谱.................................................. . (28)4. 建立全新完整方法向导 (30)5. 进样.................................................. . (30)单针进样.................................................. .. (30)序列进样.................................................. .. (31).lsca-c 800-820-3278 Agilent OpenLAB2 Agilent 1260 液相现场培训手册五、关机.................................................. . (33)1. 关闭检测器的灯.................................................. .. (33)2. 冲洗系统.................................................. .. (33)3. 封存色谱柱.................................................. . (33)4. 关闭电脑.................................................. .. (33)5. 关闭模块.................................................. .. (33)六、RRLC 快速液相注意事项.................................................. (33)七、特殊检测器的注意事项 (35)八、Agilent 1260 常见问题解决方法.................................................. . (37)附一、维护知识.................................................. .. (39)附二、注册OpenLAB CDS 许可证的流程.................................................. (41)****注意****注意：：********注意注意：：? ? 本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用，，内容为工作站现内容为工作站现本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用，，内容为工作站现内容为工作站现场培训的一般要求，场培训的一般要求，请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相场培训的一般要求场培训的一般要求，，请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相应的培训内容增删。
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程一、目的：建立Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程，保证正确使用。
二、适用范围：适用于Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作。
三、职责：研发部对本标准的实施负责。
四、正文：1 仪器组成及电源：1.1 仪器组成：本仪器由四元泵、真空脱气机、DAD检测器、安捷伦化学工作站组成。
1.2 电源：泵为110V稳压电源，检测器为220V稳压电源，工作站为220V稳压电源。
1.3开机运行前，更换溶剂瓶中的流动相，若管道为第一次使用，先用针管排空各管道中的气泡。
2 仪器硬件开启：自上而下或自下而上顺序开启各模块（真空脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器、荧光检测器），打开电源指示灯，指示灯亮，显“绿色”；状态指示灯指示当前的状态，各模块进行自检（自动进样器的门板必须关上）。
3安捷伦化学工作站的操作：3.1开机运行步骤3.1.1 待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260LC通讯，进入工作站画面，各模块的软件图标均为绿色。
3.1.2从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的”样品视图”、”系统视图”、“命令行”，来调用所需界面（或直接从“视图”菜单中选择“全部菜单”来调用全部界面。
3.1.3把流动相放入溶剂瓶中。
3.1.4打开“Purge”阀，点击泵图标，点击“设置泵”，进入泵编辑画面，设置流速为3-5ml/min，点击“确定”，则系统开始排空管道内的气泡，切换通道继续排空，直至所有要用的通道无气泡为止。
3.1.5点击泵图标，选“控制”选项，选中“关闭”关泵，关闭“Purge”阀。
3.1.6点击泵图标，设置流速冲洗柱子。
3.1.7点击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，点击“确定”。
3.2数据采集方法编辑3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整菜单”项，选中除“数据分析”外三项，点击“确定”，进入下一画面。
标准安捷伦1260液相色谱仪操作规程
安捷伦1260液相色谱仪操作规程一、 仪器开机1、更换流动相（水需要超纯水，有机试剂需要色谱纯），其中水需要每次使用时更换，有机试剂长时间不用也需要更换2、开机：打开电脑、打开液相所有模块电源、点击电脑桌面上的工作站联机图标3、打开工作站上的所有电源，待其就绪（所有灯变绿）4、拧开排空阀，四元泵里设置流速5 ml/min，A 100%；3分钟后，设置B 100%；3分钟后设置流速至合适流速，关闭排空阀二、 运行样品1、新建方法或调用已有方法2、设置方法参数四元泵：设置流速、流动相比例、采集时间，若需梯度则设置梯度，确定自动进样器（ALS）：设置进样量，确定柱温箱（TCC）：设置柱子温度，确定紫外检测器(VWD)：设置紫外波长，确定设置好后保存方法3、在线信号中点击“改变”，可添加泵的压力，以及VWD的信号4、等待系统平衡，所有灯变绿，泵的压力稳、VWD的信号稳定（约20分钟）5、进样：（1）单针进样：运行控制—样品信息，设置进样位置，保存路径等后运行方法（2）序列进样：序列—序列参数，编辑保存路径；序列—序列表，编辑序列表，然后运行序列6、待仪器自动停止分析（四元泵中已设置采集时间）或手动点击“停止”图标（四元泵中未设置采集时间）三、 关机1、冲柱流动相中含缓冲盐：先用10%甲醇、90%水冲30分钟，再用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机流动相中不含缓冲盐：用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机2、关机关闭各模块，关闭仪器电源，关闭工作站，关闭电脑四、 数据处理1、调用需要处理的信号2、自动积分，或者手动积分，删除不要的峰3、打印面积百分比结果，记录每个峰的峰面积、保留时间，在excel中用已知浓度（标准样品）的峰面积作工作曲线，得到工作曲线方程4、未知样品的峰面积来算得其浓度。
(完整word版)Agilent1260安捷伦高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程
Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程1目的建立1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程，规范人员操作。
2 适用范围适用于Agilent（四元泵）高效液相色谱仪的使用与维护。
3 责任与监督检验人员负责执行本规程，部门负责人监督本规程的实施。
4 规程细则4.1仪器原理高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
4.2仪器操作4.2.1系统组成：本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及Openlab Chemstation工作站和台式电脑等组成。
4.2.2操作前准备：4.2.2.1流动相的选择分类：组成分——单组分和多组分极性-极性、弱极性、非极性常用溶剂：甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。
（溶剂最好为HPLC级，水为纯化水）其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相，通过调节各组分的比例改变流动相的极性，已达到最佳的分离效果，对于部分情况还可以加入缓冲盐，调节出峰时间和达到改善峰型的效果。
4.2.2.2流动相的选择为了除去流动相中的杂质，保护系统和色谱柱，在流动相使用完，装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。
4.2.2.3流动相的超声与脱气为了除去溶解在流动相中的气泡，降低基线噪音，在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。
对于溶解在流动相中的极微气体，安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机，可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。
4.2.2.4流动相冷却流动相在超声机中长时间超声后，由于水分子振动摩擦，使水温上升，因此流动相瓶中的溶剂也会被加热。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机（1）打开计算机，登陆windows操作系统。
（2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。
（3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。
把各流动相放入相应的溶剂瓶中。
（4）编辑方法。
方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。
（5）排气。
旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可5ml/min，流量梯度10。
一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。
关泵，关闭排气阀（顺时针）。
（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。
（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。
将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。
（7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。
二、数据采集信息编辑及进样（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。
（2）编辑好样品信息后方可进样。
三、数据处理（1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。
（2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。
（3）谱图优化。
从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例合适为止。
（4）积分。
从“积分”中选择“自动积分”，若积分结果不理想，从菜单中选“积分事件”，更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”，从“积分”中选择积分选项，则数据被积分，如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。
Agilent 1260 Infinity Ⅱ高效液相色谱仪操作规程
操作规程
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文件编号：XXX
版本号：00
Agilent 1260 Infinity Ⅱ高效液相色谱仪操作规程
输入[结果名称]。 在[自动进样器]-[进样源]选择进样位置。如果有多个自动进样器，会在该下拉菜单中列出。 根据不同的仪器配置，会有不同的进样源。当进样源不受 OpenLAB CDS 控制时，请选择外部。 需要空白运行（通过自动进样器）时，请选择无进样/仪器空白。 在[进样量]中输入要进样的量（微升）。 在[样品瓶]中输入将要进样的样品瓶位置（样品位置格式按进样器设置要求）。此项仅在用 户将自动进样器选为其进样源时有效。 [样品准备方法]用于定量分析,一般我们不设置。
文件编号：XXX
版本号：00
Agilent 1260 Infinity Ⅱ高效液相色谱仪操作规程
（4）项目模块：模块上方有菜单栏，分别是【项目和组】、【属性】及【Data Analysis】。选择 【项目】创建项目，并对填写所创建的项目属性（名称、文件夹路径及描述）及 CDS 设置 （文件位置、项目选项、审计跟踪设置等信息）。其中审计跟踪设置下一旦启用[自动启用 审计跟踪]项，将无法关闭。
4) 【在线信号】显示在线模块下的状态。 B. 【方法】模块
此模块含有常规项和仪器设置项，仪器设置项是我们常用于新建/修改方法，仪器设置 包含【四元泵】、【进样器】、【柱温箱】和【VWD】。根据需要在仪器设置项下设置相应的 检验方法。 1) 【四元泵】的设置 在[流量]中输入流量。 在[溶剂]中输入各流动相的比例。默认 A 通道为 100%，如需用到两个通道或以上的，只 要设置除 A 通道外的比例即可。如需用到梯度洗脱，选择对应通道后在右侧窗口点击添
2.3 使用 2.3.1 排液及冲洗系统 （1）单击泵【四元泵】图标上的流动相瓶 图标，出现[瓶填充]对话框，在[实际体积]中输
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min 内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
Agilent 1260液相色谱仪场地准备.
1.用户需确保其场地准备符合仪器安装的所有要求,包括场地大小,电源,气源及其它与安装有关的必需品,(详见下列各项。
2.在安捷伦工程师提供安装和现场培训时间里,具体负责操作仪器的用户须全程在现场,以免漏掉重要的操作、维护及安全信息。
环境要求
1.推荐实验室温度为20-27°C ,温度变化<3°C/hr,相对湿度<80%
特别说明
1.当您提货时,若发现包装已经破损或有违反运输要求的情况,请让运输部门签字确认,并务必与商检部门联系解决。
2.仪器到货前您应完善上述工作,并在仪器到货后尽快申请安装,仪器保修期将从安装之日起开始计算。如果仪器发货后四十五天内仍无法安装,仪器将于发货后第四十六天起自动开始保修期。(特殊原因须提前提出延期安装申请,以免损失您仪器的保修期
2.推荐液相色谱仪工作台,长2米、宽0.8米,承重大于80公斤。建议离墙距离0.3米以上。
电源要求
1.单相交流220V , (+5% ~ -10%, 50-60Hz ,有单独的良好接地(零线对地电压小于2伏。
2.若电压不稳,需配置稳压电源,功率大于2.5千瓦。
3.准备2个合格的万用接线板,总数不小于10个扁平三角接线插座。
溶剂要求
1.二次重蒸馏水, 1000毫升以上(建议用0.45微米水相滤膜过滤。
2.乙腈或甲醇(色谱纯或优级纯, 1500毫升以上(建议用0.45微米有机相滤膜过滤。
3.如有电化学检测器(ECD,另需准备500毫升1N的硝酸(分析纯和少量亚铁氰化钾。
4.如有蒸发光检测器(ELSD,另需准备氮气(消耗量3-4升/分钟,纯度大于99.99%。
乙腈或甲醇色谱纯或优级纯1500毫升以上建议用045微米有机相滤膜过如有电化学检测器ecd另需准备500毫升1n的硝酸分析纯和少量亚铁氰如有蒸发光检测器elsd另需准备氮气消耗量34分钟纯度大于9999液相色谱仪安装场地准备通知
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2.若电压不稳,需配置稳压电源,功率大于2.5千瓦。
3.准备2个合格的万用接线板,总数不小于10个扁平三角接线插座。
溶剂要求
1.二次重蒸馏水, 1000毫升以上(建议用0.45微米水相滤膜过滤。
2.乙腈或甲醇(色谱纯或优级纯, 1500毫升以上(建议用0.45微米有机相滤膜过滤。
3.如有电化学检测器(ECD,另需准备500毫升1N的硝酸(分析纯和少量亚铁氰化钾。
4.如有蒸发光检测器(ELSD,另需准备氮气(消耗量3-4升/分钟,纯度大于99.99%。
特别说明
1.当您提货时,若发现包装已经破损或有违反运输要求的情况,请让运输部门签字确认,并务必与商检部门联系解决。
2.在安捷伦工程师提供安装和现场培训时间里,具体负责操作仪器的用户须全程在现场,以免漏掉重要的操作、维护及安全信息。
环境要求
1.推荐实验室温度为20-27°C ,温度变化<3°C/பைடு நூலகம்r,相对湿度<80%
2.推荐液相色谱仪工作台,长2米、宽0.8米,承重大于80公斤。建议离墙距离0.3米以上。
电源要求
2.仪器到货前您应完善上述工作,并在仪器到货后尽快申请安装,仪器保修期将从安装之日起开始计算。如果仪器发货后四十五天内仍无法安装,仪器将于发货后第四十六天起自动开始保修期。(特殊原因须提前提出延期安装申请,以免损失您仪器的保修期
3.仪器到现场后,请勿自行开箱,必须由安捷伦工程师在安装时开箱验货。
4.为更好地安排安装工作,请于仪器到货后提前一周向用户服务中心申请安装。
液相色谱仪
打印本页Agilent 1260液相色谱仪安装场地准备通知
尊敬的用户:
感谢您选购了安捷伦公司的液相色谱仪,为了保证您的仪器能够顺利完成安装,请根据所购仪器的配置,在仪器到货前准备好以下条件,多谢合作!
用户的职责:
1.用户需确保其场地准备符合仪器安装的所有要求,包括场地大小,电源,气源及其它与安装有关的必需品,(详见下列各项。
安捷伦科技有限公司化学分析仪器部