第六章动物实验的基本方法
小鼠实验的基本技术和方法
小鼠实验的基本技术和方法小鼠实验是生物实验中常用的实验方法之一,主要用于研究生物学、药理学、毒理学等领域。
以下将介绍小鼠实验的基本技术和方法。
一、小鼠的选材与饲养1.小鼠的选材:选取体重相近、同龄、同性的小鼠作为实验对象,并确保其健康状态。
2.小鼠的饲养:小鼠应在洁净、无臭、适温的实验动物房进行饲养。
提供适宜的饲料和清洁的饮水,保持适定的饲养环境,有规律地进行日常护理,确保小鼠的健康和舒适。
二、小鼠实验的基本技术1.注射技术:常用的小鼠注射技术包括静脉注射、皮下注射、腹腔注射等。
操作时应注意选用适当的注射器和针头,避免伤害到小鼠的内脏和组织。
2.静脉采血技术:静脉采血是获取小鼠血液样本的一种常用技术。
通常采用静脉穿刺的方式,先选定采血部位,再使用适当的器具(如针管)进行采血。
3.取脏器技术:小鼠解剖和取脏器是许多实验研究的必要步骤。
这包括心脏、肺、肝脏、脾脏等器官的解剖和获取。
操作时应尽量避免伤害到脏器,确保获取到完整可用的样本。
4.外周血细胞计数:通过采集小鼠的血液样本,使用血细胞计数仪进行细胞计数。
这是评估小鼠免疫功能、全血红细胞计数和血红蛋白浓度的重要方法,有助于评估一些疾病或药物对血液系统的影响。
三、小鼠实验的常用方法1.急性毒性实验:通过给小鼠灌胃或注射一定量的物质来观察其毒性反应,包括死亡率、体重变化、行为异常等。
根据实验设计的需要,可以使用LD50(半数致死量)等指标来评估物质的毒性。
2.慢性毒性实验:将小鼠长期接触一定浓度的物质,观察其对小鼠生理和行为的长期影响。
常用的实验方法包括饮水或饮食添加剂量法、慢性面毒研究等。
3.细胞培养和移植:通过培养小鼠的细胞,观察其在体外的生长和变化。
可以进行细胞增殖、凋亡、分化等方面的研究。
此外,还可以将小鼠的细胞或组织移植到其他物种中,进行异种移植实验。
4.基因改良和基因敲除:通过基因工程技术,改变小鼠基因组的特定基因,观察其对小鼠生理和行为的影响。
动物实验技术
动物实验技术第六章动物实验基本操作技术第一节、实验动物的抓取与固定一、小鼠的抓取与固定•抓取方法:用右手拇指和食指捏住尾部中段提起,如果只想移动小鼠,就用两手把它捧起来。
•手固定法:将右手捏起的小鼠放在笼盖上,用右手捏其尾部中段,在小鼠向前爬的一瞬间,用左手的拇指和食指捏住颈背部皮肤,再翻转左手,将小鼠置于左手掌心中,右手拉住小鼠尾部,再用左手小指和无名指压住小鼠尾根部使小鼠整个呈一条直线。
固定时注意,过分用力会使小鼠颈椎脱臼,若用力过轻头部能反转过来咬伤实验者的手。
这种固定方法是灌胃给药和腹腔注射给药常用的方法。
•手术固定法:用乙醚等麻醉药品麻醉后,用长20~30cm的线绳分别系在四肢上,再把四肢的线绳分别系在固定板四角的钉子上,并且在头部上颚切齿的地方牵一根线绳达到完全固定。
•在静脉给药时,先根据小鼠的大小选择合适的固定器,打开鼠筒盖,把小鼠放在里面,只露出尾巴;或者用倒放的烧杯将鼠扣住,只露出尾巴并压住。
二、大鼠的抓取与固定•抓取方法:4~5周龄以内的大鼠同小鼠;周龄较大的大鼠其尾部皮肤容易被剥脱,所以用左手从背部中央到胸部捏起来抓住。
抓取时最好带防护手套,但手套不宜过厚。
•手固定法:同小鼠。
•手术固定法:同小鼠。
•静脉给药或采血时同小鼠。
三、豚鼠的抓取与固定•抓取方法:抓取幼小豚鼠时,用手捧起来;成熟的大豚鼠,用手大把抓起胸肋部即可。
注意不能粗野,更不能抓取腰腹部,这样容易造成肝破裂而死亡。
•手固定法:⑴将左手的食指和中指放在豚鼠颈背部两侧,拇指和无名指放在肋部,分别用手指夹住左右前肢抓起来。
⑵反转左手,用右手的拇指和食指夹住右后肢,用中指和无名指夹住左后肢是豚鼠整体伸直成一条直线。
⑶一个人固定操作时,坐在椅子上,用右手拿着豚鼠的后肢夹在两腿之间,用大腿代替右手夹住。
•手术固定法:同大、小鼠。
四、家兔的抓取与固定•抓取方法:用一只手大把抓住颈背部皮肤提起来,另一只手托住其臀部,让其重心落在托其臀部的手上,运送时,还要抓住颈肩部皮肤抱着兔子运送。
【精品】第六章 生物多样性测定
第六章生物多样性测定一、遗传多样性的检测遗传多样性是生物多样性的重要组成部分,从某种程度上说它是生态系统多样性和物种多样性的基础和核心。
遗传多样性的最直接的表现形式是遗传变异水平的高低。
但是,对于任何个体来说,其生命总是很短暂的,由个体构成的种群或种群系统(例如种、亚种)才是在时间上是连续不断的,才是进化的基本单位,这些种群或者种群系统在自然界有其特定的分布格局,所以遗传多样性不仅包括变异水平的高低,同时也包括变异的分布格局,即种群的遗传结构.对于大范围的异交植物来说,种群之间的遗传变异会明显增加,种群遗传结构上的差异是遗传多样性的重要表现,一个物种的进化潜力和抵御不良环境的能力取决于种内遗传变异的大小,同时也有赖于遗传结构。
遗传结构是遗传变异在种群内和种群间的分布.它包括基因的种类及比例,而基因型的种类及比例、基因频率及演化规律是种群遗传结构的核心问题。
因此研究种群遗传结构有利于阐明自然条件下的生物变异。
人们对遗传多样性的检测最初是从形态学开始的。
随着染色体的发现及其结构和功能的澄清,人们又把研究的重点转向染色体上。
上世纪60年代,酶电泳技术以及特异性组织化学染色法应用于群体遗传和进化研究,使科学家们从分子水平来客观地揭示遗传多样性成为可能,并极大地推动了该领域的发展.进入80年代,分子生物学和分子克隆技术的发展带来了一系列更为直接的检测遗传多样性的方法,即直接测定遗传物质本身DNA序列的变异。
从不同水平上检测遗传多样性的各种方法在灵敏度、可行性以及检测目的等方面差别很大,目前检测遗传多样性的常用手段基本上是以形态学性状为主的表型分析和分子水平的检测。
1、形态学(表型)检测从形态学或表型性状上来检测遗传变异是最古老也最简便易行的方法。
由于表型和基因型之间存在着基因表达、调控、个体发育等一系列复杂的中间环节,如何根据表型性状上的差异来反映基因型上的差异就成为用形态学方法检测遗传变异的关键。
通常所利用的表型性状主要有两类。
动物实验基本操作技术
动物实验基本操作技术动物实验作为一种科学研究手段,常用于医学、生物学等领域的实验研究。
为了确保实验的可靠性和安全性,研究人员需要正确掌握基本的动物实验操作技术。
下面将介绍一些常用的动物实验基本操作技术。
首先,动物实验前,需要对动物进行适当的饲养管理,确保其健康状态。
这包括提供适宜的饲料和饮水,保持合适的环境温度和湿度,以及定期清洁和消毒动物饲养环境。
此外,研究人员还需对动物进行身体检查,以排除可能影响实验结果的健康问题。
其次,对于需要进行手术的实验,研究人员需要具备相关的手术技术。
例如,动物麻醉技术是必不可少的,可以采用静脉注射麻药、局部麻醉或气管插管麻醉等方法。
在动物手术过程中,需要准确切割皮肤或组织,处理血管、神经和器官,以及进行缝合和止血等操作。
因此,研究人员需要熟练掌握相关手术技术,确保手术过程的顺利进行。
此外,动物实验中还常使用动物注射技术。
注射技术包括口服给药、皮下注射、肌肉注射和静脉注射等。
研究人员需要准确计量给药剂量,选择合适的注射部位和注射器具,并注意注射速度和注射途径的选择。
在实验中,研究人员还需要掌握注射后的观察和记录技巧,及时发现和处理可能的不良反应。
另外,动物实验还涉及到采集和处理生物样本的技术。
例如,研究人员需要采集血液、组织或其他体液样本,以进行生化分析、细胞培养或组织学检查等。
采样时需要注意卫生与无菌操作,避免交叉污染。
采样后,研究人员需要合理保存和处理样本,以保证实验结果的可靠性。
此外,动物实验中的数据记录与分析也是十分重要的。
研究人员需要仔细记录实验过程的各种参数,包括实验开始时间、操作步骤、药物剂量、实验结果等。
此外,研究人员还需要进行数据分析,以得出科学合理的结论。
在数据分析过程中,研究人员可以使用统计学方法,如平均值、标准差、方差分析等。
最后,动物实验的伦理与法规也是非常重要的。
研究人员需要遵守相关的伦理规范和动物保护法律法规,保证动物实验的道德性和合法性。
6 第6章 一般毒性作用及其试验与评价方法
2、剂量设计与分组
• 根据受试物或其近似物的物理、化学性质选择与本实 验相同动物物种或品系,相同染毒途径的LD50值作为 参考值,选择剂量系列。 • 一般分四组:高中低三个剂量组及一个阴性对照组
3、确定实验动物染毒方法: 灌胃
4、观察周期及观察内容
观察周期:一般为14天或24h,但计算出LD50时应注明
• 品种、品系的选择 • 健康状况:健康成年动物
小鼠、大鼠测半数致死量,狗观察毒性反应。
• 年龄:大鼠180-240g,小鼠18-25g(35-50日 龄),家兔2-2.5kg,豚鼠200-250g,狗10-15kg。 • 性别:雌、雄各半,雌性实验动物要求是未 经交配和受孕的。 • 各剂量组动物数: 小动物数量为每组 10 只,大动物也应每组 6 只。
‘一次接触’
(P122)
经口接触和各种方式的注射接触,“一次接触”,是指 在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内;
而经呼吸道吸入与经皮肤接触,“一次接触”是指在一
个特定的期间内实验动物持续地接触受试化合物的过程; 此外,当化学物毒性较低时,需要给予动物较大剂量时, 可在 24 小时内分多次给予,这时的急性接触即为“多 次”。
免费茶水的重金属严重超标
一份外国学者的研究指出, 中国13个品牌的香烟重金属含量超标
第二节 蓄积毒性
一、基本概念 P138
当化学毒物连续、反复进入机体,而且进 入的速度(或总量)超过代谢转化与排出的速度 (或总量)时,物质就有可能在体内逐渐增加并 贮留的现象--蓄积作用(accumulation) 化学毒物容易蓄积的组织和器官——贮存库
急 以性 死毒 亡性 为的 终上 点限 参 数 急 非性 毒 作致 性 用死 的 为性 下 终急 限 点性 毒参 性数 ,
第六章动物实验的基本方法演示文稿
2.差异的控制: 差异的来源:⑴实验者;⑵动物;⑶动
物与环境的相互作用 实验者带来的差异 实验过程的实施: 不准确的测量
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动物固有的差异
✓ 动物来源不一
✓ 饲养管理的差别 ✓ 动物生活环境不同
✓ 动物健康状况
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动物与环境相互作用引起的差异 ✓ 群居因素,每个笼盒饲养动物数量 ✓ 动物与实验操作过程之间的相互作用引起 ✓ 饲养操作与实验操作的顺序 ✓ 实验操作引发的动物之间的影响
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•小鼠的给药途径和方法
✓灌胃(i.g):动物要固定好;头颈部保持平展;
要沿着口角进针,再顺着食管方向插入胃内;决不 可进针不顺就硬向里插。
✓皮下注射(s.c):常选用颈背部皮肤。
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图 大小鼠的灌胃
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✓皮内注射(i.d):观察皮肤血管的通透性变化及观
固定方法:
徒手固定;固定板固定;固定架固定;简易固定
图 小鼠保定
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大鼠的抓取与固定
✓ 抓取方法 ✓ 固定方法:
徒手固定;固定板固定;卵圆钳固定
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•豚鼠的抓取与固定
✓ ✓
图 豚鼠抓取和保定
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•家兔的抓取与固定
✓ ✓
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图 兔抓取和保定
察皮内反应,多用于接种、致敏实验等。雄性较雌性 皮肤紧密,注射难度大。 ✓ 肌肉注射(i.m):较少应用 ✓ 腹腔注射(i.p): ✓ 静脉注射(i.v):一般采用尾静脉注射。小鼠尾部 背腹各有一根动脉,两侧各有一根静脉。
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图 小鼠腹腔注射
第六章 动植物细胞培养
第一节
动植物细胞培养的特性
一、动物细胞培养的特性
技术发展历史:
1907年,美国,Harrison首次将蛙的神经组织在试管内培养 成功。 1950年,Enders及同事发表第一篇在培养细胞中生长病毒的 报告。 1972年,Knazek等创立中空纤维细胞培养技术,使细胞体外 培养扩展为大规模培养。 1986年,Demo生物公司用微囊化技术大规模培养杂交瘤细胞 生产单克隆抗体获得成功。 随后,动物细胞培养技术日趋完善。
维生素:是维持细胞生长的一种生物活性物质,它 们在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶,对细胞的代 谢有重大的影响。 糖类:多数合成培养基都含有葡萄糖,它主要由糖 酵解作用代谢形成丙酮酸,并可转化乳酸或乙酰乙 酸进入柠檬酸循环形成CO2。对胚胎细胞和转化细胞, 乳酸在培养基中的积累特别明显。 无机离子:是细胞的重要组成部分之一,参与了细 胞的代谢活动。培养基中的无机离子除K+、Na+等外, 还含有Fe2+、Zn2+、Cu2+等微量离子。
生物反应工程原理
李艳 教授
生物科学与工程学院 lymdh5885@ ly5885@
第六章 动植物细胞培养
动植物细胞培养技术:将动植物组织、器官在适当 的培养基上进行离体培养的技术。 组织:指由结构和功能相似的细胞和细胞间质组成, 具有一定形态和生理功能的聚集体。 器官:指机体中具有特殊结构和完成特殊功能的分 化部分。 组织与器官培养:在人工条件下,使它们得以继续 生存或发展的一种培养方法。
1、动物细胞培养的环境要求 2、培养基组成 3、常用的合成培养基 4、培养基制备应考虑的因素
第六章动物人工繁殖
3、异种体细胞克隆阶段
异种体细胞克隆就是将一种动物得体细胞核移植到另一种动物得去核(遗传物质)卵母细胞 中。 由于濒危物种得个体数量少,很难提供用于克隆得卵母细胞和代孕受体,这就促使科学家提 出了异种克隆得设想。 异种克隆研究面临着许多问题,如体细胞核能否在异种卵胞质中去分化并支持早期胚泡发育? 异种核质能否相容?异种重构胚能否着床并进行全程发育等问题。 1999年,中科院动物所实验室将成年大熊猫体细胞作为供核体细胞移植到去核(遗传生物)日 本大耳白兔卵母细胞中成功地构建异种重构胚,体外培养获得孵化囊胚。 2001年将重构胚移植寄母子宫,获得了着床得重大进展。 2002年,不仅异种重构胚能够在异种寄母子宫中着床,而且还能发育,这就是异种克隆大熊猫 研究中攻克得最后一个难题中得最新进展。
试管婴儿得三个阶段:
第一代试管婴儿:最早成功得常规技术。 第二代试管婴儿:采用显微受精技术将单个精子注射进卵细胞内使其受精。适用 于男性原因得不孕,如少精、弱精等。1996年,我国第二代试管婴儿(ICSI)在中山 医科大学获得成功。 第三代试管婴儿:对体外受精得胚胎取出细胞进行遗传学诊断后再行胚胎移植。 我国第三代试管婴儿(PGD)在中山医科大学获得成功。 2000年3月,我国首例超快速冷冻胚胎移植得试管婴儿在湖南医科大学人类生殖 工程研究室诞生,标志着我国在该领域得研究已进入世界先进行列。 进一步,美国、日本、台湾正研制多胞胎和“人造子宫”以完成怀孕全过程。
胚胎工程---体外受精(IVF)(第一步骤)
精子获能就是精子获得穿透卵子透明带能力得阶段。
精子获能分为体内获能与体外获能 体内获能:精子在附睾内已经获得了受精能力,但由附睾分泌得一种物质附于精
子表面,抑制了她得受精能力,这种物质被称为去能因子。去能因子就是顶体 酶得抑制剂。 体外获能:精子通过用子宫液、卵泡液、子宫内膜提取液或血清等在体外培养获 能得过程。 2 、卵子回收及成熟培养 3 、卵子和精子得体外受精(in vitro fertilization IVF) 受精成功得标志至少就是看受精卵就是否可以发育至囊胚期阶段 4 、受精卵得体外发育及体外培养
动物实验研究方法
动物实验研究方法动物实验是科学研究领域中常用的一种方法,它可以帮助科学家们了解动物行为、生理功能、疾病机制等方面的知识。
然而,动物实验也存在一些争议,因为它涉及到动物的使用和伦理问题。
为了确保动物实验的合理性和可靠性,科学家们必须遵循一系列的研究方法和道德准则。
在进行动物实验之前,科学家需要先制定研究目标和问题。
他们需要明确自己想要研究的内容,例如动物的行为特征、生理功能、药物疗效等等。
然后,科学家需要选择适合的动物模型。
动物模型是指科学家在研究中选择的动物物种,它在一些方面具有与人类相似的特点。
例如,用小鼠作为研究模型可以帮助科学家了解很多与人类相关的生理机制。
接下来,科学家需要设计实验方案。
在设计实验方案时,科学家需要考虑多个因素。
首先,他们需要确定实验所需的动物数量。
科学家应该根据实验的目的和方法来评估所需的动物数量,并且尽量减少动物数量以避免不必要的伤害。
其次,科学家需要确定实验的时间安排。
他们应该考虑到动物的生理特点和实验的时间限制,以确保实验的准确性和可靠性。
在动物实验中,科学家还需要选择合适的实验材料和设备。
例如,他们需要选择适合大鼠或小鼠的笼子和喂食器,并提供适当的饮食和水源。
此外,科学家还需要选择合适的实验仪器和设备,并确保其正常运作。
实验过程中,科学家需要准确记录实验数据。
他们应该使用标准化的方法和工具,如观察记录、测量仪器等,来确保数据的准确性和可比性。
此外,科学家还需要保留样本和数据,以备将来的分析和验证。
在进行动物实验时,科学家还必须遵循伦理准则和法律法规。
例如,他们需要确保动物的福利和权益得到充分保护,防止任何不必要的伤害。
科学家应该尽量减少动物的痛苦和困扰,并尽可能提供适当的麻醉和镇痛药物。
此外,科学家的实验也要符合相关法律法规和伦理审查的要求。
总结起来,动物实验是一种常用的科研方法,它可以帮助科学家们了解动物行为、生理功能和疾病机制等方面的知识。
在进行动物实验之前,科学家需要明确研究目标和问题,并选择合适的动物模型。
小鼠实验的基本技术和方法ppt课件
小鼠皮下注射
小鼠尾静脉注射
• (4)腹腔注射给药法:小鼠的注射量为 0.1-0.2毫升/10克 。
• (5)肌肉注射给药法: • (6)脑内注射给药法:
小鼠腹腔注射
• (四)麻醉法 • 1、吸入麻醉法:常用麻醉剂为乙醚。 • 2、腹腔麻醉法:常用麻醉剂是戊巴比妥钠,
用生理盐水配成浓度为2%的溶液,用量为 0.023毫升/10克体重。
• (五)采血法 • 1、剪尾尖法: • 2、切割尾静脉采血法:
小鼠剪尾采血
• 3、眼部采血: • (1)眼眶后静脉窦采血 • (2)摘除眼球采血法:
小鼠内眦采血
• 4、心脏采血法 • (1)穿刺法:每次采血量为0.5-0.6ml。 • (2)开胸法 : • 5、断头采血法 :可采血0.8-1ml。
• 三、实验材料及标本 18-22克小鼠(每人一只)。
• 四、实验内容及方法 • (一)小鼠抓取固定方法
பைடு நூலகம்
小鼠保定技术
• (二)标记法 • 1、永久标记法: • 2、短期标记法:也称染色标记法 。
• (三)给药法 • (1)口服法: • (2)强制灌胃法:
小鼠灌胃
• 2、注射给药法 • (1)皮下注射给药法: • (2)皮内注射给药法: • (3)静脉注射给药法:剂量为0.05-0.1mg/10g体
• 一、实验目的 • (一)掌握小鼠抓、取、固定的基本方法。 • (二)熟悉鼠类的染色、标记的基本方法。 • (三)掌握鼠类的给药、麻醉的基本操作技术和
方法。 • (四)熟练掌握小鼠基本采血技术和方法。
• 二、实验用品 • 1ml注射器、5毫升注射器、针头、500毫升
烧杯、手术剪、镊子、止血钳、灌胃针头、 棉球、生理盐水、75%酒精等。
常用实验动物第六章 小鼠
4、DBA :
淡灰色,1909年在毛色分离实验中建立,为最古老的
近交系小鼠。1929年在亚系间进行杂交,建立了两个
亚系:DBA/1、DBA/2
DBA/1系主要特征:抗DBA/2系所生长的瘤株;P1534瘤 株的生长率为50%;一年以上雌鼠乳腺癌发生率为75%; 对结核菌敏感。对疟原虫感染有抵抗力;对鼠伤寒C5 敏感;老龄雌鼠都有钙质沉着。
属全年多发情动物,产后即发情。
寿命2年左右。
4、性情温顺,胆小怕惊,反应敏感。
对多种病原体、毒素及致癌物都很敏感, 外界环境光照、噪音、营养、温度、空气 质量等多种因素均可对小鼠造成影响。
5、群居,昼伏夜动,喜啃咬。
因门齿生长较快,需经常啃咬坚硬物品。 喜光线较暗的安静环境,进食、分娩都 常发生在夜间,傍晚和黎明前是小鼠活 动的两个高峰。
无胸腺的突变系裸鼠缺乏无胸腺的突变系裸鼠缺乏tt细胞细胞scidscid小鼠小鼠是先天性是先天性tt和和bb细胞联合免疫缺陷的突变系动细胞联合免疫缺陷的突变系动nzbnzb小鼠具有自发性的自身免疫贫血症用小鼠具有自发性的自身免疫贫血症用于研究自身免疫疾病的机制
常用实验动物
常用实验动物
小鼠 大鼠 豚鼠 兔 犬 猴 小型猪等
3、遗传性疾病模型动物:
具有遗传性疾病的突变系为研究人类遗传性疾 病的病因、发病机理和治疗提供了自然的动物 模型。
如家族性肥胖、遗传性贫血、全身性红斑狼疮、 侏儒症、尿崩症等都有相应的突变系小鼠可供 研究用。
白
内
障
小
鼠
(四)、病原体所致疾病的研究
主要对病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫性疾 病的研究。 由于小鼠对多种病原体和毒素敏感,可用于制 作感染诱发的人类传染性疾病的动物模型,如: 疟疾、血吸虫、马锥虫、流感、狂犬等。对这些 疾病的病理过程、机理和治疗等进行研究。
第六章常用实验动物的特点及其应用
小鼠出生后不同时间的外观形态特征
日龄 外观形态特征 日龄 10 9-11 完全 13-15 跃 18以后 立生活 外观形态特征 能听到声音 全身被毛,发育 眼皮张开,能跳 1 子鼠裸体鲜红 3 脐带脱落,皮 肤变白,开始长毛和 胡须 4~6 双耳张开耸立 7~8 开始爬行,下 门齿长出,被毛浓密
能自行采食,独
中国培育的近交系小鼠有:TA1(津白一 号)、TA2(津白二号)、615系 引进的近交系小鼠有20多种,常用的有4种。
C3H小鼠:1975年从美国引进,毛色为野生色 C57BL/6:1975年从日本引进,毛色为黑色 BALB/c:Bagg1913年获得小鼠白化株,经近 亲繁殖20代以上育成,毛色为白色 DBA:分为DBA/1和DBA/2两个品系,1977年由 美国实验动物中心引进,毛色均为浅灰色。
重组近交系小鼠将双亲品系的基因自由组合和重组 产生一系列的子系,是遗传分析的重要依据,主要 用作基因定位及其连锁关系的研究。 同源近交系小鼠常用来研究多态性基因位点的多效 性,基因的效应和功能。 不同的近交系存在不同的组织相容性基因(H-2系 统),同源突变、导入、分离近交系小鼠中携带H-2 抗原标准等位基因不相同,在遗传、免疫和肿瘤学 研究中有重要用途。
繁殖特性
发育迅速,性成熟早 小鼠出生后20日龄左右即可离乳,此时体重达14g (10-16g)左右,稍加饲育即可用于实验及科研 (18-22g)。6-7周龄性成熟。雌性35-50d、雄性 45-60d便可交配繁殖。配种最好在65-90日龄。 性周期短,繁殖力强 发情周期4-5d,妊娠期19-21d,哺乳期20-22d。有 产后发情便于繁殖的特点。每胎产仔8-15只,最多 可达25只,年产6-9胎。生育期为1年,寿命2-3年。
实验动物学基础 第六章 动物实验概论
2、 仪器、药品、试剂 仪器要校准,好用、会用; 药品、试剂要提前预定,按照说明书进行配制,特别注意的是,生物试剂 要在确认有合格的实验动物和其它条件都具备的情况下才可配制; 各种实验器械要消毒、配套。
3、实验动物 实验动物是特殊的材料,是有生命的物质。实验前应了解实验 动物品种、品系、等级、许可证、动物质量合格证情况,进一 步提交详细的使用计划。 对本单位不能提供的实验动物,则必须联系购买,购买的程序、 要求、运输等都要认真考虑
六、动物实验的实施
在实验过程中,要敢于舍弃原设计中不尽合理的部分,仍要不断修正 和完善实验方案。 要对手术后的动物勤加观察,精心护理。 获取的各种样本、标本要及时处理,获取必须的原始数据,准确记载。 如果样本需要集中统一处理,则必须按照不同样本处理要求妥善保存。 保存样品的外包装必须详细标明:名称、每份样品编号、取样日期 (年、月、日、时间)、保存人、有效联系方式),同时应按照实验 室管理要求及时登记备案。
第六章 实验动物概论
第一节 实验动物生产供应管理及使用的特点
一、.实验动物繁殖生产的特点
1、难以控制的繁殖规律 2、对生活环境的高度依赖 3、生产成本高 4、管理要求高
二、实验动物供应使用的特点
1、可供使用时间短 2、供应使用的规格要求千变万化 3、供应使用量的峰谷落差大
三、实验动物生产供应的特殊管理要求
(2)一致性原则 一致性原则是指在实验中,实验组与对照组除了 处理因素不同外,非处理因素基本保证均衡一致。这是处理因素具 有可比性的前提。 (3)重复性原则 重复性原则是指同一处理要设置多个样本例数。 重复的作用是估计试验误差,降低试验误差,增强代表性,提高精 确度。重复的目的就是要保证实验结果能在同一个体或不同个体中 稳定地再现。为此,必须有足够的样本数。样本数过少,实验处理 效应将不能充分显示;样本数过多,又会增加工作量,也不符减少 实验动物用量的原则。
第六章 软体动物门
第六章软体动物门导读:本文是关于第六章软体动物门,希望能帮助到您!第六章软体动物门教学目标1.通过对河蚌、蜗牛及乌贼形态结构和生活习性的学习,使学生了解软体动物门的主要特征,同时了解软体动物的经济意义。
2.在观察各种软体动物的过程中,继续培养实验能力和观察能力,通过归纳总结软体动物的主要特征,培养分析综合能力。
3.通过了解河蚌等软体动物的形态结构与生活习性,树立生物体与环境相适应的观点。
通过了解软体动物与人类的关系,树立生物科学的价值观和对事物一分为二的观点。
重点、难点分析1.本章重点及分析:软体动物种类很多,约有10万多种,其形态结构和生活环境亦有很大差别。
那么,它们为什么都是软体动物呢?这就是本章的重点教学内容,即通过具体动物来揭示软体动物类群的共同特征。
河蚌生活在淡水中,蜗牛生活在陆地上,而乌贼则生活于海洋中,虽然它们的生活环境截然不同,但它们都具有共同的结构,这就是都有贝壳和外套膜,而贝壳又是由外套膜分泌产生的。
所以,外套膜是软体动物共有的和特有的结构,在教学当中应该重点强调外套膜这个特殊的结构,并明确它在动物体内的位置,这样会使学生较容易地观察到,无论是河蚌、蜗牛或乌贼,其外套膜都包在内脏团外,起到保护内脏器官的作用。
2.本章难点及分析:生物的生活环境相似却具有相同的结构特点对于学生来说比较容易理解,但生活环境不同却具有相同结构对于学生来说就不太容易接受了。
教材中列举的三种动物恰恰如此。
淡水中的河蚌,陆地上的蜗牛和海洋中的乌贼是不同环境中生活的软体动物的典型代表,要让学生理解它们是“一家”就是本章的一个难点。
解决这个难点的方法很多,但最根本的是让学生理解外套膜是“一种”结构而不是“一个”结构,这种结构是指包在内脏团外的一层膜,动物的种类不同,这层膜的形状、薄厚会发生差异。
例如:河蚌的外套膜是两个,而蜗牛及乌贼的外套膜是一个;乌贼的外套膜很厚,是肌肉质的,河蚌的则较薄,而蜗牛的外套膜却是一层透明的薄膜。
《医学实验动物学》医学实验动物学绪论
什么是实验动物化?
野生动物或经济动物经过初期的表型分析和筛 选,对具有科学实验价值的动物,经过严格的驯养、 微生物净化、遗传及饲养环境等因素的控制,按实 验要求进行培育,使之达到实验动物的标准。我们 把这种将野生动物或家畜 驯化(Domestication)、培育(breeding) 成实验动物的过程,叫做实验动物化 (Laboratory Animalization)。
20.5
27.4 23.8
18.7
9.8 24.5
8.8
及 12级
100
99.3
100
格 率
13级
100
99.3
100
% (≥60)
14级
100
100
100
实验动物与其他动物区别 ——基本概念的理解
什么叫实验动物?
所谓实验动物(Laboratory Animal): 是经人工饲育、对其携带的微生物实行
三
1-3
三
(8-19-:350)
三
4-6
(10-11:50)
三
(8-19-:350)
三 (104-1-16:50)
三
1-3
1.第六章 人类疾病动物模型 2.免疫缺陷动物 实验一:动物实验的基本技术和方法 实验一:动物实验的基本技术和方法 实验二:肿瘤接种技术 实验二:肿瘤接种技术 第八章 动物实验伦理;课程总结
用于科学实验 实验动物主要应用目的是为了科学实验,是人类的替身。
什么是实验用动物?
所谓实验用动物(Experimental Animal, Animal for Research)
野生动物(Wild Animal)
指直接从野外捕获的动物。这种动物 未经人工培育,所携带的微生物和寄生 虫受控于其生活的环境及食物,其个体 与群体间遗传基因杂合。对实验结果敏 感性、重复性差。
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大鼠的抓取与固定
✓ 抓取方法 ✓ 固定方法:
徒手固定;固定板固定;卵圆钳固定
•豚鼠的抓取与固定
✓抓取方法 ✓固定方法
徒手固定 固定板固定
图 豚鼠抓取和保定
•家兔的抓取与固定
✓抓取方法 ✓固定方法
徒手固定;盒式固定;台式固定
图 兔抓取和保定
•犬的抓取与固定
✓抓取方法 ✓固定方法
慢性试验中犬的固定方法 急性试验中犬的固定方法:头部的固定;四肢固
定
图 狗嘴捆绑保定的方法
• 猪的抓取与固定
✓ 抓取方法 ✓固定方法
猴的抓取和固定
✓ 抓取方法 ✓固定方法
五.动物的编号、标记及去毛方法
• 动物的编号与标记: ✓常用的标记液:
①3%~5%苦味酸溶液(黄色) ②0.5%中性红或碱性品红溶液(红色) ③2%硝酸银溶液(咖啡色,涂后需光照10分钟) ④煤焦油酒精溶液(黑色)
②麻醉时要注意保温。保温方法有:实验桌内 装灯,电褥,台灯照射等
③作慢性实验时,在寒冷季节,麻醉剂在注射 前应加热至动物体温水平。
④注意保持动物的呼吸道的通畅,麻醉前禁食.
八.动物的给药途径和方法
实验动物的给药方法主要分为注射法和 投入法两种,注射法又分为:皮下注射、肌 肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、 胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节 腔注射和心内注射等方法,投入法可分为: 鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入、气 管内投入以及经口腔投入。
图 兔的灌胃
图 兔的耳静脉注射
物与环境的相互作用 实验者带来的差异 ✓ 实验过程的实施: ✓不准确的测量
动物固有的差异
✓ 动物来源不一 ✓ 饲养管理的差别 ✓ 动物生活环境不同 ✓ 动物健康状况
动物与环境相互作用引起的差异 ✓ 群居因素,每个笼盒饲养动物数量 ✓ 动物与实验操作过程之间的相互作用引起 ✓ 饲养操作与实验操作的顺序 ✓ 实验操作引发的动物之间的影响
✓肌肉注射:大腿外侧肌肉 ✓腹腔注射 ✓静脉注射: ➢ 耳缘静脉 ➢外侧跖静脉
•兔的给药途径和方法
✓灌胃:确保灌胃管插入胃内;药液推完后 将残留在灌胃管内的药物用水冲入胃内,ห้องสมุดไป่ตู้确保给药剂量的准确
✓皮内注射:背部脊柱两侧的皮肤 ✓皮下注射:背部和腿部皮肤 ✓肌肉注射 ✓腹腔注射 ✓静脉注射:耳缘静脉
三.实验动物的领取
✓ 明确实验所用动物的品种、品系、规格、等级、 以及实验的大致时间表
✓ 填写动物申领计划表,教研室主任签字生效 ✓ 填写动物领用表,确定所领动物的品种、品系、规
格、数量
四.实验动物的抓取和固定
小鼠的抓取和固定 ✓ 抓取方法
图6—1 小鼠抓取
固定方法:
徒手固定;固定板固定;固定架固定;简易固 定
第六章 动物实验的基本技术方法
一.动物实验前的准备
➢ 动物实验前的理论准备: 实验动物方面的基础知识;选题 ;方案的制订;方法
的选定
➢ 动物实验前的条件准备:
实验仪器、药品、试剂、实验动物
➢ 预备实验
二 动物实验的设计与分组
1.设计原则:
➢ 对照性原则:
设对照组,应有可比性,分为自体对照和组间对 照
七. 动物的麻醉方法
✓常用的麻醉剂 1. 挥发性麻醉剂:乙醚、氯仿等 2. 非挥发性麻醉剂:苯巴比妥钠、戊巴比 妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物,盐 酸氯胺酮、水合氯醛等 3.中药麻醉剂:洋金花、东莨菪碱等
其他麻醉辅助用试剂:
• 镇痛剂:芬太尼、埃托菲等 • 镇静剂:氟阿尼酮、乙酚丙嗪等 • 抗胆碱药:阿托品、格隆溴铵等 • 肌松剂:筒箭毒碱、泮库溴铵等 • 其它:α-2激动剂——美托咪定,对狗、
➢ 一致性原则:
对照组和试验组除处理因素外,其他因素保持一致
➢ 重复性原则
同一处理要设多个样本例数,为估计试验误 差、降低试验误差、增强代表性,提高实验结果 的精确度
➢ 随机性原则:
随机分组
➢ 客观性原则
实验设计、选择观察指标以及结果判断要客观
2.差异的控制: 差异的来源:⑴实验者;⑵动物;⑶动
猫、兔及大多数啮齿类动物可产生良好 的镇静和镇痛效果
✓动物的麻醉方法 1.全身麻醉
①吸入法: ②腹腔和静脉给药麻醉法 2.局部麻醉:盐酸普鲁卡因、盐酸可卡因、利 多卡因
✓ 麻醉注意事项: ①静脉注射必须缓慢,同时观察肌肉紧张性、
角膜反射和对皮肤夹捏的反应,当这些活动明显 减弱或消失时,停止注射。
✓ 腹腔注射:用左手的大拇指、食指和中指 从大鼠的前肢和头部后面抓住大鼠,同时 用身体抵住大鼠的两后肢使之固定,使腹 部向上并伸展,注射方法与小鼠相同。
✓静脉注射:尾静脉
•豚鼠的给药途径和方法
✓经口给药: ➢固体药物的投入 ➢液体药物的投入 ✓皮下注射:大腿内侧面、背部、肩部等皮
下脂肪少的部位 ✓皮内注射:脊柱两侧
•小鼠的给药途径和方法
✓灌胃(i.g):动物要固定好;头颈部保持平展;
要沿着口角进针,再顺着食管方向插入胃内;决 不可进针不顺就硬向里插。
✓皮下注射(s.c):常选用颈背部皮肤。
图 大小鼠的灌胃
✓皮内注射(i.d):观察皮肤血管的通透性变化及
观察皮内反应,多用于接种、致敏实验等。雄性 较雌性皮肤紧密,注射难度大。 ✓ 肌肉注射(i.m):较少应用 ✓ 腹腔注射(i.p): ✓ 静脉注射(i.v):一般采用尾静脉注射。小鼠尾 部背腹各有一根动脉,两侧各有一根静脉。
图 个体染色标记法
✓编号原则: 先左后右,从前到后。左前肢记为1号,
左侧腹部为2号,左后肢3号,头顶部为4号, 腰背部5号,尾基部6号,右前肢7号,右侧 腹部8号,右后肢9号。编号超过10时,可 使用两种不同颜色的溶液,把一种颜色作 为个位数,另一种为十位数。
六. 实验动物被毛的去除方法
1. 剪毛法 2. 拔毛法 3. 剃毛法 4. 脱毛法 常用的化学药品:硫化钡(BaS)、硫化钠 (NaS)、硫化钙(CaS)
图 小鼠腹腔注射
图 小鼠尾静脉注射
•大鼠的给药途径和方法
✓ 灌胃:左手按徒手固定方式固定大鼠,使大鼠伸开两 前肢,手掌握住大鼠背。方法与小鼠相同。
✓ 皮下注射:常选在左侧下腹部或后腿皮肤处,方 法同小鼠。
✓ 皮内注射:常选用背部脊柱两侧的皮肤,方法同 小鼠。
✓肌肉注射:一般选择股二头肌注射,但应 避免伤及坐骨神经,否则会导致后肢瘫痪