电化学发光免疫分析
电化学发光免疫分析法
免疫学检测历史演进
放射免疫检测（兴起于20世纪70年代，现 仍普遍使用于县级以上医院）； 酶联免疫检测（兴起于20世纪80年代，各 临床机构普遍使用）； 以化学发光为代表的光生物学标记及免疫 检测技术（20世纪90年代开始推广使用， 产品步入成长期）三个阶段。
免疫分析法 发光和化学发光 化学发光免疫分析法 电化学发光 电化学发光免疫分析法
化学发光免疫分析
化学发光免疫分析（ CLIA）分类
按分离方法不同分
微粒子化学发光免疫测定 磁颗粒化学发光免疫测定
化学发光免疫分析（ CLIA）分类
按发光剂不同分为
发光酶免疫测定（chemiluminescence enzyme immunoasssay， CLEIA ） 化学发光免疫测定技术 （chemiluminescence immunoassay， CLIA ） 电化学发光免疫测定技术（electro－ chemiluminescence immunoassay， ECLI ）
方法评价
利用氧化铁的磁性，使用电磁场分离结 合态和游离态，方便迅速，实现了精确 的全自动化； 标记物的再循环利用，使发光时间更长、 强度更高、易于测定。
ELIA优越性
高度敏感，可达pg／ml或pmol水平； 特异性强，重复性好，CV＜5％。 测定范围宽，可达7个数量级。 试剂稳定，无毒害，无污染，有效期长， 达数月甚至数年。 操作简单，耗时短，易于自动化。 在对环保很重视的国家，CLIA成了取代 RIA的首选方法。
免疫分析法 发光和化学发光 化学发光免疫分析法 电化学发光 电化学发光免疫分析法
电致化学发光（ECL)
电致化学发光 (ECL) 是通过在电极上施 加一定波形的电压或电流信号进行电解 反应的产物之间或与体系中共存组分反 应产生化学发光的现象。
电化学发光免疫分析的原理
电化学发光免疫分析的原理电化学发光免疫分析（ELISA）是一种流行的抗体检测技术，可以检测和测定抗体或抗原。
ELISA最初由发明者迪卡贝尔（Dica Bell）于1970年发明，以前称为发光免疫分析法或发光免疫比色法。
它可以快速准确地检测抗原或抗体在生物样品中的浓度。
ELISA技术的基本原理是：首先将特定的抗原和发光探针分别固定到水凝胶的微孔平板上，然后将待测样品加入微孔平板，抗原识别抗体或抗原与它结合，抗体和发光探针之间形成免疫复合物。
然后，抗体免疫复合物结合到抗原，使抗体免疫复合物和发光探针之间形成发光免疫复合物。
最后，将产生的发光免疫复合物可以在发光分析仪上读取，从而实现抗原检测目的。
ELISA技术的预处理过程是：首先将特异性抗原固定到微孔平板上，然后将抗原固定物体洗涤干净，洗涤后，将含有实验样品的溶液加入。
抗原和实验抗体在抗原上结合，产生免疫复合物。
接下来，将发光探针加入该免疫复合物，使免疫复合物和发光探针形成发光免疫复合物，以发光的方式检测体外抗原的浓度。
ELISA技术的优点是快速、准确、可重复，可以用来检测各种抗原的抗体，如霍乱抗原、疱疹病毒抗原、轮状病毒、肝炎抗原等。
ELISA 技术也可以用来研究抗体的特异性、可稳定性和稳定性，从而为研究抗原提供重要的理论基础。
ELISA技术也有一些缺点，如测定样品抗体或抗原的反应强度不够准确。
此外，ELISA技术的准确性受到实验参数的影响，如反应温度、反应时间，以及抗原和抗体的浓度和稀释比例等。
ELISA技术具有快速、可靠和可重复性等特性，是当今最常用的免疫学检测方法。
它不仅能用于抗原抗体检测，还经常被用于临床检测，用于诊断疾病，如癌症、HIV等。
ELISA技术对对医学和科学领域都具有重要的意义，它可以准确、快速地检测抗原或抗体，为疾病的早期诊断和治疗提供有效的支持。
总之，电化学发光免疫分析（ELISA）技术是一种常见的抗体检测技术，也是当今最常用的免疫学检测方法，可以根据其特定的技术原理来进行抗原检测。
发光免疫的种类及特点
发光免疫的种类及特点发光免疫是利用一些特定的发光物质来标记抗原、抗体，这些物质吸收能量后能使其分子进入激发态。
当处于激发态的分子退回到基态时以光子的形式释放能量，从而产生可见或不可见光，然后通过对光的强度和属性进行检测来判断被测物的量[1]。
根据发光物质的不同，发光免疫分析可分为化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、生物发光酶免疫分析、微粒子化学发光免疫分析和电化学发光免疫分析。
1 化学发光免疫分析化学发光免疫分析(CLIA)是以化学发光底物直接标记抗原或抗体的免疫测定方法，常用的标记发光剂有鲁米诺、异鲁米诺及吖啶酯类。
80年代Pateln等采用吖啶酯为发光剂，改进了标记方法，在反应过程中不需催化剂，只要在碱性环境中就可进行，从而提高了测定的灵敏度[1]。
吖啶酯衍生物有几种分子结构，它们结构中都有共同的吖啶环，通过启动发光剂，在过氧化氢作用下，生成电子激发态的中间体N－甲基吖啶酮，当其回到基态时发出光子(hT)，激发波长395nm，发射光波长430nm，其发光为快速闪烁发光，其检测灵敏度可以达到8×10－19mool／I，。
应用吖啶酯类化合物可以标记多抗、单抗，进一步制备固相试管或微球，可以应用于竞争法分析，也可用于夹心法进行免疫化学发光分析，这一领域里全自动分析仪发展很快，目前已有多家以吖啶酯为标志物的全自动免疫分析系统，每小时可以完成数百个测试，很快在临床得到了推广应用。
2 生物发光酶免疫分析生物发光是化学发光的一个特殊类型，它是生命活性生物体所产生的发光现象，发光所需的激光来自生物体内的酶促反应，催化此类反应的酶称为荧光素酶。
生物发光包括萤火虫生物和细菌生物发光，前者发光反应需ATP的参与，故萤火虫生物发光又称ATP依赖性生物发光。
ATP依赖性生物发光反应中，萤火虫荧光素和荧光素酶在ATP、Mg2+和O2存在下可发光，反应式为：ATP+荧光素+荧光素酶→腺苷基荧光素。
腺苷基荧光素+O2→腺苷基氧化荧光素+光子[2]。
电化学发光免疫测定的原理
电化学发光免疫测定的原理电化学发光免疫测定（Electrochemiluminescence Immunoassay，ECLIA）是一种基于电化学和发光原理的免疫测定技术，广泛应用于临床诊断、生物学研究和药物开发领域。
它结合了电化学技术和发光技术的优势，具有高灵敏度、高特异性和广泛的应用范围。
ECLIA的原理基于化学发光反应和免疫学分析原理。
在ECLIA 中，首先需要将待测物与特异性抗体结合，形成抗原-抗体复合物。
然后，将该复合物与标记有发光物质的检测抗体结合，形成"夹心"复合物。
接下来，将这个复合物引入电化学池中，通过施加电压来激发发光物质，产生发光信号。
发光信号的强度与待测物的浓度成正比，从而可以定量检测待测物的浓度。
ECLIA的关键在于发光物质的选择和电化学池的设计。
常用的发光物质包括例子和噻吩类化合物，它们具有较高的发光效率和稳定性。
电化学池通常由工作电极和对电极组成，工作电极上涂覆有发光物质，而对电极用于提供电化学反应所需的电子。
当施加电压时，工作电极上的发光物质被激发，产生发光信号，通过检测这个信号的强度，就可以确定待测物的浓度。
ECLIA技术不仅可以用于检测生物标志物、药物和激素等生物分子，还可以用于检测病原体、肿瘤标志物等，具有广泛的临床应用前景。
同时，ECLIA还具有高度自动化、高通量和快速检测的优势，可以满足临床诊断和科研实验室对大批样本快速、准确检测的需求。
总之，电化学发光免疫测定技术以其高灵敏度、高特异性和广泛的应用范围，成为了现代生物医学领域中不可或缺的重要工具，为疾病诊断和治疗提供了有力支持。
随着技术的不断发展和完善，相信ECLIA技术将在未来发挥更加重要的作用。
电化学发光免疫分析方法及其在医学中的应用研究
电化学发光免疫分析方法及其在医学中的应用研究目的：分析电化学发光免疫分析的方法和医学中的应用情况。
方法：对AFP 含量进行电化学发光免疫分析与放射免疫分析，做出线性评价、精密度评价与回收实验，并进行对比，运用两种方法对60例患者血清标本的AFP含量进行平行检测，然后进行相关性分析。
结果：电化学发光免疫分析法的重复率明显优于放射免疫分析。
电化学发光免疫分析法的回收率明显优于放射免疫分析。
数据差异具有统计学意义（P＜0.05）。
结论：电化学发光免疫检测血清甲胎蛋白的精确度与准确性都要优于放射免疫分析法，值得临床推广与运用。
标签：电化学发光免疫；临床运用；放射免疫；检验电化学发光免疫分析出现于自20世纪90年代，是一类化学发光免疫分析技术，集纳米微粒子技术、电子发光技术、抗原-抗体免疫反应、生物素-亲和素系统以及电磁场分离整合设计的自动化标记免疫分析系统，结合了电化学发光与免疫测定，具有化学发光与电化学两个过程，磁珠微球当做固相载体，发光物质为三氯联吡啶钌[Ru（bpy）3]2+，电极进行激发，三丙胺参与循环反应，稳定快速的发光，检测的结果可靠、稳定，具有的准确度与精密度要高于酶联免疫法[1]。
发光检测灵敏度高，不具有人为操作误差的影响。
1材料与方法1.1材料选取60例患者血清标本，18份标本血清甲胎蛋白浓度正常，42份标本血清甲胎蛋白的浓度超出正常的范围。
通过Roche Elecsys2010全自动化学发光免疫分析仪器与SN-697型自动双探头放射免疫γ计数器进行检验。
1.2方法放射免疫分析法运用甲胎蛋白宽范围放射免疫分析测定盒，电化学发光免疫分析运用的检测试剂为Elecsys2010配套AFP定量检测试剂盒，按照试剂说明书进行检测操作。
2结果2.1 通过NCCLS精密度评价方案，运用电化学发光免疫分析与放射免疫分析法对高浓度、中浓度、低浓度的血清甲胎蛋白质控血清作重复性实验。
实验结果显示，电化学发光免疫分析与放射免疫分析法都具有较好的重复性，而电化学发光免疫分析的CV值对比放射免疫分析法相对较小。
电化学发光免疫分析法
化学发光免疫分析
Chemiluminescence immunoassay (CLIA)
• 化学发光分析----根据化学发光反应在某一时刻的发光强 度或反应的发光总量来确定反应中相应组分含量的分析方 法，成为化学发光分析。
• 化学发光免疫分析----是集灵敏的化学发光技术和特异的 抗原抗体免疫测定于一体的检测技术。
• 化学发光免疫分析的特点：灵敏度高、特异性高、分离简 便、快速、试剂无毒、安全稳定、可自动化。
化学发光免疫技术的类型
按发光剂不同分为
1. 发光酶免疫测定（Chemiluminescence enzyme immunpassay CLEIA）
2. 化学发光免疫测定技术（Chemiluminescence immunoassay CLIA）
活性。
酶1,促酶反促应反的应发的光发底物光底物
• 是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物 • CLEIA中常用的酶有HRP和AP • HRP的发光底物有鲁米诺、对一羟基苯乙酸 • AP的发光底物有AMPPD、4—MUP（荧光底物） 特点：可做标记物，也可以做过氧化物酶的底物
1.鲁鲁米米诺诺
对一羟基苯乙酸（HPA）
进行电解反应的产物之间或与体系中共存组分反应产生化 学发光的现象. 它包含了电化学和化学发光两个过程.
ECL和CL的区别在于:ECL是电启动发光反应,而CL是通 过化合物混合启动发光反应,因此ECL反应便于精确控制, 具有灵活性.
电化学发光剂
三联吡啶钌的特点
ECL分析中采用三联吡啶钌作为标记物，其活化衍生物是 三联吡啶钌+N羟基琥珀酸胺脂（NHS），该衍生物具有水 溶性，且高度稳定，保证电化学发光反应的高效和稳定， 而且避免了本底噪声的干扰。
电化学发光免疫分析的原理
电化学发光免疫分析的原理化学发光（Electrochemiluminescence，ECL）免疫分析技术属于毗邻双重抗原识别（sandwich）免疫分析技术之一，它是一种高敏感、高灵敏度和自动化的免疫分析方法，它可以通过细胞内标记的抗原分子检测活性过程中的特异性结合反应来测定抗体和抗原的相互作用，从而准确可靠地测定抗原的存在量及其水平。
由于它具有极高的灵敏度，可以在超低浓度的抗原水平上得到检测结果，因此，它在免疫检测方面受到越来越多的关注。
在这篇文章中，我们将探讨一下电化学发光免疫分析的原理以及其在实际应用中的优势。
电化学发光免疫分析原理是这样的：首先，将抗原和特异抗体混合，其中抗原与抗体之间形成特异性双重抗原识别复合物；其次，在上清液中加入发光标记的抗体，此抗体与双重受体复合物形成特异性三重抗原识别复合物；最后，将上清液接触到电极上，将产生的离子流动到电位活化的族金属标记的抗体上，使抗体电极活化，产生发光反应，从而测定抗原的存在量。
电化学发光免疫分析具有诸多优势，首先它具有极高的灵敏度。
它可以检测非常低浓度的抗原，其灵敏度比传统的比色测定法要高出3到4个数量级，因此在检测低抗原水平时可以节省大量时间；其次，它操作简单快速，实验步骤短暂，耗时比其他免疫分析技术短；第三，它能够高效、安全地检测抗原，准确可靠，且可视化的检测过程具有很强的稳定性和可重复性。
电化学发光免疫分析技术已广泛用于医学、生物、食品安全和环境监测等领域。
例如，它可用于检测血清中癌抗原、血清素、抗体、病毒抗原等；它可以用于检测食物中的变质抗原、有毒物质、细菌等；它可以用于环境样品中有毒物质的检测，如重金属、氯代烃等有害物质。
以上就是电化学发光免疫分析的原理以及它在实际应用中的优势。
它的灵敏度极高，操作快速，可靠精准，能够准确有效地检测抗原，被广泛应用于许多领域，是近年来进行免疫检测的重要技术手段。
电化学发光免疫分析法课件
通过实验技巧的分享，帮助读者更好地掌握电化学发光免 疫分析法的实验操作和优化方法。
案例三：疑难问题解答
案例名称
解决电化学发光免疫分析法中的常见问题
案例描述
列举一些在电化学发光免疫分析法中常见的疑难问题，如信号干扰、非特异性吸附等，并 提供相应的解决方案和注意事项。
案例总结
通过疑难问题解答，帮助读者更好地规避实验中可能出现的问题，提高实验的准确性和可 靠性。
03
实验步骤
样本准备
样本采集
采集血液、尿液等生物样本，确 保样本质量和代表性。
样本处理
对样本进行离心、分离、稀释等 操作，以去除杂质并获得纯度较 高的待测组分。
加样和反应
加样
将处理后的样本加入到电化学发光免 疫分析试剂中，确保加样量准确。
反应条件
控制温度、pH值等反应条件，确保反 应顺利进行。
电化学发光免疫分析法PPT课件
目录
• 引言 • 工作原理 • 实验步骤 • 仪器与试剂 • 结果解读 • 应用与优势 • 案例分析
01
引言
目的和背景
01
介绍电化学发光免疫分析法的目 的和背景，包括其在医学、生物 、环境等领域的应用。
02
分析电化学发光免疫分析法的发 展历程，以及当前的研究热点和 挑战。
定期对仪器进行校准和维护，保 证检测结果的准确性和可靠性。
05
结果解读
结果判读方法
确定参考值范围
根据不同年龄、性别和生理状态 ，确定各项指标的正常参考值范
围。
观察指标变化趋势
注意各项指标的变化趋势，如逐 渐升高或降低，可能提示某种疾
病或生理变化。
综合分析
结合其他检查结果和患者的临床 表现，进行综合分析，以得出准
电化学发光免疫分析的原理
电化学发光免疫分析的原理电化学发光免疫分析（electrochemiluminescenceimmunoassay，简称ECLIA）是一种化学生物分析技术，它以免疫反应为基础，利用电化学发光（Electrochemiluminescence，简称ECL）技术，解决微量分析的检测难题。
ECLIA技术实现快速、灵敏、准确的检测方法，可用于动物检查、医学诊断、疾病监测及研究，建立了一种新型的检测技术，在生命科学、医学和其他应用领域得到广泛的应用。
ECLIA原理ECLIA技术的基本原理是利用免疫反应检测目标物质的含量，再利用电化学发光技术检测反应产物的含量，从而获取目标物质的含量。
ECLIA技术包括免疫反应、电化学发光以及信号轴测定等步骤。
1.免疫反应：利用目标分子本身的特异性，引发抗体与抗原的特异性复合反应，起活性抗体的作用，形成抗体-抗原复合物，从而检测特定的抗原。
2.电化学发光：电化学发光的原理是在特定的pH值和电位下，特定的发光试剂如Ru(bpy)2（bpy为2，2‘-联苯醚磺酸铆）会被电子传递至量子化发射态，从而发出可见光。
3.信号轴测定：检测样品中抗原含量，可测定抗原-抗体复合物的信号特性，从而估算样品中抗原含量。
ECLIA技术优势ECLIA技术具有灵敏度高、动物耗材低、重复性好、简便快捷的特点，其灵敏度可达到年龄检测、病原体检测和抗体检测等实验的要求，而且它可以分析极微量样品，进而提高实验效率，减少耗材。
ECLIA技术应用1.用于分子诊断：ECLIA技术可以独立检测多种抗原，有助于比较人群血液中疾病抗原与健康组织抗原的分布，从而提供疾病早期筛查、防治及诊断指导资料。
2.用于疾病检测：ECLIA技术可以检测抗原的含量，从而可以较准确的检测疾病的携带者，并可以实现快速准确的诊断，为临床医学提供技术支持。
3.用于农业检测：ECLIA技术可以分析动物细胞、植物细胞或果蔬中抗原含量，从而可以帮助农业科学家快速准确地检测植物病原物、动物抗体及抗原等指标，及时发现病害及其产生的拮抗作用，实现农业生产的质量控制。
电化学发光免疫分析技术
电化学发光免疫分析
测量池中3个反应步 骤
结合相/游离相的分离 ECL反应 释放微粒子清洗测量池
电化学发光免疫分析测量池示意图
电化学发光免疫分析
结合相/游离相的分离
➢吸入包被了抗原抗体复合物的 微粒子
➢ 激活磁铁（为避免干扰，测定 开始前磁铁不被激活）
➢通过电极上的磁铁捕获抗原抗 体复合物
➢ 吸入TPA-ProCell冲洗工作电 极上的微粒
电化学发光免疫分析特点
高灵敏度，检测下限达1pmol 线形范围宽，达7个数量级 快速，出第一个结果的时间仅需数分钟 应用范围广，可以同样的灵敏度和线性范围 检测各种物质，包括DNA 试剂稳定，无污染和衰变问题 自动化程度高
➢ 发射出的光在短时间内 (0.20-0.60 sec.)达到峰值
➢ 光电倍增管检测到ECL信 号并转换成电子信号
➢ 相应的信号值用于计算出 结果
电化学发光免疫分析
释放微粒子与清洗
➢测量池中吸入清洗液
➢ 将微粒子从电极上冲 洗掉
➢ 吸入TPA-ProCell冲 洗测量池表面
➢ 测量池可进行下一次 的测定
电化学发光免疫分析技术
电化学发光免疫分析技术
电化学发光免疫分析原理 电化学发光免疫分析过程 电化学发光免疫分析特点
电化学发光免疫分析原理
电化学发光免疫分析 （ellectrochemiluminescence immunoassay,ECLIA） 是以电化学发光剂三联吡啶钌标记
抗体（抗原），以三丙胺（TPA）为 电子供体，在电场中因电子转移而发 生特异性化学发光反应
电化学发光免疫分析
反应时相－发光
ECL反应
➢ 钌复合物也释放一个电 子，氧化形成激发态的3 价的三联吡啶钌，接着和 激发态的TPA自由基发生 化学发光反应,发射一个 波长620nm的光子。
常见化学发光免疫分析技术比较
常见化学发光免疫分析技术比较1、化学发光免疫分析化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA），英音:［，kemi，lju：mi’nesəns] ［，imju：nəuə’sei]是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。
是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。
CLIA是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。
是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。
1.1、化学发光免疫分析原理化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。
化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子（hv) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。
免疫反应系统是将发光物质（在反应剂激发下生成激发态中间体）直接标记在抗原（化学发光免疫分析）或抗体（免疫化学发光分析) 上，或酶作用于发光底物.1。
2、化学发光免疫分析类型化学发光免疫分析法以标记方法的不同而分为两种:（1)化学发光标记免疫分析法；（2）酶标记、以化学发光底物作信号试剂的化学发光酶免疫分析法1。
2.1化学发光标记免疫分析化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析（CL IA ）, 是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法.常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物-acridiniumester (AE) ，是有效的发光标记物,其通过起动发光试剂(NaOH-H2O2）作用而发光，强烈的直接发光在一秒钟内完成，为快速的闪烁发光。
电化学发光免疫分析的原理
电化学发光免疫分析的原理
电化学发光免疫分析技术（Electrochemiluminescence Immunoassay，简称ECLIA）是一种新的生物分析技术，它利用生物反应物和特定的抗体来检测分子，从而对检测物有着准确的测定。
ECLIA的基本原理是，将待测物和夹带特异性抗体的过滤管体中的反应液一起放入体外，然后再加入电催化剂以及分子活性物质（如碳酸氢钠），在外部加入电场来促进反应物和抗体之间的免疫反应，即反应物与抗体结合后发出电化学发光。
与其他免疫分析方法相比，ECLIA具有更高的灵敏度和准确度。
ECLIA的优势有：（1）具有极佳的灵敏度（亚拉芬斯），可以检测出极低浓度的免疫物质；（2）反应过程十分快捷，几十秒内即可完成；（3）测量过程简便，不需要复杂的仪器和设备；（4）结果可以实时观察和记录，减少了人工把柄；（5）可以实现多重反应，可以同时检测多种免疫物质；（6）可以宽泛应用于血液、尿液、细胞液等多种样本中的病毒抗体的检测，对于应用研究和检验检测有重要的作用。
以上就是ECLIA技术的原理和优势，它在生物学研究、病毒检测以及其他方面都非常有用，受到了广泛应用。
随着实验技术的发展，ECLIA技术被不断改进和完善，也会被用于更多的生物医学检测工作中。
电化学发光免疫分析的特点是发光物质可以循环发光
电化学发光免疫分析的特点是发光物质可以循环发光介绍
电化学发光免疫分析（Electrochemiluminescence Immunoassay, ECLIA）是一
种新兴的高灵敏性的无标记免疫检测技术，由发光物质与荧光抗体组合而成。
电化学发光免疫分析主要通过供体发击素（horseradish peroxidase）与适当的
氧酶抑制剂（hydrogen peroxide）配合形成受体特异性发光物质，从而诊断检测样
品特定抗原的存在或否存在的技术。
这种技术的特殊之处在于，发光物质可以循环发光，使得分析的结果更加可靠、稳定和准确。
电化学发光免疫分析的分析过程无需用之前的放射性探针、标记物和酶类标记，通常只需要一种简单的荧光共聚焦物质，具备了诊断检测样品特定抗原的特异性及灵敏度。
它利用发击素-过氧化物体系，当受体抗原结合到发光物质上时，形成发
光物质-促发击素（horseradish peroxidase-luminol）复合物，产生发光现象。
总之，电化学发光免疫分析具有高灵敏度、低污染、操作简单、分析准确，实现了细胞和分子检测的高灵敏性和准确性，在许多生物分子诊断的领域中具有广泛的应用价值。
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电化学发光免疫分析是一种在电极表面由电化学引发的异性化学发光反应，是电化学和化学
发光两个过程的完美结合。
电化学发光免疫测定是电化学发光和免疫测定相结合的产物，是
目前非常先进的标记免疫测定技术。
电化学发光技术主要技术：
1. 三联吡啶钌标记技术；
（1）循环使用，不会被消耗，电极表面的氧化还原反应循环进行，测定信号无限循环放大，检测灵敏度大大提高
（2）其盐是很稳定的水溶性化合物，试剂的稳定性好，效期长
（3）N 羟基琥珀酰胺（ NHS ）酯能与蛋白质赖氨酸的ε-氨基或核酸上的氨基形成稳定的酰
胺键，应用广泛，宽广的检测菜单
（4）惰性元素，非放射性元素，稳定
（5） [Ru(bpy)32+]和TPA ，无电压的情况非常稳定，确保反应结果的准确性
2. 链霉亲和素—生物素技术；
（1）特异性强且结合紧密，灵敏度高
（2）一分子SA可与四分子B相结合，增大了抗体结合量，灵敏度高
3. 磁性微粒子技术；
（1）反应面积大，结合量增大
（2）反应在近乎液相中进行，信号均匀精确
（3）分离方便迅速，无背景干扰
4. 电启动的化学发光反应。
（1）实现了结合相和游离相的完全自动化分离
（2）彻底清洗，反应易于控制
电化学发光技术特点：试剂稳定、测量范围宽，灵敏度高、特异性优异、检测菜单丰富、准
确性好，精密度高、操作便捷；。