宿晓红葡萄单芽茎段组织培养研究

吴伟民等：宿晓红葡萄单芽茎段组织培养研究

复２次，１周后统计污染率。

１．５单芽茎段离体培养芽萌发诱导培养基的筛选

基本培养基和激素组成分别为：（１）ＭＳ＋１

ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ；（２）Ｉ／２ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ；（３）１／２

ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ１ＡＡ；（４）１／２ＭＳ＋１

ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．１ｍｓ／ＬＩＡＡ；（５）１／２ＭＳ＋０．５

ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ；（６）１／２ＭＳ＋２００

ｍｇ／ＬＫＣｌ＋０．５ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ。所

有培养基均附加３０ｇ／Ｌ蔗糖和７ｇ／Ｌ琼脂，ｐＨ值５．８。接种培养２５ｄ后观察单芽茎段生长发育状况，统计芽萌发率，筛选适宜的芽萌发诱导培养基。１．６根诱导培养基的筛选

将在芽萌发诱导培养基上形成的无菌新梢切割成长度为０．３～０．５ｃｍ的单芽茎段，接种在根诱导培养基上进行继代培养，供试验的基本培养基和激素组成分别为：Ａ．ＭＳ＋１ｍｇ／ＬＩＢＡ；Ｂ．１／２ＭＳ＋１ｍｇ／ＬＩＢＡ：Ｃ．１／２ＭＳ＋２ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．０５ｍｇ／ＬＩＡＡ：Ｄ．１／２ＭＳ＋１ｍｓ／ＬＩＢＡ＋０．０５ｎａｇ／ＬＩＡＡ：Ｅ．１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．０５ｍｇ／ＬＩＡＡ。所有培养基均附加２０ｇ／Ｌ蔗糖和７ｇ／Ｌ琼脂，ｐＨ值５．８。接种培养２５ｄ后观察单芽茎段生长发育状况，统计生根率，筛选适宜的根诱导培养基。

１．７培养条件

培养室温度２５℃左右，光照强度２０００ｉｘ，光照时间１４ｈ／ｄ。

２结果与分析

２．１冬季体眠枝水培半本质化新梢的获得

双芽枝段扦插在添加１ｍｇ／ＬＮＡＡ的水溶液中培养１周后芽开始萌动；１０ｄ后生出绿叶，１５ｄ时形成新梢（图１），４５ｄ左右当新梢长至１５—２０ｃｍ时停止生长。经随机调查，６０个双芽枝段中有４５个萌发形成新梢，水培芽萌发率达７５％。所形成的新梢处于半木质化状态，可作为本试验材料。

２．２不同来源单芽茎段外植体接种后污染率的比较

虽然带芽茎段在葡萄组织培养中是理想的外植体，但消毒比较困难，在一定程度上制约了带芽茎段的利用ｏ“。本研究采用相同灭菌方法对冬季休眠枝水培新梢与夏季新梢去叶枝段表面消毒，接种１周后进行污染率比较，发现前者污染率较低（１４％），后者污染率较高（３２％），前者明显低于后者。这可能因为前者是用冬季体眠枝经自来水冲

囤１宿晓红葡萄休喉技水培冬芽萌发形成新梢

洗后再在相对比较清洁的室内环境中生长，带菌量少，而后者采集于外界环境适合杂菌滋生的生长季节，带菌量多。

２．３不同来源单芽茎段外植体和培养基组成对芽萌发诱导的影响

以ＭＳ、１／２ＭＳ和１／２ＭＳ＋２００ｎｌＩｇ／ＬＫＣｌ为基本培养基，以不同浓度的６一ＢＡ和ＩＡＡ进行激素组合，配置成６种培养基，分别对宿晓红葡萄冬季休眠枝水培新梢单芽茎段和夏季薪梢单芽茎段进行芽萌发诱导试验，结果表明：在６种培养基上，冬季休眠枝水培新梢单芽茎段和夏季新梢单芽茎段培养２５ｄ后，均有单芽茎段芽萌发（图２）。从表１可见，在

图２宿晓红葡萄扑植体在适宜的芽诱导培养基上葫发出芽

表１不同培养基对宿晓红葡萄两种来源

的单芽茎段外植体芽葫发率的影响

外植体

篙挚竺型塑苎型兰！翌夏季薪梢单芽茎段

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江苏农业科学２００７年第５期

同一释臻莽基土冬攀体眠棱承璐薪携单势纂段芽翡

萌发率高于夏季新梢。培养基中盐浓度对宿晓红葡

萄单芽豢段芽的萌发有影响．以低盐浓度、１／２ＭＳ

秀基本薅募墓效暴鞍驽。６一ＢＡ翻ＩＡＡ不嗣浓震

间的组龠效应表明，单独使用６一ＢＡ时．芽的萌发

率较低，加入ＩＡＡ对芽的萌发有促进作用，但较高

浓度６一ＢＡ对芽的蕊发寿轻徽挪裁佞弱，篌用０。５

ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ和０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ组合时，擎势茎段芽

的萌发率最高。因此，宿晓红葡萄单芽茎段离体培养芽夔发诱导的遣嶷培养基是１／２ＭＳ＋０，５ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０。５ｍｓ／ＬＩＡＡ＋３０∥Ｌ蔗糖＋７∥Ｌ琼脂。２．４苇同培养基时无菌新捎单芽茎段生根的影响当硝种来源的荤芽茎段外植体在芽萌发初代培养基主诱导３０ｄ懿，游形成簿戈蓬精捂甥裁裁长度为０．３—０．５ｃｍ的单芽茎段，分别继代接种在根诱导培养然上进行生根培养，基率培养基为ＭＳ和１／２ＭＳ＋辫趣不弱浓寝翁ＩＢＡ秘ＩＡＡ，缝象轰骥，两种无菌新梢单芽鉴段在附加不同浓度酌ｔＢＡ、ＩＡＡ的ＭＳ溅Ｉ／２ＭＳ培养基上均谢单芽茎段生根（图３），并影成完整棱拣（巨４），且在同一种壤棼基上生擐率蠢明显差异。从表２可笕，ＭＳ和１／２ＭＳ均可作为根诱导的基本培养基。ＩＢＡ对于单芽蕊段生根有效，假］ＢＡ浓度以１ｍｇ／Ｌ为寂，附加ＩＡＡ可促进壤酶发生。敝ｔ／２ＭＳ基本培荐基秘１ｍｓ／ＬＩＢＡ、０．０５ｍｇ／Ｌ１ＡＡ的组合生根率最高，可作为宿晓红葡萄无随新梢单芽鉴段根两导的适宜培养挺。

国３宿嶙耋Ｉ葡萄外植体在适宜的根诱导

焙葬蒌上形或新撤

３讨论

在植物组织培养中，选择裔适的外梢体是组织楚葬或鞠与否瓣美壤。在蕺莓组织离体蝰棼静莛繁殖中使用较多且较理想的外横体材料是单芽茎段，但目前葡萄单芽茎段的来源主簧是大田葡萄树上夏季生长甥的半本质他耨梢，也蠢来源子室内艋栽的

固４宿跷红葡萄单芽茎段培养聪成完整植株

襄２罩同墙彝蕊对宿囊红藩蒋两种来豫魏

无菌新梢戢芽茎段生撤率的影响

冬季休眠棱水培新梢单芽茎段夏季新梢啭芽嫠段壤葬基——…——一编号接静数童擐数生擞率搂转鼗生攫数生壤率（个）Ｃ个）（％）（个）（个）（％）Ａ２０５２５２０６３０

Ｂ２０７３５２０１０５０

ｅ２０３１５嬲５２５

Ｄ２０｛２６０２０ｔ０５０

Ｅ２０５２５２０７３５

葡萄檀橡”ｊ，利甩葡薄冬季傣瞩技水培觏峭的较少。本掰究设叛宿稳红葡萄为试验晶静，蹴较了冬季休眠枝水培新梢的单芽茎段外植体与夏攀新梢的单芽茎段外植体离体培养的效果，结果表明前者在接静污染搴秘初栽培莽芽蔫轰率方簿蕊予翁者，可作为宿晓红葡萄离体培养较好的铷始外植体材料，同时可通过冷藏或沙藏冬季休眠枝的方法，打破外棱捧取专耋瓣季节缝毅髑。

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