土壤中磷的测定(全磷、速效磷)
土壤速效磷含量的测定
实训十（0.5mol/LNaHCO3浸提-钼锑抗比色法）一、目的要求土壤速效磷也称土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是判断土壤供磷能力的一项重要指标。
测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷肥提供理论依据。
实验要求了解测定土壤速效磷的基本原理，掌握其测定方法。
二、方法原理用pH8.5的0.5mol/L的NaHCO3作浸提剂处理土壤，由于碳酸根的存在抑制了土壤中的碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca2+浓度，乡音的提高了3+3+磷酸钙的溶解度。
由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe和Al的活性，有利-3-2-于磷酸铁和磷酸铝的提取。
此外，溶液中存在着OH、HCO、CO3等阴离子，也有利于吸附态磷的置换。
用NaHCO3作浸提剂提取的有效磷与作物吸收磷有良好的相关性，其适应范围也广泛。
浸出液中的磷，在一定的酸度下，用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比，因此，可以用比色法测定其含量。
三、主要仪器震荡机、分光光度计或光电比色计、天平（0.01g）、三角瓶（250ml）、容量瓶（50ml）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10ml）。
四、试剂配制1.0.5mol/L的NaHCO3（pH8.5）浸提液称取化学纯NaHCO342.0g溶于800ml蒸馏水中，以4mol/L NaOH溶液调节pH至8.5（用pH计测定），然后稀释至1000ml，保存在试剂瓶中。
如果贮存期超过1个月，是用时应重新调整pH。
2.无磷活性炭将会活性炭先用1：1（V/V）的盐酸浸泡过夜，在布氏漏斗-上抽滤，用蒸馏水冲洗多次至无Cl为止，在用0.5mol/L NaHCO3溶液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽NaHCO3，检查至无磷为止，烘干备用。
3.7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液在1000ml烧杯中加入400ml蒸馏水，蒋烧杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3ml浓硫酸（分析纯），并不断搅拌，冷却至室温。
土壤速效磷的测定
土壤速效磷的测定土壤中的磷大部分呈磷酸铁、磷酸铝、磷酸钙等难溶状态，难被植物直接吸收利用，而植物只能吸收利用水溶性及弱酸溶性的速效磷酸盐。
因此，分析土壤速效磷，可了解土壤有效磷的供应情况，并可作为合理施用磷肥的参考。
一、实验目的1、了解土壤速效磷的测定原理。
2、初步掌握测定土壤速效磷的主要方法和步骤。
3、加深对课堂所学知识的理解。
二、实验原理测定土壤速效磷的方法很多，由于浸提剂的不同，其结果也不一致。
浸提剂的选择主要是根据各种土壤性质而定。
在一般情况下，中性和石灰性土壤采用碳酸氢钠法浸提；酸性水稻土采用。
』板盐酸浸提；旱地酸性土壤采用盐酸一一氟化镂法浸提。
在酸性土壤中，速效磷可用酸性氟化镂提取，形成氟铝化镂和氟铁化镂络合物，少量的钙离子则生成氟化镂沉淀，磷酸根离子则被释放到浸提剂溶液中，其反应式如下：3NH4+3HF^A1PO4→H y PO4+(NH4)3A1F^3NH4F+3HF+FePO4→H3PO4+CNH4)3FeF6在一定酸度下，正磷酸根与铝酸镂及三价睇离子共同形成磷睇铝杂聚络合物，其组成中P：Sb：Mo的原子比约为1：2：12。
这种杂聚络合物在10~60。
C时甚易被抗坏血酸还原成磷铝蓝（〃"（吸2。
3）（欣›2。
7）3］），蓝色十分稳定，蓝色的深度与磷的含量成正比关系，在一定浓度范围内服从比尔定律。
测磷（P）范围为0.1~1Oppmo比色酸度控制在0.5±0.1mo∕∙1O三、实验试剂（1）0.03ZnH1T氟化钱一0.025mo∕∙1盐酸溶液：称取1ug分析纯氟化镂溶于800/??ZZ蒸储水中，加ImO11T盐酸25m1,然后稀释至IoOo也，贮于塑料瓶中。
（2）硼酸固体（分析纯）。
（3）磷（P）标准溶液：准确称取45P烘干4~8人的分析纯磷酸二氢钾0.2197g,用少量蒸储水溶解后，洗入IOOO"容量瓶中，稀释至刻度并充分摇匀，此溶液为含磷（P）50〃刖标准液。
土壤速效磷含量的测定
实训十0.5mol/LNaHCO3 浸提-钼锑抗比色法）一、目的要求土壤速效磷也称土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是判断土壤供磷能力的一项重要指标。
测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷肥提供理论依据。
实验要求了解测定土壤速效磷的基本原理，掌握其测定方法。
二、方法原理用pH8.5 的0.5mol/L 的NaHCO3 作浸提剂处理土壤，由于碳酸根的存在抑制了土壤中的碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca2+浓度，乡音的提高了3+3+磷酸钙的溶解度。
由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe和Al的活性，有利-3-2-于磷酸铁和磷酸铝的提取。
此外，溶液中存在着OH、HCO、CO3 等阴离子，也有利于吸附态磷的置换。
用NaHCO3 作浸提剂提取的有效磷与作物吸收磷有良好的相关性，其适应范围也广泛。
浸出液中的磷，在一定的酸度下，用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比，因此，可以用比色法测定其含量。
三、主要仪器震荡机、分光光度计或光电比色计、天平（O.OIg）、三角瓶（250ml）、容量瓶（50ml）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10ml）。
四、试剂配制1.0.5mol/L 的NaHCO3 （pH8.5）浸提液称取化学纯NaHCO342.0g 溶于800ml蒸馏水中，以4mol/L NaOH溶液调节pH至8.5 （用pH计测定），然后稀释至1000ml，保存在试剂瓶中。
如果贮存期超过1个月，是用时应重新调整pH。
2•无磷活性炭将会活性炭先用1:1（V/V ）的盐酸浸泡过夜，在布氏漏斗- 上抽滤，用蒸馏水冲洗多次至无Cl为止，在用0.5mol/L NaHCO3 溶液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽NaHCO 3，检查至无磷为止，烘干备用。
3.7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液在1000ml烧杯中加入400ml蒸馏水，蒋烧杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3ml 浓硫酸（分析纯），并不断搅拌，冷却至室温。
土壤有效磷有机磷全磷测定方法
土壤有效磷有机磷全磷测定方法土壤全磷测定方法HClO4—H2SO4法待测液制备：1.准确称取通过100目筛子的风干土样0.2500—0.500g，置于50ml凯式瓶（或者50ml消化管）中2.以少量水湿润后，加入浓硫酸4ml,摇匀后，再加70-72%高氯酸1ml,摇匀，瓶口上加一个小漏斗，通风厨静置24小时3.置于消化炉中进行3小时消煮，待溶液澄清透明即可。
4.将冷却后的消化液转移入100ml容量瓶中（容量瓶中预先盛水20-30ml），按少量多次的原则用水冲洗消化管，轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，加水定容，静置过夜5.次日小心吸取上层澄清液进行磷的测定。
6.样品空白溶液制备：在样品分解的同时做一个空白实验，即不加土样而加同样量的浓硫酸和高氯酸，与样品进行相同处理土壤速效磷测定方法M3浸提法M3溶液配置(1L)：乙酸：11.5 ml浓硝酸：0.82 ml硝酸铵：20 g氟化铵：0.5556gEDTA：0.2922g基本步骤：1.称取3g过2mm筛子风干土样于50ml聚已烯离心管中2.加入30mlM3浸提液，置于振荡机中振荡5min，振荡速度为200转，温度25℃3.置于离心机中离心，离心速度为8000转/min,温度为25℃，如溶液颜色很深，在离心前加入一定量的活性炭脱色4.用无磷滤纸过滤5.澄清液进行磷的测定。
6.样品空白溶液制备：即不加土样而加同样量M3溶液，与样品进行同样处理。
土壤有机磷含量测定（灼烧法）0.1M硫酸溶液配置：取6ml浓硫酸定容至1L，配置方法浓硫酸缓慢加入水中，最后定容至1000mL 的容量瓶中。
基本步骤：1.准确称取过100目筛子的风干土壤样品0.4000g置于15ml瓷坩埚中2.置于550℃马弗炉中灼烧1小时，取出冷却3.用40ml0.1M硫酸溶液将土样洗入聚已烯离心管中4.摇匀后将离心管置于40℃的烘箱中一个小时5.取出冷却至室温，置于离心机中离心5min，转速8000转/min,温度25℃6.用无磷滤纸过滤7.澄清液用于磷的测定8.称取0.4000g土样于聚已烯离心管中，加入40ml0.1M硫酸溶液，其他步骤同上，测定未灼烧土壤样品浸提液中磷的含量。
土壤中速效磷的测定
实验七土壤中速效磷的测定一、实验目的土壤中的速效磷是植物生长的必需元素之一。
植物体内磷含量不仅能促进蛋白质的合成，而且能增强植物的抗病能力了解土壤中速效磷的含量可以反映土壤近期内磷素的供应情况，还可以作为合理施用磷肥的参考依据。
二、实验用品试管架一台、三角瓶（250、100mL）两个、25mL容量瓶一个、小药勺一个、25mL量筒一个、10mL移液管一支、5mL移液管一支、吸耳球一个、洗瓶一个、20目土壤样品、0.5M碳酸氢钠一瓶、无磷活性炭、钼锑抗混合显色剂三、实验方法碳酸氢钠浸提法（磷钼蓝比色法）四、实验原理中性和石灰性土壤中的速效磷多以磷酸一钙和磷酸二钙状态存在，用0.5M 的碳酸氢钠浸提溶液使得钙离子形成碳酸钙沉淀，从而释放出磷酸根离子到溶液中。
含磷的溶液在酸性条件下可以与钼酸铵形成黄色的磷钼酸铵沉淀。
磷钼酸铵沉淀在还原剂抗坏血酸的作用下，使得磷钼酸铵中的一部分Mo6+离子还原为Mo5+离子，生成一种蓝色的Mo5+的“钼蓝”。
进而采用分光光度法求出溶液中速效磷的含量。
五、实验步骤1. 称土：20目风干土壤样品2g于150mL三角瓶中。
2. 浸提：加入20mL0.5M的碳酸氢钠溶液、1勺无磷活性炭，震荡30min。
3. 过滤：用滤纸过滤到另一三角瓶内。
4. 定容：吸取滤液2mL到25mL容量瓶内，加入钼锑抗混合显色剂1mL，洗瓶定容。
5. 比色：静置30min后，721分光光度计660纳米比色。
6. 空白：不加土壤样品，其余同上。
在实验过程中，应该注意以下几个方面：加入活性炭的目的是为了吸附溶液中其他杂色的影响，避免对最后比色时蓝色造成干扰。
提取有效磷的过程中，克服非有效磷的溶解是方法成败的关键，因此水土比例不能太大，震荡时间不能太长。
定容时碳酸氢钠与水、钼锑抗显色剂形成大量气体二氧化碳，为防止液体外溢，应边定容边摇动。
土壤全磷、速效磷、速效钾含量,植物组织全磷、全氮含量快速测试方法
离心替代过滤，酶标仪替代分光光度计的土壤全磷测试方法1.用万分之一天平，称取1g左右的风干土，记录下重量。
2.加入8ml浓硫酸，放置过夜后加入10滴高氯酸，消煮至白色。
3.在50ml消煮管中定容，可以先加水1/3，混匀后再加水至刻度线附近，放置过夜后再加水至刻度线，摇匀。
4.吸取1ml消煮液到1.5ml离心管中，10000rpm，离心1分钟。
5.吸取50ul上清液+750ul H2O+100ul NaOH(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离心管中。
6.摇匀后，14000rcf离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色备注：5.中吸取的上清液的量可根据显色状况调整，相应地NaOH的量也要做出调整，保证比色体系体积为1ml，氢离子浓度为0.55mol/L左右，每个样品做三个重复，重复间允许误差<0.005%即50mg/kg。
磷酸二氢钾工作曲线制做方法1.先将100mg/L(0.4394g KH2PO4(烘干2小时)先加水300ml，再加5ml浓硫酸，再定容到1L)的磷标贮液(磷酸二氢钾溶液)稀释20倍，比如吸取5ml定容到100ml2.配制3.摇匀后，10000rpm离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色备注：利用散点图绘制曲线，添加趋势线和r值，r^2要大于0.999。
利用forecast.line函数计算比色液磷含量钼锑抗配制方法1.浓硫酸153ml加入500ml左右H2O(用1L的烧杯)，用磁力搅拌器搅匀2. 1L烧杯中加入10g 钼酸铵,用磁力搅拌器融化3. 0.5g酒石酸锑钾加入100ml左右H2O(用100ml的烧杯)，用磁力搅拌器溶化4. 步骤3所得溶液倒入1L烧杯，在磁力搅拌器上混合均匀，定容到1L备注：避光储存，使用时每10ml 加入0.15g抗坏血酸二硝基酚溶液：0.2g 二硝基酚溶于100ml水中离心替代过滤，酶标仪替代分光光度计的土壤有效磷(碳酸氢钠浸提)测定方法1. 42g碳酸氢钠定容到1L，用4mol/L NaOH溶液(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)调节pH至8.5，得到浸提剂2. 1.00g风干土加入50ml塑料管中，再加入0.1g活性炭粉，再加入20ml碳酸氢钠溶液，20~25℃，180rpm，震荡30min3.吸取1ml浸提液到1.5ml离心管中，10000rpm，离心1分钟4.吸取200ul上清液+700ul H2O+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离心管中5.摇匀后，14000rcf，离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色备注：吸取的上清液体积可以根据显色情况调整，保证比色体系1ml，每个样品做三个重复植物组织全磷含量快速测定1.将烘干后的植物组织样品磨碎，再将样品粉末继续烘干至恒重。
土壤中磷的测定(全磷、速效磷)
1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法)方法原理在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。
操作步骤1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。
2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。
3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。
轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。
同时做空白试验。
4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。
5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。
6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L 数。
7.工作曲线的绘制。
分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。
即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。
在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。
结果计算全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；显色液体积—本操作中为50ml；分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；106—将ug换算成gW—土样重(g)。
土壤中速效磷的测定
土壤中速效磷的测定
土壤中速效磷的测定可以采用几种方法。
下面是一个常用的方法：
1. 蒸发浸提法：将取样的土壤样品与蒸馏水混合，放入水浴中加热蒸发，直至溶液变为饱和盐水。
然后用滤纸过滤溶液，测定滤液中速效磷的含量。
2. 磷酸化浸提法：将土壤样品与一定浓度的磷酸溶液混合，在一定温度下不断摇动，使速效磷与磷酸发生反应，生成可溶性的磷酸盐。
然后用滤纸过滤溶液，测定滤液中速效磷的含量。
3. 水提酸溶法：将土壤样品与一定量的酸（如盐酸）和蒸馏水混合，放置一段时间使速效磷与酸反应溶解。
然后将溶液离心分离，用滤纸过滤滤液，测定滤液中速效磷的含量。
通过上述方法测定土壤中速效磷的含量，可以为农田施肥和土壤肥力评价提供科学依据。
土壤速效氮磷钾、全氮磷钾测定方法
以下实验步骤的适用原则“样品量大，测定快速，数据准确”一、土壤全N、P、K测定方法土样粒径采用：2mm母液制取：步骤：称取0.5g土样于100ml三角瓶中，分别加入5ml浓硫酸和0.2ml高氯酸（不需准确），盖上小漏斗，于红外消解仪上消解直至灰白色。
取下三角瓶，冷却后全量转入50ml 容量瓶中定容。
注：1、尽量不要使土壤附着在瓶壁上，以免损失。
2、母液静置澄清后再使用。
3、消解时高氯酸要尽量赶完，后侧会影响后续测定。
4、消解20后若土样还没有变白，可以适量加入1~2滴高氯酸，切勿多加。
5、消解总时间大概40~60分钟，黑色碳渣粒无法变白，可不用管它。
6、全量测定顺序，全P和全K可同时测定，全N最后测定。
（一）全N步骤：倒取摇匀后的母液25ml（用25ml量筒量取即可），加入15ml 40%氢氧化钠（大概）蒸馏，溜液进入装有7ml硼酸吸收液的100ml三角瓶中，溶液变蓝，总体积在40~50ml 即可，最后用标准酸（高浓度/低浓度）滴定。
注：1、氢氧化钠加入后溶液会变成棕红色（高氯酸没有赶完时，加入氢氧化钠后管中溶液不会变色，此时应注意控制氢氧化钠加入量）。
2、控制管中液体总量在50ml以内。
3、40%氢氧化钠：用一整瓶均分成两份，分别在氢氧化钠的塑料瓶中配制，加水至满即可。
4、记录标准酸浓度。
5、蒸馏时前面滴出来的溜液是最重要的，所以一定不能损失。
（二）全P步骤：吸取母液1ml于25ml容量瓶中，加水至1/3处，加入两滴二-六（或二-四）二硝基酚，然后用40%氢氧化钠（浓度自定，可高可低）调色至微黄（注意颜色的统一性），加入2.5ml显色剂后定容，定容显色半小时后进行测定。
注：1、钼锑抗储备液：称取20g钼酸铵放入1L烧杯中，加入200~300ml纯水溶解，然后加入180ml浓硫酸。
待上述溶液冷却后用量筒量取准确体积转移至另外一个1L烧杯中（转移时要把原烧杯洗净，洗液也全量转入，计算总体积）。
称取0.5g酒石酸锑钾于量筒中，加入100ml纯水溶解（体积准确），待全部溶解后全量转入前面的1L烧杯中（计算总转入体积），最终控制溶液体积在1L，搅拌均匀后倒入棕色玻璃瓶中备用。
土壤中磷的测定(全磷、速效磷)
1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法)方法原理在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。
操作步骤1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。
2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。
3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。
轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。
同时做空白试验。
4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。
5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。
6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。
7.工作曲线的绘制。
分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。
即得0，,,,,,,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。
在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。
结果计算全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；显色液体积—本操作中为50ml；分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；106—将ug换算成gW—土样重(g)。
土壤全磷的测定
土壤全磷的测定1、土壤样品的分解和溶液中磷的测定土壤全磷测定要求把无机磷全部溶解，同时把有机磷氧化成无机磷，因此全磷的测定，第一步是样品的分解，第二步是溶液中磷的测定。
1.1土壤样品的分解样品分解有NaCO3熔融法、HClO4—H2SO4消煮法、HF—HClO4消煮法等。
目前HClO4—H2SO4消煮法应用最普遍，因为操作方便，又不需要白金坩埚，虽然HClO4—H2SO4消煮法不及NaCO3融煮法样品分解完全，但其分解率已达到全磷分析的要求。
NaCO3熔法虽然操作手续较繁，但样品分解完全，仍是全磷测定分解的标准方法。
目前我国已将NaOH碱熔钼锑抗比色法列为国家标准法。
样品可在银或镍坩埚中用NaOH熔融是分解土壤全磷（或全钾）比较完全和简便方法。
1.2溶液中磷的测定溶液中磷的测定，一般都用磷钼蓝比色法。
多年来，人们对钼蓝比色法进行了大量的研究工作，特别是在还原剂的选用上有了很大改革。
最早常用的还原剂有氯化亚锡、亚硫酸氢钠等，以后采用有机还原剂如1，2，4-胺基萘酚磺酸、硫酸联氨、抗坏血酸等，目前应用较普遍的是钼锑抗混合试剂。
还原剂中的氯化亚锡的灵敏度最高，显色快，但颜色不稳定。
土壤速效磷的速测方法仍多用氯化亚锡作还原剂。
抗坏血酸是近年被广泛应用的一种还原剂，它的主要优点是生成的颜色稳定，干扰离子的影响较小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。
如果溶液中有一定的三价锑存在时，则大大加快了抗坏血酸的还原反应，在室温下也能显色。
加钼酸铵于含磷的溶液中，在一定酸度条件下，溶液中的正磷酸与钼酸络合形成磷钼杂多酸。
H3PO4+12H2MoO4=H3[PMo12O40]+12H2O杂多酸是由两种以上简单分子的酸组成的复杂的多元酸，是一类特殊的配合物。
在分析化学中，主要是在酸性溶液中，利用H3PO4或H4SiO4等作为原酸，提供整个配合阳离子的中心体，再加钼酸根配位使生成相应的12-钼杂多酸，然后再进行光度法、容量法或重量法测定。
土壤中速效磷的测定
土壤中速效磷的测定了解土壤中速效磷的供应状况，对于施肥有着直接的指导意义。
土壤中速效磷的测定方法很多，由于提取剂的不同所得结果也不一样。
一般情况下，石灰性土壤和中性土壤采用碳酸氢钠提取，酸性土壤采用酸性氟化铵提取。
（一）碳酸氢钠法1、方法原理中性、石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙状态存在，用0.5M碳酸氢钠液可将其提取到溶液中，然后将待测液用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原使黄色的锑磷钼杂多酸还原成为磷钼兰进行比色。
2、操作步骤称取通过1毫米筛孔的风干土2.5克（精确到0.01克）于250毫升三角瓶中，加50毫升0.5M NaHCO3液，再加一角匙无磷活性炭，塞紧瓶塞，在20—— 25℃下振荡30分钟，取出用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于三角瓶中，同时做试剂的空白试验。
吸取滤液10毫升于50毫升量瓶中，用钼锑抗试剂5毫升显色，并用蒸馏水定容，摇匀，在室温高于15℃的条件下放置30分钟，用红色滤光片或660nm波长的光进行比色，以空白溶液的透光率为100（即光密度为0），读出测定液的光密度，在标准曲线上查出显色液的磷浓度（mgkg-1）。
标准曲线制备：吸取含磷（P）5mgkg-1的标准溶液0、1、2、3、4、5、6毫升，分别加入50毫升容量瓶中，加0.5M NaHCO3液10毫升，加水至约30毫升，再加入钼锑抗显色剂5毫升，摇匀，定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg-1磷标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值，在方格座标纸上以吸收值为纵座标，磷mgkg-1数为横座标，绘制成标准曲线。
1、结果计算显色液磷mgkg-1数×显色液体积×分取倍数土壤中速效磷mgkg-1＝—————————————————――――――――—————————烘干土重（克）显色液磷mgkg-1数：从工作曲线查得显色液的磷mgkg-1数显色液体积：50毫升浸提液总体积(50毫升)分取倍数＝————--------—————————吸取浸出液毫升数4、主要仪器及试剂配制仪器：往复式振荡机，分光光度计或光电比色计试剂：(1)0.5M NaHCO3浸提剂(pH＝8.5)称取42.0克NaHCO3溶于800毫升水中，稀释至990毫升，用4M NaOH液调节pH至8.5，然后稀释至1升，保存于瓶中，如超过一个月，使用前应重新校正pH值。
土壤有效磷 有机磷 全磷测定方法
土壤全磷测定方法HClO4—H2SO4法待测液制备：1.准确称取通过100目筛子的风干土样0.2500—0.500g，置于50ml凯式瓶（或者50ml消化管）中2.以少量水湿润后，加入浓硫酸4ml,摇匀后，再加70-72%高氯酸1ml,摇匀，瓶口上加一个小漏斗，通风厨静置24小时3.置于消化炉中进行3小时消煮，待溶液澄清透明即可。
4.将冷却后的消化液转移入100ml容量瓶中（容量瓶中预先盛水20-30ml），按少量多次的原则用水冲洗消化管，轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，加水定容，静置过夜5.次日小心吸取上层澄清液进行磷的测定。
6.样品空白溶液制备：在样品分解的同时做一个空白实验，即不加土样而加同样量的浓硫酸和高氯酸，与样品进行相同处理土壤速效磷测定方法M3浸提法M3溶液配置(1L)：乙酸：11.5 ml浓硝酸：0.82 ml硝酸铵：20 g氟化铵：0.5556gEDTA：0.2922g基本步骤：1.称取3g过2mm筛子风干土样于50ml聚已烯离心管中2.加入30mlM3浸提液，置于振荡机中振荡5min，振荡速度为200转，温度25℃3.置于离心机中离心，离心速度为8000转/min,温度为25℃，如溶液颜色很深，在离心前加入一定量的活性炭脱色4.用无磷滤纸过滤5.澄清液进行磷的测定。
6.样品空白溶液制备：即不加土样而加同样量M3溶液，与样品进行同样处理。
土壤有机磷含量测定（灼烧法）0.1M硫酸溶液配置：取6ml浓硫酸定容至1L，配置方法浓硫酸缓慢加入水中，最后定容至1000mL 的容量瓶中。
基本步骤：1.准确称取过100目筛子的风干土壤样品0.4000g置于15ml瓷坩埚中2.置于550℃马弗炉中灼烧1小时，取出冷却3.用40ml0.1M硫酸溶液将土样洗入聚已烯离心管中4.摇匀后将离心管置于40℃的烘箱中一个小时5.取出冷却至室温，置于离心机中离心5min，转速8000转/min,温度25℃6.用无磷滤纸过滤7.澄清液用于磷的测定8.称取0.4000g土样于聚已烯离心管中，加入40ml0.1M硫酸溶液，其他步骤同上，测定未灼烧土壤样品浸提液中磷的含量。
土壤速效磷测定
土壤有效磷测定常用的三种方法
中性和石灰性土壤有效磷测定
• 方法原理 石灰性土壤由于大量游离碳酸钙存在，不能用酸溶 液来提取有效磷。一般用碳酸盐的碱溶液。由于碳 酸根的同离子效应，碳酸盐的碱溶液降低碳酸钙的 溶解度，也就降低了溶液中钙的浓度，这样就有利 于磷酸钙盐的提取。同时由于碳酸盐的碱溶液，也 降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁 的提取。此外，碳酸氢钠碱溶液中存在着 OH - ， HCO3-，CO32-等阴离子有利于吸附态磷的置换， 因此 NaHCO 3 不仅适用石灰性土壤，也适应于中性 和酸性土壤中速效磷的提取。待测液中的磷用钼锑 抗 试 剂 显 色 ， 进 行 比 色 测 定 。 倍丰农资集团
倍丰农资集团
结果计算
倍丰农资集团
倍丰农资集团
倍丰农资集团
无机态磷
H3PO4 水溶态磷 H+ + H2PO4-
H2PO4HPO42Fe-P（铁磷）
Al-P（铝磷）
H+ + HPO42H+ + PO43-
无机态磷
吸附态磷
酸性土壤
石灰性土壤
矿物态磷
Ca-P（钙磷）
O-P（闭蓄态磷） 吸附
溶解
矿物态
沉淀
水溶态
解吸
吸附态
倍丰农资集团
有机态磷
倍丰农资集团
土壤固相磷 速效磷
土壤溶液中的磷
植物从土壤溶液中吸收磷
倍丰农资集团
影响有效磷提取的因素
1、提取剂的种类：
F->柠檬酸>HCO3->CH3COO->SO42->Cl2、水土比例：水土比越大浸提磷量越大。 3、振荡强度：震荡转速 、震荡时间。
土壤速效磷的测定实验方法
土壤速效磷的测定实验方法一、目的意义磷是植物生长发育的主要营养元素之一，以有机态或无机态存在于土壤中，包括了大部分的迟效磷和很少的速效磷。
土壤中的速效磷是指能为当季作物吸收利用的磷。
因此,速效磷的含量是土壤磷素供应的指标，了解速效磷的供应状况，对施肥有着直接的指导意义。
二、方法原理土壤中速效磷的测定，方法很多。
有生物法、同位素法、化学分析法、阳离子交换树脂法等。
生物方法是最直接的，即在温室中进行盆钵实验，也是最可靠的；同位素法认为是目前最标准的方法；阳离树脂法有类似植物吸收磷的作用，结果接近同位素法，但应用最普遍的化学分析方法，即以提取剂提取土壤中的效磷，提取剂种类很多，各有优缺点。
这里着重介绍盐酸-氟化铁提取剂提取酸性土壤中速效磷的化学测定法，而石灰性土壤中速效磷的测定请参阅有关书籍。
酸性土壤中的速效磷，多以磷酸铁和磷酸铝的形态存在，可用酸性氟化镂提取，形成氟铝化铁和氟铁化镂络合物,少量的钙则生成氟化钙沉淀，磷酸根则被浸提到溶液中：3NH4F+3HF+ALP04fH3P04+(NH4)3ALF63NH4F+3HF+FePO4-H3PO4+(NH4)3FeF6在一定酸度下：铝酸镂与磷络合成黄色的磷钥杂多酸络合物，用SnCI2还原可生成兰色的磷铜兰（Mo02∙4Mo03）2H3PO4∙4H20磷的含量与兰色的深度成正比，于是可用比色法测定。
三、操作步骤称取过Imm孔筛的风干土样1.OOg,放入150Inl三角瓶中,加入0.03N氟化钱-0.025N盐酸浸提剂,加塞后，振荡30分钟。
用无磷干滤纸过滤，滤液承接于盛有0.1g硼酸的三角瓶中（防止氟离子对显色的干扰和腐蚀玻璃器皿），摇匀使其溶解。
吸取滤液5ml（视含磷量而定）于25ml容量瓶中，加少量蒸储水，再加2,6-二硝基酚指示剂一滴，用4N的氢氧化钱和4N 的盐酸调至微黄色，准确加入1.5魅目酸铁-盐酸试剂5mL加蒸储水至近刻度。
加入2.5%氯化亚锡2滴，5-15分钟（20℃以下室温15分钟，20-30C7分钟，30℃以上5分钟）后在分光光度计上比色。
土壤全磷、速效磷、速效钾含量,植物组织全磷、全氮含量快速测试方法
⼟壤全磷、速效磷、速效钾含量,植物组织全磷、全氮含量快速测试⽅法离⼼替代过滤，酶标仪替代分光光度计的⼟壤全磷测试⽅法1.⽤万分之⼀天平，称取1g左右的风⼲⼟，记录下重量。
2.加⼊8ml浓硫酸，放置过夜后加⼊10滴⾼氯酸，消煮⾄⽩⾊。
3.在50ml消煮管中定容，可以先加⽔1/3，混匀后再加⽔⾄刻度线附近，放置过夜后再加⽔⾄刻度线，摇匀。
4.吸取1ml消煮液到1.5ml离⼼管中，10000rpm，离⼼1分钟。
5.吸取50ul上清液+750ul H2O+100ul NaOH(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离⼼管中。
6.摇匀后，14000rcf离⼼⼀分钟，室温⾼于15℃情况下，30min后，吸取300ul⾄酶标板⽐⾊备注：5.中吸取的上清液的量可根据显⾊状况调整，相应地NaOH的量也要做出调整，保证⽐⾊体系体积为1ml，氢离⼦浓度为0.55mol/L左右，每个样品做三个重复，重复间允许误差<0.005%即50mg/kg。
磷酸⼆氢钾⼯作曲线制做⽅法1.先将100mg/L(0.4394g KH2PO4(烘⼲2⼩时)先加⽔300ml，再加5ml浓硫酸，再定容到1L)的磷标贮液(磷酸⼆氢钾溶液)稀释20倍，⽐如吸取5ml定容到100ml2.配制3.摇匀后，10000rpm离⼼⼀分钟，室温⾼于15℃情况下，30min后，吸取300ul⾄酶标板⽐⾊备注：利⽤散点图绘制曲线，添加趋势线和r值，r^2要⼤于0.999。
利⽤forecast.line函数计算⽐⾊液磷含量钼锑抗配制⽅法1.浓硫酸153ml加⼊500ml左右H2O(⽤1L的烧杯)，⽤磁⼒搅拌器搅匀2. 1L烧杯中加⼊10g 钼酸铵,⽤磁⼒搅拌器融化3. 0.5g酒⽯酸锑钾加⼊100ml左右H2O(⽤100ml的烧杯)，⽤磁⼒搅拌器溶化4. 步骤3所得溶液倒⼊1L烧杯，在磁⼒搅拌器上混合均匀，定容到1L备注：避光储存，使⽤时每10ml 加⼊0.15g抗坏⾎酸⼆硝基酚溶液：0.2g ⼆硝基酚溶于100ml⽔中离⼼替代过滤，酶标仪替代分光光度计的⼟壤有效磷(碳酸氢钠浸提)测定⽅法1. 42g碳酸氢钠定容到1L，⽤4mol/L NaOH溶液(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)调节pH⾄8.5，得到浸提剂2. 1.00g风⼲⼟加⼊50ml塑料管中，再加⼊0.1g活性炭粉，再加⼊20ml碳酸氢钠溶液，20~25℃，180rpm，震荡30min3.吸取1ml浸提液到1.5ml离⼼管中，10000rpm，离⼼1分钟4.吸取200ul上清液+700ul H2O+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离⼼管中5.摇匀后，14000rcf，离⼼⼀分钟，室温⾼于15℃情况下，30min后，吸取300ul⾄酶标板⽐⾊备注：吸取的上清液体积可以根据显⾊情况调整，保证⽐⾊体系1ml，每个样品做三个重复植物组织全磷含量快速测定1.将烘⼲后的植物组织样品磨碎，再将样品粉末继续烘⼲⾄恒重。
土壤全磷和速效磷的测定推荐精选PPT
(1)能加速显色反应； (2)在常温下能迅速显色； (3)锑参与了“钼兰”配合物的组成(P:Sb:Mo=1:2:12)，
使兰色加深，提高了反应的灵敏度； (4)钼锑抗试剂是由钼酸铵、H2SO4、酒石酸氧锑钾、
致，所以要求严格按照操作手续进行。
土壤有效磷的测定
本章重点： 1、掌握土壤有效磷的概念。 2、了解不同土壤（石灰性土壤、酸性土壤）
有效磷测定的适合方法。 3、掌握Olsen法，Bray 1法和Mehlich 3法的
浸提原理及条件。 4、熟悉浸出液中磷的定量方法，重点掌握钼
锑抗吸光光度法（比色法）的原理及注意 事项。
2、试剂浓度： 钼兰显色是在适宜的试剂浓度的条件下进行的， 即：比色液中酸和钼试剂的浓度及二者的比例 （酸：钼试剂）、还原剂用量（或浓度）等。其 中特别是酸与钼试剂的比例在测定中比须严格 控制。一般说，钼酸铵浓度越高要求的酸度越 高，适宜的酸度范围越窄。
3、还原剂： 还原剂的种类很多，如1,2,4-氨基萘酚磺酸、SnCl2、 抗坏血酸……。 SnCl2：g/ml，此法灵敏度 高，显色快，操作方便。缺点是：兰色稳定时间短
植物吸收的磷
土壤有效磷 土壤无效磷 土壤有效磷与植物吸收的磷要
（1）Olsen 法（NaHCO3法） 在国内外都得到良好结果和广泛应用，
它适用于中性、微酸性土壤和石灰性土壤。 （2）Bray 1 法（NH4F-HCl法）
（5-15min显色，兰色稳定15min）；允许干扰离子的 浓度小，如Fe3+仅为20mg/L。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法)
方法原理
在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。
操作步骤
1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。
2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。
3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。
轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。
同时做空白试验。
4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。
5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。
6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。
7.工作曲线的绘制。
分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。
即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。
在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。
结果计算
全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100
式中：
显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；
显色液体积—本操作中为50ml；
分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；
106—将ug换算成g
W—土样重(g)。
两次平行测定结果允许误差为0.005%。
仪器、试剂
1.主要仪器：
分析天平、小漏斗、大漏斗、三角瓶(50ml和100ml)、容量瓶(50ml和100ml)、移液管(5ml和10ml)、电炉、分光光度计。
2.试剂：
(1)0.5mol/L碳酸氢钠浸提液。
称取化学纯碳酸氢钠42.0g溶于800ml水中，以0.5mol/L氢氧化钠调节pH至8.5，洗入1000ml容量瓶中，定容至刻度，贮存于试剂瓶中。
此溶液贮存于塑料瓶中比在玻璃瓶中容易保存，若贮存超过1个月，应检查pH值是否改变。
(2)无磷活性炭。
活性碳常常含有磷，应做空白试验，检查有无磷存在。
如含磷较多，须先用2mol/L盐酸浸泡过夜，用蒸馏水冲洗多次后，再用0.5mol/L碳酸氢钠浸泡过夜，在平瓷漏斗上抽气过滤，每次用少量蒸馏水淋洗多次，并检查到无磷为止。
如含磷较少，则直接用碳酸氢钠处理即可。
(3)磷(P)标准溶液。
准确称取45℃烘干4—8小时的分析纯磷酸二氢钾0.2197g 于小烧杯中，以少量水溶解，将溶液全部洗入1000ml容量瓶中，用水定容至刻度，充分摇匀，此溶液即为含50mg/L的磷基准溶液。
吸取50ml此溶液稀释至500ml，即为5mg/L的磷标准溶液(此溶液不能长期保存)。
比色时按标准曲线系列配制。
(4)硫酸钼锑贮存液。
取蒸馏水约400ml，放入1000ml烧杯中，将烧杯浸在冷水中，然后缓缓注入分析纯浓硫酸208.3ml,并不断搅拌，冷却至室温。
另称取分析纯钼酸铵20g溶于约60℃的200ml蒸馏水中，冷却。
然后将硫酸溶液徐徐倒入钼酸铵溶液中，不断搅拌，再加入100ml0.5%酒石酸锑钾溶液，用蒸馏水稀释至1000ml，摇匀贮于试剂瓶中。
(5)二硝基酚。
称取0.25g二硝基酚溶于100ml蒸馏水中。
(6)钼锑抗混合色剂。
在100ml钼锑贮存液中，加入1.5g左旋(旋光度+21—+22°)抗坏血酸，此试剂有效期24小时，宜用前配制。
2 土壤中速效磷的测定(碳酸氢钠法)
了解土壤中速效磷供应状况，对于施肥有着直接的指导意义。
土壤速效磷的测定方法很多，由于提取剂的不同所得的结果也不一致。
提取剂的选择主要根据各种土壤性质而定，一般情况下，石灰性土壤和中性土壤采用碳酸氢钠来提取，酸性土壤采用酸性氟化铵或氢氧化钠—草酸钠法来提取。
方法原理
石灰性土壤由于大量游离碳酸钙存在，不能用酸溶液来提取速效磷，可用碳酸盐的碱溶液。
由于碳酸根的同离子效应，碳酸盐的碱溶液降低碳酸钙的溶解度，也就降低了溶液中钙的浓度，这样就有利于磷酸钙盐的提取。
同时由于碳酸盐的碱溶液也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。
此外，碳酸氢钠碱溶液中存在着OH-、HCO-3、CO2-3等阴离子有利于吸附态磷的交换，因此，碳酸氢钠不仅适用于石灰性土壤，也适用于中性和酸性土壤中速效磷的提取。
待测液用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原，使黄色的锑磷钼杂多酸还原成为磷钼蓝进行比色。
操作步骤：
1.称取通过18号筛(孔径为1mm)的风干土样5g(精确到0.01g)于200ml三角瓶中，准确加入0.5mol/L碳酸氢钠溶液100ml,再加一小角勺无磷活性碳，塞紧瓶塞，在振荡机上振荡30分钟(振荡机速率为每分钟150—180次)，立即用无磷滤纸干过滤，滤液承接于100ml三角瓶中。
最初7～8ml滤液弃去。
2.吸取滤液10ml(含磷量高时吸取2.5—5ml；同时应补加0.5mol/L碳酸氢钠溶液至10ml)于50ml量瓶中，加硫酸钼锑抗混合显色剂5ml充分摇匀，排出二氧化碳后加水定容至刻度，再充分摇匀。
3.30分钟后，在分光光度计上比色(波长660nm)，比色时须同时做空白测定。
4.磷标准曲线绘制：分别吸取5mg/L磷标准溶液0、1、2、3、4、5ml于50ml 容量瓶中，每一容量瓶即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L磷，再逐个加入0.5mol/L 碳酸氢钠10ml和硫酸一钼锑抗混合显色剂5ml，然后同待测液一样进行比色。
绘制标准曲线。
结果计算
土壤速效Pmg/kg=比色液mg/L×定容体积/W×分取倍数
式中：
比色液mg/L—从工作曲线上查得的比色液磷的mg/L数；
W—称取土样重量(g)。
分取倍数—100/10
土壤速效磷(P)mg/kg 等级
＜5 低
5—10 中
＞10 高
注意事项
1.活性碳一定要洗至无磷无氯反应。
2.钼锑抗混合剂的加入量要十分准确，特别是钼酸量的大小，直接影响着显色的深浅和稳定性。
标准溶液和待测液的比色酸度应保持基本一致，它的加入量应随比色时定容体积的大小按比例增减。
3.温度的大小影响着测定结果。
提取时要求温度在25℃左右。
室温太低时，可将容量瓶放入40—50℃的烘箱或热水中保温20分钟，稍冷后方可比色仪器药品
1.主要仪器：往复振荡机、电子天平(1/100)、分光光度计、三角瓶(250ml和100ml)、烧杯(100ml)、移液管(10ml、50ml)、容量瓶(50ml)、吸耳球、漏斗(60ml)、滤纸、坐标纸、擦镜纸、小滴管。
2.试剂配制：见1—5.1。