小鼠(Mouse)转铁蛋白(TRF)ELISA试剂盒说明书
转铁蛋白检测试剂盒(免疫比浊法)说明书
转铁蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）说明书转铁蛋白检测试剂盒(免疫比浊法)说明书【产品名称】通用名称:转铁蛋白检测试剂盒(免疫比浊法)英文名称:TRF Kit【包装规格】R1:R2 ,1×30ml;1×10ml1×60ml;1×20ml 2×60ml;2×20ml【预期用途】转铁蛋白检测试剂盒临床上用于定量测定人体血清中转铁蛋白的含量。
转铁蛋白(TRF)连接上铁离子之后可以防止铁中毒以及通过肾的流失。
其水平的升高常见于铁缺乏症、怀孕、雌性激素的控制以及类脂肪的肾病。
其水平的降低常见于睾丸激素的控制、感染、急性的炎症、某些类型的肾炎、血色素缺失、急性的疟疾以及营养不良。
【检验原理】人体中的转铁蛋白与试剂中抗人转铁蛋白抗体在缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。
当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反应液的浊度亦随之增加，在340nm以终点法检测吸光度变化，与校准品对照，即可计算出未知蛋白的含量。
【主要组成成分】组成主要成分R1 NaH2PO4缓冲液R2 抗人转铁蛋白抗体注意不同批号的试剂盒的组分不能混用。
校准品:用户自行购买利德曼公司的多项高值免疫标准液，标准值见说明书;质控品:用户自行购买利德曼公司多项免疫质控血清，质控值见说明书;【储存条件及有效期】1.包装试剂均应在2?,8?避光储存，可稳定至标签所示失效日期;2( 试剂有效期为12个月;3( 开瓶有效期:10天(开瓶后在2?,8?保存);【适用仪器】包装规格适用机型1×30ml;1×10ml 日立7060、1×60ml;1×20ml 日立7170、东芝-40 2×60ml;2×20ml 日立7020、奥林巴斯AU640、贝克曼CX4 【样本要求】1、标本为离心或分离除去血液凝块的新鲜血清。
2、血清样本在2~8?储存不超过一周。
转铁蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求wanhuapuman
转铁蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法）
适用范围：该产品用于体外定性检测人体粪便样本中的转铁蛋白的含量。
1.1 包装规格
24人份/盒
1.2 主要组成成分
在转铁蛋白检测条的基础上外加筒形状的聚苯乙烯塑料外壳制成。
转铁蛋白检测条主要由塑料板，吸水板，硝酸纤维素膜，胶体金，吸水纸组成；硝酸纤维素膜由包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线（C线）和包被有鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体1的反应线（T线）组成；胶体金由鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体2标记制成。
2.1 外观
外观整洁完整、无破损、无污染；材料附着牢固、内容物齐全。
包装完整、标签清晰。
2.2 宽度
膜条应宽于2.5mm。
2.3 移行速度
液体移行速度应不低于10mm/min。
2.4 临界值及重复性
2.4.1分别检测含被测物相应检出限浓度（见表1）的阳性质控品各20次，其结果阳性率≥95%。
2.4.2分别检测含被测物相应阴性检测浓度（见表1）的阴性质控品各20次，其结果阴性率≥95%。
表1 被测物检出限检测浓度点
2.5 分析特异性
检测含有宣称不产生交叉反应的最高浓度/水平的干扰物质（详见表2）结果应不出现阳性。
表2 常见的交叉反应源
2.6 批间差
抽取三个批次的试纸条各20人份，分别按临界值及重复性检测方法检测，阴性结果符合率应≥95%，阳性结果符合率应≥95%。
2.7 HOOK效应
检测400μg/ml的人转铁蛋白阳性质控品，结果应均不出现阴性。
2.8 稳定性
检测试纸条在4℃-30℃避光保存36个月后，产品的性能应符合2.4,2.5,2.7的要求。
艾威德转铁蛋白(TRF)测定试剂盒（免疫比浊法）说明书
转铁蛋白(TRF)测定试剂盒（免疫比浊法）说明书【产品名称】转铁蛋白(TRF)测定试剂盒（免疫比浊法）【包装规格】a)试剂1：1×15mL试剂2：1×5mLb)试剂1：2×45mL试剂2：2×15mLc)试剂1：4×60mL试剂2：4×20mLd)试剂1：2×60mL试剂2：2×20mL【预期用途】用于体外定量测定人血清中转铁蛋白的含量。
转铁蛋白由肝脏合成，合成量取决于体内对铁的需求以及铁的储备。
因此，对转铁蛋白浓度的检测可提示是否铁负荷过度或铁缺乏。
转铁蛋白饱和度测定常用于筛查血色病；排除铁分布异常的铁负荷过度，例如肝病；监视对肾衰竭者使用促红细胞生成素治疗效果[1]。
测定转铁蛋白常用于铁缺乏症、怀孕、类脂肪的肾病、急性疟疾的辅助诊断。
【检验原理】样本中转铁蛋白与试剂中相应抗体（羊抗人转铁蛋白抗体）在液相中相遇，结合成抗原-抗体复合物，形成一定的浊度。
浊度的高低与样本中转铁蛋白的含量成正相关。
【主要组成成分】试剂1主要组分磷酸盐缓冲液100mmol/L 聚乙二醇6000（PEG6000）适量表面活性剂及稳定剂适量试剂2主要组分磷酸盐缓冲液100mmol/L 羊抗人转铁蛋白抗体 1.3mg/mL 表面活性剂及稳定剂适量注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。
【储存条件及有效期】1.试剂原包装在2～8℃储存，有效期为12个月，生产日期、有效期见标签。
2.开口后的试剂在仪器仓中（2～8℃）可稳定30天。
【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200；日立HITACHI7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT008AS型；贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/ AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821；佳能TBA-FX8/TBA-120FR/ TBA-2000FR；罗氏cobas8000c702/cobas8000c701/cobas8000c502；西门子SIEMENS ADVIA1800/ADVIA2400；雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200；西森美康SYSMEX BM6010/C；科华KHB卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280；迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/ CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400；迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/ BS-800/BS-2000M；颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480；赛诺迈德SUNMATIK-9050型；雷杜Chemray420；英诺华D280；特康TC6010L；锦瑞GS400；普康6066。
达优 小鼠 TGF-β1 ELISA 试剂盒说明书
产品信息和操作指南Mouse TGF-β1Precoated ELISA kitCat#:1217102本试剂盒专用于科研，而非用于诊断Mouse TGF-β11217102目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒组分 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (6)操作过程 (8)结果分析 (10)试剂盒的保存 (10)操作步骤一览表 (11)参考文献 (12)ELISA测定中可能出现的问题及解决方法 (13)达优®ELISA系列产品 (16)1、产品简介：达优®小鼠TGF-β1ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术，体外定量检测小鼠血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的TGF-β1，可同时检测天然的和重组的TGF-β1。
本试剂盒为预包被板，整个过程孵育时间不超过4小时，洗涤12次。
本试剂盒专用于科研，而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分，若有任何疑问请与北京行健雅生物技术有限公司联系，E-mail：**********************。
检测范围：1000-15.6pg/mL灵敏度：5pg/mL重复性：板内变异系数＜10％，板间变异系数＜15％。
2、知识背景：转化生长因子-β1（TGF-β1）能使正常的成纤维细胞的表型发生转化,具有细胞抑制和促进生长双重作用。
TGF-β1分子量25kDa，非糖基化同型二聚体蛋白，由二硫键连接。
TGF-β1基因结构具有高度保守性，人和小鼠TGF-β1的同源性高达99%（1-4）。
TGF-β1在治疗伤口愈合，促进软骨和骨修复以及通过免疫抑制治疗自身免疫性疾病和移植排斥等方面发挥重要作用（5）。
3、试剂盒组分：4、需要实验者自行准备的试剂与仪器：1．酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2．微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P1000 3．蒸馏水或去离子水4．全新滤纸5．旋涡振荡器和磁力搅拌器6．37℃温箱5、注意事项：1.试剂应按标签说明储存，使用前室温平衡20-30分钟。
小鼠神经生长因子(NGF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书【模板】
小鼠神经生长因子(NGF)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中神经生长因子(NGF)的含量。
试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：请来电咨询保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠神经生长因子(NGF)水平。
用纯化的小鼠神经生长因子(NGF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入神经生长因子(NGF)，再与HRP标记的神经生长因子(NGF)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的神经生长因子(NGF)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠神经生长因子(NGF)浓度。
碧云天Mouse TNF-α ELISA Kit (小鼠TNF-α酶联免疫吸附检测试剂盒)说明书
Mouse TNF-α ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PT512Mouse TNF-α ELISA Kit96次产品简介：碧云天的Mouse TNF-α ELISA Kit (Mouse Tumor Necrosis Factor-α Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠肿瘤坏死因子-α酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的TNF-α的试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。
多次重复检测结果表明，最小检出量为30.8pg/ml ，与人TNF-α、sTNF RIs 、TNF RII 等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
TNF-α，即TNF 、TNF α或TNFalpha ，也称cachectin 、cachexin 或TNFSF1A 。
TNF-α由巨噬细胞、上皮细胞等多种细胞在细菌感染、内毒素刺激、病毒或寄生虫感染时产生。
肿瘤坏死因子超家族(Tumor necrosis factor superfamily)共约19个成员，包含由巨噬细胞等产生的TNF-α和T 淋巴细胞产生的TNF-β(也称Lymphotoxin-alpha)，以及FASL 、TRAIL 、CD40L 、CD27L 、CD30L 等。
TNF-α与TNF-β在结构上有一定的相似性，并且在氨基酸水平有28%的同源性，它们拥有共同的受体TNFR1和TNFR2。
由于TNF-α的生物学活性占TNF 总活性的70%~95%，因此目前常说的TNF 多指TNF-α。
TNF (Tumor Necrosis Factor)因为能诱导细胞死亡而得名，实际上其很多时候诱导的细胞死亡为细胞凋亡。
人TNF-α有两种形式，一种是由233个氨基酸组成的跨膜蛋白同源三聚体(homotrimers)，另外一种是该跨膜蛋白在TNF-α转化酶TACE(TNF-α converting enzyme)的作用下切除信号肽，形成成熟的157个氨基酸的可溶性TNF-α单体(分子量为17KDa)的同源三聚体。
小鼠elisa检测试剂盒说明书
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小鼠elisa检测试剂盒使用说明书
小鼠elisa检测试剂盒价格
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
2.5ng/L80ng/L
96T
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素1β (IL1β)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素1β (IL1β)水平。
用纯化的小鼠白介
素1β (IL1β)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素1β
(IL1β)，再与HRP 标记的白介素1β (IL1β)抗体结合，形成抗体抗原酶标抗体复合物，经
过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转
化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素1β (IL1β)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波
长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠白介素1β (IL1β)浓度。
试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液。
转铁蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求新产业
2.性能指标
2.1外观
a)试剂盒各组分应齐全、完整；液体无渗漏；包装标签应清晰、准确、牢固。
b)试剂瓶内的试剂应为清澈透明液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.2装量
试剂装量应符合表 2 的要求。
表 2 装量要求
试剂组分数量（瓶）每瓶装量R1 3 ≥ 60 mL
R2 3 ≥ 20 mL
R1 1 ≥ 60 mL
R2 1 ≥ 20 mL 校准品 1 ≥3mL
2.3空白限
空白限≤0.05 g/L。
2.4线性区间
试剂盒线性在[0.00，4.00] g/L 区间内，应符合如下要求：
a)线性相关系数r≥0.990；
b) [0.00，1.00] g/L 区间内，线性绝对偏差在±0.10g/L 范围内；(1.00，
4.00] g/L 区间内，线性相对偏差在±10%范围内。
2.5精密度
2.5.1重复性
试剂盒测试浓度在（2.70±0.70）g/L 范围内的样本时，变异系数CV≤5.0%。
2.5.2批间差
试剂盒测试浓度在（2.70±0.70）g/L 范围内的样本时，相对极差R≤6.0%。
2.6准确度
回收率在 90%～110%范围内。
4abio mouse TNF-α ELISA 试剂盒使用说明书
REV20190712仅供研究，不用于临床诊断。
客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱:公司官网: 目录简介 ........................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................... - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................... - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................... - 5 -其他实验材料(不提供，但可协助购买) : ............................................................................................. - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................... - 5 -样本收集处理及保存方法 ....................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................... - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................... - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................... - 8 -操作要点提示 ........................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................... - 9 -结果重复性 ............................................................................................................................................. - 10 -灵敏度 ..................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ..................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ................................................................................................................................................. - 11 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。
MouseAntiSSBIgGELISA小鼠抗SSBIgG检测试剂盒说明书
MouseAntiSSBIgGELISA小鼠抗SSBIgG检测试剂盒说明书FormStds= 075 ng/ml； Sample: 100 ul （1:100）；Sensitivity； 2 ng/ml； 75 min assay； Quantitative；Agbased Ab assay, 96 testsKitContents1. Purified SSB Antigen Coated （8 wells x 12 strips） 5811 2. Mouse antiSSB Ig？s std A （0 ng/ml）, 0.650 ml 5812 3. Mouse antiSSB Ig？s std B （4.68 ng/ml）, 0.650 ml 5813 4. Mouse antiSSB Ig？s std C （9.37 ng/ml）, 0.650 ml 5814 5. Mouse antiSSB Ig？s std D （18.75 ng/ml）,0.650 ml 5815 6. Mouse antiSSB Ig？s std E （37.5 ng/ml）, 0.650 ml 5 8 1 6 7. Mouse antiSSB Ig？s std F （75 ng/ml）, 0.650 ml 5 8 1 7 8. Goat AntiMouse IgG HRP conjugate 100X （H+L）, 9. 0.120 ml 5818 10. Sample Diluent （10x）, 10 ml SD10 11. Wash Solution （100X）, 10 ml 80081 12. TMB Substrate, 12 ml 80091 13. Stop solution,12 ml 80101 14. CompleteInstruction Manual M5810MSDSTMB （substrate）, H2SO4 （1% in a buffered stop solution）, and Prolcin300 （0.1% v/v in standards, sample diluent and HRPconjugatesProduct TypeELISA KitSamplesSerum. Plasma, Culture medium and other fluids may be adaptedSpCrossreactivityThe SSB/la antigen, used for coating ELISA plates, has been purified from calfand rabbit thymus cytosol through a combination of immunoaffinity chromatography and other biochemical techniques. The purified preparation does not contain any detectable SSA, Sm, nRNP, Scl70, and Jo1 antigens by sensitive ELISA technique. This kit measures antiSSB toal Ig？s （IgG, IgA, and IgM） as the conjugate supplied in the kit is antimouse IgG （H+L）HRP conjugate. It is possible to use isotype specific antimouse Ig, such as antimouse IgM or antimouse IgG1HRP, to measure isotype specific antibodies.SpeciesReactivityMouse。
转铁蛋白(TRF)测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求sainuopu
转铁蛋白（TRF）测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中转铁蛋白的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×45ml，试剂2：3×15ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。
校准品（选配）：1×1ml，1×1.5ml，1×3ml，1×5ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂：试剂1无色澄清液体；试剂2无色至淡棕色液体。
校准品：无色至浅黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.5。
2.4 分析灵敏度测定浓度为200mg/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应在（0.1，0.3）范围内。
2.5 线性范围在（50，4000）mg/L范围内，线性相关系数r不小于0.995。
在（1000，4000）mg/L区间内线性相对偏差不大于±10%；在（50，1000]mg/L区间内线性绝对偏差不大于±100mg/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。
2.9 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至IRMM生产的有证参考物质（ERM-DA470k）。
ELISA 检测试剂盒 说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断小鼠小鼠（（MouseMouse））肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ（TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
转铁蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求meigaoyi
转铁蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：用于体外定量检测人血清中转铁蛋白的浓度。
1.1包装规格a) 试剂1：2×45ml，试剂2：2×15ml；b) 试剂1：2×60ml，试剂2：2×20ml；c) 试剂1：2×16.8ml，试剂2：2×5.6ml；d) 试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml。
1.2试剂主要组成成分试剂1主要组成成分Tris缓冲液50mmol/l试剂2主要组成成分转铁蛋白抗体适量2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.1.2 试剂1应为无色或淡黄色液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.1.3 试剂2应为淡黄色或乳白色液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度，应≤0.5。
2.4 分析灵敏度测试7.5g/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.8。
2.5 准确性回收率在85%-115%之间。
2.6 重复性变异系数（CV）应不超过5%。
2.7 线性2.7.1在(0.5,7.8)g/L范围内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2 在(0.5,3.0]g/L范围内绝对偏差不超过±0.3g/L；(3.0,7.8)g/L范围内相对偏差不超过±10%。
2.8 批间差批间相对极差不超过10%。
2.9 稳定性该产品在2℃～8℃条件下贮存有效期为18个月，取效期末的产品进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。
生物sharp mouse IgE ELISA试剂盒使用说明书
一、产品简介 ������������������� ���������二、检测原理 ������������������� ���������三、试剂盒组分 ������������������� ���������四、储存条件 ������������������ ����������五、注意事项 ������������������ ����������六、其它实验材料 ������������������� ��������七、使用说明 �������������������� �������1、样品收集、处理及保存方法 �������������������� ��2、试剂准备 �������������������� �������3、操作步骤 �������������������� �������4、操作流程图 �������������������� �������5、操作要点提示 �������������������� �������6、结果判断 �������������������� �������八、常见问题分析及解决 ���������� ������������� 2 2 3 3 3 4 4 4 4 5 6 6 6 8目 录全国统一热线：400-600-4213 ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本中天然和重组IgE浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分，如有任何疑问请与合肥兰杰柯科技有限公司联系，公司将为您提供强有力的技术支持。
仅供研究，不用于临床诊断。
二、检测原理本实验采用双抗体夹心ELISA。
用抗小鼠IgE单克隆抗体预包被酶标板，加入适度稀释的样本和标准品，其中的IgE会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗小鼠IgE抗体，抗小鼠IgE抗体与结合在单抗上的小鼠IgE结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有IgE，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色；加终止液变黄。
小鼠试剂盒,小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1CD54)酶联免疫检测ELISA试剂盒使用说明书
小鼠试剂盒,小鼠细胞间粘附分子1（ICAM-1/CD54）酶联免疫检测ELISA试剂盒使用说明书国内权威的科研试剂供应商，乔羽生物专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒，品质保证，技术严格，无效果退款退货。
Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆ICAM-1/CD54试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知ICAM-1/CD54浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将ICAM-1/CD54和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中ICAM-1/CD54的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制96孔配置48孔配置配制试剂盒成份（2-8℃保存）96/48小鼠份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗ICAM-1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型1/CD54抗体亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
猪转铁蛋白(TRF)ELISA试剂盒说明书
猪转铁蛋白（TRF）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定猪血清，血浆及相关液体样本中转铁蛋白（TRF）含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪转铁蛋白（TRF）水平。
用纯化的猪转铁蛋白（TRF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入转铁蛋白（TRF），再与HRP标记的转铁蛋白（TRF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的转铁蛋白（TRF）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪转铁蛋白（TRF）含量。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
Elabscience小鼠铁蛋白(FE)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
2022年修订第一版（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!）产品货号：E-EL-M0491c产品规格：96T/48T/24T/96T*5Elabscience 小鼠铁蛋白(FE)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Mouse FE(Ferritin) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话技术部电话************电子邮箱（销售）********************电子邮箱（技术）**************************网址：具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测小鼠 血清、血浆或其他相关生物液体中FE浓度。
转铁蛋白(TRF)测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求baiaotaikang
转铁蛋白（TRF）测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中转铁蛋白的浓度。
1.1 产品规格1.2 组成成份该试剂盒由试剂1（R1）、试剂2（R2）、校准品（选配）和质控品（选配）组成。
1.2.1 试剂1（R1）主要组分：磷酸盐缓冲液 100mmol/L1.2.2 试剂2（R2）主要组分：磷酸盐缓冲液 100mmol/L抗人转铁蛋白抗体1.2.3校准品(CaL)的组成PBS缓冲液 50mmol/L转铁蛋白：包含1个浓度水平，浓度范围5.00g/L-10.00g/L，具体浓度见瓶签。
1.2.4质控品(QC)的组成2个水平的液体质控品，在牛血清中添加转铁蛋白抗原纯品，稳定剂<1%；定值范围分别为：（1-3）g/L，（3-6）g/L。
2.1 外观a) 液体双试剂：试剂1应为透明溶液，无混浊，未溶解物；试剂2应为透明或略带浊度的均匀液体。
b) 校准品：无色至淡黄色澄清液体。
c) 质控品：无色或淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度应≤1.000。
2.4 分析灵敏度TRF试剂盒测定浓度 2.00g/L的被测物时，吸光度差值（ΔA）应在0.200-1.500范围内。
2.5 线性范围在[0.20,7.80]g/L范围内，TRF试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900；在[0.20,4.00]g/L范围内线性绝对偏差应不超过0.60g/L，在（4.00,7.80]g/L范围内线性相对偏差应不超过±15%。
2.6 重复性试剂盒测试项目精密度 CV≤8%。
2.7 批间相对极差不同批号之间测定结果的相对极差应≤15%。
2.8 试剂准确度回收实验：回收率在90%-110%。
2.9质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。
2.10试剂稳定性原包装试剂（含校准品和质控品），在（2-8）℃下有效期为18个月，取失效期的试剂盒检测其试剂空白吸光度、分析灵敏度、线性范围、重复性、准确度和质控品赋值有效性，试验结果满足2.3、2.4、2.5、2.6、2.8和2.9的要求。
RayBio Mouse Osteopontin IQELISA Kit 说明书.pdf_16976
RayBio® Mouse Osteopontin IQELISAKitCatalog #: IQM-OPNUser ManualLast revised May 17, 2022Caution:Extraordinarily useful information enclosedISO 13485 Certified3607 Parkway Lane, Suite 100Norcross, GA 30092Tel: 1-888-494-8555 (Toll Free) or 770-729-2992, Fax:770-206-2393Web: , Email: *******************RayBiotech, Inc.________________________________________RayBio® Mouse Osteopontin IQELISA Kit ProtocolTable of ContentsSection Page # I.Introduction3II.Reagents3III.Storage3 IV.Additional Materials Required4V.Reagent Preparation4 VI.Assay Procedure5 VII.Assay Procedure Summary7VIII.Calculation of ResultsA. Typical DataB. Sensitivity and Recovery 8 9 9IX.Troubleshooting Guide10I. INTRODUCTIONThe RayBio®I mmuno Q uantitative E nzyme L inked I mumuno S orbent A ssay (IQELISA) is an innovative new assay that combines the specificity and ease of use of an ELISA with the sensitivity of real-time PCR. This results in an assay that is simultaneously familiar and cutting edge and enables the use of lower sample volumes while also providing more sensitivity. The RayBio® Mouse Osteopontin IQELISA Kit is a modified ELISA assay with high sensitivity qPCR readout for the quantitative measurement of Mouse Osteopontin in serum, plasma, and cell culture supernatants. This assay employs an antibody specific for Mouse Osteopontin coated on a 96-well PCR plate. Standards and samples are pipetted into the wells and Osteopontin present in a sample is bound to the wells by the immobilized antibody. The wells are washed and a detection affinity molecule is added to the plates. After washing away unbound detection affinity molecule, primers and a PCR master mix are added to the wells and data is collected using qPCR. C t values obtained from the qPCR are then used to calculate the amount of antigen contained in each sample, where lower C t values indicate a higher concentration of antigen.II. REAGENTS1.Osteopontin Microplate (Item A)**: 96 well PCR plate coated with anti-Mouse Osteopontin.2.Wash Buffer I Concentrate (20x) (Item B): 25 ml of 20x concentrated solution.3.Standards (Item C): 2 vials of recombinant Mouse Osteopontin.4.Assay Diluent A (Item D): 30 ml diluent buffer, 0.09% sodium azide as preservative. ForStandard/Sample (serum/plasma) diluent.5.Assay Diluent B (Item E): 15 ml of 5x concentrated buffer. For Standard/Sample (cell culturemedium/urine) diluent.6.Detection Affinity Reagent for Osteopontin (Item F): 2 vials of a 4x concentrated solution of anti-MouseOsteopontin affinity reagent.7.IQELISA Detection Reagent (Item G): 1.4mL of a 10x concentrated stock.8.Primer Solution (Item I): 1.7mL vial.9.PCR Master Mix (Item J): 1.2mL vial.10.PCR Preparation buffer (Item K): 1mL vial of 10x concentrated buffer.11.Final Wash Buffer (Item L): 10ml vial of 10x concentrated buffer.**The PCR plate used is a 0.2mL, non-skirted 96-well plate (ThermoFisher, cat. no.: AB0600). Please ensure compatibility with your PCR machine prior to purchase. For additional information contact technical support ( **************************).III. STORAGEMay be stored for up to 6 months at 2°to 8°C from the date of shipment. Standard (recombinant protein) should be stored at -20°C or -80°C (recommended at -80°C) after reconstitution. Opened PCR plate or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C.Note: the kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C. Avoid repeated freeze-thaw cycles. IV. ADDITIONAL MATERIALS REQUIRED1.Real-time PCR instrument, Bio-Rad recommended2.Precision pipettes to deliver 2µl to 1 ml volumes.3.Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation.4.100 ml and 1 liter graduated cylinders.5.Absorbent paper.6.Distilled or deionized water.7.Log-log graph paper or computer and software for data analysis.8.Tubes to prepare standard or sample dilutions.9.Heating block or water bath capable of 80°CV. REAGENT PREPARATION1.Bring wash buffer, samples, assay diluents, and PCR plate to room temperature (18 - 25°C) before use.PCR master mix and Primer solution should be kept at 4°C at all times.2.Sample dilution: If your samples need to be diluted, 1x Assay Diluent B should be used for dilution ofserum/plasma samples. Assay Diluent A maybe used in place if significant matrix affects are seen.Suggested dilution for normal serum/plasma: 20 - 500 fold*.*Please note that levels of the target protein may vary between different specimens. Optimal dilutionfactors for each sample must be determined by the investigator.3.Assay Diluent B should be diluted 5-fold with deionized water.4.Briefly spin the Detection Antibody vial before use. Add 25 µl of 1X Assay Diluent B into the vial toprepare a detection antibody concentrate. Pipette up and down to mix gently (the concentrate can bestored at 4°C for 5 days). This concentrate should be diluted 80-fold with 1X Assay Diluent B and used in step 4 of the Assay Procedure.5.PCR preparation buffer should be transferred to a 15mL tube and diluted with 9mL of deionized ordistilled water before use.6.Final Wash Buffer should be transferred to a 15mL tube and diluted with 9mL of deionized or distilledwater for every 1mL of 10x concentrate used before use.7.Preparation of standard: Preparation of standard: Briefly spin a vial of Standards. Add 400 µl 1x AssayDiluent B into Standards vial to prepare a 50 ng/ml standard solution. Dissolve the powder thoroughly bya gentle mix. Add 20 µl OPN standard from the vial of Standards, into a tube with 480 µl 1x AssayDiluent B to prepare a 2,000 pg/ml standard solution. Pipette 300 µl 1x Assay Diluent B into each tube.Use the stock standard solution to produce a dilution series (shown below). Mix each tube thoroughly before the next transfer. 1x Assay Diluent B serves as the zero standard (0 pg/ml).20 µl + 480 µl100 µl+ 300 µl100 µl+ 300 µl100 µl+ 300 µl100 µl+ 300 µl100 µl+ 300 µl100 µl+ 300 µl2000 pg/ml500pg/ml125pg/ml31.25pg/ml7.813pg/ml1.953pg/ml0.488pg/mlpg/ml8.If the Wash Buffer Concentrate (20x) contains visible crystals, warm to room temperature and mix gentlyuntil dissolved. Dilute 20 ml of Wash Buffer Concentrate into deionized or distilled water to yield 400 ml of 1x Wash Buffer.9.Prepare the IQELISA detection reagent by calculating how much will be needed. This may beaccomplished by multiplying the number of wells to be assayed by the volume you plan to use per well.Once the volume of IQELISA detection reagent is known, prepare the reagent by diluting it 1:10 with deionized water and mixing thoroughly.VI. ASSAY PROCEDURE1.Bring all reagents and samples to room temperature (18 - 25°C) before use. It is recommended that allstandards and samples be run in triplicate. Partial plate runs may be accomplished by cutting the PCR plate into the desired number of strips using a pair of sturdy scissors, wire cutters, or shears. Theremainder may be saved and used for a later date. If this is done, the PCR Plate Film should also be cut toa suitable size.2.Add 10-25µl of each standard (see Reagent Preparation step 2) and sample into appropriate wells.Volumes should be consistent between all wells, samples, and standards. As little as 10µL can be used if sample volume is limited, however this increases the chance of technical error. Ensure there are nobubbles present at the bottom of the wells. Dislodge any bubbles with gentle tapping or with a pipette tip being careful not to contact the sides or bottom of the well. Cover well and incubate for 2.5 hours at room temperature or overnight at 4°C with gentle shaking.3.Discard the solution and wash 4 times with 1x Wash Solution. Wash by filling each well with WashBuffer (100 µl) using a multi-channel Pipette or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Buffer by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.4.Add 25 µl of prepared Detection Antibody (Reagent Preparation step 4) to each well. Incubate for 1 hourat room temperature with gentle shaking.5.Discard the solution. Repeat the wash as in step 3.6.Add 25µL of prepared IQELISA detection reagent and incubate 1 hour with rocking (Reagent Preparationstep 9)7.Discard the solution. Repeat the wash as in step 3.8.Add 100µL of Final wash buffer to each well and incubate for 5 minutes with rocking. Remove thesolution from each well and repeat an additional 2x.9.Add 100µL of 1x PCR preparation buffer to each well and incubate with rocking for 5 minutes beforeremoving the buffer. Blot the plate after the buffer is removed to ensure complete removal of the buffer.10.Add 15µL of the Primer solution to each well of the plate. At this stage the plate can be covered andstored at -20°C for use the next day if needed.11.Add 10µL of PCR Master Mix to each well and pipette thoroughly to mix the well (at least 3x up anddown).12.Cover the plate with the supplied PCR Plate Film, taking care to insure the film is completely and evenpressed onto the plate, creating an air tight seal around each well of the plate.13.Place the plate into a real-time PCR instrument using a FITC compatible wave length for detection withthe following settings for cycling1.3 minute activation at 95°C2.10 seconds 95°C denaturation3.25 seconds 62°C annealing/extension4.Repeat steps 2 and 3 29xVII. ASSAY PROCEDURE SUMMARY1.Prepare all reagents, samples and standards as instructed.2.Add 25µl standard or sample to each well.Incubate 2.5 hours at room temperature or overnight at 4°C.3.Add 25µl Detection Antibody to each well.Incubate 1 hour at room temperature.4.Add 25µL of IQELISA Detection Reagent to each well. Incubate 1 hour5.Add 15µl Primer solution and 10µL of PCR master mix to each well6.Run real-time PCRVIII. CALCULATION OF RESULTSThe primary data output of the IQELISA kit is C t values. These values represent the number of cycles required for a sample to pass a fluorescence threshold. As the DNA is amplified additional fluorescent signal is produced, with each cycle resulting in an approximate doubling of the DNA. Therefore, higher levels of DNA (directly related to the amount of antigen in the sample) result in lower C t values.Calculate the mean C t for each set of triplicate standards, controls and samples. Subtract the C t value of each sample from the control to obtain the difference between the control and sample (Delta C t). Plot the values of the standards on a graph using a log scale for concentration on the x axis. This graph is the quickest way to visualize results, although not the most accurate. If this method is used the concentration of unknown samples can be estimated using a logarithmic line of best fit.The line of best fit will have an equation y = mln(x)+b, where y is the Delta C t value and x is the concentration. It may be helpful to use 5 significant figures for m and b to minimize rounding errors. To calculate the concentration of unknown sample this can be entered into Excel in the following format=EXP((y-b)/m))Where y is the Delta C t obtained during the assay, and b and m are obtained from the line of best fit Alternatively, for a more accurate representation linear regression may be used. Both the Delta C t and Concentration can be transformed using a log base of 10, plotted on a graph as described above, along with a line of best fit (using a linear model). The equation of this line may be used to calculate the antigen concentration of unknown samples. This is the method used for the analysis spreadsheet for IQELISA available online.A. TYPICAL DATAThese data are for demonstration only. A standard curve must be run with each assay.B. SENSITIVITY and RECOVERYThe minimum quantifiable dose of Osteopontin is typically 0.49 pg/ml, however levels as lower than 0.49 pg/ml may be detected outside of the quantification range.Serum spike tests show recovery is 93% with a ranfe from 84% to 100%ntraplate CV is below 10% for all samples and Interplate CV is below 15%X. TROUBLESHOOTING GUIDEProblem Cause SolutionPoor standard curve Inaccurate pipettingImproper standard dilutionCheck pipettesBriefly centrifuge standards and dissolve thepowder thoroughly by gently mixingLow signal Too brief incubation timesInadequate reagent volumes orimproper dilutionEnsure sufficient incubation time. Assayprocedure step 2 may be done overnightCheck pipettes and ensure correct preparationLarge CV Uneven pipettingBubbles present in wellsCheck pipettesLightly tap or use pipette tip to dislodge frombottom of wellHigh background Plate is insufficiently washedContaminated wash bufferImproper TmReview the manual for proper wash. If using aplate washer, ensure that all ports areunobstructed.Make fresh wash bufferCheck run parameters and calibrate instrumentLow sensitivity Improper storage of theIQELISA kitImproper TmStore your standard at <-20°C afterreconstitution, others at 4°C.Check run parameters and calibrate instrumentThis product is for research use only.©2019 RayBiotech, Inc11。
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上海笃玛生物科技有限公司本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断小鼠（Mouse）转铁蛋白（TRF）ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被转铁蛋白（TRF）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的转铁蛋白（TRF）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成上海笃玛生物科技有限公司名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、0.5、1、2、4、8g/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤1.从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min 内，在450nm 波长处测定各孔的OD 值。
结果判断绘制标准曲线：在Excel 工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD 值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最低检测浓度小于0.1g/L。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
上海笃玛生物科技有限公司FOR RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Mouse transferrin (TRF)ELISA Kit instruction Intended useThis TRF ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of TRF in the sample,this TRF ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus TRF concentration.The concentration of TRF in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum -Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30minutesbefore centrifugation for 10minutes at approximately 3000×g.Remove serum andassay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma -Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifugesamples for 30minutes at 3000×g at 2-8℃within 30minutes of collection.Store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids -Remove particulatesby centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note:The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis orgranule was allowed.Materials required but not supplied1.Standard microplate reader(450nm)2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.3.37℃incubatorPrecautions1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and microplates are matched for optimal e only the reagents supplied by上海笃玛生物科技有限公司manufacturer.2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused stripsshould be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature (20-25°C)Materials suppliedName 96determinations48determinationsMicroelisa stripplate12*8strips 12*4strips Standard 0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent 6.0ml 3.0ml HRP-Conjugate reagent 10.0ml 5.0ml 20X Wash solution 25ml 15ml Chromogen Solution A 6.0ml 3.0ml Chromogen Solution B6.0ml 3.0ml Stop Solution 6.0ml 3.0ml Closure plate membrane22User manual 11Sealed bags11Note:Standard (S0→S5)concentration was followed by:0,0.5,1,2,4,8g/LReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.Assay procedure1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard 50μl tostandard well.3.Add Sample:Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testingsample well;Blank well doesn’t add anyting.4.Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive stripand incubate for 60minutes at 37°C.5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of fivewashes.Wash by filling each well with Wash Solution (400μl )using a squirt bottle,manifold dispenser or plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.6.Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well.Gently mix and incubate for 15minutes at 37°C.Protect from light.上海笃玛生物科技有限公司7.Add 50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.Read the Optical Density (O.D.)at 450nm using a microtiter plate readerwithin 15minutes.Calculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm)obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y)axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X)axis.2.First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time or temperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is 0.1g/L6.StandardcurveStorage ：2-8℃.上海笃玛生物科技有限公司validity ：six months.FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGHENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!。