人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究刘静
西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌CNE-1细胞活力的影响及其可能的分子机制探讨
西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌CNE-1细胞活力的影响及其可能的分子机制探讨王文慧;王晓玲【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2015(21)20【摘要】Objective To study the effect of cetuximab combined with paclitaxel on proliferation and migration of nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1 and its possible molecular mechanism.Methods Nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1 were cultured and divided into blank contrast group,cetuximab group,paclitaxel group and combination group.Then cell vitality was detected by MTT,migration was detec-ted by wound-healing assay and level of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2),epithelial growth factor recep-tor (EGFR) was detected by real-time PCR and Western-blot.Results ①MTT value(36 ±7) and migra-tion ability(21 ±6) of the combination group were lower than MTT value(62 ±10) andmigr ation ability(55 ±10) of the cetuximab group,MTT value(59 ±11) and migration ability(57 ±10) of the paclitaxel group (P<0.05).②EGFR,MMP-2 mRNA levels (50 ±14),(45 ±11) of the combination group were lower than (67 ±18),(69 ±16) of the cetuximab group,(60 ±17),(64 ±19) of the paclitaxel group(P <0.05);EGFR,MMP-2 protein levels (43 ±13),(36 ±8) of the combination group were lower than (69 ± 15),(64 ±10) of the cetuximab group and (56 ±14),(63 ±9) of the paclitaxel group(P <0.05).Conclusion Cetuximab combined with paclitaxel can reduce the migration and proliferation ability of carci-noma cell line CNE-1,and inhibition on MMP-2,EGFR might be the molecular mechanisms.%目的:研究西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌 CNE-1细胞活力的影响及其可能分子机制。
人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体蛋白表达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究
人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体蛋白表达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究刘静;王斌斌;刘斐叶;左强【摘要】Objective:To study the correlation between epidermal growth factor receptor(EGFR) expression and inhibition ratios of cetuximab in human nasopharyngeal carcinoma cell lines. Methods: The level of EGFR protein expression of several human nasopharyngeal carcinoma cell lines, including CNE-1 , CNE-2, HONE-1 , C-666, SUNE-1 , 5-8F and HNE-1 were detected by Western blotting. The cell inhibition ratios of cetuximab were measured using MTT method. Results: When the density of cetuximab was 1500μg/mL. there was significant positive correlation between EGFR protein expression and inhibition ratio of cetuximab(r= 0. 444. P = 0.044). However, there was significant negative correlation when the density was 1800 μg/mL (r=-0.468. P = 0.032). Conclusions: There is no correlation between EGFR protein expression and inhibition ratios of cetu ximab. and the level of EGFR protein expression can't serve as a marker in predicting the therapeutic effect of cetuximab.%目的:探讨人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞株中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白的表达水平与西妥昔单抗细胞抑制率的相关性.方法:用蛋白质印迹法检测人NPC细胞株CNE-1、CNE-2、HONE-1、C-666、SUNE-1、5-8F 以及HNE-1共7种细胞株中EGFR蛋白的表达水平,用MTT法检测西妥昔单抗对细胞株的抑制率.结果:西妥昔单抗浓度为1 500μg/mL时,EGFR蛋白表达水平与抑制率呈正相关(r=0.444,P=0.044),西妥昔单抗浓度增加至1800μg/mL时,两者呈负相关(r=0.468,P=0.032).结论:在NPC细胞株中,EGFR蛋白表达水平与西妥昔单抗的细胞抑制率之间无相关性,EGFR蛋白表达水平不能作为预测西妥昔单抗疗效的指标.【期刊名称】《中国临床医学》【年(卷),期】2012(019)006【总页数】3页(P582-584)【关键词】西妥昔单抗;鼻咽癌;表皮生长因子受体【作者】刘静;王斌斌;刘斐叶;左强【作者单位】南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州 510515;南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州 510515;南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州510515;南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州 510515【正文语种】中文【中图分类】R739.6表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因定位于染色体7p12[1]。
西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌CNE-1细胞抑制作用及其分子机制研究
西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌CNE-1细胞抑制作用及其分子机制研究刘洋;张幸平;杨帆;唐龙;刘梅【期刊名称】《重庆医科大学学报》【年(卷),期】2014(39)5【摘要】目的:研究西妥昔单抗(Cetuximab)联合紫杉醇(Paclitaxel,PTX)对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)CNE-1细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。
方法:培养人NPC CNE-1细胞株,随机分为空白对照组、Cetuximab组、PTX组、联合用药组。
用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,逆转录PCR(RT-PCR法)及Western blot法检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的mRNA和蛋白表达。
结果:联合用药组的细胞抑制率高于Cetuximab 组和PTX组(P值分别为0.002、0.000);联合用药组的凋亡率高于Cetuximab组和PTX组(P值均为0.000);联合用药组的EGFR、MMP-2的mRNA表达均低于Cetuximab组和PTX组(各组间EGFR mRNA的表达P值分别为0.000、0.001;MMP-2 mRNA的表达P值均为0.000);联合用药组的EGFR、MMP-2的蛋白表达均低于Cetuximab组和PTX组(各组间EGFR蛋白的表达P值均为0.000;MMP-2蛋白的表达P值分别为为0.000、0.006)。
结论:Cetuximab联合PTX能够抑制人NPC CNE-1细胞的增殖,促进其凋亡,两者联用具有协同作用,其分子机制可能是通过抑制肿瘤细胞EGFR、MMP-2的表达来实现。
【总页数】4页(P626-629)【关键词】西妥昔单抗;紫杉醇;鼻咽癌;增殖;凋亡【作者】刘洋;张幸平;杨帆;唐龙;刘梅【作者单位】重庆医科大学附属第一医院肿瘤科【正文语种】中文【中图分类】R739.6【相关文献】1.人鼻咽癌紫杉醇耐药细胞株CNE-1/Taxol的建立及其机制初探 [J], 褚玉敏;谭国林;马艳红2.c-Met抑制剂对人鼻咽癌细胞株CNE-1的生长抑制作用 [J], 李琦;刘同欣;王融;王玮3.西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌CNE-1细胞活力的影响及其可能的分子机制探讨 [J], 王文慧;王晓玲4.紫杉醇联合热疗对鼻咽癌CNE-1细胞株增殖及凋亡的影响 [J], 王承龙;张帅;赵素萍;肖健云5.西妥昔单抗联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用的实验研究 [J], 杨敏;张幸平;程丽;周涛琪;饶明月因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究_刘静
Chinese Journal of Clinical Medicine,2012.Vol.19,No.6 中国临床医学 2012年12月 第19卷 第6期 ·论著· 人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体蛋白表达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究刘静 王斌斌 刘斐叶 左强(南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州 510515)摘要 目的:探讨人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞株中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白的表达水平与西妥昔单抗细胞抑制率的相关性。
方法:用蛋白质印迹法检测人NPC细胞株CNE-1、CNE-2、HONE-1、C-666、SUNE-1、5-8F以及HNE-1共7种细胞株中EGFR蛋白的表达水平,用MTT法检测西妥昔单抗对细胞株的抑制率。
结果:西妥昔单抗浓度为1500μg/mL时,EGFR蛋白表达水平与抑制率呈正相关(r=0.444,P=0.044),西妥昔单抗浓度增加至1800μg/mL时,两者呈负相关(r=-0.468,P=0.032)。
结论:在NPC细胞株中,EGFR蛋白表达水平与西妥昔单抗的细胞抑制率之间无相关性,EGFR蛋白表达水平不能作为预测西妥昔单抗疗效的指标。
关键词 西妥昔单抗; 鼻咽癌; 表皮生长因子受体中图分类号 R739.6 文献标识码 ACorrelation between the Expression of EGFR and the Inhibition Ratios of Cetuximab in Human Nasopharynge-al Carcinoma Cell Lines LIU Jing WANG Binbin LIU Feiye ZUO Qiang Cancer Center,NanfangHospital,the Southern Medical University,Guangzhou 510515,ChinaAbstract Objective:To study the correlation between epidermal growth factor receptor(EGFR)expression and inhibition ra-tios of cetuximab in human nasopharyngeal carcinoma cell lines.Methods:The level of EGFR protein expression of several hu-man nasopharyngeal carcinoma cell lines,including CNE-1,CNE-2,HONE-1,C-666,SUNE-1,5-8F and HNE-1 were detec-ted by Western blotting.The cell inhibition ratios of cetuximab were measured using MTT method.Results:When the densityof cetuximab was 1500μg/mL,there was significant positive correlation between EGFR protein expression and inhibition ratioof cetuximab(r=0.444,P=0.044).However,there was significant negative correlation when the density was 1800μg/mL(r=-0.468,P=0.032).Conclusions:There is no correlation between EGFR protein expression and inhibition ratios of cetuximab,and the level of EGFR protein expression can’t serve as a marker in predicting the therapeutic effect of cetuximab.Key Words Cetuximab; Nasopharyngeal carcinoma; Epidermal growth factor receptor基金项目:广东省自然科学基金(编号:S2011040003062);南方医院院长基金(编号:2009C028)刘静和王斌斌为共同第一作者通讯作者 左强,E-mail:nfyyzq@126.com 表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor,EGFR)基因定位于染色体7p12[1]。
西妥昔单抗对人鼻咽癌细胞抑制作用的体外研究
DP 进行研究 , 了解 C225 对亲代 H NE1 和耐药细胞株 H NE1/ CDDP 的作用 , 并探讨 C225 与 DDP 不同先后 次序联合的疗效差异 , 为 C225 在进展期鼻咽癌的临 床应用提供理论依据。
细胞生长抑率( % ) = ( 1-
药物处理组 OA 值- 空白对照组 OA 值 无药对照组 OA 值- 空白对照组 隆形成实验 将 H NE1 和 H NE1/ CDDP 细胞常 规消化、 配置 为 50 个 / mL 细 胞 悬 液 , 均 以 2 m L/ 皿 接 种 于 直 径 60 mm 培养 皿 中培 养 24 h 后 , 实验 组更 换含 C225 10 g/ m L 培养基 5 m L/ 皿培养 1、 4 和 10 d 后 , 分别更 换无药培养基培养至第 12 天后中止培养; 而无药对照 组相应更换无药培养基孵育至第 12 天后中 止培养。 用 95% 乙醇固定 , 已过滤的苏木精染色, 计数 > 50 个 细胞的细胞集落。每组实验设 3 个平行样本。 实验分组同 1. 4。把细胞配置为 200 个/ mL 细胞 悬液 , 接种于直径 60 mm 培养皿中 , 不同实验分组接 种不同细胞数。孵育 24 h 后, c 组和 d 组更换含 C225 10 g / mL 培养基 5 mL / 皿, a 组和 b 组更换无药培养 基, 继续孵育 4 d。然后 H NE1 的 b 组和 d 组细胞更 换含 8 g/ m L DDP 培养基 5 mL / 皿 , 而 H NE1/ CD DP 的 b 组和 d 组的 DDP 作用浓度为 32 g/ m L, 均作 用 1 h 后, 用 N S 洗 2 次, 最后所有实验组均更换无药 培养基继续孵育 8 d 后中止培养。固定、 染色和计数 方法同前。每组实验设 3 个平行样本, 重复实验 3 次, 结果取平均值。 取 2 瓶接种细胞数均为 2 5 10 个 / 瓶、 且处于 对数 生 长 期 的 H NE1 细 胞 , 其 中 1 瓶 用 含 DDP 2 g / mL 的培养基3 mL 作用 1 h, 用 NS 洗 3 次后配置 为 100 个 / mL 细胞悬液, 以 2 m L / 皿接种于培养皿中 作为 b 组和 d 组 ; 另 1 瓶细胞用含等体积 N S 培养基 作用 1 h 后配置为 50 个/ mL 细胞悬液, 以 2 mL / 皿接 种于培养皿中, 作为 a 组和 c 组。孵育 24 h 后 , c 组和 d 组更换含 C225 10 g/ mL 培养基 5 m L/ 皿, a 组和 b 组更换无药培养基孵育 4 d。最后均更换无药培养基 继续培养 8 d 后中止培养。固定、 染色和计数方法同 前。每组实验设 3 个平行样本 , 重复实验 2 次 , 结果取 平均值。 H NE1/ DDP 细胞的 b 组和 d 组的 DDP 作用 浓度为8 g/ m L, 余实验步骤与 H NE1 细胞相同。 1. 6 体外实验药物联合作用分析 采用金正均氏公式法[ 6] 分析 10 g/ mL C225 与不 同浓度 DDP 以不同方式序贯联合作用于细胞的联合作 用, 其公式如下。 EA 和 EB 分别为 A 药和 B 药单用的 抑制率, E A+ B 为实际两药联合的抑制率。q 值的意义 : 0 85~ 1 15 为相加作用, > 1 15~ 20 为增强, > 20 为显 著增强, < 0 85~ 0 55 为拮抗, < 0 55 为明显拮抗。 q= 1. 7 统计学方法
免疫检查点抑制剂在鼻咽癌治疗中的研究进展
免疫检查点抑制剂在鼻咽癌治疗中的研究进展
刘钦;孙殿水
【期刊名称】《世界肿瘤研究》
【年(卷),期】2024(14)2
【摘要】鼻咽癌是最常见的头颈部肿瘤之一,发病与EB病毒密切相关,其标准治疗方式是同步放化疗,但是其复发和远处转移是造成鼻咽癌预后不佳的难题,随着免疫治疗在其他实体瘤中取得较大的进展,免疫检查点抑制剂也逐渐应用于鼻咽癌,并体现其临床价值,本文对免疫检查点抑制剂单药及联合化疗、靶向、放疗治疗复发或转移性鼻咽癌的研究进展进行综述。
【总页数】6页(P82-87)
【作者】刘钦;孙殿水
【作者单位】山东大学第二医院肿瘤防治中心济南
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.免疫检查点抑制剂的新辅助免疫治疗在肌层浸润性膀胱癌中的研究进展
2.化疗联合抗PD1免疫检查点抑制剂在复发或转移性鼻咽癌中的治疗效果及其安全性评价
3.免疫检查点抑制剂在肌层浸润性膀胱癌新辅助免疫治疗中的应用研究进展
4.新型免疫检查点抑制剂T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制性基序结构域在抗肿瘤免疫治疗中的研究进展
5.免疫检查点抑制剂在dMMR/MSI-H型局部进展期结直肠癌新辅助免疫治疗中的研究进展
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
西妥昔单抗体外增强人鼻咽癌细胞对紫杉醇化疗敏感性的实验研究
DOI:10.3969/j.issn.1671-4695.2020.12.016 文章编号:1671-4695(2020)12-1287-05西妥昔单抗体外增强人鼻咽癌细胞对紫杉醇化疗敏感性的实验研究陈新 刘丹 (湖北省中西医结合医院耳鼻喉科 湖北 武汉 430015)基金项目:湖北省教学研究基金资助项目(编号:2016231) 【摘要】 目的 观察西妥昔单抗(C225)体外增强人鼻咽癌CNE-1细胞对紫杉醇(PTX)化疗敏感性作用,并探讨可能的作用机制。
方法 将人鼻咽癌CNE-1细胞株随机分为对照组、PTX组、联合用药组,PTX组采用30μg/mlPTX处理,联合用药组采用30μg/mlPTX+250μg/mlC225处理,对照组加入等体积的二甲基亚砜(DMSO)。
MTT法检测细胞的PTX耐药性,取对数期的CNE-1细胞分为9组,4组分别加入浓度为0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L的PTX;另有4组也加入PTX,同时加入C225,使C225最终浓度为250μg/ml,空白对照组中加入等体积的DM SO,培养48h。
MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布,Westernblotting、RT-PCR分别检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、BCL2-相关X蛋白(Bax)蛋白水平及其基因相对表达量。
结果 PTX组CNE-1细胞抑制率为(15.99±2.13)%,联合用药组CNE-1细胞抑制率为37.10%(37.10±2.48)%,差异有统计学意义(t=11.184,P=0.000)。
与对照组相比,PTX组、联合用药组的细胞凋亡率、G0~G1期细胞比率均升高(P<0.05),而S期细胞比率降低(P<0.05)。
与PTX相比,联合用药组的细胞凋亡率、G0~G1期细胞比率升高(P<0.05),S期细胞比率与M期细胞比率均明显降低(P<0.05)。
西妥昔单抗对非小细胞肺癌细胞的体外抑制作用
西妥昔单抗对非小细胞肺癌细胞的体外抑制作用陈真;陈智伟【摘要】背景与目的目前抗EGFR单抗--西妥昔单抗在肺癌的临床运用越来越广泛.本研究旨在探讨西妥昔单抗对人肺癌细胞株(A549、H460、H1299、SPC-A-1)的体外作用.方法我们选用浓度递增的西妥昔单抗 (1 nmol/mL-625 nmol/mL)作用于A549、SPC-A-1、H460、H1229四株细胞株,采用CCK8测定各组细胞增殖抑制情况,选择A549、SPC-A-1细胞株用PI标记应后用流式细胞技术观察细胞凋亡情况,并采用免疫蛋白印迹法检测药物处理后A549细胞EGFR信号转导通路关键酶的表达.结果西妥昔单抗对A549、H460、H1299、SPC-A-1细胞的作用均呈时间和浓度依赖性,作用后细胞的凋亡现象明显,同时细胞增殖均不同程度受到抑制;通过Western blot检测发现p-AKT、p-EGFR、p-MAPK蛋白表达量较对照组明显下降.结论西妥昔单抗在体外对肺癌细胞的增殖具有一定的抑制作用,其作用可能与进一步下调了活化的EGFR信号转导通路关键酶的表达有关.【期刊名称】《中国肺癌杂志》【年(卷),期】2010(013)008【总页数】4页(P769-772)【关键词】西妥昔单抗;肺肿瘤;细胞增殖;凋亡;表皮生长因子受体【作者】陈真;陈智伟【作者单位】200438,上海,上海市杨浦区市东医院病理科;200030,上海,上海交通大学附属胸科医院,上海市肺部肿瘤临床医学中心【正文语种】中文【中图分类】R734.2肺癌分子靶向治疗常用的治疗靶点有:细胞受体、信号传导和抗血管生成等,其中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)是目前最为主要的靶点。
目前已被美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration, FDA)批准用于临床治疗的EGFR家族特异性靶向药物主要分为两大类:一类是小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor, TKI),如吉非替尼(gefitinib)和厄洛替尼(erlotinib);另一类是人源化单克隆抗体,如EGFR特异性抗体西妥昔单抗(cetuxmab)和HER2特异性抗体赫赛汀(trastuzumab)。
西妥昔单抗对鼻咽癌放疗敏感性的增强作用及机制
西妥昔单抗对鼻咽癌放疗敏感性的增强作用及机制杨洁;祝淑钗【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2013(033)022【摘要】目的探讨西妥昔单抗(C225)对鼻咽癌细胞放疗的增敏作用及作用机制.方法 MTT生长抑制实验检测Co60-γ线对鼻咽癌CNE1细胞生长的半数抑制照射剂量(IC50值);Western印迹检测表皮生长因子受体(EGFR)磷酸化和总蛋白表达的变化.结果Co60γ线照射对鼻咽癌CNE1细胞生长的IC50值为(4.21±0.56) Gy,联用C225后,IC50值变为(2.07±0.34)Gy,有显著性差异(P<0.01),联用C225后放疗对鼻咽癌CNE1细胞的敏感性增加了2.03倍.Co60γ线照射CNE1细胞后6、12、24 h均检测到p-EGFR表达增加,联用C225后p-EGFR的表达出现了下调,总EGFR的表达无显著性改变.结论鼻咽癌放疗过程中存在EGFR的激活,C225抑制鼻咽癌放疗后所诱发的EGFR激活可能是其对鼻咽癌细胞放疗增敏作用的主要作用机制.【总页数】3页(P5669-5671)【作者】杨洁;祝淑钗【作者单位】河北医科大学第四医院放疗科,河北石家庄050011;河北医科大学第四医院放疗科,河北石家庄050011【正文语种】中文【中图分类】R739.6【相关文献】1.EGFR通路与结直肠癌细胞放疗敏感性的关系及西妥昔单抗对结直肠癌放疗敏感性的影响效果研究 [J], 梁磊2.西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌CNE-1细胞活力的影响及其可能的分子机制探讨 [J], 王文慧;王晓玲3.西妥昔单抗及氟尿嘧啶对大肠癌细胞放疗敏感性影响 [J], 任宏涛;王中卫;王宝锋;王亚利;黄珊;王西京4.Epstein Barr病毒编码的microRNA bart7调节鼻咽癌放疗敏感性的机制 [J], PENG Xianbing;DAI Runzhi5.西妥昔单抗联合紫杉醇对人鼻咽癌CNE-1细胞抑制作用及其分子机制研究 [J], 刘洋;张幸平;杨帆;唐龙;刘梅因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
Ras基因与鼻咽癌西妥昔单抗耐药的相关性研究
Ras基因与鼻咽癌西妥昔单抗耐药的相关性研究左强;罗荣城【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2010(030)006【摘要】目的探讨ras基因与鼻咽癌西妥昔单抗耐药的相关性.方法以人鼻咽癌细胞株5-8F细胞为研究对象,采用逐步增加剂量法诱导建立西妥昔单抗耐药细胞5-8F/Erbitux;MTT法检测西妥昔单抗对细胞的半数抑制浓度IC30,计算耐药指数(RJ);Western Blot法检测细胞H-ras、K-ras的蛋白表达;实时荧光定量PCR检测细胞ras-p21、H-ras以及K-ras基因的表达量:测序方法检测H-ras和K-ras基因第12、13、59、61密码子是否突变.结果建立了西妥昔单抗耐药的人鼻咽癌细胞系5-8F/Erbitux.西妥昔单抗作用3天和5天的RI分别为1.2和1.1;5-8F/Erbitux细胞H-ras和K-ras蛋白表达水平显著升高(P<0.001),H-ras基因表达量显著升高(P=0.016),K-ras基因表达量显著下降(P=0.000);ras-p21基因表达量有所升高,但差异不显著(P=0.113);通过比对,5.8F/Erbitux细胞H-ras基因、K-ras 基因第12、13、59、61密码子均无突变.结论 H-ras基因扩增与过表达是导致5-8F/Erbitux细胞对西妥昔单抗耐药的主要机制之一.【总页数】3页(P1415-1417)【作者】左强;罗荣城【作者单位】南方医科大学南方医院肿瘤科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院肿瘤科,广东,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R739.6【相关文献】1.人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体蛋白表达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究[J], 刘静;王斌斌;刘斐叶;左强2.鼻咽癌PTEN和survivin基因与西妥昔单抗耐药的相关性研究 [J], 左强;曹梦苒;罗荣城3.结直肠癌k-ras基因与多药耐药相关蛋白相关性研究 [J], 韩军平;林艳丽;王丽曾4.西妥昔单抗联合XELOX化疗对不同K-ras基因型晚期结直肠癌的效果临床与实践 [J], 蔡小彪;李金江;谢才琨5.西妥昔单抗联合化疗治疗KRAS基因野生型晚期结直肠癌伴肝转移患者临床效果观察及预后影响因素分析 [J], 曹玉娟;赵聪;姚艳红;王德林;杜芳;曹凤;郝龙英因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
抗表皮生长因子受体单抗联合X线照射对人鼻咽癌细胞株CNE-2的作用
抗表皮生长因子受体单抗联合X线照射对人鼻咽癌细胞株CNE-2的作用陈静;蓝玉玲;杨永强;刘宗文;曲宝林;李建雄;孟玲玲;冯林春【摘要】目的观察抗表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)尼妥珠单抗(h—R3)、西妥昔单抗fC225)分别联合X线照射对人鼻咽癌细胞株CNE-2的作用。
方法采用流式细胞仪测定CNE-2细胞表面EGFR表达情况;采用PCR—DNA测序技术筛选K—ras野生型CNE-2细胞;采用MTS法检测细胞增殖情况;采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线;通过流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡变化。
结果在调节CNE-2细胞克隆存活及凋亡方面,C225联合X线照射组的作用优于h—R3联合x线照射组俨〈0.05);在细胞增殖及细胞周期方面,h—R3联合X线照射组与C225联合x线照射组之间差异无明显统计学意义俨〉0.05)。
结论h—R3与C225均能提高X线照射对CNE-2细胞的抗肿瘤作用,C225对该细胞株杀伤作用略优于h-R3。
【期刊名称】《解放军医学院学报》【年(卷),期】2014(035)004【总页数】5页(P360-364)【关键词】表皮生长因子受体;西妥昔单抗;尼妥珠单抗;鼻咽癌;放射敏感性【作者】陈静;蓝玉玲;杨永强;刘宗文;曲宝林;李建雄;孟玲玲;冯林春【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】R73-3鼻咽癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。
鼻咽部的解剖结构和鼻咽癌的生物学特性决定了放射治疗是其主要的治疗手段,单纯X线照射5年生存率约为60%。
表皮生长因子受体是一种具有酪氨酸激酶活性的生长因子受体,在人类多种肿瘤组织中过度表达。
鼻咽癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的阳性表达率为68% ~ 89%,且其表达异常与肿瘤增殖、分化、血管形成、侵袭转移和放化疗抵抗明显相关[1-4]。
用BIAcore系统研究西妥昔单克隆抗体与表皮生长因子受体的结合
用BIAcore系统研究西妥昔单克隆抗体与表皮生长因子受体的结合税雪;王慧;车津晶;陈知航;候禹男;程远国【期刊名称】《生物技术通讯》【年(卷),期】2009(020)004【摘要】目的:应用基于表面等离子体共振技术的BIAcore 3000系统研究国产西妥昔单克隆抗体(cetuximab)C225与可溶性重组人表皮生长因子受体(EGFR)的结合能力,并与国外已上市的西妥昔单抗Erbitux相比较.方法:在CM5传感器芯片上设置2个通道,一个氨基偶联重组人EGFR作为检测通道,另一个不固定EGFR作为空白参比通道;以HBS溶液作为工作液,流速为10 uL/min;活化与封闭芯片;再以10 uL/min的流速分别以梯度浓度进样C225和Erbitux,每个浓度级别检测2次;获得结合动态图谱,拟合处理后用软件模块进行参数计算.结果:C225与可溶性重组人EGFR的结合动力学常数K.为4.00x108 L/mol,KD为2.50x10-9 mol/L;而Erbitux与可溶性重组人EGFR的结合动力学常数KA为4.25x108 L/mol,KD为2.35x10r9 mol/L.结论:在与可溶性重组人EGFR的结合能力上,C225与Erbitux有相似的结合动力学特性.【总页数】4页(P541-544)【作者】税雪;王慧;车津晶;陈知航;候禹男;程远国【作者单位】军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071;军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071;军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071;军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071;军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071;军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071【正文语种】中文【中图分类】R96【相关文献】1.曲妥珠单克隆抗体emtansine治疗晚期人表皮生长因子受体2阳性乳腺癌有优越性 [J], 武海东2.西妥昔单克隆抗体联合XELOX化疗治疗老年晚期直肠癌的近远期效果及其对ICAM-1、Cox-2和CK-20水平的影响 [J], 黄展易;杨昌谋;郭俊宇;覃安强;郭厚基3.原发性肝癌患者外周血KRAS基因水平及其对西妥昔单克隆抗体治疗疗效的影响[J], 崔发强;李涛;王铮;陈青4.利妥昔单克隆抗体局部注射联合甲基强地松龙治疗甲状腺相关性眼病的临床疗效分析 [J], 王萍; 张少波; 张琼; 李养军5.利妥昔单克隆抗体联合激素治疗原发免疫性血小板减少症的疗效及安全性分析[J], 丁万宝; 邓磊; 张培先; 李岩; 张洁因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
西妥昔单抗联合同步放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的护理干预
西妥昔单抗联合同步放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的护理干预陈华(江苏省泰兴市人民医院放疗科,江苏泰兴,225400)摘要:目的探讨西妥昔单抗联合同步放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的护理干预措施。
方法观察12例接受西妥昔单抗联合同步放化疗治疗局部晚期鼻咽癌患者在治疗期间出现的毒副反应,并采取针对性的护理措施。
结果对12例患者应用西妥昔单抗联合同步放化疗的局部晚期鼻咽癌患者进行了针对性的护理,均顺利完成了同步放化疗及靶向治疗。
结论西妥昔单抗联合同步放化疗治疗局部晚期鼻咽癌可引起较重的毒副反应,但是通过有效的护理可以使得治疗顺利完成。
关键词:西妥昔单抗;鼻咽癌;放化疗;护理中图分类号:R473173文献标志码:A文章编号:1672-2353(2012)12-0010-03Nursing interventions on the locally advanced nasopharyngeal cancer patients treated with cetuximab combined with concurrent chemoradiotherapyCHEN Hua(T aix ing Peop le c s H osp ital,T aix ing,Jiangsu,225400)ABSTRAC T:Objective To study the nursing interventions on the locally advanced nasopha-ryngeal cancer patients treated w ith cetux imab combined w ith concurrent chemoradiotherapy. Methods The toxicity of12locally advanced nasopharyngeal cancer patients treated w ith cetux-imab combined w ith concurrent chemoradiotherapy w as observed,and corresponding nursing mea-sures w ere taken.Results All12patients have successfully completed the concurrent chemoradio-therapy and targeted therapy w ith targ eted nursing.Conclusion The treatment of cetux im ab com-bined with concurrent chemoradiotherapy for locally advanced nasopharyngeal cancer patients could cause serious adverse reactions,but the effective nursing can ensure a successful treatment.KEY WORDS:cetuximab;nasopharyngeal cancer;chemoradiotherapy;nursing目前针对表皮生长因子受体(EGFR)设计的分子靶向药物西妥昔单抗是一种抗EGFR的IgG1单克隆抗体,它可特异阻断EGFR介导的信号传导通路,同时引起EGFR内吞与降解,并诱导抗体依赖细胞介导的细胞毒作用,杀伤表达EGFR的肿瘤细胞[1-2]。
靶向表皮生长因子受体治疗鼻咽癌的研究进展
【摘要】鼻咽癌有着独特的流行病学特征,发病具有明显的地区聚集性,高发区集中在我国南方地区及东南亚国家。
随着影像诊断设备、放疗设备以及化疗药物的更新换代,国内鼻咽癌主要诊治中心报道的5年局部区域控制率达90%,5年无远处转移率达80%。
为了进一步提高疗效,寻找新的治疗策略是当前研究的热点。
表皮生长因子受体(EGFR )在鼻咽癌中呈高表达,表达率为90%左右,且与化疗耐药、放射抵抗及不良预后等密切相关。
因而,针对EGFR 的分子靶向治疗可能是进一步提高鼻咽癌疗效的合理治疗策略。
本文就靶向EGFR 治疗鼻咽癌的研究进展作一述评。
【关键词】鼻咽癌表皮生长因子受体西妥昔单抗尼妥珠单抗放射治疗陈晓钟,主任医师、浙江省肿瘤医院头颈放射治疗科主任。
中国抗癌协会鼻咽癌专业委员会副主任委员,浙江省抗癌协会鼻咽癌专业委员会主任委员,中国鼻咽癌临床分期工作委员会委员,浙江省肿瘤诊治质控中心常务副主任,浙江省放射治疗重点实验室副主任,浙江省抗癌协会理事,浙江省医学会放射治疗专业委员会常委兼秘书,浙江省抗癌协会放射治疗专业委员会常委。
《中国版头颈部肿瘤临床实践指南》专家组成员,参与制订脑胶质瘤放疗专家共识、鼻咽癌临床分期及调强放疗专家共识、转移鼻咽癌治疗专家共识。
澳大利亚玛特放疗中心进修学习,美国MD Anderson 癌症中心,Dan-Farb 癌症中心访问学者。
作为头颈放疗学科带头人,坚持以精准放射治疗为根本的头颈部肿瘤综合治疗模式。
举办多次全国继续教育学习班,推广头颈部肿瘤放射治疗的诊疗规范;主持参与国家自然基金2项;发表论文60余篇,其中被SCI 期刊收录30余篇,主编《鼻咽癌临床多学科诊断与鉴别诊断》《头颈部肿瘤典型病例集》,副主编《常见恶性肿瘤诊疗管理及技术规范》,参与著作编写5部。
表皮生长因子受体(epidermal growth factor recep -tor ,EGFR )是细胞分化和生长的重要信号转导通路,在正常细胞中表达很低。
鼻咽癌的靶向治疗
鼻咽癌的靶向治疗由于鼻咽部位置隐蔽,患者常无不适症状,易造成误诊、漏诊,在确诊患者中,70%已为中晚期。
近年来,针对中晚期患者的综合性个体化治疗已成为提高局部控制率与生存率的重要手段,然而常规放化疗手段毒性反应较大,部分患者不能耐受,有些患者对基于铂类的化疗耐药,对治疗抵抗。
越来越多的分子靶向药物被应用于鼻咽癌的联合放疗中,可较特异地阻断对肿瘤细胞生长起关键作用的信号传导通路,在杀死肿瘤细胞的同时,减少对正常细胞的影响,毒副反应轻,安全性较好,能有效改善患者生存率和生活质量。
抗个月对12.4183天,明,对于既往铂类治疗失败的复发或转移性鼻咽癌患者,西妥昔单抗+卡铂方案具有良好的临床有效性及安全性。
国内进行的多中心ENCORE研究纳入100例鼻咽癌患者进行调强放射治疗+同步放化疗+靶向治疗,放疗剂量为66~72?Gy/30~32?f,顺铂为80?mg/m2,每3周一次,同时每周应用西妥昔单抗。
中位随访330天,无局部复发及颈部淋巴结复发,4例发生远处转移。
该研究显示了西妥昔单抗治疗头颈部肿瘤的有效性。
尼妥珠单抗?尼妥珠单抗是国内正式上市的第一种人源化表皮生长因子单克隆抗体,人源化程度达95%,能显着抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤血管生成,诱导分化,促进细胞凋亡,增强放化疗疗效,其靶向性强、毒副作用低。
国内Ⅱ期临床试验结果表明,尼妥珠单抗+放化疗可将鼻咽癌3年生存率提高至84.29%。
目前西妥昔单抗己被列入2009年美国国立综合癌症网络(NCCN)头颈部肿瘤联合治疗指南,尼妥珠单抗也被2009年NCCN指南中国版推荐用于晚期鼻咽癌的联合治疗。
小分子TKI目前并无关于TKI的Ⅲ期临床研究,大多是集中于吉非替尼和厄洛替尼治疗复发或转移性头颈部鳞癌的Ⅰ/Ⅱ期临床研究。
期为6TKI缓解(PR洛替尼+尽管持。
性。
沃克斯(Vokes)等在2005年美国临床肿瘤学会(ASCO)年会上报告了厄洛替尼联合贝伐珠单抗治疗复发或转移性头颈部鳞癌的Ⅰ期和Ⅱ期研究,结果显示,这两种药物联合应用没有出现毒性协同作用,但出血问题值得注意,两药联合的有效率可能高于单药,提示有必要进行随机对照试验。
西妥昔单抗在晚期鼻咽癌治疗中的疗效和安全性分析
·62·
JOURNALOFBASICANDCLINICALONCOLOGYVol32No1Feb2019
每次用药时及用药后 8h,给予患者心电监护、血氧监 护等。出现严重超敏反应者,则立即停药。预防性应 用金银花水擦洗皮肤,含有利多卡因、地塞米松及庆大 霉素的漱口液漱口。出现皮肤瘙痒时,给予氢化可的 松软膏涂抹。合并感染时,给予抗生素控制感染。 1.3 近期疗效及安全性评价 近期疗效采用实体肿 瘤客观疗效评价标准评价,分为完全缓解(CR)、部分 缓解(PR)、稳定(SD)和进展(PD),以 PR+CR计算 总有效率,以 PR+CR+SD计算疾病控制率[3]。不良 反应评 价 采 用 美 国 国 立 癌 症 研 究 所 不 良 反 应 评 价 标准。
鼻咽癌患者早期发现比较困难,大多数发现时已 经是晚期,多伴有转移,单纯放疗 5a生存率较低。目 前,临床上放疗的同时给予化疗,极大提高了晚期鼻咽 癌的治疗效果,患者的 5a生存率明显提高。靶向药 物的应用也对晚期鼻咽癌治疗有益。表皮生长因子受 体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)在 头 面 部、 颈部鳞癌组 织 中 表 达 较 高,且 主 要 在 肿 瘤 的 生 长、分 化、增殖 过 程 中 发 挥 重 要 作 用[1]。西 妥 昔 单 抗 属 于 EGFR抑制剂,对鼻咽癌等头面部、颈部鳞癌有效。本 研究旨在进一步探讨西妥昔单抗在晚期鼻咽癌治疗中 的有效性和安全性。
3 讨论
放疗是鼻咽癌早期无转移时的最佳治疗方案。临 床上,大多数鼻咽癌发现时已经处于晚期。放疗加同 期化疗是治疗晚期鼻咽癌的标准方案[4-5]。靶向药物 西妥昔单抗来源于小鼠 IgG1,可以作为外源性配体, 特异性与 EGFR配体结合,抑制内源性配体与 EGFR
表皮生长因子受体单克隆抗体疗效预测因素的研究进展
C h i n J C l i n i e i a m( E l e e t r o n i e E d i t i o n ) . S e p t e m b e r 1 5 . 2 0 1 3 . V o 1 . 7 . N o
激酶受体基 因家族 【 l 】 a E G F R的活化分为 3个过程【 2 】 .( 1 ) E G F R
与配体结合后导致受体形 成同源二 聚体 ,也可与其他 E G F R家
族形成异源 二聚 体; ( 2 )形成 的二聚体促使 E G F R 胞 内区 6 个特异 的受体酪氨酸残基磷酸化 ,分别将 外界各种信号转导至
个 月,P=O . 1 7 )。在 K- r a s 突变型患者 中,联合应用反而显著
降低 患者 P F S( 中位 P F S :8 . 8个 月 4 0 %,P =O . 9 8 )都无显著差异 。 三 、其他潜在 的疗效预测 因素
7 . 3个月 ;P=O . 0 2 ),
K- r a s 基 因是实体瘤 中突变 频率较高的癌基因 ,属 l ' a s 癌基 因家族 ,1 0 % ̄2 0 %的肿瘤发生 与其基 因异常 有关 。K- r a s 基 因 突 变后 ,可 自主激活 E GF R信号转导途径 的下游通路 。西妥昔
单抗 ( e e t u x i ma b ,C- 2 2 5 )是针对 E G F R 为靶点的人 鼠嵌合型
E GF R单抗疗效 的独立 因素 。 帕尼单抗 ( p a n i t u mu ma b ,A B X- E G F ,Ve c t i b i x )是第一个 完全人源化的 i g c2抗 E GF R单克隆抗体 ,与 E G F R 的亲和 力 大约是西妥昔单抗 的 8 倍 ,其免疫原性显著 降低【 9 J 。P R I ME试 验是 一项应 用 帕尼单抗 联合 化疗 治疗转 移性 结直肠 癌 的多 中
表皮生长因子受体单抗导向药物(EQ75-ADR)的制备及对人表皮癌抑瘤作用的研究
表皮生长因子受体单抗导向药物(EQ75-ADR)的制备及对人表皮癌抑瘤作用的研究何颖;张尚权;赵峰;吴振华;王耀发;严缘昌【期刊名称】《中国肿瘤生物治疗杂志》【年(卷),期】2000(7)2【摘要】目的:制备抗表皮生长因子受体单克隆抗体(EQ75)与化疗药物阿霉素(ADR)、免疫偶联物(EQ75-ADR),研究该偶联物对人表皮癌A431的抑癌作用和小鼠的副作用,为最终应用于临床打下基础。
方法:用改进的戊二醛方法制备EQ75-ADR,MTT法检测EQ75-ADR对人表皮癌细胞A431和对照细胞人羊膜细胞Wish的48h和2h细胞毒作用,建立荷人表皮癌裸鼠模型和C57BL/6J小鼠模型,观察EQ75-ADR的抑瘤作用,比较EQ75-ADR和ADR对C57BL/6J的副作用。
结果:EQ75-ADR对A431细胞有明显的细胞毒作用,体外作用48h,EQ75-ADR对A431细胞的杀伤分别是EQ75,ADR和EQ75与ADR混合物(EQ75+ADR)的50倍,14倍和10倍,而EQ75-ADR对Wish细胞的杀伤只有ADR和EQ75+ADR的1/10,对Wish细胞的杀伤只有对A431细胞的1/300,2h作用得到类似结果。
EQ75-ADR显著抑制裸鼠体内肿瘤的生长,抑制率高达92.2%(P<0.01),对C57BL/6J小鼠的副作用明显低ADR。
结论:EQ75-ADR具有选择性杀伤作用,在体外和体内对表皮癌均?【总页数】4页(P135-138)【关键词】免疫偶联物;表皮生长因子受体;表皮癌;EQ75-ADR【作者】何颖;张尚权;赵峰;吴振华;王耀发;严缘昌【作者单位】中国科学院上海细胞生物学研究所;上海华东师范大学生物系【正文语种】中文【中图分类】R739.505【相关文献】1.抗程序性死亡配体1单抗和表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂对表皮生长因子受体敏感突变肺癌细胞中程序性死亡配体1表达和T细胞功能的影响 [J], 佘由;潘雪;邢玉斐;周童;张增利;施敏骅;陈永井2.曲妥珠单抗联合新辅助化疗对人表皮生长因子受体2阳性乳腺癌患者血清人表皮生长因子受体2/neu及免疫功能的影响 [J], 胡宏霞;卞海林;缪阳;彭伟3.人表皮生长因子受体2阳性乳腺癌与抗人表皮生长因子受体2新型药物 [J], 郭奕阳;朱彩虹4.马鞭草醇提液中有效部位的提取及筛选/马鞭草醇C部位抗人绒毛膜癌JAR细胞作用机制的研究/重度妊娠高血压综合征患者胎盘表皮生长因子受体的表达/不同孕期人滋养层细胞表皮生长因子受体及其mRNA表达的研究 [J],5.贝伐单抗联合卡培他滨治疗晚期转移性直肠癌及对血清表皮生长因子受体及人表皮生长因子受体表达的影响 [J], 曹冉华; 石秀换; 王薇; 王少军因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
Chinese Journal of Clinical Medicine,2012.Vol.19,No.6 中国临床医学 2012年12月 第19卷 第6期 ·论著· 人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体蛋白表达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究刘静 王斌斌 刘斐叶 左强(南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州 510515)摘要 目的:探讨人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞株中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白的表达水平与西妥昔单抗细胞抑制率的相关性。
方法:用蛋白质印迹法检测人NPC细胞株CNE-1、CNE-2、HONE-1、C-666、SUNE-1、5-8F以及HNE-1共7种细胞株中EGFR蛋白的表达水平,用MTT法检测西妥昔单抗对细胞株的抑制率。
结果:西妥昔单抗浓度为1500μg/mL时,EGFR蛋白表达水平与抑制率呈正相关(r=0.444,P=0.044),西妥昔单抗浓度增加至1800μg/mL时,两者呈负相关(r=-0.468,P=0.032)。
结论:在NPC细胞株中,EGFR蛋白表达水平与西妥昔单抗的细胞抑制率之间无相关性,EGFR蛋白表达水平不能作为预测西妥昔单抗疗效的指标。
关键词 西妥昔单抗; 鼻咽癌; 表皮生长因子受体中图分类号 R739.6 文献标识码 ACorrelation between the Expression of EGFR and the Inhibition Ratios of Cetuximab in Human Nasopharynge-al Carcinoma Cell Lines LIU Jing WANG Binbin LIU Feiye ZUO Qiang Cancer Center,NanfangHospital,the Southern Medical University,Guangzhou 510515,ChinaAbstract Objective:To study the correlation between epidermal growth factor receptor(EGFR)expression and inhibition ra-tios of cetuximab in human nasopharyngeal carcinoma cell lines.Methods:The level of EGFR protein expression of several hu-man nasopharyngeal carcinoma cell lines,including CNE-1,CNE-2,HONE-1,C-666,SUNE-1,5-8F and HNE-1 were detec-ted by Western blotting.The cell inhibition ratios of cetuximab were measured using MTT method.Results:When the densityof cetuximab was 1500μg/mL,there was significant positive correlation between EGFR protein expression and inhibition ratioof cetuximab(r=0.444,P=0.044).However,there was significant negative correlation when the density was 1800μg/mL(r=-0.468,P=0.032).Conclusions:There is no correlation between EGFR protein expression and inhibition ratios of cetuximab,and the level of EGFR protein expression can’t serve as a marker in predicting the therapeutic effect of cetuximab.Key Words Cetuximab; Nasopharyngeal carcinoma; Epidermal growth factor receptor基金项目:广东省自然科学基金(编号:S2011040003062);南方医院院长基金(编号:2009C028)刘静和王斌斌为共同第一作者通讯作者 左强,E-mail:nfyyzq@126.com 表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor,EGFR)基因定位于染色体7p12[1]。
EG-FR在人类部分肿瘤中呈高表达,其介导的信号传导与肿瘤发生、发展及预后密切相关。
鼻咽癌(na-sopharyngeal carcinoma,NPC)中EGFR高表达,并且这种高表达与不良预后相关[2]。
西妥昔单抗(cetuximab)是一种人/鼠嵌合型IgG单克隆抗体,可与细胞表面EGFR特异性结合,竞争性阻断表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和其他配体如转化生长因子-α(transforming growth factor-α,TGF-α)的结合,从而阻断EGFR依赖的肿瘤细胞增殖、转移、侵袭以及血管生成等生物学效应。
本研究应用蛋白质印迹法检测人NPC细胞株CNE-1、CNE-2、HONE-1、C-666、SUNE-1、5-8F以及HNE-1 7种细胞株中EGFR蛋白表达水平,用MTT法检测西妥昔单抗对细胞株的抑制率,并探讨两者的相关性,了解检测EGFR蛋白表达水平是否能够判断西妥昔单抗治疗NPC的疗效。
1 资料与方法1.1 研究材料 西妥昔单抗由德国Merck公司提供,β-actin一抗与EGFR一抗购自武汉Boster公司,人NPC细胞株CNE-1、CNE-2、HONE-1、C-666、SUNE-1、5-8F以及HNE-1由广州博川生物科技有限公司提供。
采用RPMI 1640培养液。
285 中国临床医学 2012年12月 第19卷 第6期 Chinese Journal of Clinical Medicine,2012.Vol.19,No.61.2 蛋白质印迹法检测EGFR蛋白表达水平 按常规方法进行。
1.3 MTT法检测细胞抑制率 按常规方法进行。
用Bio-Tek酶标仪分析490 nm处OD值。
细胞抑制率=(加药组OD值-空白对照组OD值)/(正常对照组OD值-空白对照组OD值)×100%1.4 统计学处理 用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析。
采用方差分析和双变量相关分析,检验水准α=0.05。
2 结 果2.1 不同NPC细胞株中EGFR蛋白的表达差异 不同NPC细胞株的EGFR表达水平有显著差异(F=1748.784,P<0.001),其中以5-8F细胞株中EGFR表达水平最高,显著高于其他6种细胞株(P<0.001);其次为SUNE-1,见图1~2。
图1 不同NPC细胞株EGFR蛋白表达图2 不同NPC细胞株EGFR蛋白表达水平2.2 西妥昔单抗对不同NPC细胞的抑制率 1500μg/mL浓度时,西妥昔单抗对不同NPC细胞株的抑制率差异有统计学意义(F=5.942,P=0.003),其中以对5-8F细胞株的抑制率最高,对HONE-1抑制率最低;1800μg/mL浓度时,西妥昔单抗对不同NPC细胞的抑制率无显著差异(F=2.565,P=0.069),其中以对CNE-1细胞抑制率最高。
西妥昔单抗高浓度组中NPC细胞的抑制率虽均高于低浓度组,但两组之间无显著差异(P>0.05)。
见表1、图3。
表1 西妥昔单抗不同浓度时对不同NPC细胞株的抑制率(珔x±s)细胞株类型西妥昔单抗(1500μg/mL)西妥昔单抗(1800μg/mL)F值P值CNE-1 40.71±10.16 72.39±6.15 1.498 0.288CNE-2 43.90±15.06 56.16±20.16 0.356 0.583HNE-1 41.45±5.13 68.33±3.39 1.132 0.3475-8F47.88±3.57 51.56±4.84 0.132 0.735HONE-1 15.27±7.31 66.81±2.80 1.490 0.289C666 43.67±2.23 55.48±2.94 0.587 0.486SUNE-1 45.01±1.52 64.96±1.62 0.023 0.888F值5.942 2.565P值0.003 0.069图3 西妥昔单抗不同浓度时对不同NPC细胞株的抑制率2.3 EGFR表达水平与细胞抑制率相关性研究 1500μg/mL浓度时,西妥昔单抗的细胞抑制率与EGFR蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.444,P=0.044);1800μg/mL浓度时西妥昔单抗的细胞抑制率与EGFR蛋白表达水平则呈显著负相关(r=-0.468,P=0.032)。
3 讨 论西妥昔单抗治疗EGFR高表达的转移性结直肠癌、局部晚期及复发/转移头颈部鳞癌(SCCHN),疗效好[3-4]。
最近,研究者们认为,表达野生型K-ras基因的结直肠癌患者采用西妥昔单抗和化疗联合治疗疗效较好,而K-ras基因为突变型的患者在化疗基础上应用西妥昔单抗并无额外益处。
NPC是我国最常见的头颈部恶性肿瘤,好发于385Chinese Journal of Clinical Medicine,2012.Vol.19,No.6 中国临床医学 2012年12月 第19卷 第6期 中国南方各省及东南亚地区,其病因包括EB病毒、遗传易感性、多种癌基因和抑癌基因的相互作用以及环境和饮食因素[5-6]。
NPC的EGFR表达率为90%~100%。
Ma等[7]报告,EGFR表达与未分化NPC患者的不良预后相关,提示EGFR表达可作为判断NPC患者预后的一个指标。
K-ras癌基因被认为是细胞恶变过程中起引发作用的基因,在NPC发生和发展中K-ras基因过表达起重要作用,而非基因突变[8]。
故无法通过检测K-ras基因状态来决定是否应用西妥昔单抗。
目前研究尚未证实EGFR基因或蛋白检测可预测EGFR抑制剂的疗效。