花青素纯化方法
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(3)醋酸铅沉淀法:将膏状红色素加少量水
溶解,然后加入5%醋酸铅搅拌,使色素物质沉淀,
过滤收集沉淀,再将沉淀用盐酸化食用酒精溶解,
形成氯化铅白色沉淀。过滤除去白色沉淀,得到红
色溶液。将此红色溶液蒸馏回收酒精后,再干燥,
即可得精制甘薯花青素苷色素,产率可达到
84.2%。
纸层析( paper chromatograph ,PC)
花青素传统纯化方法是纸色谱,该方法具有快
速、设备简单等优点。常用的展开剂有V (丁醇) ∶
V (乙酸) ∶V (水) = 4 ∶1 ∶5 ,V (正丁醇) ∶V (2mol/
L HCl) = 1 ∶1 , V (乙酸) ∶V (浓HCl) ∶V (水) = 15
∶3 ∶82 ,1 %盐酸, V (浓HCl) ∶V (水) = 3 ∶97 等,
可采用单向或者双向、上行或者下行方式进行展开,
展开后剪下色斑,以酸化甲(乙) 醇洗涤、浓缩,即可得
到样品。
结晶法
东京教育大学教授林孝三等人[36 ] 采用结晶法提
取花青素:原料在60 %的甲醇中室温浸泡数小时,再
以60~70 ℃加温20 min 提取;将提取液减压浓缩成
糖浆状,再将浓缩物用乙醚和乙醇洗涤,将不溶部分
溶于温水,过滤后再加入等体积乙醇,在冰箱中静置
4 h ;再过滤一次除去杂质,将滤液在30~40 ℃的减
压条件下蒸干;残渣溶于冷水后加入2 倍乙醇,在冰
箱静置12 h 则析出粉末状色素;为进一步提纯,将其
溶解于50 % 乙醇(60 ℃) 中,过滤后将滤液在30~
40 ℃下减压浓缩,在冰箱静置一夜则结晶出色素,可
用50 %乙醇再结晶。
传统的酸性条件下得到的花青素最终产物均为
酸盐形式,而此方法所获得的花青素完全不含酸类,
其色调与花青素的酸盐不同,呈现出与自然花色非常
近似的红色或紫色。
3.2.2.2 大孔树脂的预处理[1]
(1)于长30cm,内径3cm 的吸附柱内加入0.3 倍欲装柱大孔树脂体积(BV) 的无水乙醇,分别将AB-8 和D-101 两种类型的大孔树脂加入两根吸附柱内,使其液面高于树脂层表面,充分浸泡24h;
(2)用无水乙醇以2BV/h 的速度流经树脂柱4h;
(3)继续用无水乙醇以同样的速度通过树脂层,直到流出液与水按照1:5 的比例混合不呈白色浑浊并且在200~400nm 范围内除了乙醇本身的吸收外无其他
吸收为止,然后用蒸馏水以同样流速洗至无醇味;