淋巴细胞的的活化及其分子机制(106页)
第9章B淋巴细胞ppt课件
未成熟B细胞结合骨髓中的自身抗原---mIgM 表达下调---进入外周淋巴器官，对抗原刺激不 产生应答---无能
未成熟B细胞结合骨髓中的自身抗原---细胞中 RAG基因重新活化---轻链VJ再次重排，合成 新的轻链，替代自身反应性轻链---成为一个新 的B细胞---受体编辑。若受体编辑不成功，则 该细胞发生凋亡或无能。
B
V 细
胞
甲1
B
V 细
胞
乙1
B
细V
胞
丙
D
J1
1
D J1 1
D J1
3、体细胞高频突变(somatic 造成的多样性 hypermutation)
被抗原激活后的B细胞在外周免疫器官生发中 心分裂增殖时，IgV区基因大约每复制1000个 bp就有1对发生突变（碱基配对错误所致，而其他体细 胞每次分裂中DNA分子的突变率约为1010bp），故称为体细胞高频突变。
（isotype exclusion）：
是一个B细胞克隆只表达一种 BCR，只分泌一种抗体的机制。
等位排斥——是指B细胞中位于一对染色 体上的轻链或重链基因，其中只有一条 染色体上的基因得到表达，先重排成功 的轻链或重链基因抑制了另一条染色体 上的基因的重排。
同种型排斥——是指κ轻链和λ轻链之间 的排斥，κ链基因表达成功即抑制λ链基 因的表达。在人Ig中κ链和λ链之比约为 2:1，而在小鼠中约为20:1。
• 可分泌CKs调节免疫应答
第一节 B细胞的分化发育
非抗原依赖期（骨髓） 抗原依赖期（外周淋巴器官）
B细胞在中枢免疫器官 中的分化发育过程中产生的 主要事件是
–功能性BCR的表达
受体型蛋白酪氨酸激酶
（三）其他结构域
PH结构域：血小板－白细胞C激酶底物同 源区，识别膜磷脂成分及其代谢产物如 PIP2、PIP3、IP3等
死亡结构域：涉及死亡结构域蛋白、TNF 受体相关蛋白及其它多种信号转导蛋白
三. 信号分子的种类
（一）接头蛋白与锚定蛋白
特殊的信号分子，不具有酶活性
接头蛋白：具有多个结合其它分子的结构如 蛋白模块或结合蛋白模块的基团 Grb2:SH2、2xSH3
淋巴细胞活化的分子机制
一. 免疫受体信号转导的一般规律
配体的结合 受体交联、聚集、变构 蛋白酪氨酸激酶活化
受体胞浆区磷酸化
下游信号分子募集、活化
（一）配体激发的受体交联和聚集
受体启动信号传导过程的必要条件或充分条件
受体交联和聚集的机制：
重复抗原表位（细菌、病毒） 二聚体（PDGF）或三聚体（TNF） 二价分子（生长激素） 单价分子（大部分细胞因子）－－变构
（三）磷脂酶C和磷酸肌醇3激酶
磷脂酶C(phospholipase C, PLC)，包括PLCb和 PLCg。PLC以Ca2+依赖的方式水解膜磷脂中磷脂 酰肌醇-4,5二磷酸(PIP2)，产生二酰甘油(DAG)和 三磷酸肌醇(IP3)。
PLCg 可被许多免疫受体和接头蛋白活化： 经SLP-76/ZAP70、LAT结合TCR 经LNK和Btk传递BCR的信号。 与活化CD22直接关联并传递信号。 PLCb主要被G蛋白激活，介导相关信号。
G蛋白：a(23种)、b(5种)、g(10种)组成不同的 亚型。a有GTP酶活性，g也能结合膜且与b一 起介导G蛋白与效应蛋白的相互作用。
G蛋白主要激活磷脂酶(如PLCb)和腺苷酸环 化酶(经cAMP调节信号传递)。
小G蛋白是一类与Ga同源的20～30kD蛋白， 分为Ras(Ras、Ral、Rap等)、Rho(Rho、Rac等)、 Rab、Arf、Sar和Ran等6个家族。 小G蛋白结合GDP时无活性，鸟苷酸交换因子 (GEF)使它们转向结合GTP而被激活；GAP则水 解GTP成GDP，负调节小G蛋白活性。 激活的小G蛋白介导TCR、BCR等受体的信号 传导；还能引起肌动蛋白细胞骨架的多聚化，参 与细胞形态变化及内吞、内化、分泌、粘附和移 动等功能。
B淋巴细胞活化ppt课件
CD28分子
• CD28分子胞浆区可与多种信号分子相连， 能转导T细胞活化的辅助信号，也称协同 刺激信号或第二信号。
CD28
TCR CD4
CD4+T细胞的TCR及协同刺激受体
TCR
CD8
CD28
CD8+T细胞的TCR及协同刺激受体
2、T细胞的分化发育
赋予 T 细胞接受 抗原提呈的能力
前Ｔ细胞（临时受体及有关受体） ------胸腺细胞（配体或信号， 胸腺激素？）作用细胞表达CD4和CD8分子，并在增殖中进行TCR （主要为α链）基因重排表达，由α链与β链以及CD3和CD4（或 CD8）组合为复合受体出现于膜表面，从而形成多克隆的幼稚性 αβＴ细胞（CD4+，CD8+∶双阳细胞）。
第六章 免疫细胞
• 本章要求及重点 • 1、掌握T细胞表面分子和T细胞亚群。 • 2、掌握B细胞的表面分子和B细胞亚群。 • 3、熟悉NK细胞的特征及功能，单核-巨噬细胞
的表面标志及主要功能。 • 4、了解免疫细胞的种类及功能。
免疫细胞（immune cells）: 淋巴细胞、 抗原提呈细胞、 其它免疫细胞
免疫细胞（Immune cells）
泛指所有参与免疫反应的细胞及其前身，包括造血 干细胞、淋巴细胞、单核巨噬细胞、树突状细胞和粒细 胞等。
免疫活性细胞
（Immune competent cell，ICC）
能够接受抗原刺激、产生特异性的 活化、增殖、分化并形成效应产物的淋巴 细胞。
免疫细胞的起源与分化
ITAM
（2）T细胞表面抗原 （surface antigen）
• 1）MHC抗原：参与T细胞对抗原肽的识别 与应答过程。
• 2）白细胞分化抗原：是不同谱系白细胞 在正常分化、成熟的不同阶段及活化过 程中出现或消失的细胞表面标志。
肝细胞癌肿瘤免疫微环境中Ｔ淋巴细胞的功能与调控机制
!L"!肝细胞癌肿瘤免疫微环境中Ｔ淋巴细胞的功能与调控机制韩孟奎１，李 晋２，杨小华１１苏州大学附属第一医院普通外科，江苏苏州２１５０３１；２苏州市第五人民医院检验中心，江苏苏州２１５１３１摘要：Ｔ淋巴细胞作为肿瘤免疫微环境中主要免疫细胞，能够通过产生细胞因子、细胞毒性酶（穿孔素、颗粒酶Ｂ）等途径影响肝癌细胞增殖、迁移从而控制肿瘤进展。
同时，肿瘤免疫微环境中树突状细胞、髓样抑制细胞等免疫细胞可通过多种途径调控不同亚型Ｔ淋巴细胞的功能。
本文综述了肿瘤免疫微环境中常见免疫细胞对Ｔ淋巴细胞功能的影响，以及涉及Ｔ淋巴细胞功能调节的关键信号通路在ＨＣＣ中的作用机制，以期为ＨＣＣ更优治疗策略的研发提供思路和线索。
关键词：癌，肝细胞；Ｔ淋巴细胞；免疫微环境；免疫治疗基金项目：国家自然科学青年基金项目（８１９０２０５４）；苏州市“科教兴卫”项目（ｋｊｘｗ２０１８０４５）；苏州市科技发展计划项目（ＳＫＪＹＤ２０２１１３６）；伊犁州临床医学研究院研究基金项目（ｙｌ２０２１ｌｈ０４）ＦｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｉｎｔｕｍｏｒｉｍｍｕｎｅｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａＨＡＮＭｅｎｇｋｕｉ１，ＬＩＪｉｎ２，ＹＡＮＧＸｉａｏｈｕａ１．（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｅｎｅｒａｌＳｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｏｏｃｈｏｗＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｕｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ２１５０３１，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ｔｈｅＦｉｆｔｈＰｅｏｐｌｅ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｕｚｈｏｕ，Ｓｕｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ２１５１３１，Ｃｈｉｎａ）Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＹＡＮＧＸｉａｏｈｕａ，ｙｘｉａｏｈｕａ２０２２＠１６３．ｃｏｍ（ＯＲＣＩＤ：００００－０００２－１７６７－５４９９）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓｔｈｅｋｅｙｉｍｍｕｎｅｃｅｌｌｓｉｎｔｕｍｏｒｉｍｍｕｎｅｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，Ｔｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｃａｎａｆｆｅｃｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｍｉｇｒａｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏ ｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＨＣＣ）ｃｅｌｌｓａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｔｕｍｏｒｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｅｎｚｙｍｅｓ（ｐｅｒｆｏｒｉｎ，ｇｒａｎｚｙｍｅＢ），ａｎｄｏｔｈｅｒｐａｔｈｗａｙｓ．Ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ，ｉｍｍｕｎｅｃｅｌｌｓｓｕｃｈａｓｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓａｎｄｍｙｅｌｏｉｄ－ｄｅｒｉｖｅｄｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｃｅｌｌｓｉｎｔｕｍｏｒｉｍｍｕｎｅｍｉ ｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｃａｎｒｅｇｕｌａｔｅｔｈｅｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔＴｃｅｌｌｓｕｂｓｅｔｓｔｈｒｏｕｇｈｖａｒｉｏｕｓｐａｔｈｗａｙｓ．ＴｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｓｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｃｏｍｍｏｎｉｍｍｕｎｅｃｅｌｌｓｉｎｔｕｍｏｒｉｍｍｕｎｅｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｏｎｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓａｎｄｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｃｔｉｏｎｏｆｋｅｙｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｉｎＨＣＣ，ｓｏａｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅｉｄｅａｓａｎｄｃｌｕｅｓｆｏｒｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｂｅｔｔｅｒｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓｔｒａｔｅｇｉｅｓｆｏｒＨＣＣ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ；ＴＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅ；ＩｍｍｕｎｅＭｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ；ＩｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙＲｅｓｅａｒｃｈｆｕｎｄｉｎｇ：ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１９０２０５４）；ＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｄｕｃａｔｉｏｎＰｒｏｊｅｃｔｏｆＳｕｚｈｏｕ（ｋｊｘｗ２０１８０４５）；ＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＰｌａｎｏｆＳｕｚｈｏｕ（ＳＫＪＹＤ２０２１１３６）；ＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＲｅｓｅａｒｃｈＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＹｉｌｉ（ｙｌ２０２１ｌｈ０４）ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－５２５６．２０２２．１１．０３７收稿日期：２０２２－０４－０３；录用日期：２０２２－０６－２２通信作者：杨小华，ｙｘｉａｏｈｕａ２０２２＠１６３．ｃｏｍ 肝细胞癌（ＨＣＣ）是我国最常见的恶性肿瘤之一，占原发性肝癌的７５％～８５％［１］。
t淋巴细胞的主要膜分子亚群及功能
概念：淋巴细胞是在体内具有免疫功能的细胞，可以分为T细胞、B 细胞和NK细胞三大类。
而在淋巴细胞的膜面上具有多种颗粒蛋白，这些蛋白质在淋巴细胞的识别和信号传导中起到至关重要的作用。
本文将对淋巴细胞的主要膜分子亚裙及功能进行重点介绍。
1. T细胞的主要膜分子亚裙及功能T细胞的主要膜分子包括TCR、CD3、CD4、CD8等。
其中TCR（T 细胞受体）是T细胞的特有标志，它能与抗原肽结合，从而进行抗原识别。
CD3是与TCR共同参与信号传导的膜分子，具有信号转导的作用。
CD4和CD8则是T细胞的辅助分子，CD4分子主要存在于辅助T细胞上，而CD8则主要存在于细胞毒T细胞上，它们会在抗原识别后促进相关的信号通路。
2. B细胞的主要膜分子亚裙及功能B细胞的主要膜分子包括BCR、CD19、CD20、CD21、CD40等。
BCR（B细胞受体）是B细胞的受体，能识别抗原并发挥免疫应答的作用。
CD19是B细胞表面标志的一种，具有信号转导的作用，能够促进B细胞的增殖和分化。
CD20是一种与细胞信号转导相关的膜分子，其功能与B细胞增殖和分化密切相关。
CD21和CD40分别与B 细胞的抗原呈递和活化信号转导有关。
3. NK细胞的主要膜分子亚裙及功能NK细胞的主要膜分子包括NKG2D、DNAM-1、NKp30、NKp44、NKp46等。
这些膜分子对NK细胞的识别和杀伤作用起着重要的调节作用。
NKG2D受体可以结合细胞表面上的识别配体，发挥细胞毒作用。
而DNAM-1受体则能识别靶细胞表面的配体，从而进行细胞杀伤作用。
NKp30、NKp44和NKp46等膜分子则主要起调节NK细胞活化和杀伤作用的作用。
结论：淋巴细胞的膜分子亚裙在免疫应答和免疫调节中起着重要的作用，在淋巴细胞的识别、信号传导和效应功能中发挥重要的调节作用。
对淋巴细胞膜分子的研究，有助于深化我们对免疫系统的理解，为疾病的预防和治疗提供理论基础。
希望未来能够进一步深入研究淋巴细胞膜分子在疾病发生发展中的作用机制，为疾病的治疗和防控提供新的思路和方法。
细胞生物学之细胞凋亡及其调控的分子机制
1972年，Kerr等对肝细胞溶酶体的组化研究发现，结扎大鼠门脉左侧支数小时后引起肝左叶细胞片状死亡，但不同于细胞坏死，因而将细胞的这种死亡命为细胞凋亡。
大多数情况下程序化细胞死亡的形态学表现为细胞凋亡.
细胞凋亡的发现
第一节 凋亡细胞的特征及生物学意义
(一) 细胞凋亡的组织学变化 只发生在单个或几个细胞，其紧邻细胞完好； 与紧邻细胞间有空隙，有离群、脱落感；不引起炎症反应 (二) 主要形态学特征(多阶段) 凋亡细胞其形态特征表现为细胞皱缩、变小； 核固缩，胞质浓缩，细胞急剧变小； 细胞骨架解体，最后变成若干个凋亡小体。 注意点：凋亡全过程，质膜仍保持完整，细胞内容物不释放，不引起炎症反应。
一、细胞凋亡的基本特征
核内染色质凝聚、形成染色质块，并聚集于核的边缘呈多种形状排列，然后逐步分裂为碎片（核碎片形成）。
胞质脱水浓缩，体积减少约30%
(2 ) 细胞器的变化: A.线粒体早期体积增大，嵴增多晚期成空泡状, B失去微绒毛、细胞突起及细胞表面皱褶，膜电位下降，膜 流动性下降；C. 内质网腔扩大；D. 细胞骨架变得致密和紊乱。
死亡受体 (Fas/CD95,TNFR1)
CD95配体,TNF-α
FADD
Caspase-8,10
Caspase-3,6,7
PARP,Lamin,PK,DNA-PK
DNA断裂,细胞固缩等
细胞凋亡
Caspase 激活物
起始Caspase
效应Caspase
Caspase 底物
CTL
粒酶B,穿孔素
胞外
CrB
具”short-prodomain”的效应分子(effector),如-3、-6、-7等，作为上游酶的底物被切割活化，再作用于多种蛋白质或酶，促使细胞凋亡。
T细胞
CD8+细胞毒性T细胞
特异性介导靶细胞裂解或凋亡，其机制为： 释放穿孔素→靶细胞裂解、死亡 释放颗粒酶 →借助穿孔素的穿孔作用进入靶细胞 →细胞凋亡 高表达FasL →Fas/FasL途径 →靶细胞凋亡 分泌TNF-
Thank you!
清除识别自身
抗原的 T 细胞
获得自身耐受性
二、 T细胞的表面分子及其功能
1.TCR-CD3复合物 2.TCR共受体 3.协同刺激分子 4.其他表面分子
（一）TCR-CD3复合物 是T细胞识别抗 原和转导信号的 主要单位 介导TCR与抗原 接触后产生的第 一活化信号
酪氨酸活化基序（ITAM）
（一）T细胞库的形成机制
—
TCR多样性及其分子机制
每个T细胞克隆都有其独特的TCR，该TCR特
异性识别一个抗原肽-MHC复合物（pMHC）。
体内约有1018个T细胞克隆，构成了一个庞
大的T细胞库，以便应对自然界千变万化的 抗原肽。
TCR多样性及其分子机制 1. TCR基因结构
2. TCR基因重排
TCR多样性产生机制
多样性机制 V D J 组合多样性 V区基因数 连接多样性 总 计 70 0 61 52 2 13 12 0 5 60 6x102 1013 1015 5 3 4 60
4.3x103 1.4x103 5.8x106 2x1011 1018
（二）T细胞在胸腺中的发育
CD8+T cell
Apoptosis
(95%)
未接触MHC分 子: Ag肽
MHCⅠ类分子 胸腺上皮细胞 Ag肽：MHC分子 MHCⅡ类分子
DP细胞
CD4+T cell
病毒免疫的细胞及分子机制
病毒免疫的细胞及分子机制病毒是一种经常被人们提及的微生物，它们能够感染多种生物体，例如水手、动物和人。
在人类历史长河中，许多自然灾难就是由病毒引起的，例如天花、甲流和SARS等，在这些自然灾难中人类受到了很大的伤害。
而疫苗作为能够预防病毒感染的有效手段在防疫工作中被广泛应用，其原理就是利用人类的免疫机制击败病毒。
本文将详细介绍病毒免疫的细胞及分子机制，希望能够帮助大家更好地了解这一领域的知识。
1. 免疫系统的基本构成及其功能免疫系统是人类身体最具生命力的系统之一。
它的基本构成包括天然免疫和获得性免疫。
天然免疫是机体先天就拥有的免疫系统，它通过非特异性的途径保护机体免遭感染。
例如：皮肤、黏膜、粘液、胃液、眼泪、唾液等组成人体的第一道防线。
而获得性免疫是指通过感染某种病原体后机体产生相应的抗体或细胞免疫杀伤病原体的一种免疫生物防御系统。
免疫系统的功能包括四个方面：抗原识别、记忆免疫、整合调控和清除病原体。
抗原是指通过发生免疫应答后被识别为“外来物”而激发免疫反应的物质。
当病原体侵入人体后，它的大分子、低分子或细胞成分等与免疫系统的分子相互作用，被标记为抗原后即可激活免疫反应。
此外，获得性免疫还拥有一项非常重要的功能即记忆免疫，即在感染后免疫的细胞将残存的抗原标记起来，留下抗体和免疫细胞的记忆，即免疫记忆细胞，并保留在身体中，以便下次遇到相同的病原体时能够更快、更有效地进行应对，从而起到保护机体免遭再次感染的作用。
2. 病毒感染及免疫应答病毒感染是通过病毒侵入细胞引起感染，繁殖新的病毒颗粒，继而导致机体损伤的过程。
在病毒感染的初期，机体中的天然免疫系统通常首先对病毒进行非特异性的抵御，通过吞噬细胞的方式摧毁病毒颗粒。
与此同时，被Fe-receptor识别的一些病毒也可通过钩体和裹体特异性地内吞。
细胞内补体系统还能够利用其活化的剪接酶活性识别和清除病毒。
如果非特异性的抵御和淋巴细胞主导的细胞免疫不能控制病毒感染，机体将会激活获得性免疫系统来进行免疫应答。
《B淋巴细胞活化》课件
和控制传染病。
B淋巴细胞活化研究面临的挑战与展望
挑战
B淋巴细胞的活化是一个非常复杂的过程 ，涉及多种细胞和分子之间的相互作用 。目前，我们对这一过程的了解还不够 深入，仍有许多未知的领域需要探索。
VS
展望
随着科学技术的发展，我们有望开发出更 先进的实验技术和方法，以更深入地研究 B淋巴细胞的活化机制。同时，随着大数 据和人工智能技术的应用，我们有望从海 量的生物数据中挖掘出更多有关B淋巴细 胞活化的信息。在未来，我们期望能够更 好地理解B淋巴细胞的活化机制，为疾病 治疗和疫苗研发提供更有力的科学支持。
B细胞活化后，通过信号转导机 制将抗原刺激信号传递到细胞内
部，引发一系列生物学反应。
信号转导涉及多种蛋白质的磷酸 化、酶促反应以及基因表达的调
控等过程。
信号转导的异常可导致B细胞功 能异常，与某些免疫疾病的发生
有关。
B淋巴细胞的增殖与分化
B细胞活化后，开始增殖并分化为浆 细胞或记忆B细胞。
B细胞的增殖与分化过程受到多种细 胞因子和生长因子的调节。
浆细胞负责产生抗体，参与体液免疫 ；记忆B细胞则保留对特定抗原的记 忆，在再次接触相同抗原时迅速活化 。
B淋巴细胞活化的调
03
节
共刺激信号对B淋巴细胞活化的影响
共刺激信号是B淋巴细胞活化过 程中的重要调节因素，它们通过 与B细胞表面的受体结合，促进B
细胞的增殖和分化。
共刺激信号可以来自抗原、细胞 因子、趋化因子等，它们通过与 B细胞表面的受体结合，促进B细
《B淋巴细胞活化》 PPT课件
目录
• B淋巴细胞概述 • B淋巴细胞的活化过程 • B淋巴细胞活化的调节 • B淋巴细胞活化的临床意义 • 总结与展望
白血病分子生物学
荧光染料直接结合扩增产物
6
SYBR Green I与DNA双链结合
7
动态监测荧光信号变化
8
白血病的分子检测
TaqMan探针法
特异性高 多重基因定量 成本较高
成本低 最适合初步筛查 熔解曲线功能 无法多重检测 无模板特异性 灵敏度低
SYBR Green I 法
白血病的分子检测
CT值与起始模板量成反比
主要见于M2或M4，也见于M1，MDS-RAEB
t(6;9)(p23;q34)
DEK-CAN
为RAS基因家族成员之一，染色体定位于1p32.2。具有GTP/GDP结合和GTPase活性，调控正常细胞的生长
此基因突变存在于11-30%AML
突变热点位于codon12,13和61
在inv(16)/t(16;16),inv(3)/t(3;3)中突变率较高，而在t(15;17)中低
伴此突变患者外周血WBC计数低
该突变预后意义尚不明
N-RAS基因突变
Wilms tumor 1
是无特异分子异常的急性白血病患者理想的MRD检测指标
伴此基因高表达者预后差，且表达程度与预后相关
03
01
02
WT-1基因高表达
t(9;22)(q34;q11)
15~30%成人ALL及3~5%儿童ALL
03
AML1-ETO
AML1- 阴性 ETO+
C-KIT基因突变
C-KIT基因突变
C-KIT基因结构 JM
C-KIT基因突变
外周血白细胞计数
C-KIT基因突变
生存曲线
t(15;17)(q22;q21)
98%M3患者
继t(15;17)之后，又先后发现4种M3特异的累及RARα的变异性染色体易位：t(11;17)(q23;q21)，t(5;17)(q35;q21)，t(11;17)(q13;q21)以及dup(17)(q21.3;q23)，分别产生PLZF-RARα，NPM-RARα，NuMA-RARα和STAT5b-RARα融合基因
医学免疫学：免疫应答分子机制
• 内源性抗原经MHC-Ⅰ类 分子提呈给CD8 +T
2. APC与T细胞的相互作用
➢ T细胞与APC的非特异性、可逆性结合：
LFA-1/ICAM-1;LFA-2/LFA-3
➢ T细胞与APC的特异性结合：
TCR-CD3双识别肽-MHC分子复合物 CD4分子＋MHCⅡ类；CD8分子＋MHCⅠ类
调理吞噬作用
靶 细 胞
ADCC
（ antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity ）
体液免疫应答的一般规律
初次应答： 机体初次接受适量抗原刺激后产生的免疫应答。
再次应答（二次应答或回忆反应）： 初次应答后，再次接受相同的抗原刺激产生的免疫
应答。
初次应答与再次应答的一般规律
B细胞对TI抗原的IR特点： 非抗原特异性； 无MHC限制性； 无回忆反应； 无Ig类别转换
Take a rest!
B淋巴细胞介导的体液免疫应答
体液免疫应答
机体免疫系统受抗原刺激后，抗原特异性 B细胞发生活化、增殖、分化为浆细胞，产 生抗体，发挥生物学效应的过程。
Ag
B
浆
Ab
一、 B细胞对TD抗原的应答 go 二、 B细胞对TI抗原的应答 go 三、 体液免疫应答的一般规律 go
B细胞对TD抗原的免疫应答
light zone
high affinity
Somatic hypermutation in centroblasts
dark zone
smablast
Plasma cell
Selection of high affinity
淋巴细胞活化ppt课件
过提供关键的第二信号（信号2）调节导致活化的信号转导
事件。
T细胞经其TCR受与MHC分子结合的肽抗原刺激。
B细胞被激活有的需要T细胞，有的不需要T细胞。多聚
体抗原能直接刺激B细胞，而对蛋白抗原的应答需要T细胞
辅助。
可编辑课件
4
◆ 通过辅助受体发送信号
没有一个T或B细胞上的抗原受体有足够长度的胞质内尾 部起信号分子作用的氨基酸成分。因此，T细胞信号发送， 通过CD3与TcR联合在一起引发。B细胞信号发送，通过 CD79a/b与BcR联合在一起引发（详见H2、3）。这些分 子上有酪氨酸基元，可被激酶磷酸化以引发活化过程。然 后一系列有序的生化事件经激酶和磷酸酶而发生，这些事 件受来自其他辅助受体细胞表面分子信号的调节。
诱导它成熟为Tc细胞。
可编辑课件
图L2.5
18
L2.4导致T淋巴细胞活化的生化事件
T细胞为履行其功能，必须将信号从细胞表面经胞质 溶胶转达给核，以引起特异的基因转录。此信号转 导通过细胞表面的几个分子进行（图L2.6）。在此过 程中起关键作用的是酶，它们使特殊的氨基酸磷酸 化（激酶）和去磷酸化（磷酸酶），从而激活它们， 最终导致核中特异转录因子的活化和功能蛋白的产 生。
可编辑课件
20
正向 负向
可编辑课件
图L2.7导致Th细胞活化的信号发送途径
3.ZAP70可以激活磷脂酶C,从 而引发磷脂酰信号通路， 磷脂酰信号通路又分为两 类：IP3和DAG.分别产生 蛋白激酶C（PKC）和Ca 离子，PKC最终可转运核 因子NF-ĸb；而Ca离子最 终可以转运NFATC（是一 种活化T细胞核因子的蛋 白)。
虽然淋巴细胞经其抗原受体与抗原的结合（信号1）对刺 激此细胞是必要的，但不够，通常引起无反应性（详见M3）。
CFSE法检测刺激剂对淋巴细胞增殖与活化
CFSE法检测刺激剂对淋巴细胞增殖与活化薛妮娜;董凯;来芳芳;黄蕊;陈晓光【摘要】研究不同刺激剂对人外周血淋巴细胞增殖与活化的影响.采用密度离心法分离人外周血淋巴细胞,并采用1μmol/L 的CFSE进行标记,通过流式细胞术技术检测刺激剂抗CD3/28抗体、植物血凝素(PHA)和佛波酯(PMA)培养72 h对淋巴细胞分裂与增殖的影响.并采用ELISA法检测不同刺激剂对淋巴细胞上清IFNγ质量浓度的影响.0.125 μg/mL的抗CD3/28抗体和5或10 μg/mL的PHA可以显著诱导CFSE绿色荧光逐渐递,形成类似"五指峰"样图谱,说明这两者具有很强的诱导淋巴细胞分裂与增殖的作用.相比之下,单用PMA促进淋巴细胞分裂与增殖的作用较弱.此外,抗CD3/28抗体、PHA和PMA均可增加淋巴细胞IFNγ的分泌,但其作用强度如下:抗CD3/28抗体>PHA>PMA.采用CFSE标记法检测淋巴细胞增殖的实验,得出抗CD3/28抗体和PHA是高效的淋巴细胞活化刺激剂,而且最佳质量浓度分别为0.125 μg/mL和10 μg/mL.%The aim of this pa per is to investigate the effect of different stimulants on the proliferation and activation of human peripheral blood lymphocytes. Human peripheral blood lymphocytes were isolated by density centrifugation and labeled with CFSE with the final concentratio n of 1μmol/L. Flow cytometry analysis was used to detect the division and proliferation of lymphocytes after administration of anti-CD3/28 antibody, phytohemagglutinin (PHA) and phorbol ester (PMA) for 72 h. In addition, IFNγ content that reflects the acti vation of T lymphocytes was detected by ELISA method.And found that 0.125μg/mL of anti-CD3/28 antibody and 5 or 10μg/mL of PHA could induce the gradual reduction of green fluorescence, with a "Multi-peak" pattern inflow cytometry analysis, the results indicated that both anti-CD3/28 antibody and PHA are potential had strong stimulants for lymphocyte division and proliferation. In comparison, the role of PMA alone in promoting lymphocyte division and proliferation was weak. Furthermore, anti-CD3/28 antibody, PHA and PMA almost could increase the IFNγ secretion from lymphocytes. However, anti-CD3/28 antibody was the most stimulator,PHA, and PMA was the weakest agent for stimulating the production of IFNγ in lymphocytes. In the CFSE-based proliferative assays for assessment of T cell function, this paper concluded that both anti-CD3/28 antibody and PHA were effective stimulants for the proliferation and activation of lymphocytes, with the optimal concentrations of 0.125 μg/mL and 10 μg/mL, respectively.【期刊名称】《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(033)002【总页数】6页(P129-134)【关键词】淋巴细胞增殖;CFSE;干扰素γ;流式细胞术【作者】薛妮娜;董凯;来芳芳;黄蕊;陈晓光【作者单位】中国医学科学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室/创新药物非临床药物代谢及PK/PD研究北京市重点实验室,北京 100050;中国医学科学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室/创新药物非临床药物代谢及PK/PD研究北京市重点实验室,北京 100050;中国医学科学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室/创新药物非临床药物代谢及PK/PD研究北京市重点实验室,北京 100050;中国医学科学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室/创新药物非临床药物代谢及PK/PD研究北京市重点实验室,北京 100050;中国医学科学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室/创新药物非临床药物代谢及PK/PD研究北京市重点实验室,北京 100050【正文语种】中文【中图分类】R446肿瘤免疫治疗己成为继手术、化疗和放疗之后的第四种常用的肿瘤治疗方法.肿瘤免疫治疗是通过激发或调动机体的免疫系统，增强肿瘤微环境的抗肿瘤免疫能力，从而控制和杀灭肿瘤细胞.而效应T淋巴细胞是诱发有效的抗肿瘤免疫反应的主要执行者，行使对肿瘤细胞的识别和消灭作用[1].在肿瘤进展过程中，肿瘤细胞通过上调一些免疫检查点分子的配体，与T淋巴细胞表面这些共抑制性受体(PD1、CTLA4、LAG3等)相互作用，从而抑制T细胞的增殖与活化，形成肿瘤免疫逃逸微环境[2-3].目前，绝大多数上市或处于临床研究阶段的抗肿瘤免疫药物都是通过抑制T细胞的负性调控信号，通过激活T淋巴细胞的增殖和活性，强化T细胞的免疫应答，最终达到抵御肿瘤细胞增长的目的.因此，T淋巴细胞的增殖与活性水平的检测是细胞免疫功能研究的常用方法，也是目前抗肿瘤免疫药物研发中一个重要的考察指标[4].氚标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法被广泛用于淋巴细胞增殖的检测.但是其需要使用放射性同位素标记，具有潜在的污染，并且不容易大批量操作.其次，还有一些研究者采用MTT或MTS的方法检测淋巴细胞增殖.虽然MTT或MTS的操作方法相对简单，但灵敏性不高，且此方法不适合检测一些具有氧化还原性作用的药物，这类药物可直接与MTT反应，造成假阳性.此外，3H-TdR掺入法和MTT/MTS法均是以细胞的数量来反应增殖的变化，不能反应细胞的分裂情况，且无法测定不同亚群淋巴细胞的增殖情况[5-6].羧基荧光素乙酰乙酸(Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester, CFSE)染色是一种有效的检测淋巴细胞分裂与增殖的方法.CFSE可穿过细胞膜，不可逆地与细胞内的氨基共价结合偶联到细胞内蛋白.在细胞分裂增殖过程中，CFSE标记的荧光可平均分配到两个子代细胞中，出现连续的荧光强度递减现象，在流式细胞术检测过程中出现类似“五指峰”的特征[7-8].抗CD3/28抗体、刀豆蛋白A(ConA)、植物血凝素(PHA)佛波酯(PMA)可刺激小鼠脾或人外周血T淋巴细胞增殖.目前，文献中尚未对这些刺激剂促进T淋巴细胞增殖的强度进行比较.而且报道的这些刺激剂的最佳有效剂量也不尽相同.因此，本文采用CFSE标记法检测不同刺激剂诱导人外周血淋巴细胞分裂与增殖的活性，为验证肿瘤免疫药物的活性提供有效的评价方法.1.1 全血健康志愿者的抗凝血购自中国食品药品检定研究院.1.2 主要试剂人外周血淋巴细胞提取分离液购自达科为生物技术有限公司.CFSE、PMA、和PHA购自Sigma公司，人源抗CD3、CD28抗体购自美国Miltenyi?Biotec公司.人源IFN γ 的ELISA检测试剂盒购自cloud-clone公司.RPMI1640培养基和胎牛血清购自美国GIBCO公司.1.3 主要仪器FACSVerse流式细胞仪为美国BD公司产品，Synergy H1多功能酶标仪为美国Bio-Tek公司产品，CO2培养箱为日本三洋公司产品，冷冻离心机为美国Sigma 公司产品.2.1 淋巴细胞的制备将健康志愿者的抗凝血与PBS混合，再缓慢加至淋巴细胞分离液中(这三者的终体积比例为1∶1∶1)，室温，800 r/min离心30 min.小心吸取中间的一层薄而致密的白膜(淋巴细胞层)至另一层离心管中，用PBS重悬洗涤2次，计数，调整细胞浓度为1×107/mL.2.2 CFSE标记淋巴细胞在上述淋巴细胞悬液中加入CFSE染液(CFSE，终浓度为1 μmol/L)，37 ℃避光孵育10 min，每5 min混匀细胞.加入预冷的2 mL灭活牛血清冰上终止2 min，1 500 r/min离心5 min，用预冷的含10%灭活胎牛血清的PBS洗涤2次.离心，用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基重悬，计数，将细胞调整为3×106/mL，加入96孔圆底板，每孔100 μL，洗涤及离心过程中注意避光.2.3 流式细胞术检测淋巴细胞增殖活性向上述接种至96孔圆底板的淋巴细胞中分别加入100 μL含不同剂量的刺激剂的RPMI1640完全培养基：抗CD3/28抗体(终质量浓度：0.125、0.5、1、1.5μg/mL)、PHA(终质量浓度：1、5、10 μg/mL)和PMA(终质量浓度：1、5、10 ng/mL).每组实验做三个平行孔，置于37℃，5%CO2细胞培养箱中继续孵育72h.离心，收集细胞上清，冻于-80 ℃冰箱保存.将细胞用预冷PBS洗涤2次，并用200 μL PBS重悬，采用流式细胞检测仪(BD FACS Verse)检测淋巴细胞的分裂和增殖情况，并采用Flowjo 7.6软件计算淋巴细胞增殖情况(CFSE荧光强度减低的细胞百分比)和分裂指数(CFSE荧光强度减低的细胞百分比与CFSE荧光强度不变的细胞百分比的比值).2.4 ELISA法检测淋巴细胞上清IFNγ质量浓度取上述条件下淋巴细胞上清液，采用ELISA法检测IFNγ的质量浓度.操作步骤参照试剂盒说明书.简要步骤如下：1)加入100 μL倍比稀释的人源IFNγ标准品及淋巴细胞上清原液，室温静置1 h；2)充分弃上清，分别加入1∶100稀释的IFNγ的一抗，室温静置1 h；3)弃上清，洗涤三次后，加入1∶100稀释后的IFNγ的二抗，室温静置30 min；4)弃上清，洗涤5次后，加90 μL底物(TMB)显色，室温避光放置15 min；5)加50 μL的硫酸终止反应；6)酶标仪450 nmol/L下检测淋巴细胞培养上清液中IFNγ的含量.2.5 统计分析数据采用Mean±SD表示，用SPSS17.0软件对实验数据进行显著性分析，P≤0.05具有统计学意义.3.1 CFSE法淋巴细胞增殖实验中细胞门的确定采用Flowjo 7.6软件对淋巴细胞分裂与增殖进行分析.根据前向散射角(FSC)和侧向角散射(SSC)显示图，发现排除了细胞碎片群外，在正常条件下，淋巴细胞主要分布为左下群，均一度较好的一簇细胞群.在接受不同刺激剂活化后，左下的淋巴细胞群开始往右上方移动，且出现比较散在的细胞群.根据流式细胞术的原理，我们认为在刺激剂活化淋巴细胞后，淋巴细胞出现不同程度的分裂和增殖，其细胞大小和均一度都发生改变，从而显示在右上方散在的细胞群.我们把原始淋巴细胞命名为R1门，刺激剂活化后的淋巴细胞命名为R2门(如图1(A)～(B)所示).且在正常条件下，R1门的细胞具有强的CFSE染色荧光(单峰)；在刺激剂作用下，R2门内增殖的淋巴细胞出现逐渐递减的CFSE染色荧光(多峰)(如图1(C)～(D)所示).3.2 抗CD3/28抗体对淋巴细胞分裂与增殖活性的影响抗CD3和CD28抗体分别在体外模拟特异性T淋巴细胞活化的第一信号和第二信号，是T淋巴细胞活化常用的刺激剂.我们采用CFSE染色，通过流式细胞术检测抗CD3和CD28抗体对淋巴细胞增殖的影响.如图2(A)～(B)所示，抗CD3/28抗体可以强效地诱导绿色荧光强度逐渐递减，形成类似“五指峰”样图谱，说明抗CD3/28抗体可以显著促进淋巴细胞分裂和增殖.且在0.125～1.5 μg/mL剂量范围内，抗CD3/28抗体诱导的“五指峰”图几乎重叠.对其增殖指数和分裂指数进行统计，如图2(C)～(D)所示，0.125～1.5 μg/mL 的抗CD3/28抗体诱导淋巴细胞增殖百分比基本可达到75%(P≤0.001)，其诱导淋巴细胞分裂指数可达3倍(P≤0.001).但随着抗CD3/28抗体质量浓度的增加，1.5 μg/mL的抗CD3/28抗体诱导淋巴细胞分裂指数反而有所下降.因此，在诱导淋巴细胞增殖实验中，选用终质量浓度为0.125 μg/mL的抗CD3/28抗体即可.3.3 PHA对淋巴细胞分裂与增殖活性的影响PHA是一种有丝分裂原，主要用于激活淋巴细胞.对PHA的不同质量浓度进行分析表明，PHA可以剂量依赖性地促进淋巴细胞分裂与增殖.1 μg/mL的PHA促进淋巴细胞增殖和分裂指数分别为40.9%和0.69倍.当质量浓度为10 μg/mL 时，PHA促进淋巴细胞增殖的效果最为明显，淋巴细胞增殖和分裂指数为85.7%和4.7倍(如图3所示).3.4 PMA对淋巴细胞分裂与增殖活性的影响PMA是PKC信号的激活物，PKC信号在T淋巴细胞活化中占据重要地位.所以PMA也是T淋巴细胞活化常用刺激剂之一.对PMA的不同质量浓度进行分析表明，虽然PHA也可剂量依赖性地促进淋巴细胞分裂与增殖，但其诱导淋巴细胞增殖能力较弱，5 ng/mL和10 ng/mL的PMA诱导淋巴细胞增殖指数才到达20%，此剂量下的分裂指数才达到0.2倍(如图4所示).3.5 不同刺激剂对淋巴细胞IFNγ分泌的影响收集不同刺激剂培养淋巴细胞72h后的上清液，采用ELISA法检测IFNγ的质量浓度.如图5所示，0.125 μg/mL抗CD3/28抗体、10 μg/mL PHA和10 ng/mL PMA均可显著增加淋巴细胞IFNγ的分泌(P≤0.001).但其增加淋巴细胞IFNγ分泌量的顺序是抗CD3/28抗体>PHA>PMA.淋巴细胞增殖实验是评价机体免疫功能的常用方法.CFSE染色法是近年来广泛代替3H-TdR掺入法和MTT显色法的一种快速、无污染的检测淋巴细胞增殖的方法.CFSE染色结合流式细胞术技术能在不同淋巴细胞亚群及单个细胞水平上动态的分析淋巴细胞增殖情况[9-11].小分子药物单独作用在体外几乎不刺激淋巴细胞增殖，需要在淋巴细胞活化的基础上，进一步评价小分子药物调节淋巴细胞增殖的作用.因此，采用CFSE法，寻找不同刺激剂活化淋巴细胞的最佳剂量，是评价调节淋巴细胞增殖的小分子药物的必要前提.本实验采用人外周血提取获得淋巴细胞，在不同剂量的抗CD3/28抗体、PHA和PMA作用下，观察淋巴细胞的增殖和分裂指数.实验中发现，比以往报道用量更低的抗CD3/28抗体(0.12 5μg/mL)即可高效的刺激T淋巴细胞的分裂与增殖[12].5 μg/mL的PHA促进淋巴细胞增殖和分裂指数分别为75%和3倍，这与Fulcher D等研究者的报道一致[7].由于PHA可以剂量依赖性地增加淋巴细胞增殖与分裂，可根据需要活化的淋巴细胞的强弱选择合适的PHA的剂量，同时，PHA 又便宜.因此，PHA可用于调节淋巴细胞增殖的化合物的大量筛选.相比之下，PKC 信号的激动剂PMA促进淋巴细胞增殖的能力较弱.可能是因为T淋巴细胞的活化需要PKC信号和Ca2+信号共同参与，因此单一的PMA对淋巴细胞的活化作用较弱，需要与离子霉素联用(Ca2+激动剂)可能对显示出更强的促进淋巴细胞增殖的活性.这与Castagna M等人的研究相一致[13].IFNγ是T淋巴细胞活化的重要指标[14-15].实验发现抗CD3/28抗体、PHA和PMA都能显著增加淋巴细胞IFNγ的分泌，也证明了这三类刺激剂对T淋巴细胞的活化作用.并且这三种刺激剂增加IFNγ的分泌的程度与其诱导淋巴细胞分裂与增殖的程度相对应.后续将进一步研究这些刺激剂对不同亚群T淋巴细胞的促增殖作用.【相关文献】[1] LANITIS E, POUSSIN M, KLATTENHOFF A W, et al. Chimeric antigen receptor T Cells with dissociated signaling domains exhibit focused antitumor activity with reduced potential for toxicity in vivo [J]. Cancer immunology research, 2013, 1(1): 43-53.[2] YAO S, ZHU Y, CHEN L. Advances in targeting cell surface signalling molecules for immune modulation [J]. Nature reviews Drug discovery, 2013, 12(2): 130-146.[3] NIRSCHL C J, DRAKE C G. Molecular pathways: coexpression of immune checkpoint molecules: signaling pathways and implications for cancer immunotherapy [J]. Clinical cancer research: an official journal of the American Association for Cancer Research, 2013, 19(18): 4917-4924.[4] BOCHAROV G, LUZYANINA T, CUPOVIC J, et al. Asymmetry of Cell Division in CFSE-Based Lymphocyte Proliferation Analysis [J]. Front Immunol, 2013, 4(264): 1-7.[5] 王玲, 王宏, 刘越坚, 等. 利用CFSE标记检测CD8+淋巴细胞增殖[J]. 大连医科大学学报, 2004, 26(4): 262-264.[6] 季宇彬, 冯小燕, 高世勇, 等. 甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用[J].哈尔滨商业大学学报:自然科学版, 2008, 24(4): 385-388.[7] FULCHER D, WONG S. Carboxyfluorescein succinimidyl ester-based proliferative assays for assessment of T cell function in the diagnostic laboratory[J]. Immunol Cell Biol, 1999, 77(6): 559-564.[8] POPMA S H, KRASINSKAS A M, MCLEAN A D, et al. Immune monitoring in xenotransplantation: the multiparameter flow cytometric mixed lymphocyte culture assay [J]. Cytometry, 2000, 42(5): 277-283.[9] VENKEN K, THEWISSEN M, HELLINGS N, et al. A CFSE based assay for measuringCD4+CD25+ regulatory T cell mediated suppression of auto-antigen specific and polyclonal T cell responses [J]. J Immunol Methods, 2007, 322(1-2): 1-11.[10] GANUSOV V V, MILUTINOVIC D, DE BOER R J. IL-2 regulates expansion of CD4+ T cell populations by affecting cell death: insights from modeling CFSE data[J]. J Immunol, 2007,179(2): 950-957.[11] 包晶晶, 林海霞, 马璟, 等. CFSE示踪与流式细胞仪检测法研究环磷酰胺对T淋巴细胞增殖的影响[J]. 中国药理学通报, 2010, 26(6): 828-831.[12] THOMAS A K, MAUS M V, SHALABY W S, et al. 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t淋巴细胞活化的分子机理
t淋巴细胞活化的分子机理
T淋巴细胞活化的分子机理主要涉及一系列信号转导过程。
首先，T细胞受体（TCR）与抗原递呈细胞（APC）表面的抗原肽-MHC复合物相互作用，产生第一信号。
第一信号主要是由T细胞表面的CD3分子和粘附分子增强，将TCR与抗原结合后的活化信号传递到胞内。
接下来，活化信号被传递到胞内，产生第二信号。
第二信号主要由APC表面的协同刺激分子和T细胞表面的相应受体相互作用产生。
其中，最重要的协同刺激信号由B7分子和CD28分子相互作用产生。
B7-CD28复合体可以防止由MHC-抗原肽少量激活和TCR-CD3复合体的持续性内化限制导致的无反应状态或免疫耐受情况。
在第一信号和第二信号的共同作用下，T淋巴细胞被活化并开始增殖，最终产生具有特定功能的效应T细胞，如辅助、抑制或杀伤等效应细胞。
整个活化过程涉及膜分子与胞外信号的反应以及随后激发的胞内分子之间的反应，这一系列反应形成了第二信使链，从膜向核传递信息，最终导致基因活化。
淋巴细胞的抗原受体与辅助分子课件
淋巴细胞的抗原受体种类
01
B淋巴细胞的抗原受体是BCR（B 细胞受体），由IgM或IgG分子组 成，能够识别并结合抗原，如蛋 白质、多糖等。
02
T淋巴细胞的抗原受体是TCR（T 细胞受体），由αβ或γδ异二聚体 组成，能够识别并结合抗原，如 肽类、脂类等。
淋巴细胞抗原受体研究对免疫学和医学的影响和价值
推动免疫学的发展
淋巴细胞抗原受体研究是免疫学领域的重要研究方向之一，其研究成果将有助于更深入地了解免疫应 答和免疫调节的机制，推动免疫学的发展。
促进医学进步
淋巴细胞抗原受体研究不仅对免疫学有重要的意义，而且对医学也有着广泛的影响和价值。其研究成 果将有助于发现新的疾病诊断标志物和治疗靶点，为疾病的治疗提供新的思路和方法。
05
CATALOGUE
淋巴细胞抗原受体与疾病的关 系
淋巴细胞抗原受体与自身免疫性疾病的关系
自身免疫性疾病的抗原识别
淋巴细胞抗原受体可以识别自身抗原，参与自身免疫性疾病的发 病机制。
自身抗原的提呈
淋巴细胞可以通过抗原提呈机制将自身抗原提呈给其他免疫细胞， 进一步激活免疫反应。
自身免疫性疾病的免疫调节
免疫球蛋白超家族
B细胞表面有多种免疫球蛋白，它们 是B细胞抗原受体，包括膜结合型和 分泌型。膜结合型免疫球蛋白有IgM 和IgD，它们在B细胞表面成簇分布， 通过其抗原结合部位识别和结合抗原。
Fc受体
Fc受体是表达于B细胞膜上的另一种类 型的抗原受体，它们能够结合免疫球 蛋白的Fc段，从而识别和结合抗原-抗 体复合物。
04
CATALOGUE
淋巴细胞抗原受体与免疫应答
NBt还原实验完整PPT
NBT还原试验
原理：
N-NC
N=N-R-
+ H+
四氮唑基（淡黄色）
N-NH2 C
N=NH
甲月簪基（紫黑色）
第四十三页
淋巴细胞的的活化及其分子机制(106页)
细胞活化时信号传递的过程：
1. 配体-受体的相互作用，形成免疫突 触。 2. 细胞膜分子之间的相互作用。 3. 受体胞浆区的活性和受体相关分子。 4. 信号传递途径。 5. 转录因子和原癌基因的活化及其与 DNA的相互作用。 6. 基因转录的调节。
免 疫 受 体 酪 氨 酸 活 化 基 序 (immunoreceptor
如果没有第二信号的辅助信号，T细胞表现为以 下两种情况
① T细胞不能充分活化 ② 抗原特异性T细胞的凋亡、失能（anergy)
(二) CD8+T细胞的活化
Th细胞非依赖性的激活（直接激活） Th细胞依赖性的激活（间接激活）
直接激活
Th细胞促进CD8+T细胞活化
第三节 T细胞活化的信号传导
3.
11、 人 总是 珍惜为 得到。 2021/7/282021/7/282021/7/28Ju l-2128- Jul-21
4.
12、 人 乱于 心，不 宽余请 。2021/7/282021/7/282021/7/28W ednesday, J uly 28, 2021
5.
13、 生 气是 拿别人 做错的 事来惩 罚自己 。2021/7/282021/7/282021/7/282021/7/287/28/2021
tyrosine-based activation motif，ITAM):
ITAM是免疫受体胞浆段富含酪氨酸残基的 功能区，受体活化时，该功能区酪氨酸残 基 磷 酸 化 ， 可 结 合 酪 氨 酸 激 酶 (protein tyrosine kinase, PTK)【PTK 的 SH2 区 】 ， 介导T细胞内信号转导功能。
一、APC向T细胞递呈抗原的一般过程