人教版高中生物选修三 动物细胞工程 教用课件
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高中生物新人教版选择性必修3动物细胞培养(38张)课件
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2．应用 干细胞与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关，因而在医学上有 着广泛的应用。
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第2章 细胞工程
27
类型
应用
优点
造血 治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起
来源于病人自
干细胞 的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
身的体细胞，
神经 治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病(如帕
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第2章 细胞工程
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③不能用胃蛋白酶处理：由于大多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4, 而胃蛋白酶发挥作用的最适pH为2.0左右，因此不能用胃蛋白酶使细胞 分散开。
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第2章 细胞工程
15
(3)原代培养和传代培养：区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的 对象。 ①第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细 胞后进行培养，为原代培养。 ②第二次：细胞培养过程中出现接触抑制现象，用胰蛋白酶使其从瓶壁 上脱离下来，然后，将其分散到多个培养瓶中继续培养，为传代培养。
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第2章 细胞工程
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核心知识小结
4.胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一 步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 5.类似胚胎干细胞的一种细胞为诱导多能干细胞(iPS细胞)。
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第2章 细胞工程
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word部分：
请做：随堂达标检测
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将它移植回病
干细胞 金森病、阿尔茨海默病等)
人体内后，理
可治疗小鼠的镰状细胞贫血，在治疗阿尔茨海
【高中生物】动物细胞培养课件 2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3
2.原因: 细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。
➢制成细胞悬液
1.将组织分散成单个细胞 ①方法: 机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理。 ②原因: 从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了 生长和增殖；能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。
进行动物细胞培养地常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是 什么成分？用胃蛋白酶行吗？
这一阶段的细胞称为细胞株
增殖缓慢，甚至完全停止。
这一阶段的细胞称为细胞系
继续培养 （50代以后）
大部分细胞 衰老死亡
少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性， 这些细胞已经发生了突变，正朝癌细胞发展。
遗传物质一定改变了
二、动物细胞培养的过程
➢流程图解
取动物组织
制成细胞悬液
用机械的方法，或用胰 蛋白酶、胶原蛋白酶等 处理的方法，将组织分 散成单个细胞
放入CO2培养箱中培养 转入培养液进行原代培养
传代培养
放入CO2 培养箱中培养
有关动物细胞培养的问题
➢酶解法较温和，一定不会对动物细胞造成损伤，对吗？ 不对；使用胰蛋白酶时，要控制好作用时间，因为胰蛋白酶不仅能
分解细胞间的蛋白质，长时间作用还会分解细胞膜蛋白等，对细胞造成 损伤。
1.幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞相比，分化程度低的与分化程度高的 细胞相比，哪些细胞更易于培养？为什么？
包括胚胎干细胞和成体干细胞等。
➢胚胎干细胞（简称ES细胞）
分布: 存在于早期胚胎中 举例: ES细胞在体外分化成心肌细胞、神经元细胞
和造血干细胞等 特点: 具有分化为成年动物体内的任何一种类型的
细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官 甚至个体的潜能。
➢制成细胞悬液
1.将组织分散成单个细胞 ①方法: 机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理。 ②原因: 从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了 生长和增殖；能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。
进行动物细胞培养地常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是 什么成分？用胃蛋白酶行吗？
这一阶段的细胞称为细胞株
增殖缓慢，甚至完全停止。
这一阶段的细胞称为细胞系
继续培养 （50代以后）
大部分细胞 衰老死亡
少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性， 这些细胞已经发生了突变，正朝癌细胞发展。
遗传物质一定改变了
二、动物细胞培养的过程
➢流程图解
取动物组织
制成细胞悬液
用机械的方法，或用胰 蛋白酶、胶原蛋白酶等 处理的方法，将组织分 散成单个细胞
放入CO2培养箱中培养 转入培养液进行原代培养
传代培养
放入CO2 培养箱中培养
有关动物细胞培养的问题
➢酶解法较温和，一定不会对动物细胞造成损伤，对吗？ 不对；使用胰蛋白酶时，要控制好作用时间，因为胰蛋白酶不仅能
分解细胞间的蛋白质，长时间作用还会分解细胞膜蛋白等，对细胞造成 损伤。
1.幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞相比，分化程度低的与分化程度高的 细胞相比，哪些细胞更易于培养？为什么？
包括胚胎干细胞和成体干细胞等。
➢胚胎干细胞（简称ES细胞）
分布: 存在于早期胚胎中 举例: ES细胞在体外分化成心肌细胞、神经元细胞
和造血干细胞等 特点: 具有分化为成年动物体内的任何一种类型的
细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官 甚至个体的潜能。
人教版生物选修三专题--动物细胞工程-课件-共张ppt
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
受精作用
正在融合的细胞
动物细胞融合技术的发展简史：
1、20世纪30年代，在肺结核、天花等病理组织中观 察到多核细胞；
2、20世纪70年代，在蛙的红细胞中观察到多核细胞； 3、1962年，发现日本血凝性病毒能引起艾氏腹水瘤
细胞融合成多核细胞； 4、1965年，证实了灭活的病毒在适当条件下可以诱
疫作用。 3、每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。
不能无限增殖 单克隆抗体
由单个B淋巴细胞经无性繁殖（克隆），形成 基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化 学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 细
胞
小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖 融
合
杂交瘤细胞 技 （动物细胞培养技术大量培养）术
此外，体细胞核移植后的重组细胞直接发育成新个体 属于无性繁殖，产生的后代无更大变异性，而环境是
多变的，易造成该个体适应能力降低，易被淘汰。
P50 思考与探究
2.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？
动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化 的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个 体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组 织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的 动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细
绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量 的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习 性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克 隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不 可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是
生物：2.2《动物细胞 工程》课件(新人教版选修3)
没发生改变。 • 细胞系：超过50代的细程
胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源） 剪碎胰蛋白酶 分离细胞 单个细胞
洗涤、稀释、分离 原代培养 原代细胞 传代培养
细胞株（遗传物质没有发生改变）
细胞系（遗传物质发生改变）
动物细胞培养应用
1. 生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫 苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）
场景记忆法小妙招
超级记忆法--身 体法
1. 头--神经系统 2. 眼睛--循环系统 3. 鼻子--呼吸系统 4. 嘴巴--内分泌系统 5. 手--运动系统 6. 胸口--消化系统 7. 肚子--泌尿系统 8. 腿--生殖系统
超级记忆法-记忆 方法
TIP1：在使用身体记忆法时，可以与前面提到过的五感法结合起来，比如产生 一 些听觉、视觉、触觉、嗅觉、味觉，记忆印象会更加深刻； TIP2：采用一些怪诞夸张的方法，比如上面例子中腿上面生长出了很多植物， 正 常在我们常识中不可能发生的事情，会让我们印象更深。
硬背“在复合句中，修饰某一名词或代词的从句叫做定语从句”这个概念。
3.这个步骤可以使用思维导图或流程图，可以更好加深自己的理解哦~
费曼学习法-实操
第三步 没有任何参考的情况下，仅靠大脑，复述你所获得的主要内容
（三） 仅 靠 大 脑 复 述
1.与上一步不同的是，这一步不能有任何参考， 合上你的书本、笔记等，看看此时你的大脑里还剩下了什么； 2.仅凭记忆，如果可以复述很多，说明掌握状况还可以； 3.如果一合上书，就连关系词有哪些都想不起来了， 说明还 没有掌握，需要继续回顾。
TIP3：认知获取是学习的开始，而不是结束。
为啥总是听懂了， 但不会做，做不好？
高效学习模型-内外脑 模型
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胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源） 剪碎胰蛋白酶 分离细胞 单个细胞
洗涤、稀释、分离 原代培养 原代细胞 传代培养
细胞株（遗传物质没有发生改变）
细胞系（遗传物质发生改变）
动物细胞培养应用
1. 生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫 苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）
场景记忆法小妙招
超级记忆法--身 体法
1. 头--神经系统 2. 眼睛--循环系统 3. 鼻子--呼吸系统 4. 嘴巴--内分泌系统 5. 手--运动系统 6. 胸口--消化系统 7. 肚子--泌尿系统 8. 腿--生殖系统
超级记忆法-记忆 方法
TIP1：在使用身体记忆法时，可以与前面提到过的五感法结合起来，比如产生 一 些听觉、视觉、触觉、嗅觉、味觉，记忆印象会更加深刻； TIP2：采用一些怪诞夸张的方法，比如上面例子中腿上面生长出了很多植物， 正 常在我们常识中不可能发生的事情，会让我们印象更深。
硬背“在复合句中，修饰某一名词或代词的从句叫做定语从句”这个概念。
3.这个步骤可以使用思维导图或流程图，可以更好加深自己的理解哦~
费曼学习法-实操
第三步 没有任何参考的情况下，仅靠大脑，复述你所获得的主要内容
（三） 仅 靠 大 脑 复 述
1.与上一步不同的是，这一步不能有任何参考， 合上你的书本、笔记等，看看此时你的大脑里还剩下了什么； 2.仅凭记忆，如果可以复述很多，说明掌握状况还可以； 3.如果一合上书，就连关系词有哪些都想不起来了， 说明还 没有掌握，需要继续回顾。
TIP3：认知获取是学习的开始，而不是结束。
为啥总是听懂了， 但不会做，做不好？
高效学习模型-内外脑 模型
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高中生物选修3(人教版)动物细胞工程ppt课件
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（1）为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细 胞融合?
（小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量 增殖，B淋巴细胞能够产生抗体，细胞的同源性 越近，融合形成的杂种细胞越易成活。） （2）骨髓瘤细胞是癌细胞吗?
（有无限增殖能力（失去凋亡机制，失去接触 抑制等）的细胞是肿瘤细胞，而具有转移能力 的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不 能等于癌细胞。）
4、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
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22
植物、动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、 植物细胞全能性
细胞膜的流动性
细胞融合的方法
去除细胞壁后诱 导原生质体融合
使细胞分散后诱 导细胞融合
诱导方法
物理（离心、振荡、 电刺激）
物理、化学方法 （同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
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教学目标巩固
２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的
比较中，正确的是
（Ｂ）
A．结果是相同的
B．杂种细胞的形成过程基本相同
C．操作过程中酶的作用相同
D．诱导融合的手段相同
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教学目标巩固
３. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ）
2、有关概念
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内 的细胞称为原代细胞培养。
• 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。
人教版高中生物选修三-动物细胞工程-教用ppt课件
机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意
图。请回答下列问题： 吸收氧气和营养物质、排出代谢废物
(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞________。
(2)气室中充入5%CO2气体的主要作用是_ _ _ _ 。液适宜的pH
(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗
生素的_ _ _
时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________。
，抑
壁上形成的细胞层数是______；要使 的细胞从瓶壁上
分离下来，需要用酶处理，可用的酶是________。
胰蛋白酶
(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出
现__ _ _ _ _ _的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有
细胞株、细胞系
获得细胞或 细胞分泌蛋白
人教版高中生物选修三 动物细胞工程 教用课件
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取材
幼嫩的细胞、组织、 器官
动物胚胎或出生不久的 幼龄动物的器官或组织
培养 过程
人教版高中生物选修三 动物细胞工程 教用课件
人教版高中生物选修三 动物细胞工程 教用课件
4．如图是动物细胞培养的基本过程示意图， 请据图回答。
动物细胞培养不能最 终培养成动物体
3、几个重要的概念
• 细胞贴壁
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。 要求： 培养瓶(皿)内表面光滑、无毒、易于贴附。
• 接触抑制
细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量 不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接 触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。
胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进
新教材高中生物第2章第2节动物细胞工程：动物细胞融合技术与单克鹿体pptx课件新人教版选择性必修3
正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
1965年，研究证实了灭活的病毒在适当条件下确实可以诱导动物细胞融合。
一、动物细胞工程
2.动物细胞融合
病毒的灭活 ：灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能 力，但是并不破坏病毒的抗原结构。
仙台病毒
紫外线 灭活
丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合）
讨论： 1.但如何才能让两个不同的细胞融合? 2.细胞融合技术在生产实践中有哪些应用?
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
动物细胞融合技术的发展历史
时间
19世纪30年代 1858年 1875年 1876年 1962年 1965年 1974年
1975年
20世纪80年代
成果
观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中有多核细胞 观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。 第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。 在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。 日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。 英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合 华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。 Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分 泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。 发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)
思考：诱导融合后的细胞一定具有双方的遗传信息吗？为什么？
不一定，诱导A、B两种细胞融合，融合后可能有A、B未 融合细胞及AA、AB、BB等多种细胞，因此细胞融合后需 要进行筛选。
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
(5)意义： ①突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 ②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要 手段。 ③利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体 开辟了新途径。
人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第2章 细胞工程 第2节 第1课时 动物细胞培养
B
取材 培养对象
过程 细胞分裂、生长、
分化特点
动物细胞培养
新鲜的组织 分散的单个细胞 原代培养、传代培养
①贴壁生长 ②接触抑制
植物组织培养
续表
植物器官、组织或细胞等 离体的植物器官、组织或细胞等
脱分化、再分化 ①脱分化:形成愈伤组织 ②再分化:形成芽、根等
旁栏边角 想一想
1. ［教材P43从社会中来］在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健 康皮肤进行自体移植。能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 提示 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增。 2. ［教材P44旁栏思考］进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间 的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？
关键点拨 动物细胞培养与植物组织培养的比较
比较项目 生物学原理 培养基性质 培养结果
动物细胞培养 细胞增殖 液体 子代细胞
应用
人造皮肤的构建、动物分泌 蛋白的规模化生产等
植物组织培养 植物细胞的全能性
固体 新的植株 ①快速繁殖 ②作物脱毒 ③培育作物新品种 ④细胞产物的工厂化生产
比较项目 培养条件
3. ［教材P45思考·讨论］幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细 胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？ 提示 细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛， 老龄动物的细胞则相反。所以，一般来说，幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培 养。同样，分化程度越低的细胞，增殖能力越强，所以更容易培养。
旁栏边角 想一想
提示 该技术可能被用于治疗不孕症；获得足够量的生殖细胞来进行濒危物种的克隆研 究；获得生殖细胞进行转基因操作，再经过受精、胚胎发育等过程来获得转基因动物等。
高中生物专题2基因工程2.2.1动物细胞工程课件新人教版选修3
答案
5.动物细胞培养与植物组织培养的比较
细胞的全能性
细胞增殖
血浆
血清
答案
植物器官、组织或细动胞物早期胚胎、幼龄动物 的器官或组织
答案
原
传
答案
1.判断正误
(1)动物细胞培养时，需要对细胞进行一次脱分化处理 和两×次胰蛋白酶处理( )
(2)恒温条件×下进行动物细胞培养，细胞周期持续时间 长短不随细胞培养进程而改变( )
解析答
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专题2 2.2 动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养 和核移植技术
目标导航
1.结合图2－16及相关内容，归纳动物细胞培养的过 程、条件及应用。 2.结合图2－21，归纳通过动物体细胞核移植技术克 隆重动难物点的过程及应用前景。 1击.动物细胞培养的过程、条件。 2.通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
解析答
4.下列有关生物工程的说法正确的是( ) A.克隆技术发展的过程是：微生物的克隆→个体水平 的克隆→遗传工
程克隆 B.动物细胞培养时，如果缺少氨基酸供应，细胞一般 会停留在细胞周期
的分裂期 C.提高细胞克隆成功率，需在培养基中加入血清，使解析答
5.科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因 的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转 基因奶牛进行克隆(如图所示)，请结合图示回答下列 相关问题：
解析答
(3)在进行原代培养时，细胞增殖有的丝方分式裂是__________， 此外，贴细壁胞生增长殖还表现出__________和接触抑制等特点。 解析 在进行原代培养时，细胞以有丝分裂的方式进行
增殖，同时表现出贴壁生长和接触抑制的现象。 (4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中，去除 卵 母使克隆细出的胞动物细个体的胞遗传核物质的几乎全目部来的自供是体细 解__析_____去__除__卵__母__细__胞__细__胞__核__的__目__的__是__使__克__隆__出__的__动__物__个_ 体__的。遗传物质几乎全部来自供体细胞。
5.动物细胞培养与植物组织培养的比较
细胞的全能性
细胞增殖
血浆
血清
答案
植物器官、组织或细动胞物早期胚胎、幼龄动物 的器官或组织
答案
原
传
答案
1.判断正误
(1)动物细胞培养时，需要对细胞进行一次脱分化处理 和两×次胰蛋白酶处理( )
(2)恒温条件×下进行动物细胞培养，细胞周期持续时间 长短不随细胞培养进程而改变( )
解析答
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专题2 2.2 动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养 和核移植技术
目标导航
1.结合图2－16及相关内容，归纳动物细胞培养的过 程、条件及应用。 2.结合图2－21，归纳通过动物体细胞核移植技术克 隆重动难物点的过程及应用前景。 1击.动物细胞培养的过程、条件。 2.通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
解析答
4.下列有关生物工程的说法正确的是( ) A.克隆技术发展的过程是：微生物的克隆→个体水平 的克隆→遗传工
程克隆 B.动物细胞培养时，如果缺少氨基酸供应，细胞一般 会停留在细胞周期
的分裂期 C.提高细胞克隆成功率，需在培养基中加入血清，使解析答
5.科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因 的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转 基因奶牛进行克隆(如图所示)，请结合图示回答下列 相关问题：
解析答
(3)在进行原代培养时，细胞增殖有的丝方分式裂是__________， 此外，贴细壁胞生增长殖还表现出__________和接触抑制等特点。 解析 在进行原代培养时，细胞以有丝分裂的方式进行
增殖，同时表现出贴壁生长和接触抑制的现象。 (4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中，去除 卵 母使克隆细出的胞动物细个体的胞遗传核物质的几乎全目部来的自供是体细 解__析_____去__除__卵__母__细__胞__细__胞__核__的__目__的__是__使__克__隆__出__的__动__物__个_ 体__的。遗传物质几乎全部来自供体细胞。
高中生物第2章细胞工程第2节动物细胞工程第2课时动物细胞融合技术与单克鹿体课件新人教版选择性必修3
产生所需抗体的杂交瘤细胞
在小鼠腹腔内进行体内培养，或在 培养
细胞培养液中进行体外培养 从小鼠腹水中或从培养液中获得单 提取 抗
技术方法
原理
选择培养基
—
专一性抗体 检测、克隆
化培养 动物细胞
培养
免疫学原理 (抗原—抗体 特异性结合)
细胞增殖
—
—
2.两种抗体的比较
名称 血清抗体 单克隆抗体
产生
特点
由浆细胞分泌
比较
动物细胞融合
植物体细胞杂交
项目
(单克隆抗体制备)
(番茄—马铃薯植株)
正常小鼠的处理(注射特定的抗原) 原生质体的制备(酶解法)
过程
动物细胞融合 杂交瘤细胞的筛选和培养
原生质体的融合 杂种细胞的筛选和培养
提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)
杂种植株鉴定
原理
细胞膜的流动性、细胞增殖
细胞膜的流动性、植物细 胞的全能性
提示：在培养基中加氨基蝶呤就可以筛选出杂交瘤细胞。因为培养 基中加入氨基蝶呤后，骨髓瘤细胞和两两融合的骨髓瘤细胞由于其唯一 的DNA合成途径被抑制而不能增殖。B淋巴细胞本身不增殖，两两融合 的B淋巴细胞也不增殖，只有杂交瘤细胞通过辅助途径合成DNA进行增 殖。
课内探究•名师点睛
1．单克隆抗体制备过程的要点分析
解析：动物细胞融合可以用灭活的病毒诱导处理，也可以用聚乙二 醇诱导融合，A错误；②过程筛选出的杂交瘤细胞不一定全部产生抗 HCG抗体，还需要进行专一抗体检测，B错误；③过程以抗HCG单克隆 抗体为抗原，利用抗原—抗体杂交的原理进行检测，C正确；④过程要 保持无菌环境，以防止细菌、病毒等污染，D错误。
基上，未融合的亲本细胞和同种细胞 有一个杂交瘤细胞的情况下 融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤 开始克隆化培养和抗体检测， 瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交 经多次筛选得到能产生特异
2-2-1动物细胞培养(课件)——高中生物人教版(2019)选择性必修三
B
练习
3.有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱移功能干细胞(iPS细胞) 制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是( )iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸相同，蛋白质却不完全相同B. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多C.若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换,则可以起到良好的治疗作用D.植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使渐冻症病情改善
ES细胞
成体干细胞
成体组织或器官内
造血干细胞（骨髓、外周血和脐带血中）神经干细胞（神经系统中）精原干细胞（睾丸中）
具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病等）
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
A.使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分B.通常置于含有 和 的混合气体的 培养箱中进行培养C.渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数D.需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作
B
练习
例2 下列关于动物细胞培养过程的叙述，正确的是( )。
动物细胞培养的条件
保证无菌、无毒的环境
无菌
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
②在无菌环境下进行操作
定期更换培养液。
无毒
③添加一定量的抗生素
目的：方便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。
动物细胞培养的条件
温度、PH和渗透压
(1)适宜的温度：哺乳动物多以__________ ℃为宜。(2)适宜的pH：多数细胞生存的适宜pH为_________。(3)适宜的渗透压。
练习
3.有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱移功能干细胞(iPS细胞) 制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是( )iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸相同，蛋白质却不完全相同B. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多C.若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换,则可以起到良好的治疗作用D.植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使渐冻症病情改善
ES细胞
成体干细胞
成体组织或器官内
造血干细胞（骨髓、外周血和脐带血中）神经干细胞（神经系统中）精原干细胞（睾丸中）
具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病等）
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
A.使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分B.通常置于含有 和 的混合气体的 培养箱中进行培养C.渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数D.需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作
B
练习
例2 下列关于动物细胞培养过程的叙述，正确的是( )。
动物细胞培养的条件
保证无菌、无毒的环境
无菌
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
②在无菌环境下进行操作
定期更换培养液。
无毒
③添加一定量的抗生素
目的：方便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。
动物细胞培养的条件
温度、PH和渗透压
(1)适宜的温度：哺乳动物多以__________ ℃为宜。(2)适宜的pH：多数细胞生存的适宜pH为_________。(3)适宜的渗透压。
新教材高中生物第2章第2节动物细胞工程一动物细胞培养pptx课件新人教版选择性必修3
及应用(生命观念、科学思维、社会责任)
知识导图
课前·新知导学
动物细胞培养的条件
1．动物细胞培养的概念 从动物体中取出相关的组织，将它分散成___单__个__细__胞___，然后在适 宜的培养条件下，让这些细胞___生__长___和___增__殖___的技术。
2．动物细胞培养的条件 (1) 营 养 ： 动 物 细 胞 培 养 所 需 的 营 养 有 ___糖__类____ 、 氨 基 酸 、 无 机 盐、维生素等，将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的 培养基，称为__合__成__培__养__基__。通常需要在培养基中加入__血__清____等一些 天然成分。 (2)无菌、无毒的环境：对_培__养__液___和所有_培__养__用__具___进行无菌处理 以及在_无__菌__环__境___下进行操作。培养液需要__定__期__更__换__，以便清除代谢 物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
5．应用 (1)将正常的__造__血__干__细__胞____移植到病人体内，恢复病人的_造__血___和 免疫功能，用来治疗白血病等疾病。 (2)__神__经__干__细__胞____在治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病方面 (如帕金森病、阿尔茨海默病等)有重要的应用价值。 (3)用___i_P_S_细__胞____治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也 取得了新进展。
(3)温度、pH和渗透压 ①适宜的温度条件：_3_6_._5_℃___±0.5 ℃。 ②适宜的pH条件：__7_.2_～__7_._4__。 ③CO2的主要作用是维持__培__养__液__的__p_H___。
动物细胞培养液中为什么要加动物血清？ _____________________________________。 【答案】血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质，而且 还含有多种未知的促生长因子，能促进细胞的生长、增殖
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植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较
植物组织培 养
外植体
脱分化
愈伤组织
过
再分化
程
根、芽或胚 状体
试管苗
动物细胞培 养
动物组织块
剪 碎、胰 蛋 白 酶处理
细胞悬液
放 入培养 瓶
原代培养(细胞贴壁生长)
接 触抑制
胰蛋白酶处理， 分瓶继续培养
核移植 供体 受体 体细胞核 卵母细胞
(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一 般取自_动__物__胚__胎__或__幼__龄__动__物__的__器__官__、__组__织_。 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的 处理是_剪__碎__组__织_，然后用_胰__蛋__白__(_或__胶__原_蛋__白__)_酶 处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的 是_避__免__细__胞__产__生__接__触__抑__制__作_。用
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6、植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养 动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
葡萄糖、动物血清
培养基特有成分 蔗糖、植物激素
促生长因子
培养结果 培养目的
植物体
快速繁殖、培育 无病毒植株等
取出相关组织，将它分
？散成单细胞，然后,放 在适宜的培养基（条件）
中，让这些细胞生长和
繁殖。
？
2、培养过程：
动物胚胎或 胰蛋白酶
幼龄动物的 组织、ຫໍສະໝຸດ 官剪碎组织去掉组织间蛋白 避免接触抑制
加培养液
单个细胞
细胞 悬浮液
分化程度低，增殖能力强易培养
部分细胞“癌变”， 无限传代
细接 胞触 贴抑 壁制
细胞
传代培养
10代 细胞
50代 细胞
无限 传代
原代培养
传代培养
原代培养 传代培养
细胞株
细胞系
4、动物细胞培养需要满足以下条件
①充足的营养供给：微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、
促生长因子、血清等。
②适宜的温度：36.5 ℃±0.5 ℃。
③适宜的 pH：7.2～7.4。
O2：有氧呼吸、细胞代谢(95%的空气)
④气体环境
导入 去核
重组细胞
传代培养
10～50代
少数细胞获得 不死性(癌细胞)
早期胚胎
胚胎移植
个体
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植物组织培养
动物细胞培养
核移植
结 果
与外植体完全相同的个体
相同分化程度的细 胞群
与供体基本相同的 个体
关
键 环
细胞的脱分化、再分化、
(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象， 这是因为机体把移植的皮肤组织当作___抗__原___进行攻击。
•
(2012·平顶山一中模拟)研究小组为测定药物对体外培养细
胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)
进行动物细胞培养。下列有关说法正确的是( D )
• A．在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理
(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出 现___衰__老__甚__至__死__亡__的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有
些细胞会因遗传物质发生改变而变成__不__死__性__细胞，该种细胞的 黏着性___降__低___，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量__减__少____。
(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被
分化
细胞分化、细胞癌变
核融合、细胞分化
节
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考点2 植物组织培养与动物细胞培养的比较
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动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其 机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意 图。请回答下列问题： 吸收氧气和营养物质、排出代谢废物 (1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞________。 (2)气室中充入5%CO2气体的主要作用是_维__持__培__养_。液适宜的pH (3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗 生素的_种__类__和__剂__量___，以保证抗生素对肝脏无害。
(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用_胰__蛋__白__酶___处理， 然后配制成__细__胞__悬__液_，再分装。
(5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡， 原因是_细__胞__没__有__发__生__癌__变_。
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7．回答下列有关动物细胞培养的问题。
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 相__互__接__触__时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 _接__触__抑__制_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是__单__层__；要使贴壁的 细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是__胰__蛋__白__酶。
染色，而活细胞不染色，原因是________。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞 分裂到____中____期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在___冷__冻___条件下保存细胞。因为 在这种条件下，细胞中___酶___的活性降低，细胞_代__谢_的速率降低
下列有关动物细胞培养的叙述中，不正确的是( C ) A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和 动物血清 B．原代培养的细胞一般传至 10 代左右便会出现生长停止
C．动物细胞培养一般都能够传到 40～50 代，但其遗传物 质发生了改变 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身的 健康细胞
（4）用于检测有毒物质；
（5）用于生理、病理、药理等方面的研究，为 治疗和预防疾病提供理论依据；
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下列有关动物细胞培养的叙述中，不正确的是 （ C） A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维 生素和动物血清 B．原代培养的细胞一般传至 10 代左右便会出现 生长停止 C．动物细胞培养一般都能够传到 40～50 代，但 其遗传物质发生了改变 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量 自身的 健康细胞
CO2：维持 pH(5%)
⑤无菌、无毒环境：培养液和培养用具杀菌消毒，培养过
程加抗生素杀菌，定期更换培养液，清除代谢产物。
在动物细胞培养过程中，下列处理不恰当的是（ C ） A．培养液和培养用具要进行无菌处理 B．提供种类齐全的营养物质 C．提供纯氧以保证细胞的呼吸作用 D．保证提供适宜的温度和pH
原代培养：分瓶之前或10代之前 传代培养：分瓶之后或10代之后 原代培养
细胞株：50代前，存在接触 抑制，遗传物质并未改变
细胞系：50代后，未存在 接触抑制，遗传物质已改变
传代培养
细胞株
细胞系
细胞贴壁生长
随细胞增多， 出现接触抑制
细胞株
部分细胞癌变， 失去接触抑制，
无限传代
细胞系
细胞 悬浮液
(2011 年南通二模)在动物细胞培养过程中，下列处理不 恰当的是( C ) A．培养液和培养用具要进行无菌处理
B．提供种类齐全的营养物质
C．提供纯氧以保证细胞的呼吸作用
D．保证提供适宜的温度和 pH
2．(2012·赣州模拟)下列关于动物细胞培养的叙述中，错误 的是( C ) A．用于培养的细胞多取自动物胚胎或幼龄动物 B．培养过程中需要使用胰蛋白酶等获得细胞悬液 C．动物细胞培养时要保证氧气供应，不能通二氧化碳 D．动物细胞培养时的培养基是液体培养基，并要加入血清
• B．细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸 • C．取单个肝肿瘤细胞进行培养，获得细胞群的方法不属于克隆培
养法
• D．甲、乙两种细胞在原代培养过程中，最终均会出现停止增殖的 现象
1.关于动物细胞培养，下列叙述错误的是( D ) A．用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组 织 B．将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单 个细胞 C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离， 制成悬浮液 D．动物细胞培养只能传至50代左右，所培育的细胞会衰 老死亡
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5、动物细胞培养技术的应用
（1）生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等； （2）利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接 触抑制的特点，可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培 养出大量的自身薄层皮肤细胞，以供植皮所需。； （3）作为基因工程的受体细胞。
细胞株、细胞系
获得细胞或 细胞分泌蛋白
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取材
幼嫩的细胞、组织、 器官
动物胚胎或出生不久的 幼龄动物的器官或组织
培养 过程
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4．如图是动物细胞培养的基本过程示意图， 请据图回答。
4．某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞 (乙)进行培养，下列叙述正确的是( D )