观察血琼脂平板菌落性状及溶血情况

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固新鲜的人或兔血浆。此种酶的试验,常用于鉴 定葡萄球菌的致病力,以区别非致病性葡萄球菌。
血浆凝固酶试验有两种方法。
(一)玻片法:用于检测结合在细胞壁上的凝固酶。
1.实验材料 (1)葡萄球菌琼脂平板(斜面)培养物。 (2)兔血浆。 (3)生理盐水、载玻片、接种环等。 2.实验方法 在载玻片两端各滴盐水1滴,取葡萄球菌培养物放 人生理盐水中混成均匀菌液,在其中一端的菌液中加 兔血浆1滴摇匀,立即观察结果,如血浆中有明显小 凝集块出现,而生理盐水中无此现象者为阳性,若血 浆中无凝集块时为阴性。此法较简便,但不如试管法 敏锐、准确。
三种葡萄球菌培养物
三种链球菌培养物
乙型链球菌菌落(溶血环)
药物敏感性试验
细菌对抗菌药物的敏感性试验,是指在体外测 定药物抑菌或杀菌能力的方法。 实验室进行药敏试验主要有两个目的:一是帮
助ห้องสมุดไป่ตู้床医生对感染性疾病选用最佳的药物治疗;二
是进行流行病学调查,了解某些细菌的耐药性变迁
情况。
药敏试验的测定方法很多,常用的有扩散法、 试管稀释法、琼脂稀释法和E试验等。
(2)金黄色葡萄球菌分离培养物。
(3)大肠杆菌分离培养物。
(4)药敏纸片。
(5)其他。镊子、酒精灯、接种环等。
(四)实验方法

(1)按无菌操作法用接种环从分离培养平板上沾取细 菌,反复交叉密涂于平板培养基上(注意不要划破培 养基)。
(2)将小镊子用酒精灯灭菌后,分别夹取含不同抗生 素的药敏纸片,贴在已接种细菌的琼脂平板上,并轻 轻压紧。一般每个平板贴4~6片,各纸片中心相距约 24mm,纸片距平皿边缘约15mm,各纸片间距离相等。 (3)37 ℃培养18~24h后,观察结果。
实验四
脓汁中病原性球菌分离鉴定(二)
1、观察血琼脂平板菌落性状及溶血情况 2、取血平板上单个菌落涂片、染色、镜检 3、血浆凝固酶试验 4、药物敏感性试验 5、三种葡萄球菌、三种链球菌培养物观察
血琼脂平板菌落性状及溶血情况
取血平板上单个菌落涂片、 染色、镜检
血浆凝固酶试验
原理:致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,可凝
纸片扩散法(Bauer-kirby法)
(一)实验目的:掌握纸片扩散法试验.
(二)实验原理:将干燥的浸有一定浓度的抗
菌药物的滤纸片放在已接种一定量某种细菌 的琼脂平板上.经培养后,可在纸片周围出现 无细菌生长区, 称抑菌环.目的是使学生学
会此试验方法并了解其在临床治疗上的意义.
(三)实验材料
(1)普通琼脂平板培养基。
(二)试管法:
用于检测释放到菌体外的游离的血浆凝固酶。
1.实验材料
(1)葡萄球菌培养物。 (2)1:4稀释的兔血浆(试管装)。 (3)无菌小试管、接种环、水浴箱、酒精灯。
2.实验方法 吸取1:4稀释的兔血浆放于2支无菌小试管 中,每管0.5mL,用灭菌接种环取葡萄球菌 一满环,在一小试管内壁徐徐研磨成均匀悬 液。另一试管作为对照,将两支试管放在 37℃水浴箱中,每30min观察一次结果,观察 1~4h;观察时试管倾斜,凡血浆呈现胶胨样 凝集者即为阳性,仍呈液体者为阴性。
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